Manual - de - Mantenimiento (Equipos de Laboratorio)

MANUAL DE MANTENIMIENTO PARA
EQUIPO DE LABORATORIO
rea de Tecnologa y Prestacin

de Servicios de Salud
Unidad de Medicamentos Esenciales, Vacunas

y Tecnologas en Salud
MANUAL DE
MANTENIMIENTO
PARA EQUIPO DE
LABORATORIO
Washington D. C., 2005
Tecnologa y Prestacin de Servicios de Salud (THS)

Medicamentos Esenciales, Vacunas y Tecnologas en Salud (EV)
La Organizacin Panamericana de la Salud dar consideracin muy favorable a las solicitudes de autoriza-
cin para reproducir o traducir, ntegramente o en parte, alguna de sus publicaciones, siempre que no sea
con fines de lucro. Las solicitudes y las peticiones de informacin debern dirigirse a la Unidad de Medica-
mentos Esenciales, Vacunas y Tecnologas en Salud de la Organizacin Panamericana de la Salud/Organi-
zacin Mundial de la Salud, 525, Twenty-third Street, N. W. Washington, D. C. 20037, EUA, que tendr su-
mo gusto en proporcionar la informacin ms reciente sobre cambios introducidos en la obra, planes de
reedicin y reimpresiones ya disponibles.
Organizacin Panamericana de la Salud, 2005
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las disposiciones sobre reproduccin de originales del Protocolo 2 de la Convencin Universal sobre Dere-
cho de Autor: Reservados todos los derechos.
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contiene no implican, por parte de la Secretara de la Organizacin Panamericana de la Salud, juicio algu-
no sobre la condicin jurdica de pases, territorios, ciudades o zonas, o de sus autoridades, ni respecto del
trazado de sus fronteras o lmites.
La mencin de determinadas sociedades mercantiles o de nombres comerciales de ciertos productos no im-

plica que la Organizacin Panamericana de la Salud apruebe o recomiende con preferencia a otros anlo-
gos. Salvo error u omisin, las denominaciones de productos patentados llevan en las publicaciones de la
OPS letra inicial mayscula.
TABLA DE CONTENIDOS
INTRODUCCIN 13
Captulo primero 15
Analizador de ELISA 15
Fotografa de analizador de ELISA 15
Propsito del analizador de ELISA 15
Principios de operacin 15
Servicios requeridos 17
Rutinas de mantenimiento 18
Definiciones bsicas 21
Bibliografa 22
Captulo segundo 23
Lavador de ELISA 23
Fotografa de lavador de ELISA 23
Propsito del lavador de ELISA 23
Bibliografa 29
Captulo tercero 31
Analizador de pH 31
Propsito del equipo 31
Fotografas y elementos del analizador de pH 31
Esquema de un analizador de pH 33
Componentes 33
Circuito tpico 34
Procedimiento general de calibracin 35
Mantenimiento general del analizador de pH 37
Mantenimiento bsico del electrodo 37
Bibliografa 41
Anexo: Teora del pH 42
Captulo cuarto 43
Balanzas 43
Fotografas de balanzas 43
Propsito de la balanza 43
Principios de funcionamiento 43
Bibliografa 54
Captulo quinto 55
Bao de Mara 55
Esquema bao de Mara 55
Controles baos de Mara 57
Operacin del bao de Mara 57
Bibliografa 60
Captulo sexto 61
Cabina de seguridad biolgica 61
Ilustracin cabina de seguridad biolgica 61
Propsitos del equipo 61
Seguridad biolgica 64
Uso de la cabina 65
Evaluacin funcional (alternativa) 69
Bibliografa 72
Captulo sptimo 73
Centrfuga 73
Fotografa y esquema 73
Propsito de la centrfuga 73
Componentes de la centrfuga 75
Recomendaciones de conservacin y manejo adecuado 77
Bibliografa 83
Captulo octavo 85
Destilador de agua 85
Esquema del destilador de agua 85
Propsito del destilador de agua 85
Bibliografa 92
Captulo noveno 93
Diluidor 93
Esquema del diluidor 93
Propsito del diluidor 93
Bibliografa 100
Captulo dcimo 101
Dispensador 101
Esquema y fotografa del dispensador 101
Propsito del dispensador 102
Bibliografa 106
Captulo undcimo 107

Espectrofotmetro 107
Fotografas del espectrofotmetro 107
Componentes del espectrofotmetro 110
Mantenimiento del espectrofotmetro 112
Buenas prcticas de uso del espectrofotmetro 116
Bibliografa 120
Captulo duodcimo 121

Autoclave 121
Fotografa del autoclave 121
Propsito del autoclave 121
Funcionamiento del autoclave 125
Mantenimiento de componentes especializados 133
Bibliografa 137
Captulo decimotercero 139

Estufa de secado 139
Fotografas de estufa de secado 139
Propsito de la estufa 139
Operacin de la estufa 141
Control de la estufa 141
Control de calidad 143
Bibliografa 147
Captulo decimocuarto 149

Incubadora 149
Fotografas de incubadoras 149
Controles de la incubadora 152
Rutinas de mantenimiento y uso de la incubadora 153
Bibliografa 157
Captulo decimoquinto 159
Microscopio 159
Otros nombres del equipo 159
Fotografas de microscopios 159
Diagrama del equipo (isomtrico y corte) 162
Descripcin de fallas potenciales por componentes 164
Mantenimiento general del microscopio 167
Bibliografa 176
Captulo decimosexto 177

Pipetas 177
Fotografa y esquema de pipetas 177
Propsito de la pipeta 177
Principios de operacin de la pipeta 177
Uso de la pipeta 179
Bibliografa 187
Captulo decimosptimo 189

Plato caliente con agitador 189
Fotografa del plato caliente con agitador 189
Controles del plato caliente con agitador 189
Operacin del plato caliente con agitador 190
Bibliografa 193
Captulo decimoctavo 195

Refrigerador 195
Fotografa del refrigerador 195
Propsito del refrigerador 195
Circuito de control refrigerador 199
Operacin del refrigerador I 200
Operacin del refrigerador II 203
Encendido del refrigerador 204
Bibliografa 207
TABLA DE ILUSTRACIONES
Ilustracin 1: Conjunto de equipos para pruebas ELISA 16

Ilustracin 2: Lavador de ELISA 24
Ilustracin 3: Perfiles de los pozos, tcnica de ELISA 25
Ilustracin 4: Esquema de un analizador de pH 33
Ilustracin 5: Clases de electrodos 34
Ilustracin 6: Circuito de control analizador de pH 34
Ilustracin 7: Balanza de resorte 44
Ilustracin 8: Balanza de pesa deslizante 44
Ilustracin 9: Balanza analtica 44
Ilustracin 10: Balanza de plato superior 45
Ilustracin 11: Balanza de sustitucin 45
Ilustracin 12: Elementos de las balanzas electrnicas 46
Ilustracin 13: Principio fuerza de compensacin 47
Ilustracin 14: Clasificacin de balanzas por grupos de exactitud 48
Ilustracin 15: Control balanza analtica 48
Ilustracin 16: Bao de Mara 55
Ilustracin 17: Resistencias de inmersin y externa 56
Ilustracin 18: Control de bao de Mara 57
Ilustracin 19: Cabina de seguridad biolgica 61
Ilustracin 20: Concepto de fuerza centrfuga 74
Ilustracin 21: Destilador de agua 85
Ilustracin 22: Esquema diluidor 93
Ilustracin 23: Control del diluidor 94
Ilustracin 24: Jeringa y dispensador 95
Ilustracin 25: Dispensador 101
Ilustracin 26: Elementos dispensadores 103
Ilustracin 27: Interaccin de la luz con la materia 108
Ilustracin 28: Fenmeno de absorbancia 109
Ilustracin 29: Componentes del espectrofotmetro 110
Ilustracin 30: Reflexin de la luz 119
Ilustracin 31: Rejilla de difraccin 120
Ilustracin 32: Circuito de vapor del autoclave 123
Ilustracin 33: Espacios requeridos por el autoclave 130
Ilustracin 34: Acometida aire comprimido 130
Ilustracin 35: Acometida de vapor 130
Ilustracin 36: Generador de vapor 133
Ilustracin 37: Control electrnico de la estufa 142
Ilustracin 38: Circuito elctrico de la estufa 142
Ilustracin 39: Formas de transferencia de calor 151
Ilustracin 40: Control de incubadora 152
Ilustracin 41: Lente positivo (convergente) 160
Ilustracin 42: Funcionamiento del lente 161
Ilustracin 43: Corte del microscopio 162
Ilustracin 44: Clases de pipetas 178
Ilustracin 45: Fases del uso de la pipeta 180
Ilustracin 46: Desensamble de una pipeta 182
Ilustracin 47: Control plato caliente con agitador 190
Ilustracin 48: Motor de induccin 192
Ilustracin 49: Circuito de refrigeracin 196
Ilustracin 50: Circuito de control del refrigerador 199
Ilustracin 51: Control Banco de sangre 200
Ilustracin 52: Control refrigerador ultrabaja temperatura 204
12
INTRODUCCIN
Este manual ha sido desarrollado con el fin aquellas de mayor utilizacin en laborato-
de apoyar al personal que labora en los labo- rios de baja o media complejidad tcnica.
ratorios de salud, sean clnicos o de investiga-
cin, en los campos de la salud pblica, salud 3. Busca apoyar a los responsables de la gestin
animal, salud ambiental, control de alimen- tcnica en la implementacin de los progra-
tos y control de medicamentos, en la com- mas de mantenimiento y de gestin de cali-
prensin de los requerimientos tcnicos rela- dad en pro de la salud de la poblacin.
cionados con la instalacin, uso y manteni-
miento de un grupo de equipos que resultan 4. Cada equipo ha sido identificado con el
de gran importancia para la realizacin de las nombre que ms comnmente se lo cono-
actividades diagnsticas o de investigacin. ce. Tambin se han incluido otros nom-
bres alternos.
No se pretende que los lineamientos inclui-
dos en este manual conviertan a quien lo 5. Se han introducido fotografas o ilustra-
consulta en un experto capaz de solucionar ciones o una combinacin de ambas para
cualquier problema que pueda presentarse identificar, sin lugar a equivocaciones, el
en el equipamiento del laboratorio. El desa- tipo de equipo que se est considerando.
rrollo alcanzado a nivel tecnolgico y cientfi-
co ha incorporado en los equipos infinidad 6. Dadas las grandes diferencias en la com-
de funciones y modos particulares de opera- plejidad tcnica de las marcas y modelos
cin, que necesariamente conllevan a imple- existentes, cada tema ha sido desarrollado
mentar programas que permitan aportar los pensando en equipos bsicos, pero, hasta
recursos para mantener dicho equipamiento donde ha sido posible, incluyen tecnolo-
en las mejores condiciones de operacin. ga de desarrollo reciente.
Por la diversidad de orgenes, marcas y mode- 7. Presenta una breve explicacin sobre los
los, solo es posible presentar unas recomen- principales usos o aplicaciones del equipo
daciones generales, dado que las particulares en el laboratorio.
se encuentran desarrolladas en los manuales
de uso, mantenimiento e instalacin elabora- 8. Contiene una descripcin bsica de los
dos por los fabricantes y que deben ser solici- principios con los que operan los distintos
tados y exigidos en los procesos de adquisi- equipos. En consecuencia, hay explicacio-
cin por las dependencias y profesionales nes basadas en principios o leyes fsicas
que tienen bajo su responsabilidad la incor- y/o qumicas que el lector interesado pue-
poracin y la adquisicin de tecnologa en las de o debera profundizar por su cuenta.
diversas instituciones.
9. Se incluye una descripcin de los servicios o
En su desarrollo, el manual ha tomado en instalaciones que requieren los distintos
cuenta los siguientes aspectos: equipos para poder funcionar, poniendo n-
fasis en los aspectos elctricos y en los requi-
1. Cada clase o familia de equipo incluida ha si- sitos que en cada ambiente podran facilitar
do desarrollada en un captulo diferente, su correcta instalacin y operacin.
que se ha organizado en orden alfabtico,
de acuerdo con el nombre que los identifica. 10. Describe las rutinas bsicas de manteni-
miento requeridas por los equipos, que se
2. Abarca 18 familias de equipo que han si- han clasificado segn la frecuencia con
do seleccionadas, tratando de cubrir que deben realizarse: diarias, semanales,
13
mensuales, semestrales, anuales y even- comprender el significado de algunos tr-
tuales. Dichas rutinas se han numerado y minos utilizados.
se presentan siguiendo un orden que tra-
ta de ajustarse a la realidad. Mayor pro- 13. Al final se ha incluido la bibliografa utili-
fundidad y especificidad se pueden en- zada para desarrollar los distintos temas.
contrar en los manuales editados por los
fabricantes. Tambin, en el caso de algunos equipos, se
han introducido temas adicionales relaciona-
11. Para cada equipo se ha desarrollado una dos con la calibracin, el control de calidad o
tabla que procura condensar los proble- la forma en que se encuentran diseados y
mas que con mayor frecuencia lo afectan, presentados los controles.
identificando sus posibles causas y las ac-
ciones que deberan realizarse para solu- El presente manual ha sido desarrollado por
cionar el problema. la Organizacin Panamericana de la Salud,
para apoyar los programas de mejoramiento
12. En cada captulo se ha introducido una lis- de la calidad que promueve en los laborato-
ta de definiciones bsicas que ayuda a rios de la Regin.
14
CAPTULO 1
Analizador de ELISA
Cdigo (s) ECRI Denominacin (es) ECRI
16-979 Lectores de microplacas fotomtricos
ANALIZADOR DE ELISA PRINCIPIOS DE OPERACIN
El analizador de ELISA es un espectrofotme- El analizador de ELISA es un espectrofotme-

