PRÁCTICA Nº 05

ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN
I. OBJETIVOS
1. Conocer algunos métodos de esterilización, los más comunes y utilizados como:
Flameado, Vapor de agua a presión (autoclave), horno.
2. Aplicar el procedimiento de esterilización adecuado a cada tipo de material.
3. Garantizar la eficacia y efectividad de estos métodos.

II. PARTE EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO Nº 01 : ESTERILIZACION POR FLAMEADO

PROCEDIMIENTO:

1. Tome un asa de platino

2. Acerque al mechero bunsen y sométalo a la flama
3. El asa de platino está estéril

RESULTADOS:

No se observó presencia bacteriana, ya que al momento de pasar el asa por la llama

estando a una temperatura elevada se eliminó cualquier tipo de microorganismo.

CONCLUSION:

El procedimiento de esterilización al flameado es muy utilizado en los laboratorios para

poder tener material estéril para poder tomar muestras de distintos tipos.

EXPERIMENTO Nº 02: CARBONIZACIÓN DE COLONIAS

PROCEDIMIENTO:

1. Sacar con el asa de platino (Estéril) una muestra de la colonia del medio de cultivo.
2. Exponga el asa a la flama del mechero (al fuego)
3. Se observa una llama luminosa de color amarillo intenso casi blanca.

RESULTADOS:
A pesar de contaminar el asa con una colonia de microorganismos, al someterlo al fuego se
esterilizó por completo el material, matando cualquier tipo de vida microbiana.

CONCLUSION:

Se pudo determinar que gracias a la exposición a la flama del mechero Bunsen se logra
eliminar por completo cualquier microorganismo bacteriano.

EXPERIMENTO N°3: AUTOCLAVE

PROCEDIMIENTO:

1. Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que se
disponen sobre una rejilla o canasta de metal.
2. Se coloca el material a esterilizar en la rejilla o canastilla con el indicador de
esterilización.
3. Se cierra asegurando la tapa, ajustando los bulones y se da calor, dejando abierta la
válvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salida de vapor en
forma de chorro continuo y abundante,
4. Se cierra a válvula de escape de vapor y se espera que llegue a la temperatura
adecuada. A partir de allí se cuenta el tiempo de esterilización, luego del cual se debe
esperar al descenso de la temperatura para abrir la válvula de escape y la apertura de
la tapa del autoclave.
5. Luego sacar el material del autoclave y verificar la cintilla de esterilización esta debe
presentar unas franjas de color negro( es indicador de una buena esterilización)
6. Luego colocar una gota de la orina en un portaobjetos, cubrir con un cubreobjetos y
observar al microscopio.

RESULTADOS:

CONCLUSIONES:
  La esterilización mediante el autoclave está basada en ejercer una presión de
vapor, aumentar la temperatura, hacer que el vapor penetre la célula, coagulando
el citoplasma y destruyendo formas vegetativas y esporuladas.
 El tiempo programado es de 15 minutos y la temperatura 121°C.
 El autoclave sirve para esterilizar frascos, medios de cultivo, materiales metálicos,
sobretodo se esterilizan medios de cultivo bacterianos usados en trabajos
microbiológicos.

EXPERIMENTO N°4: DESINFECCION

PROCEDIMIENTO:

1. En una placa Petri que contiene Agar sangre, dividir en tres partes iguales.

2. En la parte superior poner las huellas digitales (con poca presión) sin lavar. (tres dedos)

3. Lavarse las manos con agua y jabón y una vez secadas aplicar nuevamente las huellas
digitales a la placa Petri ( segunda hilera)

4. Desinfectarse los dedos con torundas de algodón con alcohol ( limpiar los dedos) por
tres a cuatro veces y luego aplicar los dedos en el medio de cultivo (tercera hilera)

5. Llevar a la incubadora a 37°C hasta el día siguiente para observar el crecimiento en el

medio de cultivo.

RESULTADOS:
 CONCLUSIONES:

o En la primera división se hace un contacto directo en la cual se observa abundante

carga microbiana, evidenciando el estado en el que se encuentran las manos sin
haber sido desinfectadas.

o En la segunda división tras lavarse las manos con jabón y agua, se da la limpieza
pero no la desinfección, porque aún se observa carga microbiana pero poco en
relación con la primera división.

o En la tercera división se emplea un desinfectante, el alcohol en este caso, que

inhibe el crecimiento de microorganismos. Por lo que no se evidencia crecimiento
bacteriano.

III. SUGERENCIAS:

o Al momento de exponer el asa a la flama, no se debe permanecer de manera

estática ya que puede malograr el material.

o Debemos realizar el proceso de esterilización de forma correcta ya que de esto

depende la eficacia y validez en los resultados de distintas pruebas.