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Manual de Practicas Biometrica Hermatica PDF
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“Biometría Hemática”
ALUMNO:
Introducción
La flebotomía constituye una de las etapas más importantes en el trabajo del laboratorio clínico. Por una parte
representa el primer contacto entre el laboratorio y sus pacientes y desde el punto de vista de la muestra
sanguínea, la enorme importancia que conlleva una muestra apropiadamente colectada, la seguridad de su
origen y el correcto envasado y transporte, constituyen factores fundamentales en la evaluación e informe de los
exámenes a realizar.
El personal que ha de realizar la colección de la muestra sanguínea, debe tener presente que en el trato correcto
del paciente, su orientación y la habilidad para realizar su trabajo, está la cara del Laboratorio Clínico ante la
comunidad que ha de servir.
El presente protocolo pretende ser una guía para el personal encargado de la colección de las muestras
sanguíneas, tal que ésta función sea estandarizada en sus aspectos técnicos y estableciendo las pautas
necesarias en bioseguridad y de aquellos factores que pueden afectar la calidad de la muestra.
La seguridad primero
Tú eres un recurso altamente entrenado y valioso.
No permitas que un accidente ponga en peligro tu vida.
Tú eres el único que puede practicar y hacer cumplir los procedimientos de seguridad para tu propia
protección y la de tus compañeros de trabajo.
Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar bata durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio.
Cuando se va a extraer muestra, es requisito la utilización de guantes de protección. Es recomendable el uso
de lentes de protección.
No se permite comer ni tomar en el área de trabajo.
No se permite fumar.
Aplicación de cosméticos: No permitido en el área de trabajo.
Lentes de contacto: No se permite su manipulación en el área de trabajo.
Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrás su cabello, de forma tal que no entren en
contacto con superficies contaminadas.
Lavado de las manos: Las manos deben ser lavadas con frecuencia durante todo el día de labor, antes y
después del contacto con los pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio.
Practique las precauciones universales mínimas con todo paciente a ser atendido.
Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que
garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.
Limpie su mesa antes de iniciar sus labores.
Si el paciente tose con frecuencia, colóquese una mascarilla.
Evite tocar áreas visiblemente infectadas del paciente.
Tome precauciones al manipular las agujas y lancetas.
No deje agujas y lancetas usadas en la mesa de trabajo; descartar inmediatamente en su contenedor
apropiado.
No coloque el protector a la aguja.
Si hay derrame de sangre, limpie con Hipoclorito de sodio al 10%.
Limpie el torniquete con alcohol etílico después de cada extracción.
Cambie los guantes si se han manchado de sangre u otros fluidos corporales.
Siempre que sea posible, cambie los guantes entre pacientes.
Al terminar su labor, quítese los guantes y lávese bien las manos.
Si ocurre un pinchazo con aguja conteniendo sangre de un paciente HIV positivo, informe inmediatamente al
jefe del laboratorio y diríjase a la clínica del empleado o a riesgos profesionales.
Evite que los niños toquen o jueguen con los equipos de la flebotomía.
1. La ansiedad y la tensión mental o física puede afectar los niveles de muchos componentes sanguíneos.
Tal es el caso de las concentraciones de Prolactina, Cortisol, Catecolamina, Aldosteronas y Renina.
También puede elevar la cuenta de leucocitos.
2. Se recomienda evitar ejercicios físicos vigorosos durante 3 días previos a la toma de muestra, ya que
pueden alterar los niveles de CPK, LDH, AST potasio, glucosa, lactato, prolactina y cortisol.
3. El ritmo diurno de algunos fluidos corporales muestran fluctuaciones durante el día. Por ejemplo los
niveles de cortisol son altos en la mañana, pero decrecen en la tarde. Los niveles de hierro tienden a
caer durante el día.
4. La situación dietética del paciente puede ser importante para ciertas pruebas. Tal es el caso de las
variaciones en la concentración de lípidos después de una comida grasosa. El suero sanguíneo muestra
una apariencia lechosa debido a la presencia de triglicéridos y quilomicrones. Estos sueros
hiperlipidémicos influyen en las mediciones, por lo que se recomienda tomar muestra después de un
periodo de ayuno, usualmente de toda la noche.
5. La ingestión de etanol induce cambios en la composición de los lípidos corporales. De particular interés
son las enzimas hepáticas, como la fosfatasa alcalina, transaminasas, gama glutamil transferasa y otros
componentes como la glucosa, triglicéridos, uratos y lactato.
6. El fumar puede producir variaciones en los resultados de algunos componentes como la lipasa, amilasa,
colesterol, glucosa e igualmente afecta la absorción gástrica en la prueba de tolerancia a la glucosa.
7. La cirugía y la inyección intramuscular provoca un aumento en la concentración de creatincinasa.
8. La exploración rectal o la manipulación prostática, puede causar un aumento en la concentración del
antígeno prostático específico.
9. Los anticonceptivos orales afectan profundamente la actividad estrogénica y conducen al aumento de
muchas proteínas como la tiroxina, cortisol y las hormonas sexuales.
10. Medicamentos como barbitúrico y fenitoina, inducen enzimas hepáticas con valores elevados.
11. Evite extraer sangre arriba de una inyección intravenosa previa, ya que las concentraciones de muchos
compuestos pueden resultar erróneamente altos o bajos.
12. Evite provocar hemólisis durante el proceso de extracción o llenado de los tubos, lo cual afectará
algunas pruebas relevantes. La hemólisis puede ocurrir también por exceso de residuos del alcohol
utilizado durante la desinfección del sitio a puncionar. También puede ser debido a un incremento en la
fragilidad capilar y alto volumen de células empacadas, especialmente en recién nacidos.
13. Evite agitar con fuerza los capilares para microcolección de muestra, ya que puede provocar su
hemólisis.
14. Evite puncionar en un área con hematoma, fístulas, quemaduras, escoriaciones de la piel, cicatrices o
del costado en que se ha realizado mastectomía reciente.
15. Verifique condiciones de ayuno para las pruebas que lo requieran.
16. Las pruebas seriadas como curvas de tolerancia, post-prandial, post-ejercicios, etc. deben monitorearse
en el tiempo adecuado, por lo que tienen prioridad.
17. En el caso de las pruebas seriadas, deben rotularse los tubos con la hora de toma de la muestra.
Interferencias:
Los tubos con anticoagulante deben invertirse suavemente y colocarlos en posición vertical, para evitar el
contacto prolongado con el tapón de caucho.
