UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA

ESCUELA DE QUIMICA
FACULTAD DE CIENCIAS
INSTRUMENTAL ANALITICO

MTODOS CUANTITATIVOS DE ANLISIS

EMPLEADOS EAA Y EAA CON LLAMA

Caracas 2003
INTRODUCCION
El anlisis de los elementos mediante estas tcnicas requiere la disolucin
eficaz de las muestras. Las soluciones de las muestras deben ser lmpidas y no
deben contener slidos suspendidos ni sedimentados, de lo contrario es
necesario emplear procedimientos apropiados de filtracin. Debe optarse por el
empleo de la menor cantidad posible de cidos ya que su empleo masivo
conduce a cambios importantes en las propiedades fsicas de la muestra en
relacin a la de los patrones acuosos por lo que pueden presentarse
interferencias no espectrales asociadas al transporte de la muestra al
atomizador.
En las determinaciones por emisin atmica se recomienda el empleo de los
supresores de ionizacin adecuados en las concentraciones recomendadas
(1:1000 analito : supresor).
La determinacin de los elementos se realizan empleando tcnicas de
calibracin que incluyen curvas de calibracin externa, curvas de adicin de
estndar o de estndar interno.

Procedimiento analtico
El mtodo o procedimiento analtico es un conjunto de instrucciones
empleadas para obtener la informacin requerida. La cadena de
operaciones contempladas en el procedimiento que incluye: el muestreo,
el tratamiento de la muestra, la medida de la seal analtica, el
tratamiento de la seal analtica y finalmente la obtencin del resultado
analtico.
En el proceso de muestreo es vital ya que l define si el resultado
analtico es representativo. En el muestreo se encuentran diferentes
variables importantes a tener en cuenta ya que la representatividad de
una muestra tiene que ver con las variaciones de concentracin de una
sustancia dentro del volumen total de la muestra y la homogeneidad de
su concentracin dentro de la muestra tomada. Tambin es necesario
definir la cantidad o tamao de muestra para asegurar su
representatividad. De manera adicional, la estabilidad de la sustancia a
analizar puede variar con el tiempo y otras condiciones. Por ultimo, la
posible contaminacin de la muestra al momento del muestreo es algo
crtico, sobre todo si la determinacin a realizar es sobre elementos que
se encuentran a en cantidades minoritarias o a nivel de trazas.

El tratamiento de la muestra tiene como objetivo llevarla a un estado

adecuado para el anlisis. Esto puede requerir el empleo de
procedimientos de disolucin, vaporizacin, reduccin, separacin etc. y
operaciones de transvase, dilucin etc. en las cuales puede
contaminarse o perderse parte de la muestra o, a veces, introducir
sustancias que posteriormente pueden conducir a interferencias.
La seal analtica a obtener debe ser una expresin exacta de la
propiedad a medir del componente. Sin embargo, la seal obtenida
generalmente se divide en dos trminos:
y = F(c) + yo
F(c) Funcin conocida de la concentracin
yo Variable aleatoria asociada con las perturbaciones y errores
involucrados en el procedimiento analtico
El procedimiento analtico debe ser optimizado de manera de reducir la
expresin:
yo /F(c)

