Disolución mejorada de calcopirita en reactores de

tanque agitado por aumento de temperatura durante la

biolixiviación

Objetivos:

Definición de tres etapas de actividad en biolixiviación de sulfuro de cobre en

tanque agitado

Recuperación mejorada de Cu por desacoplamiento del crecimiento y fase

de biolixiviación

Aumento de temperatura menor mejorada cinética de biolixiviación y

recuperación de metales

Disolución casi completa de la calcopirita mediante biolixiviación.

Resumen
Los sulfuros primarios de cobre , como la calcopirita , representan el recurso de
cobre más importante y actualmente se explotan principalmente
mediante pirometalurgia . La biolixiviación se considera una alternativa económica
y respetuosa con el medio ambiente, yse comprobó la viabilidad técnica de la
biolixiviación de los concentrados de mineral de cobre con reactores de tanque
agitado utilizando microorganismos acidófilos que oxidan el hierro / azufre. Sin
embargo, en el caso de los concentrados de cobre del mineral de tipo
Kupferschiefer, la recuperación de cobre a temperaturas adecuadas para los
acidófilos moderadamente termófilos fue incompleta debido a la ineficiente
disolución de la calcopirita.
Por lo tanto, el estudio presentado tuvo como objetivo mejorar la disolución de
calcopirita mediante el desacoplamiento del crecimiento y la actividad de
biolixiviación de los acidófilos. Esto se logró mediante un aumento controlado de la
temperatura en experimentos de biorreactores de laboratorio con concentrado de
cobre de mineral de tipo Kupferschiefer. Número total de células y actividad
microbiana.El monitoreo permitió definir tres etapas del proceso de biolixiviación: (i)
fase de crecimiento, (ii) fase de biolixiviación y (iii) fase de reposo. El tiempo total
de residencia fue de casi siete días, según la recuperación de cobre y la actividad
de oxidación del hierro. Los experimentos a temperaturas constantes (42 ° C, 48 °
C, 50 ° C) y un aumento de temperatura controlado al final de la fase de crecimiento
de 42/46 ° C, 44/48 ° C y 46/50 ° C, mostraron que la recuperación del metal se
mejoró con un aumento incremental de la temperatura y dio como resultado
un potencial redox más bajo . La recuperación de cobre se mejoró originalmente del
86% al 97% con solo un aumento de temperatura de 4–8 ° C. El análisis
mineralógico confirmó una ausencia casi completa de calcopirita en los residuos
después de los experimentos de biolixiviación a 46/50 ° C. Estos resultados indican
un efecto distinto de latemperatura.en la recuperación de cobre. El estudio define
parámetros para hacer que la biolixiviación de minerales ricos en calcopirita con
STR sea más eficiente y económicamente viable, y garantiza un control óptimo del
proceso para la ampliación de escala .