Algunos compuestos se pueden adsorber al tubo. Tal es el caso de la hormona ACTH y la paratiroidea que se
adsorben al vidrio con facilidad, por lo que se recomienda tubos de plástico.
Los separadores de suero se utilizan para separar el suero libre del coágulo de sangre. Estos pueden ser de
gel de silicón, poliester o perlas de vidrio. En algunos casos debido a problemas en la centrifugación y a altas
temperaturas, pueden quedar gotas de gel dentro del suero. Se ha demostrado que estas gotas de gel
pueden interferir con algunas mediciones. Es conocido que la progesterona se reduce apreciablemente
cuando se almacena sobre gel por varios días. Igualmente ocurre con la lidocaína, fenobarbital, fenitoina y
Carbamacepina.
Algunas hormonas polipeptídicas de bajo peso molecular, como la ACTH, glucagón, gastrina y otras
hormonas intestinales, se destruyen rápidamente por enzimas presentes en la sangre. Por lo que es
necesario centrifugar la muestra a baja temperatura, 10 minutos después de la toma y almacenar el suero o
plasma inmediatamente a –20 C.
Aquellos tubos con anticoagulantes deben ser llenados exactamente hasta la marca, cualquiera sea el
método que se utilice para extraer la sangre, para evitar que la concentración del anticoagulante sea
demasiada alta, tal que afecte el sistema de medición.
Registro
c) Pruebas que se realizarán
d) Es deseable que la solicitud incluya información clínica de utilidad
Diagnóstico
Ingestión de drogas
Restricciones especiales
e) Fecha de orden y fecha de colección
f) Iniciales del flebotomista
g) Hora de extracción.
La identificación correcta del paciente es obligante. Pregunte su nombre completo y número de cédula o seguro
social. Si se trata de un paciente hospitalizado, observe su brazalete de identificación y su nombre en la cama.
E T I C A:
En todo momento debe mantener la ética y confidencialidad del paciente y sus pruebas. Los Códigos de Ética de
los trabajadores de la salud, prohíben estrictamente que los aspectos de salud del paciente sean divulgados con
propósitos no profesionales.
Se deben evitar críticas, temas políticos, atención de asuntos personales y conversaciones que distraigan o
dilaten la adecuada atención del paciente.
No dé preferencia a familiares ni amistades, tal que afecte la atención de los pacientes.
Tubos de colección: Los tubos están predeterminados para llenarse con un determinado volumen de sangre
por vacío. El tapón de caucho está codificado por color, de acuerdo a su uso o sus aditivos.
Agujas: Están numeradas dependiendo de su calibre. Para colección de sangre para hemogramas, se
recomienda una aguja de un diámetro de 0.8 mm (21G) para evitar daño a las células. Las agujas de 0.9 mm
a 1.1 mm de diámetro (20G – 19G) se utilizan normalmente para punción venosa en adultos.
Jeringuillas: De 3, 5, 10 y 20 cc
Torniquete: Recomendable de 2 tamaños para adultos y niños y de preferencia deben ser planos.
Algodón
Gasa
Guantes
Iodo.
El procedimiento de la flebotomía
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para evitar errores. Esto incluye la
absoluta identificación del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en
posición cómoda, de preferencia en una silla especial para venipunción con descanso para los brazos y si está en
cama, preferiblemente acostado.
Selección del sitio a puncionar:
Al proceder a seleccionar el sitio a puncionar, evite áreas con hematoma, fístulas, quemaduras, escoriaciones de
la piel o cicatrices. Si se trata de un paciente hospitalizado evite tomar muestra de un brazo que se esté utilizando
con venoclisis o del costado en que se ha realizado una mastectomía reciente.
La palpación:
Antes de proceder a puncionar, se debe escoger la vena. La mejor manera es realizando una palpación de las
mismas para esa decisión. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadas por arriba del sitio seleccionado, para
visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por más de 3 minutos, para evitar la
hemoconcentración.
Las venas más utilizadas para la venipunción, están localizadas en el área antecubital. Entre éstas tenemos:
a) Vena Cubital: Es la más larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del
brazo.
b) Vena Cefálica: Tiene iguales características de la anterior, pero es un poco menos gruesa.
c) Vena Basílica: Es más pequeña que las anteriores. Esta vena está cerca de la arteria braquial, por lo
que su punción es riesgosa y su área es más sensible y dolorosa para el paciente.
Al palpar hágalo con la punta de sus dedos, tratando de seguir el rastro de las venas. Aquí también son útiles sus
conocimientos en la anatomía de las venas de las extremidades superiores. En ocasiones si no visualiza la vena,
puede forzar la sangre dentro de la vena a través de un suave masaje de abajo hacia arriba.
PALPACIÓN DE LAS VENAS
La Descontaminación:
Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe proceder a descontaminar el área con alcohol etílico o
isopropílico al 70% utilizando algodón y con movimientos circulares del interior al exterior. Debe tener presente
que una vez realizada la descontaminación, no debe volver a tocar el área venosa.
DESCONTAMINACION DEL AREA
La punción venosa:
Ahora está preparado para realizar la extracción sanguínea.
El brazo debe estar preferiblemente en posición cómoda horizontalmente. Con el torniquete en posición, haga
que el paciente cierre y abra el puño de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puño
cerrado.
Si se trata de un niño, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del codo del paciente, para evitar
que doble el brazo durante la extracción.
Extracción con jeringuilla:
Cuando vaya a proceder a realizar la extracción con jeringuilla, usted debe tener presente el calibre a utilizar y el
tamaño de la jeringuilla según el volumen a extraer.
CUARTO SEMESTRE 9 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
a) Coloque la punta de la aguja en un ángulo de 15 a 30 grados sobre la superficie de la vena escogida y atraviese
la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el lumen de la vena.
b) Apretando firmemente la jeringuilla, debe jalar el émbolo con movimiento continuo para extraer la sangre
hasta el volumen requerido. Evite presionar fuertemente la aguja durante la extracción.
c) Afloje el torniquete para que la sangre fluya mejor y remueva la aguja del brazo con movimiento suave al
terminar de colectar, sin apretar el área de la punción con el algodón.
d) Presione el algodón sobre el sitio de la punción aplicando una presión adecuada y no excesiva para evitar
la formación de hematoma.
c) Movimiento de la aguja, tal que el bisel de la aguja quede contra la pared de la vena, afectando la entrada de la
sangre
d) Colapso de la vena:
En estos casos, afloje el torniquete para incrementar el flujo sanguíneo, remueva la aguja ligeramente y vuelva a
redireccionarla.
d) Formación de hematoma:
Si se forma un hematoma bajo la piel adyacente al sitio de la punción, afloje el torniquete y retire la aguja. Aplique
presión firmemente sobre el hematoma.
e) Sangre arterial:
Pudiera suceder que se atraviese una arteria, en estos casos la sangre se observa de un color rojo brillante.
