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UNIVERSIDAD ANDINA DEL CUSCO

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ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

MANUAL DE PRÁCTICAS DE BIOLOGIA I

Blga. ANA ISABEL OVIEDO VITORINO

CUSCO – PERU

2018

PRÁCTICA N˚1
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO Y BIOSEGURIDAD

1
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I. FUNDAMENTO TEÓRICO
NORMAS DE USO DEL LABORATORIO

Para el desarrollo de las prácticas es conveniente tener en cuenta algunas normas elementales
que deben ser observadas con toda escrupulosidad.

I. PARA INGRESAR AL LABORATORIO.

1. Porte el manual de prácticas de laboratorio.


2. Revise los antecedentes conceptuales y el protocolo de trabajo experimental
correspondiente a la sesión previa al inicio de la misma.
3. Llegue puntualmente a la sesión. Es sumamente importante aprovechar el tiempo
disponible para el trabajo en el laboratorio.
4. Use zapatos cerrados.
5. Retírese todos los accesorios personales que puedan comprender riesgos de accidentes
mecánicos, químicos o por fuego, como son anillos, pulseras, collares, etc.
6. Si tiene cabello largo, recójalo y colóquese el gorro.
7. Mantenga las uñas recortadas y limpias.
8. Use la bata cerrada durante toda la sesión, guantes y mascarilla.
9. Recoja con prontitud el material y los equipos para el trabajo correspondiente. Se debe
revisar el estado de la mesa de trabajo, del material y de los equipos recibidos. Reporte
cualquier falla o irregularidad al técnico responsable.
10. Cuente con el material de uso personal que se enlista abajo para cada sesión
experimental.

II. PARA PERMANECER EN EL LABORATORIO.

1. Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su material.


2. Siga las medidas de seguridad necesarias con los equipos, materiales y reactivos de la
sesión para prevenir accidentes. 2-4
3. Tome sólo las cantidades de reactivos necesarios para el trabajo experimental y colóquelas
en material de vidrio limpio y seco. Etiquete y rotule todos los recipientes donde coloque
reactivos, productos y residuos.
4. Mantenga sólo el material requerido para la sesión sobre la mesa de trabajo.. Los demás
objetos personales o innecesarios deben guardarse o colocarse lejos del área detrabajo.
5. No ingiera alimentos ni bebidas, ni fume en el interior del laboratorio, a menos que lo
indique el protocolo.
6. Mantener los celulares apagados o en vibrador para no interrumpir la práctica.
7. No reciba visitas en el interior del laboratorio. Evite las distracciones. Así puede evitar
accidentes.
8. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el
que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulación.
9. No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin
consultar con el profesor.
10. No tocar con las manos y menos con la boca los productos químicos.
11. Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) deben mantenerse alejados de las

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llamas de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se hará
al baño María, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe
tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.
12. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la propipeta.
13. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen líquidos debe evitarse la
ebullición violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de ensayo se
acercará a la llama inclinada y procurando que ésta actúe sobre la mitad superior del
contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullición rápida, se retirará, acercándolo
nuevamente a los pocos segundos y retirándolo otra vez al producirse una nueva ebullición,
realizando así un calentamiento intermitente. En cualquier caso, se evitará dirigir la boca del
tubo hacia la cara o hacia otra persona.
14. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo después de haberlos
calentado con el fin de evitar roturas.
15. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se
engrasen.

III. AL CONCLUIR LA SESIÓN.

1. Disponga de los residuos y de los reactivos no utilizados de la manera indicada por las
normas. Consulte la Lista de Seguridad del Laboratorio. Los reactivos no usados no se
devuelven a los frascos. Los frascos de reactivos puros deben regresarse al almacén.
2. Lave el material y devuélvalo limpio y seco. Retire las etiquetas de los materiales que
contenían reactivos, productos o residuos. Realice la entrega en orden y esperando su
turno.
3. Deje limpio y seco el lugar de trabajo. Coloque los bancos junto a las mesas o invertidos
sobre éstas.
4. Antes de salir del laboratorio retírese la bata y demás equipo de seguridad y guárdelo en
una bolsa de plástico exclusiva para este uso. La bata se deberá lavar al final de cada
sesión.

MATERIAL PERSONAL COTIDIANO OBLIGATORIO.

1. Bata larga (a la rodilla) de algodón 100% y manga larga, con botones. Se recomienda que
sea blanca.
2. Guantes de látex descartables.
3. Escobillones de varios tamaños.
4. Detergente
5. Encendedor para mechero y/o cerillos.
6. Franela de algodón limpia.
7. Cinta para rotular (masking tape) de 1.27 cm de ancho.
8. Toallas absorbentes de papel.
9. Marcador indeleble, preferentemente negro.
10. Tijeras rectas.
11. Material de aseo personal.
12. Rollo de papel higiénico.
13. Paños de tela para limpiar la mesa de trabajo.

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PRACTICA N˚2
USO ADECUADO DE LOS MATERIALES DE LABORATORIO

I. FUNDAMENTO TEÓRICO

Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio
resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y
vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilatación, teniendo una gran
aplicación en la fabricación de materiales de laboratorio, uno de los más conocidos es el vidrio
PYREX. Así como los elaborados de distintos metales pesados como platino, mercurio, aluminio,
cobre que les otorgan características como buenos conductores del calor o porque al medio
ambiente son muy manejables sin alterar su composición.

Clasificación de los materiales del laboratorio, de acuerdo a los materiales con que han sido
realizados:

De vidrio: La mayoría de los materiales del laboratorio son de vidrio, debido a su característica de
ser transparentes, fácil de limpiar de gran coeficiente de conducción térmica.
De metal: La mayoría de estos materiales se emplean para sujeción de otros materiales.
De porcelana: Otro material utilizado con frecuencia en la elaboración de materiales de
laboratorio es la porcelana químicamente pura, su nombre químico es silicato de aluminio
hidratado.
III. OBJETIVO

- Reconocimiento de los materiales necesarios en un laboratorio de biología.


- Manejar apropiadamente cada uno de los materiales utilizados en un laboratorio biología.

IV. MATERIALES Y EQUIPOS

Material de Vidrio:
- Vaso precipitado
- Probeta
- Bureta
- Morteros,
- Demás que el laboratorio disponga.

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Material complementario:
- Gradilla
- Bombillas de jebe
- Pinzas, etc.

Equipos:
Los disponibles por el laboratorio.

V. METODOLOGÍA

Basada en la observación y uso directo.

VI. PROCEDIMIENTO

Los participantes formaran grupos de trabajo de no más de 4 personas.

A cada grupo se le asignara un juego de materiales señalados en el punto anterior.

Deberánobservar sus características yanotarlas diferenciasexistente entre cada una de


ellas, según su uso y finalidad.

MATERIAL NOMBRE USO CARACTERÍSTICAS


DE LABORATORIO FISICAS

Vaso precipitado Un vaso de Generalmente de vidrio


precipitados o vaso pero también hay de
de precipitado es un plástico y metal.
recipiente cilíndrico de
vidrio fino que se
utiliza muy
comúnmente en
el laboratorio, sobre
todo, para preparar o
calentar sustancias y
traspasar líquidos.

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Es un recipiente de
kitasato De vidrio
forma como la del
matraz Erlenmeyer,
que presenta un
vástago en la parte
superior. No presenta
graduación.

Se emplea para llevar


a cabo reacciones con
producción de gases y
sobre todo para hacer
filtraciones a vacío.

Fiola Es un recipiente de
Material de vidrio
vidrio que se utiliza
sobre todo para
contener y medir
líquidos.
Se emplean
en operaciones de an
álisis químico
cuantitativo, para
preparar soluciones d
e concentraciones
definidas.

Balón de base plana Está diseñado para


calentamiento
uniforme, y se
produce con distintos De vidrio
grosores de vidrio
para diferentes usos.

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Balón de destilacion

Es un recipiente de
Vaso precipitado
vidrio que se utiliza
sobre todo para Generalmente de vidrio
contener y medir pero también hay de
líquidos. plástico y metal.
Se emplean
en operaciones de an
álisis químico
cuantitativo, para
preparar soluciones d
e concentraciones
definidas.

Bureta Consiste en un tubo de De vidrio


vidrio graduado en ml
o en 0.1 ml
dependiendo de su
capacidad y se utilizan
para la
Medida exacta
devolúmenes. En
suextremo inferior
dispone de una llave
o válvula que permite
controlar la salida del
líquido. Se puede
verter el líquido
mediante goteo o con
caudal constante.

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Probeta milimetrada
Es un instrumento
De vidrio
volumétrico, que
permite medir
volúmenes
considerables con un
ligero grado
de inexactitud. Sirve
para contener líquidos

Pipetas Es un
instrumento volumétri
co de laboratorio que
permite medir De vidrio
la alícuota de líquido
con bastante
precisión.

Embudo de vidrio El embudo es un Pude ser de vidrio,


instrumento empleado
para
canalizar líquidos y m
ateriales sólidos gran
ulares en recipientes
con bocas estrechas.
Es usado
principalmente en
cocinas, laboratorios,
actividades
de construcción, indus
tria, etc.

Lamina porta objetos Es una fina placa de De vidrio.


cristal sobre el cual se
disponen objetos para
su
examen microscópico.

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Lamina cubre Cubren y protegen las De vidrio


objetos preparaciones u
objetos que se
observarán al
microscopio e impiden
que se desprendan o
muevan al ser
observados.

Placas petri En ella se cultivan


microorganismos,
como hongos o
bacterias; también
puede usarse para
seleccionar muestras
de animales.

Bagueta Varilla de Agitar sustancias


vidrio

Tubos de ensayo Es un tubo cilíndrico De vidrio


pequeño utilizado en
la contención de
muestras líquidas y
también para
calentarla , etc.

gradilla Es utilizada para De plástico, madera,


sostener y almacenar metal
gran cantidad
de tubos de ensayo,
de todos los diámetros
y formas.

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Rejillade asbesto Es la encargada de De metal


repartir
la temperatura de
manera uniforme,
cuando se calienta
con un mechero. Para
esto se usa un trípode
de laboratorio, ya que
actúa como un
sostenedor a la hora
de experimentar.

Trípode. Se utiliza cuando no De metal


se tiene el soporte
universal para
sostener objetos con
firmeza. Es
ampliamente utilizado
en varios
experimentos. La
finalidad que cumple
en el laboratorio es
solo una, ya que su
principal uso es como
herramienta de sostén
a fin de evitar el
movimiento. Sobre la
plataforma del trípode
se coloca una malla
metálica para que la
llama no dé
directamente sobre el
vidrio y se difunda
mejor el calor

Mechero de bunsen Es De metal


un instrumento utiliza
do en laboratorios
científicos para
calentar o
esterilizar muestras
o reactivos químicos.

