GUÍA DE EJERCICIOS BIO-REACTORES

Fundamentos de Ingeniería Bioquímica

IWQ-250

Profesores: Sergio Almonacid M. y Ricardo Simpson R.

Mayo, 2015

SAM/RS 1
Estimados alumnos,

Esta guía incluye ejercicios resueltos y ejercicios propuestos (incluyendo sus respuestas). En el
punto I se presentan 12 ejercicios cuya resolución detallada se entrega al final de estos. Luego, en
el punto II se presentan 34 ejercicios propuestos, varios de ellos de certámenes y controles
anteriores y todos con sus respectivas respuestas.

Agradeceremos todo tipo de observaciones, alcances y recomendaciones y de esta forma

esperamos poder mejorar esta guía para ésta y futuras generaciones de ingenieros de procesos,
químicos y ambientales.

I EJERCICIOS (Resoluciones a continuación del ejercicio 12)

1. a) El ciclo celular es un conjunto ordenado de sucesos que conducen al crecimiento de la célula

y la división en dos células hijas.

a) Demuestre, matemáticamente, que la fisión celular se puede representar por una cinética de
primer orden (ecuación 1), teniendo en consideración que el tiempo de duplicación celular es
constante a través del tiempo:


  (1)



Donde:
x : Concentración celular (g/L)
t : Tiempo (h)
µ : Velocidad específica de crecimiento (h-1)

SAM/RS 2
b) ¿Qué relación hay entre el tiempo de duplicación (o de generación) tD y la velocidad específica
de crecimiento, µ?

2. Demuestre que para un bio-reactor simple (1 etapa), operado en estado estacionario, se cumple
la siguiente relación (asumiendo x0 = 0): µ = D; (donde D es la velocidad de dilución)

3.- Un bio-reactor continuo de una etapa para la producción de células es operado en estado
estacionario.

a) Demuestre analíticamente que para un bio-reactor de volumen V1 la concentración

celular, en estado estacionario, es mayor que para un bio-reactor de volumen V2 (donde V1 > V2).
b) Con la idea de maximizar la producción de células, ¿cómo operaría dos bio-reactores
continuos de volumen V, en serie o en paralelo?, justifique su respuesta con un ejemplo
cuantitativo.

4. Estudios realizados en el laboratorio mostraron que el cultivo continuo de Azotobacter

winelandi presenta una velocidad específica de crecimiento máxima de 0,45 h-1 y un Ks de 28
mg/L. Si se opera un bio-reactor de 50 L, con una velocidad de dilución de 0,32 h-1, Yx/s = 0,36
g/g y una concentración de sustrato en la alimentación de 5 g/l; determinar:

a) Concentración celular en estado estacionario.

b) Concentración de sustrato limitante en el efluente.

SAM/RS 3
5.- En un cultivo por lotes alimentados (C.L.A.) se obtuvieron los siguientes resultados:

Tiempo (h) XV (g)

0 210
1 277
2 364
3 479
4 631
5 831
6 1.095
7 1.442
8 1.898
9 2.500

Las características de la bacteria cultivada son µM = 0.4 h-1, y Ks = 0.01 g/l (para el nutriente
limitante utilizado).

a) Determine el tipo de alimentación usado sabiendo que SF (concentración de sustrato en la

alimentación) es constante.
b) Calcule las condiciones iniciales de concentración de sustrato y célula si el volumen inicial era
de 140 L.

6. Una nueva cepa de levadura está siendo considerada para la producción de biomasa. Para
caracterizar la cepa de levadura se realizaron experimentos en un bio-reactor de una etapa. En la
experimentación se utilizó una concentración de sustrato en la alimentación del bio-reactor de
800 [mg/L], operándose con exceso de oxígeno, pH de 5,5 y una temperatura de 35 [°C]. Los
resultados obtenidos en la experimentación se presentan en la siguiente tabla:

D S X
[1/h] [mg/L] [mg/L]
0,1 16,7 366
0,2 33,5 407
0,3 59,4 408
0,4 101 404
0,5 169 371
0,6 298 299
0,7 702 59

a) ¿Cuáles son los valores de µ máx. y Ks?

b) Encuentre una expresión para la productividad celular DX.
c) ¿Cuál es la velocidad de dilución (D) que maximiza la productividad celular? Compare el
valor teórico con el que se obtiene de la gráfica.

SAM/RS 4
7. Los siguientes datos fueron obtenidos en la oxidación de pesticidas presentes en agua residual.
Los datos fueron obtenidos mediante una mezcla de microorganismos en una operación continua
en una laguna de aireación (tipo quimiostato) donde el pesticida es el reactivo limitante.

D [S] (Pesticida)
[1/h] [mg/L]
0,08 15
0,11 25
0,24 50
0,39 100
0,52 140
0,70 180
0,82 240

Si usted tiene un residuo líquido a tratar de 0,5 [m3/s] que contiene 500 [mg/L] de pesticida y
requiere reducir la concentración del pesticida en un 95%:

a) ¿Cuál debe ser la tasa de dilución y el volumen de la laguna de aireación?

b) ¿Cuál es la masa microbiana [Ton] producida por día de operación? Considere que YX/S es
0,6 [g/g]

8. La tasa de crecimiento específico para un microorganismo cultivado en un quimiostato,

satisface la siguiente expresión:

µmS
µ=
IK S
KS + S +
KI

¿De qué tipo de inhibición se trata?

Para los siguientes valores:

S0 = 10 [g/L]
KS = 1 [g/L]
YX/S = 0,1 [gcel./gsust.]
x0 = 0 [g/L]
KI = 0,01 [g/L]
µm = 0,5 [1/h]

a) Determine x y S como función de D para I = 0 [g/L]

b) Cuando se agrega inhibidor al quimiostato (I = 0,05 [g/L]), determine la concentración de
sustrato (S) a la salida del sistema y la concentración de células como función de D.
c) Determine la productividad celular en función de D.
d) Analice el efecto del inhibidor en dx/dt.
e) ¿Cuál será el volumen del reactor, si éste debe procesar un flujo de 570 [L/h] a la máxima
productividad celular?

SAM/RS 5
9. Los siguientes datos fueron obtenidos para evaluar el efecto de la temperatura en la producción
fermentativa de ácido láctico, mediante el uso de Lactobacillus delbrueckii. De estos datos estime
los parámetros de Arrhenius para el sistema descrito:

T μ
[°C] [1/h]
40,4 0,0140
36,8 0,0112
33,1 0,0074
30,0 0,0051
25,1 0,0036

10. La bacteria Pseudomona sp. tiene una tasa máxima específica de crecimiento de 0,4 [1/h],
cuando es cultivada en acetato. La constante de saturación usando este sustrato es 1,3 [g/L], y el
coeficiente de rendimiento de células en acetato es de 0,46 [g cél./g acetato]. Si se opera este
sistema como un quimiostato, con un S0 de 38 [g/L], realice el siguiente análisis:

a) ¿Cuál es la tasa de dilución crítica?

b) ¿Cuál es la concentración de células cuando la tasa de dilución es la mitad de la crítica?
c) ¿Cuál es la concentración de sustrato cuando la D es un 80% de la crítica?
d) ¿Cuál es la productividad celular a la D en c)?
e) Encuentre Dópt para la productividad celular, ¿qué porcentaje de Dcrítico es éste?

11. En un quimiostato en que la cinética de crecimiento celular obedece la ecuación de Monod, el

sustrato residual es independiente de la concentración de sustrato inicial o de ingreso al
quimiostato (S0). Usted observa que en su quimiostato, un incremento en S0 resulta en un
incremento en la concentración de salida o residual. Un amigo le sugiere que considere la
ecuación de Contois en lugar de Monod:

µmS
µ=
K XS X + S
a) Derive una expresión para S en términos de D, µm, KXS y X para un quimiostato en estado
estacionario.
b) Derive un expresión para S en función de S0, D, KXS, YXS y µm.
c) ¿Si S0 aumenta al doble, en cuánto aumenta S?