Retire la aguja y aplique presión por 5 minutos.
Como prevenir los hematomas:
Causas de la Hemoconcentración:
o Aplicación prolongada del torniquete. La presión hidrostática causa que algo de agua y
elementos filtrables escapen al espacio extracelular. Esto tiene efectos también sobre el
empaque celular.
o Masaje vigoroso del sitio a puncionar.
o Esclerosis u obstrucción venosa.
Extracción con vacutainer:
En ocasiones, especialmente cuando se requiere colectar muchos tubos para diversas pruebas en secciones
distintas, es sumamente útil el uso del adaptador vacutainer o similar, el cual nos permite llenar cuantos tubos
sean necesarios.
En estos casos, una vez hecha la punción, sostenga firmemente el vacutainer con una mano y con la otra inserte,
llene y retire cuantos tubos requiera.
EXTRACCION CON VACUTAINER
La Punción Capilar:
La obtención de sangre por punción capilar es particularmente útil en las siguientes circunstancias:
a) Neonatos.
b) Lactantes.
c) Niños.
d) Adultos con quemaduras severas.
e) En pacientes muy obesos.
f) En caso de terapias intravenosas.
La punción cutánea se puede llevar a cabo en:
a) La superficie más lateral o más medial de la planta del pie.
b) La superficie medial plantar del dedo gordo del pie.
c) La superficie lateral del dedo medio o anular, preferiblemente.
d) El lóbulo de la oreja, evitando la mejilla.
TIPOS DE PORTA-LANCETA
Una vez escogido el sitio de la punción, puede dar un ligero masaje al área para concentrar la sangre.
Limpie el sitio con alcohol etílico o isopropílico al 70%.
Con una mano sostenga el dedo o área a puncionar y con la otra sostenga la lanceta.
Haga la punción con la lanceta, realizando un movimiento rápido, firme y profundo.
Después de puncionar, descartar la primera gota de sangre, que contiene líquido tisular, limpiándolo con el
algodón.
Presione el dedo para hacer salir la sangre, procurando sea de manera ininterrumpida.
Una vez tomada la muestra, sellar los tubos capilares con sellador o los microtubos con su tapa.
Los microtubos y capilares con anticoagulantes deben ser invertidos suavemente por lo menos 10 veces para
evitar su coagulación.
Coloque el algodón sobre el sitio puncionado haciendo presión para parar el sangramiento.
SITIO RECOMENDADO PARA LA PUNCION CAPILAR
Colección en Neonatos:
El pie del neonato es el sitio apropiado para colectar muestra sanguínea por punción capilar.
Es recomendable la pre-limpieza del pie con una gasa tibia para incrementar el flujo sanguíneo.
CUARTO SEMESTRE 14 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
El siguiente diagrama ilustra con el color verde los sitios de punción recomendados.
Al terminar mantenga presión sobre el sitio de la punción con gasa o algodón para parar el
sangramiento.
Descarte la lanceta en un receptáculo apropiado.
Por todo lo anterior enumeraremos algunas recomendaciones que han de ser tenidas en cuenta al momento de
atender estos pacientes:
a) Debe haber una plena identificación del paciente. Si el paciente está despierto, pregúntele su nombre. En todo
caso debe comprobar la identificación del paciente con el nombre colocado en la cama y su brazalete de
identificación que puede estar en el brazo o el tobillo.
b) Tome en cuenta todos los aspectos explicados referente a pacientes con venoclisis o que reciben drogas
intravenosas.
c) Pida ayuda cuando va a atender pacientes psiquiátricos o agresivos, para evitar causarle un daño durante la
punción.
d) Limpie con alcohol el torniquete después de cada extracción.
e) Siga las instrucciones de bioseguridad con todos los pacientes, especialmente las indicadas en la entrada de
las salas de pacientes potencialmente peligrosos.
f) No colecte sangre de una extremidad edematosa.
g) En caso de pacientes con línea arterial, las muestras de sangre deben ser extraídas por el médico, a excepción
de la muestra por tiempo de coagulación, que debe ser tomada del otro brazo y lo cual puede hacerlo el técnico.
El Etiquetado:
El etiquetado de los tubos debe realizarse inmediatamente posterior a la extracción sanguínea. Es incorrecto
rotular los tubos previamente a la punción. En el caso de pacientes hospitalizados, ésta tarea se realiza en la
cama del paciente.
El etiquetado puede incluir:
Transporte de la muestra
Una vez que se haya colectado la muestra sanguínea, ésta debe ser llevada pronto al laboratorio para su
procesamiento. Algunas pruebas exigen que el suero sea separado cuanto antes del coágulo sanguíneo, para
evitar alteraciones en la composición o niveles de algunos metabolitos.
De más está decir que la muestra debe ser acompañada por su correspondiente formulario de solicitud de
examen.
AL TERMINAR SU LABOR
Una vez terminada su labor en la extracción de muestras sanguíneas el personal tiene la obligación de dejar
limpio y ordenado su puesto, con el fin de que el mismo pueda ser utilizado por otro personal con las condiciones
apropiadas de trabajo.
Esta labor incluye la limpieza del área, el ordenamiento de los tubos, jeringuillas y agujas sobrantes y la
colocación de restos de basura en su recipiente.
Al terminar sus funciones, debe informar al jefe de sala o a la persona asignada para su relevo, con el fin de
mantener la continuidad de las labores.
PRACTICA No. 1
FLEBOTOMIA
OBJETIVO:
Aplicar sus conocimientos previos de la anatomía del sistema circulatorio, para realizar una extracción
sanguínea venosa. Concientizándose de la importancia de su desempeño en la rehabilitación del paciente, a si
mismo, valorando las medidas de ética y bioseguridad.
INTRODUCCION:
FLEBOTOMIA: es el proceso de colectar sangre como una medida terapéutica, con el fin de diagnosticar
adecuadamente la causa de la enfermedad.
VENIPUNTURA: o venipunción, es la extracción de sangre por una vena.
Los lugares más habituales de realizar esta punción son la flexura del codo, venas de la mano, muñeca y tobillo.