tro especializado, diseado para efectuar la tro especializado. A diferencia de los espec-
lectura de los resultados de una tcnica que trofotmetros convencionales que permiten
se utiliza para determinar la presencia de an- efectuar lecturas en un rango amplio de lon-
ticuerpos o antgenos especficos presentes gitudes de onda, este dispone de filtros o re-
en una muestra. La tcnica se basa en la de- jillas de difraccin que limitan el rango de
teccin de un antgeno inmovilizado sobre longitudes de onda a aquellas que se utilizan
una fase slida, mediante anticuerpos que, en la tcnica ELISA, la cual generalmente se
directa o indirectamente, producen una realiza con longitudes de onda comprendidas
reaccin cuyo producto puede ser ledo por entre los 400 y los 750 nm nanmetros. Al-
el espectrofotmetro. Se le conoce tambin gunos analizadores operan en el rango ultra-
con el nombre de Lector de ELISA. La palabra violeta y pueden efectuar anlisis entre los
ELISA es el acrnimo de las palabras en len- 340 y los 700 nm. El sistema ptico utilizado
gua inglesa Enzyme-Linked Immunosorbent por muchos fabricantes utiliza la fibra ptica
Assay. para llevar la luz hasta los pozos de la placa,
donde se encuentra la muestra bajo anlisis.
La luz que atraviesa la muestra tiene un di-
FOTOGRAFA DE ANALIZADOR DE ELISA metro que vara entre 1 y 3 mm. Un sistema
de deteccin recibe la energa lumnica, pro-
veniente de la muestra, la amplifica, determi-
na la absorbancia y, a travs de un sistema de
lectura, la convierte en datos que permiten
interpretar el resultado de la prueba. Tam-
bin hay analizadores de ELISA que emplean
sistemas lumnicos de doble haz. Las muestras
del ensayo de ELISA se colocan en placas de
diseo especial, las cuales disponen de un n-
mero definido de pozos o vasos, en los cuales
se lleva a cabo el procedimiento o ensayo.
Son comunes las placas de 8 columnas por 12
filas, con un total de 96 pozos. Tambin exis-
ten placas con un mayor nmero de pozos.
PROPSITO DEL ANALIZADOR DE ELISA Las hay de 384 pozos y la tendencia actual
busca aumentar el nmero de pozos, y redu-
El analizador de ELISA se utiliza para leer el re- cir la cantidad de reactivos y el volumen de
sultado de las pruebas efectuadas, utilizando la las muestras requeridas. La ubicacin de los
tcnica de ELISA, la cual tiene aplicacin directa sensores pticos en el analizador de ELISA va-
en inmunologa y en serologa; permite confir- ra dependiendo de los fabricantes. Algunos
mar la presencia en el organismo de anticuerpos los colocan sobre la placa portamuestras,
o antgenos de un agente infeccioso, vacunal o mientras que otros los ponen directamente
autoanticuerpos artritis reumatoide, por ejem- bajo los pozos de la placa.
plo, entre otras aplicaciones.
15
En la actualidad, los analizadores de ELISA 1. Un analizador de ELISA.
disponen de controles regulados por micro-
procesadores, interfases de conexin a siste- 2. Un lavador de ELISA (captulo 2).
mas de informacin, programas de control de
procesos y control de calidad que, a travs del 3. Un sistema dispensador de lquidos. (Pue-
computador, permiten la automatizacin den usarse pipetas multicanal).
completa de los ensayos requeridos.
4. Una incubadora especializada para las placas.
Equipos requeridos para efectuar ensa- La ilustracin que se presenta a continuacin

yos de ELISA da una idea de la forma en que se encuentran
interrelacionados los equipos mencionados.
Para desarrollar la tcnica de ELISA se requiere
disponer al menos de los siguientes equipos:
Ilustracin 1: Conjunto de equipos para pruebas ELISA
Fases mecnicas de un ensayo utilizando pipetas multicanal, se llenan los vasos o

la tcnica de ELISA pozos de las placas con las soluciones pre-
paradas para ser utilizadas en el ensayo.
Uso de equipos
3. A continuacin, se coloca la placa en la incu-
Cuando se realiza una prueba de ELISA, ge- badora donde, a temperatura controlada, se
neralmente se siguen estos pasos: lleva a cabo un conjunto de reacciones.
1. Utilizando el lavador de ELISA o microplacas, Las etapas 1, 2 y 3 se pueden repetir varias ve-
se efecta un primer lavado de la placa. ces dependiendo del ensayo, hasta que se lo-
gre que las muestras colocadas en las placas
2. Mediante el dispensador de lquidos o las hayan terminado sus reacciones.
16
4. Finalmente, cuando se han completado las de color en la solucin, brindando un me-

reacciones qumicas, se lleva la placa al dio para medir la cantidad de conjugado
analizador de ELISA y se efectan las lectu- que a la vez dir cunto complejo antge-
ras que permiten emitir un diagnstico. no-anticuerpo est presente. Otro perodo
de incubacin permitir que esta reaccin
tenga lugar.
Fases qumicas de la tcnica de ELISA
8. Cumplido el tiempo de incubacin, se aa-
Se presenta a continuacin un breve resumen de un reactivo para detener la reaccin
de cmo funciona la tcnica de ELISA, desde sustrato-enzima y prevenir cambios adicio-
el punto de vista qumico1. nales de color. Generalmente este reactivo
es un cido diluido.
1. Se recubren los pozos de una placa con an-
ticuerpos o antgenos. 9. Finalmente, se efecta la lectura de la pla-
ca en el analizador de ELISA. Los valores de
2. Se aaden las muestras, controles y estn- los resultados se usan para determinar las
dares a los pozos de la placa y se incuban cantidades de antgeno o anticuerpo espe-
a temperaturas que oscilan entre la tem- cficos presentes en la muestra.
peratura ambiente y 37 C, por un perodo
de tiempo determinado, segn caracters- Algunos de los pozos en la placa se destinan pa-
ticas de la prueba. Durante la incubacin, ra colocar estndares y controles. Los estndares
una parte del antgeno de la muestra se permiten definir los puntos de corte (cut off).
une al anticuerpo del recubrimiento de la Los controles son cantidades conocidas que se
placa, o el anticuerpo de la muestra se une usan para medir el xito del ensayo, evaluando
con el antgeno ubicado en el recubri- los datos recibidos contra las concentraciones es-
miento de la placa, en funcin de su pre- tablecidas para cada control. El proceso antes
sencia y cantidad en la muestra analizada. descrito es comn, aunque muchas pruebas de
ELISA tienen variantes.
3. Despus de la incubacin, las entidades no
unidas antgenos o anticuerpos se lavan
y se retiran de la placa, utilizando el lava- SERVICIOS REQUERIDOS
dor de ELISA que utiliza un buffer de lava-
do adecuado. Para que el analizador de ELISA opere correc-
tamente, es necesario verificar los siguientes
4. A continuacin, se aade un anticuerpo se- puntos:
cundario, denominado el conjugado, el
cual tiene una enzima que reaccionar con 1. Un ambiente limpio, libre de polvo.
un sustrato para producir un cambio de
color. 2. Una mesa de trabajo estable. Lo recomen-
dable es que la misma est alejada de
5. Se inicia entonces un segundo perodo de equipos que generen vibraciones centr-
incubacin, durante el cual el conjugado fugas, agitadores, que tenga un tamao
se unir al complejo antgeno-anticuerpo adecuado que permita ubicar, al lado del
en los pozos de la placa. analizador de ELISA, los equipos comple-
mentarios requeridos para efectuar la tc-
6. Despus de la incubacin, se realiza un nue- nica en mencin: lavadores, incubadora,
vo lavado para retirar de los pozos de la pla- dispensador y computador con perifricos.
ca cualquier vestigio del conjugado no unido.
3. Una fuente de suministro elctrico de acuer-
7. Se aade un sustrato. La enzima reaccio- do con las normas y estndares implemen-
nar con el sustrato y causar un cambio tados en el pas. En los pases americanos se
1
Explicaciones ms detalladas deben ser consultadas en literatura especializada.
17
utilizan por lo general voltajes de 110 V y valores promedio idnticos en cada fila, el
frecuencias de 60 Hz. analizador se encuentra calibrado.
5. Verificar si el desplazamiento de la placa se