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Mortero y pilón Se usa para moler o Porcelana o vidrio


reducir el tamaño de
las sustancias.

espatula

Escobilla de cerdas Según el diámetro se De metal


utilizan luego de
los experimentos de fí
sica, química o prueb
as de laboratorio para
lavar: tubos de
ensayo, buretas,
vasos de precipitado,
erlenmeyer, etc...

pizeta para contener algún De plástico


solvente, por lo
general agua destilad
a o desmineralizada,
aunque también
solventes orgánicos
como etanol, metanol,
hexano, etc.

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Pinza de madera Esta herramienta De madera


sirve para sujetar los
tubos de ensayos,
mientras se calientan
o se trabajan con
ellos.

EQUIPOS DE NOMBRE USO CARACTERISTICAS


LABORATORIO
Hace visibles al ojo
humano objetos
diminutos. Es de suma
importancia en un
laboratorio. Con él se
han hecho avances
notables en medicina,
química, biología,
etcétera.

balanza Con ella se conoce el


peso de objetos

Cabina de flujo para eliminación de


laminar partículas en el aire,
especialmente de
posibles
contaminantes
(bacterias,
levaduras,...)

VII. RESULTADO Y DISCUSIÓN

Los materiales que no se encuentren descritos en la presente deberán ser graficados y así
mismodeberánexplicarse detalladamentesuusoyfinalidadenlaslaboresdepráctica.

VIII. CONCLUSIÓN Y/O RECOMENDACIONES

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IX. CUESTIONARIO:

1. Definir: agentes biológicos, peligro, daño, riesgo biológico y no biológicos, desinfección,


limpieza, Esterilización, Bioseguridad, desinfección, limpieza, Contaminación, Niveles de
Bioseguridad.

¿Qué diferencia existe entre higiene y desinfección?

2. ¿Qué son, cómo funcionan y para qué sirven las Cabinas de Seguridad Biológica?
3. Según la norma peruana que señales de bioseguridad, como los clasifica y cuales son
obligatorias en un laboratorio . Esquematice los más importantes
4. ¿Cómo seclasificanlos AgentesBiológicossegúnsu riesgo? Dequéotramanera seclasifican?
5. Explique brevemente la importanciadelaesterilizacióndematerialen un laboratorioy
fundamente surespuesta
6. Basados en la norma peruana ¿Cómo se debe llevar a cabo el manejo de residuos
líquidos? y ¿Como se debe llevar a cabo el manejo de residuos sólidos?

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PRACTICA N° 3
MICROSCOPIO ÓPTICO
El Microscopio Óptico, es un instrumento que tiene más de una lente de objetivo. Empleado para
examinar objetos transparentes, o laminas muy finas. Se utiliza para poder ampliar o aumentar las
imágenes de objetos no visibles a simple vista.
Un microscopio es un aditamento mecánico creado en 1590 por Zacharias Janssen y consiste en el
acomododedoslentescóncavosquepermitenver lascosaspequeñasqueexisten yasíes
utilizado en términos médicos en 1665 cuandoWilliam Harvey lo usa para ver los capilares
sanguíneos.
En forma inmediata, fue utilizado por los científicos para poder ver los seres microscópicos,
influenciando directamente sobre la salud y sobre la industria, llegando hasta nuestros días.
La estructura y funcionamiento del microscopio es por refracción física de la luz. Los más modernos
utilizan componentes electrónicos y piezas más sofisticadas para obtener una resolución más clara.

PARA QUÉ SIRVE EL MICROSCOPIO.

Por su estructura y funciones, el microscopio es usado en infinidad de campos, desde la medicina,


que es en donde se ha destacado, como en la industria, botánica, farmacéutica, en la electrónica y
la cibernética, donde realizan estudios para crear nuevos micro componentes como los
procesadores de las computadoras actuales.
Fue una herramienta indispensable en la elaboración de las
vacunas, con este dispositivo, se observaron los diminutos
seresquecomponíanelvirus,loquelollevóadesarrollar
las técnicas de la vacuna, y de igual manera lo uso para
pasteurizar el vino y la cerveza.
Posteriormente se estudiaron la tuberculosis, y los hongos,
aprendiendo los beneficios y daños que producen.
Los microscopios electrónicos, funcionan de una manera diferente, por medio de la reflexión de
electrones, que rebotan y forman una imagen más elevada de la imagen. Cuando están bien
manejados pueden llegar a aumentar hasta mil veces la imagen.
El microscopio óptico está formado por dos partes muy importantes:
 PARTE OPTICA
 PARTE MECANICA

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MICROSCOPIO CX31

ORGANISMOS UNICELULARES
El Reino Protista, definido en elsistema de clasificación de Haeckel (1866) comprende a las
Bacterias, Hongos, Algas Protozoos.

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El término microorganismo comprende además de los grupos anteriores a los Virus, que son
considerados como entidades microscópicas no vivas.
Todosestos organismos presentan diversas formas y tamaños, pero se caracterizan porque para
observarlos y estudiarlos como organismos individuales, generalmente se requiere el uso del
microscopio. Losmicroorganismos seencuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza. Sus
hábitatsnaturales extremadamente diversos. Prácticamente los encontramos en todas partes: en
elaguaquebebemos,enelairequerespiramos,enelsuelo, enlosalimentosqueingerimos,
algunos pueden vivir en el interior de plantas y animales, sobre nuestra piel, y en general sobre
cualquiermaterialquelesproporciónenmateriasnutritivas ylascondicionesdehumedady
temperatura sean favorables para su desarrollo y multiplicación.
Haymuchos hábitats donde,debido a las extremas condicionesfísicas o químicas,no se encuentran
organismos superiores, sin embargo, en ellos pueden existir microorganismos que en algunos
casos, incluso crecen mejor allí.
MICROORGANISMOS QUE SE PUEDEN ENCONTRAR EN AGUA ESTANCADA:

PARAMECIO
Los paramecios (género Paramecium) son protozoos ciliados con forma ovalada, habituales en
aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. Son
probablemente los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por
la Ciencia. El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas 0.5 milímetros.

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Descargado por Giovanni Jesus Solorzano LLasa (giovanni974256415@gmail.com)


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Se trata de un protozoo muy común que se encuentra en estanques de agua dulce, acequias,
arroyos, ríos, lagos y embalses. En general su presencia es abundante en aguas estancadas que
contienen materia orgánica en descomposición y que, por tanto, son ricas en sustancias nutritivas.

AMEBA

Ameba (o Amiba) es un protista unicelular del género Amoeba. Es un protozoo caracterizado por
su forma cambiante, puesto que carece de pared celular, y por su movimiento ameboide a base de
pseudópodos, que también usa para capturar alimentos a través del proceso llamado fagocitosis.
Las especies de este género viven libres en agua o tierra, mientras que las de otros géneros
relacionados parasitan el intestino del hombre o de los animales.
La ameba se encuentra típicamente en vegetación en descomposición. Sin embargo, debido a la
facilidad con la que se obtienen, pueden guardarse en laboratorios, ya que son objeto común de
estudio.

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GUSANILLO COBRA (nematodos)

Casi todos los nematodos son gusanos de cuerpo muy pequeño afilado y alargado, pero a pesar
de su aparente delicadeza son muy resistentes pues, aunque no lo parezca, están vestidos con
una coraza flexible, transparente y casi siempre lisa.

Los nematodos de vida libre se encuentran tanto en agua dulce como salada y pueden vivir
prácticamente a cualquier profundidad, también son frecuentes en los musgos o entre sustancias
en descomposición. Cuando las condiciones se vuelven desfavorables, fundamentalmente en
tiempo de sequía, los nematodos se pueden enquistar y sobrevivir durante largas temporadas
hasta que lleguen mejores tiempos.

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EUGLENA

Los euglénidos (Euglenoidea o Euglenophyta) son uno de los más conocidos grupos de
flagelados, comúnmente presentes en agua dulce, en especial cuando ésta es rica en materia
orgánica. Sólo unos pocos miembros habitan aguas marinas o son endosimbiontes. Muchos
euglénidos poseen cloroplastos y producen energía mediante fotosíntesis, mientras que otros se
alimentan por fagocitosis o por pinocitosis. Se los ubica dentro del fila Euglenozoa, y su estructura
celular es típica de dicho grupo.

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AELOS

Son pocas las especies de Aeolosoma y pueden vivir tanto en aguas estancadas de charcos,
lagunas... e incluso acuarios, como en las aguas corrientes de ríos y arroyos. La coloración de sus
lunares, así como el número de quetas que presenta cada penacho, constituyen dos de los
caracteres que mejor permiten diferenciar a las distintas especies, así, mientras Aeolosoma
hemprechi presenta estos lunares -que corresponden a gotas de aceite- de color anaranjado o
rojizo, en otra especie muy común, Aelosoma variegatum suelen ser amarillas o azuladas.

COLURELLA

El rotífero Colurella no para de girar y apoyando los dos finos dedos sobre un minúsculo
grumo de sedimento mantiene un equilibrio que parece imposible. Es un número de circo
acuático y así, dando vueltas, va filtrando el agua recogiendo de ella, algas, bacterias y otros
pequeños seres casi invisibles que van rellenando poco a poco su interior.

El rotífero Colurella vive encerrado en un caparazón transparente, lateralmente comprimido,


como si se tratase de las valvas de un molusco bivalvo, y sobre su caparazón, asoma la
cabeza, protegida
también por un escudo cefálico, como un flequillo en forma de gancho que puede retraerse
para dejar al descubierto los cilios de su corona.

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STENTOR IGNEUS

Los Stentor, a veces llamados animálculos trompeta son un género de organismos unicelulares
filtradores, heterótrofos protistas ciliados, representativo de la clase Heterotrichea. Normalmente
tienen forma de cuerno y llegan a medir 2 milímetros, encontrándose entre los mayores
organismos unicelulares.

EXPERIENCIA CON EL MICROSCOPIO:


1º- Muestra:

Antes de hacer nada, tuvimos que recoger muestras de agua estancada, cuanto más “sucia” esté
es mejor, ya que, hay probabilidades de que haya más microorganismos, gracias a nuestra
muestra pudimos observar varios microorganismos, he incluso pudimos perseguirlos por la
muestra, con el microscopio

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Aquí podemos observar la muestra con la que trabajamos

2- Preparación:

Una vez seleccionada la muestra se procede a coger una gotas, con el cuentagotas. Se echa
una gota en el cristal que se coloca en el microscopio, y encima se coloca el otro cristal para
poder expander la gota y poder ver mejor los microorganismos.

