UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
LABORATORIO DE FUNDAMENTOS DE QUÍMICA
PROPIEDADES QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS Y PROTEINAS

Diana Fernanda Rosero Rosero

Víctor Daniel Velasco Pérez

OBJETIVOS: Reconocer algunos aminoácidos y proteínas mediante diversas reacciones, identificando en

estos compuestos núcleos aromáticos, la presencia de triptófano y aminoácidos azufrados. Además
realizar pruebas de coagulación y precipitación con varios agentes.

Aprender a determinar el punto isoeléctrico de la caseína.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

A continuación se listan los diferentes experimentos realizados con sus respectivas observaciones y
resultados:

1. Prueba de la nihidrina

En la imagen podemos observar cómo se obtiene una

coloración purpura en las diferentes matrices utilizadas,
esto indica una prueba positiva para los α-aminoácidos a
un pH entre 4-8, lo cual es útil como base para la
detección y la cuantificación de α-L-aminoácidos.

2. Reacción Xantoprotéica

En esta prueba se buscan proteínas que en su estructura

contengan aminoácidos con anillos aromáticos, en la
imagen podemos apreciar como para la leche y para la
albumina obtenemos pruebas positivas ya que notamos el
color anaranjado característico de dicha reacción, la
glicina carece de este tipo de compuestos debido a eso no
presenta coloración en el tubo de ensayo.
3. Reacción de Hopkins-Cole

El reactivo de Hopkins-Cole reacciona con proteínas que

contengan triptófano dando un complejo color violeta,
luego de adicionar los diferentes reactivos la formación
de un anillo color violeta nos muestra la evidencia de la
presencia de este aminoácido. En la fotografía podemos
apreciar como en la Leche y en la albúmina se da la
formación del anillo indicando la presencia de triptófano.

4. Reacción de los aminoácidos Azufrados

La formación de un precipitado negruzco de sulfuro de

plomo nos indica la presencia de azufre en algunos
aminoácidos como lo son la cisteína y la metionina, en el
experimento realizado vemos como la leche y la albumina
concentrada nos dan positivo mientras que la glicina
permanece incolora lo cual nos dice ausencia de esta, la
leche presenta un color menos intenso pero esto solo se
debe a la cantidad de reactivo utilizado, igual que la
albumina presenta aminoácidos azufrados.

5. Reacción de Ehrlich

Esta prueba se realiza para determinar la presencia

de los anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados
en la cadena lateral de los aminoácidos en la
fotografía podemos observar una coloración rojiza
debido a la formación de compuestos azoicos lo cual
permite detectar la presencia de tirosina e histidina
libres en nuestro caso particular la glicina no
presenta ninguno de estos componentes.
6. Prueba de Biuret
En esta prueba se determina la presencia de
grupos amida muy cercanos entre sí, estos se
reconocen fácilmente debido a la coloración azul-
violeta que se obtiene al agregar un poco de
sulfato de cobre ya que estos forman complejos
de coordinación, las proteínas proteosas y
peptosas dan positivo a esta prueba, como vemos
de nuevo la albumina y la leche dan positivo y se
puede decir que estas contienen este tipo de
proteína.

7. Punto isoeléctrico

En esta prueba luego de calentada la leche se

comenzó a adicionar gota a gota ácido acético al 10%
y como se ve en la imagen se formaron unos grumos y
a estos se le midió el punto isoeléctrico con un papel
indicador obteniendo un valor de 4
aproximadamente, que comparado con el de la
literatura es 4,44.

8. Precipitación

En la
imagen podemos apreciar como por medio de la una sencilla técnica como lo es precipitación con
metales como plata o cobre, podemos obtener de manera fácil y rápida la proteína aislada sin que pierda
su actividad biológica la presencia de grumos o turbidez en los tubos de ensayo nos da una prueba
positiva para la precipitación de proteínas.
9. Desnaturalización de las proteínas

Para esta prueba se tomó una solución de albumina

diluida y se agregaron distintos reactivos para
evaluar su desnaturalización con dichos reactivos en
la imagen tenemos de derecha a izquierda la
albumina con los siguientes reactivos y/o
condiciones: Calor, etanol, NaOH 50%, HCl
concentrado. La formación de turbidez o de coágulos
en los tubos de ensayo es una señal de
desnaturalización según los resultados obtenidos las
proteínas no se desnaturalizan en medio básico pero
si en presencia de calor, de un medio ácido o de un
solvente orgánico como lo es el etanol.

PREGUNTAS

1. Dibuje la estructura de la valina en una solución con pH ácido y pH básico.

Cuando el pH de la solución donde se encuentra desciende más de

5.96, la valina tiende a captar protones (H+) de la solución para intentar
compensar el pH. 

Cuando el pH de la solución donde se encuentra sobrepasa los 5.96, la

valina tiende a liberar protones (H+) de la solución para intentar
compensar el pH. 

2. ¿Cuáles aminoácidos se encuentran tanto en la leche como en la albumina?

