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MANUAL DE PRCTICAS
FITOPATOLOGA
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CONTENIDO
Practica 1. Preparacin de medios de cultivo..1
Practica 2. Aislamiento de hongos, siembras y condiciones optimas para su desarrollo.4
Practica 3. Tipos de inoculacin de patgenos en plantas sanas9
Practica 4: Montaje de hongos en muestras permanentes.13
Practica 5: Aislamiento de hongos y bacterias existentes en muestras de suelo16
Practica 6: Cenicillas..18
Practica 7: Pudricin caf de frutales con hueso..22
Practica 8. Hongos: Mildus...25
Practica 9: Carbones.29
Practica 10: Royas.32
Practica 11: Tizones y manchas foliares bacterianas..35
Practica 12: Marchitez Bacteriana...39
Practica 13. Manchado del follaje y de los frutos.43
Practica 14. Bacterias que producen prodicin blanda48
Practica 15. Aislamiento de nematodos del suelo52
Practica 16. Aislamiento de nematodos de plantas..56
Practica 17. Enfermedades causadas por virus60
Practica 18. Seleccin de bacterias antagnicas para el control de enfermedades en
plantas..64
Practica 19. Daos en granos y semillas mal almacenados...69
Practica 20. Aflatoxinas en granos y semillas74
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Procedimient
o:
Se prepara el autoclave, llenndose hasta la parrilla de agua destilada y se prende en
medio, mientras que calienta, se pesan en la balanza analtica el medio PDA el que se
requiera (39g por 1 L de agua), se coloca agua destilada en un matraz y se vaca el
PDA pesado, y se pone a calentar en el termoplato hasta que de una coloracin oro
oscuro y se desbaraten los grumos, mientras sucede eso se preparan los tapones para
el matraz utilizando algodn, se tapa y se sella con cinta masking tape.
Con esta preparacin se coloca el medio PDA ya bien disuelto en cajas petri hasta o
y se llenan tubos de ensayo si se requiere hasta la marca de y luego se sellan
con cinta.
Posteriormente, el contenido del matraz, el de los tubos previamente sellados y
envueltos en papel sanilta lo mismo para las cajas petri, se colocan en el autoclave
para esterilizar (a 15 lb por 15 min). Al sacar los tubos de la olla se dejan cuajar el
medio inclinado para dejar mayor superficie donde se desarrolle el hongo.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy, J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Resultados
:
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Conclusiones:
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Papel secante
2 mecheros Fisher.
Cloro
2 cajas petri.
Etiquetas
Asa de platino.
Agua destilada
Fibra de vidrio.
Portaobjetos y cubreobjetos
Cutex
Procedimiento
hongo:
para
aislar
el
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Por el mtodo de raspado. Se coloca un portaobjetos una gota de rojo colorante; luego
la mancha del material vegetativo se raspa con un bistur o una navaja y una vez que
se monto la muestra en el portaobjetos con una gota de rojo colorante se procede a
observarla en el microscopio.
Procedimiento para siembra en PDA, todo bajo campana de flujo
laminar:
Se debe tener 3 cajas petri; en la primera colocar agua destilada, en la segunda cloro al
5% y en la tercera agua destilada.
Despus de haber aislado el material vegetativo infectado se coloca dos minutos en la
caja con cloro al 5%, con la finalidad de limpiar la muestra de hongos contaminados y
se pasa por ultimo a la caja con agua destilada para enjuagar y quitar el exceso de
cloro.
Para esto se tiene los dos mecheros prendidos, se coloca papel secante sobre la mesa
en que est trabajando y se humedece la superficie de esta con cloro.
Luego se esteriliza el asa de platino, se abre la caja petri y se coloca la muestra en ella,
se acerca al mechero y se sella y a los pocos das se ver el desarrollo del hongo.
Otro mtodo es utilizando papel filtro, este papel se humedece con agua y se coloca en
la caja petri, despus se acomoda el hongo dentro de ella y se tapa. El hongo se
desarrolla as en la humedad.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Herrera T. y M. Ulloa. 1990. El reino de los hongos. Fondo de Cultura Econmica y
UNAM, Mxico, 552 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos Fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi-prensa. Madrid,
Mxico. 671 pp.
