Práctica

VALORACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE LA GLICINA

FUNDAMENTO TEÓRICO
Neutralizaciones Ácido -Base
El concepto de ácido y base es convencional, pues se basa en algún tipo de reacción entre
especies químicas y un disolvente. Se han propuesto definiciones de ácidos y bases, si bien, en la mayor
parte de los casos es suficiente la de Arrhenius (1887):
ácido : Toda sustancia que al disolverse (disociarse) aumenta la concentración de iones
positivos del disolvente (H+ o H3O+, caso del agua).
base : Toda sustancia que al disociarse, aumenta la concentración de iones negativos del
disolvente (OH-, caso del agua).
Según la definición de Brönsted-Lowry (1923):
ácido : sustancia que cede H+.
base : sustancia que capta H+.

Ácido ⇔ H + + Base
La concentración de iones H+ de una disolución suele expresarse en forma del pH de la misma,
definido como :
pH = - log [H+]; pOH = - log [OH-]; pH + pOH = pKw = 14.
El pH se suele determinar experimentalmente mediante el uso de aparatos llamados
POTENCIÓMETROS (pH-metros) o empleando sustancias llamadas indicadores de pH.
Cuando un ácido fuerte (ej. HCl) se mezcla con una base fuerte (ej. NaOH), tiene lugar una
reacción química denominada neutralización, que se representa por :

HCl + NaOH → Cl − + Na + + H 2 O
En las primeras adiciones de Base (NaOH de concentración conocida exactamente) sobre el
ácido (HCl concentración desconocida) el pH casi no varía hasta llegar a las proximidades del Punto
de Equivalencia. En el P.E. la base ha reaccionado con todo el ácido, a partir de este punto se
produce un aumento brusco del valor de pH, debido al aumento de la [OH-]. Finalmente el pH se
estabiliza con sucesivas adiciones de álcali(ver figura 1a).

pH
14
exceso de Valorante

12

10
P.E. de ácido débil
8
pH = pK
6 b
Volumen en el 1/2 P.E.
4 a

2
Volumen en el P.E.
0
0 10 20 30 40 50
Vvalorante/ mL
Figura 1
Curvas de Valoración Potenciométrica de Ácido fuerte (a), y Ácido débil (b)

Cuando la reacción se produce entre un ácido fuerte y una base fuerte, el pH de

neutralización completa (P.E.) es 7. Si el ácido a valorar es débil, el pH del P.E. es ligeramente
mayor que 7 (hidrólisis del anión del ácido). Si la base a valorar es débil el pH del P.E. es
ligeramente inferior que 7 (hidrólisis del catión de la base).
Como todas las reacciones transcurren equivalente a equivalente ( en este caso además mol a
mol), el nº de equivalentes gramo añadidos de base (titulante) será igual al nº de equivalentes gramo de
ácido neutralizado (problema), cumpliéndose,
Vbase . Nbase = Vacido . N acido
o también
Vbase . Mbase = Vacido . Macido
 *En disolución acuosa la disociación de un ácido débil se puede expresar como:

AH ←→
K
A− + H +
La constante de equilibrio de esta reacción se relaciona con el pH por la ecuación de Henderson-
Hasselbach (para disoluciones muy diluidas se toma aH+ aA- y aAH como valores de [H+], [A-] y [AH]),
pudiendose calcular el pKa del ácido a apartir de esta ecuación, por medidas potenciométricas de pH.