En la flexura del codo existe una anastomosis especial entre la vena basílica y cefálica formado entre ellas una
especie de anclaje que evita que estas venas se muevan lo que facilita la flebotomía.
PUNCION CAPILAR
Este tipo de flebotomía se utiliza en pacientes que no permiten una adecuada punción venosa; facilita al
flebotomista la obtención de muestra sin causar traumatismos al paciente.
Esta punción capilar se realiza en las yemas de los dedos de las manos, en el lóbulo de la oreja o en los
talones de los pies.
A continuación se mencionaran algunas de las más frecuentes causas en las que se recomienda
punción capilar:
En pacientes quemados severamente, quienes presentan deshidratación y su circulación sanguínea es
deficiente.
En pacientes de oncología cuyas venas se reservan con fines terapéuticos (quimioterapia).
En pacientes obesos cuyas venas son demasiado profundas.
En pacientes geriátricos en los que las venas son poco accesibles y demasiado frágiles.
En niños y bebes prematuros cuyas venas son inaccesibles.
En el caso de los bebes prematuros o niños menores de 1 año se recomienda hacer la punción capilar en la
planta de los pies, en las zonas laterales, evitando la parte central, que es donde se concentran gran cantidad de
arterias y venas axial como el hueso, pudiendo ocasionar infecciones o daños en tendones y cartílagos.
Sin embargo este tipo de punciones (capilar en dedo y en talón) puede frecuentemente sufrir hemólisis, esto
debido ha:
Que se presiona demasiado el dedo o el pie, lo que evita una buena circulación sanguínea.
Fragilidad en los eritrocitos, esto es frecuente en los recién nacidos.
Que en la piel no se haya secado el alcohol al hacer la punción, provocando la hemólisis.
MATERIAL:
1. Jeringas (5 ó 10 mL).
2. Agujas desechables.
3. Torniquete.
4. Torundas de algodón o gasas.
5. Alcohol isopropílico al 70 %.
6. Tubos desechables adecuados a la muestra requerida.
7. Gradilla.
8. Recipiente de recolección para desechos infecto-contagiosos.
9. Banda adhesiva.
PROCEDIMIENTO:
1. RECEPCION DEL PACIENTE.- Es sumamente importante recibir al paciente con amabilidad, establecer
una comunicación cordial y atenta para lograr su confianza. Por lo tanto, se debe llevar un registro
adecuado del paciente, y así evitar confusiones y errores tanto de la o las muestras que se le van a
obtener, así como de sus resultados. Se sugiere considerar los siguientes aspectos :
a. Nombre, sexo y edad del paciente.
b. Número de registro.
c. Fecha y hora en que la muestra fue tomada.
d. Nombre del médico que atiende al paciente.
e. Diagnostico presuntivo.
f. Fármacos administrados.
g. Nombre o iniciales de la persona responsable de la flebotomía.
2. El paciente debe de estar en una posición cómoda, en un lugar iluminado y accesible al técnico.
3. Preguntarle al paciente a qué hora fue su última comida.
4. Colocar el torniquete.
5. Localizar la vena a puncionar, en caso de no ser visible, utilizar el tacto palpando la vena; cuando el
paciente tiene venas difíciles de palpar, ya sea porque son muy delgadas o están ocultas, es necesario
dar un masaje al brazo hacia abajo, estimulando la circulación sanguínea; bajar los brazos del paciente
para que las venas se “llenen” de sangre por la gravedad; o aplicarle compresas con agua caliente en el
brazo (con el calor las venas se ensanchan , logrando así su visualización).
6. Hacer asepsia de la zona a puncionar, en UN SOLO SENTIDO con una torunda con alcohol isopropilico.
7. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba y siguiendo la trayectoria de la vena.
8. Extraer la sangre, girando poco a poco el émbolo de la jeringa hacia fuera.
9. Quitar el torniquete.
10. Sacar la aguja de un solo movimiento, sin lastimar
11. Presionar con la torunda de algodón, a forma de compresa, el sitio de la extracción.
12. Trasvasar la sangre a los tubos según sea el uso de la muestra.
13. Rotular tubos con la muestra.
14. Aplicar una banda adhesiva en el sitio de la punción.
BISEL
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO: (explique su experiencia personal durante la extracción de sangre, al desempeñar los papeles de
paciente y de flebotomista)
CUESTIONARIO 1
2. ¿Cuáles son los sitios más comunes para realizar una flebotomía?
3. ¿En qué casos se puede realizar una punción en el talón del pie?
4. Mencione 5 datos importantes del paciente durante la recepción, para realizar un adecuado registro de sus
exámenes a realizarle:
5. ¿Si tenemos a un paciente con venas difíciles de visualizar, que se sugiere hacer, para realizar una
extracción exitosa?
PRACTICA No. 2
“RECUENTO ERITROCITARIO Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO”
INTRODUCCION:
EL RECUENTO DE ERITROCITOS es un examen de sangre que determina el número de glóbulos rojos (GR)
que tiene una persona. La cantidad de oxígeno recibida por los tejidos corporales depende de cuántos glóbulos
rojos tenga la persona y de qué tan bien éstos estén funcionando. El recuento de eritrocitos, leucocitos y
plaquetas son expresados en concentración (células por unidad de volumen de sangre); en este caso que es el
método manual es de mm³.
Es preciso que cuando se interprete los resultados del conteo eritrocitario, se complemente con otras medidas de
la biometría hemática, es decir, con la hemoglobina, el hematocrito, la VCM, la HCM y la VMHC.
El hematocrito
Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso de
las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total,
o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan oxígeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
La finalidad que se persigue con esta prueba es la de confirmar el diagnostico de varias patología o afecciones.