1 . Introducción

Los reactores de tanque agitado (STR) se utilizan principalmente a escala industrial para la
biooxidación de minerales de oro refractarios , sin embargo, también se ha descrito
la biolixiviación de metales básicos comerciales . La biolixiviación del cobre tiene lugar
principalmente como biolixiviación en pilas o en vertedero y contribuye significativamente
a la producción mundial de cobre ( Schippers et al., 2014 ; Brierley, 2016 ). Un
inconveniente de esta última tecnología es, además de las cinéticas de lixiviación más bajas
en comparación con STR, que los sulfuros de cobre primarios , como la calcopirita (CuFeS 2)
están escasamente lixiviados en los montones y la producción de cobre solo se basa en la
disolución de sulfuros de cobre secundarios ( Watling, 2006 ). Sin embargo, la recuperación
incompleta de cobre debido a la disolución insuficiente de calcopirita también se ha
observado en proyectos de investigación europeos que abordan el desarrollo de un proceso
de biolixiviación STR para concentrados de cobre de minerales de tipo Kupferschiefer
( d'Hugues et al., 2008 ; Spolaore et al., 2009 , Spolaore et al., 2011 ; Kamradt et al., 2018 ).
Los principales minerales sulfurosos de cobre en la pizarra negra son bornita (Cu 5 FeS 4 ),
calcocita (Cu 2 S), covellita (CuS) y calcopirita. Según lo observado por Spolaore et al.,
2009, Spolaore et al., 2011 durante la biolixiviación, la calcocita se oxida con iones
férricos en dos pasos, con covelita como producto intermedio ( Dixon, 2000 ; Leahy et al.,
2007 ):
(1)➔con2S+2Fe3+➔con2++CuS+2Fe2+
(2)➔CuS+2Fe3+➔con2++S0+2Fe2+
El azufre elemental producido en la ec. (2) luego se oxida enzimáticamente a sulfato por
microorganismos. La tasa intrínseca de la ec. (1) es tan alto, que la velocidad de reacción está
limitada por la difusión de iones férricos a la superficie mineral ( Dixon, 2000 ), pero desde
la ecuación. (2) es muy lento, la recuperación de cobre en general está impulsada por la
disolución de covellita.
La calcocita y la bornita se disolvieron casi por completo en el primer biorreactor de un
experimento de biolixiviación STR en tres etapas, mientras que la cantidad de covellita
aumentó en el residuo, pero se disolvió completamente en el segundo biorreactor. El residuo
final en el tercer biorreactor estuvo dominado por la presencia de calcopirita, apoyando la
hipótesis de su recalcitancia en la biolixiviación ( Spolaore et al., 2011 ).
La calcopirita solo se disuelve en medio ácido (por debajo de pH 4) a potenciales redox
porencima de 400 mV (vs. electrodo de Ag / AgCl), mientras que la cinética de disolución
depende de la concentración de ión férrico y del valor del pH. La disminución de la
disolución de calcopirita observada a lo largo del tiempo durante la biolixiviación se describe
a menudo como el resultado de la formación de la capa de pasivación en la superficie del
mineral, lo que dificulta el proceso de oxidación adicional ( Cordoba et al., 2008 ). Las
pruebas de azufre elemental, sulfuros (como covellita) ( Barriga Mateos et al., 1987 ) y
precipitados ferrosos que contienen hierro en la superficie del mineral se confirmaron
mediante análisis mineralógico ( Sandstrom et al., 2005 ; Stott et al., 2000 ).
Las estrategias para resolver la disolución incompleta de calcopirita en los procesos de
biolixiviación incluyen (i) la aplicación de arqueas termofílicas ( Gericke et al.,
2001 ; d'Hugues et al., 2002 ), (ii) que operan a niveles redox controlados ajustando el
suministro de oxígeno ( Third et al., 2002 ; van der Merwe et al., 1998 ) o mediante la
aplicación de métodos electroquímicos ( Lotfalian et al., 2015 ; Ahmadi et al., 2011 ), (iii) la
adición de catalizadores como la plata ( Cancho et al. al., 2007 ), así como (iv) molienda fina
del concentrado ( Rhodes et al., 1998 ).
La biolixiviación con calcopirita con acidófilos oxidantes de hierro y / o azufre
moderadamente termófilos ha recibido una mayor atención, ya que
sus temperaturas de crecimiento óptimas de aproximadamente 45–52 ° C representan una
ventaja cinética sobre las de meso-acidófilos, y los costos de operación son más bajos que
para Operaciones a temperaturas más altas para termo-acidófilos ( Brierley, 2008 ). En un
estudio de Norris et al. (2016) se logró una extracción de cobre eficiente de calcopirita
con bacteriasmoderadamente termófilas a aproximadamente 50 ° C y usando arqueas
termófilas a hasta 80 ° C ( Norris 2007 ). La biolixiviación a alta temperatura
con termófilos tiene, sin embargo, también desventajas, tales comola corrosión de los
biorreactores, la formación de minerales secundarios que impiden la biolixiviación adicional
y causan que los valiosos elementos lixiviados vuelvan a precipitarse ( Batty y Rorke,
2006 ). Los termófilos moderadamente también son capaces de crecer a densidades de pulpa
más altas que los termófilos y permiten la biolixiviación en STR sin corrosión significativa
( Nemati y Harrison, 2000 ). Recientemente, se ha desarrollado en Irán un proceso STR a
escala industrial con una producción anual planificada de 50,000 t de cátodos de cobre con
termófilos moderados (Naghibzadeh et al., 2017 ).
El objetivo de este estudio reciente fue mejorar la recuperación de cobre del concentrado de
cobre derivado del mineral de tipo Kupferschiefer y optimizar el proceso de biolixiviación
STR. Se realizó un estudio detallado de la biolixiviación de metales y los cambios en la
composición de la comunidad microbiana durante el curso del experimento. La idea de
mejorar la recuperación de cobre era aumentar ligeramente la temperatura de operación para
lograr una mejor disolución de calcopirita, pero para evitar una mayor precipitación de
minerales secundarios y la formación de la capa de pasivación. Este enfoque fue probado ya
sea operando a temperatura constante o con un incremento incremental de la temperatura de
dos pasos combinado con el monitoreo de la comunidad microbiana. Análisis de la cinética
de biolixiviación, recuperación de metales y mineralogía. de los residuos de biolixiviación
deben indicar la temperatura de operación favorecida para la disolución eficiente de la
calcopirita.
2 . materiales y métodos