K=
[A ][H ] ⇒ log K = log [A ] + log[H ]
− + −
+

[AH ] [AH ] ,

reordenando términos:

[ ]
 A− 
− log K + log [ ]
 = log H +
 [ AH ] 

pH = pKa + log
[A ] −

[AH ] ecuación de Henderson-Hasselbalch

Cuando las especies A- y AH se encuentran en igual concentración (corresponde al punto
de semiequivalencia), su cociente es la unidad, el logaritmo es cero, y el pH de la disolución
coincide numéricamente con el pKa del ácido. Así podemos determinar gráficamente el pKa del
ácido, mediante la lectura del punto de corte con el eje.
Representando pH (eje de ordenadas, y) frente al volumen de reactivo titulante (eje de
abscisas, x) se obtiene la curva de valoración (ver figura 1b) que presenta una forma sigmoidea, con
un salto brusco en las proximidades del P.E. Este salto es más notorio cuando el ácido que se valore
sea fuerte, que si es débil, incluso puede aparecer un doble salto si el ácido es diprótico.
Se puede añadir un indicador de pH, para apreciar visualmente el P.E. o punto final de
valoración.
De lo expuesto hasta aquí se deduce que el punto de inflexión de la curva da el P.E. a partir del
cual es fácil obtener el volumen de titulante consumido y así calcular la concentración exacta del ácido
(Vbase . Mbase = V acido . Macido).
 Estas curvas pueden ser trazadas por un aparato suficientemente automatizado que disponga de
una bureta capaz de añadir volúmenes conocidos de disolución alcalina de forma regular y que
represente en un registro gráfico el pH frente al volumen añadido así como la curva derivada.
1.- Curvas de Valoración de la Glicina
Los aminoácidos por tener al menos un grupo ácido y un grupo amino pueden considerarse
como anfolitos, es decir, sustancias que pueden comportarse como ácidos o como bases.
En soluciones acuosas el aminoácido glicina pueden existir en tres formas diferentes:
Totalmente protonada glyH 2+

ión híbrido glyH + , y

Como anión glicinato gly −

La concentración relativa de estas especies depende del pH de la solución.

Todos los aminoácidos poseen un punto en el que se comportan como una sal neutra. En este
punto la carga neta del aminoácido es nula ya que los dos grupos disociables tienen su carga de signo
contrario y compensada. Este punto recibe el nombre de punto isoeléctrico.
La valoración potenciométrica de glicina protonada, con hidróxido sódico da lugar a una curva,
pH frente al volumen de valorante, características de un ácido diprótido. A partir de esta curva se
puede calcular la concentración de glicina y de los valores de las constantes de equilibrio (Ka1 y Ka2).

En primer lugar vamos a considerar los dos equilibrios de disociación ácida de la glicina:

NH 3+ − CH 2 − COOH ←
→ NH 3+ − CH 2 − COO − + H +
K a1

NH 3+ − CH 2 COO − ←
→ NH 2 − CH 2 − COO − + H +
K a2
 La valoración potenciométrica de la glicina protonada da lugar a una curva del tipo propuesto
en la figura 2

14 Gly-

12
= pK 2
pH pH Gly H
10

6
+
4 pK 1 H
2

pH = Gly
/2 P
.E .E.
1º 1 /2 P
2 2º 1
.E. .E.
0 1º P 2º P
0 10 20 30 40 50
Valorante / mL
Figura 2.
Curva de Valoración Potenciométrica de Glicina (100 mL) con Valorante NaOH (0.2 M)

Esta curva es característica de la valoración de un ácido diprótido. Los dos puntos de inflexión
corresponden a los dos puntos de equivalencia.
En el momento inicial la solución contiene glicina protonada ( glyH2+), variando poco el valor
de pH por la adición de valorante, hasta un momento en que se produce un salto brusco en el valor de
pH, alcanzándose aquí el primer punto de inflexión (1º P.E.) que corresponde a la valoración del 1er
protón de la glicina, encontrándose la glicina en la forma (glyH, ión híbrido).
Sigue la valoración con ligera modificación del pH hasta otro salto, menos brusco, pero apreciable, que
corresponde al 2º punto de inflexión (2º P.E.) esto es valoración del segundo protón de la glicina,
alcanzándose la forma (gly -, aniónica) concluyendo la valoración.

