Coriandrum sativum: evaluación de su efecto ansiolítico en el laberinto elevado en forma

de cruz

Emamghoreishi Masoumeh, Khasaki Mohammad, Aazam Maryam Fath.

Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina de la Universidad de Ciencias Médicas de Shiraz,

Shiraz, Irán.

Recibido el 11 de julio de 2003; recibido en su forma revisada 10 de junio 2004; aceptado 28 de junio 2004.
Disponible en línea desde el 19 de noviembre 2004

RESUMEN

Las aplicaciones clínicas de las benzodiacepinas como ansiolíticos están limitadas por sus
efectos secundarios no deseados. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos fármacos está bien
justificado. Entre las plantas medicinales, Coriandrum sativum L. ha sido recomendada para el
alivio de la ansiedad y del insomnio en la medicina popular iraní. Sin embargo, hasta ahora
ningún estudio farmacológico ha evaluado sus efectos sobre el sistema nervioso central. Por lo
tanto, el objetivo de este estudio fue examinar si el extracto acuoso de las semillas de
Coriandrum sativum tiene efecto ansiolítico en los ratones. Además, también se evaluaron sus
efectos sobre la actividad espontánea y la coordinación neuromuscular. El efecto ansiolítico del
extracto acuoso (a 10, 25, 50, 100 mg/kg, por vía i.p. [intraperitoneal]) se examinó en ratones
albinos machos en el laberinto elevado en forma de cruz tomado como un modelo animal de
ansiedad. Los efectos del extracto sobre la actividad espontánea y la coordinación
neuromuscular se evaluaron utilizando el medidor de actividad Animex y la vara rotatoria,
respectivamente. En el laberinto elevado en forma de cruz, el extracto acuoso a 100 mg/kg
mostró un efecto ansiolítico, aumentando el tiempo pasado en los brazos abiertos y el
porcentaje de entradas en dichos brazos abiertos, en comparación con el grupo de control. El
extracto acuoso a 50, 100 y 500 mg/kg, redujo significativamente la actividad espontánea y la
coordinación neuromuscular, en comparación con el grupo de control. Estos resultados
sugieren que el extracto acuoso de las semillas de Coriandrum sativum tiene efecto ansiolítico,
además que puede poseer potenciales efectos sedativos y como relajante muscular.

1. INTRODUCCIÓN

Los trastornos de la ansiedad en las sociedades modernas tienen una prevalencia relativamente
alta y el representan importantes recursos financieros. Actualmente, los medicamentos más
prescritos para los trastornos de ansiedad son las benzodiacepinas. Sin embargo, los usos
clínicos de las benzodiacepinas están limitados por sus efectos secundarios, tales como
deterioro psicomotor, la potenciación de otros fármacos depresores del sistema nervioso central
y el riesgo de crear dependencia. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos medicamentos que
posean efectos ansiolíticos sin las complicaciones de las benzodiacepinas sería de gran
importancia en el tratamiento de los trastornos relacionados con la ansiedad. Las plantas
medicinales son una buena fuente para encontrar nuevos remedios para estos trastornos.

En la medicina tradicional iraní, Coriandrum sativum L. (Umbelliferae) ha sido indicada para

una serie de problemas médicos tales como los malestares de la dispepsia, pérdida del apetito,
convulsiones, insomnio y ansiedad (Zargari, 1991; Mir Heidar, 1992). Para propósitos
médicos, la semilla del cilantro es utilizada empíricamente en diferentes formas de
dosificación, incluyendo las semillas en polvo o como extracto seco (5.2 g/día), té (8.4 g/100
ml, hasta 30 g), tinturas (1:8 g/ml) (10-20 gotas), decocción o infusión (Zargari, 1991; Mir
Heidar, 1992). Se han recomendado tanto el jugo de hojas frescas (30 g) como el té, o las
semillas de cilantro en polvo para el alivio de la ansiedad y del insomnio (Mir Heidar, 1992),
tomadas por lo general en una sola dosis antes de dormir. Usos similares de las semillas de
cilantro (por ejemplo, para el alivio de nerviosismo e insomnio) también se han indicado en
otras medicinas populares (Duke, 1983, 2002). Sin embargo, ningún estudio farmacológico o
médico han evaluad los efectos de Coriandrum sativum L. (cilantro) sobre el sistema nervioso
central. Por lo tanto, el presente estudio se llevó a cabo para ver si el extracto acuoso de las
semillas de cilantro tiene un efecto ansiolítico en los ratones. Además, también se evaluaron los
posibles efectos del extracto de cilantro sobre la actividad espontánea y la coordinación
motora.