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A la izquierda se observan los dos cristales con la muestra en medio, y a la derecha el


cuentagotas
3- Observación por el microscopio:

Ya que tenemos la muestra preparada, solo falta mirar por el objetivo para ver si hay algún
microorganismo

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Cuestionario

1.- Para qué sirve el microscopio óptico.

S.- Que expectativas tienes sobre la práctica hecha en el laboratorio.

3.- Dibuja lo que has visto en el microscopio en laboratorio


4.- Dibuja un microscopio CX31 y indica sus partes.

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PRACTICA N⁰ 4

1.- IDENTIFICACIÓN DE LA GLUCOSA

La Glucosa es un monosacárido que posee carácter reductor. Es capaz de reducir al Licor de


Fehling que contiene una sal cúprica soluble (de color azul) a óxido cuproso dando un precipitado
rojo, realizándose la reacción en medio alcalino y en caliente.

El reactivo de Fehling, también conocido como Licor de Fehling, es una disolución descubierta por
el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de
azúcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar
derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa.

La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.

• La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso

MATERIAL DE LABORATORIO.
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas, Pinzas para tubo de ensayo, espátula, mechero de bunsen.

REACTVOS BIOLOGICOS: Glucosa, Uva, Miel de abeja.

REACTIVOS QUÍMICOS
Solución de Fehling A. Solución de Fehling B. (o reactivo Benedict) Glucosa, Uva, Miel de
abeja.

PROCEDIMIENTO
1.- Disolver un poco de Glucosa en unos 3 ml de agua en un tubo de ensayo.

¿Cuáles son las características físicas que observas?

2.- Añadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).

¿ Que color presenta la mezcla?

3.- Calienta el tubo de ensayo a la llama del mechero ( con cuidado).

¿ Que color presenta la mezcla?

*********** *********** *********** *********** ***********

4.- Coloca el zumo de uva en un tubo de ensayo.

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¿Cuáles son las características físicas que observas?

5.- Añadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).

¿Qué color presenta la mezcla?

6.- Calienta el tubo de ensayo a la llama del mechero ( con cuidado).

¿ Que color presenta la mezcla?

*********** *********** *********** *********** ***********

7.- Coloca miel de abeja y 1.5 ml de agua destilada en un tubo de ensayo.

¿Cuáles son las características físicas que observas?

8.- Añadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).

¿ Que color presenta la mezcla?

9.- Calienta el tubo de ensayo a la llama del mechero ( con cuidado).

¿Quecolorpresentalamezcla?

Elabore un dibujo.

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Descargado por Giovanni Jesus Solorzano LLasa (giovanni974256415@gmail.com)


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2.- IDENTIFICACIÓN DE LA MOSACARIDOS

El reactivo de Fehling, también conocido como Licor de Fehling, es una disolución descubierta por
el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de
azúcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar
derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa.

MATERIAL DE LABORATORIO.
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas. Pinzas para tubo de ensayo. Espátula. Mechero de
laboratorio.

REACTIVOS BIOLOGICOS: Glucosa Miel karo, orina, edulcorante para diabético.

REACTIVOS QUÍMICOS
Solución de Fehling A. Solución de Fehling B. (o reactivo Benedict) .

PROCEDIMIENTO
Numere 4 tubos de ensayo y agregue muestras de glucosa, orina, edulcorante para los diabéticos,
miel karo respectivamente.
Agregue 1.5 ml de agua destilada excepto al tubo Nº 2.
Agitar los tubos hasta homogenizara bien.
Añadir 2ml de reactivo Fehling A y B.

Colocar todos los tubos a baño maria (el cual debe estar a ebullición) en un vaso de precipitados y
hervir 3 minutos.
¿Cuales son las propiedades físicas antes de agregar el reactivo Fehling A y B
Tubo1
Tubo2
Tubo3
Tubo4
¿Qué color tienen las muestras después de agregar el reactivo Fehling A y B ?
Tubo1
Tubo2
Tubo3
Tubo4
¿Quécolortienen lasmuestras despuésdecalentar?
Tubo1

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Tubo2
Tubo3
Tubo4
¿Quésignificaqueexistapresenciadeglucosaenlaorina?

Elabore un dibujo.

3.- IDENTIFICACIÓN DE LA SACAROSA

La Sacarosa es un Disacárido no reductor y, por tanto, la reacción con la solución de Fehling es


negativa. Pero si rompemos su molécula (hacemos una hidrólisis) en presencia de ácido Clorhídrico
y en caliente, da lugar a los monosacáridos, glucosa y fructosa, y entonces aparece el carácter
reductor.

MATERIAL BIOLÓGICO : Un sobrecito de azúcar .

MATERIAL DE LABORATORIO:
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas. Pinzas de madera. Probeta o matraz pequeño. Mechero de
laboratorio.

REACTIVOS QUÍMICOS
Solución de Fehling A. Solución de Fehling B. Ácido Clorhídrico.

PROCEDIMIENTO
1º).- Pon 5 ml de agua en un tubo de ensayo y disuelve un poco del sobrecito de azúcar.
Realiza la prueba de identificación de glucosa ( debe salir negativa ).

2º)- Pon 5 ml de agua en un tubo de ensayo y disuelve un poco de azúcar del sobrecito. Añade
1 ml de ácido Clorhídrico diluido al 10% y calienta el tubo a la llama del mechero durante unos tres
minutos. Deja enfriar el tubo y añade 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B; vuelve a calentar el tubo
y observa lo que ocurre.

¿ Cual es la formula de la sacarosa?

¿De donde se obtiene principalmente la sacarosa?

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 28


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¿Cuál son los inconvenientes de un consumo excesivo de azúcar?

¿Qué productos conoces que se elaboren con sacarosa?

¿Qué enfermedades se pueden producir por el consumo excesivo de azúcar?

1.-

2.-

3.-

4.-

Elabore un dibujo de la práctica.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 29


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4.- IDENTIFICACIÓN DEL ALMIDÓN

El Almidón es un polisacárido constituido por numerosas moléculas de Glucosa. Carece de


carácter reductor, pero podemos identificarlo mediante la tinción con Lugol.

El lugol es una disolución de yodo y yoduro potásico en agua . Es un detector específico del
almidón con el que forma complejos coloreados de color azul oscuro .
MATERIAL BIOLÓGICO: Una papa cruda, arroz, garbanzos, etc. Almidón soluble.

MATERIAL DE LABORATORIO: Mortero. Probetas. Tubos de ensayo. Gradilla. Espátula.


Portaobjetos. Cubreobjetos. Microscopio. Navaja (Cutex).

REACTIVOS QUÍMICOS:
Solución de LUGOL (Solución acuosa de Yodo en Yoduro potásico); puede sustituirse por
Tintura de Yodo.

PROCEDIMIENTO:
Se corta en trocitos la papa una vez pelada y se tritura en el mortero, o bien, se raspa con
algo cortante (p.e. un cutex) su superficie sin piel.

Se toma una parte pequeña y se deposita en un tubo de ensayo con agua, agitándola. Se añade
solución de Lugol (probar con varias disoluciones cada vez más diluidas), y si hay almidón se teñirá
de color azul oscuro (dependiendo de lo diluido que esté la solución de Lugol).

lo que se ve). Hacer lo mismo, pero añadiendo unas gotas de Lugol (probar con varias
disoluciones).

¿Qué alimentos contienen mayor cantidad de almidón?

¿Qué inconvenientes tiene el exceso de almidón en la dieta?

(Dibujar lo que se ve en el microscopio).

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 30


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PRACTICA N⁰ 5

CONSTITUYENTES ORGÁNICOS DE LA MATERIA VIVA CARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS

INTRODUCCIÓN

Los componentes químicos de la materia viva se clasifican en inorgánicos (agua e iones


minerales) y orgánicos (carbohidratos y proteínas, ácidos nucleídos, lípidos, etc.) el protoplasma
de una célula vegetal o animal contiene de 75 – 85% de agua y de 10 – 20% de proteínas, de 2
– 3% de lípidos, 1% de carbohidratos y 1% de materia inorgánica.

Por medio de pruebas químicas es posible identificar la presencia de compuestos químicos de


plantas y animales, algunos son tomados directamente del ambiente y otros son sintetizados a
partir de sustancias minerales.

CARBOHIDRATOS O GLÚCIDOS.

Los carbohidratos son compuestos tenarios constituidos por tres elementos C, H, O y N. los
glúcidos se originan en los organismos vegetales y son la fuente de energía para el
mantenimiento de los organismos animales.

A parte de cumplir función energética, también cumplen función de almacenamiento y es


estructural. Los simpes son los monosacáridos (Azucares simples) como la glucosa, galactosa
y fructosa.

Los monosacáridos pueden combinarse para formar disacáridos entre los mas importantes
están: maltosa, lactosa, sacarosa, así mismo se tiene oligosacáridos como pentosa entre ellas
la ribosa y desoxirribosa, importantes por formar parte de los ácidos nucleídos y polisacáridos
que son cadenas de muchos monosacáridos entre ellos el almidón.

OBJETIVOS

 Determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos en alimentos.

MATERIALES

Material de laboratorio
 Tubos de ensayo
 Gradillas
 Pipetas
 Mechero
 Pinzas de madera
 Vaso precipitado
 Trípode

REACTIVOS BIOLÓGICOS
 Papa, arroz, garbanzo, camote, yuca, maicena,

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 3s


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REACTIVOS QUIMICOS

Solución LUGOL (Solución acuosa de Yodo en Yoduro potásico); puede sustituirse por Tintura de
Yodo.

PROCEDIMIENTO:
Se corta en trocitos la papa una vez pelada y se tritura en el mortero, o bien, se raspa con
algo cortante (p.e. un cutex) su superficie sin piel.

Se toma una parte pequeña y se deposita en un tubo de ensayo con agua, agitándola. Se añade
solución de Lugol (probar con varias disoluciones cada vez más diluidas), y si hay almidón se teñirá
de color azul oscuro (dependiendo de lo diluido que esté la solución de Lugol. Hacer lo mismo, pero
añadiendo unas gotas de Lugol (probar con varias disoluciones).

¿Qué alimentos contienen mayor cantidad de almidón?

¿Qué inconvenientes tiene el exceso de almidón en la dieta?

(Dibujar lo que se ve en el microscopio).

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 32


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LÍPIDOS

Los lípidos forman un grupo de compuestos caracterizados por su relativa insolubilidad en el agua y
su solubilidad en los solventes orgánicos, esta propiedad general de los lípidos y compuestos
relacionados se debe al predominancia de largas cadenas hidrocarbonadas alifáticas o anillos
bencénicos, en muchos lípidos las cadenas pueden estar adheridas a un grupo polar en un extremo,
lo cual las vuelve capaces de unirse al agua por uniones de hidrogeno.

IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS. REACCIÓN DE SAPONIFICACIÓN.

La presencia de un lípido se puede detectar fácilmente por su insolubilidad en agua. Además,


se puede detectar si un lípido es saponificable, mediante la reacción de saponificación, o
formación de jabón.

Losésteresdeácidosgrasossufrenhidrólisis enpresencia deunagentealcalino. Estahidrólisis


conduce a la liberación del alcohol y a la formación de sales de ácido graso o jabones:

CH2 O CO R1 C H 2O H R1C O O -N a

CH O CO R 2 +3NaO H CH O H + R 2C O O - N a

C H 2 O CO R3 C H 2O H R 3C O O - N a

Salessódicasd e
T rig licé rid o G lice rin a ac.grasos(JABÓN)

MATERIAL BIOLOGICO: Aceite comestible

MATERIAL DE LABORATORIO: Un tubo de ensayo, una gradilla, soporte universal, anillo de


hierro, tela con asbesto, baño María, pinzas universales.

REACTIVOS QUÍMICOS:

Hidroxido de sodio al 20%

PROCEDIMIENTO:

1. Añadir aceite (sin pipetearlo) a un tubo de ensayo, hasta una altura de aproximadamente 1 cm.
2. Añadir 2 ml de NaOH al 20% (p/v) en agua.
3. Agitar enérgicamente.
4. Calentar al baño María de 20 a 30 minutos y observar qué ocurre?

¿Cuántas fases observas que se forman en el tubo de ensaye?

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 33


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¿Qué contiene la fase que se encuentra en la parte inferior del tubo de ensayo?

¿Qué contiene la fase que se encuentra en la parte media del tubo de ensayo?

¿Qué contiene la fase que se encuentra en la parte superior del tubo de ensayo?

¿Por qué se da esa disposición de fases?

¿Cómo se prepara la NaOH al 20% en agua?


Elabore un dibujo de la práctica.

Cuestionario

1. Describa las funciones principales de los carbohidratos, ponga ejemplos.

2. ¿Cuál es el mecanismo de unión entre el almidón y el lugol?

3. ¿cuáles son las propiedades de un acido graso?

4. ¿Cuáles son las funciones de los lípidos en los eres vivos?

5. ¿Cuáles son los lípidos que se encuentran formando parte de la membrada celular?

Bibliografía

Incluya la bibliografía de acuerdo a las normas técnicas el sistema APA

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 34


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PRÁCTICA N° 06

CONSTITUYENTES ORGÁNICOS DE LA MATERIA VIVA PROTEÍNAS Y ENZIMAS

INTRODUCCIÓN

PROTEÍNAS
Las proteínasson elementosvitales para los organismos, encontrándose enplantasy animalesen
una proporción elevada. Hay una gran variedad de proteínas y cada una desempeña una función
biológica específica que puede ser de reserva, de sostén, transporte, estructural, etc.
Químicamente las proteínas están constituidas por combinaciones complejas de carbono,
hidrógeno, oxígeno, nitrógeno más otros elementos en menor proporción como son azufre, cobre,
fósforoyhierro. Cuandolaestructuradelaproteínasedesorganiza, sediceque seencuentra
desnaturalizada y eso trae como consecuencia la pérdida de la actividad biológica. La
desnaturalización puede lograrse por medios físicos como el calor o químicos como variación de
pH,observándoseunadisminuciónenlasolubilidadylaformacióndeuncoagulo.Tambiénse
pueden identificar proteínas mediante el uso de sustancias que al ponerse en contacto con ellas,
producen una coloración específica como reacción xantoprotéica en la que al ponerse en contacto
la proteína con el ácido nítrico toma una coloración amarilla en presencia de calor y en frío al
combinarseconunálcaliviraaanaranjadoasimismosetienelareaccióndebiuretenlaquese
agreganhidróxidosódicoysulfatocúpricoalaproteína,elcobresecombinaconellaytomauna
coloración púrpura.
OBJETIVOS:
 Reconocer la presencia de proteínas en la clara de huevo
 Realizar la desnaturalización de proteínas (Ovoalbúmina, lactoglobulinas) por cambios de
Ph y temperatura.

1. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE LA REACCIÓN EL BIURET

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su
identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas,
pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye
al liberarse losaminoácidos.

El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se
coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad
de color depende de la concentración de proteínas.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 35


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MATERIAL BIOLÓGICO: albúmina de huevo

MATERIAL DE LABORATORIO: Tubos de ensayo, gradilla,

REACTIVOS QUÍMICOS: Reactivo de Biuret

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%.

1. Añadir 4-5 gotas de solución de Cu SO4 al 1%.


2. Añadir 3ml de solución de NaOH al 20%.
3. Agitar para que se mezcle bien.
4. Observar los resultados.
5. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de de albúmina sin diluir y repite la operación.

¿Qué coloración da la reacción del Biuret?

¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?

Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o
negativa? ¿Por qué?

Elabora un dibujo de la práctica.

2.- DESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS.


Si en una disolución de proteínas se producen cambios de pH, alteraciones en la concentración,
agitación molecular o variaciones bruscas de temperatura, la solubilidad de las proteínas puede
verse reducida hasta el punto de producirse su precipitación. Esto se debe a que los enlaces que
mantienen la conformación globular se rompen y la proteína adopta la conformación filamentosa.
De este modo, la capa de moléculas de agua no recubre completamente a las moléculas proteicas,
las cuales tienden a unirse entre sí dando lugar a grandes partículas que precipitan. Además, sus
propiedades biocatalizadores desaparecen al alterarse el centro activo. Las proteínas que se hallan
en ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron diseñadas, en resumen, no
son funcionales.

Esta variación de la conformación se denomina desnaturalización. La desnaturalización no afecta a


los enlaces peptídicos: al volver a las condiciones normales, puede darse el caso de que la proteína
recupere la conformación primitiva, lo que se denomina renaturalización.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 36


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Ejemplos de desnaturalización son la leche cortada como consecuencia de la desnaturalización


de la caseína, la precipitación de la clara de huevo al desnaturalizarse la ovoalbúmina por efecto
del calor o la fijación de un peinado del cabello por efecto de calor sobre las queratinas del pelo.

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales
que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o
al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los
agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras
secundaria y terciaria.
MATERIAL BIOLÓGICO: albúmina de huevo ( o leche ), limón

MATERIAL DE LABORATORIO: 5 tubos de ensayo, gradilla

REACTIVOS QUÍMICOS: HCl concentrado, alcohol etílico, jugo de limón, agua,

PROCEDIMIENTO
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse
en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
2. Al tubo 1 calentar uno de los tubos al baño María,
3. Al tubo N◦2 agregar 2-3ml de HCl concentrado
4. Al tubo N◦3 agregar 2 o 3ml de alcohol etílico.
5. Al tubo N◦4 agregar 2 o 3ml de jugo de limón
6. Al tubo N◦5 agregar 2 o 3ml de agua.
7. Observar los resultados.

1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?

2. ¿Cuál de los agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?

¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 37


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PRÁCTICA N° 07

ENZIMAS
Las enzimas son moléculas de proteínas que tienen la capacidad de facilitar y aclarar las reacciones
químicas que tienen lugar en los tejidos vivos, capaces de aumentar hasta 1020 veces la velocidad
de una reacción debido a su alto poder de activación, específico paracadareacción su parte
proteínica se llama apoenzima, que al unirse a un cofactor produce la holoenzima que es la enzima
activa. Generalmente las enzimas se nombran añadiendo la terminación “asa” a la raíz del nombre
de la sustancia sobre la que actúan.
OBJETIVOS
 Reconocer la presencia de catalasa
 Realizar la hidrólisis del almidón

MATERIALES
 Almidón
 Saliva, tomate, hígado de pollo
 Agua oxigenada, lugol
 Pipeta bacteriológica
 Tubos de ensayo, gradilla
 Vaso de precipitación
 Baño maría
 Hornilla

PROCEDIMIENTO
RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales. La
función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular se forma
una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno o agua oxigenada. Esta enzima, la catalasa, lo
descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La reacción de la catalasa
sobre el peróxido de hidrógeno es la siguiente:
2H2O2 2H2O + O2
La existencia decatalasa enlos tejidos animales, seaprovecha para utilizar elaguaoxigenada como
desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchas de las bacterias patógenas son
anaerobias(nopuedenvivirconoxígeno),muerenconeldesprendimientodeloxígenoquese
produce cuando la catalasa de los tejidos actúa sobre el agua oxigenada.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 38


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1. Colocar en un tubo de ensayo unos trocitos de muestra por ejemplo hígado, tomate
2. Añadir 5 milímetros de agua oxigenada
3. Se observa un intenso burbujeo debido al desprendimiento del oxígeno.

DESNATURALIZACIÓN DE LA CATALASA
La catalasaquímicamente es una proteína, podemos desnaturalizarla al someterla aaltas
temperaturas. Al perder la estructura tercearia, perderá también la función y como consecuencia
sufunción catalítica, por loque nopodrá descomponer el agua oxigenadayno se observará
ningún tipo de reacción cuando hagamos la experiencia anterior con muestras de tejidos hervidos.
1. Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos de tejido animal ovegetal
2. Añadir agua para hervir la muestra. Hervir durante unos minutos
3. Después de ese tiempo, retirar el agua sobrante
4. Añadir el agua oxigenada
5. Observar el resultado

HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN


Veremos la actividad de la amilasa o ptialina, esta enzima actúa sobre el polisacárido almidón,
hidrolizandoelenlaceO- glicosídico, porloqueelalmidónseterminaráportransformaren
unidades de glucosa.
1. Ponga en una gradilla dos tubos de ensayo numeraos
2. Añadir en cada tubo 5 mililitros de una solución diluida de almidón
3. Al tubo dos añadir una pequeña cantidad de saliva
4. Añade unas gotitas de lugol al tubo N° 1
5. Dejar 15 minutos a baño maría 37°C el tubo N° 2
6. Añadir unas gotitas de lugol al tubo N° 2

RESULTADOS
Realizar los gráficos correspondientes a los experimentos, observar y analizar los resultados
obtenidos.
CONCLUSIÓN
Establezca las conclusiones finales del desarrollo de la presente práctica.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las funciones principales de las proteínas?
2. ¿Qué significa desnaturalización?
3. ¿Por qué en el experimento de hidrólisis de almidón la reacción es negativa en el tubo
número 1 para el lugol?
4. ¿Dónde se encuentra la amilasa o ptialina?
5. ¿Qué función tienen las enzimas?
6. ¿Qué coloración da la reacción xantoprotéica al encontrar la presencia de proteínas en los
alimentos?

