Abstracto

Shigella es una bacteria Gram-negativa que es responsable de la shigelosis. Con los años, han evolucionado para
contrarrestar eficazmente las defensas del huésped, incluida la invasión de las células del huésped, los cambios
metabólicos que ocurren dentro de la bacteria y la célula infectada, propagación celular, autofagia , señalización
inflamatoria y muerte celular. Este progreso muestra la interacción entre las células huésped y los patógenos bacterianos
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Introducción

Este tipo de bacterias son patógenos que infectan el tracto gastrointestinal ( shigelosis aguda) .Son patógenos no
móviles, facultativos anaeróbicos que están relacionados con Escherichia coli, pero han evolucionado rasgos
específicos de patogenicidad . La vía de transmisión fecal-oral, el contacto de persona a persona o la ingestión de
alimentos o agua contaminados. Hay cuatro serogrupos de Shigella : Shigella flexneri, S. dysenteriae, S.
boydii y S. sonnei. La diarrea síntoma ocurre cuando la bacteria llega al intestino delgado. Sin embargo se
dirigen al epitelio colónico , causando colitis inflamatoria Según los datos de los Centros para el Control y
Prevención de Enfermedades (CDC), causa 80-165 millones de casos en todo el mundo , que resulta en 0,6
millones de muertes( pequeño) . Son endémicas en regiones tropicales y subtropicales S . flexneri es la causa
más común de enfermedad, mientras que S. sonnei se asocia con mayor frecuencia a infecciones en países
industrializados La infección por S. boydii y S. dysenteriae es menos común en general, pero puede ser
localmente endémica, como en el sur de Asia y en el África subsahariana
S. flexneri el más utilizados de interacción huésped-bacteria en modelos celulares de infección. Junto
con Mycobacteria, Salmonella y Listeria. El mecanismo de invasión tiene similitudes con la Salmonella ; sin
embargo Shigella escapa rápidamente de la vacuola de entrada y puede propagarse de una célula a otra, al igual
que la Listeria
Invasión de Shigella
Para la infección por Shigella se necesitan 100 bacterias. Shigella transita por el epitelio colónico a través de las
células M, y luego puede invadir y provocar una respuesta inflamatoria severa.
Shigella utiliza al (T3SS) codificadas por un gran plásmido de virulencia de 220 kb y forman una estructura
macromolecular en forma de aguja que permite el suministro de proteínas . Primero se adhiere a la célula
huésped, a pesar de la ausencia de proteínas de adhesión ; se ha demostrado que IcsA, funciona como una
adhesina que se activa mediante sales biliares, después de la activación inicial de T3SS. Las sales biliares
también promueven la secreción de OspE1 y OspE2 que permanecen en la membrana externa bacteriana y
aumentan la adherencia . Además, las sales biliares, en particular el desoxicolato, promueven el ensamblaje final
del T3SS en un estado listo para la activación. La unión bacteriana a filopodios a través de los componentes
T3SS, IpaB e IpaD, también promueve la interacción y la invasión ; Shigella bloquea la secreción del T3SS en
condiciones anaeróbicas a través de la supresión mediada por fumarato y nitrato reductasa (FNR)
de spa32 y spa33transcripción (Marteyn et al., 2010 ). La detección de O 2 en la región inmediatamente
adyacente a la barrera epitelial alivia esta supresión transcripcional, desencadenando
la expresión spa32 y spa33 que conduce a la activación del T3SS y la invasión eficiente .En conjunto, estos
hallazgos indican que Shigella ha evolucionado para detectar de forma aguda cuándo está en el entorno intestinal
apropiado para desencadenar una mayor adherencia y actividad de T3SS.

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Figura 1
Distintas fases de invasión y autofagia dirigida durante la infección por Shigella . Shigella seadhiere a la superficie
basolateral de las células epiteliales, forma un poro en la membrana eucariótica y libera proteínas efectoras para inducir su
captación (cuadro 1). La primera ola de objetivos de autofagia sigue a la invasión inicial y está mediada por el
reclutamiento de la maquinaria de autofagia al sitio de entrada. Los PRRs intracelulares, NOD1 y NOD2, juegan un papel
crítico a través del reclutamiento de ATG16L1. Después de escapar de la vacuola de entrada, Shigelladirigen la
polimerización de actina en un polo mediante reclutamiento de N-WASP y ARP2 / 3 dependiente de IcsA. Esto permite la
motilidad intracelular. Este proceso es contrarrestado por el intento del huésped de atrapar bacterias en jaulas derivadas de
septinas que permiten la selección de autofagia. Una vez móvil y libre en el citosol, el anfitrión no puede dirigir a Shigella a
la autofagia. La motilidad basada en actina permite que Shigella se propague desde la célula-célula, y se escapa
eficientemente a la segunda célula usando un T3SS reactivado. Este evento de invasión secundaria permite una orientación
autofagia adicional. Los mutantes IcsB que son menos eficientes en el escape son atacados más fácilmente por la autofagia
en este paso.