Los valores altos de hematocrito puede deberse a afecciones tales como:
Cardiopatías
Hemoconcentración o eritrocitosis
Deshidratación
Eclampsia durante el embarazo
CUARTO SEMESTRE 23 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
MATERIAL BIOLOGICO:
Sangre total
REACTIVOS:
Liquido de Hayem o solución de Dacie
E.D.T.A. al 10 %
MATERIAL NECESARIO:
Pipeta de Thoma
Hemacitómetro (cámara de Neubauer)
Boquilla
Microscopio
Contador celular
Tubos capilares
Micro centrífuga
Plastilina selladora
PROCEDIMIENTO:
Para recuento de eritrocitos:
1. Obtener sangre total siguiendo el protocolo ya conocido
2. Con la boquilla y la pipeta de Thoma aspirar sangre hasta la marca 0.5 (SIN BURBUJAS)
3. Aspirar diluyente (Hayem o Dacie) hasta la marca 101 de la pipeta
4. Agitar la pipeta por 3 min.
5. Desechar las 5 o 6 primeras gotas de la pipeta de Thoma
6. Colocar el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer y llenarla, tratando que fluya libremente por
difusión el liquido evitando llenar en exceso o formación de burbujas
7. Dejar en reposo 2 o 3 minutos el Hemacitómetro con el fin de que los eritrocitos sedimenten
8. Localizar la cuadricula de la cámara de Neubauer con el objetivo seco débil (10X); enseguida enfocar
con seco fuerte (40X)
9. El recuento se realizara en los cuadros más pequeños de la cámara, contando los hematíes localizados
en los 4 cuadros de los extremos y en el del centro, haciendo un total de 5 cuadros. (VER FIGURAS
MAS ABAJO)
10. Realizar los cálculos para determinar la cantidad de eritrocitos resultantes
Nota: Se puede realizar con la pipeta automática, se toma 20 µL (0,02mL) de sangre total con anticoagulante, o
sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que contenga 4 mL de solución de Hayem (aquí se tiene una
dilución de 1:200). Se deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cámara con la misma
pipeta usando un nuevo tip.
PARTES DE LA PIPETA DE THOMA:
De los 25 cuadrados en que se encuentra subdividido, se cuentan los cuatro angulares y el central, con un
recuento total representativo de 1/5 de milímetro cuadrado. Sobre la base de una dilución de 200, de un recuento
2
de 1/5 mm y una profundidad de 0.1 mm, el cálculo se efectúa como sigue:
3
Eritrocitos contabilizados X 5 X 200 X 10 = NUMERO DE ERITROCITOS POR mm , o bien
3
Eritrocitos contabilizados X 10,000 = NUMERO DE ERITROCITOS/ mm
Con el valor del hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso
de las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del
total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan oxígeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
PROCEDIMIENTO:
1. Utilice tubos capilares de 7 cm de largo por 1 mm de grosor, llenar las ¾ partes del capilar, con sangre
venosa bien homogeneizada.
2. Cerrar la punta del tubo capilar sellando a la llama del mechero (evite quemar el paquete globular) o con
plastilina.
3. Centrifugar por 5 min. a 10,000 rpm
4. Leer el resultado en escalas comerciales, de la siguiente manera:
a.
extremo inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de la línea horizontal
correspondiente al cero.
b. Desplace el tubo a través de la escala hasta que la línea marcada con el número 100 quede al
nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la columna de eritrocitos continúe
sobre la línea cero. El tubo debe encontrarse completamente en posición vertical.
c. La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicará la fracción de volumen
de éstos.
VALORES NORMALES:
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO:
PARAMETRO RESULTADO VALOR DE REFERENCIA
ERITROCTIOS (RBC)
HEMATOCRITO (HTO)
CALCULOS:
COMENTARIO:
CUESTIONARIO 2
“RECUENTO DE ERITROCITOS Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO”
1. Con tus propias palabras, explica ¿Para qué nos sirve el recuento de glóbulos rojos, en un examen de
salud?
7. El conteo de eritrocitos con el método manual, puede tener errores y afectar al resultado de la prueba;
menciona al menos 3 de estas causas de error:
9. Que cálculos aritméticos se deben realizar para obtener el número total de glóbulos rojos contabilizados:
10. ¿Cuál es la modificación que se realizo en la dilución de la sangre con el reactivo de Hayem, para hacer
el recuento eritrocitario?
PRACTICA No. 3
“DOSIFICACION DE HEMOGLOBINA”
INTRODUCCION:
La hemoglobina es el componente principal de los glóbulos rojos constituye el 95% del peso eritrocitario,
es una proteína conjugada que sirve de vehículo para el transporte de O2 y CO2. Está constituida por 4
estructuras de hem unidas a una de globina.
La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno
como para bicarbonato por parte del eritrocito.
Tanto la concentración de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa el número de
eritrocitos. Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de
hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de eritrocitos.
Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes anémicos) están
definidas por la concentración de la hemoglobina.
La determinación de la hemoglobina por métodos electrónicos, se obtiene por el método de la
cianometahemoglobina que determina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la
carboxihemoglobina, mediante un pequeño hemoglobinómetro incorporado al equipo.
El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para la
Estandarización de Hematología (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más
recomendado.
Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares satisfactorios y la
capacidad de cuantificar todas las formas de Hb de importancia clínica. Es el método de elección para efectuar
estudios científicos sobre anemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pública.
Los niveles de hemoglobina por debajo de los niveles normales pueden deberse a:
- Anemia (diversos tipos)
- Sangrado
- Deficiencia de eritropoyetina (por enfermedad renal)
- Intoxicación con plomo
- Desnutrición
- Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6
- Sobre hidratación
- Destrucción de los glóbulos rojos asociada con una reacción a transfusión
La hemoglobina alta es normalmente debido a un aumento del número o anormalidad de los glóbulos rojos. Las
causas incluyen:
Vivir en una gran altura
Fumar
Enfermedad cardíaca congénita
Cicatrices y engrosamiento del tejido pulmonar (fibrosis pulmonar)
Policitemia vera
La deshidratación, como de la diarrea severa o sudoración excesiva
La enfermedad renal
El uso de esteroides anabolizantes
FUNDAMENTO
La reacción se da así:
El reactivo de Drabkin contiene cianuro potásico y ferrocianuro potásico.
El ferrocianuro hace pasar el hierro de la hemoglobina del estado ferroso (Fe++) al férrico (Fe+++) para formar
metahemoglobina, la cual se combina con cianuro potásico y da un pigmento estable, la cianometahemoglobina.
La intensidad del color se mide mediante un fotómetro a una longitud de onda de 540 nm. La densidad óptica de
la solución es proporcional a la concentración de hemoglobina.
FUNDAMENTO DE ESPECTROFOTOMETRIA:
La base de la colorimetría y la espectrofotometría es que muchas sustancias tienen color propio, o pueden dar
lugar a productos finales coloreados en ciertas reacciones químicas. Hay una relación entre la intensidad de este
color y la concentración del producto final, o sea la concentración de uno o varios de los reactivos; de esta
manera, la intensidad del color puede utilizarse para medir la concentración. Para este fin se emplean los
espectrofotómetros, que son instrumentos para la medición del color (Mathew, 1977)
REACTIVOS:
Reactivo de Drabkin
MATERIAL:
Tubos de ensaye de 13 X 100 mm
Pipeta de Salí o micropipetas
Espectrofotómetro (VER ANEXO 1)
Celdas analíticas
Pipetas de 5 mL
Plumones sharpie
MATERIAL BIOLOGICO:
Sangre total venosa con EDTA
PROCEDIMIENTO:
11. Calcular la concentración de hemoglobina, utilizando la curva de calibración o multiplicando por una
constante que resulta de la calibración del método.
