UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
E.P FARMACIA Y BIOQUÍMICA

QUIMICA ANALITICA INSTRUMENTAL

INFORME 2: DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA
ÓPTIMA DE UNA SUSTANCIA ORGÁNICA
(AZOSULFAMIDA) MEDIANTE EL TRAZADO DE UNA
CURVA ESPECTRAL . CURVA RINGBOM.

Docente: Dra. Norma Angélica Carlos Casas

Integrantes:
● Bravo Becerra Eliana Rocio 16040043
● Curioso Melo Dara Edith 17040054
● Mamani herrera Leslie 17040090
● Perez Noriega Jilmer 17040002
● Suarez Santacruz Kevin Angel 17040098
● Venegas Fiestas Gerardo 17040014
● Yui Góngora Ariana Yasmeen 17040021

2018
 I. TÍTULO

DETERMINACIÓN DE LA LONGiTUD DE ONDA ÓPTIMA DE UNA SUSTANCIA

ORGÁNICA (AZOSULFAMIDA) MEDIANTE EL TRAZADO DE UNA CURVA
ESPECTRAL . CURVA RINGBOM .

II. OBJETIVOS

● Aprender a graficar la curva de Ringbom.

● Destacar la importancia de una curva de calibración.
● Determinar la longitud de onda óptima en las disoluciones de Azosulfamida.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO:

La espectroscopia de absorción uv-visible se basa en la relación existente entre la

energía radiante con la materia . En este proceso ocurre la absorción de la energía
basal de los electrones pasando a un estado de transición ( disipación de los
electrones de valencia ) donde se adquiere información sobre el analito midiendo la
radiación electromagnética emitida conforme este regresa a su estado basal o
midiendo la cantidad de radiación electromagnética absorbida como resultado de la
excitación. En la espectroscopia de absorción se mide la cantidad de luz absorbida
como función de la longitud de onda . La ley de absorción (Ley de Lambert - Beer )
nos indica cuantitativamente como la cantidad de atenuación depende de la
concentración de las moléculas absorbentes y de la longitud de la trayectoria donde
ocurre la absorción (1) . Esta relación se expresa como A = Ebc (E=absortividad , b=
λ , c= concentración ).

IV. PARTE EXPERIMENTAL

A. CÁLCULOS DE LAS DILUCIONES

Concentración inicial: Solución saturada de azosulfamida 5%

5000000 µg ---------------> 100mL
50000 µg -------------------> 1mL

● Para 100 µg/ml a partir de una disolución de 500µg

500µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
100µg-------------> x
X=20 mL

● Para 90 µg/ml a partir de una disolución de 500µg

500µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
90µg-------------> x
X=18 mL
● Para 80 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
80µg-------------> x
X= 16
● Para 60 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 5 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
60µg-------------> x
X= 12 mL
● Para 50 µg/ml a partir de una disolución de 100µg
100µg----> 1mL
Extraer 10 ml en una fiola de 100mL
1000µg-------------> 100mL
50µg-------------> x
X= 5ml
● Para 40 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 5 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
40µg-------------> x
X= 8 mL
● Para 30 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 5 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
30µg-------------> x
X= 6ml
● Para 25 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 5 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
25µg-------------> x
X= 5 mL
● Para 20 µg/ml a partir de una disolución de 500µg
500µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
500µg-------------> 100mL
20µg-------------> x
X=4 mL
● Para 15 µg/ml a partir de una disolución de 100µg
100µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
100µg-------------> 100mL
15µg-------------> x
X=15 mL
● Para 10 µg/ml a partir de una disolución de 100µg
100µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
100µg-------------> 100mL
10µg-------------> x
X=10 mL
● Para 5 µg/ml a partir de una disolución de 50µg
50µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 100mL
50µg-------------> 100mL
5µg-------------> x
X=10 mL

● Para 1 µg/ml a partir de una disolución de 10µg

10µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 10 mL
10µg-------------> 10mL
1µg-------------> x
X=1 mL
● Para 0,1 µg/ml a partir de una disolución de 1µg
1µg----> 1mL
Extraer 1 ml en una fiola de 10 mL
10µg-------------> 10mL
1µg-------------> x
X=1 mL