En el extremo distal del T3SS está el complejo compuesto por IpaB, IpaC e IpaD. La IpaD facilita el
ensamblaje de IpaB e IpaC en la aguja, y IpaB e IpaC son hidrofóbicas que se insertan y forman un poro que
permite la administración de efectores . La inserción y la actividad de T3SS se da por la interacción de IpaB con
el colesterol
La administración de T3SS genera una región de remodelación y polimerización de actina que conduce a
ondulación de la membrana y a la captación de la Shigella . Los efectores IpgB1 y IpgB2 actúan como factores
de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) para que Rac y RhoA dirijan la remodelación de la actina . De
hecho, un mutante doble de Shigella para IpgB1 e IpgB2 es incapaz de invadir eficazmente las células epiteliales
intestinales. Además IpgD es una fosfatasa que genera fosfotidil-inositol-5-fosfato para promover la
polimerización de actina . IpaC, promueve la invasión mediante la activación de Src quinasa y Cdc42.
. Finalmente, , IpaA se une a la vinculina de la célula huésped, un componente de las adherencias focales para
anclar Shigella en el sitio de la ondulación de la membrana
Una vez que Shigella se internaliza, se escapa de la vacuola de entrada. Se cree que IpaB e IpaC promueven la
descomposición de la vacuola
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Impacto de la invasión de Shigella en las vías metabólicas del huésped y el agente

patógeno
La invasión por Shigella requiere una adaptación del patógeno a un nuevo entorno, en el cual los nutrientes como
fuentes de carbono, hierro y oxígeno es limitado y está bajo el control del huésped ( Figura (Figura 2).2 ). La
restricción del hierro es el más estudiado debido a su toxicidad por ello ha desarrollado proteínas fijadoras de
hierro, para limitar la concentración de hierro libre como los sideróforos, que capturan hierro intracelular
Los sistemas de adquisición de hierro (Iut, Sit, FhuA y Feo) y la privación de hierro( Suf) asociada al estrés están
regulados en Shigella ; niveles restringidos de hierro, magnesio y fosfato.
Una vez que se ha eliminado Shigella utiliza hierro para procesos esenciales como replicación del ADN hasta la
respiración .Shigella requiere de carbono para sus rutas biosintéticas.
El análisis global identificó que la fermentación de ácido mixto y el metabolismo del piruvato son necesarios
para el crecimiento intracelular óptimo de S. flexneri .A diferencia de los componentes del ciclo del ácido
tricarboxílico (TCA), lo que concuerda con la idea de que la fermentación, en lugar de la respiración, predomina
en el entorno intracelular.
Shigella utiliza tres vías glucolíticas para producir piruvato a partir de la glucosa: la vía Embden-Meyerhof-
Parnas (EMP), la ruta de la pentosa-fosfato (PPP) y la vía Entner-Doudoroff (ED). Los estudios del grupo de
Payne demostraron la importancia de la vía EMP, que convierte glucosa en piruvato a través de los intermedios
glucosa-6-fosfato / fructosa-6-fosfato / gliceraldehído-3-fosfato, mientras que las vías PPP y ED eran
prescindibles
Es el metabolito más importante ( piruvato), porque es una fuente de carbono esencial para el crecimiento
intracelular de Shigella . En un estudio se analizaron vías de fermentación del hospedador en células no
infectadas frente a células infectadas con Shigella. Observaron que las rutas glicolíticas del huésped no se vieron
afectadas por el patógeno, pero las células infectadas excretaron acetato en lugar de piruvato y lactato, lo que
sugiere que las últimas moléculas habían sido capturadas y utilizadas por Shigella para su metabolismo.
El acceso a los aminoácidos o ácidos grasos del huésped no limita el crecimiento bacteriano intracelular
Figura 2
La infección por Shigella induce cambios metabólicos en el huésped y la bacteria . La inanición de aminoácidos (AA)
se induce después de una infección bacteriana, y esto conduce a numerosos cambios en el metabolismo de la célula
hospedadora que incluyen la inducción de la respuesta de estrés integrada (ISR) que provoca la reprogramación
transcripcional y la formación de gránulos de estrés. La inhibición de la señalización de mTOR también se observa, con
múltiples efectos posteriores. Dentro de Shigella, los cofactores clave como el hierro deben ser eliminados para procesos de
supervivencia esenciales. El ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) es menos importante que otros procesos como la
fermentación. La vía Embden-Meyerhof-Parnas (EMP) predomina en la generación de piruvato en comparación con la vía
de pentosa-fosfato (PPP) y la vía de Entner-Doudoroff (ED).