CALCULOS:
Se divide la absorbancia del problema entre la absorbancia del estándar, el resultado se multiplica por la
concentración del estándar.
Valores de referencia:
Estos varían según la edad, el sexo y la altura sobre el nivel del mar:
CAUSAS DE ERROR
Errores en la obtención de la sangre. La estasis prolongada causada por usar más de un minuto
el torniquete en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobina
en las muestras de sangre venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario cuando se ejerce una
presión excesiva en el sitio de punción y aumenta el flujo de los líquidos tisulares diluyendo la
muestra de sangre.
La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces o, de preferencia, usar
un mezclador mecánico.
Errores de pipeteo o de dilución.
Muestra de sangre con coagulo.
Sangre lipemia.
9
Recuento de leucocitos muy elevado (50.0 x10 /L).
Instrumento incorrectamente calibrado.
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:
CUESTIONARIO No. 3
1. ¿Qué es un espectrofotómetro?
3. Con tus propias palabras, explica como se realiza la lectura del haz de luz en el espectrofotómetro:
(laboratorio)
9. Menciona 3 causas de error que podemos tener al realizar esta prueba de manera manual:
10. Según tus características físicas, ¿cuales serian TUS valores de hemoglobina normales?
PRACTICA No. 4
OBJETIVO:
Realizar una formula roja mediante la medición de cada uno de los parámetros que la integran: recuento
de eritrocitos, medición de la hemoglobina, Hematócrito y cálculo de los valores absolutos de la concentración de
hemoglobina; para poder diagnosticar y clasificar una anemia.
INSTRUCCIONES:
Tomar una muestra de sangre y realizar CADA UNO DE LOS RECUENTOS que ya hemos realizado
(eritrocitos, Hematócrito y dosificación de hemoglobina) con el material requerido para cada prueba. Anotar y
hacer cálculos correspondientes para determinar y clasificar anemias. Y finalmente realizar el reporte
correspondiente a cada paciente.
El Volumen Corpuscular Medio (VCM o VGM) da idea DEL TAMAÑO promedio DE CADA ERITROCITO, se
calcula con la siguiente fórmula:
VGM= Hto X 10
Eritroc.
HCM= Hb (g /dL) x 10
Eritroc.
CALCULOS:
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:
CUESTIONARIO 4
1. ¿Qué es la hemoglobina?
3. ¿Qué es la anemia?
5. ¿Para qué son útiles los valores absolutos que se obtienen a partir de la concentración de la
hemoglobina, del número de eritrocitos y del hematocrito?
6. Generalmente en las anemias microcíticas hipocrómicas, ¿Cómo se resultan los índices absolutos?
7. Menciona al menos tres pruebas de laboratorio que se deban realizar adicionalmente a la formula roja
(biometría hemática), como auxiliares al diagnostico de anemia:
9. Menciona tres posibles tratamientos que se pueden emplear para combatir la anemia:
10. Mencione 3 tipos de anemia que se puedan manifestar en los seres humanos:
PRACTICA No. 5
La eritrosedimentación globular es una prueba que se usa ampliamente para estudiar la actividad de
diversas enfermedades. La velocidad de sedimentación de los glóbulos rojos se refiere al tiempo que tardan en
separarse del plasma. Se le mide en MILIMETROS POR HORA.
La velocidad de sedimentación es un examen hematológico que no está incluido en el desarrollo de un
hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta anormal en las
enfermedades funcionales, así como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
FUNDAMENTO:
La eritrosedimentación depende de la formación de “ROULEAUX”, de la concentración de fibrinógeno y
de la concentración de globulinas alfa y beta en el plasma. La concentración de las diversas proteínas
plasmáticas afecta la eritrosedimentación y en muchas enfermedades se altera la relación entre las proteínas, con
la consiguiente aceleración de la eritrosedimentación. Una disminución en el número de glóbulos rojos también la
acelera y en algunos laboratorios se corrige su resultado en los casos de anemia. Además de las elevaciones
producidas en procesos infecciosos e inflamatorios, se producen elevaciones fisiológicas en el embarazo y
durante la menstruación. La VSG disminuye en la anemia falciforme y en las 39fibrinógeno39 severas.
FENOMENO DE ROULEAUX:
El ROULEAUX o “formación de pilas de monedas”, es un fenómeno que consiste en que los glóbulos se
aglomeran en masas. Las causas de este fenómeno radican en el plasma o en el suero y no están influidas por la
temperatura. La administración de algunos medicamentos puede producir este fenómeno. Otras veces se trata
de una causa intrínseca al paciente, que tiene un desequilibrio de sus proteínas (aumento del 39fibrinógeno o
aparición de proteínas anormales).
Observado en el microscopio, el fenómeno de Rouleaux es característico: se ven los glóbulos reunidos
en filas, apilados por sus caras planas, varias filas se entrecruzan en diversos planos, produciendo un grumo el
cual puede ser visto de forma macroscópica (a simple vista)
INTERPRETACION CLINICA:
La VSG es un buen índice de la presencia de procesos infecciosos activos como la tuberculosis o la
endocarditis bacteriana subaguda, el lupus eritematoso diseminado, las carditis reumáticas, ciertas neoplasias,
embarazo ectópico, etc. Sirve igualmente para controlar la actividad evolutiva de las infecciones mencionadas.
MATERIAL:
Tubos de Wintrobe
Pipetas Pasteur
Gradilla de wintrobe
Reloj cronometro
Papel secante
Guantes
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres: 0 – 9 mm/hr
Mujeres y niños: 0 – 15 mm/hr
CAUSAS DE ERROR:
1. Uso de anticoagulante incorrecto (heparina aumenta el resultado).
2. Exceso de anticoagulante (aumenta)
3. Posición inadecuada del tubo (que este ladeado el tubo)
4. Aglomeración anormal de los glóbulos rojos en “pilas de monedas”.
CUENTA DE RETICULOCITOS
FUNDAMENTO:
La investigación de reticulocitos es una de las pruebas más útiles en la investigación de la causa de la
anemia, pues nos dá idea del estado de la producción de glóbulos rojos por la médula ósea.
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir con el azul de cresil brillante.