Errores aleatorios
Las condiciones ideales no pueden ser reproducidas en un anlisis real.
Cada etapa del procedimiento analtico genera perturbaciones que
actan como fuente de ruido. Los orgenes de este ruido pueden ser
diversos:
- El ruido puede ser consecuencia de imperfecciones del sistema de
medida o del modo en que se opera el sistema: diferentes interferencias,
errores de calibracin. Estos ruidos generan los errores sistemticos, los
cuales pueden detectarse y eliminarse.
-Puede relacionarse con el carcter discreto de la materia y energa, la
agitacin trmica y el principio de incertidumbre.
-Se relaciona con las condiciones en las que se opera el sistema, tales
como por ejemplo vibraciones y fluctuaciones de temperatura, humedad,
fuentes de tensin, fuentes de luz, etc...
Estos dos ltimas fuentes de ruido, denominadas generalmente fuentes
de ruido instrumental y ambiental, originan los errores aleatorios, los
cuales junto a los ruidos de tipo qumico siempre existirn en las medidas
analticas y por ende conducirn a la fluctuacin de la seal analtica y a
la imprecisin del resultado analtico. A veces conducen, de manera
adicional a errores en la exactitud de la determinacin.
La inevitable fluctuacin de la seal analtica debido a razones
instrumentales, conduce a la necesidad de realizar rplicas de lectura.
De manera adicional, para garantizar la representatividad de un resultado
es necesario realizar rplicas de la muestra, aplicndole a cada una de
ellas el mismo procedimiento analtico. El nmero de rplicas depende de
la homogeneidad de la muestra, pero comnmente se emplean tres
rplicas ya que de lo contrario, el tiempo de anlisis se eleva sin
aumentar de manera significativa la exactitud y representatividad del
resultado.
El tratamiento de los datos analticos, los errores aleatorios y los
resultados analticos es un paso importante en la obtencin del resultado
analtico. Pruebas de descarte de datos y resultados, determinaciones de
valores medios y la magnitud de los errores aleatorios propagados
durante el procedimiento analtico son, entre otros clculos, parte del
procedimiento analtico. Finalmente, se requiere en general, la aplicacin
de pruebas estadsticas para comparar los resultados obtenidos,
determinar el intervalo de confianza del resultado, etc...

Curvas de calibracin externa

En esta tcnica de calibracin se preparan diferentes soluciones patrones que
contengan concentraciones exactamente conocidas del elemento a determinar.
La curva de calibracin es aquella que resulta cuando se grafica la seal de
absorcin o intensidad de emisin obtenida para cada solucin versus la
concentracin de dichas soluciones patrn. La seal de la muestra debe ser
corregida con la correspondiente seal obtenida por el blanco. En condiciones
ideales, el blanco contiene todos los componentes de la muestra original
excepto el analito.
La representacin grafica de los datos permitir obtener, en general, una
relacin lineal entre la seal y la concentracin dentro del intervalo dado de
concentracin. Lo ms aconsejable es emplear zonas lineales dentro de las
curvas de calibracin ya que el error dentro de ellas es determinable de una
manera ms eficaz y directa.
La ecuacin de la curva de calibracin debe ser ajustada apropiadamente y
para ello se emplea generalmente el mtodo de ajuste lineal por mnimos
cuadrados.
Una vez obtenida la curva de calibracin, la seal obtenida para la muestra,
medida en las mismas condiciones que la curva de calibracin, permitir la
determinacin de la concentracin del elemento en la muestra dada.
El xito de la aplicacin tcnica de curva de calibracin externa depende, en
gran medida, de la exactitud con la que se preparen las soluciones patrn y de
la similitud entre la matriz de dichas soluciones y la de las muestras.
Lamentablemente, reproducir la matriz de muestras complejas puede ser difcil
o imposible y sus efectos dan a lugar interferencias que conducen a un error en
la determinacin cuantitativa. La presencia de otras interferencias no
espectrales (de tipo qumico o de la matriz) afecta tambin la exactitud de este
mtodo por lo que en estos casos debe optarse por otras tcnicas como la
curva de adicin estndar.
Sin embargo, an cuando algunas tcnicas son ms robustas que otras, es
importante tener en cuenta que la nica garanta de obtener un resultado
cuantitativo confiable es mediante la validacin previa del mtodo. Para ello se
emplean muestras estndar de referencia. Lamentablemente, debido al
elevado costro de este tipo de muestras, ellas no sern empleadas en este
laboratorio.