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Resultados:
Procedimiento 1 (cinta scotch)
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Procedimiento 3 (raspado)
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Conclusiones:
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Papel filtro
Algodn
Vaso de precipitado de 500 ml
Jeringa desechable
Planta sana nacida en suelo
Procedimiento
1:
Se tienen 200 ml de agua en un vaso de precipitado, los cuales se colocan en la
licuadora.
Se macera el PDA con el hongo en desarrollo en la licuadora.
Se agita el contenido durante 15 segundos y al extracto resultante se le coloca en el
vaso de precipitado.
Se toma con una jeringa una muestra de 4cc y se deposita en la base del tallo,
abrindose el tejido con la aguja y ah se inocula. O bien, solo deposite el contenido
(4cc) en la base del tallo de la planta.
9
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Procedimiento
2:
Se saca un block de 1cm y se deposita adherido a la planta a un lado del tallo, este
block ser del de los hongos en el medio PDA, esto reporta la ventaja de que si hongo
llega al suelo y tiene medio para nutrirse, despus se tapa con suelo.
Procedimiento
3:
Del licuado se empapan 5 ml en un algodn y se coloca cerca de la planta, despus se
tapa con papel filtro.
Procedimiento
4:
Se utiliza un atomizador al cual se le coloca el hongo macerado del vaso de precipitado
y se asperja la parte foliar, o bien, se pueden empapar trozos de algodn o de papel
filtro y se adhieren a la superficie foliar.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos Fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi-prensa. Madrid,
Mexico. 671 pp.
Resultados
:
Procedimiento 1:
10
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Procedimiento 2:
Procedimiento 3:
11
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Procedimiento 4:
Conclusiones:
12
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Formol
Cutex
13
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Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy y J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Resultados:
14
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Conclusiones:
15
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16
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Conclusiones:
17
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Practica 6: Cenicillas
Objetivo
:
Describir y dibujar los signos y los sntomas causados por las cenicillas.
Demostrar la importancia de los apndices en los cleistotecios para la identificacin de
los gneros.
Introduccin
:
Esta enfermedad es causada por hongos ascomicentos del orden Erysiphales los
cuales son parsitos estrictos y se manifiesta por el desarrollo de una cubierta
pulverulenta de color blanco grisaseo en las partes areas de las cuales plantas
infectadas.
Las cenicillas son de distribucin mundial, habindose observado por primera vez en el
ao 1894 en algunas plantas de la familia cucurbitceas. En la actualidad han sido
reportadas ms de 7100 especies de angiospermas hospedantes encontrndose en
frutales, hortalizas, gramneas y ornamentales. Este grupo de hongos produce, en la
fase sexual de su ciclo de vida, ascocarpos del tipo cleistotecio, los cuales pueden
contener en su interior, una o varas ascas, las que a su vez contienen de dos a ocho
ascas.
Por otra parte, el estado asexual o imperfecto puede estar representado por el gnero
Oidium, Oidiopsis y Ovulariopsis. En los cleistotecios es importante observar la
morfologa de los apndices que desarrolla, lo que permite identificar los gneros.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Porta y cubreobjetos
Navaja de un solo filo
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
Hojas de diversos cultivos daados por la cenicilla
18
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Procedimient
o:
Observar y describir los sntomas y signos en las diferentes plantas indicando las
siguientes caractersticas: aspecto de las lesiones, coloracin, tamao, forma y
distribucin.
Examinar y dibujar bajo el microscopio estereoscopio las lesiones y los cuerpos de
fructificacin del hongo.
Hacer preparaciones de un raspado de la lesin, observar al microscopio y dibujar las
estructuras fructferas.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi-prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados
:
19
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Conclusiones:
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Microsphaera sp.
Podosphaera sp.
Erysiphe sp.
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22
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Procedimient
o:
Describir y dibujar los signos y sntomas producidos por Monilinia. Aislar el hongo
causante de la enfermedad en cultivo puro utilizando placas con medio PDA. Hacer una
preparacin de las estructuras fngicas y observar al microscopio. Reproducir los
sntomas de la pudricin caf inoculando frutos sanos con el cultivo puro.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi -prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados
:
23
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Conclusiones:
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25
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Procedimiento:
Observar y describir los diferentes tipos de signos y sntomas presentes en el follaje de
algunos cultivos afectadas con mildus y hacer dibujos.