12. Se tiene un fermentador operando en cultivo por lotes alimentado, donde la tasa específica de
crecimiento celular se describe mediante la ecuación de Monod. Se tiene como objetivo
conseguir 600 [Kg] de células secas. Se pide para las siguientes condiciones:

Sf = 90 [g/L] constante
KS = 0,055 [g/L]
YX/S = 0,44 [gcel/ gsust]
X0 = 6 [g/L]

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µm = 0,46 [1/h]
µ = 0,33 [1/h] constante
V0 = 10.000 [L]

a) Obtenga una expresión para el flujo de alimentación F en el tiempo, en función de las

variables anteriores.
b) Obtenga el tiempo de alimentación [h].
c) Obtenga la concentración de nutriente limitante en el fermentador [g/L].
d) Calcule el volumen final en el fermentador [L].
e) Obtenga el valor de F al inicio de la fermentación (t = 0 [h]).
f) Obtenga el valor del flujo, F, transcurrido la mitad del tiempo de proceso [L/h].

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RESOLUCIÓN (ejercicios 1 al 12)

1. a) Unicellular organisms (e.g. bacteria) duplicate in a process called cell division. Each cell
divides into two new cells within a certain time, called generation time (tg). Schematically, we
can represent this division process as depicted in the following Figure:

Therefore, if we have N0 bacteria at time = 0, then after 1 generation (1tg) we will have 2N0
bacteria, and after 2 generations (2tg) we will have 4N0 bacteria, and so on, implying that after
each generation time, the bacterial population is duplicating. Putting this information in a table,
we get:

Time Bacteria population

0 N0 = 20N0
1tg 2N0 = 21N0
2tg 4N0 = 22N0
3tg 8N0 = 23N0
… …
… …
ntg N = 2n N 0

In addition, the number of generations (n) is related to time (t) and generation time (tg) as
follows:
t
n= (for t = 0, n = 0; for t = 1tg, n = 1, and so on)
tg
Then replacing n from Equation in the expression N = 2nN0, we get:

t
tg
N = 2 N0

Now arranging the previous Equation 9.9, we can obtain:

 N  t
ln  = ln 2
 N0  tg

SAM/RS 8
By definition, ln2/tg = µ (specific growth rate), thus the number of bacteria after time t can be
expressed by the exponential equation as follows:

N = N 0 e µt
b) tD = (Ln2)/µ

2. De un balance de células se obtiene:

( )
 −  +   (2)



Dado que el sistema está en estado estacionario y, además x0 = 0, entonces:


−  +   0 (3)

De la ecuación (3) se obtiene: µ = F/V, y por definición F/V = D, entonces:

µ=D

3. a) De la expresión:

DK S
x = y x / s (S0 − )
µ max . − D
FK S
x = y x / s ( S0 − )
Considerando que D = F/V, entonces: Vµ max . − F
Donde es posible apreciar que a mayor V (F = constante), mayor es la concentración celular, x.
Por lo tanto si V1 > V2, entonces x1 > x2.

b) Es mejor en serie que en paralelo. No olvide desarrollar un ejemplo numérico. Si asumimos

que el flujo de alimentación es F y se opera en serie la productividad la productividad será Dx2.
Al operar en paralelo será Dx1. Se puede demostrar que x2 > x1.

4. a) x = 1,775 g/L; b) S = 68,92 mg/L

5. a) Alimentación exponencial (note que al graficar XV versus el tiempo se comprueba que es

una función exponencial).

b) xo = 1,5 g/L ; So = 0,022 g/L

SAM/RS 9
6. a) Para el quimiostato, la tasa específica de crecimiento celular puede ser expresada por la
ecuación de Monod:

µ m [S ] (1)
µ=
K S + [S ]

Sin embargo, en estado estacionario, el flujo de células que salen del quimiostato, también
conocido como tasa de dilución, puesto que se asume mezclado perfecto en el reactor es igual a la
tasa de crecimiento específica en éste, es decir, D = µ, por lo que la ecuación de Monod puede ser
re-escrita como:
µ m [S ] (2)
D=
K S + [S ]

A partir de los valores entregados en la tabla, se puede determinar µmáx y KS mediante regresión
no lineal o por regresión lineal al graficar los inversos de D y [S].
 1
• Regresión no lineal: µm = 0,8  
h 
 mg 
K S = 102,3  
 L 

• Regresión lineal: 12,00

10,00

1 KS 1 1 8,00
= +
D µ m [S ] µ m
1/D

6,00

4,00

1/D 1/[S] 2,00

[h] [L/mg]
0,00
10,00 0,060 0,000 0,010 0,020 0,030 0,040 0,050 0,060 0,070
5,00 0,030
1/[S]
3,33 0,017
2,50 0,010
2,00 0,006
1,67 0,003
1,43 0,001

De la ecuación de la recta se extrae el intercepto y de aquí la velocidad máxima. Luego con la

pendiente y µmáx se obtiene KS:

1  1
= 1,25 ⇒ µm = 0,8  
µm h

KS 5,00 − 2,00 K  mg 
= = 125,3 = S ⇒ K S = 100,3  
µm 0,030 − 0,006 0,8  L 

b) Se define productividad celular como: DX

SAM/RS 10
 Tomando las ecuaciones que describen el comportamiento del quimiostato:

X = YX /S ( S0 − S ) (3)
KS D (reordenando la ecuación (2)) (4)
[S ] = µ
m −D

Luego, multiplicando la ecuación (3) por D y reemplazando la ecuación (4) en ésta, se obtiene
una expresión para la productividad celular DX:

X = YX /S (S0 − S )
DX = DYX /S ( S0 − S )
 K D  (5)
DX = DYX /S  S0 − S 
 µm − D 

c) Para obtener la tasa de dilución teórica que maximiza la productividad celular (Dóptimo), se
deriva la ecuación (5) en función de D, se iguala a cero y se despeja Dóptimo:

d ( DX ) d   KSD   KS
=  DYX /S  S0 −   = 0 ⇒ Dóptimo = µm ± µm
dD dD   µ m − D  S0 + KS

 KS  1
Dóptimo,1 = µm + µm = 1,07  
 S0 + K S  h  (se descarta, no puede ser mayor que µ max.)
⇒
 KS  1
Dóptimo,2 = µm − µm S + K = 0,53  h 
 0 S

Si se observa la gráfica que representa el comportamiento del quimiostato:

D [S] [X] D[X] 900

[1/h] [mg/L] [mg/L] [mg/L h]
800
0,1 16,7 366 36,6
700
0,2 33,5 407 81,4
0,3 59,4 408 122,4 600
Concentración

[S]
0,4 101 404 161,6 500 D[X]
0,5 169 371 185,5
400 [X]
0,6 298 299 179,4
0,7 702 59 41,3 300 Dcrit
200 S0
100 Dópt
0
0 0,2 0,4 0,6 0,8

Ahora, Dóptimo, se extrae desde la gráfica siendo su valor es aproximadamente igual a ~ 0,56 [1/h].

Finalmente, se puede decir que los valores encontrados son casi iguales, siendo la principal causa
de diferencia el error respectivo de valores obtenidos experimentalmente y la gráfica de éstos.

