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Lo importante es identificar los grupos -NH y -COOH terminales y si hay alguno en los
aminoácidos no terminales, en este caso tenemos:
Ahora debemos identificar los valores de pKa de cada uno de los grupos -NH2 y -
COOH, los cuales se encuentran en la siguiente tabla:
En la primer columna tenemos los valores de pKa que corresponden al grupo -
COOH unido al Cα, es decir, el -COOH terminal. En la segunda columna tenemos
el pKa que corresponde al grupo -NH2 unido al Cα, es decir el -NH2 terminal. Y la
tercer columna corresponde al grupo -NH2 o -COOH de la cadena lateral (según
corresponda).
En nuestro ejemplo tenemos que:
Entonces, una vez identificados todos los valores de pKa los ordenamos de menor
a mayor:
2,18
4,25
9,69
10,53
Siempre tenemos que tener: pH, pKa, pH, pKa... de menor a mayor, es decir de
más ácido a más alcalino, donde tenemos a pH muy ácido todos los grupos
ionizables protonados y a medida que vamos a pH más alcalino se van a ir
desprotonando: se desprotona el grupo ionizable que tiene pKa menor que el pH),
ahora tomamos pH= 7,00 y tenemos:
En este caso la carga neta de la molécula es 0, es decir que estamos en un valor
cercano al valor de pI. El pH se encuentra entre pKa= 4,25 y pKa=9,69. Entonces
en nuestra fórmula: pI=(pKa1+pKa2)/2 ya sabemos los dos valores de pKa que
debemos reemplazar para calcular pI.