2.1 . Concentrado de cobre del mineral de tipo Kupferschiefer

Los depósitos europeos de tipo Kupferschiefer en Europa central pertenecen a los depósitos
de metales base alojados en sedimentos, que están muy extendidos y se extraen en todo el
mundo ( Borg et al., 2012 ).
El material utilizado para la biolixiviación fue un concentrado de cobre extraído
de los depósitos de mineral de esquisto negro (KGHM, Polonia). El concentrado tenía un
tamaño de partícula de <90 μm y tenía las siguientes características principales: 13.3% en
peso de Cu, 9.4% en peso de Fe, 16.5% en peso de S, 0.064% en peso de Ag, 1.1% en peso
de carbono inorgánico total (TIC), 9.1% en total carbono orgánico (TOC) y un tamaño de
partícula aproximado de <63 μm (que pasa del 89%, tabla S1). La abundancia
de minerales de sulfuro se determinó mediante mineralogía automatizada basada en
SEM (análisis de liberación de minerales – SEM / MLA-GXMAP).
2.2 . Cultivo microbiano y condiciones de crecimiento.
El consorcio de biolixiviación acidófilo, moderadamente termofílico utilizado fue el
consorcio BRGM-KCC mantenido durante muchos años en concentrado de cobre ( d'Hugues
et al., 2003 ; Morin y d'Hugues, 2007 ) que comprende L.
ferriphilum , At. Caldus y Sulfobacillusspp. ( Spolaore et al., 2011 ). El consorcio se
mantuvo en concentrado de Cu al 3% en medio de sal basal, pH 1,8 ( Wakeman et al., 2008 )
a 42 ° C, en el que se subcultivó varias veces y se adaptó a una carga de sólidos del 10% (p /
v) antes Sirviendo de inóculo para pruebas de biolixiviación.

2.3 . Instalación de biolixiviación.

Los experimentos de biolixiviación se llevaron a cabo en biorreactores de tanque agitado con

control de temperatura y pH de 2 l (Electrolab, Reino Unido). Los reactores fueron
totalmente desconcertados y agitados por un sistema de doble impulsor que consiste en
una turbina Rushton de 6 palas estándar en combinación con un impulsor de flujo axial de45
° y 6 palas con velocidad establecida en 400 rpm. Después del tratamiento ácido inicial del
material sulfidic con H 2SO4(consumo de ácido de 182,3 g H2SO4/ kg) a aproximadamente pH
1,8 con el fin de disolver carbonatosy para evitar la inhibición de las células mediante valores
de pH inapropiados, el experimento se inoculó con un cultivo de 150 ml adaptado al mineral
según el protocolo descrito por Hedrich et al. (2016) . Los biorreactores funcionaron a una
carga de sólidos del 10% (p / v) y se rociaron con aire a 120 l / h.

2.4 . Determinación de parámetros experimentales.

Se llevó a cabo una prueba preliminar para estudiar la relación entre la actividad bacteriana(a
través de la microcalorimetría), los números de células (tinción con SYBR Green) y la
disolución del metal ( Hedrich et al., 2016 ). Números de células, actividad microbiana, pH,
redox y metales disueltos se siguieron diariamente para determinar los parámetros clave
durante el experimento para comprender mejor y mejorar el proceso de
biolixiviación. Experimentos previos con el mismo material, el consorcio microbiano y el
uso de condiciones similares demostraron que era adecuado un tiempo de reacción de
aproximadamente siete días para la biolixiviación; Por lo tanto, permitimos diez días para el
seguimiento completo de los experimentos.

2.5 . Experimentos de temperature

Los datos de experimentos previos en biorreactores en cascada continua en BRGM indicaron

que la disolución del sulfuro y la recuperación del metal aumentaron cuando la temperatura
subió unos pocos grados de un tanque a otro debido a las reacciones exotérmicas durante
la lixiviación del sulfuro de metal . Esta observación condujo a la configuración de la
temperatura de dos pasos propuesta, donde, de acuerdo con los hallazgos anteriores, la
temperatura se mantuvo cerca del óptimo del consorcio de biolixiviación durante unos tres
días para permitir el crecimiento y la colonización adecuados del mineral, y se incrementó
en 4 ° C después para mejorar la biolixiviación de metales. Se probaron las temperaturas
constantes (42 ° C, 48 ° C, 50 ° C) y los perfiles de temperatura de dos etapas (42/46 ° C,
44/48 ° C, 46/50 ° C).
Cada experimento a temperaturas constantes de 42 ° C, 48 ° C, 50 ° C siguió el protocolo de
adaptación descrito anteriormente ( Hedrich et al., 2016 ), mientras que, para los
experimentos de temperatura de dos pasos a 42/46 ° C, 44 / A 48 ° C y 46/50 ° C, los cultivos
se adaptaron a la temperatura inicial. Se ejecutaron tres biorreactores paralelos para cada
experimento y las configuraciones abióticas sirvieron como experimentos de control
químico . El pH en los experimentos de control se ajustó con ácido sulfúrico de acuerdo con
el pH final determinado en los experimentos de biolixiviación para proporcionar condiciones
similares. La disolución del mineral de cobre y la cinética durante la biolixiviación se
siguieron y los experimentos terminaron cuando la disolución del mineral de cobre alcanzó
una meseta. Monitoreo regular de pH, potencial redox.La concentración de metal disuelto, la
actividad microbiana y laestructura de lacomunidadse realizaron como se describe
anteriormente.