Mientras Shigella intracelular experimenta estrés metabólico y nutricional, la infección también tiene importantes
consecuencias para la célula huésped (esres metabólico)
El objetivo mecánico de la rapamicina (mTOR) y las vías de respuesta de estrés integrada (ISR) controlan las
respuestas de estrés metabólico a la limitación de nutrientes; pero la infección por Shigella inhibe la mTOR y
la inducción del ISR, que produce una respuesta de inanición de aminoácidos (AA) en células hospedadoras
infectadas .
Esta respuesta de inanición AA upregulated el control general no reversible (GCN2) / factor de iniciación de
traducción eucariota 2 (eIF2α) / activación del factor de transcripción 3 (ATF3) eje de la ISR, lo que resulta en
la reprogramación transcripcional asociada al estrés y la acumulación de ácido ribonucleico mensajero
(ARNm) gránulos de estrés en las células infectadas.
La inhibición de mTOR provocó la defosforilación de la proteína 1 de unión a 4E (4E-BP1) y la S6 quinasa 1
(S6K1),
la inhibición de la traducción y la regulación positiva de la autofagia
la baja señalización de mTOR en las células infectadas es importante en la defensa inmune innata
contra Shigella.,
. recientemente demostraron que Shigella usó la proteína efectora OspB para inhibir este proceso en la primera
fase de la infección activando el complejo 1 de mTOR a través de la proteína 1 activadora de la proteína 1 que
activa el análogo de Guanosina trifosfato (GTP) del andamiaje (IQGAP1; Lu y col. ., 2015 ).
Se informó una consecuencia inesperada de la inducción de las vías de estrés metabólico después de la infección
por Shigella . Específicamente, observamos en células infectadas con Shigella la modulación de la maduración
citosólica del ácido ribonucleico nuclear pequeño (snRNA), que es un paso crítico en el control del ensamblaje
del spliceosoma, la maquinaria molecular responsable del corte y empalme del ARNm (Tsalikis et
al. , 2015 ). Demostramos que este efecto requiere invasión bacteriana y podría recapitularse por inanición AA,
estrés del retículo endoplasmático o inhibición de mTOR (Tsalikis et al., 2015).) Si bien es probable que la
adaptación del metabolismo spliceosome durante la infección refleje la inhibición de la traducción y sea un
mecanismo de conservación de energía, los resultados obtenidos en este estudio sugieren que este proceso
desempeña un papel en la regulación general de las respuestas asociadas al estrés y la inflamación
infección. Queda por determinar si la regulación de los niveles de U snRNA en las células infectadas también
contribuye a dar forma a los programas de empalme alternativo en las células infectadas, y si este mecanismo
potencial es importante para la defensa del huésped.

