UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN DE AREQUIPA

FACULTAD DE AGRONOMÍA

FITOPATOLOGIA GENERAL

INFORME:

METODOS Y TECNICAS DE DIAGNOSIS

INTEGRANTE:

 Paredes Cori Michael Jose

AREQUIPA -2016
 TRABAJO DE INVESTIGACIÓN

1. TÍTULO.
METODOS Y TECNICAS DE DIAGNOSIS
2. INTEGRANTES.
 Paredes Cori Michael Jose

3. INTRODUCCION:
Las enfermedades de las plantas tienen una notable importancia en la Agricultura moderna,
porque causan pérdidas totales, por lo general reducen, en forma crónica, el rendimiento de la
mayoría de los cultivos y obligan a tomar medidas de lucha que aumentan los costos de
producción; además afectan la calidad y durabilidad de los productos cosechados. Es por eso que
la fitopatología va de mano con la ciencia y de esta manera se presentan tanto los métodos clásicos
y modernos en la detección de enfermedades, el diagnostico incluye la identificación del
problema y también su importancia.

OBJETIVO GENERAL:
 Conocer diferente tipo de métodos de diagnosis.
 Conocer que método se utiliza dependiendo del patógeno.
 Procedimiento de los métodos de aplicación.
4. MARCO TEÓRICO:
4.1. El diagnostico incluye la identificación del problema, al alcance del problema, la
importancia y magnitud del problema, el método de control a emplear, y la demanda de
investigación y conto – beneficio. ( Vázquez - 2003)

4.2. Para el diagnostico de hongos se necesita el estudio de estructuras reproductivas, como

esporas o conidios, y cuando se tratan de bacterias el proceso de investigación debe
complementarse con pruebas bioquímicas ( Flores – 1997)
5. MATERIALES Y METODOS.
 Laboratorio Aséptico.
 Mecheros.
 Pinzas Estiletes.
 Vaso Precipitado.
 Legia.
 Identificadores (Lactofenol, Cottonblue)
 Placas Petri.
 Cubreobjetos.
 Microscopio.
 Bandejas.
 Caja al vacío.
 PDA.
 Plantas con presencia de enfermedades patógenas.
 Tierra.

 La esterilización de los instrumentos es de mucha importancia en la manipulación

de patógeno, para no contaminar las muestras, los tipos de esterilisacion son los
siguientes.
 Calor Seco. (rojo vivo)
Pinzas y Estiletes.
 Flameo
 Calor húmedo. (vapor)
Ceramico, recipientes de vidrio.

METODOS.
A. Método usando Identificadores.
Se utilizan dos reactivos en este método.
 Lactofenol
(10 gr. De cristales de fenol, 20 ml. De Ácido Láctico, 10 ml. De gr. glicerina, 100 ml
de Agua Destilada.
 Utilizado para la identificación de bacterias y hongos.
 Cottonblue
0.1 gr de cotton blue para pigmentar.
  Utilizado para la identificación de patógenos incoloros. ( pigmentación)

I. Debe de colocarse sobre el portaobjetos 1 gota del identificador a utilizar, luego con la ayuda
de un estilete hacer un raspado en la parte de la hoja donde se encuentra el signo de la
enfermedad (lugar necrosado), cubrir con un cubreobjetos, y llevarlo al microscopio para su
observación.

B. Método de la cinta.
i. Consiste en la utilización de cinta adhesiva, la cual se coloca sobre la parte donde se encuentra
el signo de la plata, (parte necrosada) tiene que haver adhesion de la cinta sobre la plata para
luego retirarla, después se vierte una gota del identificador( Lactofenol, Cottonblue) sobre
una placa portaobjetos, se coloca la cinta encima y se cubre respectivamente con un
cubreobjetos, se lleva al microscopio para su evaluación.
Si es abiótico se tienen que preparar cultivos.
Se saca una parte afectada de la hoja.
Se corta en trozos dependiendo del tamaño de la muestra (2 a 4) se sumerge en 4 diferentes soluciones.
1. Agua destilada autoclabada.
2. Legía al 1%.
3. Agua destilada
4. Agua destilada autoclabada.

Luego se coloca sobre papel secante autoclabado para la eliminación de humedad.

Se colocan las muestras dentro de la placa que contiene el PDA, y se lleva a la cámara de cultivo.

ANALISIS DE PATOGENOS EN EL SUELO.

 5 gr. de suelo
 50 ml de agua destilada autoclabada

- Se mezcla los 5 gr. de tierra en los 50 ml de agua destilada autoclabada para su disolución,
luego se extre un ml de la solución y se coloca entre de una placa con PDA, en diferentes
lugares, y se lleva a la cámara de cultivo.
METODO NEMATOLOGICO. (Método de la bandeja)

- Taper.
- Papel Higiénico.
- Tierra.
- Agua destilada.
- Cilindo el cual debe tener una malla porosa a un extremo.

Se disuelven 5 gr. de tierra en agua destilada.

En el cilindro se coloca papel higiénico en zig – zag luego se introduce en el taper con la disolución
de tierra y agua, esperar a que se asiente el agua (24 horas aprox.) luego retirar el cicindro, los
patógenos u hongos presentes en el suelo quedaran pendidos en la malla dl cilindro.

6. CONCLUSIONES.
o Se dio a conocer los diferentes métodos para al identificación de patógenos.
o Se logró aprender los pasos y pautas por cada método.
o Dependiendo del patógeno que se desea encontrar varia el método.

7. BIBLIOGRAFIA.

 Duveiller, R.P. Singh, M. Henry e I. García A. 2005. Guía práctica para la identificación
de algunas enfermedades de trigo y cebada. Segunda edición. México, D.F.:
 Narayanasamy, P., 2001. Plant pathogen detection and disease diagnosis. Marcel.
 C Zapata 1994. Guía para el diagnóstico y control de enfermedades en cultivos de
importancia económica.