B. CÁLCULOS PARA HALLAR LA λ ÓPTIMA

 A= 2 -Log %T

Longitud de onda (λ) %T Absorbancia

650 94,4 0,02502801

640 92,6 0,03338901

630 90,5 0,04335142

620 88,3 0,0540393

610 85,4 0,06854213

600 81,1 0,09097915

590 75,6 0,1214782

580 68,3 0,1655793

570 60,3 0,21968269

560 52,7 0,27818938

550 46,5 0,33254705

540 42,8 0,36855623

530 41 0,38721614

520 41,4 0,38299966

510 43,6 0,36051351

500 46,8 0,32975415

490 51,2 0,29073004

480 56,4 0,2487209

470 61,5 0,21112488

460 66 0,18045606

450 68,5 0,1643094285

λoptima= 530 nm

C. CÁLCULOS PARA HALLAR LA CONCENTRACIÓN ÓPTIMA

 100-%T

Concentración %T Absortancia

0,1 97,6 2,4

0,2 98,5 1,5

0,4 98,9 1,1

0.8 97 3

1 95,8 4,2

1,5 94,4 5,6

2 90,5 9,5

3 86,1 13,9

4 76,3 23,7

5 56 44

10 42,3 57,7

20 29,8 70,2

25 23,3 76,7

30 17,5 82,5

40 9,1 90,9

50 5 95

60 2,9 97,1

80 0,7 99,3

90 0,5 99,5

100 0,3 99,7

[ ] Optima=11,5 ug/ml [ ] Mínima=2,4 ug/ml [ ] Máxima= 50 ug/ml

Rango de concentraciones que cumplen con la ley de Lambert y Beer : [ 2,4 ; 50 ]

D. FLUJOGRAMA
V. DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS
Para las 3 concentraciones más diluidas no se obtuvo la relación, basada en la ley de
Lambert-Beer, que a una misma longitud de onda la muestra más diluida presenta mayor
porcentaje de transmitancia, error que pudo deberse a una mala praxis (error humano) o un
error lectura del espectrofotómetro, asimismo las diluciones de 5 y 10 microgramos/mililitro
se presentaron fuera de la curva, está aberración pudo ser producto de una falla del
espectrofotómetro en cuanto a su capacidad de reproducibilidad. Las cinco diluciones antes
mencionadas fueron omitidas en la gráfica de la curva de Ringbom puesto que estorban su
interpretación (2).

Previamente calculada la longitud de onda óptima de la azosulfamida, la cual fue de 530

nm y concuerda con la bibliografía (3); se construye la curva de Ringbom que consiste en una
gráfica de absortancia (100%-T) vs Log C; que generalmente describe una curva en forma de
S (1), generalidad experimental que fue favorecida por el uso de 20 disoluciones en nuestra
práctica (4).

Por otro lado, En esta gráfica, los cruces de la parte recta (la intermedia), con la parte baja y
con la parte alta, pueden servir para determinar un valor para los límites de detección mínimo
y máximo, respectivamente, y así obtener nuestra zona de trabajo y la concentración óptima.
En el caso de nuestra azosulfamida, la curva de Ringbom nos permite interpretar que se
obtuvo como concentración óptima 11.5 μg/ml aproximadamente, mientras que la
concentración mínima fue de 2.4 μg/ml y la concentración máxima fue de 50 μg/ml; siendo
este intervalo nuestra zona de trabajo (1).

VI. CONCLUSIONES

● Se graficó la curva de Ringbom teniendo en cuenta los parámetros de concentración

y absortancia . Es importante recalcar el trazado de la curva de Ringbom , ya que nos
ayuda a determinar la zona de trabajo con las concentraciones que cumplen con la
Ley de Lambert - Beer.

● Las curvas de calibración son muy importantes para cuantificar una sustancia por
interpolación a partir de su espectro . Su concentración debe estar en el intervalo de
linealidad de la curva de calibración , ya que valores por encima ( muy concentrada )
o por debajo ( muy diluida ) la cuantificación de los datos no son confiables.

● Se determinó la longitud de onda óptima en las disoluciones de azosulfamida (λoptima=

530 nm). Es esta λ existe una mayor dependencia entre absorbancia y concentración.

VII. COMPLEMENTO
¿Cómo se elabora la curva de Crawford y cual es su aplicación?

Si:
A partir de esta última relación se construye la curva del error o curva de Crawford graficando
el valor absoluto de (D C/C) / D T vs. T, tomando transmitancia entre cero y uno. Esta gráfica
indica que el error depende en forma compleja de la medida de la transmitancia y para valores
muy bajos o muy altos de transmitancia, el error en la concentración crece exponencialmente,
mientras que para valores intermedios el error permanece aproximadamente constante,
presentándose un mínimo error en la concentración para la transmitancia correspondiente a
0.368 o 36.8 %T.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Skoog Douglas, Principios de análisis instrumental. 6ta edición.

CENGAGE LEARNING: Mexico D.F, 2007.
2. Harris Daniel. Quantitative Chemical Analysis. 7th ed. WH. Freeman &
Company: New York, 2007.
3. Castañeda Gregorio (Tesis Doctoral). Determinación de sulfamidas y sus
potenciadores en productos farmacéuticos y zoosanitarios. Servicio de
Publicaciones de la Universidad de Castilla - La Mancha, 1994; pp 99.
4. Universidad Nacional de Colombia. Establecimiento de un método
espectrofotométrico. Disponible en:
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap10/01_
01_01.htm