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Los productos de la colmena podemos dividirlos en dos categorías: los introducidos por
las abejas y los producidos por las abejas.
Miel Cera
Propóleo Abejas
APITOXINA
Cada uno de estos productos requiere unos conocimientos y técnicas adecuadas para su
extracción y manejo. El producto sobre el cual vamos a trabajar es la apitoxina.
VENENO DE ABEJAS
Historia antecedentes
El veneno de abejas, es conocido como apitoxina del latín apis = abeja y del griego
toxicon = veneno. La mayoría de los estudios relativos al veneno de abejas han sido
impulsados por los numerosos informes que indican que las personas que sufren de
artritis o síntomas artríticos se han beneficiado con picaduras repetidas de abejas,
empleo conocido antes de nuestra era por Hipócrates 400 A de C. quien ya empleaba
abejas en sus procedimientos terapéuticos; Celse y más tarde Galeno quien en el siglo II
de nuestra era escribió sobre tratamiento con veneno. En el siglo VIII de nuestra era Carlo
Magno fue tratado con picaduras de abeja para combatir inflamaciones en las
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coyonturas. El médico francés Demarti lo empleó en Europa en 1858. I.B. Lubarski
escribía en 1878 la obra “el veneno de abejas un remedio”. Filip terc médico apicultor trató
enfermos de reumatismo con picaduras de abejas. En 1920 – 1940 además del empleo
del veneno de abejas en el tratamiento de enfermedades reumáticas, se manifestó un
gran interés por la recolección de este con el fin de preparar soluciones inyectables. El
veneno de abejas ha sido usado medicinalmente en Europa por algunas décadas,
especialmente para el tratamiento de enfermedades reumáticas; abejas vivas y el veneno
extraído han sido usados. La apitoxina ha sido reportada como medicina potencial para la
artritis y desensibilizar personas que son hipersensitivas al veneno de abeja. Además de
numerosas aplicaciones, el veneno de abejas tiene unas posibilidades interesantes para
su uso en insecticidas selectivos.
Durante las últimas tres décadas, gracias a los métodos con dispositivos eléctricos, se ha
logrado obtener veneno de abejas cristalizado, que permite su empleo en estudios
bioquímicos de laboratorio, así como en la elaboración de formas terminadas para
estudios preclínicos y clínicos, dirigidos a la terapéutica humana y animal.
CARACTERÍSTICAS DE LA APITOXINA
Color: incoloro.
Olor: penetrante.
pH: 5.2
COMPONENTES.
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SECO MOLECULAR
Melitina 50 12.000
Tertiapina 2.500
FOSFOLÍIPIDOS 5 700
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n - exilacetato 0.2 **
bencilacetato 1.0 *
n – octilacetato 1.0 *
n - decilacetato 0.1 -
Tomado de Collins
y Blum 1982.
HIALURONIDASA.
FOSFOLIPASA A2.
Esta enzima está naturalmente presente en todos los seres vivos. Las funciones varían de
acuerdo al organismo productor originando diferentes aspectos fisiológicos. Dependiendo
del origen la fosfolipasa A2 puede tener efectos anticoagulantes e inflamatorios. En la
apitoxina existen dos estructuras de fosfolipasa A2, ambas con peso molecular del orden
de 11.000. En el veneno seco la cantidad media de fosfolipasa A2 está en un 12%,
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pudiendo variar las concentraciones entre 1.8 a 27.4%, siendo mayor en las abejas
africanas que en las europeas.
MELITINA.