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1. Animales
Los ratones albinos macho, con pesos de 25-35 g, fueron adquiridos del bioterio de la
Universidad de Ciencias Médicas de Shiraz. Los animales fueron albergados en jaulas en un
número de 5 individuos, a 22±1°C, en un ciclo luz/oscuridad de 12 horas. Agua de grifo y
alimento en pellet estaban disponibles ad libitum (a disposición). Se asignaron grupos de 6 a 11
ratones al azar, para los diferentes grupos de tratamiento y lo mismos fueron evaluados en un
orden de contrapeso. Los animales no tenían noción de las condiciones del experimento. Todos
los experimentos se llevaron a cabo en una habitación silenciosa con luz roja tenue entre las
9:00 a.m. y las 2:00 p.m.

2.2. Material vegetal

Las semillas secas de cilantro fueron adquiridas de una fuente comercial en Shiraz, Irán. La
identidad de las semillas fue confirmada por el Departamento de Farmacognosia de la
Facultad de Farmacia, en la Universidad de Ciencias Médicas de Teherán, en Teherán, Irán. Un
ejemplar de muestra (C-100) se mantuvo en nuestro laboratorio para referencia futura.

2.3. Preparación del extracto acuoso

Las semillas secas de cilantro se homogeneizaron hasta obtenerse un polvo fino. Se preparó
una infusión de cien gramos de cilantro en polvo en 500 ml de agua destilada fría durante 24
horas, fue llevado a ebullición, luego se retiró de la fuente de calor y se dejó en infusión
durante 15 minutos. El extracto fue filtrado, luego se concentró en baño de agua y fue llevado a
sequedad bajo vacío. El rendimiento del extracto era del 7,9% (p/p).

2.4. Drogas
El clorhidrato de diazepam (10 mg/2 ml; de Darou Pakhsh, Teherán, Irán) fue utilizado como
un fármaco de referencia. Se diluye a 0,3 mg/10 ml y a 3 mg/10 ml con solución salina antes de
su uso. Las diferentes concentraciones del extracto de cilantro fueron preparadas por diluciones
seriadas a partir de una solución stock de 50 mg/ml del extracto preparado con solución salina.
Todas las soluciones se prepararon cada vez en los días de ensayo y fueron administradas por
vía intraperitoneal (i.p.) en un volumen de 0.1ml/10 g de peso corporal de los ratones.

2.5. Elevated plus-maze model of anxiety

Anxiolytic activity was measured using the elevated plusmaze test (Lister, 1987). The maze
consisted of two open (30 cm × 5 cm × 0.2 cm) and two closed (30 cm × 5 cm × 15 cm) arms,
extending from a central platform (5 cm × 5 cm) and elevated to a height of 45 cm above the
floor. The entire maze was made of clear Plexiglas. Mice were individually placed on the
center of the maze facing an open arm, and the number of entries and the time spent in closed
and open arms were recorded during a 5-min observation period. Arm entries were defined as
entry of all four paws into an arm. The percentage of open arm entries (100 × open/total
entries) was calculated for each animal. The experimental animals were intraperitoneally
treated with diazepam (0.3 mg/kg, n = 10) or the aqueous extract (10, 25, 50 or 100 mg/kg, n =
6–10), 30 min and 45 min, respectively, before evaluation in the maze. The coriander extract at
doses higher than 100 mg/kg caused a marked decrease in motor activity that interfered with an
accurate evaluation of anxiolytic effect. Therefore, higher doses of the extract were not
included in the plus-maze test.

