Una nueva visión de 
en imagen, han dado lugar a una situación mucho más  información S1 (película)).
complicada
y hermosa vista de las células procariotas 3 . Ahora vemos
la célula procariota.
estas células como conjuntos organizados de macromolecular
Máquinas 4 , optimizadas para viajar e interactuar
con ambientes complejos y dinámicos. Este aumento
biología de la 
Conocimiento de detalles cada vez más finos de microbios.
la biología celular ha sido habilitada por el asombroso techno
avances lógicos en imagen. En el siglo XVII,
criotomografía 
Antonie van Leeuwenhoek construyó microscopios con
poderes de aumento de varios cientos de veces, lo que permite
La primera visualización de organismos unicelulares. los
electrónica
desarrollo de microscopía electrónica en la primera mitad de
el siglo XX permitió la ampliación en el pedido
de cientos de miles de veces, trayendo resolución
Catherine M. Oikonomou y Grant J. Jensen desde el nivel de microorganismos hasta el de los átomos. Esta
Resumen | La criotomografía de electrones (TEC)  proporcionó una vista sin precedentes dentro de las celdas, y  y patogenia.
mucho
permite visualizar células intactas en 3D en un
de lo que sabemos sobre la estructura celular proviene de
estado esencialmente nativo a la resolución  estudios con microscopía electrónica.
'macromolecular' (~ 4 nm), revelando las  Sin embargo, debido al vacío que es necesario para
arquitecturas básicas de operar un microscopio electrónico, la preparación tradicional
nanomáquinas completas y sus arreglos in  Aration de muestras biológicas para microscopía electrónica
implicó fijación y deshidratación, lo que puede desnaturalizar
situ . Desde su inicio, ECT ha avanzado nuestro
estructuras e introducir artefactos engañosos 5,6 . Esta
Comprensión de muchos aspectos de la biología de 
se evitó la limitación con el descubrimiento de que delgado
las células procariotas, desde la morfogénesis hasta la Las muestras acuosas pueden enfriarse tan rápido que el agua
subcelular. las moléculas dejan de reorganizarse antes de que puedan  resumir la literatura publicada existente, resaltar
compartimentación y del metabolismo a interacciones cristalizar,
entre especies complejas. En esta revisión, que da como resultado la formación de una película delgada de
'vítreo
destacamos cómo la TEC ha proporcionado 
hielo '(un sólido amorfo que conserva la célula nativa
información estructural y mecanicista sobre la  estructuras) 7 . En criotomografía de electrones (TEC; también
fisiología de conocido como cryoET o CET), tal sam congelado
bacterias y arqueas y discutir las perspectivas para el  Se toman imágenes de los ples en un microscopio electrónico a
futuro diferentes
ángulos a medida que se inclinan, lo que resulta en una serie de
proyecciones
Página 1 imágenes que se pueden combinar computacionalmente para  Sobre poroso. Como primer ejemplo de cómo tiene la TEC En
Históricamente, las bacterias y las arqueas fueron vistas  producir
Una reconstrucción del espécimen en 3D. Por lo tanto, la TEC
principalmente
permite ver celdas enteras o partes de celdas con
como sacos indiferenciados de enzimas mezcladas (para 
examen resolución macromolecular (~ 4 nm) en 3D, en lo que es
ple, ver REFS 1,2 ). Avances tecnológicos, particularmente esencialmente un estado nativo (CUADRO 1; FIG.  que enfría la muestra a ~ 10 4 K s –1 , lo que lleva a
1)  (Suplementario
Una limitación importante de la TEC es el grosor de la
muestra, que debe ser inferior a ~ 500 nm para siempre
resolución. Sin embargo, el pequeño tamaño de muchas 
bacterias
y las células arqueales los hacen particularmente susceptibles a
Análisis de TEC. De hecho, la TEC ha permitido la 
observación
de muchos componentes de estas células, que incluyen: la 
célula
sobre y citoesqueleto; máquinas macromoleculares
involucrado en la división celular, la motilidad y la 
navegación; y
compartimentos subcelulares. Esto ha proporcionado nuevas
información sobre varios aspectos de la fisiología procariota
ogy, incluyendo metabolismo, cooperación entre especies
En esta revisión, destacamos los avances en nuestra estructura
conocimiento natural de las células procariotas que estos 
esfuerzos
han producido (para revisiones más centradas de la tecnología
aspectos nicos de la TEC, ver REFS 5,8,9 ; y para una revisión de
aplicaciones eucariotas de TEC, ver REF. 10 ) En un previ
Nuestra revisión de este tema, en 2007, discutimos todos
los estudios relevantes en ese momento, 15 en total 11 . Ahora 
eso
hay un orden de magnitud más estudios, rápidamente
Lo que sentimos son ejemplos particularmente 
interesantes. Como
una herramienta narrativa, organizamos nuestra discusión en 
términos de
desafíos hipotéticos y oportunidades que un solo
organismo celular podría haber encontrado durante el
curso de la evolución.
Separación del medio ambiente.
Uno de los primeros requisitos para el desarrollo de un
célula es la separación del medio ambiente por un selectivo
 
la criotomografía electrónica (TEC), las células en medios acuosos 
estándar se congelan por inmersión en rejillas de microscopio 
electrónico.
utilizando un criógeno eficiente, como una mezcla de etano y propano, 
formación de hielo vítreo (no cristalino) 7.156 . Las rejillas se mantienen 
posteriormente a la temperatura del nitrógeno líquido (~ 80 K).
Se adquiere una serie de imágenes por microscopía electrónica de  bloquean los electrones que están dispersados inelásticamente por  recientemente. Los modelos competidores propusieron una 
transmisión (TEM) a medida que se gira la cuadrícula, generalmente  muestras biológicas gruesas y contribuyen al ruido de  circunferencia
una o dos imágenes. Zernike y
disposición ferencial de los filamentos de glucano paralelos al
grados entre imágenes. La inclinación completa de 180 ° es imposible  Las placas de fase Volta aumentan el contraste de las imágenes, 
superficie celular, un andamio como disposición perpendicular
debido al aumento del grosor de la muestra en ángulos altos, también especialmente a bajas frecuencias espaciales, lo que permite la 
como intrusión del portamuestras. En la práctica, generalmente se  a la superficie, o cables en espiral. TEC de peptido purificado
resolución de proporcionó nuevos conocimientos sobre la 
recogen 120 ° a 140 °. Las imágenes de proyección resultantes son  los sacos de glucano revelaron que los hilos están alineados 
biología celular, discutimos el
entonces circunferir
reconstruido digitalmente en un tomograma 3D. Se pueden agregar  Envoltura de células micobacterianas, cuyo entendimiento Entialmente alrededor de la célula en ambas bacterias 
marcadores fiduciales (generalmente cuentas de oro densas en  Es vital para el desarrollo de la terapéutica. Gramnegativas
electrones) al (como Caulobacter crescentus y Escherichia coli ) 14
Hasta hace poco, la estructura de los agentes patógenos.
