TSI Agar

Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la

fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.
Resultados

1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la

glucosa.
2-Pico ácido/fondo ácido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa,
lactosa y/o sacarosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de
azúcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo
produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce ácido sulfhídrico .

Microorganismo Pico/Fondo Producción de gas Producción deácido

sulfhídrico
E. coli ATCC 25922 A/A + -
K. pneumoniae ATCC 700603 A/A + -
P. mirabilis ATCC 43071 K/A + +
S. typhimurium ATCC 14028 K/A - +
S. enteritidis ATCC 13076 K/A + +
S. flexneri ATCC 12022 K/A - -
P. aeruginosa ATCC 27853 K/K - -

A: ácido
K: alcalino

MIO Medio.
Medio usado para la identificación de Enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de
ornitina decarboxilasa y producción de indol.

Resultados

1-Movilidad:
-Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas allá de la línea de siembra.
-Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siembra.
2-Ornitina decarboxilasa:
-Resultado positivo: color púrpura.
-Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violáceo en la
superficie del medio.
3-Prueba del indol:
La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de
ornitina.
-Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador.
-Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.

Microorganismo Crecimiento Movilidad Indol Ornitina

decarboxilasa
E. coli ATCC 25922 Bueno + + +
K. pneumoniae ATCC 700603 Bueno - - -
P. mirabilis ATCC 43071 Bueno + - +
Simmons Citrato Agar
Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato
como única fuente de carbono y energía.

Resultados

-Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.

-Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no
hay cambio de color.

Microorganismo Citrato permeasa Color del medio

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Positivo Azul
S. typhimurium ATCC 14028 Positivo Azul
E. coli ATCC 25922 Negativo Verde
S. flexneri ATCC 12022 Negativo Verde

Lisina Hierro Agar.(LIA)

Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente Salmonella spp.,
basado en la decarboxilación / desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.

Resultados

1- Decarboxilación de la lisina:
-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.
-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.
2-Desaminación de la lisina:
Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y alguna cepas
de Morganella spp.
3-Producción de ácido sulfhídrico:
-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo)

Color en el pico de Color en la base Ennegrecimiento del

Microorganismos
flauta del tubo medio
Proteus mirabilis ATCC 43071 Rojo Amarillo Negativo
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Púrpura Púrpura Positivo
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Púrpura Púrpura Positivo
Providencia spp. Rojo Amarillo Negativo
Citrobacter freundii Púrpura Amarillo Positivo
Morganella spp.* Rojo Amarillo Negativo
Edwarsiella spp. Púrpura Púrpura Positivo
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Púrpura Púrpura Negativo
Escherichia coli ATCC 25922 Púrpura Púrpura Negativo

*Algunas especies de Morganella spp., pueden desaminar la lisina.

SIM Medio
Es un medio semisólido destinado a verificar la movilidad, producción de indol y de sulfuro de
hidrógeno en un mismo tubo.
Es útil para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae.
Resultados
Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas allá de la línea de siembra.
Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovac´s o de
Erlich.
Cepas indol negativas: sin cambio de color.

Microorganismo Movilidad Indol Producción de ácido

sulfhídrico
E. coli ATCC 25922 + + -
K. pneumoniae ATCC 700603 - - -
P. mirabilis ATCC 43071 + - +
S. typhimurium ATCC 14028 + - +
S. enteritidis ATCC 13076 + - +
S. flexneri ATCC 12022 - - -

Limitaciones
-En las bacterias aerobias estrictas, que sólo crecen en superficie, la movilidad puede ser difícil
de observar.
-Algunas bacterias productoras de melanina como M. morganii, pueden dar un color parduzco,
que no debe confundirse con el color negro debido a la producción de ácido sulfhídrico.

Ureasa Medio para la prueba

Medio utilizado para la identificación de microorganismos, en base a la actividad ureásica.
Es particularmente útil para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia
Enterobacteriaceae.
Resultados

Microorganismo Actividad ureásica Color del medio

Proteus mirabilis ATCC 43071 Positiva Rojo-rosado
Escherichia coli ATCC 25922 Negativa Amarillo
S. flexneri ATCC 12022 Negativa Amarillo
S. typhimurium ATCC 14028 Negativa Amarillo

Limitaciones
-La gran capacidad buffer de este medio de cultivo, puede enmascarar la actividad ureásica en
bacterias que hidrolizan lentamente la urea.
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone facilmente .