ANTECEDENTES
• 1802 William Hyde Wollaston-. Notó que en el espectro
del sol a ciertas frecuencias aparecen líneas oscuras.
• 1815 Joseph Von Fraunhofer: Estudió a fondo los
espectros del sol y sustancias, y contabilizó las líneas
oscuras.
• 1859 Gustav Robert Kirchoff: Mostró que cada elemento
produce un único modelo de líneas.
• 1861 Robert Wilhem Bunsen: Identificó elementos
presentes en la atmósfera del sol
1903 Kuster y Gruters :sentaron las bases
de las valoraciones conductimétricas,
desarrolándose posteriormente las
valoraciones potenciométricas .
1922 Jaroslav Heyrovský: inventó la
polarografía donde el electrodo de trabajo
es uno de gota de mercurio (DME), útil por
su amplio rango catódico y su superficie
renovable.
1930 pHmetro: Se construyeron los
primeros electrodos de vidrio sensibles al
pH
1950 La Espectrofotometría UV visible – Infrarroja
eliminó el comparador de color y los análisis fueron
más cuantitativos, confiables, reproducibles, más
precisos y exactos.
1950 Primer espectrómetro de masas que se
vendió a nivel comercial.
Mediados del siglo XX: Aparecieron en el
mercado los primeros equipos de cromatografía
de gases. En 1960 comenzó a desarrollarse la
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
DEFINICIÓN
Juega un papel importante
en la producción y en la
Es una parte atractiva y evaluación de nuevos
fascinante del análisis productos y en la protección
químico que interacciona al consumidor y medio
con todas las áreas de la ambiente.
química y con muchos
otros campos
OBJETIVOS DEL ANÁLISIS INSTRUMENTAL
• Conocer las herramientas del análisis químico instrumental para
obtener información cualitativa y cuantitativa, así como adquirir los
conocimientos básicos (fundamentos) de los diferentes métodos de
análisis.
• Aplicar y seleccionar técnicas y metodologías analíticas según la
sustancia a analizar.
• Montar y validar metodologías analíticas realizando demostraciones
prácticas en el laboratorio, trabajando en equipo con responsabilidad
y actitud crítica, tomando decisiones pertinentes y presentando
reportes escritos claros.
• Búsqueda de métodos de análisis más rápidos, selectivos y sensibles.
CONCEPTOS BÁSICOS
Método Ejemplo
Técnica analítica analítico
Es un proceso Es una La
científico aplicación espectrometría
fundamental específica de de infrarrojo es
que ha una técnica una técnica
demostrado ser para resolver analítica; y el
útil para un problema análisis por
proporcionar analítico. infrarrojo de
información los copolímeros
acerca de la estireno y
composición de acetonitrilo es
las sustancias. un método
instrumental.
Procedimiento Protocolo
• Son las instrucciones • Es la descripción más •ASTM: Sociedad
escritas para aplicar un específica de una americana para ensayos y
método. método. materiales
• Supone que el usuario • Deben seguirse, sin •ADAC: Asociación de
tiene algún excepción, las directrices químicos analíticos
conocimiento previo de detalladas
oficiales.
la metodología analítica. • Se usa cuando los
No proporciona gran •EPA: Agencia de
resultados deben ser
detalle. aceptados. protección ambiental
• Métodos estándares de • Ejemplo: EPA o
la ASTM, ADAC, u otros dictámenes legales
ESTADARIZACIÓN
VALIDACIÓN
CLASIFICACIÓN DE TÉCNICAS
INSTRUMENTALES
Espectrometría de absorción
Espectrometría de emisión
Espectrometría Raman
Proceso de “light scattering”
Basados en métodos
ópticos
Espectrometría de resonancia spin
Tienen que ver con
radiaciones Espectrometría de Rayos X
electromagnéticas y con su
interacción de cualquier
Refractometría
tipo con la materia.