Detección de host de Shigella

El huésped detecta patógenos invasores a través de mecanismos de detección intracelular y extracelular. Entre
otros, los receptores Toll-like (TLR) detectan el entorno extracelular y endosomal y dirigen la señalización
proinflamatoria en respuesta a una estimulación específica. Esta detección basada en TLR juega un papel
importante en la respuesta a Shigella por células mieloides (Girardin et al., 2001 ). Por ejemplo, está bien
documentado que la detección de lipopolisacárido (LPS) extracelular por TLR4 conduce a una respuesta
inflamatoria en células mieloides (Poltorak et al., 1998 ; Hoshino et al., 1999 ). Sin embargo, la detección
intracelular de Shigellaen células epiteliales ha demostrado ser crítico para la respuesta del huésped. Los
receptores Nod-like NOD1 y NOD2 responden a Shigella peptidoglycan (PGN) y controlan tanto la proteína
cinasa activada por mitógeno (MAPK) como la señalización proinflamatoria del factor nuclear κB (NF-κB)
(Girardin et al., 2001 , 2003a , b , c Chamaillard et al., 2003 ; Inohara et al., 2003 ). Los estudios han demostrado
que NOD1 es esencial para la inducción de quimiocinas y citoquinas en respuesta a Shigella intracelular.o
PGN. La replicación bacteriana dentro de las células huésped libera PGN, que desencadena el inhibidor de la
proteína 2 que interactúa con el receptor NOD1 (RIP2) de la vía del factor nuclear kappa-B quinasa (IKK) que
conduce a la producción de interleucina 8 (IL-8; Girardin et al ., 2001 ). NOD1 sigue siendo el principal detector
intracelular de la infección por Shigella , y está aguas arriba de vías inflamatorias y de supervivencia que ayudan
al anfitrión a manejar la infección por el patógeno. Una de estas vías de supervivencia que implica NOD1-RIP2-
IKKβ-NF-κB en las células epiteliales contrarresta el daño mitocondrial y la vía de estrés desencadenada
por Shigella(Carneiro et al., 2009) Las vías de señalización aguas abajo de estos receptores pueden funcionar de
forma aislada o en combinación, lo que conduce a respuestas antimicrobianas. Por ejemplo, la estimulación de
TLR puede ayudar en procesos dirigidos a NLR, como se ve con la expresión de los precursores de IL-18 e IL-1β
guiada por TLR, que se procesan intracelularmente como consecuencia de la activación de inflamasomas
dependiente de NLR (Miao et al. ., 2010 ). Esto permite niveles adicionales de amplificación, asegurando que se
inicie una respuesta rápida una vez que se verifica una posible amenaza a través de múltiples sensores, tanto
intracelulares como extracelulares.
Después de que los macrófagos internalicen Shigella , una forma proinflamatoria de muerte celular, dependiente
de caspasas, conocida como piroptosis, es inducida por componentes bacterianos, así como por señales de peligro
que provienen de células hospedadoras muertas o moribundas. Se ha demostrado que la proteína varilla MxiI y la
proteína de aguja MxiH de Shigella T3SS estimulan el dominio CARD de la familia NLR que contiene 4
proteína (NLRC4) inflamasoma después de ser detectada por la familia NLR, proteína inhibidora de apoptosis 2
(NAIP2) y NAIP humana (NAIP1 murino) respectivamente (Yang et al., 2013 ; Suzuki et al., 2014 ). Se sabe que
la familia canónica de NLR, dominio de pirina que contiene 3 (NLRP3) inflamasoma, responde a los restos de la
membrana fagocítica, entre otros estímulos (Ashida et al., 2014) En conjunto, la presencia de un sistema
intracelular que genera especificidad a través de diferentes sensores en sentido ascendente permite que unos
pocos efectores clave realicen la misma función mientras detectan una gran diversidad de estímulos. Sin
embargo, el descubrimiento de un método de hospedaje para detectar LPS intracelular ha descubierto la
existencia de un inflamasoma no canónico. Esta vía inflamamasome no canónica requiere caspasa-11 (homólogo
de ratón de caspasa-4 humana) como un sensor aguas arriba de LPS intracelular (Kayagaki et
al., 2013 ). Caspasa-11 induce piroptosis independientemente de NLRP3 o caspasa-1, pero requiere que los
últimos componentes induzcan la respuesta de las citocinas IL-1β e IL-18 (Kayagaki et al., 2011) El
descubrimiento de esta función de caspasa-11 cambió la creencia de que LPS solo se detectaba extracelularmente
por TLR4. Un sistema redundante para detectar LPS refuerza la dependencia de los sensores intracelulares y
extracelulares para los componentes bacterianos, que en conjunto pueden servir para inducir múltiples ondas de
defensa del huésped. Aunque estos hallazgos sobre la caspasa-11 no son específicos de Shigella , sugieren un
mecanismo que puede estar en juego en las células en respuesta a Shigella , así como a otros patógenos.
A medida que las vías para detectar ácidos nucleicos virales intracelulares se han vuelto más exhaustivas, la
investigación de los sensores intracelulares de ácido nucleico bacteriano se ha convertido en un área de
interés. Los estudios han informado que el detector intracelular de ácido desoxirribonucleico de doble cadena
(dsDNA) es GMP-AMP sintasa cíclica (cGAS), una enzima que genera monofosfato de guanosina cíclica-
monofosfato de adenosina (cGAMP) que luego sirve como un segundo mensajero aguas abajo para activar el
estimulador de los genes de interferón (STING) que conducen a la generación de interferones de tipo 1 y
señalización de NF-κB (Broz y Monack, 2013 ; Wu et al., 2013)) El dsDNA citosólico asociado con la infección
por Shigella podría surgir a partir del daño de la célula huésped o la presencia de bacterias intracelulares, ambas
situaciones en las que el huésped se beneficiaría de la señalización proinflamatoria. Si bien las células
hospedadoras poseen independientemente múltiples formas de responder a la infección por Shigella , estudios
recientes destacan el transporte intercelular de cGAMP a través de uniones gap. Se demostró que este cGAMP
transferido estimula STING en células no infectadas adyacentes a la célula infectada, lo que permite la
preparación de defensa proactiva incluyendo la expresión de citoquinas proinflamatorias en células hospedadoras
no infectadas (Kasper et al., 2010 ; Ablasser et al., 2013).) Teniendo en cuenta que la bacteria se mueve
rápidamente de una célula a una célula adyacente utilizando mecanismos de propagación de célula a célula,
cualquier forma de preparación que las células circundantes puedan llevar a una defensa preventiva sería
beneficioso para combatir la infección por Shigella (ver más abajo).
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Efectores de Shigella y manipulación de procesos host

Shigella ha desarrollado estrategias sofisticadas para escapar de la vacuola de entrada y replicarse en el
compartimiento intracelular del huésped. Estas estrategias dependen de efectores de la proteína que en conjunto
contribuyen en gran medida a la manipulación de los procesos celulares clave por el patógeno bacteriano
(Tabla (Tabla 1).1 ). Los efectores entregados por Shigella a través del T3SS se pueden dividir en una primera y
segunda ola. La primera ola de efectores, como se mencionó anteriormente, es esencial para la remodelación de
la actina y la posterior invasión de las células epiteliales del hospedador, e incluye proteínas como IpaA, IpaB,
IpaC y VirA (Wang et al., 2013 ). Una vez Shigellaha ingresado a la célula, la segunda ola provoca cambios en el
tráfico de membranas del huésped, autofagia, señalización inflamatoria y muerte, modificaciones epigenéticas,
entre otros procesos como la motilidad intracelular y la diseminación intercelular que se mencionaron
anteriormente (Ashida et al., 2015 ). Estos cambios promueven la supervivencia, la replicación y la propagación
de Shigella a las células circundantes, permitiendo que la infección empeore.

tabla 1
Los efectores de Shigella manipulan una variedad de procesos de host .