2.6 . métodos analíticos

2.6.1 . Análisis químico

Regular pH fuera de línea (BlueLine 18 pH electrodo , Schott, Alemania) y el potencial redox

(BlueLine 31 Rx electrodo, Schott, Alemania) las mediciones se realizaron directamente en
la pulpa biorreactor. Los valores redox medidos se corrigieron al electrodo de hidrógeno
estándar (SHE) y se informaron como E h . Las concentraciones de hierro férrico y férrico se
midieron en muestras de 0,45 µm filtradas utilizando el ensayo de Ferrozina ( Lovley y
Phillips, 1987 ). Los metales disueltos se determinaron regularmente en muestras filtradas y
acidificadas utilizando ICP-OES (Varian SpectrAA-300). Al final del experimento, el
residuo se recogió, se lavó con agua acidificada y se secó antes de realizar la digestión
con ácido nítrico después del análisis de los metales por ICP-OES.
2.6.2 . Analisis mineralogico

Las investigaciones de microscopía electrónica de barrido (SEM) en secciones pulidas

cubiertas con carbón del concentrado y los residuos se llevaron a cabo utilizando un
MLA650F (sistema Quanta 650 FEG; compañía FEI) equipado con dos detectores de rayos
X de dispersión de energía (XFlash Detector 5030, Silicon Detector de deriva; Bruker Nano)
para el análisis de elementos semicuantitativos sin estandarización . Las muestras secas y
homogeneizadas se almacenaron bajo nitrógeno hasta su posterior análisis. La composición
mineralógica de las rocas se determinó cuantitativamente utilizando técnicas de análisis de
liberación mineral / SEM (SEM / MLA-GXMAP; Gu, 2003 ; Fandrich et al., 2007). Se
midieron secciones representativas duplicadas para el concentrado y cada muestra de
residuo. En cada sección, la mineralogía se identificó mediante espectrometría de rayos X
de dispersión de energía (EDS) combinada con imágenes de electrones retrodispersados
(BSE). El intenso crecimiento / acumulación de minerales de grano muy fino en partículas
más grandes (comúnmente minerales no minerales, por ejemplo, silicatos) requirió la
aplicación de un umbral de alto espectro del 80% para la identificación adecuada de los
minerales, sin embargo, también dio lugar a un aumento Porcentaje de granos tratados como
minerales desconocidos por el sistema.

2.6.3 . Análisis microbiológico

Los números de células totales se determinaron en muestras de lechada mediante recuento

microscópico después de la tinción con SYBR Green según Lunau et al. (2005) , luego de
la homogeneización de las muestras mediante tratamiento ultrasónico (20 s, 20 ciclos, 20%
de intensidad). Después de la dilución apropiada, 1 ml de solución de tinción (20 μL de ácido
ascórbico 1 MSe agregaron 280 μl de Mowiol, 20 μL de SYBR Green I) a 50 μL de la muestra
y se incubaron durante al menos 10 minutos en la oscuridad. La mezcla se aplicó luego sobre
un filtro de membrana (Whatman Nucleopore, d = 25 mm, tamaño de poro de 0,2 μm), se
enjuagó con 1 ml de solución de Tween20 / PBS al 0,1%, seguido de un lavado con 30 ml de
tampón TE para mejorar la visibilidad de las células y Para evitar interacciones con
partículas. Posteriormente, el filtro se colocó en un portaobjetos microscópico y se cubrió
con 25 µl de solución anti-desvanecimiento (7% de Mowiol, 1% de ácido ascórbico) antes
de contar las células bajo el microscopio. Los números de células se determinaron para cada
muestra contando a través de toda el área del filtro y al menos 50 campos de visión .
Las mediciones microcoralimétricas se realizaron al inicio y al final de cada experimento
para determinar la actividad de biolixiviación de los cultivos ( Rohwerder et al.,
1998 ; Makaula et al., 2017 ). Por lo tanto, 1 ml de la pulpa del biorreactor se colocó en
una ampolla de vidrio de 4 ml y el sobrenadante se eliminó después de 5 minutos de
sedimentación. La ampolla se selló y la producción de calor (μW por g de material) se midió
en un microcalorímetro TAM III (TA Instruments). Las muestras se midieron por triplicado
durante aproximadamente 12 h. El peso del residuo antes del experimento y el peso seco
después se determinaron para calcular la producción de calor por g de sólidos. Se realizaron
experimentos de control químico con la misma configuración.
La estructura y la abundancia de la comunidad microbiana se monitorizaron en muestras de
lodo después de la extracción de ADN mediante el polimorfismo de longitud del fragmento
de restricción terminal (T-RFLP) y la PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) como se
describió anteriormente ( Hedrich et al., 2016 ). Se compararon y representaron los valores
medios de la abundancia relativa determinada por qPCR y T-RFLP.
3 . Resultados

3.1 . Determinación de etapas de biolixiviación.

