Fecha de entrega: 22 de Octubre de 2015

Cuantificación colorimétrica de concentraciones

Paula Andrea Roncancio Wilches y Karen Dayana Zabala Gómez

Programa de Ingeniería Química - Universidad Nacional de Colombia

Resumen: El presente documento tiene por objetivo describir la práctica

acerca de colorimetría de disoluciones, técnica utilizada para determinar la
concentración de compuestos en una disolución la cual depende de la
absorbancia y de la transmitancia. Es utilizada en distintos campos a nivel
científico e industrial como en el control de calidad de alimentos, en farmacia
y cuantificación de proteínas. En la práctica se obtuvo por medio de un
espectrofotómetro la absorbancia de seis diluciones preparadas con el fin de
realizar una curva de calibración e interpolar los datos de cuatro disoluciones
problema con el fin de conocer su concentración, por último se calculó el
porcentaje de error de las medidas. Se concluye que la concentración es
directamente proporcional a la absorbancia y esto se basa en la ley de
Lambert - Beer.

Palabras clave: Colorimetría, disoluciones, diluciones, absorbancia,

transmitancia, ley de Lambert - Beer, curva de calibración.

I. INTRODUCCIÓN

La colorimetría es utilizada para medir la longitud de onda y la intensidad de la

radiación electromagnética en la región visible del espectro, es usada
extensivamente para la identificación y la determinación de las concentraciones de
sustancias y soluciones que absorben la luz.1

Existe una ley fundamental en la colorimetría: la Ley de Lambert - Beer, la cual

relaciona la concentración de una molécula en disolución y su capacidad de
absorción 2, estas dos variables son directamente proporcionales. Para medir la
absorbancia se utiliza un instrumento llamado colorímetro y si se quiere trabajar no
solo con la luz visible sino también en otras regiones del espectro electromagnético
como lo son el infrarrojo o el ultravioleta se utiliza un espectrofotómetro.

Durante la práctica, se realizó un análisis colorimétrico de absorbancia en el

espectrofotómetro de seis diluciones con diferente concentración, preparadas a partir
de una disolución de CuSO4 0,24 M, también se hizo el mismo análisis a cuatro
disoluciones problema de concentración desconocida con el fin de realizar gráficas
de absorbancia vs concentración e interpolación de datos. Además de esto se
realizó el cálculo del % de error de las cuatro disoluciones de concentración
desconocida el cual fue menor del 13%.
Aunque la bureta utilizada para cuantificar el volumen de CuSO 4 necesario para
preparar las diluciones presentó inconvenientes pues tenía una obstrucción y fue
necesario cambiarla por otra bureta, el procedimiento se llevó a cabo con
normalidad, generando resultados satisfactorios. Además de esto, al realizar la
medida de absorbancia en el espectrofotómetro algunas de las celdas (mostradas en
la Figura 1) se ubicaron mal dentro del mismo, lo cual interfirió en el paso de la onda
de luz, por esto el valor de la absorbancia se vio afectado y fue necesario realizar la
medida de absorbancia nuevamente.

II. MATERIALES Y MÉTODOS

Se tomaron 40 mL de disolución 0,24 M de CuSO 4 la cual es de color azul, mientras

se realizaba la toma, se realizaron los cálculos de la concentración de las diluciones
que se prepararon a partir de dicha disolución; posterior a esto se tomaron las
cantidades de CuSO4 necesarias para realizar las 6 diluciones que finalmente
tuvieron un volumen de 10 ±0,025 mL y se midió su absorbancia en el
espectrofotómetro (mostrado en la Figura 2) con una longitud de onda de 720 nm,
gracias a los datos obtenidos se hizo una curva de calibración absorbancia vs
concentración (M).

Después se realizó la medida de absorbancia de cuatro disoluciones problema con

concentración desconocida de CuSO4, de esta manera se interpolaron los datos de
absorbancia en la curva de calibración para conocer la concentración de dichas
disoluciones y ver el comportamiento que tenían sobre la gráfica.

Diagrama de flujo 1. Preparación de Diagrama de flujo 2. Comparación del

soluciones para curva de calibración. color.
Diagrama de flujo 3. Determinación de Figura 1. Muestras de disoluciones
de concentración de cobre en 4 muestras CuSO4 utilizadas en el laboratorio.
problema.

Figura 2. Espectrofotómetro 3

En los diagrama de flujo se puede observar de forma clara los procedimientos para
realizar una curva de calibración a partir de las medidas de absorbancia y
concentración y la determinación de la concentración de muestras desconocidas.