Resumen de los efectores de Shigella y sus mecanismos de acción

Shigellaefector Objetivos de host Efecto en el proceso de host

OspE1 Enlace al exterior de las celdas polarizadas Aumenta la adherencia a las células
polarizadas

OspE2 Enlace al exterior de las celdas polarizadas Aumenta la adherencia a las células
polarizadas

IpgB1 Actuar como GEF para Rac Inducir remodelación de actina para
facilitar la invasión

IpgB2 Actuar como GEF para RhoA Inducir remodelación de actina para
facilitar la invasión

IpgD Actúa como fosfatasa para generar PI5P Inducir remodelación de actina para
facilitar la invasión
 Resumen de los efectores de Shigella y sus mecanismos de acción

Shigellaefector Objetivos de host Efecto en el proceso de host

IpaB Enlace a filopodia y colesterol en la superficie de la célula huésped Insertar en la membrana eucariota para
Inserte en la membrana de la vacuola formar un poro Facilitar la invasión
Reduzca y distorsione los niveles equilibrados de colesterol y lípidos Forma complejo T3SS
Promover la ruptura de la vacuola
Interferir con la función adecuada de
Golgi

IpaD Enlace a filopodia en la superficie de la célula huésped Facilitar interacción e invasión

Forma complejo T3SS

IpaC Activa la Facilite la invasión

inserción de Src Kinase y Cdc42 en la membrana de la vacuola Forma el complejo T3SS
Promueva la ruptura de la vacuola

IpaA Componente de adhesión focal de células hospedantes vinculina Functions as an anchor to the site of
membrane ruffling

OspB Induce mTOR signaling through IQGAP1 Inhibit autophagy

VirA Catalyze GTP hydrolysis in Rab1 Disrupt ER-to-Golgi trafficking and

Induce p53 degradation autophagy
Block apoptosis

IpgD Host cell recycling endosome machinery Rapid escape from the entry vacuole
Increase levels of PI5P leading to p53 degradation Induce PI3K/Akt-dependent survival
pathways
 Resumen de los efectores de Shigella y sus mecanismos de acción

Shigellaefector Objetivos de host Efecto en el proceso de host

IpaJ Cleave N-myristoylated glycine from ARF1 to disrupt its localization Disrupt autophagosome maturation and
host membrane trafficking

IpaH9.8 Target and degrade NEMO/IKKγ Disrupt NF-κB signaling

IpaH4.5 Target and degrade p65 subunit of NF- κB Disrupt NF- κB signaling

IpaH0722 Target and degrade TRAF2 Disrupt NF- κB signaling

OspZ Prevent nuclear translocation of p65 Disrupt NF- κB signaling

OspI Deamidato UBC13 E2 enzima necesaria para la activación de TRAF6 Interrumpa la señalización NF-κB

OspG Interfiere con la degradación proteasómica de ubiquitina de IκB-α Interrumpa la señalización NF-κB

OspF Inactivar los componentes de señalización de MAPK como ERK y p38 Interrumpir la señalización MAPK
mediante modificaciones epigenéticas utilizando su actividad de
fosfotreonina liasa

OspC3 Interactúa con la subunidad caspasa-4-p19 e inhibe su Inhibir piroptosis dentro de las células
heterodimerización y activación epiteliales

IcsB Bloquea la segmentación de autofagia al unir Atg5 Unir el Reducir la autofagia

colesterol Escape de la vacuola tras la propagación
 Resumen de los efectores de Shigella y sus mecanismos de acción

Shigellaefector Objetivos de host Efecto en el proceso de host

de célula a célula

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Tales procesos incluyen señalización apoptótica además de otra señalización de muerte, inhibición de autofagia, remodelación de
actina que se usa en invasión así como motilidad y propagación de célula a célula, señalización antiinflamatoria que conduce a una
respuesta inmune alterada, dinámica de membrana alterada y la estimulación de la formación y acción inflamasome. Estos procesos
alterados contribuyen a la infección por Shigella, ayudando a la propagación eficiente de la bacteria dentro del huésped .