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 39


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BIBLIOGRAFÍA
Incluya la bibliografía utilizada de acuerdo a las normas técnicas del sistema APA

PRÁCTICA N° 08
CONSTITUYENTES ORGÁNICOS DE LA MATERIAVIVA
ÁCIDOS NUCLEICOS
INTRODUCCIÓN:

Losácidosnucleicossonlasbiomoléculasportadorasdelainformacióngenética.Tienenuna
estructura polimérica, lineal, cuyos monómeros son los nucleótidos. El grado de polimerización
puede llegar a ser altísimo, con moléculas constituidas por centenares de millones de nucleótidos
en una sola estructura covalente. Los ácidos nucleicos tienen como función principal contener la
información necesaria para la síntesis de las proteínas celulares. Entre los tiposde ácidosnucleicos
se tiene el ácido ribonucleico y el ácido desoxirribonucleico.
El ADN es la huella digital de la vida ya que determina las características de todos los organismos
vivos. El ADN se compone de un abecedario de cuatro letras, nucleótidos, que se llaman A, T,C y G.
el orden del abecedario determina las características de los organismos vivos, como el orden de las
letras en nuestro abecedario determina las palabras.
Cada célula en el cuerpo humano contiene más de 3 billones de letras y la única diferencia entre
los organismos vivos es la cantidad y el orden del abecedario del ADN.
El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unidos a proteínas
para formar la cromatina. Para extraerlo es necesario homogeneizar el tejido y romper las células
para separar el núcleo, romper este para liberar el ADN, separarlo de las proteínas que se adhieren
a la varilla de vidrio. Por último, se puede situar sobreun porta objetos, teñirlo con un colorante
básico y observarlo al microscopio.
Cada célula contiene casi tres metros de ADN. En un almuerzo promedio, te comes
aproximadamente 55 000 000 de células o cerca de 150 000 Km de ADN, ajeno a tu propio ADN.
OBJETIVOS:
 Identificar la molécula de ADN mediante un proceso sencillo de aislamiento de un tejido
animal.

 Confirmar la estructura fibrilar del ADN.

 Confirmar que el ADN en el núcleo se encuentra replegado.

MATERIALES:
MATERIAL DE LABORATORIO

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 40


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 Varilla de vidrio

 Mortero

 Vasos de precipitado

 Pipeta

 Probeta

 Arena

 Trozo de tela para filtrar

MATERIAL BIOLOGICO

 Hígado de pollo

REACTIVOS QUIMICOS

 Alcohol de 96

 Cloruro de Sodio 2M

 SDS

PROCEDIMIENTO:
- Triturar medio hígado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan
romper las membranas de las células y quedan los núcleos sueltos.

- Añadir al triturado, 50 ml de agua. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.

- Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado
por romper.

- Medir el volumen del filtrado con una probeta.

- Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M, con esto conseguimos producir el
estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.

- A continuación, se añade 1 ml de SDS. La acción de este detergente es formar un complejo


con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADN libren de las proteínas que
tiene asociadas.

- Añadir mediante una pipeta 50 ml de alcohol de 96, hay que hacerlo de forma que el alcohol
resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN.

- Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van
adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación
de muchas fibras de ADN.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 4s


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- Esta práctica se puede complementar depositando sobre un portaobjetos las fibras que se
van depositando sobre las varillas de vidrio. Teñir durante unos minutos con un colorante
básico y observar al microscopio.

RESULTADOS:
Realice los esquemas correspondientes al desarrollo dela práctica.
CONCLUSIONES:
Establezca las conclusiones finales al desarrollo de la presente práctica.
CUESTIONARIO:
1. ¿Qué es DNA?

2. ¿Cuál o cuáles son las funciones del DNA?

3. ¿Dónde se encuentra el DNA en los organismos procarióticos y eucarióticos?

4. ¿Quiénes plantearon el modelo de la doble hélice del DNA, en qué año y qué
características tiene?

5. ¿Qué unidad tiene el cloruro sódico 2M y el detergente SDS (Shampoo) en la práctica?

6. ¿Qué es el ARN, cuántas clases de ARN existen y qué funciones tiene cada uno de ellos?

BIBLIOGRAFÍA:
Incluya la bibliografía utilizada de acuerdo a las normas técnicas del sistema APA.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 42


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PRACTICA N⁰ 9

CULTIVO Y OBSERVACION DE HONGOS

INTRODUCCIÓN

Los hongos son un grupo de seres vivos diferentes de las plantas y de los animales, razón por la
cual se clasifican en un reino aparte llamado Fungi. La ciencia que los estudia se llama Micología
(Mykes=Hongo y Logos=Estudio). Poseen gran capacidad de adaptación y pueden desarrollarse
sobre cualquier medio o superficie, tanto en los bosques como en las ciudades. Se reproducen por
medio de esporas, las cuales son diseminadas principalmente por el viento y por el agua.

Juegan un papel descomponedor, ya que transforman la materia orgánica en sustancias más simples
y asimilables por otros seres vivos. Pero también pueden desarrollarse formando asociaciones de
beneficio mutuo con raíces de plantas (micorrizas) y con algas dando origen a los líquenes—que son
organismos totalmente diferentes a las plantas y a los mismos hongos--, mientras que algunos
crecen sobre otros seres vivos produciéndoles enfermedad o incluso la muerte.

Los hongos han jugado y juegan un papel muy importante en la medicina, la industria y la
alimentación. La era de los antibióticos se inicia con el descubrimiento de la penicilina, obtenida a
partir del hongo Penicillium notatum; asimismo algunos hongos son importantes en la industria de
quesos, cerveza, vinos y otros; además de la excelente fuente de vitaminas, proteínas, fibra y
minerales que constituyen los hongos comestibles.

Aunque no se conoce con exactitud el número de especies, hasta ahora se han descrito
aproximadamente 80.000 en todo el mundo.

LAS CLASES DEL REINO DE LOS HONGOS


1- ¿Cómo se organizan los hongos?. Taxonomía.

Los hongos como el resto de seres vivos se agrupan en Clases, Órdenes, Familias y Géneros
atendiendo fundamentalmente a las características de los órganos reproductores, es decir, a lo
que popularmente conocemos como “setas” u “hongos”.

Aunque existenmuchasclasificaciones uordenamientos, según los autoresy segúnlos criterios


quesemanejennosotrosvamosaplasmaracontinuaciónlamásdidácticayunadelasmás
tradicionales y más manejada por los aficionados al mundo de la Micología.

2.- ZIGOMICETOS
Un gran grupo de hongos los ZIGOMICETOS no producen cuerposfructíferos, es decir,carpóforoso
lo que popularmente se conocen como “setas y hongos”. Se reproducen por esporas producidas
directamente del micelio o de esporangios o conidióforos microscópicos o casi, comprenden los
conocidos popularmente como “mohos” y no despiertan el interés de micólogos sino de
Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 43
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fitopatólogos, médicos,biólogos,etc, por susformasdedesarrollo parásitasosaprófitas. Un


ejemplo típico es el del moho del pan.
El restos de los hongos se reproducen por esporas de origen sexual producidas en estructuras
microscópicas agrupadas a su vez en otras más grandes y visibles, los carpóforos, las típicas setas.
3- ASCOMICETOS

Dentrodeestosgruposnos encontramos losque presentan unasestructuras microscópicas


productoras deesporasllamadas“ascas”seencuadran dentrodelgrupo ASCOMICETOS.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 44


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4- BASIDIOMICETOS

Los que presentan unas estructuras microscópicas productoras de esporas llamadas “basidios” se
encuadran dentro del grupo BASIDIOMICETOS. Éstos a su vez según la textura de su carne, ellugar
donde se producen los basidios, la forma de desarrollo y otra amplia serie de caracteres se
subdividen en tres grandes grupos: Afiloforales, Gasteromicetales y Agaricales.

Partes de un hongo
Partes de hongos superiores

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 44


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Partes de hongos inferiores

Objetivo
 Observación macroscópica del aparato vegetativo.
 Observación microscópica del aparato reproductor.

Fundamento Teórico
Dentrodeestegrupo,losgénerosmásimportantessonMucor,RhizopusyPeniciliumquese
localizan sobre alimentos, materia orgánica en descomposición, etc. El primero de ellos da lugar al
llamado moho blanco del pan, el segundo al moho negro del pan y el último almoho azulado.
1. Género Mucor

Sumicelioesblanquecinoydeaspectolanoso.Conlalupasepuedenver lashifasblancas
entrecruzadas entre las que sobresalen algunas provistas de esporangios en sus extremos. Es
característico de este género el que, al romperse los esporangios, las esporas son arrojadas a
distancia. Al microscopio se pueden apreciar las hifas plurinucleadas, que carecen de tabique de
separación.
2. Género Rhizopus

Son hongos zygomicetos, como los anteriores. Estos mohos tienen el micelio grisáceo y de
aspecto algodonoso, menos compacto que el anterior. Si se mira con lupa, pueden verse hifas
clarasjuntocon otrascoloreadas,quetienen ensusextremos esporangios negrosmuy
llamativos. Estos esporangios se abren de forma similar a los del género Mucor, pero no tienen
mecanismos para arrojarlasesporasa distancia. Son características de este génerounas hifas

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 45


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de aspecto radicular, que penetran en el sustrato para obtener agua y nutrientes, a la vez que
fijan al moho.
Con el microscopio se pueden ver las hifas, no tabicadas, de gran tamaño, siendo más patentes
las portadoras de los esporangios.
3. Género Penicillium

Este género de hongos es de tipo ascomiceto. Las hifas son tabicadas y ramificadas.
Los esporangios tienen aspecto de cepillo, presentan unos ensanchamientos sobre los que se
insertan, como dedos de una mano, unos apéndices cortos, llamados esterigmas. Cada uno de
ellos se continúa en una serie de esferitas, denominadas conidios, sirven para la reproducción.
Material necesario
Material de laboratorio:
 Microscopio compuesto.
 Portaobjetos y cubreobjetos.
 Pinzas y palillos.
 Placa de Petri.
 Cuentagotas.

Reactivos:
 Agua
 Lactofenol (opcional)

Material Biológico:
 Cultivo de moho del pan
 Hongos de cítricos y frutas en general.
 Hongos de hojas
 Hongos comestibles.

Procedimiento

1. Deposita en el centro del portaobjetos una gota de lactofenol (opcional, sirve como liquido de
soporte), sino dispones de lactofenol, coloca unas gotitas de agua y extiende en su seno un
trozo de micelio que contenga esporangios (con ayuda de las pinzas).
2. Coloca el cubreobjetos después, procurando que no quede ninguna burbuja de aire.
3. Observa la muestra al microscopio con diferentes aumentos y recorriéndola en toda su
extensión.

