UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

MICROBIOLOGÍA

Kasandra Wieny Callupe Aguilar, 20187018K, Sección E

1. DESCRIBIR LOS PRINCIPALES CRITERIOS QUE DEFINEN A CADA NIVEL DE

BIOSEGURIDAD.

 Nivel 1 (BSL-1) : Los agentes del nivel de Bioseguridad 1 no representan una amenaza
para la salud humana; esto quiere decir que aparentemente no causan enfermedad en
adultos saludables.

Para este nivel sólo se requieren prácticas estandarizadas de trabajo en laboratorio.

Estas prácticas estandarizadas incluyen:
• Lavado frecuente de manos, especialmente después de quitarse los guantes y antes
de salir del laboratorio
• Una puerta que pueda mantenerse cerrada mientras se trabaja
• Límites en el acceso al espacio del laboratorio al trabajar
• No fumar, comer, beber, o almacenar alimentos en el laboratorio
• Cuidado para minimizar salpicaduras y acciones que pudieran crear aerosoles (gotas
minúsculas)
• Descontaminación de superficies de trabajo después de cada uso y después de
cualquier derrame
• Descontaminación de desechos del laboratorio
• Uso de pipetas mecánicas (no usar la pipeta por medio de succión oral)
• Tener precauciones al usar objetos punzantes, lo que incluye el uso de contenedores
especiales para desecho de agujas y otros objetos punzantes
• Mantenimiento de un programa de control de insectos y roedores
• Uso de equipo de protección personal (tales como batas de laboratorio, guantes de
látex, y protección para los ojos o máscaras para el rostro, según sea necesario
dependiendo del tipo de trabajo que se realice). Se requiere un lavamanos para
lavarse las manos. No se requieren estructuras adicionales para laboratorios BSL-

 Nivel 2 (BSL-2) : Los agente asociados con enfermedades humanas se estudian en

laboratorios BSL-2. Un laboratorio BSL-2 se requiere generalmente para trabajar con
cualquier derivado de sangre humana, otros fluidos corporales (especialmente cuando
estén visiblemente contaminados con sangre) o tejidos en los cuales la presencia de un
agente infeccioso puede ser desconocida. Los agentes BSL-2 no causan infecciones
mortales y no son transmitidos por el aire. Esto significa que no causan infección si
gotas minúsculas del material se transmiten por aire (e.g. se vuelven aerosol) y son
inhaladas, lo que podría ocurrir si el material genera salpicaduras. Además, los agentes
estudiados en un laboratorio BSL-2 son patógenos para los cuales hay inmunización o
tratamiento antibiótico disponible. Sin embargo, se debe tener extremo cuidado con
las agujas e instrumentos punzantes cuando éstos están contaminados con estos
agentes. Para reducir la infección accidental, en los laboratorios BSL-2 se incluyen las
prácticas estandarizadas para laboratorios BSL-1, y adicionalmente:
• Políticas especiales y procedimientos para restringir el acceso al laboratorio mientras
se desarrollan trabajo
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• Señales de advertencia de peligro biológico desplegados fuera del laboratorio

• Vigilancia del personal de laboratorio al cual se le ofrece inmunización adecuada
• Manual de bioseguridad que incluye definiciones de cualquier política de
descontaminación de desechos o vigilancia médica específicos a las actividades y
agentes del laboratorio
• Personal de supervisión con experiencia en el trabajo con agentes infecciosos y
entrenamiento específico para personal que maneja estos agentes.
Algunas barreras primarias en laboratorios BSL-2 son gabinetes de bioseguridad u
otros aparatos de almacenamiento aprobados. Estas áreas minimizan una
contaminación potencial mientras se trabaja con un agente, especialmente si hay
derramamiento o aerosolización de materiales infecciosos. El equipo protector para el
personal incluye batas de laboratorio, guantes y protección para la cara según se
necesite al trabajar con agentes infecciosos. El personal debe despojarse de la ropa
protectora cuando abandona el área del laboratorio. Los gabinetes deben
descontaminarse cuidadosamente a diario y si se usan materiales radioactivos, se
deben monitorear por la radioactividad, como forma de protección personal. Las
barreras secundarias incluyen todas las barreras BSL-1 además de una autoclave
(máquinas de esterilización) para material de vidrio.