Calibracin del analizador de ELISA encuentra calibrado, columna por columna.
Colocar una placa vaca y efectuar las lectu-
La calibracin de un analizador de ELISA es ras. Si no se observan diferencias medias en-
un proceso especializado que debe realizar tre las lecturas de columna a columna de la
un tcnico o ingeniero debidamente entrena- primera a la ltima, podra asumirse que el
do, siguiendo las instrucciones que para el avance se encuentra calibrado.
efecto brinda cada fabricante. Para efectuar
la calibracin se requiere disponer de un jue-
go de filtros grises, los cuales se encuentran RUTINAS DE MANTENIMIENTO
montados en una placa de igual geometra a
las utilizadas para efectuar los anlisis. Los fa- Las rutinas que se describen a continuacin es-
bricantes suministran dichos filtros y pueden tn enfocadas exclusivamente al analizador de
ser utilizados para realizar calibraciones a ELISA. El mantenimiento del lavador de ELISA
cualquier longitud de onda de las que utiliza est tratado en el captulo correspondiente.
el equipo.
Los filtros de calibracin disponen de al me- Mantenimiento bsico

nos tres valores de densidad ptica, preesta- Frecuencia: Diaria
blecidos dentro de los rangos de medicin;
uno bajo, uno medio y el ltimo, un valor al- 1. Revisar que los sensores pticos de cada
to. Para efectuar la calibracin se realiza el si- canal estn limpios. Si se detecta suciedad,
guiente proceso: limpiar con un pincel la superficie de las
ventanas de los emisores de luz y de los
1. Colocar el filtro de calibracin en el equipo. sensores.
2. Efectuar una lectura completa con el filtro 2. Confirmar que el sistema de iluminacin
de calibracin. Verificar si se presentan di- est limpio.
ferencias en las lecturas obtenidas de ca-
nal a canal. Si es as, invertir el filtro (180) 3. Verificar que la calibracin del analizador
y repetir nuevamente la lectura para des- es adecuada. Cuando se inicien las opera-
cartar que las diferencias puedan ser atri- ciones diarias, permitir que el analizador
buibles al filtro en s. Por lo general, se se caliente durante 30 minutos. A conti-
acepta que el instrumento no requiere ca- nuacin, realizar una lectura en blanco y
libracin, si se encuentra ajustado en dos luego leer un mdulo lleno de sustrato.
longitudes de onda. Las lecturas deben ser idnticas. Si no lo
son, invertir el mdulo y repetir la lectura,
3. Verificar si el lector est descalibrado. Si es a fin de determinar si la desviacin se ori-
as, proceder a la calibracin, siguiendo la gina en el mdulo o en el lector.
rutina definida por el fabricante, verifican-
do especialmente que la linealidad de las 4. Examinar el avance automtico de la pla-
lecturas se mantenga lo ms rigurosamen- ca. El mismo debe ser suave y constante.
te posible.
4. Si no se dispone de filtro de calibracin, Mantenimiento preventivo

verificar la misma colocando una solucin Frecuencia: Trimestral
de color en los pozos de una placa y efec-
tuando en seguida una lectura completa. 1. Verificar la estabilidad de la lmpara. Usar
Luego invertir la placa 180 y efectuar una el filtro de calibracin, efectuando lecturas
nueva lectura. Si ambas lecturas presentan con intervalos de 30 minutos o una misma
18
placa. Comparar las lecturas. No deben 3. Limpiar el mecanismo de avance de la placa.

existir diferencias.
4. Verificar la alineacin de cada pozo con los
2. Limpiar los sistemas pticos de los detecto- sistemas emisores y detectores de luz.
res y los sistemas de iluminacin.
Tabla de solucin de problemas
PROBLEMA CAUSA PROBABLE REMEDIO

El analizador brinda lecturas sin sentido. Lmpara de iluminacin fuera de Reemplazar la lmpara por otra de las mismas
servicio. caractersticas que la original.
Las lecturas del analizador varan de fi- Sensores pticos sucios. Limpiar los sensores.
la en fila. Lentes o elementos del sistema de ilu- Limpiar lentes del sistema de iluminacin.
minacin sucios.
Falta de calibracin de uno o ms Verificar la calibracin de cada uno de los
canales. canales.
Problemas con los blancos. Efectuar una lectura en vaco y compararla
contra la lectura del blanco. Si el sistema lee
bien, deber encontrarse una lectura de den-
sidad ptica similar. Caso contrario, el analiza-
dor est descalibrado.
El analizador presenta absorbancias Reactivos usados y/o preparados de Revisar que el TMB sea incoloro y la prepara-
altas. forma incorrecta. cin adecuada.
Contaminacin con otras muestras. Repetir el ensayo verificando la marcacin, el
lavado y la forma de usar la pipeta.
Filtro de longitud de onda incorrecto. Verificar la longitud de onda recomendada
para el ensayo. Ajustar si es del caso.
Lavado insuficiente o ineficiente. Confirmar el mtodo de lavado utilizado. Em-
plear un ensayo de control de calidad apropiado.
Tiempo de incubacin muy largo o Revisar tiempos y temperatura de incubacin.
temperatura muy alta.
Dilucin de muestras mal procesada. Revisar proceso de dilucin de muestras.
Falta algn reactivo. Verificar que el ensayo se realiza de acuerdo al
procedimiento establecido.
El analizador presenta absorbancias Tiempo de incubacin muy corto o Revisar temperaturas y tiempos de incubacin.
bajas. temperatura muy baja.
Los reactivos no se encuentran a la Comprobar que los reactivos estabilicen su
temperatura ambiente. temperatura con la del ambiente.
Lavado excesivo de la placa. Ajustar el proceso de lavado a lo indicado por
el fabricante del ensayo.
Filtro de longitud de onda incorrecto. Verificar el filtro de longitud de onda seleccio-
nado. Utilizar el recomendado para el ensayo.
Reactivos usados o preparados de for- Revisar los reactivos utilizados. Comprobar las
ma incorrecta. diluciones.
Falta algn reactivo. Verificar que el ensayo se realiza de acuerdo
al procedimiento establecido.
La placa presenta rayaduras en el fon- Preparar una nueva placa y repetir el ensayo.
do de los pozos.
19
Clase de placa mal seleccionada o pla- Verificar el tipo de placa utilizada. Preparar
ca sucia. una placa nueva y repetir el ensayo.
Se han secado los pozos de la placa. Cambiar la forma de lavar la placa.
Placa mal colocada en el lector o mal Revisar la colocacin de la placa. Repetir la
sentada. lectura.
Humedad o huellas digitales en el fon- Verificar que el fondo exterior de los pozos se
do exterior de la placa. encuentre limpio.
Cantidades residuales del buffer de lavado Confirmar la remocin completa del buffer de
en los pozos antes de aadir el sustrato. lavado.
Las tabletas del sustrato no se encuen- Verificar que las tabletas se disuelvan
tran completamente disueltas. correctamente.
La tableta del sustrato ha sido conta- Evidenciar integridad y manejo de las tabletas
minada por humedad o pinzas metli- del sustrato.
cas o no se encuentra completa.
La posicin del pozo blanco podra ha- Verificar la carga correcta de la placa.
ber sido cambiada y una cantidad inco-
rrecta ha sido restada a cada lectura.
El analizador presenta variaciones La lmpara del analizador en situacin Reemplazar la lmpara por otra de las mismas
inesperadas en las lecturas de densi- inestable. caractersticas que la original.
dad ptica.
La lectura del analizador presenta un Calibracin inadecuada del motor de Calibrar el avance para que en cada paso los
aumento gradual o un decremento de avance de la placa. pozos queden exactamente alineados con el
columna en columna. sistema emisor de luz.
Lecturas de densidad ptica muy bajas La lectura se est realizando con luz de Verificar con qu longitud de onda se est
comparadas con los criterios de la eva- longitud de onda diferente a la reque- efectuando la lectura. Si es del caso, ajustar la
luacin ptica del operador. rida por el ensayo. longitud de onda y repetir la lectura.
Verificar que se ha seleccionado el filtro de
longitud de onda recomendado.
Baja reproducibilidad. Homogeneidad de la muestra. Mezclar los reactivos antes de usarlos. Permitir
que se equilibren con la temperatura ambiente.
Procedimiento errneo en el uso de la Comprobar que las puntas de la pipeta son
pipeta. cambiadas entre las muestras y que es remo-
vido el exceso de lquido en el exterior.
Lector descalibrado. Revisar la calibracin. Usar un juego de con-
trol de calidad apropiado.
Lector utilizado sin suficiente Esperar a que el lector se haya estabilizado en
calentamiento. su temperatura de operacin.
Reactivos vencidos. Verificar las fechas de vencimiento de los
reactivos.
Alta absorbancia del blanco. Sustrato contaminado. Revisar que el TMB sea incoloro y la prepara-
cin adecuada.
Lavado insuficiente o ineficiente. Retirar el buffer despus del lavado. Revisar
que los pozos sean llenados y aspirados de
manera uniforme cuando se lavan.
Los datos no son transferidos entre el El lector y el microprocesador tienen Verificar cdigos seleccionados.
lector y el microprocesador. definidos diferentes caracteres.
Tasas de transferencia de informacin Confirmar tasas de transferencia seleccionadas.
(Baud) diferentes.
Configuracin de las clavijas de trans- Revisar la configuracin de las clavijas. Debe
misin/recepcin mal seleccionada. estar configurada segn parmetros definidos
por el fabricante.
20