Hacer una preparacin a partir de un raspado de la lesin con una gota de lactofenol o
agua, entre porta y cubreobjetos, para observar a microscopio.
Dibujar los esporangioforos observados y compararlos con los esquemas de referencia.
Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicion, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicion. Academic Press. 636 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autonoma de Chapingo. 345
pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi -prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados:
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Conclusiones:
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Bremia sp.
Peronospora sp.
Plasmopara sp.
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Practica 9: Carbones
Objetivo
:
Describir y dibujar los sntomas carbones que se presentan en algunos cultivos de
Mxico.
Identificar la morfologa macroscpica de los telios y microscopia de las teliosporas.
Introduccin
:
Los carbones son enfermedades causadas por basidiomicetos del orden ustilafinales.
En estas enfermedades hay desplazamiento del contenido del grano por una masa de
esporas pulverulentas de color negro que se parecen al holln denominadas soros y
que disminuyen en forma drstica los rendimientos.
Los hongos causantes de los carbones atacan las semillas de las gramneas y se
desarrollan en ellas destruyndolas por completo. Sin embargo varios carbones atacan
a las hojas, tallos o verticilos florales y algunos infectan semillas o plntulas antes de
que emerjan del suelo y se desarrollan en el interior hasta la formacin de las
inflorescencias; otras solo producen infecciones locales sobre hojas, tallos y otros
rganos. Hoy formacin de soros que se mantienen unidos temporalmente por una
membrana delgada y rara vez matan a su hospedero, en algunos casos, l as plantas
pueden atrofiarse notablemente.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Bistur
Cajas de petri
Cubre y portaobjetos
Navaja de un solo filo
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
Plantas enfermas con signos y sntomas de carbn.
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Procedimiento:
Describir y dibujar las muestras de carbones.
Hacer preparaciones a partir de un raspado de la lesin para observar las teliosporas
en el microscopio.
Dibujar los diversos tipos de teliosporas observados.
Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy y J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Resultados:
30
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Conclusiones:
31
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32
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Procedimiento:
Describir y dibujar los signos y sntomas del material infectado.
Hacer preparaciones a partir de un raspado de la lesin entre porta y cubreobjetos con
lactofenol, agua o KOH al 3%.
Dibujar los diversos estructuras fngicas.
Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Resultados:
33
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Conclusiones:
34
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35
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Morteros
Pinzas
Tubos de vidrio
Vasos de precipitado
Microscopio
Estereoscopio
Medio de cultivo B de King
Hojas enfermas con sntomas tpicos de tizn bacteriano
Plantas de tabaco sanas.
Procedimient
o:
Examinar las hojas de las plantas enfermas. Describir y anotar los tipos de sntomas y
signos.
Lavar con agua corriente las hojas daadas y posteriormente desinfectar con
hipoclorito de sodio o agua jabonosa, para eliminar ambos, enjuagar con agua
destilada estril.
Hacer cortes de los tejidos enfermos, con navaja o tijeras, tomando tejido sano y
enfermo, aprox. De 0.5 cm de dimetro.
En un mortero estril, moler los tejidos infectados de las hojas, adicionando de 3 a 5
gotas de agua destilada estril.
Hacer aislamientos por estra cruzada en placas con medio de cultivo B de King.
Escoger aquellas bacterias que produzcan fluorescencia o una pigmentacin amarilla y
crecimiento lento, seleccionar y purificar.
Con las colonias que fueron positivas a la fluorescencia y pigmentacin amarilla,
preparar una suspensin de 3 x 10 8 clulas por mililitro e infiltrar por separado hojas de
tabaco en la nervadura central, dejando una zona intervenal totalmente inoculada.
Tanto las colonias fluorescentes como las de pigmentacin amarilla sern asperjadas
con una suspensin de 3 x 108 clulas por mililitro en pantas de frijol sanas.
Observar la reaccin de hipersensibilidad en tabaco en un tiempo de 24 horas a 48
horas y en frijol. Observar los sntomas tpicos de tizn, segn sea el caso.
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Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy y J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Resultados:
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Conclusiones:
38
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Procedimiento:
Hacer una descripcin de los sntomas y signos presentes en plantas de tomate y/o de
papa con sntomas de marchitez bacteriana.