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

A continuación se presentan los datos recolectados de las seis diluciones, a los

cuales se halló la concentración de Cu2+ y su absorbancia. La concentración final de
Cu2+ de cada dilución se halló despejando Mf de la ecuación: Vi x Mi = Vf x Mf y
con ayuda del espectrofotómetro a una longitud de onda de 720 nm se halló la
absorbancia de las seis diluciones y de la disolución patrón.

Disolución Disolución 1 Vol. Final (mL) Concentración Cu2+

No. (mL) ±0,025 (M) Absorbancia
±𝟎, 𝟎𝟎 ±𝟎, 𝟎𝟎𝟎
2 8.0 10 0.19 0.738
 3 6.0 10 0.14 0.514
4 4.0 10 0.096 0.361
5 2.0 10 0.048 0.176
6 1.0 10 0.024 0.088
7 0.5 10 0.012 0.044
Absorbancia solución inicial= 0,860
Tabla 1. Información sobre soluciones curva de calibración colorimétrica

A partir de los datos obtenidos de absorbancia y concentración consignados en la

tabla anterior, fue posible realizar la siguiente curva de calibración.

Figura 3. Curva de calibración de diluciones de CuSO4

Según la regresión lineal los datos obtenidos presentan un R 2= 0,9967 lo cual indica
una buena asociación lineal entre las variables y se demuestra que son
directamente proporcionales. Es importante aclarar que esta relación sucede ya que
las diluciones son del mismo soluto y las muestras absorben en el mismo intervalo
de longitud de onda seleccionada (720 nm), es decir si las cuatro disoluciones
problema no fuesen de CuSO4 los resultados serían muy diferentes.

Por otra parte, al medir la absorbancia de las cuatro disoluciones problema

dispuestas en el laboratorio se interpolaron los datos obtenidos en la curva de
calibración (mostrada en la Figura 3) determinando la concentración de las
disoluciones y donde se observa que siguen perfectamente la tendencia lineal. Para
conocer el valor exacto de las concentraciones se despejo “x” que representa la
concentración en la ecuación de la gráfica y en “y” se tomaron los valores de
absorbancia medidos.

Figura 4. Interpolación absorbancia de las disoluciones problema en la curva de

calibración.

Disolución Concentración Valor real

problema Absorbancia (A) (M) concentración (M) % Error
No.
1 0,539 0,157 0,165 4,85
2 0,417 0,417 0,118 5,08
3 0,251 0,0670 0,0708 5,37
4 0,251 0,0309 0,0309 12,7
Tabla 2. Información sobre las cuatro disoluciones problema después de su análisis.

Finalmente, con el valor real de concentración (M) de cada disolución brindado por el
docente, se calculó el porcentaje de error en las medidas el cual es inferior al 12,7%.
pero solo una de ellas presentó ese valor, las demás estuvieron por debajo del 6%,
lo que indica exactitud en las medidas porque existe proximidad entre el valor
medido y el valor real. Posiblemente el dato que tuvo un porcentaje de error de
12,7%, se debe a un error personal en el momento de realizar la medida de
absorbancia en el espectrofotómetro.

IV. CONCLUSIONES

La absorbancia y la transmitancia son características de todos los líquidos y nos

permiten conocer su concentración de soluto, además se manifiestan a través del
color. En general el desarrollo de la práctica fue satisfactorio ya que se llevaron a
cabo todos los procesos que se esperaban en un comienzo aun cuando hubo dos
inconvenientes.
La medida de la absorbancia con el espectrofotómetro es un excelente método ya
que es muy confiable y brinda valores que ayudan a calcular la concentración de
soluto de las sustancias que absorben luz en diferentes intervalos de longitud de
onda, las cuales se pueden graficar en una curva de calibración donde se demuestra
que la absorbancia y la concentración son directamente proporcionales.

El color también juega un papel importante al caracterizar una sustancia de forma

cualitativa ya que cuando se presenta más intensidad de color es porque hay una
gran cantidad de soluto. (Esto solo sucede en disoluciones con color)

Por último, la colorimetría tiene una amplia aplicación en diferentes campos como lo
el control de calidad de alimentos, en farmacia, en la industria del papel y celulosa,
cuantificación de proteínas y muchos más.

V. REFERENCIAS

1 The Editors of Encyclopædia Britannica (2014): Colorimetry. Encyclopædia

Britannica
2 X. Fuentes Arderiu, M.J Castiñeiras, J.M. Queraltó (1998): Bioquímica clínica y

patología molecular, volumen 1, segunda edición. Editorial Reverté, España.

3Labotienda (S.F): Material de laboratorio. [Fecha de consulta: 19/10/2015]

Disponible en:
<http://labotienda.com/es/catalogo/espectrofotometria_espectrofotometros_uv-
vis_Espectrofotometro-4251-50.aspx >