SAM/RS 11
7.
a) Análogo al ejercicio 6, se grafica los inversos y se obtiene los parámetros para la relación
del quimiostato en estado estacionario:

14,00
1 KS 1 1 y = 186,5x + 0,606
= + 12,00 R² = 0,987
D µ m [S ] µ m 10,00

8,00

1/D
6,00

4,00

2,00
1/D 1/[S]
[h] [L/mg] 0,00
0,000 0,010 0,020 0,030 0,040 0,050 0,060 0,070
12,50 0,067
1/[S]
9,09 0,040
4,17 0,020
2,56 0,010
1,92 0,007
1,43 0,006
1,22 0,004

1  1 
= 0,606 ⇒ µm = 1,65   
µm  
h  KS D 307,8D
S = =
KS KS  mg  µ − D 1,65 −D (1)
= 186,5 = ⇒ K S = 307,8  
m

µm 1,65  L  

Se quiere abatir la concentración en un 95% S0 − S  mg 

⇒ = 0,95 ⇒ S = 25  
S0  L 
Se reemplaza dicho valor en la ecuación (1) y se despeja la tasa de dilución:

307,8D  1
S = 25 = ⇒ D = 0,12  
1,65 − D h

Finalmente se despeja el volumen a partir de la definición de tasa de dilución:

F F  m3  s  1
D= ⇒ V = = 0,5   ⋅ 3600   ⋅ [h]
V D s
   h  0,12

⇒ V = 15.000  m 3 

b) Se determina la masa microbiana utilizando el coeficiente de rendimiento:

 mg células   mg sustrato   mg células 

X = Y X / S ( S0 − S ) = 0,6   ⋅ ( 500 − 25 )   = 285  
 mg sustrato   L   L 

 mg   m3   s   L  1 Toncélulas 
Masamicrobiana = 285  células  ⋅ 0,5   ⋅ 3600 ⋅ 24  día  ⋅ 1000  m3  ⋅ 109  
 L   s       mgcélulas 

SAM/RS 12
 Ton 
Masamicrobiana = 12,3  
 día 

8. Por la forma de la expresión que describe la tasa específica de crecimiento celular, se deduce
que es una inhibición del tipo competitiva.

a) Para determinar S en función de D, se realiza el balance de células para el quimiostato:

Acumula = Entra − Sale + Genera

d ( XV ) , pero V = cte
= FX 0 − FX + µ XV
dt
d(X) F
⇒ = ( X0 − X ) + µ X = D ( X0 − X ) + µ X
dt V
d(X)
Dado que x0 = 0 [g/L], ⇒ = −DX + µ X = X ( µ − D )
dt
Asumiendo estado estacionario ⇒ d ( X ) = 0 = {
X (µ − D) ⇒ µ = D (1)
dt X ≠0

Si [I] = 0 [g/L], entonces la tasa específica de crecimiento celular puede ser representada por la
ecuación de Monod:
µmS
µ=
KS + S
Pero µ = D , µm S (2)
⇒µ =D=
KS + S
Reordenando, se tiene: DK S (3)
S=
µm − D

Reemplazando los parámetros del enunciado en la ecuación (3), se obtiene:

D (4)
S=
0,5 − D

Ahora, para determinar X en función de D, se realiza el balance de materia para el sustrato:

Acumula = Entra − Sale − Consume

d ( SV ) µX , pero V = cte
= FS0 − FS − V
dt YX / S
d (S ) F µX µX (5)
⇒ = ( S0 − S ) − = D ( S0 − S ) −
dt V YX / S YX /S

SAM/RS 13
 Introduciendo la ecuación (1) en (5):

d (S ) DX
= D ( S0 − S ) −
dt YX / S

Asumiendo nuevamente estado estacionario y considerando que:

dX dS
=− =0
dt dt
d (S ) DX  X 
⇒ = 0 = D ( S0 − S ) − {  ( S0 − S ) −
= D 
dt YX /S D ≠0  YX /S 
⇒ X = YX / S ( S0 − S ) (6)

Reemplazando los parámetros del enunciado y la ecuación (4) en la ecuación (6), se

obtiene:
 D  (7)
X = 0,1 10 −
 0,5 − D 

b) Como se está trabajando en estado estacionario, los balances de materia anteriores son
válidos. Sin embargo, varía la definición de la tasa específica de crecimiento celular
puesto que esta vez existe inhibidor, por lo que la ecuación (2) se escribe de la siguiente
manera:

µ mS µmS (8)
µ =D= =
IK
KS + S + S  I 
KS  1 +  + S
KI  KI 
Reordenando la ecuación (8) para despejar S:

 I 
KS  1 +  D
S=  KI  (9)
µm − D

,y reemplazando los parámetros del enunciado en la ecuación (9) se tiene:

 0,05 
1 1 + D
 0,01 
S=
0,5 − D

6D (10)
S=
0,5 − D

Finalmente, sustituyendo la ecuación (10) y los valores de S0 e YX/S en la ecuación (6) se

obtiene la expresión para x:

SAM/RS 14
  6D  (11)
X = 0,110 −
 0,5 − D 

c) Se define la productividad celular como:

DX (12)

Por lo que multiplicando la ecuación (11) por la tasa de dilución, se consigue una
expresión para ésta:

 6D 
DX = 0,1D  10 −
 0,5 − D 

d) Se define la variación de la concentración de células en el tiempo como:

dX (13)
= µX
dt

Dado que para el quimiostato operando en estado estacionario se cumple que µ = D , la

ecuación (13) se transforma en:
dX
= DX
dt

es decir, la variación de la concentración de células en el tiempo es equivalente a la

productividad celular.

Si se hace una comparación para dx/dt con y sin inhibidor:

dX  6D  dX  D 
= 0,1D  10 − = 0,1D  10 −
dt  0,5 − D  dt  0,5 − D 
14444244443 14444244443
[I ]>0 [I ]=0

Se aprecia que cuando existe inhibidor, será menor la variación de células en el tiempo
puesto que el coeficiente que acompaña a la tasa de dilución (6 > 1) es mayor.

e) Si se observa una gráfica representativa (nota: valores de los ejes no están relacionados
con el ejercicio) de productividad celular en función de la tasa de dilución:

250

DX máx 200

150
DX

100

50

0
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8

D
Dópt Dcrít

SAM/RS 15
 se puede concluir que para obtener la productividad máxima se debe operar a la tasa de
dilución óptima, por lo que se derivará la función de productividad e igualará a cero para
obtener su máximo:

 6D  0,6D
DX = 0,1D  10 −  =D−
 0,5 − D  0,5 − D
d ( DX )  0,6D − 0,6D 2 
⇒ = 1−  2

 ( 0,5 − D ) 
dD

d ( DX )
⇒ = 0 ⇒ 1,6D 2 − 1,6D + 0,25 = 0 (14)
dD

De la ecuación (14) se obtienen dos posibles valores para la tasa de dilución óptima:

D1 = 0,194 [1/ h ]


D2 = 0,806 [1/ h ]

Para establecer cuál de estos valores es el adecuado, se determinará la tasa de dilución

crítica (Dcrít) que es el valor de D cuando la productividad y la concentración de células es
cero. También, Dcrít corresponde a la tasa de dilución donde la concentración de sustrato
es la de entrada o inicial (S0):

µmS0 0,5 ⋅ 10
Dcrít = D S = =
0 IK 0,05 ⋅ 1
KS + S0 + S 1 + 10 +
KI 0,01
 1
⇒ Dcrít = 0,31 
h

Dado que Dópt < Dcrít (véase gráfico representativo) ⇒ Dópt = 0,194  1 
 
h 

Finalmente, se despeja el volumen del reactor desde la tasa de dilución:

F F L  1
D= ⇒ V = = 570   ⋅ [h ]
V D  
h 0,194

⇒ V = 2938 [L ]

9. La ecuación de Arrhenius viene descrita por:

Ea
−
µ = k 0e RT (1)

Por lo que, para determinar sus parámetros, una manera práctica es linealizar los datos
entregados mediante la siguiente expresión, obtenida luego de aplicar logaritmo natural a la
ecuación (1):

SAM/RS 16
 Ea 1 (2)
Ln ( µ ) = Ln ( k0 ) −
R T

Se tiene entonces la siguiente gráfica:

Ln(μ) -4,00
T 1/T
0,00315
-4,20 0,00320 0,00325 0,00330 0,00335 0,00340
[K] [1/K] --
-4,40
313,6 0,00319 -4,27
310,0 0,00323 -4,49 -4,60

306,3 0,00327 -4,91 -4,80

Ln(μ)
303,2 0,00330 -5,28 -5,00
y = -8715,x + 23,55
298,3 0,00335 -5,63 -5,20 R² = 0,988
-5,40
-5,60
 Ea Ea  J 
 R = 8,314 = 8715 ⇒ Ea = 72457  mol 
-5,80

Finalmente,    -6,00
1/T

Ln ( k ) = 23,5 ⇒ k = e 23,5  1 
 0 0 h
 

NOTA: Obtenga los parámetros k0 y Ea a través de una regresión no lineal y compare los
resultados.