2.- Cálculo de las constantes de disociación

Vamos a llamar glyH2+ a la glicina protonada; glyH al ión híbrido y gly - a la forma aniónica :
glyH 2+ , glyH + , gly −

La constante de disociación del primer equilibrio, Ka1, se puede expresar, como:

 a H + a glyH
K1 =
a glyH 2 +
Sustituyendo la actividad por su valor, ai = ci. gi siendo "ci" la molalidad y "g i" el coeficiente de
actividades. Trabajando con disoluciones muy diluidas los coeficientes de actividad pueden
considerarse la unidad. Con estas consideraciones la constante quedará:

K1 =
[H ] [glyH ] = [H ]
+ + 2

[glyH ] C − [H ]
0
+ +
(1)
2 0 0

siendo [H+]o la concentración inicial, a V= 0 mL, de protones y Co la concentración inicial de glicina.

La constante del segundo equilibrio viene dada por la siguiente expresión:

K2 =
[H ][gly ]
+ −

[glyH ]
Cuando las concentraciones del anión glycinato (gly -) y del ión híbrido (glyH) son iguales entonces Ka2
= [H+], (pKa2 = pH) luego este es un método para calcular esta constante.
OBJETIVO DE LA PRACTICA.-

- Previamente y a modo de entrenamiento se puede llevar a cabo la valoración potenciométrica de un

ácido débil como es el caso de ácido acético, determinandose su concentración y su pKa con ayuda de
la gráfica y de la ecuación de Henderson -Hasselbalch.
- El objeto de esta práctica es la valoración de un aminoácido (de interés en ciencias de la vida) como
la Glicina, con una base fuerte (Hidróxido sódico, NaOH) observando el cambio de pH durante el
curso de la valoración, deduciendo la concentración de glicina y los valores de pKa1 y pKa2 de este
aminoácido.

MATERIAL Y REACTIVOS.-

Bureta con su soporte y pinza para sujetar el electrodo

Vasos de precipitados altos, 2*250 mL
Matraces aforados, 2*250 mL
Pipetas graduadas, 1*1mL, 1*10 mL
Pipetas aforadas, 1*25 mL, 1* 50 mL
Probeta, 1*10 mL. Pipeta pasteur.
Pesasustancias
Reactivo Titulante (Valorante), NaOH
250 mL 0.2 M(exactamente definida)
Reactivos problemas: Aminoácido
glicina 250 mL. de concentración aproximada 0.04 M,
AcOH(acético) 250 mL aproximadamente 0.04 M.

El pH-metro :
En esencia mide la fuerza electromotriz de una pila electroquímica de la que la disolución
problema forma parte. Dicha pila se construye introduciendo en el seno de la disolución un electrodo de
referencia(de potencial cte), como el de calomelanos y un electrodo de vidrio sensible a los iones H+,
que cierra el circuito a través del instrumento de medida. El potenciómetro da la fuerza electromotriz en
voltios, puede ser calibrado directamente en medidas de pH llamándose pH-metro. El electrodo
comercial más corriente (e. combinado) consiste en una sonda de vidrio con una lámina delgada de
platino dentro de otra de vidrio en forma de bulbo donde se encuentra una disolución de pH fijo (HCl
0.1 m) y un electrodo de calomelanos.

Instrucciones de manejo:
1.- Conectar a red y conmutar (un tiempo antes de la medida)
2.- Proceder al ajuste y calibrado con patrones de Tampón de pH conocido
a) Calibrado con Tampon de pH=7.00. Sacar el electrodo de su protector, lavar con agua destilada,

secar y meter en disolución Tampón. Esperar ajuste.

b) Lavado el electrodo y seco, meter en Tampón pH 4.00, para ajuste de pendiente.

3.- Electrodo ya está listo para medir disolución problema. Manteniéndolo en el seno de la
disolución, dar lectura y anotar valor. Si no es automático volver a posición cero de pH y añadir
volúmenes de titulante, homogenizar la disolución y leer pH. Asi sucesivamente. NO SACAR EL
ELECTRODO DE LA DISOLUCIÓN QUE SE ESTA MIDIENDO.
4.- Acabada la valoración y lectura de pH sacar el electrodo lavar con agua, secar con papel y
guardar en su protector.