muestra para ayudar en la alineación durante la reconstrucción. La falta 
Se debatieron las envolturas de células micobacterianas, con  (FIG. 2b) y bacterias Grampositivas (como Bacillus
de imágenes de alto ángulo de inclinación introduce una 'cuña faltante'
Artefacto que disminuye la resolución de la reconstrucción a lo largo  varios subtilis ) 15 , con la principal diferencia entre estos sacculi
del eje z (paralelo al haz). modelos que proponen una membrana simple o doble simplemente siendo la presencia de múltiples capas en el más 
La limitación fundamental para la resolución en la TEC es el daño por  membrana. Microscopía electrónica tradicional de fija delgada grueso
radiación; En la imagen de un objeto único, la claridad de la secciones no pudieron resolver la estructura del myco Pared celular grampositiva 16 . Esta idea erosionó la noción
La imagen final está limitada por la cantidad de electrones dispersados  envoltura celular bacteriana, ya que las estructuras lipídicas  que los phyla Gramnegativos y Grampositivos son solo
antes de que se destruya la muestra. Además, el alto electrón­ son susceptibles relacionado distantemente (aunque continúa algún debate
la sección transversal de dispersión del material biológico limita el 
a reordenamientos causados por deshidratación y / o sobre la arquitectura grampositiva) 17 .
espesor de la muestra a menos de ~ 500 nm para una calidad de imagen 
razonable
solventes orgánicos durante la preparación de la muestra. Por  La TEC también ayudó a aclarar la 'clamidia relacionada
en TEM actualmente disponibles. Por lo tanto, el pequeño tamaño de  el contrario, anomalía ': el debate de larga data sobre si
algunas células procariotas las hace susceptibles a la TEC de células  La TEC es particularmente efectiva para preservar la estructura Las clamidias tienen una pared celular de peptidoglucano. Este 
enteras. lipídica debate
Las células más gruesas se pueden preparar para la TEC seccionando,  tures, y estudios que utilizan criosección vítrea , así como surgió de la observación de que las clamidias son sus
por ejemplo, mediante criosección vítrea 157 , aunque esta técnica células enteras han proporcionado la primera visualización  ceptible a los antibióticos peptidoglycantargeting, pero
puede introducir artefactos, particularmente artefactos de compresión 
directa intentos de purificar sacculi de estas bacterias tienen
por la presión de la cuchilla 158,159 . Un enfoque alternativo,
de sobres nativos en Mycobacterium bovis bacillus no ha tenido éxito Esta contradicción fue resuelta
fresado de haz de iones enfocado (FIB), utiliza una fuente de iones 
(típicamente galio) para fresar con precisión el material en un  Calmette­Guérin (BCG) y Mycobacterium smegmatis , cuando la TEC reveló una pared celular de peptidoglucano en 
congelado espeso y la bacteria Corynebacterium estrechamente relacionada dos
muestra, dejando una lámina delgada, de unos pocos cientos de  glutamicum . Estos estudios revelaron que el sobre Chlamydiae, ' Candidatus Protochlamydia amoebophila '
nanómetros de grosor, que es adecuada para imágenes por ECT 160­ de estas bacterias se compone de un citoplasma interno y Simkania negevensis 18 .
163 . Esto se expande
membrana y una membrana externa simétrica que Citoesqueleto
La utilidad de la TEC para células y tejidos procariotas y eucariotas 
es morfológicamente similar a la de Gramnegative Una envoltura celular reforzada permite que las células 
más grandes.
La resolución típica de la ECT de células completas es de unos pocos 
bacteria 12,13 (figura 2a) , que descarta fundamentalmente adopten diferentes
nanómetros, lo que permite la visualización de las formas y la  Morfología de envoltura diferente para micobacterias. diferentes formas La mayoría de las células mantienen formas 
organización de Soporte estructural especializadas.
complejos macromoleculares y cerrar la brecha entre la resolución casi  Las membranas celulares deben ser apoyadas contra la  construyendo un andamio interno de filamentos o cito
atómica de la cristalografía de rayos X o RMN turgencia. esqueleto. El citoesqueleto, que se entiende bien
espectroscopía y la resolución más amplia a nivel celular de  y presiones ambientales. La solución más bac en eucariotas, ha sido objeto de mucho debate en
microscopía óptica. Sin embargo, el desarrollo continuo de muchos
El uso de teria es la pared celular de peptidoglucano , que se crea procariotas Homólogos de las tres clases principales de
Las tecnologías prometen aumentar la resolución. Por ejemplo, los 
entrecruzando hebras de glucano largas y rígidas en una malla elementos del citoesqueleto eucariota (microfilamentos de 
detectores directos están reemplazando la carga de fósforo acoplada
dispositivos. En un detector directo, los golpes de electrones se  como red con enlaces cruzados de péptidos cortos. A pesar de actina, microtúbulos y filamentos intermedios) han sido
registran directamente (en lugar de a través de la producción de  la ubicuidad del peptidoglucano en microorganismos y
encontrado en genomas bacterianos, pero electrón tradicional
fotones) y pueden ser décadas de estudio de su estructura, detalles del arreglo
contados individualmente, aumentando la resolución 164 . La resolución  los métodos de microscopía no lograron identificar ninguno de
El tratamiento de las cadenas de glucano permaneció poco 
también aumenta a través de la adopción de filtros de energía, que Estos filamentos en las células bacterianas. Sin embargo, al 
claro hasta
proporcionar
mejor preservación estructural que el electrón tradicional Mecanismo regulador parece estar conservado a través de ubicaciones especializadas en células bacterianas. Protección 
métodos de microscopía, la TEC ha revelado una impresión procariotas y eucariotas, y de hecho pueden haber dado visual
siva diversidad de filamentos del citoesqueleto en células  subir al citoesqueleto bacteriano 25 . ómicas, por lo que los complejos de proteínas se examinan en
bacterianas La TEC también ha ayudado a identificar algunos  celdas duales individuales que utilizan algoritmos 
que median una gama de procesos. citoesqueletos de coincidencia de plantillas que
El homólogo de actina MreB tiene un papel en la disuasión de  filamentos que son únicos para las bacterias, como un único se basan en estructuras disponibles 35,36 , se ha utilizado para