Falla en la interfase del programa de Llamar al servicio tcnico especializado.
comunicaciones.
Cable de conexin lector-microproce- Revisar conexiones. Ajustar conexiones.
sador mal ajustado.
Haz de luz desalineado. El analizador trasladado o movido sin Llamar al servicio tcnico especializado.
las debidas precauciones.
La fuente de luz lmpara ha sido Verificar montaje y alineacin de la fuente de
cambiada y su reemplazo no ha sido luz.
instalado y alineado correctamente.
Identificacin incorrecta de la muestra. Placa cargada de forma inadecuada. Revisar proceso de identificacin de las mues-
tras. Repetir lectura efectuando los ajustes.
Identificacin incorrecta de la muestra
registrada en el analizador.
El computador falla al indicar los cdi- El programa que controla la activacin Llamar al servicio tcnico especializado.
gos de error. de las alarmas y los mensajes de adver-
tencia presenta fallas o no est valida-
do por el productor.
El analizador presenta fallas en la de- Diversos componentes del sistema pre- Llamar al servicio tcnico especializado.
teccin de errores. sentan fallas, como el sistema de de-
teccin del nivel de lquidos.
DEFINICIONES BSICAS reacciones. El lavador de ELISA utiliza buffers

especiales en los procesos de lavado.
ELISA. Tcnica desarrollada para efectuar
anlisis que permiten determinar si una sus- Lector de microplacas. Nombre dado a los
tancia se encuentra presente en una muestra. analizadores de ELISA.
Se utiliza principalmente en el rea de inmu-
nologa. La palabra ELISA es el acrnimo de Placa de ELISA. Elemento de consumo que se
las palabras en lengua inglesa Enzyme-Linked ha estandarizado para efectuar los anlisis me-
Immunosorbent Assay. diante la tcnica de ELISA. Las placas tienen en
general 96 pozos en una configuracin tpica
Enzima. Protena que sirve de catalizador en de 8 filas por 12 columnas. Tambin hay placas
una reaccin qumica, acelerando las reacciones. de ELISA de 384 y recientemente se han venido
imponiendo microplacas de hasta 1 536 pozos,
Fluorforo. Molculas que absorben luz a en centros de alta demanda, debido a las eco-
una determinada longitud de onda y emiten nomas logradas en insumos y reactivos.
luz de una longitud de onda mayor.
Quimioluminiscencia. Emisin de luz que
Lavador de ELISA. Equipo que se utiliza pa- aparece durante una reaccin qumica.
ra lavar las placas durante las etapas de una
prueba de ELISA, con el fin de remover aque- TMB. Sustrato usado con la enzima HRP.
llos componentes que no se han unido en las
21
Bibliografa
ELISA Automation, Hudson Control Group, AB104A, 2002. (www.hudsoncontrol.com)
Solid Phase Guide, NUNC, Brand Products, Introduction to Solid Phase Techniques.
(http://www.nuncbrand.com/PDF/Guides%20and%20Manuals/Guide%20to%20Solid%20P
hase.pdf)
Universal Medical Device Nomenclature System (UMDNS), Product Categories Thesaurus,

ECRI, 5200 Butler Pike, Plymouth Meeting, PA, USA, 2000.
Zoon, Kathryn, Recommendations to users of medical devices that test for infectious dis-
ease markers by enzyme immunoassay (EIA) test systems, Division of Blood Applications,
Bethesda, MD. (http://www.fda.gov/cber/bldmem/122094.txt)
22
suministra, a travs de agujas, la solucin nica aguja. Si se utilizan dos agujas, una se
de lavado a los diferentes pozos. La cabeza usa para el suministro de la solucin de lavado
suele contar con ocho pares de agujas para y la otra para la extraccin. Si se utilizan tres,
lavar y aspirar los pozos de una misma fila la primera es para el suministro de la solucin
de la placa de forma simultnea en la cabe- de lavado, la segunda para la extraccin y la
za confluyen los subsistemas de suministro y tercera para controlar extraer cualquier ex-
de extraccin. Tambin hay modelos que ceso de volumen dentro del pozo.
disponen de doce pares de agujas y existen
versiones que efectan el proceso de lavado En general la longitud de la aguja de extrac-
de manera simultnea en todos los pozos de cin es mayor que la longitud de la aguja de
la placa. Algunos lavadores brindan la posi- suministro, con el fin de que pueda avanzar
bilidad de trabajar con diversas soluciones verticalmente hasta una altura que oscila
de limpieza, efectuando los cambios de so- entre 0,3 y 0,5 mm del fondo del pozo.
lucin segn programe el operador.
Subsistema de avance. Est compuesto
Subsistema de extraccin. Requiere de por un mecanismo que desplaza horizon-
un mecanismo de vaco y de un sistema de talmente la cabeza de suministro y extrac-
almacenamiento para recolectar los fluidos cin, para poder llegar en la placa de ELI-
y desechos retirados de los pozos de las pla- SA a cada uno de los pozos; cuando se ha
cas. El vaco puede ser proporcionado por efectuado el desplazamiento horizontal a
bombas externas o internas. La extraccin la siguiente fila, se realiza un movimiento
se realiza mediante un conjunto de agujas vertical hacia los pozos, con el fin de dis-
montadas en la cabeza lavadora/aspirado- pensar y/o extraer la solucin de lavado.
ra. El nmero de agujas vara entre uno y Hay lavadores que efectan estas opera-
tres, segn el fabricante y el modelo. ciones de forma simultnea.
Si se usa una sola aguja, las operaciones de la- Se presenta a continuacin una ilustracin en la
vado y extraccin se hacen a travs de esta que se muestran los subsistemas mencionados.
Ilustracin 2: Lavador de ELISA
24
Lavador de ELISA 2
La siguiente ilustracin muestra las formas de de ELISA. Cada forma de pozo es adecuada
pozo ms comunes encontradas en las placas para un tipo de prueba en particular.
Ilustracin 3: Perfiles de los pozos, tcnica de ELISA
Proceso de lavado Aspiracin y dispensacin simult-

neas. En este tipo de lavado los sistemas
El lavado es una de las etapas que se debe reali- de lavado y aspiracin funcionan simult-
zar cuando se efectan anlisis, utilizando la neamente, generando una turbulencia
tcnica de ELISA. Se emplean para el efecto so- controlada dentro del pozo que remueve
luciones especiales. Entre las ms usadas se en- las sustancias no unidas durante los tiem-
cuentra la solucin buffer fosfatada o PBS. La so- pos estimados de reaccin.
lucin buffer fosfatada tiene una estabilidad de
2 meses, si se la conserva a 4 C. Se estima que Aspiracin desde el fondo de los po-
para el lavado de una microplaca se requiere en- zos. En este sistema, la aspiracin del
tre 1 y 3 litros de solucin. Se estima que en ca- fluido contenido en los pozos se efecta
da pozo se utilizan 300 l de solucin de lavado posicionando inicialmente las agujas de
por ciclo. El lavado es una operacin que se pue- aspiracin en una posicin muy cercana
de realizar manualmente, pero si se tienen de- al fondo, iniciando en seguida un ciclo de
mandas altas y si se trabaja con sustancias po- succin que generalmente es controlado
tencialmente contaminadas, es mejor utilizar un por tiempo. Este sistema puede llegar a
equipo de lavado automatizado. aspirar aire si hay diferencias en los nive-
les de llenado de los tanques.
Entre los procesos de lavado se destacan los
siguientes:
Calibracin del lavador
Aspiracin de arriba hacia abajo. Cuan-
do se inicia la fase de aspiracin, las agujas El lavador de ELISA resulta crtico para garan-
se desplazan verticalmente y la aspiracin tizar que la tcnica de ELISA funciona de for-
se inicia de inmediato; estas entran en el l- ma apropiada. Se presentan a continuacin
quido; el proceso contina hasta que las los lineamientos a tener en cuenta para que
agujas alcanzan la posicin mxima infe- el equipo funcione adecuadamente.
rior, muy cerca del fondo de los pozos, mo-
mento en el que se detienen para evitar Posicin de las agujas (cabeza de sumi-
succionar aire que fluira necesariamente nistro y aspiracin). Se debe verificar con
sobre las paredes laterales interiores de los cuidado el ajuste de la posicin horizontal y
pozos. Este tipo de aspiracin previene vertical respecto de los pozos. Si la placa tie-
que corrientes de aire sequen la protena ne pozos de fondo plano, se debe verificar que
unida sobre la superficie de los pozos. la aguja de aspiracin se encuentre ubicada
25
muy cerca a la pared del pozo; si el fondo es de ELISA han desarrollado procedimientos que
redondo o en V, se debe verificar que la deben ser efectuados de forma regular. Uno de
aguja de succin se encuentre en el centro los controles5 se basa en la utilizacin del reac-
del pozo y, cuando se efecta el movimien- tivo Peroxidasa, el cual se dispensa mediante
to vertical, se mantenga una distancia agu- una pipeta en los pozos de la placa para ser le-
ja-fondo del pozo, comprendida entre 0,3 y do a 405, 450 y 492 nm. En seguida los pozos
0,5 mm. Nunca se debe permitir que las se lavan y se les aade un sustrato incoloro
agujas toquen el fondo de los pozos, para (TMB/H2O2 - Tetrametilbenzidina/Perxido
evitar interferencias de tipo mecnico entre de hidrgeno). Cualquier residuo conjugado
la punta de la aguja y el fondo del pozo du- hidrolizar la enzima y el cromgeno cam-
rante la funcin de aspiracin. biar a color azul. Despus de detener la
reaccin con cido, el TMB se vuelve amari-
Tiempo de aspiracin. Ajustar el tiempo llo. La intensidad del color resultante est
de aspiracin de forma que resulte adecua- directamente relacionada con la eficiencia
do, para que la pelcula de solucin adheri- del proceso de lavado.
da a la pared del pozo pueda fluir hasta el
fondo del mismo. Evitar tiempos demasiado
largos para impedir que se seque el recubri- SERVICIOS REQUERIDOS
miento de los pozos. Verificar que las agu-
jas del sistema de succin se encuentren Para que el lavador de ELISA opere correcta-
limpias (libres de obstrucciones). mente, se necesita disponer de los siguientes
servicios:
Volumen dispensado. Verificar que el vo-
lumen dispensado est lo ms cerca posible 1. Un ambiente limpio, libre de polvo.
del volumen mximo del pozo; confirmar
que todos los pozos se llenen de forma ho- 2. Una mesa de trabajo estable. Se aconseja
mognea al mismo nivel. Comprobar que que la misma est alejada de equipos que
las agujas dispensadoras se encuentren lim- generen vibraciones centrfugas, agitado-
pias (libres de obstrucciones). res, que tenga un tamao adecuado para
que permita ubicar, al lado del lavador de
Vaco. El sistema de succin debe estar gra- ELISA, los equipos complementarios re-
duado de forma adecuada. Si el vaco es muy queridos para efectuar la tcnica en men-
alto, puede alterarse la prueba, pues podran cin: analizador, incubadora, dispensador
secarse los pozos y debilitar considerable- y computador con perifricos.
mente la actividad de la enzima en los pozos,
alterando por completo el resultado de la 3. Una toma elctrica con polo a tierra en
prueba. La mayora de los lavadores funcio- buen estado, conectada a una acometida
nan bien con un vaco que oscila entre el 60 y que cumpla con las normas y estndares
70 % de la presin atmosfrica. En algunos elctricos implementados en el pas o el la-
lavadores, el vaco se produce en una bomba boratorio. En los pases americanos se uti-
externa que opera como un accesorio del la- lizan generalmente voltajes de 110 V y fre-
vador y su operacin es controlada desde el cuencias de 60 Hz.
lavador, lo que implica que la bomba de va-
co opera nicamente cuando se requiere.
RUTINAS DE MANTENIMIENTO
Verificacin del proceso de lavado Las rutinas que se describen a continuacin es-
tn enfocadas exclusivamente al lavador de
Para verificar si el proceso de lavado se realiza ELISA. El mantenimiento del analizador de ELI-
de acuerdo con las especificaciones exigidas por SA est tratado en el captulo correspondiente.
la tcnica de ELISA, los fabricantes de pruebas
5
Procedimiento desarrollado por PANBIO, ELISA Check Plus, Cat. N E-ECP01T.
26
Lavador de ELISA 2
Mantenimiento bsico Mantenimiento preventivo