2.5. Modelo de ansiedad del laberinto elevado en forma de cruz

La actividad ansiolítica se midió mediante la prueba del laberinto elevado en forma de cruz
(Lister, 1987). El laberinto consistió en dos brazos abiertos (30 cm x 5 cm x 0,2 cm) y dos
brazos cerrados (30 cm x 5 cm x 15 cm), que se extienden desde una plataforma central (5 cm
x 5 cm) y está elevado a una altura de 45 cm por encima del suelo. Todo el laberinto estaba
hecho de plexiglás transparente. Los ratones fueron colocados individualmente en el centro del
laberinto, orientados hacia un brazo abierto, y el número de entradas y el tiempo pasado en los
brazos abiertos y en los brazos cerrados se registraron durante un período de observación de 5
minutos. Las entradas en un brazo se definen como la entrada de las cuatro patas dentro del
brazo. Para cada animal se ha calculado el porcentaje de las entradas en los brazos abiertos
(100 × abierto/entradas totales). Los animales de experimentación fueron tratados con
diazepam por vía intraperitoneal (0,3 mg/kg, n = 10) o con el extracto acuoso (a 10, 25, 50 o
100 mg/kg, n = 06.10), 30 minutos y 45 minutos, respectivamente, antes de evaluación en el
laberinto. El extracto de cilantro a dosis superiores a 100 mg/kg provocó una marcada
disminución de la actividad motora, lo cual interfirió con una evaluación precisa del efecto
ansiolítico. Por lo tanto, no se incluyeron dosis mayores del extracto en la prueba del laberinto
elevado en forma de cruz.

2.6. Actividad espontánea

La actividad de ratones individuales ha sido registrada con el medidor de actividad Animex
(modelo AB FARAD, Suecia). Los recuentos de la actividad se acumularon 20 minutos después
de la administración de la solución salina (por vía i.p. [intraperitoneal], n = 11), del diazepam
(3 mg/kg por vía i.p., n = 7) o del extracto de cilantro (10, 50, 100 o 500 mg/kg por vía i.p., n =
7) a intervalos de 5 minutos, durante 30 minutos.

2.7. Coordinación neuromuscular – vara rotatoria

El efecto del extracto de cilantro sobre los movimientos coordinados del motor fue evaluado
utilizando la prueba de la vara rotatoria. Un día antes de la prueba, los ratones fueron
entrenados para permanecer en la rueda giratoria (3 cm de diámetro, a 20 r.p.m.) durante más
de 1 minuto. El día de la prueba, los ratones fueron probados en la vara rotatoria (modelo 7600,
Ugo Basile, Italia) antes de la administración de la solución salina, el diazepam o el extracto
acuoso de semillas de cilantro y 50 minutos después de dicha administración (es decir,
inmediatamente después de la prueba de actividad). El número de segundos que cada ratón se
mantuvo en la rueda giratoria fue grabado para un máximo de 300 segundos.

2.8. Estadísticas
Los datos obtenidos a partir de la evaluación del extracto de cilantro en la prueba del laberinto
elevado en forma de cruz, fueron analizados estadísticamente utilizando un ANOVA en un solo
sentido. También se empleó una prueba t independiente para realizar la comparación de los
promedios entre el grupo tratado con solución salina y el grupo tratado con diazepam en la
prueba del laberinto elevado en forma de cruz. Las actividades espontáneas fueron evaluadas
mediante un análisis de la varianza para medidas repetidas (factor entre-sujetos: tratamiento;
factor intra-sujeto: tiempo después de la dosis). Los datos obtenidos a partir de la prueba de la
vara rotatoria fueron evaluados utilizando el análisis univariado de varianza, teniendo como
covariable al tiempo dedicado a la vara rotatoria antes de la inyección. Las comparaciones post
hoc entre los distintos grupos se realizaron mediante la prueba t de Dunnett. Los análisis
estadísticos se realizaron con el programa SPSS 10.0. P <0,05 fue considerado como un nivel
significativo.

