SEP TecNM

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE TIJUANA

“PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE
MATERIAL”
Practica l

INGENIERÍA BIOQUÍMICA

Elaborado por:
EQUIPO #6

2021 –

2021 –

20211734 – PACHECO PLASCENCIA ANGEL RAMÓN

MICROBIOLOGÍA – BQ6A

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Y BIOQUÍMICA

Docente:
M.C. MARTHA MARGARITA PORRAS LANZAGORTA
Tijuana B.C. 08 febrero de 2023
ÍNDICE
 1. INTRODUCCIÓN

Esterilización es la eliminación de toda forma de vida de un material u

objeto determinado. Existen varios métodos de esterilización, cada uno con
ventaja particular según el material a utilizar. Entre los más usuales en el
laboratorio de microbiología.

Existen:

 Esterilización por aire caliente

 Esterilización por vapor a presión

La esterilización por aire caliente se lleva a cabo en hornos de calor seco o

de aire caliente que consiste en una cámara de doble pared construida para
resistir altas temperaturas y equiparada con ventiladores para asegurar la
circulación constante del aire caliente dentro de la cámara. En este aparato se
esterilizan principalmente tubos de ensayo, frascos, frascos, cajas de Petri,
pipetas, matraces y otros objetos vacíos de vidrio. El material a esterilizar se
distribuye en el horno adecuadamente y la temperatura se eleva a 160 °C o 180
°C conservándolo así durante 1 a 2 horas.

Esterilización por presión a vapor se lleva a cabo en un aparato llamado

autoclave, el cual consta esencialmente de una cámara metálica de doble pared
(camisa) provista de una puerta de seguridad cerrada a presión. En la parte
superior hay una válvula de seguridad que permite el escape de vapor desde la
camisa, si la presión es demasiado alta. Las ollas de presión utilizadas en el hogar
para cocinar o conservar alimentos son autoclaves pequeñas sin camisa. También
son las retortas grandes utilizadas en las fábricas de enlatados para la
esterilización de latas de conserva. Los objetos que se esterilizan en la autoclave
generalmente se somete a una presión de 15 libras de vapor (es decir a una
temperatura de 121 °C) por un periodo de 15 a 30 minutos. El tiempo de duración
depende en gran parte de la naturaleza del material. En el laboratorio de
microbiología se utiliza generalmente para esterilizar material de vidrio con
líquidos, como agua y medios de cultivo.

2. OBJETIVO

Clasificar, preparar y esterilizar el material para trabajar en el laboratorio de

Microbiología.

3. MARCO TEÓRICO

3.1 Esterilización
3.2 Desarrollo histórico de la esterilización
3.3 Importancia de la esterilización
3.3.1 Aplicaciones de la esterilización
3.3.1.1 Almentos
3.3.1.2 Medicina
3.3.1.3 Industria
4. MATERIAL Y EQUIPO

 1 matraz Erlenmeyer de 200 mL.  Papel de estraza para envolver.

 6 pipetas de 1 ó 2 mL.  Algodón.
 1 pipeta de 5 mL.  Gasa.
 1 pipeta de 10 mL.  Cinta indicadora.
 10 caja Petri de vidrio.  Mechero.
 10 tubos con 9 mL de agua  Autoclave.
destilada.  Horno.

5. METODOLOGÍA
Esterilización en el horno:
1. Tapar matraces y pipetas con algodón según se indique.
2. Envolver el material de vidrio en papel.
3. Poner un pedazo de tape indicador.
4. Colocar el horno y prender.
5. Esterilizar a una temperatura de 165 °C durante una hora y treinta minutos.

Esterilización en autoclave:
1. Agregar 9 ml de agua destilada a cada uno de los 10 tubos y taparlos.
2. Colocarlos dentro de un recipiente y meterlos en la autoclave.
3. Poner un pedazo de tape indicador
4. Esterilizar por 15 minutos a una temperatura de 121 °C a 15 libras de
presión.
           Nota
El material preparado en esta práctica será utilizado posteriormente.

6. RESULTADOS

Se consiguió la esterilización del material después de los procesos

empleados los cuales fueron: por aire caliente y vapor a presión.

Las pipetas y cajas Petri se sometieron a la esterilización por aire

caliente que se llevo acabo en el horno que se tiene en el laboratorio de
microbiología. Dicho proceso es efectuado a 165-180°C, que se considera
una temperatura óptima para esterilizar, donde aproximadamente se dejó 1
hora con 30 minutos.

Asimismo, el matraz Erlenmeyer, agua destilada y los 10 tubos de

ensaye fueron esterilizados, sin embargo, este proceso fue realizado a
presión de vapor en el autoclave #1 que se encuentra también en el
laboratorio de microbiología. El material igualmente fue preparado para su
esterilización. La esterilización se llevo acabo en condiciones de 121°C a 15
Lb de presión, en un periodo de 15 minutos, para llegar a dichas
condiciones se tuvo que esperar 15 minutos.

Para detectar que los procesos de esterilización terminaron y por

ende se alcanzaron las condiciones necesarias, se le colocó al material
tape indicador, en el cual se hicieron notar franjas por el cambio de color, lo
que significa que el material esta listo y debe proceder a guardarse.

7. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El proceso de esterilización en autoclave con agua destilada es

conocido como esterilización por calor húmedo o esterilización de vapor a
presión. Se le coloco un tapón y una cubierta a la boca del matraz para
llevarla al autoclave donde ahí se llevo acabo la esterilización por calor
húmedo. Se pueden alcanzar temperaturas muy elevadas por encima del
punto de ebullición normal del agua, sin embargo, en el matraz el agua
destilada no llega a tal punto fisicoquímico ya que las condiciones dentro
del sistema lo impiden, gracias al tapón y a la presión que se encuentra por
encima de 1 libra de presión, gracias a esto se puede llevar acabo la
esterilización del agua con el vapor que está en el autoclave.

En el horno se esterilizó a calor seco donde se coloco el material de

vidrio, debido a que es lo óptimo; como el aire caliente no tiene un alto
poder de penetración, la humedad se elimina durante el tiempo de
exposición de la pieza al calor caliente. No es recomendable esterilizar el
material de vidrio en autoclave ya que el vapor puede propiciar a la
humedad dentro del material lo que puede conllevar a la proliferación de
microorganismos debido a que generalmente el material será almacenado.
 El material tuvo una serie de preparación dependiendo el
instrumento, pudo ser con tapones de algodón, cubierta de periódico o
empaques con papel estraza. El objetivo del empaque es retener
la esterilización por tiempos prolongados, permitir la penetración y difusión
del agente esterilizante, constituir una barrera efectiva contra los
microorganismos y facilitar y permitir la manipulación de su contenido en
forma aséptica.

Para garantizar que el material llego a las condiciones necesarias

para su esterilización se le coloca a los empaques o material una tira de
tape indicador, el cual antes de ser sometido a esterilización contiene
franjas diagonales blancas. Después de la esterilización las franjas tienen
un cambio de color muy notorio, en autoclave se aprecio mas que en horno,
ya que cambia de color debido al calor húmedo.

8. CONCLUSIONES

9. ANEXO
Cuestionario

1. Ventajas y las desventajas de la esterilización en horno y en autoclave.

Esterilización en horno:

Esterilización en autoclave

2. Clasificación de los métodos de esterilización.

3. Indicadores de esterilización
4. Diferencia entre desinfección y esterilización.

10. REFERENCIAS