Como se explicará en detalle a continuación, las células hospedadoras se someten a autofagia en respuesta a
diversas situaciones de estrés, una de ellas es la infección (Baxt y Goldberg, 2014 ). Shigella entrega efectores
similares a aquellos involucrados en la primera ola que se dirigen a la polimerización y motilidad de la actina
para manipular la maquinaria del huésped involucrada en la autofagia. Del mismo modo, Shigella inyecta
efectores que interfieren con el tráfico de la membrana del huésped. IpgD es uno de estos efectores y, como
fosfoinositida fosfatasa, promueve la producción de fosfatidilinositol 5-fosfato (PI5P), que desempeña numerosas
funciones en la manipulación del tráfico de huéspedes, como el aumento de la disrupción de la membrana
vacuolar (Ashida et al., 2015) La PI5P controlada por IpgD también bloquea la formación de hemichannels,
previniendo la liberación de trifosfato de adenosina (ATP), lo que limita las células vecinas para detectar esta
señal de peligro potencial (Puhar et al., 2013 ). Otros tres efectores, VirA, IpaJ e IpaB también ayudan en esta
manipulación del tráfico de membranas hospedadoras. Las GTPasas forman componentes importantes de la ruta
secretora del hospedador y están dirigidas por VirA e IpaJ. VirA interrumpe el tráfico de ER a Golgi y la
autofagia catalizando la hidrólisis de GTP en Rab1, y IpaJ escinde la glicina N-miristoilada de ARF1, alterando
la localización y maduración de autofagosomas entre otros procesos (Ashida et al., 2015) Por último, IpaB
interfiere con el correcto funcionamiento de Golgi y el transporte de proteínas a través de la reducción y, por lo
tanto, altera los niveles equilibrados de colesterol y lípidos (Ashida et al., 2015 ). Por lo tanto, la alteración de la
dinámica de la membrana parece ser un componente clave de la estrategia de infección por Shigella .
La señalización inflamatoria es una de las principales defensas del huésped frente a la infección, lo que lo
convierte en un candidato para el objetivo de Shigella . De hecho, Shigella amortigua la vía de señalización NF-
κB usando varios efectores, como la familia IpaH ubiquitina ligasa. IpaH9.8 se dirige al modulador esencial NF-
κB (NEMO) / IKKγ, IpaH4.5 se dirige a la subunidad p65 de NF-κB, y IpaH0722 se dirige al factor 2 asociado al
receptor de TNF (TRAF2), junto a componentes importantes degradantes de la vía NF-κB. detener la
señalización inflamatoria pro (Ashida et al., 2013 ; Wang et al., 2013 ; Giogha et al., 2014) Del mismo modo, la
familia de efectores Osp también contribuye al bloqueo de NF-κB, a través de diferentes mecanismos. OspZ
previene la translocación de p65 al núcleo, OspI desamida la enzima UBC13 E2 necesaria para la activación de
TRAF6 y OspG interfiere con la degradación proteasómica de ubiquitina de IκB-α. Este ataque multifacético
sobre NF-κB confirma su importancia en el aclaramiento de Shigella . Además de NF-κB, los efectores
de Shigellatambién se dirigen a otras vías de señalización que regulan la inflamación. OspF usa su actividad
fosfotreonina liasa para inactivar irreversiblemente los componentes de señalización MAPK como la quinasa
regulada por señal extracelular (ERK) y p38 a través de modificaciones epigenéticas (Li et al., 2007 ; Newton et
al., 2010 ; Sanada et al.,2012 ; Raymond et al., 2013 ). Estos métodos de interrupción conducen a una
disminución en la expresión génica de la señalización proinflamatoria, apoptótica y de estrés en células
hospedadoras.
Como Shigella impone un frenazo tan severo en la señalización del NF-κB del anfitrión, es razonable esperar que
la célula huésped se convierta en pro-apoptótica. Sin embargo, Shigellano induce la muerte celular en células
epiteliales tan fácilmente como en los macrófagos, y como resultado, es común ver células epiteliales con cientos
de bacterias en ellas (Mantis et al., 1996 ). Como se esperaba, Shigellainyectar efectores que también se dirigen a
la vía apoptótica. VirA y IpgD conducen a la degradación de p53 a través de la activación de calpaína y la
degradación proteasomal, respectivamente, deteniendo la muerte celular. IpgD aumenta los niveles de PI5P que
promueven las rutas de supervivencia fosfoinositida 3-quinasa (PI3K) / Akt-dependiente, y la fosforilación del
homólogo doble minuto 2 de ratón (MDM2) que degrada p53 (Ashida et al., 2015 ). Un proceso de supervivencia
inducido por VirA implica la escisión impulsada por calpaína del agonista de muerte del dominio de interacción
BH3 (BID), que conduce a un segundo activador de caspasas derivado de mitocondrias (SMAC) de las
mitocondrias y al bloqueo del inhibidor de la proteína de la apoptosis ( XIAP), respuesta inmune impulsada y
apoptosis (Andree et al., 2014 ; Ashida et al., 2014) En una nota similar, aunque Shigella induce piroptosis en los
macrófagos, estudios recientes han identificado a Shigella efector OspC3 como un antagonista de la piroptosis
inducida por caspasa-4 dentro de las células epiteliales (Kobayashi et al., 2013 ). Esto está en consonancia con la
prioridad de Shigella para mantener vivas las células epiteliales del huésped, lo que logran mediante la inyección
de efectores T3SS.
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Difusión de célula a célula y segmentación autofagia