10.
a) Como ya se ha demostrado, para un quimiostato operando en estado estacionario, la tasa
de dilución crítica viene dada por:

µ mS µ S 0,4 ⋅ 38
D=µ= ⇒ Dcrítico = m 0 =
KS + S K S + S0 1,3 + 38
 1
⇒ Dcrítico = 0,39  
h 

b) Para determinar la concentración de células, primero se determina la concentración de

sustrato para la tasa de dilución especificada y luego este valor se reemplaza en la
definición de concentración de células a partir del coeficiente de rendimiento.

Dcrítico 0,39  1
D= = = 0,19  
2 2 h 
DK S 0,19 ⋅ 1,3 g 
⇒S = = = 1,2  
µm − D 0,4 − 0,19 L 
⇒ X = YX / S (S0 − S ) = 0,46 ⋅ ( 38 − 1,2 )
g 
⇒ X = 17  células 
 L 

c) Se calcula la concentración de sustrato análogamente a la alternativa anterior:

 1
D = 0,8Dcrítico = 0,8 ⋅ 0,39 = 0,31 
h 

SAM/RS 17
 DKS 0,31⋅ 1,3 g 
⇒S = = = 4,4  
µm − D 0,4 − 0,31 L 

d) Para obtener la productividad celular, se establece la concentración de células y

posteriormente se multiplica este valor por la tasa de dilución:

g 
X = YX /S ( S0 − S ) = 0,46 ⋅ ( 38 − 4,4 ) = 15,4  células 
 L 
⇒ DX = 0,31⋅ 15,4
g 
⇒ DX = 4,8  células 
 L⋅h 

e) Como ya se vio, la tasa de dilución óptima se puede definir como:

KS 1,3
Dóptimo = µ m − µ m = 0,4 − 0,4
S0 + K S 38 + 1,3
 1
⇒ Dóptimo = 0,33  
h 

, y el porcentaje es:
Dóptimo 0,33
= ⋅ 100 = 84,6%
Dcrítico 0,39

11.
a) Análogo al procedimiento descrito en el ejercicio 3, para determinar S se realiza un
balance de materia para la concentración de células:

Acumula = Entra − Sale + Genera

d ( XV ) , pero V = cte
= FX 0 − FX + µ XV
dt
d(X) F
⇒ = ( X0 − X ) + µ X = D ( X0 − X ) + µ X
dt V
d(X)
Asumiendo que x0 = 0, ⇒ = −DX + µ X = X ( µ − D )
dt
, y dado que se opera en estado estacionario ⇒ d ( X ) = 0 = {
X (µ − D) ⇒ µ = D (1)
dt X ≠0

Por lo que, se puede despejar S mediante el reordenamiento de la ecuación de Contois

combinada con la ecuación (1):
µmS
µ =D=
K XS X + S
⇒ DK XS X (2)
S=
µm − D

SAM/RS 18
 b) Se desarrolla el balance de materia para el sustrato, para obtener una expresión para X y
así obtener S sin que dependa de x:

Acumula = Entra − Sale − Consume

d ( SV ) µX , pero V = cte
= FS0 − FS − V
dt YX / S
d (S ) F µX µX (3)
⇒ = ( S0 − S ) − = D ( S0 − S ) −
dt V YX / S YX /S

Introduciendo la ecuación (1) en (3):

d (S ) DX
= D ( S0 − S ) −
dt YX / S

Asumiendo estado estacionario y considerando que:

dX dS
=− =0
dt dt
d (S ) DX  X 
⇒ = 0 = D ( S0 − S ) − {  ( S0 − S ) −
= D 
dt YX / S D ≠0  YX /S 
⇒ X = YX / S ( S0 − S ) (4)

Reemplazando la ecuación (4) en la ecuación (2):

DK XSYX /S ( S0 − S )
⇒S =
µm − D
Sea R = DK XSYX /S , RS0 RS
⇒S = −
µm − D µ m − D
 R  RS0
⇒ S 1 + =
 µm − D  µm − D
 R 
 µ −D  (5)
⇒ S = S0  m 
1 + R 
 µ m − D 

c) A partir de la ecuación (5), si se define un nuevo parámetro R’ como:

 R 
 µ −D 
R' =  m

 1 + RS 
 µ m − D 

La concentración de sustrato queda descrita por:

S = S0R '

SAM/RS 19
 Donde se aprecia claramente que si S0 se duplica, S también lo hace.

µt
12. a) F = µ X 0V0e
YX / S ( Sf − S )

b) t = 7,0 [h]
c) S = 0,14 [g/L]
d) V = 23.658 [L]
e) F(0) = 501 [L/h]
f) F = 1.584 [L/h] a la mitad del proceso.

SAM/RS 20
II EJERCICIOS PROPUESTOS

1.- Un bio-reactor continuo se opera con un volumen de trabajo de 120 L y un flujo de

alimentación de 20 L/h. La población bacteriana presenta un tiempo de duplicación mínimo de
3,15067 h y un Ks de 1 g/L. El rendimiento expresado en g de células por g de sustrato se ha
estimado en 0,28. Ensayos preliminares hacen recomendable trabajar a una velocidad de dilución
igual al 82% del valor crítico*.

* Velocidad de dilución crítica, D*= µMSo/(So + Ks)

So : Concentración de sustrato en la alimentación (g/L)

µM : Velocidad específica máxima (h-1)
Recuerde: µ = Ln2/tD, donde tD es el tiempo de duplicación.

a) ¿Cuál es la velocidad específica máxima, µM? 0,22 h-1

b) ¿Cuál es la concentración de sustrato en la alimentación? 12,136 g/L
c) ¿Cuál es la concentración de sustrato en la descarga? 3,125 g/L
d) ¿Cuál es la concentración celular en estado estacionario? 2,523 g/L
e) ¿Cómo cambian las respuestas b) y c) si el flujo de alimentación se disminuye a 15 L/h?
2,256 y 1,316 g/L

2.- Formule los balances de células y sustrato en estado no estacionario para el esquema que se
presenta en la siguiente figura.

SAM/RS 21
R:

SAM/RS 22
3.- Un bio-reactor del tipo Fed Batch (cultivo por lotes alimentados) se opera de tal forma que la
concentración de sustrato se mantenga constante durante la operación (S*= 2 g/L).

Datos:
S0 = 20 (g/L); X0 = 2 (g/L); V0 = 2000 (L); µ = 0,4 (h-1); YX/S = 0,4 (g/g)
a) ¿Cuál es la concentración de células después de 4 horas de fermentación? 4,72 g/L
b) ¿Cuál es el volumen de fermentación después de 4 horas de operación? 4196,3 L
c) Si se realizara una fermentación batch (por lotes) con la misma concentración
inicial, ¿cuál sería la concentración después de 4 horas de fermentación? 9,9 g/L
d) Compare sus respuestas a las preguntas formuladas en las letras a) y c) y explique las
diferencias. Parece extraño el resultado, dado que en ambos caso la velocidad
específica de crecimiento fue 0,4 h-1. La explicación es que el volumen final en el
C.L.A. es mayor. Se puede comprobar que la masa celular es la misma!,
COMPRUEBELO.