la forma clase de proteínas poliméricas llamadas bactofilinas, que contar proteínas en la célula 37,38 y determinar su
mination en muchas bacterias con forma de bastón, aunque es  están casi universalmente conservados en bacterias. TEC de localización subcelular. Por ejemplo, un estimado
exacto C. crescentus reveló que dos bactofilinas forman un scaf 15% de los ribosomas 70S en Spiroplasma melliferum
La función sigue sin estar clara. Basado en microscopía de luz. doblar para reclutar enzimas biosintéticas de la pared celular  se encontraron asociados con la membrana en una
de MreB marcado con fluorescencia, se pensó que tanto tiempo para el orientación preferida 39 , y se vio que los ribosomas eran
filamentos helicoidales de MreB envueltos alrededor de la  poste de células acechadas , probablemente apoyando la  Del mismo modo periféricamente localizada en 
célula, por formación de ultrapequeño archaeal
haps coordinando globalmente la síntesis de la pared  esta delgada estructura de adhesión 26 . Las funciones de bacto Nanoorganismo acidófilo de la mina Richmond (ARMAN)
celular. Sin embargo, filin en otros organismos todavía se están descubriendo, pero células 40 . En  Leptospira interrogans 41 y Mycoplasma
no se vieron filamentos largos en los criotomogramas de parece reflejar un papel intermedio similar a un filamento en el pneumoniae 42 , la distribución celular de varios molec
seis especies bacterianas ( E. coli , C. crescentus , B. subtilis , citoesqueleto bacteriano los complejos ulares se mapearon mediante proteómica visual, 
Vibrio cholerae , Borrelia burgdorferi y Acetonema Otros elementos del citoesqueleto funcionan en procesos que
longum ) 19 , y posteriormente se determinó que tales  aparte de la determinación de la forma celular. MamK, otro demostró que grandes complejos pueden ubicarse dentro del
filamentos La proteína relacionada con MreB (y actina) se encuentra en el  celular y allanó el camino para el trabajo futuro para revelar el 
ser artefactos, al menos en el caso de un fluorescente MreB magneto más fino
fusión de proteínas 20 . Estos estudios destacan el poder de bacterias tácticas y, como lo muestra la TEC, forma filamentos detalles de la organización del proteoma  (figura 2d) .
TEC para dilucidar lo que no está presente, además de lo que que ayudan a alinear los magnetosomas en una brújula que Una forma en que las células procariotas organizan su interior
es. Estudios posteriores de microscopía de luz fluorescente orienta la bacteria en un campo magnético 27­31 (FIG. 2c) . es agrupando enzimas funcionalmente relacionadas en spe
mostró pequeños parches de MreB viajando dinámicamente Dos homólogos de tubulina, tubulina bacteriana A (BtubA) compartimentos cializados, que son análogos funcionales
alrededor de la celda 21,22 . Estos datos respaldan la idea de que y BtubB, se identificaron en Prosthecobacter  spp. 32 , de orgánulos eucariotas. Por ejemplo, foto verde
MreB no forma largos filamentos helicoidales alrededor del pero no se observó que formaran filamentos microtúbulos las bacterias sintéticas usan compartimentos llamados 
celular pero también destaca una limitación importante de la  paquetes in vivo 32 o in vitro 33 por electrón tradicional clorosomas
TEC: puede microscopía. Sin embargo, la TEC reveló que BtubA y para agregar pigmentos de recolección de luz, con cada cloro
solo proporciona instantáneas de las estructuras celulares, sin  BtubB forma tubos de filamento que son muy similares a algunos contienen hasta 250,000 bacterioclorofila
el microtúbulos eucariotas, aunque solo comprenden inco  moléculas 43 . La TEC se utilizó para revelar la estructura y
dinámicas inherentes a muchos procesos celulares. protofilamentos en lugar de los 13 generalmente encontrados distribución de clorosomas (que cubre aproximadamente el 
Un homólogo de filamento intermedio, la crescentina, es 70% de
conocido por tener un papel importante en la definición de la  en eucariotas 34 . Estos hallazgos desafían la idea de que la membrana citoplasmática) y su asociación con
curva Los microtúbulos son una estructura exclusivamente  centros de reacción en la membrana 44,45 . Esto habilitado, para el
forma celular de C. crescentus . La TEC ayudó a identificar eucariota. TEC primera vez, el mapeo de los centros de reacción, que fueron
nuevos filamentos de una enzima metabólica, CTP sintasa, También ha sido útil para caracterizar la estructura y se encuentran agrupados de manera irregular en todo el mem
que parecen regular negativamente la crescentina para definir  función de varios otros filamentos que están involucrados en brana 45 . Del mismo modo, la foto de concentrado de 
el división celular (ver abajo). cianobacterias
curvatura correcta de la celda 23,24 . Curiosamente, la asamblea Organización subcelular enzimas sintéticas en la membrana interna, expandiéndose
La concentración de CTP sintasa en filamentos parece inhibir  Además de tener un citoesqueleto y un definido sus capacidades de recolección de energía elaborando
su forma, las células se benefician de organizar sus interiores en Invaginaciones de la membrana. La extensa laminar
actividad, que refleja un mecanismo más general de regulación otras maneras. Uno de los primeros objetivos de la TEC fue  estructura 46,47 , y ensamblaje en respuesta a la luz 48 , de estos
ing actividad enzimática por polimerización. Notablemente,  abordar el las membranas intracitoplasmáticas se caracterizaron por
esto cuestión de si los componentes proteicos se localizan en TEC. El hallazgo adicional de que estas membranas pueden
brotar en estructuras vesiculares completamente separadas  que Leptospira spp. organizar su ADN en paquetes de que les permite pasar a nuevos y posiblemente más
desafíos filamentos paralelos 56 y esa bacteria ultrapequeña, que ambientes benéficos. Quizás porque la motilidad es de
la suposición de que los orgánulos cerrados por membrana que fueron descubiertos recientemente con la ayuda de un portátil importancia fundamental, o por el buzo
no están unidos a la membrana plasmática solo se encuentran sistema de campo para sumergir muestras de diversos sity de ambientes que habitan los microorganismos, allí
en células eucariotas 49 . ambientes naturales para ECT 57 , tienen densidad similar Es una sorprendente variedad de formas por las cuales estas 
Además de los compartimentos fotosintéticos, la TEC Empaquetamiento de filamentos de ADN putativos 58 . Estudio  células se mueven.
