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I. INTRODUCCION
Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos o
químicos. Se dispone actualmente de una gran variedad de técnicas y agentes que actúan de
manera diferentes y cada uno tiene sus propios límites de aplicación de práctica. Entre los
agentes físicos más utilizados están el calor, presión, radiación, etc. Entre los agentes
químicos se encuentran el cloro, yodo, fluor, etc. Se denomina esterilización al proceso
validado por medio del cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El
proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar
que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto.
Antes de iniciar un empaque del material que se desea esterilizar, es necesario que todas las
prácticas que se realicen estén en condiciones de esterilidad y se debe, en primer lugar,
limpiar el área de trabajo con alguna sustancia desinfectante y encender el mechero.
El material a esterilizar se deberá de empacar correctamente con papel estraza, Una de las
razones de la importancia del papel es que se puede adaptar a diferentes usos como: Impedir
el ingreso de microorganismos al interior, Sellar en forma completa para evitar
contaminación, Soportar la tracción y manipulación habitual sin sufrir deterioro y hacer
permeable al método de esterilización seleccionado.
II. OBJETIVOS
* Conocer los métodos más comunes de esterilización de los materiales de uso más frecuente
del laboratorio de microbiología.
DEFINICION DE ESTERILIZACION
La esterilización es la destrucción o eliminación de todo organismo vivo de un producto. Esto
implica que un objeto estéril debe considerarse como libre de cualquier microorganismo.
La eliminación de microorganismos de los líquidos, o del aire, se hace por filtración, en
donde, las formas vivas más pequeñas son las más difíciles de eliminar.
1. ESTERILIZACIÓN A LA LLAMA:
La utilización de este método y su eficacia depende de los factores: tiempo de
exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto
grado a la acción del calor. Se realiza por carbonización.
Métodos térmicos
Los métodos térmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen entre sus fines la
destrucción de los microorganismos por el calor. Los métodos son tanto la pasteurización
como la esterilización, cuya finalidad principal es la destrucción microbiana, como al
escaldado y a la cocción, procesos en los que también se consigue una cierta reducción de la
flora microbiana, pero que sus objetivos principales son la variación de las propiedades
físicas.
Calor húmedo
Las condiciones de temperatura y presión de un proceso de esterilización por vapor de agua
en un autoclave van de 121 °C a 134 °C y 275-350 kPa. Para el tratamiento de residuos
hospitalarios se emplean tiempos de operación entre 20 y 30 minutos. El método de
esterilización por autoclave utiliza pruebas microbiológicas, las cuales se ingresan dentro del
ciclo de operación y posteriormente por medio de una incubadora se busca detectar si hay
crecimiento de microorganismos. Uno de los microorganismos utilizados en estas pruebas es
el Bacillus stearothermophilus.
Calor seco
PLACA PETRI
Base: 9.5 cm 32cm x 24cm
Altura:1.5 cm
TUBOS DE ENSAYO
Material: Borosilicato 24cm x 16cm
Tapa:nefra de Bakelita
PIPETA
Medida : 5ml 36m x 5cm
POMO GERBER
Con tapa 17cm x 30cm
PAPEL KRAFT
Grosor : medio N° 1- Esterilización de Materiales
Laboratorio Pliego en el Laboratorio de Microbiología 11
ING. Vásquez Nuñez, Flor.
UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
PAPEL ALUMINIO
ASA DE SIEMBRA
AGUJAS DE SIEMBRA
SIMPLE
AGUJAS DE SIEMBRA
REDONDA
ALCOHOL 70%
ALGODON
PAPEL KRAFT
Grosor : medio Pliego
Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 12
ING. Vásquez Nuñez, Flor.
UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
PAPEL KRAFT
Grosor : medio Pliego
TIJERA
REGLA
RON DE QUEMAR
JARRA HERVIDORA
PAPEL KRAFT
Grosor : medio N° 1- Esterilización de Materiales
Laboratorio Pliego en el Laboratorio de Microbiología 13
ING. Vásquez Nuñez, Flor.
UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
V. PROCEDIMIENTO
El personal
deberá tener
un mandil
VESTIMENTA protector,
ADECUADA mascarilla,
guantes y
gorra
Las manos
deberán ser
lavadas con
LAVADO DE jabones que
MANOS contengan
ADECUADO yodóforos,
amonio
cuaternarios,
etc
La
desinfección
final de
DESINFECCIÓN manos se
DE MANOS realizará con
alcohol al
70%
ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES
TUBO DE ENSAYO
PLACA PETRI
Tenedor y cuchillo
1
Campanas Durhan
1
Botella
1
VI. RESULTADOS
Todos los materiales se esterilizaron en una estufa a 120 °C obteniendo materiales libres de
microorganismos.
VII. DISCUSIÓN
En base a los cuidados que se tuvo mediante el proceso de esterilización, el lapso que se
esperó, se obtuvo todo el material esterilizado. También nos dimos cuenta que si no seguimos
los pasos correspondientes o pasamos por alto uno de estos pasos de esterilización, corremos
el riesgo que nuestro material, después de la esterilización, este contaminado.
Para la esterilización se utilizó papel craft y pabilo los cuales evitan la contaminación después
de la esterilización.
VIII. CONCLUSIONES
IX. ACTIVIDADES
TUBO DE ENSAYO
a. Cortar papel Kraft con la medida de 27cm x 16cm.
b. Desenroscar un poco la tapa del tubo de ensayo.
c. Colocar 3 tubos de ensayo en la parte lateral del papel.
d. Enrollar el primer tubo y de manera siguiente los otros dos.
e. Doblar la parte superior e inferior del tubo.
f. Con pabilo, amarrar el tubo de ensayo.
g. Colocar en la estufa a 160° C durante 1h 40 min.
PIPETA
a. Cortar papel Kraft con la medida de 60cm x 4cm.
b. Colocar algodón en la boquilla de la pipeta.
c. Coger la esquina del papel y doblarla en diagonal.
d. Colocar la punta de la pipeta y envolverla de manera giratoria.
e. Doblar la parte sobrante del papel para el costado.
f. Amarrar con un pedazo de pabilo.
g. Colocar en la estufa a 160°C durante 1h 40 min
AFICHE:
Tipos de desinfectantes
Alcohol etíl o isopropílico (70% al 90%)
Blanqueador, hipoclorito de sodio (en concentración de 5.2% como el blanqueador
doméstico) en una dilución de 1:500 (100 ppm de cloro libre)
Yodo.
Fenol.
Amonios Cuaternarios.
Estufa de cultivo:
Interior de acero inoxidable
Ajuste de puerta con cordón de silicona
Exterior de hierro
Grade de temperatura de 0 a 80°C
Tipos:
Estufa de esterilización
Estufa bacteriológicas
Función: se utilizan a una temperatura de 37°C, para realizar cultivos de bacterias, hongos
a una temperatura igual al cuerpo humano.
Autoclave:
Recipiente de presión metálica
Tiene un cierre hermético que permite trabajar a alta presión
Tipos:
Autoclave de laboratorio
Autoclave de uso medico
Autoclave industrial
Autoclave de materiales compuestos
Función: permite la entrada o generación de vapor de agua pero restringiendo su salida,
hasta obtener una presión interna de 103 kpa.
Baño maría:
Incluyen termostatos desde 25°C hasta 100°C
Tienen incorporados bombas de circulación de agua
Los elementos de calefacción son del tipo resistivo
Función: conferir temperatura uniforme a una sustancia liquida o sólida para calentarla
lentamente.
X. RECOMENDACIONES
Favero MS and Bond WW. Chemical Disinfection of Medical and surgical Materials. In SS,
Block (Ed) Sterilization and Preservation (4th Edition) Philadelphia Lea & Febiger, 1991 Pg
617 – 641
The Pharmacopeia of the United States of America. Cap 1211 Sterilization and
Sterility. Assurance of Compendial Articles. 31 Edition. Rockville: USP; 2008.
Roger Y. Stainer, Jhon L. Ingraham, Mark L. Wheeli. Microbiología. Editorial Reverté, S.A