El rendimiento del biolixiviación de concentrado de cobre en un STR inoculado con el

consorcio BRGM-KCC acidófilo y moderadamente termófilo se siguió a 42 ° C. El
monitoreo diario de las células totales a través de la tinción con SYBR Green mostró
claramente que los números de células aumentaron en los primeros tres días de los
experimentos y luego se mantuvieron constantes a aproximadamente 5 * 10 9 células / ml con
una ligera disminución en los días 9 y 10 ( Fig. 1 ) . Los datos microcalorimétricos apoyaron
el aumento inicial de los números de células con un aumento en la actividad microbiana a
aproximadamente 680 μW / gy una actividad constante para los próximos días. La actividad
disminuyó entre los días 7 y 8 y se redujo en los últimos dos días a aproximadamente 140
μW / g ( Fig. 1). Se pueden definir tres etapas a partir de este experimento: (i) etapa de
crecimiento (días 1 a 3), (ii) etapa de biolixiviación (días 3 a 7) y (iii) etapa de descanso(días
8 a 10) ( Fig. 1 ). De manera correspondiente, la actividad de oxidación del hierro y
el sulfuro en términos de cambios de E h y pH ( Fig. 2 ) y cinéticas de biolixiviación como el
cobre liberado del mineral ( Fig. 3 ) se correlacionaron con la actividad bacteriana detectada
y el desarrollo del número de células. Un aumento en la biolixiviación de cobre y la oxidación
de hierro se produjo después de tres días.

3.2 . Experimentos de temperature

Los primeros experimentos se realizaron en STR a tres temperaturas constantes (42 ° C, 48

° C y 50 ° C). La cinética de biolixiviación del cobre y la recuperación del metal mejoraron
al aumentar la temperatura constante de 42 ° C a 48 ° C, pero disminuyeron y se detuvieron
a 50 ° C ( Tabla 1 ). La recuperación de Cu resultante alcanzó el 94% a 48 ° C (comparado
con el 86% a 42 ° C), pero disminuyó al 46% a 50 ° C ( Tabla 1 ).

Tabla 1 . Recuperación de cobre [%] determinada por análisis de digestión de residuos y velocidad de disolución
[mg L -1 E -1 ] durante la biolixiviación a diferentes perfiles de temperatura . Los valores medios se proporcionan
para las series de biorreactores por triplicado, incluida la desviación estándar.

Temperatura [° C] 42 48 50 42/46 44/48 Control químico 46/50.

Con recuperacion 86 ± 2 94 ± 1 46 ± 3 94 ± 1 96 ± 1 97 ± 1 48 ± 2
Con tasa de disolución. 163± 9 182 ± 4 66 ± 12 173 ± 7 201 ± 5 263 ± 3 93 ± 2

La recuperación de cobre más alta del 97% se logró al comenzar la fase de crecimiento a 46
° C y aumentar la temperatura a 50 ° C en el día 3 ( Tabla 1 ). La recuperación y la velocidad
de disolución del cobre fueron similares a 48 ° C y 42/46 ° C (94%, Tabla 1 ) y mejoraron
aún más al aumentar la temperatura de inicio de los ciclos de dos etapas de 42 ° C a 44 ° C y
46 ° C. C, que indica la ventaja de la condición de temperatura de dos pasos. Solo hubo una
ligera diferencia en la recuperación de cobre entre los perfiles de 44/48 ° C y 46/50 ° C.
Además, la cinética de biolixiviación del cobre mejoró con el aumento de la temperatura. La
Fig. 3 muestra la cinética a 42 ° C estándar en comparación con los perfiles de
temperatura(42/46 ° C, 44/48 ° C, 46/50 ° C) donde la recuperación máxima de cobre (97%)
se logró a 46/50 ° DO. Los datos de recuperación de metales mostraron una disminución de
la biolixiviación de hierro del mineral a temperaturas más altas ( Fig. 3 b).

Un análisis adicional del residuo demostró que no solo la recuperación de cobre se mejoraba
a temperaturas más altas, sino también la recuperación de níquel y zinc ( Tabla 2).

Tabla 2 . Comparación de la recuperación de metal [en%] del concentrado de cobre en STR con
microorganismos acidófilos en varios perfiles de temperatura .