La melitina está conformada por 26 aminoácidos y tiene una forma cilíndrica helicoidal
abisagrada en su centro; uno de sus extremos rechaza el agua mientras el otro extremo
atrae el agua. En la bolsa del veneno, la melitina se almacena formando tetrámeros
(cuatro moléculas), y de este modo protegen su superficie hidrofóbica del agua; en esta
forma la melitina no es lítica (no daña las células). Cuando es diluida, el tetrámero se
disocia produciendo el monómero que tiene una superficie altamente activa, pudiendo las
moléculas de melitina dañar la membrana celular al alterar su estructura fosfolipídica,
conduciendo a la formación de poros y la destrucción celular. La melitina y la fosfolipasa
A2 son más tóxicas cuando actúan juntas, ocurriendo la destrucción celular con bajos
niveles de melitina y fosfolipasa A2.
La melitina destruye un amplio rango de células. La lisis de algunas células puede llevar a
la liberación de componentes dañinos como lisosomas de leucocitos, serotonina de los
trombocitos, histamina en mastocitos.
Muchas células poseen sus propias moléculas de fosfolipasa, las cuales son usadas para
generar prostaglandinas y derivados relacionados, algunos de los cuales son asociados
con la generación del dolor. Normalmente estas llamadas fosfolipasas endógenas son
inactivas, sin embargo la melitina es capaz de activarlas de una manera incontrolada,
elevando así los niveles de prostaglandinas.
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La melitina es efectiva en la destrucción de las células de los insectos, es
extremadamente tóxica a Drosophila y artrópodos. Abejas obreras algunas veces rocían
el veneno en la dirección de un invasor invertebrado. Bajo ciertas circunstancias, la
actividad superficial de la melitina es capaz de disolver cera en la cutícula externa de
algunos insectos, facilitando de esta forma la penetración de los otros componentes del
veneno. Es claro que los tres componentes: hialuronidasa, fosfolipasa y melitina forman
una mixtura extremadamente potente la cual es capaz de infligir intenso dolor en
mamíferos y matar enemigos invertebrados.
APAMINA.
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membranosas que contienen histamina. Cuando son activadas bajo un rango de
estímulos, pero en particular por inmunoglobulinas (IgE), el calcio entra a la célula y
entonces lleva a la fusión de la membrana y la liberación de histamina. El péptido
degranulador de mastocitos, estimula esta cadena de eventos aunque su potencia hacia
células de animales deferentes y tejidos diferentes de la misma especie es variable,
sorprendentemente los mastocitos de ratones, diferente a los de las ratas no son
afectados. Esta diferencia es reflejada en la toxicidad del péptido DCM en estos dos
mamíferos; las ratas son más susceptibles que los ratones.
OTROS PEPTIDOS.
Hay otros péptidos encontrados en el veneno de abejas, algunos de los cuales han sido
bien caracterizados. Muchos de ellos no son encontrados en todas las muestras del
veneno y su presencia, además, puede variar con las líneas de subespecies de Apis
mellifera.
Secapina contiene 25 aminoácidos, tiene muy baja toxicidad hacia mamíferos y puede
estar presente en el veneno a niveles del 2 %.
Muchos de los polipéptidos componentes del veneno de abejas son moléculas compactas
y robustas. Debido a su relativo pequeño tamaño, ellos tienen un potencial considerable
para estudios detallados. Péptidos del veneno de abejas están siendo corrientemente
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usados para cálculos energéticos, estudios de resonancia nuclear magnética, y como
modelos para interacciones membrana - proteína.
Cuando las proteínas son sintetizadas en la célula, ellas son secretadas a través de la
membrana y espontáneamente cazan en una estructura precisa. Al presente los
mecanismos de estos procesos no son completamente entendidos. Tal conocimiento es
absolutamente esencial para el eficiente procesamiento de proteínas genéticamente
elaboradas.
PRUEBAS FARMACOLÓGICAS.
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efectivamente componentes sintéticos los cuales poseen habilidad de degranular
mastocitos.
MELITINA
LA ABEJA.
BIOLOGIA.