Polarimetría
Potenciometría
Conductimetría
Basados en métodos
eléctricos
Amperiometría, Polarografía
Magnitudes eléctricas en la
medición
Columbimetría
Espectrometría de masas
Basados en métodos Métodos radio-químicos
varios
Análisis térmico
Basados en métodos ópticos
• Atómica: referente a los propios átomos.
Espectrometría de • Molecular: que se aplica mediante pruebas de
absorción IR (rayos infrarrojos), técnicas UV (radiación
ultravioleta) y de visible.
Mide la luminiscencia.
• Fluorescencia: emite toda la energía.
Espectrometría de emisión
• Fosforescencia: parte se la energía se absorbe y
parte se emite
Espectrometría Raman Relacionada con la dispersión
Se relaciona con las partículas en suspensión.
Proceso de “light
• Turbidimetría.
scattering”
• Nefelometría.
Basados en métodos ópticos
Espectrometría de El giro del spin determina ciertas propiedades.
resonancia spin RSE: Resonancia de spin electrónico.
RMN: Resonancia magnética nuclear.
Espectrometría de Rayos X Realiza un bombardeo de electrones
Refractometría
Trata de la desviación de un haz de luz que
atraviesa un cuerpo, son menos sofisticadas pero
Polarimetría concluyentes
Basados en métodos eléctricos
Potenciometría Mide el potencial eléctrico mediante un pHmetro
Miden la resistencia eléctrica que se realiza en el
Conductimetría control de aguas. Se trata de analizar la resistencia
que opone el medio al paso de la corriente.
Método electroquímico que proporciona
Amperiometría,
información cualitativa y cuantitativa de sustancias
Polarografía
electro-reducibles y electro-oxidables
Columbimetría Miden la carga eléctrica
Basados en métodos varios
Se basa en el análisis de la presencia de algún
Espectrometría de masas elemento de la tabla periódica (TP).
Aprovecha las características radiactivas de las
Métodos radio-químicos reacciones para medir radiactividad mediante un
bombardeo de electrones
Se basan en el análisis de la temperatura
Análisis térmico
relacionados con el calor.
ETAPAS DEL ANÁLISIS INSTRUMENTAL
CRITERIOS PARA LA SELECCIÓN DE UNA
TÉCNICA
• Qué exactitud se requiere?
• Cuánta muestra se tiene?
• Cuál es el intervalo de concentración del analito?
Definición del • Qué componentes de la muestra podrían causar
problema interferencia?
• Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la
matriz de la muestra?
• Cuántas muestras se realizarán?
Características de desempeño
CONCEPTOS BÁSICOS SOBRE CALIBRACIÓN
CALIBRACIÓN: Determina la relación entre la
respuesta analítica y la concentración del
analito. Se determina mediante el uso de
normas químicas
Comparación con
estándares
Estándar externo
Procedimientos
Adición estándar
Patrón interno
• Comparación • Un estándar • Para analizar • Un patrón
directa: la externo se muestras interno es una
propiedad del prepara por complejas en sustancia que
analito debe separado de la las cuales se se añade en
concordar con muestra. podrían cantidad
la del • Se usan cuando presentar constante a
CALIBRACIÓN CON ESTÁNDARES
estándar. no hay efectos efectos matriz. todas las
de interferencia • Generalmente, muestras,
• Titulación: el de la matriz de se añaden uno blancos y
analito componentes o más patrones de
reacciona con sobre la incrementos de calibración
un reactivo disolución del una solución
estandarizado analito. patrón a
ESTÁNDAR EXTERNO
ADICIÓN ESTÁNDAR
(el titulante), alícuotas de la
PATRÓN INTERNO
en una muestra con
Reacción volúmenes
estequiométri idénticos.
ca conocida
y: señal
m: pendiente de la recta.
x: concentración.
b: intercepto de la recta.