Los aminoácidos son los componentes de las proteínas. La leche contiene dos proteínas
especialmente la caseína y la lactoalbumina que tiene 123 aminoácidos.

Entonces tenemos: 
Aminoácidos de la Caseína: Prolina y Arginina.
Aminoácidos de la lactoalbumina: Es la proteína con mayor cantidad de leucina, pero contiene todos
los aminoácidos esenciales que son:
  Fenilalanina   Metionina   Arginina
 Isoleucina   Treonina   Histidina
 Leucina   Triptófano 
 Lisina   Valina 

Aminoácidos de la albumina: Son los mismos de la lacto albumina. Si observamos en la mayoría de

pruebas la leche y la albumina dan resultados positivos esto se debe a la gran cantidad de aminoácidos
que contienen ambas sustancias.

3. ¿Por qué se utiliza frecuentemente la clara de huevo como antídoto para el envenenamiento con
plomo y mercurio?

Esto se debe a que el plomo y el mercurio, tienen mucha afinidad por las proteínas, y siendo la
albumina una proteína, se forma un complejo metal-proteína, que es inactiva y precipita, facilitando
su eliminación del sistema. Pero esto sería útil en una intoxicación leve, donde se hubieran ingerido
pocas gotas de un compuesto de plomo o mercurio, sería un tratamiento de ayuda DE EMERGENCIA,
pero no definitivo, pues estos compuestos, son demasiado tóxicos, y lo mejor, es usar ya en una sala
de urgencias de un hospital, DIMERCAPROL, PENICILAMINA, EDTA, DESFEROXAMINA, entre otros,
porque, las dosis letales de estos compuestos son bajos, y el medico tendría que cerciorarse que se
ha eliminado o inactivado la mayor parte del veneno.

4. ¿Qué métodos hay para detectar albúmina en la orina?

Una prueba más sensible para la detección de proteína o albúmina en la orina incluye la medición y
el cálculo en el laboratorio de la relación entre la proteína y la creatinina o entre la albúmina y la
creatinina. Esta prueba debe emplearse para la detección de enfermedad renal en personas que
corren un alto riesgo, en especial las que padecen diabetes. Si en la primera prueba de laboratorio se
detectan niveles altos de proteína, debe realizarse una prueba adicional después de 1 a 2 semanas.
Si el resultado de la segunda prueba sigue mostrando niveles altos de proteína, indica que tiene
proteinuria persistente y deben realizarse otras pruebas para evaluar la función renal.

Se utiliza una "prueba rápida" para ver si la proteína está o no presente en la orina. En este examen,
una tirilla químicamente tratada se sumerge en una muestra de orina al azar, simplemente para ver
si se detecta la proteína. Se requiere una muestra de 24 horas para medir la cantidad real de
proteína que está siendo excretada en la orina.

5. ¿Cuál es la evidencia experimental que pone de manifiesto que la estructura

tridimensional de las proteínas determina su actividad biológica?

La prueba que nos presenta esta evidencia es la desnaturalización de esta ya que

al afectar las interacciones que estabilizan las estructuras terciarias de las
proteínas y luego evaluar su actividad biológica para ver algún efecto notaríamos
inmediatamente la importancia de que estas se encuentren en su estructura 3D.
 Por ejemplo el beta-mercapto y el etanol afecta a los puentes disulfuro de las
proteínas. la urea afecta los puentes de hidrogeno, también se puede lograr la
perdida de estructura terciaria por calor, valores extremos de pH.

6. ¿Qué y cuáles son los aminoácidos esenciales?

Los aminoácidos esenciales son aquellos que no se pueden sintetizar a partir de

otros recursos de la dieta (el cuerpo humano no puede generarlos). Esto implica
que la única fuente de estos aminoácidos en esos organismos es la ingesta
directa a través de la dieta. Las rutas para la obtención de estos aminoácidos
esenciales suelen ser largas y energéticamente costosas. Cuando un alimento
contiene proteínas con todos los aminoácidos esenciales, se dice que son de alta
o de buena calidad. Algunos de estos alimentos son: la carne, los huevos, los
lácteos y algunos vegetales como la espelta, la soja y la quinoa.
No todos los aminoácidos son esenciales para todos los organismos (de hecho
sólo ocho lo son), por ejemplo, la alanina (no esencial) en humanos se puede
sintetizar a partir del piruvato. 

En humanos se han descrito estos aminoácidos esenciales:

fenilalanina 
isoleucina 
leucina 
lisina 
metionina 
treonina 
triptófano 
valina 

y solo los niños: 

arginina 
histidina 

Los aminoácidos que contienen azufre, metionina y cisteína, se pueden convertir

uno en el otro, por lo que por conveniencia se consideran una única fuente. Del
mismo modo, la arginina, ornitina y citrulina son interconvertibles, y también se
consideran una única fuente de aminoácidos nutricionalmente equivalentes. 

En otros mamíferos distintos a los humanos, los aminoácidos esenciales pueden

ser considerablemente distintos. Por ejemplo, a los gatos les falta la enzima que
les permitiría sintetizar la taurina, así que la taurina es esencial para los gatos.