Antes de 1956, en América solo existían razas europeas introducidas por los
conquistadores. En dicho año y con el fin de desarrollar su apicultura, Brasil importó
reinas seleccionadas de razas africanas, para cruzarlas con las razas europeas
existentes en dicho país, y así producir un híbrido que, adaptado al trópico reuniera las
características deseables presentes en las razas parentales tanto europeas como
africanas. En 1957, accidentalmente se escaparon varios enjambres con reinas africanas
importadas, iniciándose un cruzamiento no controlado entre las abejas europeas y
africanas. La población de abejas en la América tropical que resulta de estos múltiples
cruzamientos libres y que retiene muchas de las características ancestrales africanas, se
conoce como abeja africanizada.
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LA FAMILIA BIOLÓGICA Y SUS CASTAS.
La abeja melífera es un insecto social y como tal vive en grupo familiar compartiendo una
misma vivienda o nido, presentando superposición de generaciones (los padres coexisten
y se interrelacionan con sus hijos), hay división del trabajo, es decir las labores requeridas
para la supervivencia del grupo familiar, se distribuyen entre sus miembros de acuerdo a
las necesidades del momento.
En la abeja melífera hay tres castas representadas por una sola madre llamada reina, por
millares de hijas infecundas denominadas obreras y por algunas decenas o centenas de
hijos conocidos como zánganos.
LA COLONIA.
Una colonia de abejas melíferas es una familia que ya ha colonizado un sitio para vivir, o
sea que ya ha construido su vivienda (nido) en dicho sitio. Una colonia es pues una familia
con nido.
El nido está formado por varios panales paralelos, construidos en una cavidad o a la
intemperie, de cera secretada por glándulas ceríferas localizadas en la parte ventral del
abdomen de las obreras. Cada panal es una estructura vertical formada por un conjunto
de celdas hexagonales contiguas en series paralelas y construidas a ambos lados de una
lámina central, las celdas contienen la cría de abejas (huevos, larvas, pupas y adultos
próximos a emerger), y las reservas de alimento (néctar, miel y polen) de la colonia. La
colonia solo ataca en defensa de su nido.
LA COLMENA
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colonia; es fabricada por el hombre de cualquier material, forma y tamaño y sus panales
son fijos (no se pueden remover e inspeccionar individualmente).
La colmena moderna, es también fabricada por el hombre pero siguiendo ciertos criterios
en cuanto a materiales, forma, tamaño y, esencialmente, en cuanto a que sus panales
deben ser removibles y así permitir su inspección o manejo individual.
EL ENJAMBRE.
Un enjambre es una familia o grupo de abejas melíferas con una o varias reinas, vírgenes
o fecundadas, en tránsito, en busca de un sitio donde anidar; pueden estar volando o
formando un racimo en un lugar temporal, Un enjambre, por definición, no tiene nido que
defender y normalmente son mansos. Existen dos clases de enjambres naturales: a)
enjambre reproductivo que se forma por la división natural de las colonias que se
desarrollan y maduran en épocas favorables de abundantes recursos. b) enjambre
abandonista: están constituidos por toda la colonia (sin división), la cual abandona su
colmena debido a condiciones desfavorables internas o externas a ella.
LAS FEROMONAS.
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Las feromonas son sustancias producidas por un organismo que ejercen su acción en otro
organismo de su misma especie. Constituyen pues, una forma de comunicación
intraespecífica. La reina produce varias feromonas; la llamada sustancia real, es
secretada por sus glándulas mandibulares, y entre sus componentes están los ácidos 9-
oxodecenioco y 9-hidroxidecenoico que son las feromonas mas conocidas de la reina;
mediante ellas la reina, por ejemplo, inhibe en las obreras el desarrollo de sus ovarios y el
instinto de construir celdas reales.
Las obreras también producen feromonas. Así, por ejemplo, la glándula del veneno
produce varios compuestos volátiles que tienen actividad como feromonas de alarma.
Cuando una colonia recibe un estímulo que ella interpreta como de amenaza o ataque a
ella, las abejas guardianas elevan su abdomen y protraen (sacan) su aguijón, liberando
feromonas de alarma que reclutan a otras abejas para la defensa colonial. El aguijón que
dejan las abejas en sus víctimas también libera feromonas que orientan a otras abejas
para atacar a los agresores así marcados.
