Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
CARRERA Medicina
ASIGNATURA Bioqumica I
CURSO
PRCTICA DE LABORATORIO No: 2
-1-
ESTUDIANTES
APELLIDOS Y NOMBRES CDULA FIRMA
COMPLETOS ESTUDIANTE
0105259857
Mora Amoroso Emilia Gisselle
1727384909
Jaramillo Nieves Anggie
1315049203
Ramos Vera Shayra
0202297073
Paredes Ledesma Valeria
OBSERVACIONES
CALIFICACIN
-2-
1. TEMA: EXTRACCIN Y MANEJO DE MUESTRA SANGUNEA
2. OBJETIVOS
-3-
1 dermogrfico (o marcador de material de vidrio)
2 cepillos para lavar tubos de ensayo pequeos (de 5 ml y grandes de 10 ml)
1 par de guantes de uso domstico
1 frasco con detergente (para lavado de materiales)
1 frasco grande para cortopunzantes con etiqueta (recipiente vaco de los
desinfectantes que reutilice en casa con tapa, grande de plstico grueso)
ROTULAR CON EL CURSO Y EL NUMERO DE GRUPO
4 recipientes de plstico de 100 ml de capacidad con tapas
100 puntas azules
100 puntas amarillas
Tiras multipeg
1 lavacara pequea
INDIVIDUALES:
-4-
4. GRFICO
franelas de 40 cm cada una, frasco de cloro, frasco de agua destilada de 500 ml, frasco estril
para torundas de algodn, Torundas de algodn, frasco de alcohol, gasas estriles, frasco de
jabn lquido, dermogrfico (o marcador de material de vidrio, cepillos para lavar tubos de
ensayo pequeos (de 5 ml y grandes de 10 ml), entre otros)
-5-
FOTOGRAFA N 3 MATERIALES INDIVIDUALES
(tubos al vaco de tapa roja (sin anticoagulante), tubos al vaco con anticoagulante (tapa lila o
celeste), jeringuillas descartables de 10 ml y 2 de 5 ml, agujas vacuntainer tapa verde, lancetas,
2 venditas o curitas, torniquete, cpsula, mascarilla, par de guantes de manejo de ltex entre
otros)
-6-
FOTOGRAFA N 5 PROCEIMIENTO PARA LA EXTRACCIN DE MUESTRA
SANGUNEA
5. FUNDAMENTO TERICO
I. LA SANGRE
La sangre es un tejido lquido que recorre el organismo, a travs de los vasos sanguneos que
transporta las clulas necesarias para llevar a cabo las funciones vitales como respirar, formar
sustancias y defenderse de agresiones. La cantidad de sangre de una persona est en relacin
con su edad, peso, sexo y altura. Una persona adulta tiene entre 4,5 y 6 litros de sangre, es
decir, un 7% de su peso corporal.
La sangre transporta los principios nutritivos desde el aparato digestivo hasta las clulas, donde
se recogen tambin las sustancias de desecho para eliminarlas gracias a los riones, el hgado
y otros rganos de excrecin. Tambin es la encargada de regular el transporte de oxgeno y la
eliminacin del anhdrido carbnico. Tiene un papel importante en funciones como la
coagulacin, la inmunidad y el control de la temperatura corporal.
A) Los glbulos rojos, tambin denominados hemates o eritrocitos, son las clulas
sanguneas ms numerosas, cuyo caracterstico color rojo se debe a una protena que se
encuentra en su interior llamada hemoglobina, responsable de ligar el oxgeno para
transportarlo desde los pulmones a todos los tejidos del organismo para que las clulas
respiren y eliminar el dixido de carbono que se produce por la actividad celular. Los
-7-
glbulos rojos se forman en la mdula sea, que se localiza dentro de los huesos del
esqueleto, desde donde son liberados al torrente sanguneo. Su dficit (anemia) provoca
una carencia de oxgeno en los rganos vitales de los enfermos. En este caso deben
administrarse concentrados de hemates.
B) Los glbulos blancos, o leucocitos, se encargan de proteger al organismo contra el
ataque de bacterias, virus, hongos y parsitos. Cuando hay una infeccin aumentan su
nmero para mejorar las defensas. Unos se forman en la mdula sea y otros en el
sistema linftico (bazo, ganglios, etc.). Los glbulos blancos estn constantemente
atentos a cualquier signo de enfermedad. Cuando aparecen los grmenes utilizan
diferentes maneras para atacarlos; por ejemplo, produciendo anticuerpos protectores
que inutilizan a los grmenes; o rodeando y devorando a la bacteria invasora.
La Albmina: Es una protena que ayuda a mantener el agua del plasma en una
proporcin equilibrada.