Este colorante en combinación con una misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la
temperatura (baño maría) se produce la coloración de estos eritrocitos jóvenes visualizándose en los frotices
sanguíneos por microscopía
REACTIVOS:
Azul brillante de cresilo
MATERIAL:
Tubos de ensaye 13 X 75 mm
Papel parafilm
Plumón sharpie
Portaobjetos
Contador celular (pianito)
Aceite de inmersión
Microscopio
Reloj cronometro
PROCEDIMIENTO:
1. En un tubo de ensaye chico se depositan tres gotas de sangre con EDTA
2. Se agregan 3 gotas de reactivo
3. Mezclar el tubo y tapar con parafilm
o
4. Incubar a 37 C por 10 minutos.
5. Hacer frotis en un portaobjetos
6. Leer en el microscopio con el objetivo de inmersión (100X)
7. Se leerán varios campos, contando 300 eritrocitos en total, incluyendo a los reticulocitos
8. Se hará un cálculo de regla de tres simple para obtener el valor porcentual de los reticulocitos
encontrados.
CUARTO SEMESTRE 40 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
VALORES DE REFERENCIA:
Recién nacidos: 3 – 6 %
Adultos: 0.5 – 1.5 %
INTERPRETACION CLINICA:
Causas de aumento
El número de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las que existe un incremento de la
eritropoyesis, tales como en la hemólisis, como respuesta a sangrados o tras el inicio de un tratamiento
antianémico que ha resultado eficaz.
Causas de disminución
Como la producción de reticulocitos es necesaria para compensar las pérdidas fisiológicas de glóbulos rojos
maduros, una disminución de su número es la expresión de un estado arregenerativo o hiporregenerativo de la
serie roja. Esta circunstancia es típica de anemias aplásicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y
neoplásicas.
CALCULOS:
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:
CUESTIONARIO 5
ERITROSEDIMENTACION Y RECUENTO DE RETICULOCITOS
5. Explique cuáles son las unidades en las que se mide la eritrosedimentación globular y porque:
7. Mencione 2 causas de error que pueden alterar el resultado de la velocidad de sedimentación globular:
8. Se han mencionado varios sinónimos de la prueba que mide la sedimentación de la sangre, ¿Cuáles son
estos?
PRACTICA 6
FUNDAMENTO: En el método de Turk se utiliza un solución de acido acético al 2% que tiene como función lisar
los eritrocitos para evitar interferencias en el recuento.
MATERIAL UTILIZADO:
1. Pipeta de Thoma para LEUCOCITOS
2. Cámara de Neubauer
3. Microscopio
4. Contador celular
5. Boquilla
REACTIVO UTILIZADO:
Reactivo de Turk
El recuento de glóbulos blancos se realizara en las 4 CUADRICULAS GRANDES que están en las orillas,
en este dibujo están MARCADAS con la letra W (White)…. Y con el OBJETIVO DE 10X
3
LEUCOCITOS TOTALES/ mm = células contadas X 50
VALORES DE REFERENCIA:
3
5,000 – 10,000/mm
9
5.00 – 10.00 X10 /L
Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización anormal)
Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso)
Enfermedad del hígado o el bazo
Radioterapia o exposición a la radiación
Anemia
Enfermedades infecciosas
Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoidea o alergia)
Leucemia
Estrés emocional o físico severos
Daño tisular (como, por ejemplo, quemaduras), entre otros
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
CALCULOS:
CUESTIONARIO 6
RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES
1. ¿Qué es la leucopoyesis?
8. ¿Cuál es el efecto del reactivo de Turk, para permitir la observación de los glóbulos blancos con más
facilidad?
9. Dibuje un esquema que represente lo observado en el microscopio al hacer el conteo de los glóbulos
blancos y explique ampliamente el proceso para realizarlo.
PRACTICA 7
INTRODUCCION: El recuento diferencial de leucocitos es una parte rutinaria de la biométrica hemática que
puede ser útil en la valoración de una infección o inflamación, en la determinación de los defectos de intoxicación
posible por sustancias químicas o drogas, en el monitoreo de trastornos sanguíneos como la leucemia, y en los
efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia. El procedimiento consta de una toma de sangre, la
misma se disemina en un portaobjetos de vidrio y luego se tiñe. A continuación se determina el porcentaje de
cada tipo de leucocitos.
FUNDAMENTO: Los leucocitos son parte fundamental del tejido hemático y presentan las siguientes
características: son células que tienen un mayor diámetro que los eritrocitos, presentan un núcleo de forma
irregular, su citoplasma presenta algunas granulaciones las cuales son teñidos con diferentes colorantes, y la
cromatina del núcleo puede ser de diferentes densidades.
Pueden distinguirse 5 tipos de leucocitos maduros (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos y linfocitos)
basándose en general en las siguientes características:
Tamaño de la célula
Forma del núcleo
Contenido de gránulos
Consistencia de la cromatina nuclear
Coloración de los gránulos
Los leucocitos se desplazan por medio de movimientos amiboideos saliendo de los vasos sanguíneos y llegando
a los tejidos, por medio de la DIAPEDESIS. Estas células vagabundas son importantes en las reacciones de
defensa contra enfermedades y en general en infecciones, puesto que pueden fagocitar cuerpos extraños y
bacterias.
Tienen una importante función en las reacciones inmunológicas de nuestro organismo favoreciendo la producción
de anticuerpos.
MATERIAL:
Portaobjetos de vidrio
Palillos aplicadores de madera
Papel secante
Plumón sharpie
Contador celular
Cronometro
Aceite de inmersión
Alcohol metanol fijador
Eosina bufferizada
Policromo
PROCEDIMIENTO:
1. Homogenizar la muestra sanguínea y ANTES de 3 hrs. realizar un frotis
2. Empleando un aplicador de madera, depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un
portaobjetos totalmente limpio.
CUARTO SEMESTRE 49 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
3. Con el borde de otro portaobjetos a 20 o 30 grados, tocar la gota, esperar a que la sangre se distribuya
por capilaridad en el extremo del portaobjetos extensor y deslizarlo suavemente sobre el otro
portaobjetos, en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del
primer portaobjetos (NOTA: revisar clase de leucopoyesis para recordar la forma de hacer el frotis)
4. Dejar secar el frotis.
5. Teñir el frotis con la tinción correspondiente de la siguiente manera:
a. fijar la extensión en metanol absoluto aproximadamente 30 segundos.
b. teñir con la solución de Eosina bufferizada por 20 segundos.
c. enjuagar con agua de la llave.
d. introducir la extensión en solución de azul de policromo durante 30 segundos.
e. enjuagar con agua de la llave, dejar escurrir el agua y dejar secar al aire libre.