Tcnica de adicin de estndar

La tcnica de adicin de estndar es especialmente til para analizar muestras
cuya matriz compleja hace altamente probable la presencia de interferencias no
espectrales. Este mtodo puede aplicarse de diferentes formas.
Una de las ms habituales implica la preparacin de diferentes soluciones,
mediante la adicin de diferentes volmenes de una disolucin patrn a una
misma alcuota de muestra. Todas las soluciones se llevan a un volumen final
fijo. Este proceso se conoce como adicin de muestra. Hay que tener en
cuenta que cuando la cantidad de la muestra es limitada, las adiciones de
estndar se pueden llevar a cabo por adiciones sucesivas de volmenes del
patrn a un nico volumen de muestra. Las medidas, se van haciendo en la
muestra original y despus de cada adicin del patrn en la muestra.
En la mayora de las versiones del mtodo de la adicin de estndar, la matriz
de la muestra es casi idntica despus de cada adicin y la nica diferencia es
la concentracin del analito agregado, o la concentracin de reactivo en el caso
de que se aada un exceso de un reactivo analtico.
Como los patrones se preparan en alcuotas de la muestra y la dilucin de la
muestra es la misma en cada solucin, la matriz es idntica. Por esta razn, en
cada solucin, las seales sern afectadas de manera similar por las
interferencias no espectrales producto de la matriz de la muestra por lo que la
curva obtenida permite, en principio, realizar la determinacin cuantitativa de
manera adecuada. Es importante destacar que esta tcnica no elimina las
interferencias sino que las compensa, ya que permite obtener la seal de
patrones y muestra bajo las mismas condiciones de matriz. Tambin es
importante tener en cuenta que la aplicacin de esta tcnica NO garantiza la
obtencin de un resultado cuantitativo verdadero ya que la presencia de
algunas interferencias de tipo aditivo o multiplicativo podran afectar el
resultado.
La determinacin de la concentracin de la muestra se realiza mediante la
extrapolacin de la curva ajustada (seal versus concentracin de patrn
agregado a la muestra) hasta un valor de seal igual a cero.
Al emplear esta tcnica de calibracin, se tiene la seguridad de compensar y
solventar los efectos que producen las interferencias debidas a las diferencias
en las propiedades fsicas de las soluciones patrones y la muestra y algunas
interferencias por parte de la matriz. Sin embargo, otras interferencias no
espectrales que se originan por la matriz de la muestra, como algunas de tipo
qumico, no siempre son compensadas por lo que, an aplicando esta tcnica
de calibracin, existe la probabilidad de que la determinacin cuantitativa sea
errnea. La verificacin del mtodo empleando muestras estndar de
referencia es obligado para garantizar el resultado de la determinacin.

Tcnica del patrn interno

Esta tcnica se emplea en aquellos mtodos instrumentales, bien sea de
emisin o absorcin atmica, que permiten la determinacin multielemental.
Un patrn interno es una sustancia que se aade a todas las muestras, blancos
y patrones de calibrado en una cantidad fija. Tambin puede ser un
componente mayoritario de las muestras que se agrega a los patrones en una
concentracin lo suficientemente elevada como para que se pueda considerar
que es la misma en todos los casos. En este caso, el calibrado es una
representacin grfica ajustada del cociente entre la seal del analito y la seal
del patrn interno en funcin de la concentracin de analito de los patrones. En
las muestras, este cociente se utiliza para determinar la concentracin del
analito a partir de una curva de calibrado.
Si se elige y se usa adecuadamente un patrn interno, se pueden compensar
algunos errores aleatorios o sistemticos, como derivas, ruido de parpadeo y
algunas interferencias no espectrales producto de la matriz., ya que el cociente
de las seales del analito y del patrn interno es independiente de dichas
fluctuaciones y algunos efectos de la matriz. Cuando el patrn interno es el
componente mayoritario de las muestras y de los patrones, tambin puede
suceder que se compensen los errores producidos en la preparacin de las
muestra, disolucin y filtrado.
La mayor dificultad para aplicar el mtodo del patrn interno es encontrar la
sustancia adecuada que sirva para compensar estos efectos, as como para
incorporarla a las nuestras y a los patrones de forma reproducible. El patrn
interno deber dar una seal similar a la del analito en la mayora de los casos.
De manera adicional, las interferencias no espectrales deben afectan al
estndar interno de igual manera que al analito a determinar. Por esta razn la
escogencia del estndar interno es vital para que la aplicacin del mtodo de
los resultados deseados. Los criterios de escogencia del estandar interno es
variable dependiendo de la tcnica analtica a emplear en la determinacin.

Esta tcnica de calibracin no es empleada en el Laboratorio de Instrumental

Analtico ya que no se cuenta con ninguna tcnica de emisin o absorcin
atmica de deteccin multielemental.

BIBLIOGRAFA
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