Frecuencia: Diaria Frecuencia: Trimestral
1. Verificar el volumen dispensado. 1. Desensamblar y limpiar los conductos y co-

nectores. Verificar la integridad de los mis-
2. Comprobar la uniformidad del llenado. mos. Si de detectan fugas o vestigios de
corrosin, ajustar y/o reemplazar.
3. Verificar la eficiencia del subsistema de
aspiracin. 2. Verificar la integridad de los componentes
mecnicos. Lubricar de acuerdo con las ins-
4. Confirmar la limpieza de las agujas de su- trucciones del fabricante.
ministro y extraccin.
3. Comprobar el ajuste de cada uno de los
5. Limpiar el lavador con agua destilada des- subsistemas. Calibrar de acuerdo a las re-
pus de haberlo utilizado, para remover comendaciones del fabricante.
cualquier vestigio de sal en los conductos
de los subsistemas de suministro y extrac- 4. Confirmar la integridad del conector elc-
cin. Las agujas pueden mantenerse su- trico y el cable de interconexin.
mergidas en agua destilada.
5. Verificar la integridad del fusible, y que sus
6. Verificar la limpieza del cuerpo del lava- puntos de contacto estn limpios.
dor. Si es del caso, limpiar las superficies
exteriores con una pieza de tela humede- Nota: Personal tcnico debidamente ca-
cida, con un detergente suave. pacitado debe realizar el mantenimiento
de sistema de control. Si se requiere, debe
llamarse al fabricante o representante.

Al terminar el lavado quedan residuos El sistema de extraccin del lavador Verificar si el sistema de vaco funciona a la
de la solucin utilizada en los pozos. presenta fallas. presin adecuada.
Los conductos del sistema de vaco son Comprobar el dimetro de los conductos que
de dimetro diferente al recomendado. recomienda el fabricante.
La lnea de succin presenta obstruc- Verificar que las lneas de vaco se encuentren
ciones. limpias.
El recipiente para almacenar el desper- Confirmar el nivel del recipiente de desperdicio.
dicio se encuentra lleno.
El filtro de la lnea se encuentra hme- Verificar el estado e integridad del filtro del sis-
do o bloqueado. tema de succin.
La punta de la pipeta no est colocada Examinar la colocacin de las puntas en la
y no llega hasta el fondo de los pozos. pipeta.
Se utiliz una microplaca diferente en Verificar el tipo de placa que requiere el ensayo.
el ensayo.
El lavador no ha sido purgado adecua- Revisar el proceso de purga.
damente.
El operador no ha seguido las instruc- Examinar el proceso recomendado por el fa-
ciones del fabricante correctamente. bricante. Efectuar los ajustes requeridos.
Se coloc la placa en el lavador, sin la Revisar la colocacin de la placa en el lavador.
alineacin correcta.
27
El ciclo de lavado se desarrolla de for- Se agot la reserva de la solucin de Examinar el recipiente de almacenamiento de
ma inadecuada. lavado. la solucin de limpieza. Reponer el volumen
faltante.
El lavador no fue purgado adecuada- Limpiar adecuadamente para homogeneizar
mente al inicio del ciclo de trabajo. la humedad en cada uno de sus componentes
y que se eliminen las burbujas de aire.
El volumen dispensado de solucin de la- Verificar los volmenes de solucin requeridos
vado ha sido programado errneamente. para cada tipo de prueba y cada tipo de placa.
La placa fue colocada de forma inco- Comprobar la correcta instalacin de la placa
rrecta en el lavador. en el lavador.
La altura de trabajo fue mal seleccionada. Revisar la altura de trabajo recomendada pa-
ra cada tipo de placa.
Las placas utilizadas son diferentes a Verificar que las placas utilizadas sean com-
las recomendadas por el fabricante. pletamente compatibles con el lavador.
No se mantienen los niveles de fluido
adecuado en los pozos.
El tubo de suministro de la solucin de Revisar las especificaciones del fabricante. Co-
lavado no es del dimetro ni del espe- rregir si es del caso.
sor definido por el fabricante.
La presin es insuficiente para entregar Revisar el sistema de suministro y los conduc-
la cantidad adecuada de solucin de tos de suministro. Puede haber una obstruc-
lavado. cin en la lnea de llenado.
El recipiente de lavado presenta creci- El sistema no se usa frecuentemente.
miento de hongos o bacterias.
No se utiliza un procedimiento de con- Revisar los procedimientos usados para impe-
trol adecuado (desinfeccin). dir el crecimiento de hongos o bacterias.
Los tubos y conectores no se cambian Verificar la frecuencia de cambio sugerida por
con la frecuencia requerida. el fabricante y/o por el departamento tcnico.
La solucin de lavado se ha contaminado. Confirmar los procedimientos utilizados en la
preparacin y manejo de la solucin de lava-
do, a fin de determinar la causa de la contami-
nacin y eliminarla.
No se ha efectuado el mantenimiento Revisar las fechas previstas para efectuar el
de acuerdo a la programacin. mantenimiento. Informar a los responsables.
DEFINICIONES BSICAS pruebas de ELISA. PBS es el acrnimo de

Phosphate Buffer Solution. Est compuesto
Bomba de desplazamiento positivo. Dis- por las siguientes sustancias: NaCl, KCl, NaH-
positivo conformado por un mbolo que se PO42H2O y KH2SO4. Las casas productoras su-
desplaza a lo largo de un cilindro. El mecanis- ministran los boletines tcnicos que indican
mo es similar al que presenta una jeringa. Es- las proporciones e instrucciones de cmo pre-
t dotado de un conjunto de vlvulas para pararse. En general se mezcla una parte de
controlar los flujos hacia y desde la bomba. PBS, con 19 partes de agua desionizada.
Buffer. Solucin que mantiene un valor cons- Placa (de ELISA). Dispositivo de dimensiones
tante y conocido de pH a una temperatura estandarizadas diseado para colocar las mues-
dada. tras que requieren ser analizadas mediante la
tcnica de ELISA. En general existen disposicio-
PBS. Una de las soluciones que se utiliza pa- nes de 96, 384 y 1 536 pozos. Se fabrican en
ra efectuar las operaciones de lavado en las plsticos como poliestireno y polipropileno.
28
Lavador de ELISA 2
Existen tambin placas que han recibido tra- TMB/H2O2. (Tetrametilbenzidina/Perxido de

tamientos especiales para facilitar la realiza- hidrgeno). Reactivo que se emplea para ve-
cin de pruebas. rificar la calidad del lavado de los pozos utili-
zados en la tcnica ELISA.
Bibliografa
ELISA Check Plus, Panbio, Cat. N E-ECP01T, Brisbane, 2004.
(http://www.panbio.com.au/prodinfo/E-ECP01T.pdf)
Good technique for ELISA Assay, GTI, Inc.

(http://www.gtidiagnostics.com/forms %26docs/good_elisa_techniques_062304.pdf)
Solid Phase Guide, NUNC, Brand Products, Introduction to Solid Phase Techniques.
(http://www.nuncbrand.com/PDF/Guides%20and%20Manuals/Guide%20to%20Solid%20P-
hase.pdf)

Zoon, Kathryn, Recommendations to users of medical devices that test for infectious disea-
se markers by enzyme immunoassay (EIA) test systems, Division of Blood Applications, Bet-
hesda, MD. (http://www.fda.gov/cber/bldmem /122094.txt)
29
30
CAPTULO 3
Analizador de pH
15-164 Medidores de pH
ANALIZADOR DE pH [HCO3]. El organismo mantiene el equilibrio