Lavar con agua jabonosa y agua corriente las plntulas de tomates.
Cortar la panta en pequeos trozos de aprox. 0.5 cm y desinfectar con hipoclorito de
sodio al 2%.
Moler los trozos de tejido ya tratado hasta obtener una masa bacteriana.
Aislar el agente etiolgico responsable de la marchitez bacteriana por estria cruzada a
partir de la masa bacteriana.
Seleccionar las colonias amarillo claro y de crecimiento lento
Aplicar la tincin de Gram y de Rye a las colonias seleccionadas.
Describir la morfologa macroscpica y microscpica que hayan dado positiva ambas
pruebas.
Inocular mediante la tcnica del palillo, mesa bacteriana, en la axila de las hojas.
Observar las plantas peridicamente durante 20 das.
Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
40
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Resultados:
41
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Conclusiones:
42
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Resultados:
45
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Conclusiones:
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Cylindrosporium sp.
Pestalotia sp.
Colletotrichum
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Vasos de precipitados
Micro y estereoscopio
Agua destilada estril
Alcohol
Tubrculos de papa blanca
Cepa de Erwinia carotovora
Procedimiento:
Examinar las muestras de tubrculos de papa y describir los tipos de sntomas y
signos.
Hacer cortes de tejidos enfermos y sanos con navaja o tijeras tomando aprox. 0.5 cm
de dimetro. Colocar los cortes de tejido en tubos de caldo nutritivo o agua destilada
estril y/o forma directa a partir de la lesin/
Hacer aislamientos por estra cruzada, tomando una asada a partir de los tubrculos
con agua destilada estril y/o directa e incubar a temperatura ambiente.
Describir las caractersticas tanto macroscpicas como microscpicas de las colonias
desarrolladas, poniendo nfasis en las siguientes caractersticas.
1. Observar un cultivo de 24 hr. Bajo el microscopio estereoscopio.
2. Hacer incidir la luz reflejada mediante un espejo cncavo, po la parte baja de la
caja.
3. Reconocer las colonias de Erwinia carotovora por la presencia de reticulaciones.
Para demostrar la produccin de enzimas pectinoliticas, cortar rodajas de papa de un
grosor 0.5 cm y colocarlas en cajas de petri conteniendo un papel hmedo.
Hacer una incisin que pase por el centro de la rodaja teniendo cuidado de no llegar a
los extremos, la profundidad de esta incisin no deber ser mayor de 3 milmetros.
Inocular por medio de una asa bacteriolgica masa bacteriana a lo largo de incisin, a
partir del cultivo puro de la cepa que se aisl.
Incubar a 28 grados C durante 48-72 hr.
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Conclusiones:
51
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Tubo de goma
Agua
Abrazadera
Tela
Soporte universal
Papel filtro
Ligas
Cajas petri
Tamices (20, 60, 200 mallas)
Procedimient
o:
Utilizando una muestra fresca del suelo aproximadamente de 100 a 300 cc. Los
nematodos pueden aislarse mediante el mtodo del embudo de Baermann o mediante
tamizado.
Mtodo
1:
Baermann
Embudo
de
Mtodo
tamizado
2:
Por
Se basa en que una muestra pequea de suelo (300cc) se mezcla con un volumen
mucho mayor de agua (2Lts), los nematodos flotan en el agua y pueden ser colectados
en tamices con poros de ciertos tamaos.
53
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Conclusiones:
55
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56
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Ligas Cajas
petri
Estereoscopio
Procedimient
o:
Sin tomar en cuenta el rgano de la planta que contenga a los nematodos, se cortan
en piezas pequeas ya sea con la mano o utilizando una mezcladora durante unos
segundos y se vierte entonces en el embudo de Baermann segn el mtodo. Los
nematodos salen de los tejidos y nadan en el aguan del tubo a partir del cual se
colectan en caja petri.
Mtodo de Embudo de Baermann
Este consiste en un embudo de vidrio bastante largo (de 12 a 15 cm de dimetro) al
cual se encuentra unido un tubo de goma, con una abrazadera colocada sobre el tubo.
