Inhibición irreversible

Algunos inhibidores se combinan de modo permanente con el enzima uniéndose covalentemente a

algún grupo funcional esencial para la catálisis con lo que el enzima queda inactivado
irreversiblemente. Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos funcionales reactivos como
mostazas nitrogenadas, aldehídos, halo-alcanos o alquenos, todos estos de naturaleza electrofílica,
los cuales reaccionan con las cadenas de los aminoácidos para formar enlaces covalentes.
Este tipo de inhibición se conoce también como "envenenamiento" del enzima. Por ejemplo,
algunos compuestos organofosforados tóxicos llamados venenos nerviosos, que se utilizan como
insecticidas, actúan inhibiendo irreversiblemente al enzima acetilcolinesterasa, la cual interviene en
la actividad del sistema nervioso. Se sabe que estos compuestos organofosforados inactivan al
enzima formando un enlace éster fosfórico con el grupo hidroxilo de un determinado resto del
aminoácido Serina, lo que demuestra que ese grupo funcional es esencial para la catálisis.
El estudio de este tipo de inhibidores ha resultado de gran utilidad para identificar los grupos
funcionales esenciales para la catálisis en aquellos enzimas a los que inactivan.
En general los inhibidores se unen a la enzima mucho más fuerte que lo hace el sustrato, por ello la
actividad de la enzima con el sustrato
Tipos de inhibición irreversible

Inhibición irreversible, marcadores de afinidad

Los marcadores de afinidad son compuestos que contienen un grupo químicamente reactivo
que reacciona con el sitio activo de la enzima dado un aducto irreversible. Luego de
formarse el complejo reversible E∙I, se produce la reacción con algún nucleófilo del sitio
activo para formar la unión covalente y estable con la enzima.
A continuación, presentamos el esquema básico de la cinética química de una reacción
irreversible por marcadores de afinidad:
E+ I K 1 E . I K Inact E−I
↔ ↔

K 1: Constante de formación de complejo E.I

K Inact: Constante de inactivación de la enzima.

Si el grado de disociación del complejo E∙I es relativamente rápido respecto a la formación
del enlace covalente ( K Inact), éste último paso es el determinante de la velocidad de
reacción. En estos casos, la cinética es dependiente del tiempo, tal como los inhibidores
reversibles de unión lenta y fuerte.
Existe marcadores de afinidad no tóxicos, estos son muy frecuentemente usados en
fármacos como:
Antibióticos β-lactámicos

Estos son una ampliación clase de antibióticos incluyendo derivados de la penicilina,

cefalosporinas, monobactámicos, carbacefem, carbapenems e inhibidores de la
betalactamasa; básicamente cualquier agente antibiótico que contenga un anillo β-lactámico
en su estructura molecular.
Los antibióticos β-lactámicos actúan inhibiendo la última etapa de la biosíntesis de la pared
celular: el entrecruzamiento de las cadenas de peptidoglicano, Han sido consideradas
drogas maravillosas, altamente selectivas y sin problemas serios de toxicidad. En algún
momento se consideró utilizarlas como un complemento dietario, pero estudios posteriores
demostraron que los abusos de estos contribuyen a las antibioresistencias agravando aún
más el problema.

Figura _. Inhibidores de transpeptidasa, recopilado de

https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/158537/mod_folder/content/0/Teorico
s/Clase%20Inhibidores%20Enzimaticos%202016.pdf?forcedownload=1
 Figura _, comparación de la estructura de la penicilina con el Acil-D-Alanil-D-Ananina,
recuperado de
https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/158537/mod_folder/content/0/Teorico
s/Clase%20Inhibidores%20Enzimaticos%202016.pdf?forcedownload=1

Figura _, acilación del peptidogluacano transpeptidasa por la penicilina, recuperado de

https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/158537/mod_folder/content/0/Teorico
s/Clase%20Inhibidores%20Enzimaticos%202016.pdf?forcedownload=1
Inhibidores irreversibles – Basados en el mecanismo
Un inhibidor (o inactivador) basado en el mecanismo es un compuesto inactivo que, al unirse con el
sitio activo de la enzima, se transforma en un producto altamente reactivo que, en la mayoría de los
casos, reacciona con la enzima para unirse covalentemente e inactivarla. En cuanto a su cinética
tiene un paso más respecto a los marcadores de afinidad.
E+ I K 1 E . I K Inact E−I
↔ ↔ K3

E+ P
Tiene dos complejos E∙I, uno que lleva al compuesto reactivo y el segundo que produce la unión
covalente E-I. La relación entre K1 y K3 es denominada relación de partición, donde lo ideal sería
que esta toma valores cercanos a 0, valor al cual no se forman metabolitos potencialmente tóxicos.
Este tipo de inhibidores tiene las ventajas de tener baja toxicidad y pocos efectos secundarios para
su aplicación a fármacos, como, por ejemplo: la Eflornitina (antiprotozoario) se puede administrar
en dosis de hasta 30g por día sin efectos secundarios.
Entre algunos ejemplos de este tipo de inhibidores se tiene:
Vigabatrin
Este fármaco tiene aplicaciones como anticonvulsivante en casos de epilepsia idiopática y
sintomática. No se conoce el mecanismo que lleva a la epilepsia. Se cree que son muchos los
mecanismos involucrados. Se sabe de la importancia del ácido gama-amino butírico (GABA),
cuando los niveles de este bajan se da lugar a las convulsiones.
El inhibidos de la GABA es el Ácido 4-amino-5-hexenoico.

Inhibidores de β-Lactamasas
La producción de betalactamasas es uno de los principales mecanismos de resistencia bacteriana.
Las betalactamasas son enzimas capaces de inactivar los antibióticos de la familia betalactámicos.
 Figura _, mecanismo de acción del ácido clavulánico. Recopilado de
https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/158537/mod_folder/content/0/Teoricos/Clase
%20Inhibidores%20Enzimaticos%202016.pdf?forcedownload=1

Figura _. Mecanismo de acción de la sulbactama. Recopilado de

https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/158537/mod_folder/content/0/Teoricos/Clase
%20Inhibidores%20Enzimaticos%202016.pdf?forcedownload=1