Observarás las hifas a modo de pequeños tubos, sin tabiques de separación y con numerosos
núcleos esparcidos en el citoplasma común (hifas sifonadas). En el extremo de algunas hifas
aparece un engrosamiento (columnilla) rodeado del esporangio, en cuyo interior se hallan las
esporas.
Cuestionario

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1. Haz un dibujo coloreado de todo lo hayas observado, indicando el nombre de las partes que
diferencies (género del hongo, tipo de hifa, esporangio y esporas).
2. Haz un esquema del ciclo biológico del moho del pan.
3. Describe el aparato vegetativo de los hongos.
4. Escribe para qué otras cosas puede ser útil la lupa binocular.

BIBLIOGRAFIA
Incluya la bibliografía utilizada de acuerdo a las normas técnicas del sistema APA

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PRACTICA N°10

CÉLULA - ESTRUCTURA PROCARIONTE

Introducción

INTRODUCCIÓN
Desde que Robert Hooke observo las celdas del corcho, otros científicos se dieron a la tarea de
investigar cómo estaban formados los seres vivos. Fueron tres de ellos quienes conformaron lo que
conocemos ahora como la teoría celular el botánico Mattew Schleiden quien propuso a la célula
como la unidad estructural de las plantas, el zoólogo Theodor Schawn que hizo lo mismo con los
animales, y el médico yfisiólogo Rudolph Virchow, que conjuntó las propuestas anteriores y
propuso que las células se originan de otras células, existen dos tipos de células en la naturaleza:
las procarioticas como las bacterias conformadas por una membrana celular, citoplasma, material
genético y ribosomas y las eucarioticas como las de los protistas , hongos, plantas y animales que
además de las estructuras de las bacteria, tienen Organelos membranoso y su material genético
estánencapsuladosenunnúcleo, todoestoseconocegracias alamicroscopia electrónica.
Para clasificar a las bacterias debemos tener en cuenta su tamaño, forma, disposición espacial,
propiedades.
Se encuentran en todos los lugares de nuestro planeta, en al agua dulce y salada, por tanto viven
en el aire, agua ytierra, y se les halla tambien en los alimentos y en el exterior yel interior de los
seres vivos.
Encontramos también bacterias que pueden provocar enfermedades potencialmente mortales.
La enfermedad puede deberse a los efectos tóxicos de los productos bacterianos o a la invasión de
regiones corporales que acostumbran a ser estériles.

Objetivos
1. Realizar una tinción simple de bacterias procedentes de distintas muestras naturales.
2. Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qué casos se recomienda una u otra.
3. Observar la morfología bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de
agrupaciones que existen.
4. Practicar con el microscopio al máximo aumento y con el correcto empleo del aceite de
inmersión.

MATERIAL
 Mechero de alcohol
 Asa de siembra o aguja ebmangada
 Pinzas
 Portaobjetos y cubreobjetos


 Muestras bacterians de origen natural: yogurt, , sarro dental,
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 Colorantes para tinción:


 a) Solución de cristal violeta al 1%
 b) Solución de safranina al 0.5%
 c) Azul de metileno al 1%
 Microscopio y aceite de inmersión

BACTERIAS DEL YOGURT


El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala
industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos
cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático, y
el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparación se podrán, por tanto, observar
dos morfologías bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos,
cocos en cadenas arrosariadas). Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30µm de longitud) facilita
la observación aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.
ProcedimiExtension: Realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogur en una pequeña gota
de agua.

1. Fijación Fijar con metanol o Xilol para eliminar parte de la grasa.


2. Teñir Apoyar el portaobjetos sobre el soporte de tinciones y añadir unas gotas de azul de
metileno o con un colorante cualquiera de los arriba indicados durante 4-5minutos.
3. Lavar con agua destilada
4. Secar. pasar el portaobjetos varias veces por encima de la llama del mechero de alcohol,
sin permitir que llegue a hervir, hasta que se seque.
5. añadir una gota de glicerina y colocar el cubreobjetos
6. Observar primero con el objetivo 40×; luego se añade aceite de inmersión y se observa
con el objetivo 100×

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Resultados
BACTERIAS DEL SARRO DENTAL
El sarro dental es un depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los dientes.
Está constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto con sus
productos metabólicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable dependiendo de las
condiciones que se den en el momento de hacer la preparación, pero suelen abundar bacterias
saprófitas, pudiéndose observar gran variedad de morfologías: espiroquetas, cocobacilos,
diplococos y bacilos.
1. Con una aguja enmangada tomar una pequeña porción de sarro dental y disolverla en una
gota de agua sobre el portaobjetos.
2. Dejar secar y fijar con calor.
3. Teñir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

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PRACTICA N°11

Tinción GRAM

BACTERIAS:

Características:
 Las bacterias son de vidas libres, cosmopolitas y patógenas para el hombre y animales.
 Miden entre 1 y 10 um.
 Estos causan enfermedades infecciosas en los seres vivos.
 Son beneficiosos como los que reciclan el carbono, azufre, nitrógeno y fósforo; algunos viven el
intestino del hombre (ejemplo: Escherichia coli), los cuales sintetizan vitaminas como BIOTINA;
en rumiantes elaboran celulosa, una enzima que digiere la celulosa.
Funciones:
 Nutrición: autótrofa: por fotosíntesis y quimiosíntesis y heterótrofa (bacterias).
 Reproducción:asexualysexual,lareproduccion delasbacteriasserealizaagranvelocidad;
algunas se dividen un vez cada 20 minutos.

Estructura:
Constituida por:
1. Pared celular.
2. Membrana Celular.
3. Estructura Citoplasmáticas.
4. Genóforo.
5. Cápsula.
6. Fimbrias o Pilis.
7. Ausencia de Envoltura Nuclear

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ESTRUCTURA DE LAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS

TINCIÓN GRAM

La tinción Gram es una prueba potente y rápida que nos permite diferenciar dos clases de
bacterias estas son: Bacterias grampositivas y las gramnegativas.
Lasgrampositivassetiñendemoradoyaqueelcolorante sequedaatrapadenlacapagruesade
peptidoglucanos que rodea a la célula

Las gramnegativas tienen una capa de petidoglucano mucho más delgada es por ello que no
retieneelvioletacristalyporestolascélulassetiñenconsafraninaylasobservamosrojas.

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DIFERENCIAS MOLECULARES ENTRE UNA BACTERIA GRAN POSITIVA Y OTRA GRAN NEGATIVA.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Poseen una pared celular interna y una pared de Poseen una pared celular más compleja:
peptidoglucano. -pared celular interna
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que da -pared de peptidoglucano
consistencia y forma esencial para replicación y - bicapa lipídica externa
supervivencia de la bacteria.
No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco rígido
alrededor de la bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a macromoléculas,
ofrece protección en condiciones adversas

Espacio periplasmático: espacio entre la


No tiene espacio periplasmático superficie externa de la membrana
citoplasmática y la interna de la membrana

externa.
La red de mureína está muy desarrollada y llega La red de mureína presenta una sola capa
a tener hasta 40 capas
La penicilina mata a las gram positivas, ya que La penicilina no mata a las Gram negativas, a
bloquea la formación de enlaces peptídicos entre causa de la capa de lipopolisacáridos situada
las diferentes cadenas del peptidoglucano en la parte externa de la pared celular.
Contiene LPS: estimulador de respuestas
No contiene LPS inmunes: activa células B, liberación de IL,
FNT, IL 6 por macrófagos.
En la tinción de Gram, retienen la tinción azul Quedan decoloradas.

Conservan el complejo yodocolorante Pierden el complejo yodocolorante

Pueden ser anaerobios o aerobios


Son esporulantes y no esporulantes, como
Streptococcus, Cisteria, Frankia.

Poseen otros componentes: ácidos teicoicos y Poseen proteínas con concentraciones


lipoteicoicos, y polisacáridos complejos. elevadas.

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Gram Positivo: Staphyloccocus aureus

Gram Negativo: Escherichia coli


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Conclusiones.-
 Las bacterias son causantes de infecciones y enfermedades.
 ALgunas son beneficiosas para la agricultura, industria, salud y la investigación.
 Para observar y distinguir este tipo de celulas se utiliza la Tinción de Gram( en honor al medico
danés Hans ChristianGram)

Objetivo
 Realizar observaciones Gram Positivas y Gram Negativas
Materiales
 Microscopio
 Portaobjetos y cubre objetos
 Asa de kolle
 Mechero
 Goteros palillo de dientes
Reactivos
 Alcohol – cloroformo
 Azul de metileno
 Solución violeta genciana o violeta de metilo
 Solución Lugol
 Alcohol
 Al 96%
 Solución fucsina o safranina

Observación de bacterias con tinción Gram


1. Esterilizamos el portaobjetos con jabón y alcohol para eliminar grasa
2. Si vas a tomar bacterias de una placa de Petri, esteriliza un asa bacteriológica en la llama
de un mechero Bunsen hasta que brille, luego deja que se enfríe. Úsala para colocar una
gota de agua esterilizada sobre el portaobjetos y luego esteriliza y enfría el asa otra vez
antes de transferir una pequeña muestra de bacteria al portaobjetos y revolverla suavemente
en el agua.
3. Dejamos secar podemos hacerlo con la ayuda del mechero sin dejar que se calienten
mucho la muestra.
4. Añadimos cristal violeta dejamos actuar el colorante durante 1 minuto para que tiña a
todas las bacterias gram positivas y gram negativas.
5. Lavamos suavemente con agua destilada.
6. Añadimos Lugol y dejamos actuar 3 minutos este actúa como fijador dejando el colorante
sin lavarlo con agua se vierte la solución.
7. Decolore la muestra con el alcohol de 96% durante 30 segundos moviendo el portaobjetos
hasta que desaparezcan los chorros gris violáceo del colorante. Después lave con agua
8. Sobre la muestra eche safranina para realizar la cotratincion al cabo de 1 o 2 minutos se
vierte el colorante, el preparado se lava con agua, se seca con papel toalla o filtro o con la
llama del mechero.
9. Observe al microscopio la tinción añadiendo una gota de aceite de inmersión y con el
objetico de mayor aumento.

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.Conclusiones

Establezca las conclusiones finales correspondientes al desarrollo de la práctica.

Cuestionario

1. Esquematice y señale las partes de la bacteria


2. Diferencias entre bacterias Gram positivas y Gram negativas.
3. ¿Todas las bacterias son patógenas? ¿Por qué si y porque No?
4. ¿Qué formas y tamaños tienen las bacterias?
5. ¿Cuál es la importancia que tienen las bacterias para la alimentación, salud, industria,
medio ambiente entre otros?.
6. Mencione 5 ejemplos de baterías benéficas y 5 de bacterias patógenas.