Las Globulinas: Son los anticuerpos encargados de la defensa de nuestro organismo
frente a las infecciones. Su disminucin ocasionar una baja de defensas.
Factores de Coagulacin: Son imprescindibles para evitar las hemorragias. La ausencia
de algn factor de coagulacin puede ocasionar trastornos hemorrgicos ya que se
dificulta la formacin del cogulo.
-8-
Otras protenas transportan sustancias necesarias para el normal funcionamiento de las
clulas (grasas, azcares, minerales).
1) Puncin venosa
2) Puncin capilar
3) Puncin arterial.
La sangre oxigenada por el pulmn, es bombeada por el corazn hacia todos los rganos y
tejidos para cubrir las necesidades metablicas. Esta sangre arterial tiene prcticamente una
composicin uniforme en todo el cuerpo. La venosa vara segn la actividad metablica del
rgano o tejido por lo que el punto donde se extrae la muestra puede influir en la composicin
de la sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial tambin se diferencia por el pH,
por su concentracin en Dixido de Carbono y su hematocrito.
La sangre obtenida por puncin de la piel, que a veces se denomina sangre capilar
incorrectamente, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vnulas y capilares por lo
-9-
tanto es en parte arterial, y en parte venosa. El aumento de presin en las arteriolas hace que la
muestra sea ms rica en sangre arterial, pero contiene tambin lquido intersticial e intracelular.
V. ANTICOAGULANTES Y PRESERVANTES
El anticoagulante debe elegirse de acuerdo con las determinaciones que se vayan a realizar,
asegurndose de que su presencia no afecte a la medida. As, por ejemplo, si se quieren medir
los iones sodio o potasio, no puede utilizarse como anticoagulante ninguna sustancia que
contenga estos iones.
- 10 -
b) El oxalato acta como anticoagulante por la formacin de complejos con el calcio, ion
que es fundamental en el mecanismo de coagulacin. La sal ms utilizada es el oxalato
potsico, en una concentracin de alrededor de 2 mg/ml de sangre. Como en el caso de
la heparina, puede utilizarse como solucin o secarse sobre las paredes de los tubos de
recogida. Las sales de oxalato se utilizan como anticoagulantes en las determinaciones
hematolgicas de recuentos celulares y hematocrito.
c) El citrato es otro anticoagulante que acta por formacin de complejos con el calcio.
Alrededor de 30 mg/ml de sangre es la concentracin que suele utilizarse. El citrato
sdico se emplea para las medidas de velocidad de sedimentacin y estudios de
coagulacin.
e) Fluoruro es un preservador que inhibe un gran nmero de enzimas, por lo que impide
el metabolismo de diversas sustancias sanguneas. Resulta especialmente til para las
determinaciones de glucosa cuando entre la toma y la centrifugacin de la sangre haya
de transcurrir ms de una hora.
6. DISEO EXPERIMENTAL
- 11 -
Rotule previamente los tubos donde va a recolectar las muestras.
Elija la vena de buen calibre, mire y verifique al tacto. De preferencia se utilizan las venas
del pliegue del codo y en especial la mediana ceflica en los adultos. En los nios en el
dorso del pie o de la mano.
Desinfecte la zona con torunda algodn alcohol yodado para lo cual se emplean dos
mtodos el circular y el perpendicular.
Aplique un torniquete con nudo a una distancia de 10 a 15 cm del sitio de extraccin.
Concomitadamente se pide que el paciente realice puo.
Verificando el funcionamiento adecuado de la jeringuilla tome la misma con los dedos
ndice y pulgar descansando el dedo medio en el antebrazo del paciente, formando un
ngulo de 45 grados con la horizontal.
Retire el protector de la aguja.
Atraviese firmemente la piel e introduzca la aguja una distancia aproximada de 1 a 1,5
cm con el bisel hacia arriba dentro del lumen de la vena. En este instante fluye
espontneamente la sangre.
Aydese con el mbolo para extraer la cantidad deseada de sangre; retire el torniquete y
pida que abra el puo.
Coloque una torunda de algodn alcohol en el sitio de la extraccin y retire lentamente
la jeringuilla. Realice una ligera presin para favorecer la hemostasia.
Retire la aguja de la jeringuilla.
En el tubo de recoleccin de la muestra, forma un ngulo de 30 grados con la jeringuilla,
deslice lentamente la sangre por las paredes laterales del tubo con una presin constante
para evitar hemlisis.
Obtenida la muestra se procede a realizar las diferentes determinaciones.