6. colocar una gota de aceite de inmersión y leer al microscopio con el objetivo de 100x.
7. se hará un recuento de 100 células blancas en total, DIFERENCIANDO cada una de ellas según sus
características antes citadas. (VER CLASE LEUCOPOYESIS)
8. evaluar la morfología de eritrocitos, leucocitos y plaquetas y reportar anormalidades.
VALORES DE REFERENCIA:
Cellular Relativo (%)
Neutrófilos en Banda 0-5
Neutrófilos segmentados 45 - 65
Linfocitos 30 - 40
Monocitos 3-8
Eosinófilos 1-5
Basófilos 0-1
VARIACIONES FISIOLÓGICAS
La fórmula diferencial varía con la edad.
El niño en términos generales, posee más linfocitos que el adulto normal y alrededor de los 10 años comienza a
estabilizarse en los valores normales del adulto.
9
El anciano presenta un recuento de leucocitos entre 3.1 - 8.5 x 10 /L y el recuento diferencial tiene una media de
65 +/- 10% de polimorfo nucleares neutrófilos y linfocitos de 30 +/- 9%.
9
En el embarazo y sobre todo en el último trimestre, la leucocitosis puede llegar a 15 x 10 /L, con un aumento de
polimorfo nucleares neutrófilos y bandas neutrófilos.
REPORTE DE LABORATORIO
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
RECUENTO TOTAL
LINFOCITOS
MONOCITOS
NEUTROFILOS SEGMENTADOS
NEUTROFILOS EN BANDA
EOSINOFILOS
BASOFILOS
OTROS
COMENTARIO:
CUESTIONARIO 7
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
2. ¿Qué características celulares se deben observar para diferenciar a los leucocitos y poder clasificarles?
3. Además de evaluar la serie blanca, ¿Qué otras cosas deben ser evaluados al observar una extensión
sanguínea?
4. ¿Qué características de calidad, debe tener la extensión sanguínea para realizar la lectura diferencial?
9. Elabore un esquema de un campo visual del microscopio, e indique las células observadas
ANEXO 1
Espectrofotómetro
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud
de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones.
También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir
la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra
ESPECTROFOTOMETRIA:
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de
onda. Cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. Comparando la longitud
de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra versus soluciones estándar, es posible
determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra (solución incógnita).
Las ventajas de la espectrofotometría sobre otros métodos analíticos de laboratorio son varias: es rápida, precisa,
versátil, fácil de usar y eficiente en costo. Los espectrofotómetros se han mejorado en precisión y versatilidad en
los últimos años con los avances de tecnología, y hoy se consideran indispensables en un laboratorio de química
analítica.
Un espectrómetro típico posee cuatro componentes básicos: una fuente de radiación que tiene intensidad
constante en el rango de longitud de onda que cubre (usualmente es lámpara de tungsteno para luz visible, y
deuterio para ultravioleta), un compartimiento para la muestra, un monocromador que separa la banda de longitud
de onda deseada del resto del espectro y la dispersa al compartimiento de la muestra, y un foto detector, que
mide cuantitativamente la radiación que pasa por la muestra.
En general, los espectrómetros miden en % de transmitancia (T) y absorbancia (A). El por ciento de transmitancia
se refiere a la cantidad de radiación que pasa a través de la muestra y alcanza el detector. Una solución límpida,
no absorbente, mostrara una lectura de 100% de transmitancia en un espectrofotómetro calibrado. Las unidades
de absorbancia van de 0 a 2. Las medidas de absorbancia son frecuentemente usadas en química analítica, ya
que la absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y la concentración de la sustancia en ésta.
El espectrofotómetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática (de una longitud de onda
particular) a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. El
espectrofotómetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850
nm). El largo de onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda
escogido. Luego la luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra
y llega a un tubo fotográfico, donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%)
de transmitancia
ANEXO 2
VALORES NORMALES EN LA BIOMETRIA HEMATICA
9
Leucocitos 5.0 – 10.0 10 /L
12
Eritrocitos 3.5 – 5.7 10 /L
9
Plaquetas 150 – 450 10 /L
Eosinófilos 0 – 0.7 %
Bandas 0 – 0.2 %
BIBLIOGRAFIA:
1. Garza D and Becan-McBride K. Phlebotomy Handbook, 2nd Ed. Norwalk, Connecticut: Appleton and Lange:
1989.
2. National Committee for Clinical Laboratory Standards; Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Venipuncture, 3rd Ed. Document H3-A3. Vol. 11 No. 10, 1991.
3. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Skin Puncture. Document H4-A3. Vol. 11 No. 11, 1991.
4. Phelan, S. Phlebotomy Techniques: A Laboratory Workbook. Chicago, Ill.: American Society of Clinical
Pathologists: 1993.
5. University of Iowa Hospital and Clinics, Pediatric Phlebotomy Training Manual. 1994.
6. University of Iowa Hospital and Clinics, Phlebotomy Training Manual. 1994.
7. Mejoría Continua de la Calidad. Guía para los laboratorios clínicos de América Latina. Editores: M.L.Castillo
de Sánchez y M.E.Fonseca Yerena en colaboración con COLABIOCLI. Editorial Médica Panamericana.
8. Virtual Phlebotomy: A Computer Aided Course of Instruction.
http://www.parsons.umaryland.edu/~vguy/phleb.htm
9. California Phlebotomy Training. http://www.scpt.com/PhlebotomyViews.html
10. Virtual Hospital: CLIA. Pre-Analytical Factors Affecting Laboratory Results.
http://www.vh.org/Providers/CME/CLIA/Phlebotomy/Phlebotomy.html
11. Center for Phlebotomy Education. http://www.phlebotomy.com
12. Medstat Utah. http://www.medstat.med.utah.edu/webpath/tutorial/PHLEB/PHLEB.html
Autor:
Eric Caballero J.
ecaballe[arroba]cwpanama.net
http://www.ventajas.com/foro/view.cgi?header_id=235
http://reina.4life.biz/enfermedades.aspx?eId=107
Mathew, L. (1977). Metodos de laboratorio. Mexico, D.F.: Nueva Editorial Interamericana, S.A. de C. V.
BORBOLLA Escoboza, José Rafael; Principios de hematología. Primera edición, México, D.F. MASSON DOYMA
MEXICO, S.A.; 2005