4.- a) Formule los balances de células y sustrato en estado estacionario para el esquema que se
presenta en la siguiente figura.
b) Si S0 = 20 (g/L), µM = 0,4 (h-1); KS = 0,5 (g/L); D = 0,2 (h-1); YX/S = 0,5 (g/g), entonces calcule
las condiciones de estado estacionario para el primer bio-reactor, es decir: X1, S1, y µ1, y deje
expresadas las ecuaciones que permitan calcular X2, S2, y µ2
F
S0

I II

V, X1, S1 V, X2, S2

F
X2
F
S2
X1
S1

a) Balance de células I : − + μ   

 
Balance de sustrato I : −  − μ    
/
Balance de células II :  −  + μ  

Balance de sustrato II : −  − μ   

c) x1 = 9,75 g/L; S1 = 0,5 g/L; µ = 0,2 h-1
,  − ,  +    (1)

,  − ,  − ,   (2)
!= 0,4S2/(S2+0,5) (3)

SAM/RS 23
5.- Un bio-reactor continuo de dos etapas se opera con un volumen de trabajo de 10 L (cada etapa) y un
flujo de alimentación de 4 L/h con una concentración de sustrato de 22 g/L en la primera etapa. La
población bacteriana presenta una velocidad específica de crecimiento máxima de 0,6 h-1 y un Ks de 1 g/L.
El rendimiento expresado en gramos de células por gramo de sustrato consumido se ha estimado
experimentalmente en 0,5 g célula/g sustrato.

a) Calcule la concentración de células y sustrato en la descarga de la primera etapa.

b) Calcule la concentración de células y sustrato si se sabe que la velocidad específica de crecimiento en la
segunda etapa del bio-reactor es igual a: 0,035326447 h-1
c) Calcule la concentración de células y sustrato en el caso que los dos bio-reactores se disponen en
paralelo. Considere que el flujo de alimentación a cada bio-reactor es 2 L/h.
d) Compare y comente los resultados obtenidos en b) y c).

R: a) X1 = 10 g/L; S1 = 2 g/L; µ1 = 0,4 h-1

b) X2 = 10,97 g/L; S2 = 0,063 g/L
c) X = 10,75 g/L; S = 0,5 g/L
d) El arreglo en serie es más eficiente que el arreglo en paralelo. Claro que en este ejemplo la
diferencia a favor del arreglo en serie es menor.

6.- Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para la fermentación se ocupará una
cepa microbiana que tiene las siguientes características:

µ máx. = 0,6 h-1

Ks = 8 mg/L
YX/S = 0,5 g. célula/g. sustrato

La concentración de sustrato se mantendrá en 3 g/L durante la operación del cultivo por lotes alimentado.
Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentación exponencial y una concentración de sustrato
constante en la alimentación e igual a 23 g/L. Para efectos prácticos se puede considerar que µ = µ máx. si µ
> 0,99 µ máx. El volumen inicial es de 2000 L y la concentración inicial de células es de 2 g/L. Después de
6 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo de alimentación. Ud. como jefe de
planta decide que la fermentación continúe en modalidad batch hasta que la concentración de sustrato (que
es constantemente medida) sea igual a 1 g/L.

a) ¿Cuál era la masa celular en el bio-reactor a las 6 horas de operación? 146.392,94 g

b) ¿Cuál era el volumen de fermentación a las 6 horas de operación? 16.239,3 L
c) ¿Cuál era la concentración de células a las 6 horas de operación? 9,014 g/L
d) ¿Por cuánto tiempo se prolongó la fermentación batch? 0,175 h
e) ¿Cuál era la concentración de células al término de la fermentación batch? 10,014 g/L
f) ¿Hasta qué concentración de sustrato se podría llegar de tal forma que todavía las células sigan
creciendo a µ máx.? 0,792 g/L

7.- A un bio-reactor continuo de una etapa se ha acoplado un sedimentador tal como se muestra en la
figura siguiente. La corriente de recirculación está concentrada en células y no contiene sustrato.
Datos:
µ máx. = 2 h-1, Ks = 1000 ppm, YX/S = 0,5 g. célula/g. sustrato, F = 100 L/h, S2 = 0,5 g/L, V = 100 L, S0 = 3
g/L, X0 = 0, ρ = 1 kg/L

SAM/RS 24
a) Calcule la concentración de células y sustrato en la descarga del bio-reactor.
b) Calcule la concentración de células y sustrato en la descarga del sedimentador (S2 y X2)
R:
a) X = 2,5 g/L; S = 0,33 g/L
b) X2 = 1,25 g/L; S2 = 0,5 g/L

8.- Para un sistema de tratamiento de aguas residuales se ha propuesto el siguiente sistema.

SAM/RS 25
0

a) Formule los balances de células y sustrato en el bio-reactor y, también balance de células en el

sedimentador.
b) Sí F = 310.000 m3/día; F2 = 6.700 m3/día; V = 68.000 m3; α = 0,197; x = 21000 células/ml y
x1 = 52 células/ml, calcule µ.

R:
a) Balance de células en el bio-reactor: "# − ( + ") +µ  
Balance de sustrato en el bio-reactor:  + " − ( + ") −µ//  
Balance de células en el sedimentador: 
"    # "#  

b) µ = 0,55

9.- Un bio-reactor continuo de dos etapas se opera con un volumen de trabajo de 10 L (cada etapa) y un
flujo de alimentación de 4.5 L/h con una concentración de sustrato de 20 g/L en la primera etapa. La
población bacteriana presenta una velocidad específica de crecimiento máxima de 0,5 h-1 y un Ks de 1 g/L.
El rendimiento expresado en gramos de células por gramo de sustrato consumido se ha estimado
experimentalmente en 0,4 g célula/g sustrato.

a) Calcule la concentración de células y sustrato en la descarga de la primera etapa.

b) Calcule la concentración de células y sustrato si se sabe que la velocidad específica de crecimiento en la
segunda etapa del bio-reactor es igual a: 0,194371 h-1
c) Calcule la concentración de células y sustrato en el caso que los dos bio-reactores se disponen en
paralelo. Considere que el flujo de alimentación a cada bio-reactor es 2,25 L/h.
d) Compare y comente los resultados obtenidos en b) y c)

R: a) X1 = 4,4 g/L y S1 = 9 g/L

b) X2 = 7,745 g/L y S2 = 0,636 g/L

SAM/RS 26
 c) X = 7,673 g/L y S = 0,818 g/L
d) El arreglo en serie es más eficiente que el arreglo en paralelo. Claro que en este ejemplo la
diferencia a favor del arreglo en serie es menor.

10.- Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para el desarrollo de la

fermentación se ocupará una cepa microbiana que tiene las siguientes características fisiológicas:

µ máx. = 0,4 h-1

Ks = 5 mg/L
YX/S = 0,4 g. célula/g. sustrato

La concentración de sustrato se mantendrá en 2 g/L durante la operación del cultivo por lotes alimentado.
Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentación exponencial y una concentración de sustrato
constante en la alimentación e igual a 22 g/L. Para efectos prácticos se puede considerar que µ = µ máx. si µ
> 0,99 µ máx. El volumen inicial es de 2000 L y la concentración inicial de células es de 2 g/L. Después de
5 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo de alimentación. Ud. como jefe de
planta decide que la fermentación continúe en modalidad batch hasta que la concentración de sustrato (que
es constantemente medida) sea igual a 1 g/L.

a) ¿Cuál era la masa celular en el bio-reactor a las 5 horas de operación?

b) ¿Cuál era el volumen de fermentación a las 5 horas de operación?
c) ¿Cuál era la concentración de células a las 5 horas de operación?
d) ¿Por cuánto tiempo se prolongó la fermentación batch?
e) ¿Cuál era la concentración de células al término de la fermentación batch?
f) ¿Hasta qué concentración de sustrato se podría llegar de tal forma que todavía las células sigan
creciendo a µ máx.?