C) OBTENCIN DE SUERO: Una vez obtenida la muestra de sangre, siga los siguientes
pasos:
Formado el cogulo en los tubos de tapa roja, se somete a centrifugacin por un
lapso de 5 minutos a 3000 r.p.m. (revoluciones por minuto)
- 12 -
Retirar el lquido sobrenadante por medio de una pipeta manual o semi automtica
para no contaminar la muestra. A otro tubo de ensayo el cual debe tener rotulacin.
Establecer caractersticas organolpticas factibles en el suero.
8. CUESTIONARIO
1. Qu factores y condiciones influyen en la toma de una muestra sangunea?
- 13 -
- la postura durante la toma de sangre es decir, si su posicin es de cubito prono o se
encuentra sentado
- el tiempo de aplicacin del torniquete
- el almacenamiento de la muestra sangunea con el cuidado y la temperatura
correspondiente.
QUIMICA CLNICA
ESTABILIDAD ESTABILIDAD
DETERMINACION TIPO DE MUESTRA
REFRIGERADO A 4C FRIZADO A -18C
cido rico 1 semana 6 semanas suero
Albmina 1 mes 6 meses suero
Bilirrubina (Total y
1 semana 6 meses suero
directa)
CPK 1 semana suero
suero o plasma
Calcio 1 dia 1 ao heparinizado
suero o plasma
Cloro 4 semanas 1 ao heparinizado
Colesterol (Total) Hacer en el da suero
Creatinina 1 semana suero
Eritropoyetina 2 meses suero o plasma con EDTA
Fosfatasa cida 2 dias 1 mes suero
suero o plasma
Fosfatasa alcalina Estable 4 hs. a temperaura ambiente heparinizado
Glucemia Procesar lo antes posible suero o plasma (urgencia)
Hemoglobina sangre total anticoagulada
5 dias
glicosilada con EDTA
suero o plasma
Hierro srico 1 semana heparinizado
suero o plasma
Ionograma plasmtico 1 dia 1 ao heparinizado
Procesar antes de las 8 horas de tomada la suero o plasma
Triglicridos muestra heparinizado
suero o plasma
Urea 1 semana 6 meses heparinizado
COAGULACION
El Tiempo de Protrombina (TP) y el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT) requieren sangre
entera anticoagulada con citrato (1 parte de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rpidamente
- 14 -
10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete
globular y procesar dentro de las 4 hs.)
Las determinaciones de Anticoagulante Lpico (tambien llamada Inhibidor Lpico), Protena C, Protena
S, Antitrombina III y Resistencia a la protena C Activada (RPCA) requieren las mismas muestras que las
utilizadas en las pruebas de rutina (TP y APTT), solo que aqu debemos hacer una segunda centrifugacin
para obtener un plasma pobre en plaquetas. Una vez separado el plasma podemos guardar las muestras
congeladas a -20 C por un mes.
La determinacin de Fibringeno y Dmero D requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte
de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rpidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben
procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4
hs.). El plasma separado puede guardarse a -20C una semana para el Fibrinogeno y un mes para el
Dmero D.
El dimetro de la aguja est indicado por el calibre de la aguja. Cada calibre tiene una serie de
diferentes longitudes para el uso que ameriten. Hay una serie de sistemas para medir el calibre
de las agujas. Las agujas ms comnmente usadas en el campo mdico van en escala desde la
nmero 7 y la ms ancha, hasta la nmero 33, la ms pequea: el calibre mayor es reservado
para las agujas de menor dimetro. Las agujas de calibre 21 son las que ms se usan para la
venopuncin, mientras que las de calibre 16 son agujas comnmente utilizadas para la donacin
de sangre, ya que son lo suficientemente gruesas como para permitir que los glbulos rojos
- 15 -
pasen a travs de la aguja sin que se rompan; adems, el calibre ms grueso permite que ms
sangre se recoja o entregue en un perodo ms corto. Aunque las agujas reutilizables tienen
aplicacin en situaciones de investigacin cientfica, las agujas desechables son mucho ms
comunes en el uso de la Medicina con la finalidad de evitar la transmisin de enfermedades.
El calibre de la aguja tambin depende de lo espeso que pueda ser el medicamento administrado
si el medicamento es espeso, una aguja con un calibre pequeo y gran dimetro sera la aguja
a elegir. Los medicamentos intramusculares se administran con agujas largas, mientras que los
medicamentos subcutneos se administran con agujas ms cortas.
- 16 -
5. En un mapa conceptual indique la composicin y funciones de la sangre.
La sangre
Composicin Funciones
- 17 -
6. Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total.
Suero: El suero es la parte lquida de la sangre despus de la coagulacin. Contienen 6-8% de las
protenas que forman la sangre. Estn ms o menos, igualmente divididas entre la albmina y las
globulinas de suero. Cuando la sangre es extrada y dejada a coagular, el cogulo se reduce despus
de algn tiempo. El suero es la parte de la sangre que queda una vez que se han eliminado los factores
de coagulacin como fibrina.