también ha aclarado la estructura de los carboxisomas, adicional En muchos casos, la motilidad está mediada por nano celular
que utilizan las cianobacterias y la quimioterapia autotrófica se requiere para examinar cómo pueden usar los  máquinas (grandes, nanometrescale multiprotein com
bacterias para concentrar ribulosa 1,5 bisfosfato microorganismos plexos) cuyas arquitecturas generales han sido resuelto por 
carboxilasa / oxigenasa (RuBisCO), probablemente la más Empaquetamiento de ADN para regular la transcripción. ECT. Nanomáquinas involucradas en
abundante proteína en la tierra y un catalizador crucial en
fijación de carbono 50 . La TEC reveló que los carboxisomas la motilidad con frecuencia abarca la envoltura celular y 
tienen conchas icosaédricas proteicas irregulares y que Se produce otro tipo de diferenciación subcelular. contiene
estos proyectiles y la red interna RuBisCO probablemente en C. crescentus , que se adhiere a una superficie por medio componentes extracelulares, periplásmicos y citoplasmáticos.
forma simultánea 51–53 . Curiosamente, carboxysomes Las estructuras de las piezas individuales de nano máquinas.
de un tallo largo y delgado. Microscopía de luz correlacionada y TEC
fueron vistos para asociarse con otras estructuras subcelulares, ayudó a identificar cuatro proteínas (StpABCD) que se forman puede resolverse mediante cristalografía de rayos X y / o RMN
gránulos de almacenamiento de polifosfato (discutidos a  espectroscopia, pero a menudo no está claro cómo funcionan 
bandas en el tallo, que actúan como barreras generales para
continuación), difusión de periplásmico, membrana interna y externa las piezas
lo que sugiere una relación funcional entre encajan, porque el complejo no puede ser puri
proteínas de membrana, compartimentando la célula y
estos dos compartimentos 53 . TEC también reveló el borrando aún más el límite entre eucariotas fied intacto o no se puede ensamblar in vitro . Por lo tanto,
estructura poliédrica bastante heterogénea de otra y características procariotas 59 . La TEC es invaluable para revelar la estructura de la 
microcompartimento bacteriano responsable de Finalmente, algunos apéndices extracelulares también actúan  comunidad
La utilización de propanodiol. Esta microcompartida para complejo completo en su estado intacto in vivo . La ubicación 
ment también tiene enzimas agrupadas rodeadas por un  diferenciar espacialmente los procesos celulares. Por ejemplo, de
delgado La TEC reveló las estructuras del tallo que ironoxidizan componentes específicos pueden ser determinados por com
cáscara de proteína, lo que indica que esta organización bacterias ( Mariprofundus ferrooxydans y Gallionella  emparejar estructuras ECT de tipo salvaje a las de mutantes
puede representar una característica estructural general de  como bacterias) para concentrar la precipitación de hierro en el que las proteínas duales individuales se eliminan o
bacteriana desde su superficie interior o general, donde estaría etiquetado Este mapa de localización se puede utilizar para 
microcompartimentos 54 . perjudicial 60 . Del mismo modo, la TEC ha aclarado la  informar
ECT incluso ha podido revelar cierta información microscopía electrónica de acoplamiento de modelos atómicos en el
estructura
ción sobre cómo se organiza el ADN dentro de las células  tura de los nano agregados férricos que decoran el Densidad de TEC, que finalmente permite la construcción de
vivas. superficie de las bacterias planctónicas reductoras de  Modelos pseudoatómicos del sistema completo.
De manera similar a los eucariotas, las células bacterianas  hierro 61 . Gramo Una de las nanomáquinas más comunes involucradas en
tienen sub bacterias negativas en ambientes acuosos con frecuencia La motilidad es el flagelo. Estudios de TEC, y en particular
organización celular de su material genético, empaque promedio del subtomograma , han mostrado la ubicación detallada
secretan vesículas de membrana externa para fines 
sus cromosomas en el nucleoide (el genoma metabólicos, de la mayoría de los componentes del motor flagelar 63–65 y
que contiene la región de la célula). TEC de Bdellovibrio y la TEC reveló una inteligente adaptación de este sistema para su arquitectura en muchas especies bacterianas diversas 66
(Figura 3a) . Esto ha revelado un sorprendente número de
bacteriovorus , una pequeña bacteria depredadora, reveló El ambiente parcialmente hidratado del suelo, en el cual
una compactación espiral retorcida del nucleoide con adaptaciones periféricas específicas de la especie alrededor de 
a Delftia sp. Cs14 forma 'nanopods' que están compuestos
ribos somes ubicados a lo largo de la periferia. Diferente de tubos extendidos contiguos a la capa superficial un com
Se observaron niveles de compactación en diferentes células, mon núcleo estructural 64–67 . Por ejemplo, motores en algunos
(Slayer) y que entregan vesículas a cierta distancia de
incluyendo un mutante MreB, lo que sugiere que el ADN la celda 62 . organismos, como Borrelia burgdorferi , contienen collares
el embalaje puede regular la transcripción, de manera similar a  eso puede funcionar para estabilizar el estator a un par más 
Motilidad
lo que alto.
Las células procariotas han desarrollado mecanismos 
se observa para la cromatina eucariota 55 . TEC ha demostrado La TEC se utilizó con éxito para visualizar estructuras clave 
complicados.
que
se perdieron en preparaciones purificadas anteriores, incluida  en el cual el cilindro rígido de la célula helicoidal rueda dentro  sp. AMB1, que tienen vesículas cargadas con ferroso
la del vaina de la membrana externa 78 . TEC del magneto cristales que están unidos a la membrana citoplasmática 28
estator y el aparato de exportación, que es responsable (FIG. 2c) , y Magnetovibrio blakemorei , que tienen
para el autoensamblaje del flagelo 63,68 . Además, el la bacteria táctica MO1 identificó un paquete revestido de magneto somes que están completamente separados del cito
capacidad de la TEC para resolver el macro molecular  flagelos extracelulares que, junto con fila delgada asociada membrana plasmática 85 . Curiosamente, la TEC 
completo puede girar en una configuración de engranaje de  de Desulfovibrio
estructura de toda la máquina, en oposición a la doble  enclavamiento
Magneticus RS1 llevó a la sugerencia de que los 
individual que puede generar una tremenda potencia y velocidad 79 .
magnetosomas
partes, ha proporcionado información sobre su propia mecánica Otras bacterias usan sistemas no flagelares para motil
en esta bacteria no están rodeadas de membranas 84 .
corbatas. Por ejemplo, en especies que usan flagelos  ity. Por ejemplo, Flavobacterium johnsoniae exhibe
Más extendida que la magnetotaxis es la quimiotaxis,
periplásmicos motilidad deslizante pero no contiene genes que codifican que integra señales sobre el entorno químico
para impulsar la rotación del cuerpo celular (en lugar de un  estructuras de motilidad conocidas. El mecanismo de motil
en una cascada de transducción de señales que controla 
remo La bacteria de esta bacteria siguió siendo un misterio hasta la  flagelos
como flagelo extracelular), la TEC reveló anillos más grandes TEC.