 Nivel 3 (BSL-3) : Un laboratorio BSL-3 debe utilizarse cuando el trabajo de laboratorio

se realiza con agentes nativos o exóticos que tienen potencial de ser transmitidos por
vía respiratoria (aerosol) y que pueden causar infecciones serias y potencialmente
letales. Los materiales potencialmente infectados con estos agentes pueden ser
estudiados a nivel de BSL-2 sólo para efectos de diagnóstico, pero la manipulación y
experimentación posteriores requieren de condiciones BSL-3.

El primer peligro para el personal que trabaja con estos agentes es el riesgo de
infección por pinchaduras de agujas, ingestión, o exposición a aerosoles infecciosos.

Las prácticas de laboratorio establecidas que deben llevarse a cabo en laboratorios

BSL-3 incluyen todas las prácticas BSL-2, más:

• Acceso al laboratorio estrictamente controlado.

• Entrenamiento específico para el personal de laboratorio, en el manejo de agentes
potencialmente letales.
• Descontaminación de todos los desechos.
• Cambio de ropas de protección de laboratorio y descontaminación de toda la ropa
de laboratorio antes de su lavado y Políticas institucionales relacionadas con la toma
de muestras (suero) y almacenamiento de especímenes de los trabajadores del
laboratorio para establecer su exposición a agentes infecciosos.

Las barreras protectoras primarias y secundarias en el laboratorio BSL-3 hacen énfasis

en la protección del personal de laboratorio, así como también de personal en áreas
cercanas, la comunidad y el medio ambiente, frente a aerosoles potencialmente
infecciosos. Las barreras primarias son similares al equipamiento protector personal de
BSL-2, pero pueden también incluir equipo respiratorio si existe riesgo de infección a
través de inhalación. Las barreras secundarias en laboratorios BSL-3 incluyen las
barreras de BSL-2 además de algunas otras barreras un poco más sofisticadas. Los
corredores deben estar separados del acceso directo al laboratorio. El acceso debe ser
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a través de puertas dobles que se cierren solas. Los sistemas de aire deben estar
diseñados para asegurar que el flujo de aire negativo , para que el aire alrededor de
puertas y ventanas fluya hacia el laboratorio en lugar de hacia fuera del laboratorio. El
aire bombeado hacia el interior del laboratorio no recircula al interior del edificio. Esta
medida evita que se lleven aerosoles infecciosos fuera del laboratorio a través del aire.

 Nivel 4 (BSL-4) : Agentes peligrosos y exóticos que poseen un alto riesgo de infección y
riesgosos para la vida, y agentes infecciosos de transmisión por vía aérea se
encuentran en laboratorios BSL-4. También se estudian en estos laboratorios agentes
relacionados con riesgo de transmisión desconocido. Estos agentes suponen un alto
riesgo de enfermedad mortal, pueden ser transmitidas por vía aerosol (respiratoria) y
no tienen vacuna o terapia disponible. Todos los agentes BSL-4 son virus.

El personal que trabaja con agentes BSL-4 puede estar en riesgo de exposición a
aerosoles infecciosos, exposición de membranas mucosas a gotas infecciosas, y
pinchazos accidentales con agujas u otros objetos punzantes contaminados con
material infeccioso. Debido a estos riesgos, todo el personal del laboratorio debe
recibir entrenamiento especializado para el manejo de agentes infecciosos
extremadamente peligrosos y en el funcionamiento de los equipos de contención.
Además, el acceso al laboratorio está restringido. Las personas con compromiso
inmunológico (incluyendo niños y mujeres embarazadas) jamás son admitidas al
interior del laboratorio.
Las prácticas de laboratorio para el BSL-4 incluyen todas las prácticas de BSL-3, más:
• Acceso estrictamente controlado al laboratorio
• Cambio de ropa antes de entrar y salir del laboratorio (se recomienda ducharse al
salir del laboratorio)
• Descontaminar todo el material al salir del lugar. Las barreras primarias incluyen la
realización de procedimientos en gabinetes de bioseguridad usados en los otros
niveles de bioseguridad en combinación con un traje que cubre todo el cuerpo, con
oxigeno y presión positiva. Así, los trabajadores de laboratorios de BSL-4 no entran al
laboratorio a menos que estén usando un “traje espacial.”