Plasma: El plasma es un lquido amarillento y claro que es parte de la sangre. Tambin se encuentra
en las linfas o en fluidos intramusculares. Esta es la parte de la sangre que contiene fibrina y otros
factores de coagulacin. El plasma hace el 55% del volumen total de sangre. El principal componente
del plasma sanguneo es el agua. El plasma es la parte de la sangre que contiene ambas, el suero y los
factores de coagulacin
Sangre total: Se conoce por sangre total aquella que no ha sido separada en sus diferentes
componentes. Una unidad tiene un volumen de 450 a 500 mL y es recolectada en una solucin
con anticoagulante y conservante que permite la supervivencia de sus elementos.
- 18 -
8. Mediante un video grupal con la participacin de los estudiantes de los grupos
se demostrar la obtencin de sangre y sus derivados, se identificar a la
Universidad, la Facultad, la carrera, asignatura e integrantes. Recuerden que
para cada video se utilizarn los implementos de proteccin personal.
https://www.youtube.com/watch?v=d03aOjPAMZs&feature=youtu.be
- 19 -
9. CLCULOS Y RESULTADOS
MUESTRA N APELLIDOS Y TIEMPO DE SUERO PLASMA
NOMBRES CUAGULACION
DEL (minutos)
PACIENTE
Color: Rojizo Color: amarillo
1.1 Mora Emilia 10 Olor: Inodoro Olor : Inodoro
EM Aspecto: Aspecto:
Trasparente Transparente
APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIN Y
MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: JARAMILLO ANGGIE
OBSERVACIONES: Destruccin de los hemates o glbulos rojos de la sangre que va
acompaada de liberacin de hemoglobina.
- 20 -
APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIN Y
MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: MORA EMILIA
- 21 -
APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIN Y
MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: RAMOS SHAYRA
10. OBSERVACIONES
En el momento de realizar la prctica se pudo observar lo siguiente:
- En las muestras 1.1 y 1.3 que se le realizaron a los estudiantes: Mora Emilia y Paredes
Valeria respectivamente, luego de los 10 minutos de centrifugacin correspondiente a
cada una de estas se present en el suero de los especmenes un color rojizo
manifestando la ruptura de los hemates por la liberacin de la hemoglobina en el
mismo, a este fenmeno se lo denomina hemolisis, y se produce por el manejo brusco
de la muestra sangunea obtenida.
- El hierro es uno de los minerales que se encuentran presente en la hemoglobina,
participa en la oxigenacin de la sangre, adems interviene en la eliminacin de dixido
de carbono. En todas las muestras sanguneas obtenidas de nuestros compaeros de
grupo observamos que estas eran inodoras, la razn primordial por la que no presentan
- 22 -
olor es porque la cantidad de sangre que se obtuvo pues fue escasa; pese a la gran
cantidad de hierro presente en la misma.
- En las muestras sanguneas obtenidas despus de la centrifugacin en los tubos con
anticoagulantes se diferencian claramente dos colores el rojo en la parte inferior que es
donde se encuentran los eritrocitos mientras que en la parte superior hallamos una
coloracin amarillenta a la que le corresponde el nombre del plasma. El plasma posee
en un 91% agua y el resto se debe a los electrolitos, protenas, enzimas, aminocidos,
glcidos, lpidos, hormonas y urea.
11. CONCLUSIONES
12. RECOMENDACIONES
- 23 -
A) Al inicio y al final de cada prctica es importante desinfectar el rea de trabajo.
B) Utilizar los equipos de proteccin, como guantes, mandil, gorra entre otros.
C) Mantener la higiene personal ya sea de manos o en otras partes cutneas.
D) Para la extraccin de muestras sangunea es importante tener en cuenta que el
torniquete no debe estar ms de dos minutos ejerciendo presin en el brazo.
E) El recipiente de desechos corto punzantes siempre debe estar a nuestro alcance,
se debe utilizar la tcnica de pescar para cubrir las ajugas utilizadas evitando
ejercer el contacto directo con las mismas.
F) Al momento de utilizar la centrifuga se debe equilibrar el peso diagonalmente
ya que si no se realiza esto los tubos se pueden romper daando las muestras.
G) El bisel de la jeringa debe ir hacia arriba y aflojar el torniquete en un tiempo
aproximado de 2 minutos.
13. BIBLIOGRAFIA
- 24 -
Videos
https://www.youtube.com/watch?v=pMYGzqZAl9Y
https://www.youtube.com/watch?v=ky46bpApJCQ
https://www.youtube.com/watch?v=cdo2mgoUD4Y
- 25 -