¿Qué con Fe Mn Ni Zn
42 °C 83 86 62 95 25 55
42/46 °C 83 94 64 95 33 63
44/48 °C 85 96 57 93 40 70
46/50 °C 86 97 44 94 42 74

El pH se desarrolló de manera similar en casi todos los experimentos independientemente de

la temperatura y estuvo entre 1.3 y 1.5 después de 8 días (Fig. S1). Solo el pH del experimento
a 50 ° C permaneció casi constante a aproximadamente 1,8 durante el curso completo del
experimento. El potencial redox final (E h ) de los experimentos con temperaturas más altas
fue significativamente menor (hasta 100 mV menos) que para los experimentos a 42 ° C y
42/46 ° C (~ 850 mV; Fig. 4 ). La E h del ciclo de 50 ° C también fue baja (614 mV) debido a
la inhibición de la biolixiviación durante todo el experimento. La E hde los experimentos de
control siempre estuvo por debajo de 400 mV y la concentración de hierro férrico <1 g / L
(datos no mostrados).
3.3 . Comunidad microbiana
La comunidad microbiana mostró una actividad similar (533–596 μW / g) durante (día 3) y
al final (día 8) del experimento para la mayoría de los diferentes perfiles de temperatura,
aparte de la serie de 50 ° C. En este último, la actividad disminuyó a 225 μW / g al final de
la ejecución del biorreactor ( Fig. 5 ).

El número total de copias del gen 16S rRNA bacteriano determinado por PCR cuantitativa en
tiempo real no mostró diferencias significativas en todos los experimentos, excepto en los 50
° C. Aumentaron el día 3 de la biolixiviación seguida por una ligera disminución el día 8
(Fig. S2). Los números de copias de genes bacterianos del experimento a 50 ° C fueron
similares a los otros al principio, solo disminuyeron ligeramente el día 3 y se redujeron a 6.8
* 10 3 números de copias de genes / ml al final de la ejecución.
La abundancia detallada de especies bacterianas determinada por T-RFLP y qPCR específica
de la especie (Fig. S3) reveló que la comunidad microbiana a 48 ° C estaba dominada
por Sb. termosulfidooxidanos , pero todavía contenían alrededor del 20% de At. caldus No se
encontró L. ferriphilum al final de la fase de biolixiviación. El experimento a 50 ° C fue
dominado por Sb. Termosulfidooxidanos en todas las etapas, mientras que L.
ferriphilum estuvo ausente durante todo el experimento. La última observación es consistente
con la pérdida de la actividad de oxidación del hierro en los experimentos de biolixiviación
( Fig. 6 ).

Como en las muestras del ciclo de biolixiviación a 48 ° C, At. Caldus fue dominante el día 3
en todos los experimentos de temperatura de dos pasos (Fig. S3). Sb. Los
termosulfidooxidanos dominaron sobre los otros dos taxones en todos excepto en el
experimento de temperatura a 42/46 ° C. A. Caldus fue el jugador clave al final de la
biolixiviación de 42/46 ° C de manera similar al experimento de 42 ° C. L. ferriphilum solo
se detectó en números bajos (1–3%, Fig. S3) en el experimento de 42/46 ° C, y no se encontró
a temperaturas más altas ( Figs. 6 y S3).

3.4 . Analisis mineralogico

Los datos de SEM / MLA-GXMAP reconstruyeron la composición mineralógica del

concentrado de cobre y los residuos de biolixiviación. El concentrado de cobre contenía
12,3% en peso de calcopirita , 9,6% en peso de bornita (+ idaita), 1,8% en peso de calcocita
+ covellita, 5,6% en peso de pirita , así como otros minerales sulfídicos menores (valores
medios de dos submuestras medidas). Fig. 7ilustra la disolución casi completa de bornita y
calcocita / covelita a 42 ° C, así como algo de pirita restante y cantidades significativas de
calcopirita. La cantidad de calcopirita en el residuo de biolixiviación disminuyó
dramáticamente con el aumento de las temperaturas y el mineral se disolvió casi
completamente a 46/50 ° C. En contraste, las concentraciones de pirita se encuentran en un
valor bastante alto a temperaturas más altas. El análisis SEM / MLA-GXMAP del residuo a
46/50 ° C resultó difícil, ya que> 50% de las partículas tenían un tamaño <6.3 μm (Tabla S1)
y ya no estaban presentes los granos minerales de cobre adecuados para realizar un análisis
confiable. La ausencia de partículas de calcopirita, sin embargo, proporcionó evidencia de su
disolución. Mientras que el análisis de difracción de rayos X podría detectar
aproximadamente el 3% en peso de calcopirita en el residuo de 42 ° C,
4 . Discusión

Los experimentos de biolixiviación en biorreactores discontinuos a 42 ° C que albergan al