El embudo se coloca sobre el soporte y se llena con agua. La muestra de suelo se
coloca en el embudo sobre un papel poroso y resistente a la humedad (papel filtro), o
en un vaso de precipitados sobre el cual se ata un trozo de tela con una liga. El vaso de
precipitados se invierte entonces el embudo con el trozo de tela y todo el suelo que
este bajo el agua se deja as durante todo el transcurso de la noche o por varias horas.
Los nematodos vivos se mueven activamente y migran a travs de la tela o el papel
poroso en el agua y se sumergen hasta el fondo de tubo de goma inmedi atamente por
arriba del nivel donde se encuentra la abrazadera. Se colecta el primer volumen en una
caja petri para examinarla y se asla individualmente cada nematodo utilizando
estereoscopio.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy y J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
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Resultados:
58
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Conclusiones:
59
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Glicerol
Solucin amortiguadora de fosfatos pH 7.0
Hojas de plantas con sntomas virales
Plantas de Gomphrenea globosa y Nicotiana tabacum
Procedimiento:
Aplicar una cantidad pequea de carborundum en el haz de las hojas de las plantas de
tabaco.
Triturar en un mortero, hojas con sntomas virales y adicionar 5 ml de solucin
amortiguadora de fosfatos pH 7.0
Humedecer un hisopo en el triturado y frotar suavemente la superficie de las hijas
previamente preparadas con carborundum.
Inocular con solucin amortiguadora una hoja de tabaco, la cual servir como testigo.
Mantener en condiciones de invernadero las plantas inoculadas y hacer observaciones
peridicamente para registrar el tiempo transcurrido en que se ponen en evidencia los
primeros sntomas.
Etiquetar todas las hojas que hayan sido inoculadas.
Inclusiones virales
Desprender la cutcula y epidermis de la nervadura central o secundaria de las plantas
infectadas con virus.
Colocar las tiras de tejido en las microplacas serolgicas, que contiene formalina al 2%
y dejar actuar por 15 min.
Colocar las tiras de tejido en microplacas serolgicas conteniendo los colorantes,
floxina y rosa de bengala al 2% y los dejara actuar por 5 a 15 min.
Lavar dos veces los tejidos con agua destilada.
Colocar los tejidos entre porta y cubreobjetos con glicerol.
Describir y dibujar las inclusiones observadas en los tejidos.
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Referencias:
Agrios G.N. 1998. Fitopatologa, 3era Edicin, Mxico, 838 pp.
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Kiraly Z., Z. Klement, F. Solymosy y J. Voros. 1974. Methods in plant pathology.
Akademial Kiado. Budapest. 509 pp.
Romero C.S. 1968. Hongos fitopatogenos. Universidad Autnoma de Chapingo. 345
pp.
Resultados:
62
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Conclusiones:
63
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Pesar 10 gr de suelo de vivero sin que haya sido tratado con algn plaguicida.
Adicionar los 10 gr de suelo a 90 ml de agua destilada estril.
Preparar diluciones: 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7, 10-8 a partir de la suspensin
de suelo.
Pipetear 0.1 ml de diluciones 10 -6, 10-7, 10-8, sembrar por duplicado y depositar en
placas que contengan medio B King. Distribuir sobre la superficie del medio con una
varilla acodada estril e incubar a 28 grados C hasta la aparicin de colonias
bacterianas.
Sembrar en el centro de la placa PDA una porcin del hongo aislado obtenido mediante
un sacabocados de 0.3 cm de dimetro.
Seleccionar las colonias bacterianas que presenten diferencia en tamao, forma,
aspecto, color y consistencia.
Sembrar por la tcnica de punto a una distancia de 2.5 cm del hongo cada una de las
colonias bacterianas seleccionadas.
Incubar las placas sembradas con el hongo y las bacterias a 28 grados C, hasta que se
manifieste una zona de inhibicin por parte de las bacterias con capacidad antagnica.
Seleccionar y purificar las bacterias que hayan producido un halo de inhibicin.
Conservar las bacterias en solucin salina o agua destilada estril.
Cuantificar cada una de las cepas que mostro capacidad antagnica.
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Resultados:
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Conclusiones:
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Pruebas de germinacin
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Conclusiones:
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Aspergillus sp.
Fusarium sp.
Penicillium sp.
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Resultados:
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Conclusiones:
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