R: a) XV = 29550 g
b) V = 5193,8 L
c) X = 5,7 g/L
d) 0,17 h
e) 6,1 g/L
f) 0,495 g/L

SAM/RS 27
11.- Para realizar una fermentación industrial se dispone de un sistema de bio-reactores multi-
etapa tal como se muestra en la figura adjunta. En la primera etapa se alimenta un flujo de 32 L/h
y con una concentración de sustrato de 35 g/L. Entre las dos etapas, se agrega una alimentación
adicional, con un flujo de 12 L/h y una concentración de sustrato de 25 g/L.
Determine cuáles son las condiciones de salida en la segunda etapa (F2, S2, x2 y µ2)

F0 F0 S1 x1 F2
S0 S2 Datos:
x0 x2
V = 80 L
µM = 0.57 h-1
F1 KS = 0.09 g/L
∞ S01 ∞ Yx/S = 0.43 g/g
V µ1 V µ2

R: F2 = 44 L/h; S2 = 0,024 g/L; x2 = 13,87 g/L y µ2 = 0,119 h-1

12.- De los datos obtenidos en un proceso batch (por lotes), se determinó que el crecimiento
viene descrito por el Modelo de Monod, con valores de los parámetros de µmax = 0.7 h-1 ; Ks = 1.5
g/L y Yx/s = 0,12 g/g. Se desea llevar a cabo el mismo crecimiento a escala industrial en un bio-
reactor continuo (mezcla perfecta).

a) Suponiendo que la alimentación es estéril (x0 = 0), ¿Cuál será el volumen de fermentador
necesario para tratar un caudal de 300 L/h, con una concentración de sustrato de 20 g/L si
se desea convertir un 90% del sustrato alimentado? V = 750 L

b) ¿Cuál será la producción de biomasa? FX = 300*2,16 g/h = 648 g/h

c) Con el fin de aumentar el caudal a tratar, se propone utilizar el mismo reactor con
recirculación. Mediante un sistema de filtración, se obtiene una corriente de recirculación
con una concentración celular que es cuatro veces la de salida del bio-reactor. Si se desea
obtener la misma conversión global del 90% para el sustrato, trabajando a una relación de
recirculación (caudal de recirculación/caudal de alimentación) de 0.25, a) ¿Cuál será el
caudal de entrada que podrá ser tratado? 1.200 L/h

13.- Se lleva a cabo un cultivo por lotes seguido por un cultivo por lotes alimentados para la
producción de biomasa, con alimentación exponencial. El volumen inicial de fermentación es de
10 L, la concentración inicial de células es de 0.2 g/l, la concentración inicial de sustrato es 12
g/l, el rendimiento de sustrato es de 0.46 g/g, la velocidad específica máxima de crecimiento es
0.4 h-1, Ks = 10 mg/l y la concentración de sustrato en la alimentación es de 100 g/l.
Calcular:

SAM/RS 28
 a) El tiempo al que se inicia la alimentación del C.L.A., si en cultivo por lotes alimentados
se desea mantener una concentración de sustrato de 0.8 g/l. ~ 8,217 h
b) Flujo del cultivo por lotes alimentados. F ~ 0,469e0,4t
c) El tiempo total de fermentación (batch + C.L.A) y la concentración celular al momento
de alcanzar un volumen de 20 L. ~ 13, 8528 h (8,217 + 5,635)

14.- Ud. dispone de 2 bio-reactores a nivel de planta piloto con volúmenes de 100 y 200 L
respectivamente para la producción de células. El caldo estéril a tratar tiene un flujo volumétrico
de 50 L/h con una concentración de sustrato de 5 g/L. Experimentos a nivel de laboratorio
indican que el micro-organismo tiene una velocidad específica máxima de 0,8 h-1 y un Ks = 1
g/L. El rendimiento de sustrato (Yx/s) es de 0,5 g/g. Ud. ha decidido operar los bio-reactores en
modo continuo y en serie.
a) Si se desea maximizar la concentración de células en la descarga del segundo bio-reactor,
¿cuál de los dos bio-reactores pondría primero?
b) Si se desea optimizar la operación con estos dos bio-reactores, ¿qué flujo volumétrico
utilizaría?

R: a) Conviene poner primero el reactor de 200 L (x = 2,47 g/L)

15.- En el manuscrito: “Production of Ethanol by Fed-Batch Fermentation” se presenta el

siguiente balance de células:

dx F
= µx − x
dt V

a) ¿Es correcto este balance de células?, Justifique con ecuaciones

R: Si, es correcto y se obtiene de combinar el balance global y el de células.

Balance Global (asumiendo densidad constante)

dV
F= (1)
dt

Balance de Células

d ( xV )
µxV = (2)
dt

dV dx
µxV = x +V (3)
dt dt

Remplazando (1) en (3)

SAM/RS 29
 dx
µxV = xF + V
dt

Dividiendo por V y despejando:

F dx
µx − x =
V dt

16.- En la siguiente tabla se presentan los datos obtenidos en un proceso de fermentación llevado
a cabo en un bio-reactor continuo de tanque agitado operado en estado estacionario a varias
velocidades de dilución.

D (h-1) 0.38 0.33 0.29 0.235

X (g/l) 5.96 5.98 5.99 6.00
S (g/l) 0.57 0.33 0.23 0.14

a) Determinar Ks y µ max.
b) Dada una concentración de sustrato a la entrada del reactor de 120 g/l y asumiendo una
alimentación estéril, calcular el rendimiento de sustrato.
c) Determinar el caudal de alimentación que podrá ser procesado en un reactor similar de 100 m3
en estado estacionario, si se pretende convertir el 80% de una alimentación estéril que contiene
120 g/l de sustrato.

R: a) Ks = 0,1422 g/L y µmax = 0,4725 h-1

b) Yx/s ~ 0,05 g/g
c) F = 47 m3/h

17.- Un quimiostato simple de 5 litros de volumen útil, presenta algunos problemas de diseño que
ocasionan una agitación imperfecta. El equipo se va a utilizar para cultivar levadura con µ max =
0,48 h-1, Ks = 0,072 g/L. El flujo de alimentación será de 1,1 L/h, con una concentración de
nutriente limitante de 6 g/l, y Yx/s de 0,43 g/g. Se supone que un 35% del flujo de alimentación no
pasa por el fermentador, sino que se une a la corriente de salida y que el resto ingresa al
quimiostato. Determinar Qmax (Dopt.Xopt.), µ, y S a la salida del fermentador.
R: Qmax ~ 1 g/Lh, µ = 0,143 h-1, y S ~ 0,03 g/L

18.- En el desarrollo de una tecnología microbiana para tratar un efluente industrial se requiere de
un quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 l/h. La población presenta
un µ max. de 0,22 h-1, Ks de 1000 ppm y Yx/s de 0,28 g/g. Los ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a D = 0,82*Dc. Determinar la concentración de sustrato en la alimentación
y en la descarga y también la concentración celular en estado estacionario.
R: S0 = 11,94 g/L, S ~ 3,15 g/L y X = 2,46 g/L

SAM/RS 30
19.- Un reactor es operado recirculando la corriente concentrada del separador solido/liquido, de
manera que el producto del sistema es la corriente clara de este separador. El volumen de
operación del fermentador es de 2,2 m3, el factor de recirculación es 0,9 y el factor de
concentración 1,8. Se tiene una concentración de sustrato inicial de 40 g/L y un Yx/s de 0,29 La
velocidad de dilución del fermentador es de 0,31 h-1, el microorganismo posee un µ max =0,62 h-1 y
un Ks = 0,77 g/L. Calcular los valores estacionarios de la concentración celular en el fermentador
y en la corriente clara, la concentración de sustrato limitante, la velocidad especifica de
crecimiento, la productividad de células del fermentador y la velocidad especifica de crecimiento,
la productividad de células del fermentador y la velocidad másica de salida de células del
sistema. Este sistema de recirculación no considera purga.

R: X = 41,3 g/L, X1 = 11,6 g/L (corriente clara), S = 0,13 g/L, µ = 0,087 h-1, Qx = 3,6 g/Lh,
F1X1 = 7.911 g/h.

20.- Un quimiostato con recirculación de células sin purga opera con un volumen de 12 m3 y una
alimentación fresca de 6240 L/h con una concentración de 12 g/L de sustrato limitante y el factor
de recirculación es 1. En estas condiciones la velocidad de crecimiento de la población es de 0,35
h-1. El microrganismo tiene un µ max=0,62 h-1, Ks = 0,2 mg/L, y un rendimiento en células Yx/s =
0,4 g/g. a) Calcular el factor de concentración del separador y b) Calcular la concentración celular
en el fermentador y en el efluente.