acido-bsico a travs de los riones, rganos en
El analizador de pH se utiliza para determinar la los cuales se elimina cualquier exceso que se pre-
concentracin de iones del gas hidrgeno [H+] sente. Es una de las caractersticas que vara de-
en una disolucin. Este equipo permite realizar pendiendo de factores como la edad o el estado
mediciones de la acidez de una solucin acuosa, de salud del paciente. Se presentan a continua-
siempre que el mismo sea utilizado de forma cin los valores tpicos de pH de algunos fluidos
cuidadosa y se ajuste a procedimientos plena- corporales.
mente comprobados. A los analizadores de pH
se les denomina, adems, pHmetros, monitores Tabla 1: Valores de pH de algunos fluidos orgnicos
de pH o potencimetros.
FLUIDO VALOR DE pH
Bilis 7,8 8,6
PROPSITO DEL EQUIPO
Saliva 6,4 6,8
El analizador de pH es un instrumento de uso Orina 5,5 7,0
comn en cualquier campo de la ciencia relacio- Jugo gstrico 1,5 1,8
nado con soluciones acuosas. Se utiliza en reas
como la agricultura, el tratamiento y purifica- Sangre 7,35 7,45
cin de agua, en procesos industriales como los
petroqumicos, fabricacin de papel, alimentos,
metalmecnica, farmacia e investigacin y desa- FOTOGRAFAS Y ELEMENTOS DEL
rrollo, entre otros. En el laboratorio de salud, las ANALIZADOR DE pH
aplicaciones del instrumento estn relacionadas
con el control de medios de cultivo, contro- Fotografa
lar y/o medir la alcalinidad o acidez de caldos y
buffer. En equipos especializados de diagnstico
de laboratorio, se usan los mismos principios uti-
lizando microelectrodos para medir la acidez o
alcalinidad de los componentes lquidos de la
sangre, en donde la sustancia ms importante es
el agua que contiene gran cantidad de sales y
sustancias orgnicas disueltas. El pH del plasma
sanguneo es una de las caractersticas que per-
mite evaluar y determinar el estado de salud de
un paciente; su valor vara normalmente en el
plasma entre 7,35 y 7,45. Dicho valor est rela- Elemento
cionado con el metabolismo del paciente, pro- Analizador de pH con brazo portaelectrodo y electrodo
ceso en el cual ocurre multitud de reacciones
que resultan inherentes al proceso vital, en las 1. Brazo portaelectrodo y electrodo
cuales se producen y eliminan cidos y bases 2. Transformador
que, en condiciones normales, se mantienen en 3. Control ajuste temperatura
equilibrio. Los cidos liberan constantemente io- 4. Controles de calibracin Cal 1 y Cal 2
nes [H+] que el organismo neutraliza o equilibra 5. Control selector de funciones Stand by, mV, pH
mediante la liberacin de iones de bicarbonato
31
Fotografa del tubo interior, est el extremo del ctodo
del electrodo de referencia. El extremo an-
dico se envuelve as mismo en el exterior del
tubo interno y termina con el mismo tipo de
electrodo de referencia como el del tubo in-
terno. Ambos tubos, el interior y el exterior,
contienen una solucin de referencia, pero
nicamente el tubo exterior tiene contacto
con la solucin del lado externo del electrodo
de pH, a travs de un tapn poroso que acta
como un puente salino.
Dicho dispositivo se comporta como una cel-

da galvnica. El electrodo de referencia es el
tubo interno de la sonda analizadora de pH,
el cual no puede perder iones por interaccin
con el ambiente que lo rodea, pues como re-
ferencia debe permanecer esttico invaria-
ble durante la realizacin de la medida. El
tubo exterior de la sonda contiene el medio
al que se le permite mezclarse con el ambien-
te externo. Como resultado de lo anterior, es-
te tubo debe ser llenado peridicamente con
Elemento una solucin de cloruro de potasio (KCl) para
Electrodo de pH y brazo portaelectrodo reponer la capacidad del electrodo que se in-
hibe por prdida de iones y por evaporacin.
http://www.umd.umich.edu/casl/natsci/slc/slconline/PHM/select.html
El bulbo de vidrio en la parte inferior del
electrodo de pH que acta como elemento
de medicin est recubierto, tanto en el exte-
PRINCIPIOS DE OPERACIN rior como en el interior, con una capa de gel
hidratado. Los cationes metlicos [Na+] se di-
El analizador de pH mide la concentracin de funden en el gel hidratado fuera del vidrio y
iones [H+], utilizando un electrodo sensible a dentro de la solucin, mientras que los iones
los iones. En condiciones ideales dicho elec- [H+] de la solucin se difunden dentro del gel
trodo debera responder ante la presencia de hidratado. El gel hidratado es el que hace
un nico tipo de in, pero en la realidad que el electrodo de pH sea un electrodo se-
siempre se presentan interacciones o interfe- lectivo de iones. El in [H+] no cruza a travs
rencias con iones de otras clases presentes en de la membrana de vidrio del electrodo de
la solucin. Un electrodo de pH es general- pH, es el in sodio [Na+] el que cruza y permi-
mente un electrodo combinado, en el cual se te un cambio de la energa libre. Cuando un
encuentran integrados un electrodo de refe- in se difunde de una regin de actividad a
rencia y un electrodo de vidrio, en una misma otra, se presenta un cambio en la energa li-
sonda. La parte inferior de la sonda termina bre y esto es lo que mide el analizador de pH.
en un bulbo redondo de vidrio delgado. El Una breve explicacin de la teora sobre la
tubo interior contiene cloruro de potasio sa- cual se basa el funcionamiento de los electro-
turado (KCl), invariable y una solucin 0,1 M dos se incluye en el anexo ubicado al final del
de cido clorhdrico (HCl). Tambin, dentro captulo.
32
Analizador de pH 3
ESQUEMA DE UN ANALIZADOR DE pH
Ilustracin 4: Esquema de un analizador de pH
COMPONENTES con las letras Cal 1 y Cal 2. Si el analizador

de pH se calibra con una sola solucin, se
Un analizador de pH dispone generalmente utiliza el dial Cal 1 previendo que el dial
de los siguientes componentes: Cal 2 se encuentre graduado al 100 %. Si
el analizador de pH permite el uso de ca-
1. Un instrumento que contiene los cir- libraciones de dos puntos, se deber dis-
cuitos, los controles, los conectores y las poner de dos soluciones de pH conocido
pantallas o escalas de medicin. Dentro de que abarquen el rango de pH que ser
los componentes ms importantes del mis- medido. En este caso se utilizan los dos
mo, se encuentran los siguientes: controles (Cal 1 y Cal 2). En casos espe-
ciales debern efectuarse calibraciones
a) Un interruptor de encendido/apagado. de tres puntos (utilizando tres soluciones
No todos los analizadores de pH disponen de pH conocido).
de un interruptor de encendido y apaga-
do. Algunos simplemente disponen de un d) Selector de funciones. Las funciones in-
cable con un enchufe que permite conec- cluidas en el control en mencin, general-
tarlo a una toma elctrica adecuada. mente, son:
b) Control de temperatura. Este control I. Modo Stand by (0). En esta posicin los
permite realizar los ajustes relacionados electrodos se encuentran protegidos de co-
con la temperatura de la disolucin a la rrientes elctricas. Es la posicin utilizada pa-
cual se realiza la medicin del pH. ra mantener almacenado el equipo.
II. Modo pH. En esta posicin el equipo es-
c) Controles de calibracin. Dependiendo t en capacidad de realizar las mediciones
del diseo, los analizadores de pH pueden de pH, previas a los procedimientos de ca-
disponer de uno o dos botones o diales de libracin requeridos.
calibracin. Normalmente se identifican III. Modo milivoltios mV. En esta posicin el
33
equipo est en capacidad de realizar lectu- 2. Un electrodo de combinacin. Este dis-
ras de milivoltios. positivo debe ser almacenado en agua
IV. Modo ATC. Modo de ajuste automtico destilada y permanecer conectado al ins-
de la temperatura cuando se mide el pH trumento de medicin o metro. El electro-
en soluciones cuyas temperaturas varan. do de combinacin dispone de un electro-
Esta funcin requiere el uso de una sonda do de referencia conocido tambin como
especial. No todos los analizadores de pH electrodo calomel o calomelanos y un
disponen de este control. electrodo activo, integrados sobre un mis-
mo cuerpo. El diseo del mismo vara de-
pendiendo del fabricante.
Ilustracin 5: Clases de electrodos
CIRCUITO TPICO de un analizador de pH. Cada fabricante dis-

pone de sus propios diseos y variantes.
A continuacin, se incluye un circuito tpico
de los que conforman el sistema de control
Ilustracin 6: Circuito de control analizador de pH
34
Analizador de pH 3
Tabla 2: Descripcin elementos circuito de control
SISTEMA ELEMENTO DESCRIPCIN

Alimentacin y rectificacin elctrica Transformador 110 V/12 V AC Dispositivo para convertir el voltaje de red
110 V a 12 V AC
Diodos rectificadores 1N4002 Diodo para controlar la forma de la onda y ga-
rantizar que la misma es positiva
Condensadores electrolticos 3 300 mi- Condensadores para amortiguar el voltaje DC
crofaradios (fd) (2) obtenido por los diodos
Reguladores de tres terminales (7812, Dispositivo para regular el voltaje resultante de la
7912) interaccin entre diodos y condensadores
Condensadores electrolticos de 0,1 mi- Dispositivos usados para lograr estabilidad en al-
crofaradios (fd) (2) ta frecuencia
Lmpara de seal 12 V DC Lmpara que indica si el equipo est prendido
Medicin de pH y milivoltios Amplificador dual de modo no inverti-
do TL081
Resistencia (R1) 9,09 K (ohm) Circuito milivoltios
Resistencia (R2) 1 K (ohm) Circuito milivoltios
Resistencia (R3) 560 K (ohm) Circuito pH
Resistencia variable (R4) 10 K (ohm) Circuito pH
Resistencia (R5) 30 K (ohm) Resistencia a tierra
La ganancia del circuito est gobernada me-
diante la siguiente ecuacin:
Ganancia = 1+(R3+PxR4)/R5+(1P)xR4.
Seccin de salida Voltmetro DC de bajo costo Permite la lectura en milivoltios. El voltaje le-
do es 10 veces el voltaje de la celda, permi-
tiendo una resolucin de 0,1 milivoltios.
La lectura se realiza mediante la utilizacin de
electrodos de carbono/Quinhidrona.
SERVICIOS REQUERIDOS garantizar la calidad y exactitud de las lectu-

ras. Los procedimientos que se realizan son
El analizador de pH funciona mediante corrien- los siguientes:
te elctrica de las siguientes caractersticas:
1. Calibracin de un punto. Se realiza en con-
Energa tipo: monofsica diciones de funcionamiento y uso normal.
Voltaje: 110 V o 220 V Utiliza una solucin de referencia de pH
Frecuencia: 60 Hz conocido.
Tambin existen analizadores de pH de tipo 2. Calibracin de dos puntos. Se realiza si se

porttil que funcionan con bateras. requiere efectuar mediciones muy preci-
sas. Utiliza dos soluciones de referencia de
pH conocido. Igualmente, si el instrumen-
PROCEDIMIENTO GENERAL to se utiliza de forma espordica y si el
DE CALIBRACIN mantenimiento que recibe es eventual.
Los analizadores de pH normalmente deben