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PRACTICA N°1S
LA CÉLULA – ESTRUCTURA EUCARIONTE
La célula es una unidad mínima de un organismo capaz de actuar de manera autóma. Todos los
organismos vivos están formados por células, y en general se acepta que ningún organismo es un
ser vivo si no consta al menos deuna célula. Algunos organismosmicroscópicos, comolas
bacteriaslos protozoarios, soncélulas únicas, mientasquelos animales ylas plantas están
formados por Muchos millones de células organizadas en tejidos y órganos. Aunque los virus y los
extractos celulares realizan muchas de las funciones propias de la célula viva. Carecen de vida
independiente capacidad de crecimiento y de reproducción propios de las células y por tanto nos e
consideran seres vivos. La forma de la célula es variada.
Tanto los protozoarios, hongos como plantas y animales se caracterizan por poseer células de tipo
eucarionte que son las más evolucionadas que la células procariotas y estructuralmente mas
complejas. Sus característicasson:
 Poseen carioteca
 El material genético se encuentra dentro del núcleo
 Posee organelos citoplasmáticos.

OBJETIVOS
 Realizar observaciones de protozoarios
 Realizar preparados para observar levaduras , hogos
 Reconocer, describir las características morfológicas y estructurales de cada uno de estos
grupos de microorganismos.

PROTOZOARIOS
Los protozoarios son organismos eucarioticos, unicelulares que varían grandemente en forma y
tamaño,.Seencuentran en casitodosloshábitats húmedos:estanques,lagos,ríos,arroyos,arena,
suelo, gravahúmeda, aguas negras, pantas detratamiento de agua, aguasmarinas como
estanques costeros formados por una marea, en vegetación flotante, estuarios, bahías, aguas
termales y estanquesglaciares.
MATERIALES
 Microscopio
 centrifuga
 Tubos de ensayo
 Porta objetos y cubre objetos
 Pipeta Pasteur
 Muestra de agua estacada, charco, agua de florero, agua de pecera.

PROCEDIMENTO
 Colocar las muestras en os tubos de ensay al mismo nivel y centrifugar.
 Realizar preparaciones en fresco a partir del concentrado centrifugado, de las muestras de
agua.

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 En zona aséptica, con una pipeta Pasteur transfiera una gora de muestra al centro del
portaobjetos limpio y desgrasado.
 Cubra la preparación con la lámina cubreobjetos y coloque en la platina del microscopio
para la observación.
 Observar con el objetivo de 40X y con baja intensidad de luz
 Realice los esquemas correspondientes.

HONGOS Y LEVADURAS.
Los hongos constituyen un grupo heterogéneo de organismos eucariotas, heterótrofos no
fotosintéticos, con pared celular.Basándose en la apariencia macroscópica de la colonia se pueden
diferenciar dos tipos de hongos. Si producen colonias opacas, cremosas o pastosas se denominan
LEVADURAS, siproducen crecimientos aéreos, velludos, algodonosos opulverulentos se llaman
hongos filamentosos, existe en tercer grupo que se desarrolla cono levaduras cuando crece a 37°C
y como hongos filamentosos a 25°. Este fenómeno se llama dimorfismo.
MATERIALES
Microscopio
Glicerina
Porta objetos y cubre objetos
Moho de pan o de fruta
Aguja y asa de kolle
Alfiler
PROCEDIMIENTO

 Colocar una gota de glicerina sobre un porta objetos


 Desprender con un alfiler o con la aguja de kolle una porción de moho de pan o de fruta y
ponerla en la gota de glicerina.
 Cubrir con el cubre objetos
 Observar con el objetico de 40X
 Realizar los esquemas correspondientes.

RESULTADOS

Realice las gráficas correspondientes a los experimentos

COCLUSIONES

Establezca las conclusiones finales correspondientes al desarrollo de la práctica.

CUESTIONARIO

1.- ¿Cuál es la clasificación de los protozoarios?

2.- ¿Qué importancia tienen los protozoarios en el medio ambiente, para la salud humana?

3.- ¿ A que reino pertenecen los hongos y las levaduras?

4.- ¿Quién y Quienes hicieron la clasificación de lso seres vivos y que tomaron en cuenta para ello?

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5.- ¿Qué importancia tienen los hongos y las levaduras.

BIBLIOGRAFIA

Incluya la bibliografía utilizada de acuerdo a las normas técnicas del sistema APA

PRACTICA N°13

MITOSIS

INTRODUCCIÓN

La mitosis es el proceso por el que las células se dividen de forma que el material genético se reparte
por igual entre las dos células hijas, y así las dos son genéticamente iguales. En las plantas la mitosis
se produce sobre todo en los meristemos, que son los tejidos que permiten el crecimiento de la planta
y que se encuentran, entre otros lugares, en los extremos de los tallos y de las raíces.

MATERIALES

 Microscopio
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Lanceta estéril
 Cubeta de tinción
 Aguja enmangada
 Pinzas
 Palillos
 Frasco lavador
 Mechero de alcohol
 Tijeras
 Papel de filtro
 Vaso de precipitados
 Vidrio de reloj
 Orceína A
 Orceína B

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PROCEDIMIENTO

1. Llena un vaso de precipitados con agua y coloca un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres
palillos de maneraque la parte inferiorquede inmersa en el agua. Al cabo de3-4 días
aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm de longitud.
2. Corta con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y deposítalo en un vidrio de
reloj en el que se han vertido 2-3 ml de orceína A.
3. Calienta suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos,
evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.
4. Con las pinzas toma uno de los ápices o extremos de las raicillas y colócala sobre un
portaobjetos, añade una gota de orceína B y deja actuar durante 1 minuto.
5. Coloca el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja
enmangada da unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede
extendida.
6. Sobre la preparación coloca unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Pon el dedo pulgar sobre el
papel de filtro en la zona del cubreobjetos y haz una suave presión, evitando que el cubre
resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión
que se realice.
7. Observa al microscopio.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

Se realizará a fuertes aumentos. La orceína A reblandece las membranas celulares y la B completa


el proceso de tinción. Con la presión sobre el porta de la preparación se logra una extensión y
difusión de las células del meristemo de la cebolla.

La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el
microscopio. Se observan células en diversas fases o estados de división celular. Se ven los
cromosomas teñidos de morado por la orceína. El aspecto reticulado así como el mayor tamaño de
algunos núcleos corresponde a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división
mitótica.

A diferencia de las células animales, se observa nítidamente la separación entre células adyacentes
(límites intercelulares) debido a la presencia de la pared celular(de celulosa) por fuera de la
membrana celular. La mayoría de estas células están en interfase.

Interfase:
Núcleo con cromatina puntillada y el nucléolo prominente y acidófilo.
Profase:
Se observan los cromosomas, de aspecto filamentoso. El nucleólo es todavía evidente y los
cromosomas ocupan mayor espacio.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 6s


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Prometafase:
Se observan cromosomas más o menos dispuestos en ovillo pero sin adoptar una forma esférica
perfecta, lo que denota que se ha desintegrado la carioteca.
Metafase:
Los centrómeros se alinean en el ecuador de la célula mientras los brazos cromosómicos apuntan hacia los
polos. El nucléolo y la membrana nuclear están ausentes, el huso mitótico es difícil de discernir.
Anafase:
Los cromosomas migran hacia los polos de la célula con los brazos hacia el ecuador y el
centrómero hacia el polo.
Telofase:
Los cromosomas llegan a los polos y se agrupan, perdiendo la orientación característica de la
anafase. Ocasionalmente, bajando el condensador, puede apreciarse una tenue línea de
citocinesis, que en las células vegetales corresponde a la pared celular en formación.
(*) Aunque la membrana nuclear no se ve con el microscopio óptico, su presencia o ausencia
durante la mitosis puede inferirse por el ordenamiento de los cromosomas.

CUESTIONARIO

1. Describe las fases de la mitosis que has observado y su significado.


2. Explica las características de la mitosis.
3. Explica en qué etapa del ciclo celular se encontraban la mayoría de las células observadas.
4. ¿Por qué los cromosomas se tiñen de morado?
5. ¿Has observado el proceso de citocinesis? En caso afirmativo, descríbelo.
6. ¿Por qué crees que se utilicen las partes en crecimiento de la cebolla para observar la
mitosis?
7. ¿Para qué se utiliza la acetorceína, que función cumple en la preparación?
8. ¿Se cumplieron los objetivos planteados? ¿Por qué?
9. ¿Qué es lo más relevante de esta actividad?

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PRACTICA N°14

TRANSPORTE CELULAR: DIFUSIÓN y OSMOSIS.

A. Difusión

A.1. Difusión de moléculas de colorante en agua

En esta actividad, se estudiará el movimiento browniano de las moléculas y el efecto de


latemperatura sobre dicho movimiento.

MATERIALES:

 Dos vasos precipitados 100 ml


 Agua a temperatura ambiente
 Agua a temperatura fría
 Colorante vegetal

PROCEDIMIENTO

1) Añada a un primer vaso 90 ml de agua a temperatura ambiente y al segundo vaso 90 ml de


agua a temperatura fría.

2) Deje los vasos reposar por 15 min para que no haya movimiento del agua.

3) Transcurrido este tiempo, añada cuidadosamente y en ambos envases a la vez, una gota de
colorante y observe la dispersión de la gota.

4) ¿Afectó la temperatura la difusión del colorante? Explique su observación.

B. OSMOSIS EN CÉLULAS ANIMALES Y VEGETALES

En las siguientes experiencias se observará qué ocurre al colocar células animales y vegetales en
soluciones con diferentes concentraciones de solutos.

B.1. Células animales

Cuando los eritrocitos (glóbulos rojos) se encuentran en un ambiente hipotónico, el agua entra por
difusión y sucede hemólisis (rompimiento del eritrocito). Cuando el eritrocito está en un ambiente

hipertónico pierde agua, se encoge y sucede crenación. En este experimento se observará el


comportamiento de los glóbulos rojos en soluciones isotónicas, hipotónicas e hipertónicas.