R: a) C = 1,29
b) X = 7,13 g/L y Xe = 4,8 g/L

21.- Se quiere instalar un sistema de cultivo por lote alimentado en el cual se obtenga un
crecimiento exponencial a flujo constante y con una concentración del sustrato limitante
(glucosa) variable con el tiempo.

a) Deduzca las ecuaciones que representan el comportamiento del sistema.

b) Determine el tiempo de alimentación y la masa de glucosa si el fermentador
inicialmente con 22 m3 de líquido se desea obtener 640 Kg de biomasa seca a un µ = 0,5 h-1.
c) Volumen final en el fermentador.

Datos:
Xo : 8 g/L Yx/s : 0,4
µM:: 0,62 h-1 F : 1 m3/h
Ks : 0,045 g/L

R: a) Están en los apuntes; b) 2,582 h y 4,61 kg de glucosa; c) 24,582 m3

22. Las condiciones de operación con que se lleva a cabo un cultivo por lote alimentado con
alimentación constante de una determinada bacteria, se señalan a continuación junto con algunos
de sus principales parámetros:

SAM/RS 31
Vo : 59.983 L µM:: 0,26 h-1
S* : 6 g/L Ks : 50 mg/L
Xo : 3 g/ L Yx/s: 0,5 (limitante)
VF : 80.000 L F : 1.250 L/h

Durante el cultivo se ha tomado una muestra que indica que la concentración celular en ese
momento es de 15,3 g/L. Podría Ud. ¿Cuántas cuantas horas faltan para el término de la
fermentación?

R: 9,2 h

23.- Un fermentador de tanque agitado de 2000 L opera con un flujo de alimentación de 540 L/h,
con 35 g/L de nutriente limitante Este tiene dos salidas, una directa y otra a través de un filtro
absoluto, la primera tiene un flujo igual al 70% del flujo de alimentación el que pasa a un
separador solido/liquido del que resulta una corriente concentrada 1,8 veces de células con un
caudal igual al 30% del caudal de entrada del separador, la que se recircula al fermentador. La
corriente clara se junta con la corriente filtrada y se envían a la próxima sección de la planta. La
población posee un µ max.=0,7 h-1, Ks = 4,1 g/L y Yx/s de 0,22 g/g. Calcular la concentración celular
y de nutrientes en el fermentador.

R: x = 7,445 g/L; S = 1,29 g/L

24.- En un quimiostato de 500 L se cultiva un microorganismo bio-lixiviante que en las

condiciones de operación presenta un µ M de 0,17 h-1, un Ks de 1,2 g/L y un rendimiento de
sustrato limitante de 0,019 g/g. Se sabe que a una tasa de dilución de 0,08 h-1 se obtiene una
concentración celular de 0,9 g/L. Calcule la concentración de alimentación de nutriente limitante,
la productividad máxima en células, a que tasa de dilución se produce ésta y con qué
concentración celular.

R: S0 = 48,435 g/L; DX= 0,1143 g/Lh; D = 0,14357 h-1, X = 0,79643 g/L

25.- Un quimiostato simple de una etapa de 50.000 L de volumen de trabajo es operado con una
alimentación de 4250 L/h con una concentración de nutriente limitante de 15 g/L y un
rendimiento de 0,41 g/g. La población microbiana presenta un µ M de 0,21 h-1 y un Ks de 320
mg/L. Para aumentar la capacidad del sistema a 12.500 L/h se decide instalar a la salida un
separador sólido/líquido y una corriente de recirculación con purga. Se desea mantener la misma
velocidad específica de crecimiento y que el flujo de purga sea un 10% del flujo de la corriente
clara.
¿Cuáles deberán ser los valores del factor de concentración c y el factor de recirculación α, si la
concentración celular de la corriente clara debe ser un 12% de la concentración en el
fermentador?

R: c = 2,54; α = 0,429

SAM/RS 32
26.- En el desarrollo de una tecnología microbiana para tratar un efluente industrial se requiere de
un quimiostato de 100 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 l/h. La población presenta
un µ max. de 0,26 h-1, Ks de 500 ppm y Yx/s de 0,28 g/g. Los ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a D = 0,82*Dc. Determinar la concentración de sustrato en la alimentación
y en la descarga y también la concentración celular en estado estacionario.

* Control 2, primer semestre 2014 (Casa Central)

R: S0 = 7,625 g/L, S ~ 1,67 g/L y X ~ 1,67 g/L

27.- Se está analizando y estudiando la realización de dos modos de operación: a) fermentación en cultivo
por lotes (batch) y b) fermentación en cultivo continuo. Se dispone de un fermentador de 10.000 L y la
cepa microbiana tiene las siguientes características: µmax = 0.7 h-1 ; Ks = 1.5 mg/L y Yx/s = 0,52 g/g. Por
otro lado se dispone de un medio de cultivo que tiene una concentración de sustrato de 30 g/L. El cultivo
batch se inicia con una concentración celular de 1 g/L y se detiene cuando la concentración celular es 14
g/L. Asuma que el tiempo de carga y descarga son iguales a 2 h.

a) ¿Cuáles serían las condiciones óptimas de operación del cultivo continuo? Dopt. ~ 0,7 h-1
b) ¿Cuál es la productividad máxima del cultivo continuo? PC ~ 10,92 g/L h
c) ¿Cuál es la productividad (máxima) del cultivo batch? PB ~ 2 g/L h
d) Compare y discuta las productividades de ambos modos de operación. Como ha sido comentado en
clases y demostrado a través de un análisis general, la productividad del cultivo continuo,
prácticamente siempre, es mayor que la productividad del proceso batch.

* Pregunta de Certamen del 2do semestre 2013.

28.- De los datos obtenidos en un proceso batch (por lotes), se determinó que el crecimiento viene descrito
por el Modelo de Monod, con valores de los parámetros de µmax = 0.8 h-1 ; Ks = 1.5 mg/L y Yx/s = 0,42 g/g.
Se desea llevar a cabo el mismo crecimiento a escala industrial en un bio-reactor continuo (mezcla
perfecta).

a) Suponiendo que la alimentación es estéril (x0 = 0), ¿Cuál será el volumen de fermentador
necesario para tratar un caudal de 500 L/h, con una concentración de sustrato de 25 g/L si se desea
convertir un 85% del sustrato alimentado? 625 L
b) ¿Cuál será la producción de biomasa? 4462,5 g/h
c) Con el fin de aumentar el caudal a tratar, se propone utilizar el mismo reactor con recirculación.
Mediante un sistema de filtración, se obtienen dos corrientes, un sobrenadante y una corriente de
recirculación con una concentración celular que es cuatro veces la de salida del bio-reactor. La
concentración de sustrato en la alimentación al filtro y ambas corrientes de descarga del filtro
(sobrenadante y corriente de recirculación) es la misma. Si se desea que la concentración sustrato
en la descarga del bio-reactor sea 3,75 g/L, trabajando a una relación de recirculación (caudal de
recirculación/caudal de alimentación) de 0.25, ¿Cuál será el caudal de entrada que podrá ser
tratado? ¿Cuál será la producción de biomasa en esas condiciones?, F = 2000 L/h, FXs = 17850
g/h
d) Compare y discuta su respuesta en c) con respecto a sus respuestas en a) y b). El flujo a tratar y
la producción de biomasa aumentaron 4 veces.