ser calibrados antes de ser utilizados, a fin de
35
Descripcin del proceso movimiento mediante el uso de un agi-
Frecuencia: Diaria tador magntico, cuidar que la barra de
agitacin no golpee el electrodo, pues
1. Calibrar el analizador de pH utilizando podra romperlo. Una solucin buffer se
una solucin de pH conocido (calibra- usa como solucin de calibracin, debido
cin de un punto). a que su pH es conocido y as se manten-
dr aun en el caso de que se presente
1.1. Conectar el equipo a una toma elctrica una pequea contaminacin. Por lo ge-
adecuada al voltaje del mismo. neral, se utiliza para este propsito una
solucin de pH = 72.
1.2. Ajustar el selector de temperatura a la
temperatura ambiente.
3. Girar el selector de funciones de la po-
1.3. Ajustar el metro. sicin Stand by a la posicin pH.
1.4. Retirar los electrodos del recipiente de 3.1. Esta accin conecta, en el analizador de
almacenamiento. Los electrodos debe- pH, el electrodo a la escala de medida de
rn estar siempre almacenados en una pH para que la lectura pueda ser realizada.
solucin adecuada. Algunos se mantie-
nen en agua destilada, pero otros en 3.2. Ajustar el metro para leer el pH de la so-
una solucin diferente que recomienda lucin de calibracin, utilizando el botn
el fabricante del electrodo1. Si por algu- marcado Cal 1, de forma que se pueda
na circunstancia el electrodo se seca, es leer el pH de la solucin de calibracin.
necesario dejarlo en remojo al menos 24
horas antes de volverlo a utilizar. Por ejemplo: pH = 7. La aguja podra osci-
lar ligeramente en unidades de 0,1 pH; en
1.5. Enjuagar el electrodo con agua destila- promedio la lectura debera ser de 7. Mi-
da, sobre un vaso de precipitado vaco. rar el metro la escala de lectura de for-
ma perpendicular, para evitar o eliminar
1.6. Secar el electrodo con un elemento que errores de paralelaje errores de lectura
absorba la humedad residual superficial, producidos por la sombra de la aguja del
pero que no impregne el electrodo. No metro, visible en el espejo de la escala de
frotar el electrodo. Este procedimiento de- lectura. El analizador de pH se encuentra
ber realizarse siempre que los electrodos entonces listo calibrado, para efectuar
se utilicen en varias soluciones, para dismi- lecturas correctas del pH.
nuir la posibilidad de contaminacin.
3.3. Colocar el selector de funciones en la po-
sicin Stand by.
2. Colocar los electrodos en la solucin
de calibracin.
4. Medir el pH de una solucin
2.1. Sumergir el electrodo en la solucin de
estandarizacin, de forma que la parte 4.1. Retirar el electrodo de la solucin de
inferior del mismo no toque el fondo del calibracin.
vaso de precipitados. Esto disminuir el
riesgo de que el electrodo se rompa con- 4.2. Enjuagar el electrodo con agua destilada
tra el fondo del recipiente. Si el ensayo y secarlo con un elemento secante.
requiere que la solucin se mantenga en
1
Verificar el tipo de solucin buffer que recomienda el fabricante del electrodo.
2
Verificar el tipo de de solucin de calibracin que recomienda el fabricante del electrodo.
36
Analizador de pH 3
4.3. Colocar el electrodo en la solucin de pH Procedimientos generales de manteni-

desconocido. miento al cuerpo del analizador de pH
Frecuencia: Cada seis meses
4.4. Girar el selector de funciones de la posi-
cin Stand by a la posicin pH. 1. Examinar el exterior del equipo y evaluar su
condicin fsica general. Verificar la limpieza
4.5. Leer el pH de la solucin bajo anlisis, en de las cubiertas y el ajuste de las mismas.
la escala del metro o la pantalla del ana-
lizador de pH. Registrar la lectura obte- 2. Probar el cable de conexin y su sistema de
nida en la hoja de control. acoples. Comprobar que se encuentran en
buenas condiciones y que estn limpios.
4.6. Girar de nuevo el selector de funciones a
la posicin Stand by. 3. Examinar los controles del equipo. Verifi-
car que se encuentran en buen estado y
Si se requiere medir el pH de ms de una solu- que se pueden accionar sin dificultad.
cin, repetir los procedimientos anteriormen-
te descritos. Cuando son numerosas las solu- 4. Verificar que el metro se encuentra en
ciones a las cuales se les mide el pH, se debe buen estado. Para esta verificacin el ins-
calibrar el analizador de pH de forma frecuen- trumento debe estar desconectado de la l-
te, siguiendo los lineamientos presentados. nea de alimentacin elctrica. Ajustar la
aguja indicadora a cero (0), utilizando el
tornillo de graduacin que generalmente
5. Apagar el analizador de pH. se encuentra bajo el pivote de la aguja in-
dicadora. Si el equipo dispone de pantalla
5.1. Remover el electrodo de la ltima solu- indicadora, comprobar su funcionamiento
cin analizada. normal.
5.2. Enjuagar el electrodo con agua destilada 5. Confirmar que el indicador de encendido
y secarlo con un elemento secante que bombillo o diodo opere normalmente.
no lo impregne.
6. Verificar el estado de brazo portaelectro-
5.3. Colocar el electrodo en el recipiente de do. Examinar el mecanismo de montaje y
almacenamiento. fijacin del electrodo, a fin de prever que
el electrodo no se suelte. Comprobar que
5.4. Verificar que el selector de funciones es- el ajuste de alturas opere correctamente.
t en la posicin Stand by.
7. Revisar las bateras si aplica; cambiar si
5.5. Accionar el interruptor de apagado o es necesario.
desconectar el cable de alimentacin, si
carece de este control. 8. Efectuar una prueba de funcionamiento
midiendo el pH de una solucin conocida.
5.6. Limpiar el rea de trabajo.
9. Inspeccionar las corrientes de fuga y la co-
nexin a tierra.
MANTENIMIENTO GENERAL DEL

ANALIZADOR DE pH MANTENIMIENTO BSICO DEL ELECTRODO
Los analizadores de pH disponen de dos pro- Frecuencia: Cada cuatro meses

cedimientos generales de mantenimiento: los
dirigidos al cuerpo del analizador y los dirigi- El electrodo detector requiere manteni-
dos a la sonda detectora de pH (electrodos). miento peridico de la solucin conductora,
para que pueda obtener lecturas precisas.
37
Los procesos recomendados para reponer la 9. Limpieza general. Remojar el electrodo de
solucin electroltica son los siguientes: pH en una solucin 0,1 M de cido clorh-
drico (HCl) o 0,1 M de HNO3, durante 20
1. Retirar el electrodo detector de la solucin minutos. Enjuagar con agua corriente an-
buffer de almacenamiento. tes de usar.
2. Enjuagar el electrodo detector con abun- 10. Remocin de depsitos y bacterias. Remo-
dante agua destilada. jar el electrodo de pH en una disolucin
1:10 de blanquedor domstico, durante
3. Retirar la cubierta superior del electrodo 10 minutos. Enjuagar con agua abundan-
detector. te antes de usar.
4. Llenar el electrodo detector con una solu- 11. Limpieza de aceite y grasa. Enjuagar el
cin saturada de cloruro de potasio (KCl). electrodo de pH con un detergente medio
Utilizar la jeringa o aplicador que acompa- o con metil alcohol. Enjuagar con agua
a la solucin de KCl. El llenado se efecta antes de usar.
a travs del conducto que protege la tapa
superior del electrodo. Verificar que la 12. Limpieza de depsitos de protenas. Re-
punta de la jeringa no toque el interior del mojar el electrodo de pH en pepsina al 1 %
electrodo. en cido clorhdrico 0,1 M, durante 5 mi-
nutos. Enjuagar con agua antes de usar.
5. Envolver una pequea parte de la tapa su-
perior del electrodo para cubrir la apertu- Despus de realizar cualquier operacin de
ra superior del mismo. limpieza, es conveniente enjuagar con agua
desionizada y rellenar el electrodo de refe-
6. Usar la punta de la aguja de la jeringa pa- rencia antes de usar.
ra perforar el rea de la tapa que cubre la
abertura, a fin de permitir que exista un
equilibrio de presiones entre el interior y Otros cuidados
el exterior del electrodo.
13. No golpear el electrodo. Dado que su es-
7. Enjuagar el electrodo con agua destilada. tructura generalmente es de vidrio y este
material es muy frgil se rompe antes de
8. Mantener el electrodo dentro de la solu- que se deforme, es necesario manipular-
cin buffer de almacenamiento, siempre lo de forma cuidadosa, evitando que sufra
que no est en uso. golpes, choques o cadas.
14. Recordar que el electrodo es un elemento de

Limpieza del electrodo consumo y que tiene una vida til limitada.
La clase de limpieza requerida por el electro- 15. Mientras no est en uso, mantener el
do depende del tipo de contaminante que lo electrodo dentro de la solucin buffer de
haya podido afectar. Se resumen a continua- almacenamiento.
cin los procedimientos ms comunes.
38
Analizador de pH 3

El analizador de pH presenta lecturas Burbujas de aire en el electrodo. Remojar el electrodo para eliminar las burbujas.
inestables.
Electrodo sucio. Limpiar el electrodo y recalibrar.
Electrodo muy superficial. Verificar que la muestra cubre perfectamente
la punta del electrodo.
Electrodo roto. Reemplazar el electrodo.
La respuesta del electrodo es lenta. Electrodo sucio o grasoso. Limpiar el electrodo y recalibrar.
La pantalla presenta mensaje de error. Operacin incorrecta o seleccin err- Verificar modo de operacin seleccionado. Se-
nea del modo de operacin. leccionar una operacin vlida.
La pantalla presenta mensaje de cali- Error de calibracin. Recalibrar analizador de pH.
bracin o error.
Valor de buffer errneo en la calibracin. Verificar los valores del buffer utilizado.
Electrodo sucio. Limpiar electrodo y calibrar.