MATERIALES:

 Frascos con soluciones de NaCl (0, 0.9 y1.5 %p/v)


 Porta y cubreobjetos
 Agujas de disección
 Microscopio óptico compuesto

Gotas de sangre

 Toalla Nova
 Gotarios plásticos
Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 62
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 Agua destilada

Ud. recibirá tres frascos conteniendo lo siguiente:

 Frasco 1: Agua destilada (solución de NaCl 0.0 %p/v)


 Frasco 2: Solución de NaCl 0.9 %p/v
 Frasco 3: Solución de NaCl 1.5 %p/v

Pinche el dedo de un compañero y coloque unas gotas de sangre en cuatro portaobjetos. Agregue
a cada uno de ellos las soluciones de NaCl. Observe la apariencia de la mezcla en cada portaobjeto
a preparar a continuación:

Portaobjetos 1:

Gota de sangre, coloque el cubreobjeto y observe los eritrocitos bajo el microscopio.

Portaobjetos 2:

Gota de sangre más gota del frasco 1 (0.0 %), coloque el cubreobjeto, observe bajo el microscopio
y compare con portaobjetos 1.

Portaobjetos 3:

Gota de sangre más gota del frasco 2 (0.9 %), coloque el cubreobjeto, observe bajo el microscopio
y compare con portaobjetos 1.

Portaobjetos 4:

Gota de sangre más gota del frasco 3 (1.5 %), coloque el cubreobjeto, observe bajo el microscopio
y compare con portaobjetos 1.

Cuestionario

a) ¿Qué observó en la primera muestra (portaobjetos 1)?.

b) ¿Qué le pasó a las células al entrar en contacto con cada una de las soluciones? ¿Por qué?.

c) ¿Cuáles de las soluciones usadas fueron hipotónicas, hipertónicas e isotónicas para los

d) ¿En qué solución sucedió hemólisis de los eritrocitos y por qué?.

e) ¿Por qué ocurrió la crenación?.

f) ¿Qué indican los resultados acerca de la concentración de solutos en el plasma sanguíneo?.

Blga. Ana Isabel Oviedo Vitorino 63


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B. 2. Células vegetales

Cuando las células vegetales se encuentran en un ambiente hipotónico, el agua que ingresa
incrementa el tamaño de la vacuola ejerciendo presión de turgencia contra la pared celular, hasta

que llega a un punto límite en que no puede ingresar más agua y se evita el rompimiento de la célula
debido a la presencia de pared celular. Cuando las células vegetales están en un ambiente
hipertónico pierde agua, las células sufren de plasmólisis donde la membrana celular se separa de
la pared celular, lo cual puede ser letal para esta célula. En este experimento se observará el
comportamiento de las células de catáfilo de cebolla expuestas a soluciones isotónicas, hipotónicas
e hipertónicas.

MATERIALES:

 Frascos con soluciones de NaCl (0, 0.9 y 1.5 %p/v)


 Porta y cubreobjetos
 Agujas de disección
 Microscopio óptico compuesto
 Cebolla
 Toalla Nova
 Gotarios plásticos
 Agua destilada

Procedimiento

 Rotule y prepare tres portaobjetos según se indica a continuación. Coloque un


cubreobjetos yobserve con el microscopio:
 Portaobjetos 1: Trozo de catáfilo de cebolla más unas gotas del contenido del frasco 1.
 Portaobjetos 2: Trozo de catáfilo de cebolla más unas gotas del contenido del frasco 2.
 Portaobjetos 3: Trozo de catáfilo de cebolla más unas gotas del contenido del frasco 3.

Cuestionario

a) ¿Qué le pasó a las células al entrar en contacto con cada una de las soluciones?.

b) ¿Cuáles de las soluciones fueron hipotónicas, hipertónicas e isotónicas con respecto a la célula

vegetal?.

c) ¿Por qué ocurrió plasmólisis en una de las soluciones?.

d) ¿Cuál es la diferencia entre plasmólisis y crenación?.

e) ¿Por qué no ocurre lisis (rompimiento de la célula) en la célula vegetal?.

f) ¿En qué tipo de solución ocurrió turgencia?.

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PRACTICA N°15

EL CARIOTIPO HUMANO

El objetivo de esta práctica es aprender a reconocer los cromosomas humanos, elaborar un


cariotipo a partir de una fotografía y saber determinar las anomalías cromosómicas más
frecuentes.
La dotación cromosómica normal de la especie humana es de 46,XX para las mujeres y de 46, XY
para los varones.
En el cariotipo humano los cromosomas se ordenan de mayor a menor. Hay cromosomas grandes,
medianos y pequeños. Al ordenar los cromosomas se constituyen 7 grupos atendiendo no sólo al
tamaño sino también a la forma de las parejas cromosómicas, dentro del cariotipo humano
podemos encontrar cromosomas:
1. Metacéntricos (tienen los dos brazos aproximadamente iguales en longitud).
2. Submetacéntricos (con un brazo más pequeño que otro).
3. Acrocéntricos (con un brazo corto muy pequeño).

Concretamente en el cariotipo humano hay 7 grupos de cromosomas. Dentro de cada grupo vamos
a ordenar y reconocer los cromosomas con la ayuda de un idiograma:

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Un ideograma es la representación esquemática del tamaño, forma y patrón de bandas de todo el


complemento cromosómico, los cromosomas se sitúan alineados por el centrómero, y con el brazo
largo siempre haciaabajo.
Los grupos que comprende el cariotipo humano son los siguientes:
 Cromosomas grandes

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Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), meta y submetacéntricos

Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacéntricos

 Cromosomas medianos

Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y además los cromosomas X), submetacéntricos

Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos

 Cromosomas pequeños

Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) submetacéntricos


Grupo F,(cromosomas 19 y 20) metacéntricos
Grupo G,(cromosomas 21 y 22) acrocéntricos

PoracuerdoloscromosomassexualesX eYseseparandesusgrupos correspondientes y seponen


juntos aparte al final del cariotipo

Anexos

Conceptos básicos de la herencia biológica.


Existen unos conceptos fundamentales en Genética que permiten la adecuada comprensión de los
mecanismos hereditarios. Son los siguientes:
 Genética. Ciencia que estudia la transmisión de los caracteres hereditarios.
 Carácter hereditario. Característica morfológica, estructural o fisiológica presente en un ser
vivo y transmisible a la descendencia.
 Gen. Término creado por Johannsen en 1909 para definir la unidad estructural y funcional de
transmisión genética. En la actualidad, se sabe que un gen es un fragmento de ADN que lleva
codificada la información para la síntesis de una determinada proteína. Mendel
denominó “factor hereditario”.
 Genotipo. Conjunto de genes que posee un individuo.
 Fenotipo. Características que muestra un individuo, es decir, expresión externa del genotipo.
 Alelos. Término introducido por Bateson en 1902 para indicar las distintas formas que puede
presentar un determinadogen.
 Homocigoto o raza pura. Individuo que posee dos alelos idénticos para el mismo carácter.
 Heterocigoto o híbrido. Individuo que tiene dos alelos distintos para el mismo carácter.
 Gen o alelo dominante. Gen cuya presencia impide que se manifieste la acción de otro alelo
distinto para el mismo carácter.
 Gen o alelo recesivo. Gen que sólo manifiesta su acción en ausencia de un alelo dominante, es
decir,únicamenteapareceenelfenotiposiseencuentraenhomocigosis.
 Genesoalelos codominantes. Alelos para el mismo carácter que poseen idéntica capacidad
para expresarse y, cuando se encuentranjuntos en el mismo individuo, éste manifiesta la
acción de ambos.

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 Cromosomashomólogos. Pareja decromosomas en células diploides, queprocede uno del


progenitor paterno y el otro del materno, son igualesmorfológicamente (excepto los
cromosomas sexuales) pero no son idénticos, puesto que no tienen la misma composición
química, al contener diferentes genes alelos uno y otro cromosoma.
 Locus. Lugar ocupado por un gen en un cromosoma. El plural es loci por ser palabra latina.
 Herencia dominante. Es aquella en la que hay un alelo, el llamado dominante, que no deja
manifestarse al otro, el llamado alelo recesivo
 Herenciaintermedia. Esaquella en la que unode los alelos muestra una dominancia
incompleta sobre el otro. Así pues, los híbridos tienen un «fenotipo intermedio» entre las dos
razas puras.
 Herencia codominante. Es aquella en la que los dos alelos son equipotentes, y por tanto no
hay dominancia. Los híbridos presentan las características de las dos razas puras a la vez.
 Dihíbridos. Son los individuos con heterocigosis en dos pares de genes.
 Polihibridos. Son los seres con heterocigosis para muchos pares de genes.

 Alelos letales. Son aquellos alelos que poseen una información deficiente para un carácter tan
importante que, sin él, el ser muere. Los alelos letales pueden producir la muerte a nivel del
gameto o a nivel del cigoto, pudiendo suceder entonces que el individuo no llegue a nacer, o
bien que muera antes de alcanzar la capacidad reproductora. Los alelos letales suelen ser
recesivos, por lo que necesitan darse en homocigosis para manifestarse.
 Cariotipo. Conjuntode cromosomasde unindividuo, característico de cada especieen cuanto
a forma, tamaño y número, que se perpetúan en la descendencia.
 Simbología. Losgenesse simbolizanconletras. Siesherenciadominanteysólo haydos alelos,
eldominante se representa con mayúscula y elrecesivo con minúscula. La letra escogida
puede ser la inicial del nombre del carácter dominante o la del carácter recesivo.

Otrotipo denotación,quepermiteademás simbolizar másdedosalelos, eseluso de


exponentes (superíndices). Un caso en el que se utiliza esta anotación es en la herencia de los
grupos sanguíneos humanos ABO.

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CARIOTIPO

Objetivo

Armar el cariotipo humano.

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PRACTICA N°17
Objetivo

Resolver Problemas de Genética mendeliana

PROBLEMAS DE GENÉTICA

1. Si una planta homocigótica de tallo alto (AA) se cruza con una homocigótica de tallo enano (aa),

sabiendo que el tallo alto es dominante sobre el tallo enano, ¿Cómo serán los genotipos y fenotipos
de la F1 y de la F2?

2. Al cruzar dos moscas negras se obtiene una descendencia formada por 216 moscas negras y 72
blancas. Representando por NN el color negro y por nn el color blanco, razónese el cruzamiento y
cuál será el genotipo de las moscas que se cruzan y de la descendencia obtenida. Sólo si las dos
moscas negras son híbridas (Nn) pueden tener descendientes de color blanco

3. El pelo rizado en los perros domina sobre el pelo liso. Una pareja de pelo rizado tuvo un cachorro
de pelo también rizado y del que se quiere saber si es heterocigótico. ¿Con qué tipo de hembras
tendrá que cruzarse? Razónese dicho cruzamiento.

Habrá que realizar un cruce prueba, es decir, cruzarlo con una hembra de pelo liso (genotipo
conocido por manifestar el carácter recesivo). Si aparece algún descendiente de pelo liso el individuo
es heterocigoto, pero si no aparece ninguno lo más probable es que sea homocigoto.

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