En el citosol, Shigella utiliza la maquinaria de actina de la célula huésped para la motilidad intracelular. IcsA
(VirG) interactúa con y activa la proteína neuronal del síndrome de Wiskott-Aldrich (N-WASP), que recluta Arp2
/ 3 para dirigir la polimerización de actina (Egile et al., 1999 ). La tirosina quinasa, Btk, fosforila N-WASP,
aumentando la motilidad de Shigella (Egile et al., 1999 , Dragoi et al., 2013 ). Es importante destacar que, basada
en la motilidad actina permite Shigella de propagarse de célula a célula a través de la formación de
protuberancias en la membrana celular que se producen preferentemente en los cruces tricelular (Fukumatsu et
al,. 2012 ; Figura Figura 1).1) Este proceso es facilitado por las proteínas del huésped Serina / treonina quinasa
11 (STK11), miosina X, miosina II y Dia1 (Rathman et al., 2000 ; Heindl et al., 2010 ; Bishai et al., 2013 ;
Dragoi y Agaisse, 2014 ). Es importante destacar que el trabajo reciente ha demostrado que la secreción de T3SS
se suprime durante la replicación intracelular, pero se reactiva durante la propagación de células y células
(Campbell-Valois et al., 2014 ). De acuerdo, usando un sistema que permite el cierre posterior a la entrada de la
actividad T3SS, Kuehl et al. demostraron que la propagación de célula a célula depende de la actividad de T3SS
(Kuehl et al., 2014 ).
Un desafío importante que Shigella debe superar durante la replicación intracelular es evitar la focalización y
degradación de la autofagia. La autofagia es un sistema complejo para secuestrar la carga citoplásmica
en vesículas de doble membrana generadas de novo que posteriormente se fusionan con los lisosomas para
permitir la degradación de la carga citoplásmica. Aunque la función primaria de la autofagia es el reciclado de
componentes citoplasmáticos u orgánulos enteros, también se puede usar como una vía de defensa celular
dirigiéndose a las bacterias intracelulares. Ogawa et al. informó la primera interacción
de Shigella intracelular con la maquinaria de autofagia (Ogawa et al., 2005).) En este informe inicial, los autores
demostraron que la proteína de superficie IcsB era crítica para reducir la focalización de la autofagia y que las
cepas que carecen de IcsB están restringidas de manera eficiente por la autofagia (Ogawa et
al., 2005 ). Curiosamente, las cepas que carecen de IcsA (VirG) y IcsB no son blanco de la autofagia (Ogawa et
al., 2005 ). El trabajo posterior demostró que Tecpr1 es un factor de orientación del huésped en esta vía (Ogawa
et al., 2011 ). Estos hallazgos proporcionaron la primera sugerencia de que la maquinaria implicada en la
propagación de células y la motilidad intracelular está relacionada con la autofagia dirigida.
Varios estudios han sugerido que Shigella es particularmente vulnerable a la autofagia cuando se asocia con
membranas de células hospedadoras. Travassos et al. demostraron que los receptores de reconocimiento de
patrón de peptidoglucanos intracelulares (PRR), NOD1 y NOD2 juegan un papel crítico en la dirección de la
maquinaria de autofagia a través de la interacción con autofagia 16 como 1 (ATG16L1) al sitio
de invasión de Shigella en la membrana plasmática (Travassos et al ., 2010 ). Esta interacción NOD-ATG16L1
también regula la respuesta proinflamatoria desencadenada por la invasión de Shigella (Sorbara et
al., 2013 ). Además, los restos de membrana del huésped resultantes del escape de Shigelladesde la entrada, la
vacuola puede generar respuestas inflamatorias, y también se ubiquitan y se dirigen a la degradación autofágica
(Dupont et al., 2009 ). Mostowy et al. encontraron que la Shigellaintracelular puede quedar atrapada en las jaulas
de Septin, lo que permite la selección y eliminación de la autofagia. Por el contrario, las bacterias con colas de
actina no están segregonadas ni segmentadas por autofagia (Mostowy et al., 2010 ).
El trabajo de ambos Ogawa et al. y Mostowy et al. sugieren que los componentes implicados en la motilidad
basada en actina son necesarios tanto para la autofagia dirigida (IcsA) como para el escape (IcsB; Ogawa et
al., 2005 ; Mostowy et al., 2010 ). Trabajos recientes han arrojado luz sobre estos hallazgos. Campbell-Valois et
al. demostraron que el subconjunto citosólico de Shigella durante la infección no estaba dirigido al sistema de
autofagia, y que solo se atacaron las bacterias ya asociadas con un evento de entrada de vacuolas o célula-célula,
marcado por un T3SS activo (Campbell-Valois et al. , 2015) Además, encontraron que IcsB y VirA están
implicados en el escape de la vacuola después de la propagación célula a célula, y que la deficiencia en
cualquiera de las proteínas conduce a un aumento de la focalización de LC3 como resultado de un proceso de
escape alterado (Campbell-Valois et al. 2015 ). De acuerdo, las bacterias IcsA negativas, deficientes en la
propagación de célula a célula, tampoco son el objetivo de las proteínas Septins o autofagia (Ogawa et
al., 2005 , 2011 ; Mostowy et al., 2010 ). Aunque el mecanismo exacto a través del cual IcsB promueve la
propagación de célula a célula es desconocido, Kayath et al. demostraron que la unión al colesterol por IcsB es
necesaria para su función en la evitación de la autofagia (Kayath et al., 2010).), lo que sugiere que la unión del