R2: coeficiente de
determinación
Búsqueda bibliográfica
Definir las condiciones
Estandarizar el métodos
Validar el método
VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS
REQUISITOS:
Estandarizados
Instrumentos Métodos
calificados y calibrados documentados
Patrones de referencia
Analistas calificados
confiables
Integridad de la
muestra
VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS
DEFINICIÓN
OBJETIVO
• Es el proceso por el cual
• Demostrar si un
se establece, por medio
procedimiento analítico es
de estudios de
demostrar que es apto
laboratorio, que un
para el propósito
método es apropiado para
indicado.
el uso propuesto.
Métodos
Métodos reproducibles
confiables
PROTOCOLO DE VALIDACIÓN
• Lista de materiales y equipos.
• Características de desempeño que se
evaluarán.
• Análisis estadístico.
• Criterio de aceptación para cada
parámetro de desempeño.
PARÁMETROS
Límite de Sensibilidad
Linealidad
detección
Límite de Precisión
cuantificación
Intervalo
Selectividad
Exactitud Reproducibilidad
SELECTIVIDAD
• Es la capacidad de un método
para evaluar inequívocamente
el analito en presencia de
interferentes.
• Se refiere al grado por el cual el
método analítico está libre de
interferencias de otras especies
contenidas en la matriz de la
muestra.
Generalmente, se utiliza en:
• Identificación de analitos.
• Pruebas de pureza.
• Valoración.
• Análisis cualitativos.
SENSIBILIDAD
• Es una medida de la aptitud de
un método para discriminar
entre pequeñas diferencias de
concentración de un analito.
• Factores que la limitan:
La pendiente de la curva
de calibración y la
reproducibilidad o
precisión del dispositivo
de medición.
LINEALIDAD
• Es la capacidad de producir
resultados directamente
proporcionales a la
concentración del analito
dentro de un intervalo.
• Debe utilizarse un mínimo de 5
puntos de datos para una
evaluación adecuada.
• Es necesario un intervalo para
resultados exactos y precisos.
• Valor de R2 entre 0.99 y 0.9999.
INTERVALO
• Se refiere al intervalo de
concentraciones del analito que
pueden ser determinadas con
precisión, exactitud y linealidad.
• El extremo inferior está
determinado por el límite de
cuantificación.
• Debe abarcar del 0 al 150 % o
del 50 al 150 % de la
concentración susceptibe de ser
hallada.
• Se expresa con las mismas
unidades que los resultados.
PRECISIÓN
• Es el grado de concordancia
entre los datos que se
obtuvieron de la misma
manera.
• Proporciona una medida del
error aleatorio o indeterminado
de un análisis.
• Parámetros de calidad:
desviación estándar, error
estándar de la media,
coeficiente de variación.
REPETIBILIDAD REPRODUCIBILIDAD
• Supone dar la menor • Supone dar la mayor
variación en los resultados. variación en los resultados.
• Es una medida de • Es una medida de la
variabilidad en los variabilidad en los
resultados cuando la resultados entre
medición se lleva a cabo por laboratorios
un solo analista y utilizando
el mismo equipo.
LÍMITE DE
DETECCIÓN
• Es la concentración o masa
mínima del analito que puede
ser detectada con un nivel de
confianza conocido.
• Depende de la relación entre la
magnitud de la señal analítica y
el tamaño de las fluctuaciones
estadísticas en la señal del
blanco.
LÍMITE DE
CUANTIFICACIÓN
• Es la menor concentración del
analito que puede determinarse
con precisión y exactitud en una
muestra.
• Se expresa en las mismas
unidades de concentración
empleadas para el analito.
EXACTITUD
• Medición de la diferencia entre los resultados
previstos del análisis y el valor de referencia
aceptado, debido a un error sistemáticos del
método y del laboratorio.
• Normalmente se expresa en porcentaje de
recuperación.
INCERTIDUMBRE EN LA MEDICIÓN
• Como no es posible realizar
mediciones absolutamente
exactas, toda medición va a
tener un margen de duda.