consorcio BRGM-KCC acidófilo y moderadamente termófilo se llevaron a cabo a varias
temperaturas con el objetivo de estudiar el efecto de la biolixiviación de un concentrado de
cobre obtenido del mineral Kupferschiefer y mejorar Recuperación de metales.
Los experimentos preliminares para determinar la cinética y el comportamiento
del crecimiento microbiano durante la operación de biolixiviación sirvieron como base para
pruebas adicionales. El número diario total de células y el monitoreo de la actividad
microbiana permitieron determinar tres etapas durante el experimento de biolixiviación: (i)
etapa de adaptación / crecimiento, (ii) etapa de biolixiviación, donde los microorganismos
están activos y la mayor parte de la lixiviación del metal ocurre pero el número de células y
microbios la actividad se mantuvo constante, y finalmente, (iii) la etapa de reposo, donde el
sustrato (es decir, el sulfuro de metal) se agota y las bacterias ya no están activas, pero el
número de células no disminuye de inmediato. Estos datos muestran claramente que aun
cuando las células son prominentes durante todo el experimento, no todas contribuyen de
manera activa a la biolixiviación de metales en todo momento. A partir de estos hallazgos,
se supone que los parámetros dentro de los primeros tres días del experimento de
biolixiviación son esenciales para el crecimiento microbiano y deben ajustarse de acuerdo
con las necesidades de los organismos objetivo, por ejemplo, operando a un pH y temperatura
óptimos. En la siguiente etapa, cuando el consorcio microbiano deseado esté bien
establecido, se puede centrar la atención en la extracción eficiente de metales y los
parámetros se ajustarán en consecuencia.
En los experimentos de STR, la biolixiviación máxima de metales se logró después de
aproximadamente siete días cuando la actividad microbiana alcanzó una meseta; luego
disminuyó, lo que indica una finalización del proceso de biolixiviación debido al
desvanecimiento del sustrato (sulfuros metálicos y hierro ferroso). La recuperación de
metales y la cinética del cobre y la biolixiviación de hierro confirmaron los resultados de
experimentos anteriores ( Spolaore et al., 2009 , Spolaore et al., 2011 ; Hedrich et al.,
2016). Los datos de biolixiviación a 42 ° C en STR sirvieron como caso base para
experimentos adicionales con el objetivo de mejorar la recuperación de cobre y la cinética de
biolixiviación.
En un experimento previo, se observó un aumento automático de la temperatura en la
biolixiviación STR continua de pirita cobaltiferrosa debido a la disolución de minerales
exotérmicos (datos no publicados). Dado que este aumento de temperatura fue simultáneo
con la recuperación mejorada de metales, los perfiles de temperatura de dos pasosEn el
estudio actual, se probó un aumento de la temperatura al final de la etapa de
crecimiento. Estos experimentos de temperatura mostraron que la recuperación de cobre se
mejoró al aumentar la temperatura y alcanzó su máximo en los experimentos a 44/48 ° C y
46/50 ° C. En contraste, los experimentos a temperaturas constantemente altas de 48 ° C y
50 ° C no lograron las altas recuperaciones de cobre de los ciclos de temperatura de dos
etapas. Los datos muestran claramente que una fase de crecimiento de tres días para los
microorganismos, antes de aumentar la temperatura en solo 4 ° C, tuvo un efecto positivo en
la recuperación de cobre y la disolución de calcopirita . Además, la comunidad
microbiana.se inhibió en experimentos a una temperatura constante de 50 ° C, indicado por
una baja actividad microbiana, velocidad de oxidación del hierro y recuperación del metal,
pero proporcionó los resultados más positivos cuando se permitieron tres días de adaptación
a 46 ° C antes de aumentar a 50 ° C para mejorar la biolixiviación del metal. El procedimiento
de temperatura incremental de dos pasos fue claramente más eficiente que ejecutar el
experimento a un nivel de temperatura constante, ya que permite que los microorganismos
crezcan y se adapten primero antes de su etapa real de biolixiviación.
La comunidad microbiana estaba dominada por tres actores clave del consorcio BRGM-
KCC, que normalmente se encuentran en operaciones de biolixiviación a temperaturas
moderadas ( d'Hugues et al., 2008 ; Gericke et al., 2010 ; Spolaore et al., 2009 , Spolaore et
al., 2011 ). El oxidante de hierro autótrofo L. ferriphilium , que tiene una clara tolerancia al
bajo pH y altas concentraciones de hierro férrico, el oxidante autótrofo de azufre At. caldus y
el mixotrófico oxidante de hierro / azufre Sb. Thermosulfidooxidans, que es capaz de crecer
a temperaturas más altas que los otros dos.
A medida que aumentaban las temperaturas, la comunidad microbiana se volvió dominada
por las bacterias moderadamente termófilas ( Sb. Thermosulfidooxidans ) del consorcio
según sus temperaturas de crecimiento óptimas (50–55 ° C). Después del dominio inicial en
el día 3 de los experimentos, la abundancia de At. caldus disminuyó hacia el final, pero el
organismo todavía estaba presente a 50 ° C, ya que puede crecer hasta 52 ° C, pero tiene su
óptimo a 40–45 ° C. L. ferriphilum solo estuvo presente en números bajos a 42–46 ° C, pero
no se detectó a temperaturas más altas, ya que solo crece hasta 45 ° C con un óptimo a 37 °
C. Otra razón por la baja abundancia de la quimiolitoautotrófica L. ferriphilumy el desarrollo
tardío de Sb. thermosulfidooxidans en el sistema, aparte de la gama de temperaturas, podría
ser la falta de CO 2 . Contrariamente a estudios anteriores, en los que se encontró L.
ferriphilum ( Spolaore et al., 2009 , Spolaore et al., 2011 ; Norris et al., 2016), no se
aplicó CO 2 adicional . Dado que L. ferriphilum es el oxidante de hierro clave en el sistema
hasta Sb. Los termosulfidooxidanos toman el control, el potencial redox y, por lo tanto, la
tasa de oxidación del hierro se mantuvo baja en los experimentos a temperaturas más
altas. Sin embargo, según lo propuesto anteriormente por Spolaore et al. (2011), una mayor
proporción de azufre-oxidantes en el proceso de biolixiviación en realidad parece mejorar la
disolución de calcopirita, por ejemplo, al contrarrestar la formación de azufreelemental como
capa de pasivación en la superficie de calcopirita y mantener un potencial redox más bajo a
medida que se oxida menos hierro.
Las comunidades mixtas son, por lo tanto, muy importantes cuando se realizan este tipo de
experimentos para asegurar un desarrollo estable del proceso en diferentes condiciones.
Los estudios mineralógicos confirmaron que la bornita y la calcocita se disolvieron
inmediatamente incluso a 42 ° C, ya que son los más fáciles de biolixidar con sulfuros de
cobre con el potencial de reposo más bajo. La formación de covellita informada, después de
la disolución de calcocita y calcopirita ( Dixon, 2000 ; Leahy et al., 2007), no pudo
confirmarse en los residuos de los experimentos a temperaturas más altas, ya que el valor de
calcocita + covellita fue inferior al 0,1% en todos los residuos, lo que sugiere una disolución
inmediata de la covellita potencialmente formada. La disolución de calcopirita mejorada se
produjo al aumentar la temperatura y el mineral se disolvió casi completamente a 46/50 ° C,
lo que demuestra que la disolución de calcopirita se favorece a temperaturas más altas y
potenciales redox más bajos. Se informa que el potencial redox crítico para la disolución de
calcopirita es de aproximadamente 450 mV ( electrodo de Ag / AgCl , Cordoba et al.,
2008).). El potencial redox del experimento de biolixiviación a 42 ° C aumentó muy rápido
y ya alcanzó el potencial crítico para precipitados de hierro férrico después de tres días (498
mV, convertidos a Ag / AgCl), mientras que el valor redox en los otros experimentos aumentó
lentamente y solo se logró a 490 mV (Ag / AgCl) después de cinco días y se mantuvo por
debajo de 420 mV (Ag / AgCl) hasta el día 4. Según lo informado por Gericke et
al. (2010)Las tasas de biolixiviación de cobre de mineral rico en calcopirita a 45 ° C se
favorecen a potenciales redox de alrededor de 420 mV (Ag / AgCl) en comparación con 600
mV (Ag / AgCl). También informaron sobre la disminución de la oxidación de pirita en estos
potenciales redox bajos combinados con valores de pH finales más altos debido a la falta de
producción de ácido a partir de la oxidación de pirita. Aunque quedaba más pirita en los
residuos de temperatura más alta, los valores de pH eran casi tan bajos como a 42 ° C. Solo
el pH del experimento de 44/48 ° C fue mayor (1.53 en comparación con 1.41), lo que
también fue apoyado por una mayor abundancia de pirita en el residuo.
5 . Conclusión