colesterol durante la propagación de célula a célula contribuye a escapar. En conjunto, estos hallazgos están de
acuerdo con un modelo en el que Shigella se dirige de forma eficiente a la autofagia en el contexto de las
membranas del huésped durante la invasión inicial o la propagación de célula a célula.
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Conclusiones
Como suele ocurrir con las interacciones biológicas complejas entre los agentes infecciosos y el huésped, el
descubrimiento de la comprensión y las explicaciones mecanicistas revela preguntas adicionales. Algunos de
ellos, junto con breves conclusiones, se presentan a continuación.
La relevancia in vivo del mecanismo de focalización de la autofagia aún no se ha determinado. En otras palabras,
¿la autofagia realmente restringe el crecimiento de Shigella en condiciones fisiológicas? Además de esto, se
necesita más trabajo para comprender el mecanismo molecular de cómo Shigella es capaz de desestabilizar las
membranas (ya sea durante la invasión inicial o la propagación de célula a célula) y cómo se relaciona con el
reconocimiento del huésped de la Shigella citosólica .
Si bien es claro que la infección con Shigella conduce a la regulación positiva de las vías de estrés metabólico, no
está claro cómo la activación de estas vías contribuye a la defensa del huésped contra este patógeno. Del mismo
modo, queda por ver cómo la vía de estrés regulada al alza afecta el panorama transcripcional de las células
infectadas con Shigella . Anteriormente se había demostrado que el piruvato es una importante fuente de carbono
para Shigella intracelular , sin embargo, estos estudios se han realizado utilizando células cancerosas que
dependen ampliamente de la glucólisis. Para avanzar en la comprensión, será esencial determinar si lo mismo es
cierto para las células epiteliales intestinales primarias, que representan un objetivo fisiológico
de Shigella . Shigellala infección induce la inhibición de mTOR y la fosforilación de eIF2alfa, pero el grado en
que estas vías están reguladas por efectores de Shigella específicos permanece mal caracterizado. Identificar si,
además de OspB, Shigella ha evolucionado significa manipular estas vías será una cuestión importante para
futuras investigaciones. Por último, se propuso que Shigella puede inducir la inanición de aminoácidos en las
células anfitrionas como resultado del daño a la membrana, sin embargo, actualmente no está claro cómo el daño
a la membrana del huésped desencadena la inanición de aminoácidos.
Los efectores de Shigella manipulan una variedad de procesos fundamentales en el host. La lista
de efectores de Shigella sigue creciendo, junto con los procesos de host que están dirigidos. La inducción de la
muerte celular sigue siendo uno de los mecanismos de defensa fundamentales para que las células anfitrionas
combatan la infección. Investigación adicional sobre el riesgo / beneficio de la piroptosis para Shigellaayudará a
entender qué situaciones requieren un método de escape tan proinflamatorio de la célula huésped. El
descubrimiento del inflamasoma no canónico ha despertado el interés sobre la naturaleza exacta de los estímulos
y los sensores utilizados por los principales inflamasomas, por lo que se necesita investigación centrada en
aclarar estas vías. Finalmente, la identificación de la transferencia intercelular de mensajeros protectores como
cGAMP sugiere que también pueden existir otros mensajeros paracrinos de infección. Esto podría representar
una estrategia de defensa eficaz y proactiva utilizada por el huésped para contrarrestar la consecuencia nociva de
la inyección de efectores durante la invasión al alertar a las células vecinas no infectadas.
Tal progreso en el descubrimiento de la patogénesis de la infección por Shigella sugiere posibilidades para el
futuro de las terapias y el tratamiento de enfermedades de naturaleza bacteriana. Quizás la estrategia de
tratamiento más aparente sería diseñar inhibidores específicos de los efectores T3SS, para bloquear la acción de
aquellos efectores que son críticos para la invasión y la propagación de célula a célula. Del mismo modo,
después de entender los cambios metabólicos Shigellasometerse durante el proceso de infección, limitar el acceso
al piruvato podría detener la propagación de la bacteria. Sin embargo, con la mayoría de las terapias que se
dirigen a componentes o procesos específicos de un microbio, las mutaciones y la selección que conducen a la
resistencia serían un riesgo potencial. Teniendo esto en cuenta, una terapia alternativa que podrían tomar las
terapias implica fortalecer las respuestas del huésped, especialmente aquellas que son atacadas por la infección
bacteriana, antes de que las bacterias tengan la oportunidad de atacar las células. Esta defensa ocurre
endógenamente ya que las células circundantes amplifican su defensa cuando un vecino está infectado, por lo
tanto, también debería funcionar con estímulos exógenos. Tales vías podrían incluir el mantenimiento de
componentes de las vías de señalización inflamatoria y de supervivencia, o la limitación del acceso bacteriano a
nutrientes esenciales como el hierro en pacientes que han sido infectados.Lapatogénesis de Shigella y la amplitud
de la respuesta del huésped a la infección.