Las barreras secundarias en los lugares BSL-4 incluyen todas las barreras físicas de los
laboratorios BSL-3 más:
• Una zona aislada o un edificio separado.
• Sistemas de entrega y escape, vacío, sistemas de descontaminación
• Ausencia de ventanas es recomendada, cualquier ventana debe ser sellada y debe
ser resistente al rompimiento.

En resumen podemos relacionar (no equiparar) los grupos de riesgo con los niveles de
bioseguridad.

Nivel
Grupo de Prácticas de Equipos de
Tipo de laboratorio
de biosegurida laboratorio bioseguridad
riesgo d

1 1 Enseñanza básica, TMA Ninguno, trabajo en

investigación mesa de laboratorio
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al descubierto

Trabajo en mesa al
Servicios de atención TMA y ropa protectora, descubierto y CSB
primaria, diagnóstico, señal de riesgo para posibles
2 2 investigación biológico aerosoles

Prácticas BSL-2 más CSB además de otros

ropa especial, acceso medios de contención
Diagnóstico especial, controlado y flujo para todas las
3 3 investigación direccional de aire actividades

Prácticas BSL-3 más

cámara de entrada con CSB de clase III o
cierre hermético, salida CSB clase II más
Unidades de con ducha y trajes presurizados,
patógenos muy eliminación especial de autoclave de doble
4 4 peligrosos residuos puerta y aire filtrado

2. ELABORAR UNA TABLA SOBRE LA INSTRUMENTACIÓN DEL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGÍA BÁSICA (USANDO IMAGENES Y DESCRIPCIÓN DEL NOMBRE DE
CADA INSTRUMENTO O EQUIPO).

INSTRUMENTO IMAGEN DESCRIPCIÓN

Un autoclave es un recipiente metálico
de paredes gruesas con cierre hermético
que permite trabajar con vapor de agua
a alta presión y alta temperatura, que
AUTOCLAVE sirve para esterilizar material médico o
de laboratorio.

El microscopio es un instrumento que

permite observar objetos no
perceptibles a al ojo humano. Esto se
logra mediante un sistema óptico
compuesto por lentes, que forman y
MICROSCOPIO amplifican la imagen del objeto que se
está observando.

Una Incubadora de laboratorio es un

dispositivo utilizado para cultivar y
mantener cultivos microbiológicos o
cultivos celulares. La incubadora
INCUBADORA mantiene una temperatura y humedad
optima garantizando también otras
condiciones tales como el dióxido de
carbono (CO2) y contenido de oxigeno
presente en la incubadora.
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Un equipo de flujo laminar básicamente

constituye un espacio, el cual, mediante
un tratamiento específico del aire,
CABINA DE FLUJO permite trabajar en una zona con un
LAMINAR control estricto de partículas no viales.

Un contador de colonias es un
instrumento mayormente utilizado en
los laboratorios y en la industria
CUENTA COLONIAS farmacéutica. Este aparato sirve para
contar colonias de bacterias y
microorganismos que por lo general
crecen en una placa de agar.

Es un recipiente redondo fabricado en

cristal o plástico. Tiene una cubierta de
la misma forma que la placa, pero con
un mayor diámetro para que pueda ser
PLACA PETRI colocada encima y cierre el recipiente.
Aunque no de forma hermética. Forma
parte del material de vidrio del
laboratorio.

Se emplea para transportar o arrastrar o

trasvasar inóculos (pequeño volumen
que contiene microorganismos en
ASA suspensión) desde la solución de trabajo
BACTERIOLOGICA también llamada “solución madre” al
medio de cultivo (sólido o líquido) o de
un medio a otro (resiembra). También
sirve para la realización de frotis.

3. REALIZAR UN PROTOCOLO DE BIOSEGURIDAD PARA INGRESAR, SALIR Y

DESARROLLAR UNA ACTIVIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA. INCLUIR
EL MANEJO DE RESIDUOS (INCLUYA CRITERIOS PARA UNA RUTA DE DESECHO).
Según lo leído de ciertos informes de protocolos de bioseguridad de otras
universidades, estos se dan en un estudio de los tipos de actividades que se
desarrollan en el laboratorio mencionado. En el caso de un protocolo de bioseguridad
general se pueden rescatar ciertos puntos repetitivos, también guiándonos del video
que fue puesto en clase. Por lo cual se describen las acciones de una actividad desde el
punto de entrada, que el alumno llega al laboratorio, y salida dando una pauta general
de como deben ser tratados los residuos. Clasificándolos en tablas referenciadas al
final de la lista que está en orden.
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1º Para entrar al laboratorio es necesario vestir las ropas adecuadas. Esto haciendo alusión a
zapatos cerrados y pantalones largos.