Lar rotación o extensión del pilus. Gran parte de nuestro 
eso puede producir el aumento de torque que se requiere mechones revelados de filamentos delgados unidos al exterior conocimiento.
para impulsar la rotación de células completas 63 . Finalmente,  membrana. Se demostró que estos filamentos tienen un papel
sobre la estructura macromolecular de la quimiotaxis
la TEC también destapa en la motilidad basada en la adherencia 80 (figura 3b) . Además, El sistema proviene de una serie de estudios de TEC que 
introdujo la secuencia modular de ensamblaje del flagelo La TEC reveló cintas largas del citoesqueleto que se usan
muestran que
en B. burgdorferi : apertura del canal central y por mollicutes helicoidales para impulsarse a través de sur los quimiorreceptores están unidos en un hexágono
montaje de la varilla, montaje del gancho y finalmente caras; los cambios en la longitud relativa de estas cintas son
celosía de anillos interconectados 71,86–93 (FIG. 3c) . ECT revelado
formación del filamento 68 . se pensó convertir toda la celda en una hélice helicoidal 81 . que esta arquitectura se conserva a través de las bacterias 94 y
Además de la estructura de los flagelos, la TEC tiene La TEC también identificó que M. pneumoniae usa un elab arqueas 95 , así como entre la membrana y el cito
ayudó a identificar detalles de su función en diferentes estructura de fijación orate que consiste en un gran matrices plasmáticas 96 , sugestivas de la utilidad fundamental
sistemas de motilidad. Por ejemplo, en las espiroquetas  núcleo articulado en el citoplasma y adhesión asociada de esta arquitectura para la transducción quimiosensorial. En
patógenas, proteínas en la superficie para mediar lo que se piensa que otro ejemplo del poder del subtomograma averag
como Treponema denticola, Treponema pallidum y ser un movimiento parecido a un gusano 37,82 . En otro mech ing y microscopía electrónica de acoplamiento, ECT se utilizó 
B. burgdorferi , los flagelos periplásmicos permiten que las  anismo, las bacterias ironoxidantes discutidas anteriormente  para
células son generar un modelo pseudoatómico de este extenso sub
penetrar en el tejido 64,65,69–71 . Mientras que el electrón  pensado para impulsarse, al menos en parte, por el estructura celular, revelando las interconexiones entre
tradicional extrusión de sus tallos mineralizantes 60 . Por último, Listeria componentes quimiosensoriales y apoyando la idea de que
preparaciones de microscopía de B. burgdorferi mostraron un  monocytogenes puede remodelar el citoesqueleto de actina de  cambios conformacionales en un hexágono de receptores
bollo su podría transmitirse a hexágonos adyacentes, por lo tanto ampli
dle de flagelos, similar al encontrado en otras especies 72 , host en 'colas de cometas', que la TEC ha demostrado  escuchando la señal y explicando la notable sensibilidad
La TEC reveló que en este caso los flagelos forman una  comprender del sistema 97,98 (figura 3c) . Otros estudios de TEC tienen pro
costilla plana manojos de filamentos paralelos, hexa gonalmente  visiones instructivas sobre el mecanismo de activación de la
bon. Esta estructura es indicativa de un mecanismo para ejercer empaquetados que sistema (en el que el sustrato se une en el extremo proximal
forzar el cilindro celular y propagar una onda a lo largo del movimiento de fuerza, tal vez empujando o apretando el del quimiorreceptor desencadena un cambio conformacional en
eje largo de la celda, que impulsa la celda hacia adelante 73 . bacteria hacia adelante, destacando la notable capacidad la cinasa unida en su punta distal) 99 y dentro del conjunto
Otros estudios de TEC han identificado los roles de los  de patógenos para remodelar las células huésped para satisfacer de matrices de subunidades de trimersofreceptordimers 100 .
individuos. sus necesidades 83 . División
proteínas en B. burgdorferi conjunto flagelar 74­76 y tienen Navegación Las células exitosas se propagan a través de la división, un 
demostrado que se requiere rotación del motor para la  Con la motilidad viene el problema de decidir dónde proceso que
formación ir. Ya hemos mencionado una orientación potencial presenta muchos desafíos A continuación, discutimos cómo 
de la cinta flagelar 77 . TEC de una espiroqueta mutualista, mecanismo ­ magnetotaxis. La TEC ha revelado la estructura ECT
Treponema primitia , prestó apoyo a un modelo de motilidad Ture y formación de cadenas de magnetosomas en varios ha aclarado los mecanismos moleculares de dos de estos
especies 27–30,84,85 , incluyendo Magnetospirillum magneticum
procesos: segregación de ADN y citocinesis. ualized directamente por ECT en C. crescentus . En este  coordina la remodelación de la pared celular para la 
Primero, para asegurar que ambas células hijas sean  organismo constricción durante
funcionales la división es asimétrica, y un estudio temprano de TEC mostró división celular 112,113 .
copias, la celda debe distribuir uniformemente un número bajo  que la membrana interna completa la constricción antes En lugar de usar FtsZ, algunas arqueas usan endosomas
de copias la membrana externa 107 . Los tomogramas posteriores  complejos de clasificación necesarios para el transporte (ESCRT) pro
estructuras La estructura de número bajo más obvia revelaron rela Teins para dividir. ESCRT media la escisión de membrana
En la célula está el cromosoma. La TEC ha ayudado a  Totalmente pocos filamentos de arco de FtsZ colocados  eventos en muchas arqueas y eucariotas, pero el
identificar alrededor del El mecanismo exacto ha sido objeto de mucho debate.
una zona de exclusión de ribosomas en los polos de C.  división del sitio 108 , en contraste con los modelos anteriores de Sin embargo, la TEC de dividir Sulfolobus acidocaldarius
crescentus espesor, reveló un cinturón de filamentos en la zona de constricción, 
células donde PopZ ata cromosomas replicados en anillos FtsZ completos basados en microscopios de  sup
cualquier extremo de la celda para facilitar la  fluorescencia temprana portar un modelo en el que los filamentos en espiral se 
segregación 101,102 . Además de dupdo. Estas observaciones apoyan un modelo de división 109 contraen
ción al cromosoma, diferente extracromosómico en el que los filamentos de FtsZ proporcionan la fuerza la membrana celular 114 , aunque se requiere más trabajo
los plásmidos están presentes en diferentes números de copias,  de constricción a través de rondas iterativas de polimerización para probar esto
algunos ción, apego, cambios conformacionales reunidos en La citocinesis en sí ayuda a dividir algunas células fea
veces tan solo uno por celda. TEC de E. coli reveló uno la membrana y la despolimerización 108,109 . Por el contrario, tures, como la cadena de magnetosomas en magnetotactic
solución para asegurar que estos plásmidos sean igualmente  El trabajo posterior de la TEC proporcionó evidencia de  bacterias mencionadas anteriormente. TEC identificó un 
seg paquetes de FtsZ mecanismo
regateado: el homólogo de actina ParM, presente como doble filamentos que forman anillos completos que rodean las células en el que MamK localiza la cadena de magnetosomas a la
filamentos helicoidales, coloca los plásmidos en los extremos  durante célula media, que garantiza una segregación adecuada de la 
de ing las últimas etapas de la división y propuso un diferente  cadena
el nucleoide para la división 103 , y cada plas replicado modelo de constricción basado en el deslizamiento de  a ambas células hijas por citocinesis 115 .