SAM/RS 33
29. En un bio-reactor continuo de una etapa se alcanza estado estacionario con una cepa microbiana que
tiene la siguiente cinética de crecimiento:
%
$ '  )*á. , donde xmáx. y k son constantes.
%& (

Asumiendo que el flujo de alimentación y descarga sean igual a F (L/h), que volumen del bio-reactor sea
igual a V (L), que la concentración de sustrato en la alimentación S0 (g/L) y x0 = 0, entonces:
a) Encuentre expresiones para x y S en estado estacionario en función de parámetros conocidos.
x = xmáx.- D/k y S = S0 –(xmáx.- D/k)/yx/s
b) Encuentre una expresión para x en función de S. x = yx/s(S0 – S)
c) Si se define µ = k*xmáx. demuestre con ecuaciones que µ > D (recuerde D = F/V). Como x = xmáx.- D/k
sustituyendo k*xmáx por µ se obtiene: x = (µ - D)/k y como x es mayor que 0, entonces µ > D

30. En un laboratorio de bioprocesos se ha implementado un sistema de cultivo continuo consistente en 2

quimiostatos operados en serie. Cada quimiostato tiene un volumen de trabajo de 80 L. Se requiere
realizar un ensayo con una bacteria de µmáx. = 0,57 h-1, con un medio definido limitado por carbono, con Ks
= 0,09 g/L y un Yx/s = 0,43. A la primera etapa se alimenta un flujo de 32 L/h con un S0 = 35 g/L. En la
segunda etapas se incorpora una alimentación adicional de 12 L/h con una concentración de nutriente
limitante de 25 g/L.

a) Determinar las condiciones de salida de la primera etapa en estado estacionario. x = 14,96 g/L; S
= 0,2118 g/L, µ = 0,4 h-1
b) Escriba las ecuaciones necesarias que permitan determinar las condiciones de salida de la segunda
etapa en estado estacionario.

31. Se desea producir un metabolito P mediante una fermentación continua con un microorganismo
anaerobio facultativo en un sistema quimiostato de 2 etapas. La primera (200 litros de volumen útil) se
opera a D = 0,4 h, en condiciones aerobias en las cuales P no se produce. El segundo reactor (300 litros)
se opera sin aireación y en él se produce un metabolito con Yp/s = 0,44 g/g. Se utiliza un medio limitado
por sacarosa con una concentración inicial de 15 g/L. En base a las condiciones de cultivo, en la primera
etapa se tiene un µM = 0,52 h-1, un Yx/s = 0,5 g/g y Ks = 0,018 g/L. La segunda etapa posee una alimentación
secundaria de 15 L/h de una solución de 100 g/L de sacarosa. Se sabe además que para la segunda etapa
µM = 0,3 h-1, Yx/s = 0,25 g/g y Ks = 0,018 g/L.

Determinar la concentración final del metabolito P. P = 6,964 g/L (x2 = 10,25 g/L, S2 = 0,0124; µ2 =
0,122)

32. Utilizando microrganismos se desea reducir la concentración de un sustrato orgánico del cual se tiene
200 L con una concentración de 5 g/L. El microrganismo seleccionado tiene una cinética de crecimiento
de primer orden y satisface la ecuación de Monod con parámetros µM = 0,27 h-1, KS = 1 mg/L, yx/s = 0,15
g/g. El problema es determinar bajo qué condiciones de operación se realizará el proceso (batch o
continuo). Para ello dispone de un reactor de 10 litros de volumen útil.

a) Si el proceso se realiza en operación batch, determine el tiempo necesario para reducir la concentración
de sustrato a 0,5 g/L en cada batch. Asuma que la concentración inicial de biomasa es de 0,1 g/L. ¿Cuál es
el tiempo total? 7,6 h por cada batch y si se desprecia los tiempos de carga y descarga el tiempo total
sería 152 h.

SAM/RS 34
b) Si el proceso se realiza en operación de cultivo continuo, determine el tiempo necesario para llevar a
cabo el proceso operando en estado estacionario. F = 2,7 L/h por lo tanto en procesar los 200 L se
necesitan 74,1 h.

* 2do Certamen, primer semestre 2014

33. Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el
mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo propuesto por Monod y que los rendimientos
de sustrato en células (yx/s1 = yx/s2 = yx/s) son constantes e iguales para ambas cepas microbianas.

Plantear las ecuaciones que describen el sistema en función de los parámetros cinéticos (µmax y Ks), los
rendimientos (yx/s), la concentración de sustrato en la alimentación (S0) y la velocidad de dilución (D).

* 2do Certamen, primer semestre 2014

Balance de células (cepa 1)

-.
. -.   0 (1)

Balance de células (cepa 2)

-/
/ -/   0 (2)

De (1) y (2) .  /  0

Balance de Sustrato
23 43
1 1
28 48
56/7
− 56/7
0 (3)

Como .  /  0

De (3): -. + -/  9/: (1 − 1) (4)

Ecuación de Monod
=
.  ;<. =>? (5)
@3

=
/  ;</ =>? (6)
@8
Y como .  / , entonces de (5) y (6):

= =
;. =>?  ;/ =>? (7)
@3 @8

De (7) se calcula S, luego reemplazando en (4) se obtiene -. + -/ .

SAM/RS 35
34. Una levadura es cultivada en un quimiostato simple de 110 litros de volumen de caldo. La levadura es
susceptible a inhibición de acuerdo a:
1
μ  μB
1
C= 1
CD 

Donde: µM = 0,39 h-1; Ks= 0,098 g/L; Ki = 0,5 g/L; yx/s = 0,5 g/g

El fermentador se opera a una velocidad de dilución de 0,21 h-1, obteniéndose una concentración celular
en estado estacionario de 7 g/L.

a) Calcule el flujo de alimentación. F = 23,1 L/h

b) Calcule la concentración de sustrato en la descarga y en la alimentación. Se presentan dos posibles
estados estacionarios. ¿Cuál de ellos ocurrirá?, Dependerá de cómo se realice la puesta en marcha,
es decir, cuál es la concentración de sustrato en la alimentación. Esto determinará a que estado
estacionario converge. Las posibles soluciones son: a) S01 = 15,22 g/L y S1 = 1,219 g/L, b) S02 = 14,04
g/L y S2 = 0,04 g/L.

* 2do Certamen, primer semestre 2014

35. Encuentre una expresión para la concentración de células y sustrato en la descarga de un bio-reactor
tubular con flujo pistón y recirculación. El bio-reactor tiene volumen V y el factor de recirculación es α.
La cinética de crecimiento microbiano es de pimer orden.

36. Encuentre una expresión para la concentración de células y sustrato en la descarga de un bio-reactor
tubular con flujo pistón y la cinética de crecimiento microbiano se puede expresar por:

%
E F  )*á. 
%& (

Donde k y xmax. son constantes.

37. A Ud. se le encarga determinar el número de bio-reactores a disponer en una planta de fermentación.
El proceso de fermentación es batch y se le encomienda que su estudio considere algunas simplificaciones
con la idea de tener una respuesta rápida pero que, a su vez, tenga un sólido fundamento económico. Para
ello se le pide que determine el número de bio-reactores que minimice la inversión total que en este caso,
para efectos de este análisis económico rápido, sólo incluirá la inversión en bio-reactores y “fittings”. Tal
como se expresó cada fermentador es operado en la modalidad batch, aunque la operación del conjunto de
bio-reactores debe ser continua. La inversión en “fittings” y el costo de cada bio-reactor se pueden
expresar por:

Inversión en “fittings”

G  )/  H

Costo de un Bio-reactor

IJ  ).  <

SAM/RS 36
Donde V es el volumen de un bio-reactor.

Encuentre una expresión para calcular el número de bio-reactores que minimice la inversión total y calcule
el número de bio-reactores en el caso que a = 0,6; a ~ b y k1 = 2k2.

Recuerde que:

a, b, k1 y k2: Constantes

LM >M
R: a) K  ; b)6 (5,75)
M NL

38. Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el
mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo propuesto por Monod y que los rendimientos
de sustrato en células son yx/s1 = 0,4 g/g; yx/s2 = 0,5 g/g. Encuentre la concentración de sustrato en la
descarga del bio-reactor y, también, una expresión para la concentración de células en el bio-reactor en
función de la concentración de sustrato en la alimentación (S0) si:

µmax1 = 0,6 h-1; µmax2 = 0,4 h-1, Ks1 = 0,05 g/L, Ks2 = 0,01 g/L.
 
R: S = 0,07 g/L; 1 0,07  ,P3
,Q8

SAM/RS 37