2º Otra condición es el cabello sujeto y quitarse todos los accesorios que presenten riesgo al
realizar la actividad microbiológica.

3º Usar la bata, preferiblemente manga larga, en todo momento al estar dentro del
laboratorio. En caso del derrame del algún material infectante, se debe quitar y desinfectar la
bata

4º Usar jabón antibacterial antes de empezar la actividad y al terminar

5º Cada vez que se manipule objetos con riesgo biológico usar los guantes, no tocarse la cara.
En caso de ser necesario también se puede utilizar lentes de seguridad y/o mascarilla

6º Limpiar la zona de trabajo con alcohol con el fin de desinfectar el lugar

7º Flamear las ases bacteriologías antes y después de la siembra con el fin de que no presente
peligro por microorganismos allí presentes.

8º No sacar los cultivos biológicos fuera del laboratorio, en caso de tener que sacarlos deben
ser previamente esterilizados y hacer uso del protocolo de transporte de cultivos microbianos.

4. ELABORAR MEDIANTE EL USO DE GRÁFICOS UNA SECUENCIA DE LOS NIVELES

LABORATORIOS DE BIOSEGURIDAD Y COLOCAR EJEMPLOS DE MICROORGANISMOS

QUE SE MANIPULAN EN CADA NIVEL.
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Para el diseño de los siguientes gráficos se uso de la aplicación Skecthup, se trato de hacer una
simulación del laboratorio de química de la FIA-UNI en cuanto a estructura

 Laboratorio BSL-1 y BSL-2 : En cuanto a estructura estos dos niveles son parecidos. Lo
que varia es la seguridad que debe tomar la persona que entre al laboratorio y el
riesgo de los microorganismos tratados. Según lo puntos escritos en la pregunta 1.

Se encuentran los implementos básicos de un laboratorio de microbiología

Placa petri autoclave

microscopio
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ventana

Tachos para
residuos

incubadora

Cabina de
flujo laminar lavado

Microorganismos
BSL-1 BSL-2
- Bacilus subtilis - el virus del sarampión
- Naegeria gruberi - muchas especies de salmonella
- virus de hepatitis canina infecciosa - especies patogénicas de
- especies de E.coli no patogénicas Toxoplasma
- Clostridium botulinum
- virus hepatitis B
- otros patógenos de la sangre.
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 Laboratorio BSL-3 y BSL-4 : Estos niveles tienen el protocolo de seguridad más estricto
en cuanto a estructura del laboratorio y seguridad en la persona. Comparten el tipo de
laboratorio, mas no la seguridad de la persona y se manipulan diferentes tipos de
microorganismos. Siendo el nivel 4 exclusivo de virus.

Sala donde se filtra

el aire

Cuarto para
cambio de ropa a
traje de seguridad

Sistema de esclusas
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casilleros

Traje de bioseguridad

Sistema de filtración
de aire
señalización

Microorganismos
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BSL-3
- Mycobacterium tuberculosis
(tuberculosis)
- virus de encefalitis de St. Louis,
Francicsella tularensis (tularemia). La
Tularemia es una fuente de infección
adquirida en laboratorio relativamente
común. La mayoría de las infecciones
ocurren al manipular animales
infectados con la bacteria (como por
ejemplo conejos, un reservorio natural)
o al experimentar con cultivos de
tularemia.
- Coxiella burnetii
BSL-4
- virus Marburg
- el virus Ebola
- virus que causan fiebre hemorrágica Congo-
Crimea y fiebre Lassa. El trabajo de laboratorio
con materiales potencialmente infectados con
estos agentes, como por ejemplo, muestras de
diagnóstico de animales infectados natural o
experimentalmente, representan un alto riesgo
de exposición e infección para el personal de
laboratorio y posiblemente incluso para la
comunidad y el medio ambiente.

BIBLIOGRAFIA

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 https://www.visavet.es/es/bioslab/niveles-de-bioseguridad.php
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 http://www.ingeniarg.com/blog/48-cabinas-de-flujo-laminar-cual-es-el-proposito-de-
los-equipos-de-flujo-laminar
 https://www.quiminet.com/articulos/simplifique-el-conteo-de-colonias-bacterianas-y-
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