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Técnica de valoración (ver figura 3):

En una bureta se pone la disolución de Valorante, cuidando que este llena desde el cero al final
sin burbujas y habiendo aclarado la misma con unos 10 mL de valorante para retirar restos de agua.
* En un vaso de precipitados alto, de 250 mL de capacidad, se descargan por pipeteado 100 mL de
disolución problema con ayuda de una pipeta aforada de 50 mL.
* Se introduce el electrodo combinado del potenciómetro, lavado y seco, en la disolución problema,
sujetándolo con una pinza para evitar roces con las paredes y fondo del vaso.
* Se procede a la valoración por descargas de volúmenes de 2 en 2 mL de Valorante desde la bureta,
anotándose el pH resultante después de homogeneizar la disolución por agitación.
* Se recogen los datos Volumen frente pH en una tabla del tipo:
Vvalorante / mL
pH
Repetir la valoración al menos dos veces. Representar en papel milimetrado los datos obtenidos,
interpretar la curva (ver figuras 1 y 2).
a) Valoración de Acido Acético, aportado por el profesor (Maprox. 0.04), con NaOH 0.2 M valorada.
b) Valoracion de aminoácido Glicina con NaOH 0.2 M valorada. Se preparan 500 mL de glicina
protonada 0.04 M, por pesada, apartir de la expresión M= g/P.m./L para sacar los gramos necesarios
(buscar el P.m. de glicina en el frasco de reactivo comercial), pesar en pesasustancias y descargar en un
vaso adecuado para disolver la muestra, una vez disuelta llevar al matraz aforado de 500 mL y acabar
de enrasar con agua. Llevar a cabo la valoración según técnica propuesta.
Vvalorante / mL
pH

Cálculos:
1.- Determinación de la concentración de Acido Acético y de glicina:
Fijandose en la gráfica correspondiente, pH frente a Volumen, y a partir del volumen de NaOH gastado
en el primer punto de equivalencia se calcula la concentración real de problema. Aplicando la ecuación:
Vvalorante en P.E. * Mvalorante = V inicial problema(100 mL) * Mproblema.
2.- Cálculo de las ctes. de equilibrio
Según la ecuación (1) para calcular la Ka1, es necesario conocer la concentración de glicina (Co),
obtenida por el método que se acaba de explicar, y la concentración inicial de protones [H+] . Esta
última concentración se calcula a partir del pH inicial (sabiendo que -log[H+] = pH ; antilog pH = [H+])
. Se sustituyen estos valores en la ecuación 1 y se calcula el valor de la constante del primer equilibrio.
Si se levanta una línea vertical que corte a la curva, en el punto medio del volumen alcanzado
para el 1er punto de equivalencia (P.E.), se obtiene el 1er punto de semiequivalencia (1/2P.E.) que
permite ver, leyendo en el eje de pH, el valor del pKa1 de la glicina. Y levantando una vertical que corte
a la curva, en el punto medio entre los dos P.E., que corresponde al 2º punto de semiequivalencia, se
puede leer en el eje de pH, el valor que coincide con el pKa2.
Ayúdese de la gráfica y de la ecuación de Henderson-Hasselbach.
Para el calculo de Ka2, hemos visto (ecuación 2) que cuando la concentración del ión híbrido
(glyH) es igual a la concentración del anión glicinato (gly-) la constante de equilibrio, Ka2, coincide en
valor absoluto con la concentración de protones (esto es pKa2 = pH). Este punto corresponde al punto
medio entre los dos puntos de equivalencia, donde vemos, con ayuda de la gráfica pH/volumen de
valorante, qué pH le corresponde a ese punto. Del pH se obtiene la concentración de protones que
será igual al valor de la constante del segundo equilibrio. O bien el pH = pKa2.

Bibliografí a:
F.Daniels y R.A. Alberty . "Physical Chemistry, Ed. John Willey and Sons. New York.