El estudio presentado ofrece información sobre el efecto microbiano en la biolixiviación

demetales eficiente y cómo este proceso puede controlarse simplemente entendiendo la
concurrencia de las especies bacterianas, la mineralogía del mineral y las condiciones físico-
químicas. Después de una comprensión detallada del rendimiento microbiano durante la
biolixiviación del concentrado de cobre, se aplicó un concepto novedoso basado en la
temperatura basado en el desacoplamiento del crecimiento y la fase de biolixiviación para
mejorar la biolixiviación de metales. El procedimiento de temperatura de dos pasos demostró
ser superior a los experimentos a alta temperatura constante en términos
de composición de la comunidad microbiana , calcopiritaDisolución y recuperación del
cobre. Un ligero aumento de la temperatura de funcionamiento, aplicado justo al final de la
etapa de crecimiento bacteriano, condujo a una mejor cinética de biolixiviación y una
recuperación general del metal en combinación con una disolución casi completa de
calcopirita a un potencial redox más bajo. Este estudio demuestra una biolixiviación eficiente
de concentrado rico en calcopirita a temperaturas moderadas con la ventaja de los bajos
costos de operación debido a temperaturas más bajas para la disolución completa de la
calcopirita. Al operar el STR a temperaturas moderadas bajo las condiciones informadas, la
formación de capas de pasivación, la precipitación de minerales de hierro secundarios y el
daño a los tanques pueden reducirse en relación con las operaciones a temperaturas más
altas. Además, la recuperación mejorada de varios otros metales del concentrado eleva el
valor general del material.