el par medio probablemente sea separado por un par dedicado filamentos Sobrevivir a tiempos difíciles
de dobletes antiparalelos ParM 104 (figura 4a) . Otras bacterias, Las fuentes de nutrientes en el medio ambiente no son de 
ing 110 (figura 4b) . Las discrepancias entre estos observadores
incluyendo Bacillus thuringiensis , use un tubulin homo ninguna manera
Las estaciones destacan dos inconvenientes de las imágenes de 
logue, TubZ, para segregar plásmidos. TubZ también forma un garantizado, y las células con frecuencia enfrentan escasez. A
TEC: el
superestructura helicoidal doble, lo que sugiere la prepararse para esos tiempos de escasez, tanto bacterias como 
El efecto de "cuña faltante" (ver CUADRO 1 ) significa que las 
evolución vergente de filamentos bacterianos para este papel  arqueas
características,
de Almacenar nutrientes esenciales en gránulos de 
como los filamentos, no se pueden rastrear por completo
segregación de plásmidos 105 . almacenamiento durante tiempos
la circunferencia de la célula; e imágenes estáticas, no importa
Una vez que los contenidos están segregados, la celda debe  de suficiencia, y los detalles de estos gránulos han sido
qué tan alta es su resolución, solo puede proporcionar pistas 
físicamente revelado por ECT. Tanto en Grampositive como en Gram
para
dividir. La visualización de este proceso por ECT ha  bacterias negativas, incluyendo C. crescentus , polifosfato
mecanismos de procesos dinámicos. Los filamentos de FtsZ 
proporcionado se almacena en estructuras esféricas uniformes que carecen de
son
ideas mecanicistas tanto para bacterias como para arqueas. Más límite de la membrana, lo que indica que se forman a través de
de hecho, se necesita un trabajo altamente dinámico y adicional
las bacterias usan FtsZ, una GTPasa que es homóloga a  un mecanismo de agregación local 116,117 . C. crescentus también
para
eucariota almacena carbono en estructuras un poco más grandes y menos
resolver su mecanismo constrictivo.
otul tubulina y FtsA, un homólogo de actina, para contraer regulares 116 .
La TEC también ha ayudado recientemente a mostrar que dos 
la célula. La TEC ha demostrado que FtsA forma  D. Magnetus ha demostrado concentrar hierro
profesionales
protofilamentos y fósforo en un compartimento unido a la membrana,
Teins, MinC y MinD, forman copolímeros que inter
que ata los filamentos de FtsZ a la membrana 106 . Sin embargo, aunque no está claro si esto es para fines de
actuar con la membrana y posicionar los filamentos FtsZ
Los detalles del mecanismo de acción de FtsZ permanecieron secuestro o almacenamiento 84 . Tiendas Cupriavidus necator
en el plano de división 111 . El uso de TEC también condujo a
poco claro hasta que los filamentos y el proceso de división  polihidroxibutirato en compartimentos que no son
fueron visibles la descripción de una proteína C. crescentus , DipM, que
unidos a la membrana pero en cambio están recubiertos por  El Slayer puede representar del 10 al 15% de la proteína total  Ensamblaje y desmontaje transitorios intermedios, alto
una proteína en el iluminando la utilidad de esta técnica para identificar pre
se descascaran y forman pequeños gránulos que luego se  celda 122 , pero su estructura era difícil de resolver usando tradi Estructuras y conformaciones muy poco caracterizadas 130 .
unen 118 . métodos nacionales; aunque el asesino es una red cristalina, Una estructura tipo T6SS también es responsable de un notable
La TEC también reveló que el arqueón Methanospirillum es una muestra pobre para métodos como el cristal de rayos X interacción entre bacterias y eucariotas multicelulares.
hungatei contiene varios polifosfatos amorfos lografía, al menos en parte debido a su curvatura natural Las larvas de un gusano de tubo marino seleccionan superficies
cuerpos que se encuentran en los extremos de la celda 119 . alrededor de la celda Una de las primeras aplicaciones de la  cubiertas por
Para lidiar con los tiempos de escasez, algunas especies  TEC fue biopelículas bacterianas de Pseudoalteromonas luteoviolacea a
bacterianas para visualizar el Asesino de Pyrobaculum aerophilum intacto  establecerse y diferenciarse en adultos sésiles. ECT revelado
forma metabólicamente inerte y ambientalmente favorable células arqueadas 123 , y la TEC se aplicó más tarde a la Gram que las señales que reconoce el gusano de tubo son
Esporas tectivas. Estudios de TEC de un Gramnegativo raro estructuras contráctiles asociadas a metamorfosis que son
miembro endosporeforming del filo Firmicutes bacteria negativa C. crescentus 124 . Sorprendentemente, estos formado por una red interconectada de T6SSlike piocinas que
reveló que la membrana interna de la célula madre sur los estudios revelaron que Slayer no es una red uniforme; se desarrollan dentro de las células de P. luteoviolacea y se 
redondeando la espora se invierte y eventualmente se convierte en cambio, tiene una heterogeneidad significativa a través de la liberan por lisis
La membrana externa del germinativo Gramnegativo célula para formar una micrometrescala, extracelular bien organizada
celda 120 (figura 4c) . Este hallazgo inesperado sugiere que el e incluye regiones de capas dobles apiladas, lo que sugiere bola de espiga que consiste en aproximadamente 100 piocinas 
proceso de esporulación podría haber dado lugar a la diderm ensamblaje desde múltiples puntos de nucleación. y asociadas
plan celular . La TEC también ha ayudado a identificar el 
La cooperación puede ocurrir dentro o entre especies y proteínas 131 (figura 5c) . La función de esta estructura para el
polifosfato incluso reinos, y a menudo involucra estructuras especializadas La bacteria sigue siendo desconocida.
gránulos de almacenamiento en Gramnegativo pero no en  Tures que permiten el contacto físico entre organismos. Alternativamente, las células procariotas podrían comerse el 
Gram Por ejemplo, los estudios han utilizado la TEC para obtener  susurro.