FEROMONAS DE ALARMA.
Las feromonas de alarma alertan y atraen a otras abejas, y pueden provocar aguijoneo si
estímulos adicionales apropiados son producidos; son liberadas cuando el aguijón de la
obrera es protraido y el aguijón es introducido en un intruso. Las glándulas mandibulares
también producen una feromona la cual ha sido implicada en comportamiento de alarma.
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El primer componente de la feromona de alarma identificado fue el isopentil-acetato, y
recientes trabajos sugieren que es producido por las glándulas de Koschevnikov, Este par
de glándulas también produce otros componentes volátiles. La glándula de Koschevnikov
es localizada en la parte superior del plato cuadrado, y consiste en una masa de células
situadas a lo largo en la membrana intersegmental que corre entre el plato cuadrado.
Cada glándula contiene largas células en forma de huevo que exudan sus secreciones
dentro de los delgados ductos sobre la membrana intersegmental, y desde aquí la
secreción colectiva fluye dentro de la cámara del agujón vía del plato cuadrado y oblongo.
En la cámara del aguijón la secreción se acumula sobre la membrana cetácea. Si el
aguijón es protraido, la membrana cetácea es expuesta permitiendo que los componentes
volátiles presentes se evaporen en los alrededores. La glándula de Koschevnikov también
está presente en la reina y es reportado que la secreción de la reina fecundada es
altamente atractiva para las obreras, aunque su función y química no es bien conocida
aún.
Una segunda estructura glandular que produce feromonas de alarma ha sido reportada en
el aguijón. La región proximal a la vaina del aguijón ha sido mostrado que posee una
actividad secretora. La secreción es elaborada por células epiteliales alargadas y alcanza
la superficie vía canales porosos presentes en la vaina de la cutícula. Los componentes
volátiles producidos por la membrana de la vaina del aguijón, ha sido encontrado que
origina respuesta de alarma, incluyendo alertamiento, atracción y acción de aguijonear en
las obreras guardianas.
La abeja melífera como todos los organismos vivientes es susceptible de ser atacada por
una variedad de patógenos, pestes y depredadores que pueden tener efectos nocivos en
el desarrollo y productividad de la colonia. Una colonia de Apis mellifera está conformada
por una gran cantidad de individuos viviendo juntos, y en cercana proximidad; además
cría en todas las fases de desarrollo, recursos almacenados de miel, polen y cera, con
condiciones de temperatura y humedad óptimas para la vida. Todas estas características
potencian el daño que puede sufrir la colonia. En su proceso evolutivo este insecto social
ha desarrollado diferentes y efectivos mecanismos que protegen al individuo y a la colonia
como totalidad, de sus enemigos. El hombre ha sido el más serio depredador habiendo
otros vertebrados, aves, invertebrados, hormigas, avispas, polillas y las mismas abejas
que pueden pillar a otras colonias. Entre los mecanismos de defensa que posee la abeja,
tenemos el sistema inmune que comprende barreras mecánicas y fisiológicas que cubren
el cuerpo y operan en el hemocelo de la abeja. Otras reacciones defensivas de Apis
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mellifera están relacionadas a nivel de organización social en la colonia e incluyen: un
comportamiento higiénico y de limpieza, referido a la acción de desopercular cría enferma
y retirarla de la celda hacia el exterior de la colmena respectivamente; secreciones de las
abejas y las cuales están presentes en la miel, jalea real y polen, protegiéndolos de
algunos microorganismos. Son utilizados por las abejas materiales como el propóleo con
propiedades antibióticas. Estructuras corporales como el aguijón con su veneno hacen
parte del arsenal de defensa de las abejas hacia depredadores.