3. RESULTADOS

3.1. Laberinto elevado en forma de cruz

Una prueba t independiente, reveló que la administración del diazepam (0,3 mg/kg)
incrementó significativamente la cantidad de tiempo pasado en los brazos abiertos y el
porcentaje de las entradas en dichos brazos abiertos (P <0,05), comparado con el grupo tratado
con la solución salina (Figura 1). El extracto acuoso de las semillas de cilantro a 100 mg/kg
aumentó significativamente tanto el tiempo empleado en los brazos abiertos (F(4,39) = 3.5, P
<0,05) como el porcentaje de las entradas en los brazos abiertos (F(4,39) = 2.7, P <0,05),
comparado con el grupo tratado con la solución salina (Figura 2). No hubo diferencias
significativas entre el extracto de cilantro y los grupos tratados con la solución salina para el
número de entradas en los brazos cerrados (F(4,39) = 1.8, P> 0,05) y para las entradas totales
(F(4,39) = 0.9, P >0.05).

3.2. Actividad espontánea

Las medidas ANOVA repetidas mostraron un efecto significativo del tratamiento (F(5,38) =
7.7, P <0,001) y del tiempo después de la dosis (F(5,34) = 15.7, P <0,001), pero no mostraron
ninguna interacción significativa con el tiempo por el tratamiento administrado ( F(25,190) =
0.9, P> 0,05) (Figura 3). La comparación post hoc t de Dunnett reveló que el diazepam a 3
mg/kg y el extracto acuoso de las semillas de cilantro a 50, 100 y 500 mg/kg, produjeron una
reducción significativa de las actividades espontáneas, en comparación con el grupo de control
(P <0.01, Figura 3-recuadro). El análisis por regresión lineal mostró que el efecto del extracto
del cilantro sobre la actividad espontánea era dependiente de la dosis (pendiente = -0.41, P =
0,001), es decir, al incrementarse la dosis del extracto de cilantro se produjo un mayor efecto
sobre la actividad espontánea (Figura 3-recuadro). Además, el ANOVA en un solo sentido,
seguido por la comparación post hoc de Tukey, mostraron una reducción significativamente
mayor de la actividad espontánea por el extracto de cilantro a las dosis de 100 y 500 mg/kg, en
comparación con el extracto cilantro a la dosis de 10mg/kg (F(4 , 35) = 14.4, P <0,001) (Figura
3-Recuadro). Las diferencias entre las dosis de 10 y 50 mg/kg del extracto de cilantro no
alcanzaron importancia estadística (P = 0,06).

Figura 1. Efecto del diazepam (0, 0,3 mg/kg, por vía i.p [intraperitoneal]; n = 10) sobre el
tiempo pasado en los brazos abiertos y en los brazos cerrados (A) y sobre el porcentaje de
entradas en los brazos abiertos (B) durante una prueba de 5 minutos en el laberinto elevado en
forma de cruz para los ratones. Las barras representan el promedio ± D.E. (Desviación
Estándar). * P <0,05 en comparación con el grupo de control.
Figura 2. El efecto del extracto acuoso de semillas de cilantro (0, 10, 25, 50 y 100 mg/kg, n =
6.10; por vía i.p [intraperitoneal]) sobre el tiempo pasado en los brazos abiertos y en los brazos
cerrados (A) y sobre el porcentaje de las entradas en los brazos abiertos (B) durante una prueba
de 5 minutos en el laberinto elevado en forma de cruz para los ratones. Las barras representan
el promedio ± D.E. (Desviación Estándar). * P <0,05 en comparación con el grupo de control.
Figura 3. Promedio (±D.E., Desviación Estándar) del recuento de la actividad espontánea en
los ratones, acumulado en intervalos de 5 minutos durante 30 minutos, 20 minutos después de
la administración de solución salina (por vía i.p [intraperitoneal], n = 11), diazepam (3 mg/kg
por vía i.p., n = 7) y el extracto acuoso de las semillas de cilantro (10, 50, 100 y 500 mg/kg por
vía i.p., n = 7). El diazepam (de 30 a 40 minutos después de la dosis) y el extracto acuoso a 50,
100 y 500 mg/kg (de 25 a 45 minutos después de la dosis) redujo significativamente la
actividad, en comparación con el grupo tratado con solución salina (P <0,01). Recuadro: Las
barras representan el Promedio ± D.E. (Desviación Estándar) de los recuentos de la actividad
media cada 5 minutos, durante el período de prueba de 30 minutos. (a) P <0.01 en
comparación con el grupo tratado con la solución salina, (b) P <0,05 en comparación con el
grupo tratado con el extracto acuoso a la dosis de 10 mg/kg.