esporas positivas, lo que sugiere que estos gránulos pueden imágenes de: bours, como lo ejemplifica B. bacteriovorus , que perfora
Ayuda a mantener la membrana externa durante la espora la vasta matriz extracelular de túbulos huecos (conocida el periplasma de su presa y se come su estafa citoplasmática
crecimiento 16 . Además, la TEC también ha demostrado que  como cánulas) que ancla una comunidad de Pyrodictium carpas ECT proporcionó nuevos conocimientos sobre este 
mem abyssi el uno al otro 125 ; contactos entre células entre células proceso al
vesículas de brana que son secretadas por colonias esporuladas de varias comunidades arqueales 126.127 ; y la lucha revelando una flexibilidad inusual de la pared celular que 
de Streptomyces coelicolor están densamente empaquetados  estructuras de gancho conocidas como hami que el euryar SM1 proba
con pro chaeon usa para anclarse en comunidades simbióticas bly subyace a la capacidad de B. bacteriovorus de exprimirse
teínas (incluidas enzimas metabólicas, antioxidantes y con bacterias 128  (figura 5a) . su presa 132 .
factores de resistencia) que pueden ayudar a la  En lugar de cooperar, las células procariotas podrían ser ben
Patogenicidad
supervivencia 121 hacer más por matar a sus vecinos. Por ejemplo, TEC
Una forma particularmente importante de interacción entre
reveló que el sistema de secreción tipo VI (T6SS), un celular
procariotas y sus células vecinas es patogenicidad
Cooperación y competencia. nanomáquina que se caracterizó por primera vez en V.  a anfitriones humanos. Muchas de las adaptaciones que 
En la naturaleza, las células procariotas están rodeadas por otro cholerae y convierten un bacte
órgano. es utilizado por muchas bacterias Gramnegativas para combatir El rio en un patógeno eficiente implica cambios estructurales,
ismos, tanto monocelulares como multicelulares; éstos  bacterias y la TEC ha proporcionado información sobre los mecanismos 
incluyen y células eucariotas, es una 'daga molecular' cargada por  de
Conespecíficos, simbiontes, competidores, depredadores y  resorte patogénesis de varias bacterias.
presas. que es estructuralmente homólogo a una cola de fago contráctil Primero, los patógenos deben detectar y entrar a su huésped.
(CUADRO 2) . La TEC visualizó las conformaciones dinámicas de
Para adaptarse a dicho entorno, las células pueden recubrir su  Además de las adaptaciones patogénicas al flagelar.
envoltura T6SS, incluyendo llenado extendido (cargado) y contratado motor que se discutió anteriormente, muchos adapta estructural
lopes con proteínas, creando una capa que proporciona  tubos vacíos (disparados), descubriendo así un mecanismo Las sensaciones ocurren en la punta de la celda, que la TEC ha 
protección que la fuerza de contracción impulsa la translocación de demostrado que puede
acción contra la depredación o media la fijación de  la aguja T6SS en la celda objetivo 129  (figura  ser complejo en bacterias patógenas. Por ejemplo, ECT de
5b) . Adicionalmente,
biopelículas. Campylobacter jejuni reveló una punta celular elaborada con
 Crio­PALM y ECT correlacionados permitieron la identificación de
gránulos de almacenamiento, extensas matrices de  el cuerpo basal es estructuralmente similar al motor flagelar, poder de la TEC para obtener imágenes de estructuras nativas.
quimiorreceptores y aunque exhibe diferencias clave, incluyendo una más amplia La TEC puede ser útil para caracterizar agentes terapéuticos
un complejo motor flagelar, todos los cuales se cree que canal que puede permitir la secreción de al menos parcialmente que se dirigen a las bacterias patógenas. Por ejemplo, la TEC 
Ayuda a mediar la invasión de las células huésped 133 . Del  sustratos plegados (en lugar de subunidades de flagellina  fue
mismo modo, ECT de desplegadas) solía ver cómo un anticuerpo contra B. burgdorferi lyses
Leptospira spp. revelaron una amplia gama de  y mayor elasticidad 136­138 . Además, patogénico las células induciendo proyecciones de membrana externa que
quimiorreceptores Se observó que los T3SS en Y. enterocolítica se agrupaban , tal probablemente aumente la permeabilidad 144 . La TEC también 
que probablemente sean importantes para detectar las células  vez se puede usar
huésped 56 . TEC para mejorar la secreción en una célula objetivo 139 y clamidia completo en la identificación de futuros objetivos 
de T. pallidum y T. denticola identificaron cono complejo También se observó que trachomatis orientaba una serie de  terapéuticos. Por ejemplo,
como estructuras periplásmicas en la punta de la célula, aunque T3SS para La TEC ha demostrado que un Mycobacterium 
La función de estas estructuras sigue siendo desconocida 65,134 . contactar con la célula objetivo 140 (figura 5d) . Más tarde, mayor  marinum conocido
Una vez que una célula ingresa a su host, debe evadir al host. resolución factor de virulencia, SecA2, ayuda a mantener la pared celular
sistema inmunitario, y los estudios que utilizan la TEC han  TEC y subtomograma de promedio de minicélulas de S.  integridad 145 , lo que sugiere que apuntar a esta proteína
proporcionado flexneri podría ser una estrategia efectiva para combatir micobacterias
información clave sobre cómo los patógenos adaptan su  reveló, por primera vez, cómo el flagelar Cring tiene infecciones Del mismo modo, la TEC de Acinetobacter 
superficie celular adaptado a la plataforma de clasificación de los injecti baumannii
para este propósito. Por ejemplo, T. pallidum exhibe un com algunos, un complejo citoplasmático que selecciona un efector  identificado un mecanismo patogénico que se basa en
membrana externa flexible y lábil que no está atada a la específico suministro de vesículas de membrana externa de moléculas 
capa de peptidoglicano como en la mayoría de las células  proteínas para la secreción 141 (figura 5d) . efectoras.