• La incertidumbre es el valor de
ese margen de duda.
• Determina la calidad de las
mediciones
FUENTES:
La naturaleza de la magnitud que se mide.
El instrumento de medición
El observador
Condiciones externas
TÉCNICAS ÓPTICAS
Los primeros instrumentos de
esta clase se crearon para su
aplicación dentro de la región
visible y por esto se llaman
instrumentos ópticos.
Miden las interacciones entre la
energía radiante y la materia.
La energía radiante que se
utiliza para estas mediciones
puede variar desde los rayos X,
pasando por la luz visible, hasta
las ondas de radio.
REM: RADIACIÓN
ELECTROMAGNÉTICA
• Longitud de onda.
Se describe por medio de un
• Frecuencia.
modelo ondulatorio sinusoidal
• Velocidad.
clásico, que incorpora:
• Amplitud.
La radiación electromagnética
no requiere medio de soporte
para su transmisión y pasa
fácilmente por el vacío a
diferencia del sonido.
El modelo ondulatorio no toma
en cuenta los fenómenos
relacionados con la absorción y
emisión de energía radiante
La REM es como una
La energía de un fotón
corriente de partículas
es proporcional a la
discretas, paquetes de
frecuencia de la
ondas o energía
radiación.
llamados “fotones”.
La amplitud de la onda es la longitud del vector del campo
eléctrico en el máximo de la onda, mientras que la longitud de
onda es la distancia entre máximos sucesivos.
PROPIEDADES ONDULATORIAS
El componente eléctrico de la radiación
es el causante de la transmisión,
reflexión, refracción y absorción.
El componente magnético es el causante
de las absorción de la ondas de
radiofrecuencia en la RMN.
El término “polarizada en el plano” (haz
de luz) significa que las oscilaciones de
los campos eléctrico o magnético yacen
en un solo punto.
• Longitud del vector eléctrico en
Amplitud
un máximo de la onda.
• Tiempo en segundos que se
requiere para el paso de máximo
Periodo
y mínimos sucesivos por un punto
fijo en el espacio
• Número de oscilaciones del
Frecuencia
campo que ocurren por segundo
• Distancia lineal entre dos puntos
Longitud
equivalentes cualesquiera en
de onda
ondas sucesivas.
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO Y SU
INTERACCIÓN CON LA MATERIA
El espectro electromagnético
abarca una enorme gama de
longitudes de onda y
frecuencias (energías).
El intervalo es tan grande que
se requiere una escala
logarítmica.
Las divisiones se basan en los
métodos usados para generar
y detectar las distintas clases
de radiación.
REGIONES EN EL ESPECTRO
ELECTROMAGNÉTICO
Difracción de radiación
• Proceso en el cual un haz paralelo se curva cuando pasa por una
barrera afilada o por una abertura reducida.
• Es una propiedad de la onda que se puede observar no solo
para la radiación electromagnética, sino también para ondas
mecánicas o acústicas.
Transmisión
• La interacción involucrada en la transmisión se puede atribuir a
la polarización periódica de las especies atómicas y
moleculares.
• La polarización implica deformación temporal de las nubes
electrónicas.
Refracción
• Cambio abrupto de dirección de un haz, cuando la radiación
atraviesa con cierto ángulo la interfase entre dos medios
transparentes de diferentes densidades
Reflexión
• Cuando la radiación cruza una interfase entre medios que
difieren en el índice de refracción, también se presenta la
reflexión.
Difusión
• Cuando una fracción muy pequeña de la radiación se
transmite en todos los ángulos a partir de la trayectoria
original.
Polarización
• La radiación ordinaria está constituida por un haz de ondas
electromagnéticas en las cuales las vibraciones están
distribuidas de manera equitativa entre una gran cantidad
de planos centrados a lo largo de la trayectoria del haz