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Las glándulas del veneno comienzan a funcionar luego de la emergencia de la abeja
adulta, el veneno comienza a ser detectado después de l tercer, con la producción
máxima alcanzada después de dos o tres semanas. La síntesis de los diferentes
componentes del veneno no alcanzan su máxima producción simultáneamente. Estos
cambios en el contenido del veneno han sido sugeridos ser relacionados a la transición de
la actividad de abeja de casa a actividad de abeja de campo. El nivel de histamina en el
veneno, por ejemplo aumenta con la edad de la abeja, siendo máximo en abejas de unos
40 días de edad. El nivel de hialuronidasa, por ejemplo es más bajo en reinas que en
obreras. Las abejas viejas tienen una menor capacidad para regenerar el veneno, la
degeneración de las glándulas del veneno comienza a hacerse evidente en la parte más
tardía de la vida del adulto. En general, la cantidad de veneno de las abejas obreras
parece ser más alto durante los meses de verano cuando estas están en su pico de
actividad en la colmena y las abejas jóvenes están sirviendo como guardianas de la
colmena.
Una situación diferente ocurre con la reina cuando la máxima producción de veneno se
alcanza al tiempo de su emergencia; es sugeridos que es necesario para usar en batallas
con otras reinas recién emergidas en la colonia.
La cantidad de veneno presente en una abeja obrera ha sido estimado en 3-4 µl. Es difícil
obtener todo el veneno de un simple individuo y 0.5 – 1.0 µl de veneno puede ser
obtenido. El veneno de abeja es 88% agua y de esta forma solo 0.1 µg de veneno seco
puede ser obtenido de cada abeja, esto es que 10.000 aguijonazos de abeja son
requeridos para producir 1 gramo de veneno seco.
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HIGIENE PERSONAL
EQUIPO DE PROTECCIÓN.
-La explotación de las colmenas debe realizarse con intervalos de al menos 15 días, con
el fin de permitir la recuperación de las abejas.
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Métodos tradicionales.
Método de Illertisen.
Consiste en tomar una a una las abejas por las alas y el tórax con una pinza. El insecto al
tratar de picar, aparece una gota de veneno en la punta de su agujón, y es entoces
recogido en un vidrio reloj o placa de vidrio.
Se toma una abeja viva con una pinza y se introduce su aguijón en una probeta con agua
destilada donde el veneno se disuelve. Así el líquido obtenido está listo para el
tratamiento.
Por medio de una pinza se le arranca el aparato vulnerante, que es desecado y reducido
a polvo y disuelto en agua para su uso.
Un vaso de vidrio se llena con agua destilada para recubrirlo con una membrana animal.
Se toma la abeja con una pinza haciéndola que aguijonee la membrana, y pasando así
por ósmosis el veneno de abejas al líquido.
Método de Floury.
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En un frasco de vidrio vacío se introducen varias abejas y se tapa con un algodón
embebido en éter. Esta técnica, al emplear anestesia, tiene por objetivo no solo sedarlas,
sino hacerlas desenvainar el aguijón; posteriormente se enjuaga el frasco con agua
destilada y el líquido obtenido es filtrado.
ESTIMULADOR ELÉCTRICO.
Hay modelos de trampas de cajón cerrado, donde es necesario llevar las abejas para
extraerles el veneno y luego liberarlas.
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Para las condiciones nuestras el estimulador recomendado es el de piquera, que permite
instalarlo y retirarlo fácilmente; permitiendo visualizar todo el proceso EL COLECTOR
TRAMPA DE APITOXINA 4G, ha sido diseñado para extraer el veneno de la abeja
melífera (Apis mellifera), sin dañarlas o matarlas. Su diseño ha sido pensado para
trabajar en el medio apícola colombiano; con la abeja africanizada y donde la gran
mayoría de los productores posee un número pequeño de colmenas y la mayoría de los
sitios son de difícil acceso. Su tamaño y peso facilitan su transporte y manejo.
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