Gramnegativas, ena Una vez en una célula huésped, algunas bacterias patógenas,  Curiosamente, se observó que estas vesículas se formaban en 
Bling la bacteria para arrojar la membrana externa (que como áreas
contiene múltiples componentes que son reconocidos por el como Chlamydia spp., se diferencian de la infección con peptidoglucano irregular y concentraciones subletales
sistema inmunitario) y de ese modo evadir al huésped  Tious cuerpos elementales para reticulado metabólicamente activo iones de un antibiótico peptidoglycantargeting mejorado
inmunitario cuerpos . Durante este proceso, muchas adaptaciones  formación de vesículas 146 .
respuesta 65 . Del mismo modo, la TEC de B.  patogénicas Finalmente, la TEC también puede ayudar a diseñar estrategias
burgdorferi reveló un que ya no se requieren para sobrevivir dentro del huésped Esta  contra
vaina de membrana externa lábil 70 . Curiosamente, la TEC  perdido. Por ejemplo, la TEC de C. trachomatis mostró que patógenos resistentes a los antibióticos. Muchas células 
también bacterianas tienen
se observaron eventos de fusión celular en Borrelia spp., así  El contacto celular mediado por T3S induce bacterias internas mecanismos de defensa evolucionados contra los antibióticos, 
como dos Zation en vacuolas tempranas, donde la polarización y T3SSs incluidos
células que comparten una única membrana externa, lo que  están perdidos 140 . Por el contrario, la TEC también reveló las  ing la bomba de eflujo multidrogas, una nanomáquina celular
sugiere que adaptaciones que abarca las membranas internas y externas y selectivamente
estas bacterias usan esto como una estrategia para diversificar  que acompañan la diferenciación de C. trachomatis de Exporta antibióticos desde el citoplasma. La estructura es
la superficie reticular cuerpos en cuerpos elementales, como un cuerpo  demasiado inestable para ser purificado, lo que impide la 
antígenos para evadir la inmunidad del huésped 13 Las bacterias cercano mayor parte de la estructura
patógenas usan otra nanomáquina que duplicando el grosor de la membrana externa 142 . TEC métodos de determinación TEC y subtomograma promedio
de otro patógeno, Chlamydophila abortus , mostró ing reveló parte de la estructura y posible ensamblaje
está relacionado con el motor flagelar para facilitar la  que tiene una estructura y diferenciación T3SS similar de una multidroga de Pseudomonas aeruginosa reconstituida
infección. estrategia para C. trachomatis 143 . TEC también identificó que  bomba de eflujo 147 , que ofrece la promesa de resolver la 
TEC de Shigella flexneri , Salmonella enterica y Yersinia un totalidad
entero colitica identificó la estructura completa de la etapa de desarrollo de clamidias previamente identificada, estructura. Esta estructura in situ probablemente dilucidaría
sistema de secreción tipo III (T3SS) inyectable. Este struc la etapa en forma de media luna, en realidad era un artefacto de El mecanismo de la bomba de eflujo, que podría informar
ture consiste en un cuerpo basal y un canal de secreción que la Nuevas estrategias terapéuticas para combatir la resistencia a 
entrega proteínas efectoras directamente a una célula  fijación química y deshidratación utilizada en la tradicional los antibióticos.
objetivo. los preparaciones de microscopía electrónica 6 , destacando el
panorama poder de la TEC en el futuro cercano. Una dificultad clave en  copia y reconstrucción de partículas individuales ), así como con
En comparación con la escasez de información disponible. la TEC información sobre ubicación y dinámica obtenida de
antes de 2002, estamos presenciando una explosión de nuevos, está identificando macromoléculas de interés; el struc estudios usando microscopía de luz fluorescente, estamos
información de alta resolución sobre arreglos moleculares tures de muchos complejos de proteínas permanecen  cada vez más cerca del objetivo de resolver completamente la 
Ment dentro de las células procariotas. Esta revisión destaca indeterminados estructura
La impresionante diversidad de ideas estructurales sobre el  porque no pueden identificarse sin ambigüedades en el de células procariotas.
CCB ambiente celular lleno de gente. Por esa razón, muchos
fisiología terrestre y arqueológica que ya ha surgido Los estudios de TEC hasta la fecha se han centrado en 
de TEC de células enteras en un estado nativo. Por ejemplo, estructuras para las cuales
por primera vez, la disposición de los polímeros en la celda La morfología o localización ya era conocida. A
el muro se puede visualizar directamente, lo que ha permitido identificar nuevas estructuras, necesitamos tecnologías 
observación de simi estructurales previamente no apreciados mejoradas
laridades entre bacilos grampositivos y gramnegativos para localizarlos Microscopía de luz correlacionada y TEC
teria Del mismo modo, la TEC reveló la interconversión del  se ha aplicado con éxito para identificar varias estructuras
exterior tures in vivo , y el reciente desarrollo de correlación
y membranas internas durante la esporulación, lo que sugiere  cryoPALM y ECT ha aumentado la precisión de esto
una técnica, que permite la localización de proteínas etiquetadas
nueva hipótesis simple para la evolución del diderm dentro de unos pocos cientos de nanómetros en una 
plan celular. También por primera vez, la TEC ha demostrado  celda 130 . Anticipado
directamente mejoras tecnológicas podrían mejorar aún más local
que las bacterias no solo tienen un citoesqueleto, sino que esto ización a decenas de nanómetros, en 3D. Sin embargo,
El citoesqueleto es rico y variado en su función. Del mismo  agregar un fluoróforo voluminoso a una proteína de interés 
modo, celular puede
la compartimentación ya no es una característica restringida introducir artefactos estructurales y de localización, por lo que 
a eucariotas; unido a la membrana, incluso en brote, com el
se han observado particiones y muchas estructuras aplicación potencial de pequeñas moléculas fluorescentes 148
tienen localizaciones subcelulares restringidas. ECT también  al etiquetado de proteínas in vivo , quizás mediante el uso de
tiene los aminoácidos no naturales 149 son intrigantes. Otro enfoque
permitió la visualización de nanomáquinas intactas, la es localizar proteínas de interés directamente en tomogramas,
complejos macro moleculares que realizan diversas funciones potencialmente con la ayuda de electronmicroscopyspecific
de motilidad a interacciones entre especies y etiquetas, como las basadas en metalotioneína genéticamente 
patogenicidad La complejidad de estas máquinas (que codificadas
puede comprender muchas copias de docenas de proteínas  o etiquetas basadas en ferritina con una densidad que resistiría
distintas) fuera en imágenes de microscopía electrónica 150­153 . Otro 
y sus ubicaciones que abarcan compartimentos celulares complejo
(citoplasma, periplasma y espacio extracelular) media estructuras (por ejemplo, REFS 40,65,134,154,155 ) tienen
que muchos no pueden ser purificados o reconstituidos  ha sido identificado visualmente mediante TEC, pero sus 
intactos. funciones
Ahora, visualizándolos in situ y creando pseudo sigue siendo un misterio E incluso cuando la TEC con éxito
modelos atómicos, finalmente podemos comenzar a  identifica un complejo proteico, puede perder la dinámica
entenderlos de su localización.
en contexto. En última instancia, nos gustaría mapear la estructura
Queda mucho trabajo por hacer, y continuar y distribución de cada proteína en una célula procariota.
Los desarrollos tecnológicos (RECUADRO 1) deberían expandir Al combinar la TEC con otra determinación de estructura
métodos (como la cristalografía de rayos X, espectros de RMN