Cuantificación de azúcares totales

Método de Antrona (Witham et al., 1971)

Pesar 1 g de material vegetal fresco y cortar en trozos pequeños, colocar en matraz

Erlenmeyer de 125 mL y agregar 40 mL de etanol al 80%, hervir de 20 a 30 minutos y filtrar.
Evaporar el sobrenadante en baño maría cuidando que no se caramelice (Ortega y Rodríguez,
1979). Puede evaporarse directamente en parrilla.
Disolver lo evaporado en 20 mL de agua destilada, esto depende del material con que se
trabaje, podrían ser 50 mL en fruto o 20 mL si son hojas.
Tomar 1 mL de la muestra, agregar 2 mL de agua destilada para ajustar a 3 mL.
Agregar 6 mL de Antrona-ácido sulfúrico, teniendo los tubos en hielo, agregando Antrona
de poco a poco por las paredes. Dejar en hielo hasta que se enfríe.
Calentar el contenido del tubo en baño maría durante 3 minutos. El baño maría debe estar en
ebullición.
Sacar los tubos y ponerlos en hielo.
Leer absorbancia a 600 nm.
El blanco es 3 mL de agua destilada más 6 mL de Antrona-ácido sulfúrico, el cual debe llevar
el mismo procedimiento de las muestras.
Preparación de reactivos:
Antrona-ácido sulfúrico: pesar 0.4 g de Antrona, disolver en 75 mL de ácido sulfúrico
concentrado en baño de hielo. Se afora a 100 mL, se guarda en envase ámbar y se almacena
en refrigeración hasta su uso, que no sobrepase las 24 horas.
Solución de Glucosa: pesar 15 mg de D-glucosa anhidra, se afora a 100 mL con agua
destilada.

Witham, H. F.; Blaydes, D. F. and Devlin, R. M. 1971. Experiments in Plant Physiology.

Van Nostrand Reinhold. C. New York, USA. 245 p.
Southgate, D. A. T. 1976. Determination of carbohydrates. Applied Science Publishers, Ltd.
London.