Analizador de pH encendido, pero no Bateras mal instaladas. Verificar polaridad de las bateras.
hay seal en la pantalla (*).
Bateras agotadas. Reemplazar bateras.
Indicador de bateras centellea (*). Bateras agotadas. Reemplazar bateras.
(*) Causa probable en equipos que funcionan con bateras.
DEFINICIONES BSICAS Una sustancia cida tiene una mayor canti-

dad de iones [H+] que la que presenta el agua
Buffer. Solucin que mantiene un valor constan- pura; una sustancia bsica presenta mayor
te y conocido de pH a una temperatura dada. cantidad de iones [OH] que los que presenta
el agua pura. La concentracin de las sustan-
pH. Medida de la concentracin del in hi- cias se expresa en moles (M).
drgeno (H+) dada en moles (M) por litro en
una disolucin. El concepto de pH fue pro- En el agua pura se sabe que la concentracin
puesto por Srensen y Lindstrm-Lang en de iones [H+] y [OH] es de 1,0 x 107 M, por lo
1909, con el fin de facilitar el manejo de la que la misma se considera una sustancia neu-
expresin de concentraciones de iones que tra. En realidad es un electrolito dbil que se
resultan muy bajas. Se define mediante la si- disocia segn la ecuacin:
guiente ecuacin:
H2O [H+] [OH]
pH = Log[H ] [H ] = 10
+ + pH
En toda disolucin acuosa existe un equilibrio

Es una medida de la acidez de la disolucin. que puede expresarse como:
Ejemplo: en el agua la concentracin de [H+] es
1,0 x 107 M, siendo en consecuencia el pH = 7. [H+] [OH]
=K
Esto permiti expresar el rango de concen- H2O
traciones de 1 a 1014 M, simplemente como
de cero (0) a 14. Existen diversos sistemas pa- Si la disolucin es diluida, la concentracin
ra medir la acidez de una solucin. Una sus- del agua no disociada puede considerarse
tancia es cida cuando, disuelta en agua, la constante y por ello,
misma es capaz de producir iones H+; una
sustancia es bsica cuando, disuelta en agua, [H+] [OH] = [H2O]K = Ka
es capaz de producir iones [OH] (hidrxidos).
39
La nueva constante Ka se denomina constan- potasio (KCl) de concentracin 0,1 M. Se re-
te de disociacin o producto inico del agua presenta as: Cl2[Hg2Cl2, KCl]Hg.
y su valor es 1,0x1014, a 25 C.
Electrolito. Solutos que producen soluciones
[H+] [OH] = 1,0 x 10-14 conductoras tales como el NaCl cloruro de
X x X = 1,0 x 10-14 sodio y el NH4OH.
X2 = 1,0 x 10-14
X = 1,0 x 10-7 Gel. Tipo de mezcla en la cual un lquido se
encuentra disperso a travs de un slido.
En el agua pura las concentraciones de H+ y OH Ejemplos: jaleas, gelatinas.
son de 1,0 x 107 M, concentracin que es muy
pequea, si se tiene en cuenta que la concentra- In. Cuando un tomo neutro gana o pierde
cin molar del agua es de 55,4 mol/litro. un electrn, forma una partcula a la que se
conoce con el nombre de in. Si el tomo
Disociacin. Fenmeno por el cual se pre- pierde un electrn, se convierte en un in de
senta un rompimiento de las molculas como carga positiva y se le denomina catin. Si el
resultado de la disolucin de una sustancia tomo gana o captura un electrn, se con-
en otra y que produce partculas cargadas vierte en un in de carga negativa y se le de-
elctricamente (iones). nomina anin.
Disolucin. Mezcla homognea de propie- Mol. Cantidad de cualquier sustancia cuya

dades uniformes de dos o ms sustancias. Se masa, expresada en gramos, es numricamen-
caracteriza por no existir interaccin qumica te igual a la masa atmica de dicha sustancia.
entre los componentes de la mezcla. El com-
ponente que existe en mayor proporcin y Molaridad. Como el nmero de moles (M)
que generalmente se encuentra en estado l- de una sustancia en un litro de solucin. (N-
quido se denomina disolvente y el que se en- mero de moles de soluto en un litro (l) de so-
cuentra en menor cantidad, soluto. lucin). El parntesis cuadrado alrededor del
smbolo del in indica que se trata de una
Electrodo sensitivo a los iones. Dispositivo concentracin molar.
que produce una diferencia de potencial que es
proporcional a la concentracin de un analito. Solucin. Mezcla fsicamente homognea
de dos o ms sustancias, cuyas partes son muy
Electrodo calomel. Electrodo de referen- pequeas para diferenciarlas a simple vista o
cia que se utiliza, junto con el electrodo ac- aun con el microscopio. La composicin y de-
tivo, en la determinacin del pH de una so- ms propiedades de la solucin son iguales
lucin. Dicho electrodo est construido con en todas sus partes.
base en mercurio (Hg), una capa de dimer-
curio (Hg2Cl2) y una disolucin de cloruro de
40
Analizador de pH 3
Bibliografa
Aston, R., Principles of Biomedical Instrumentation and Measurement, Merrill Publishing
Company, 1990.
Basic Ph Meter PH-20, Operation Manual, Sartorius, Publication N WPB6001-e00062.

(www.sartorius.com)
Castellanos, J., Medidor de pH en sangre, Fondo Nacional Hospitalario, Divisin de Ingenie-

ra y Mantenimiento, 1989.
Healthcare Product Comparison System, ECRI, 2002.
Ram S., Lamba, De La Cutara, R., Locally Produced Low Cost Equipment Project, UNESCO-
IUPAC.
Restrepo, F., Vargas L., Qumica bsica, Medelln, Editorial Bedout.
Sienko, M., Plane R., Qumica, Madrid, Aguilar S.A. de Ediciones, 1971.
pH Electrode care and maintenance, Eutech Instruments.
Potts, R., The pH Meter, Science learning Center, University of Michigan - Dearborn.
(http://www.umd.umich.edu/casl/natsci/slc/slconline/ PHM/ph-home.htm)
The pH Meter. (www.wikipedia.org)

41
Anexo: Teora del pH
Los electrodos de pH idealmente se comportan como una celda electroqumica y reaccionan a la

concentracin de iones [H+]. Esto genera una fuerza electromotriz (FEM) que, de acuerdo con la
ley de Nernst, se plantea segn la siguiente ecuacin:
RT
E = E + lnaHL
nF
Si se tiene en cuenta que:
pH = -log aHL donde a es la concentracin efectiva de iones (Actividad)
Si n = 1, la ecuacin entonces se reescribe as:
RT
E = E - pH
F
E es una constante dependiente de la temperatura. Si se sustituye E por ET, la calibracin re-

sulta ms sencilla. Los electrodos reales no siempre siguen la pendiente de la ecuacin de Nernst.
Si se introduce el concepto de sensibilidad (s), la ecuacin puede reescribirse as:
RT
E = ET - s pH
F
Los valores de E y s se encuentran midiendo la FEM en dos soluciones con pH conocido. S es la

pendiente de E versus pH, mientras que E se encuentra de la interseccin con el eje y. Cuando E
y s son conocidas, la ecuacin puede reescribirse y el pH puede calcularse as:
ET - E
pH =
RT
s
F
42
CAPTULO 4
Balanzas
10-261 Balanzas
10-263 Balanzas electrnicas
18-449 Balanzas electrnicas analticas
18-451 Balanzas microelectrnicas, microanalticas
BALANZAS
La balanza es un instrumento que mide la

masa de un cuerpo o sustancia, utilizando co-
mo medio de comparacin la fuerza de la
gravedad que acta sobre el cuerpo. La pala-
bra proviene de los trminos latinos bis que
significa dos y linx, plato. Se debe tener en
cuenta que el peso es la fuerza que el campo
gravitacional ejerce sobre la masa de un
cuerpo, siendo tal fuerza el producto de la
masa por la aceleracin local de la gravedad.
[F = m x g]. El trmino local se incluye para
destacar que la aceleracin depende de fac- Balanza electrnica
tores como la latitud geogrfica, la altura so-
bre el nivel del mar y la densidad de la tierra,
en el lugar donde se efecta la medicin. Di- PROPSITO DE LA BALANZA
cha fuerza se mide en Newton. La balanza
tiene otros nombres, entre los que destacan La balanza se utiliza para medir la masa de un
bscula y pesa. cuerpo o sustancia o tambin el peso de los mis-
mos, dado que entre masa y peso existe una re-
lacin bien definida. En el laboratorio se utiliza
FOTOGRAFAS DE BALANZAS1 la balanza para efectuar actividades de control
de calidad con dispositivos como las pipetas,
para preparar mezclas de componentes en pro-
porciones predefinidas y para determinar densi-
dades o pesos especficos.
PRINCIPIOS DE FUNCIONAMIENTO
Las balanzas se diferencian entre s por el di-

seo, los principios utilizados y los criterios de
metrologa que utilizan. En la actualidad po-
dra considerarse que existen dos grandes
grupos: las balanzas mecnicas y las balanzas
electrnicas.
Balanza mecnica
1
http://www.ohaus.com/input/media/picture_s/EP64C_s.jpg / http://www.ohaus.com/ products/ind/ mechanical.asp
43
Balanzas mecnicas
Algunas de las ms comunes son las siguientes:
1. Balanza de resorte. Su funcionamiento

est basado en una propiedad mecnica de
los resortes, que consiste en que la fuerza Bandeja
que ejerce un resorte es proporcional a la Escala macro
Pesa deslizante micro
constante de elasticidad del resorte [k] Pesa deslizante macro
multiplicada por la elongacin del mismo Escala micro
[x] [F = -kx]. Lo anterior implica que mien-
tras ms grande sea la masa [m] que se co- Ilustracin 8: Balanza de pesa deslizante
loca en el platillo de la balanza, mayor ser
la elongacin, siendo la misma proporcio-
nal a la masa y a la constante del resorte. La
3. Balanza analtica. Funciona mediante la
calibracin de una balanza de resorte de-
comparacin de masas de peso conocido con
pende de la fuerza de gravedad que acta
la masa de una sustancia de peso desconoci-
sobre el objeto, por lo que deben calibrarse
do. Est construida con base en una barra o
en el lugar de empleo. Se utilizan si no se
palanca simtrica que se apoya mediante un
requiere gran precisin.
soporte tipo cuchilla en un punto central de-
nominado fulcro. En sus extremos existen
unos estribos o casquillos que tambin estn
soportados mediante unas cuchillas que les
permiten oscilar suavemente. De all se en-
cuentran suspendidos dos platillos. En uno se
colocan las masas o pesas certificadas y en el
otro aquellas que es necesario analizar. Todo
el conjunto dispone de un sistema de ase-
guramiento o bloqueo que permite a la pa-
lanca principal reposar de forma estable
cuando no es utilizada o cuando se requie-
ren modificar los contrapesos. Dispone de
una caja externa que protege la balanza de
las interferencias, como corrientes de aire,
que pudieran presentarse en el lugar donde
se encuentra instalada. En la actualidad, se
Ilustracin 7: Balanza de resorte considera que una balanza analtica es aque-
lla que puede pesar diez milsimas de gramo
(0,0001 g) o cien milsimas de gramo (0,00001 g);
tienen una capacidad que alcanza general-
2. Balanza de pesa deslizante. Dispone de
mente hasta los 200 gramos.
dos masas conocidas que se pueden des-
plazar sobre escalas una con una gradua-
cin macro y la otra con una graduacin
micro; al colocar una sustancia de masa
desconocida sobre la bandeja, se determi-
na su peso deslizando las masas sobre las
escalas mencionadas hasta que se obtenga
la posicin de equilibrio. En dicho momen-
to se toma la lectura sumando las cantida-
des indicadas por la posicin de las masas
sobre las escalas mencionadas.
Ilustracin 9: Balanza analtica
44
Balanzas 4
Para utilizarlas se requiere disponer de un 5. Balanza de sustitucin. Es una balanza

juego de masas certificadas, el cual dispo- de platillo nico. Se coloca sobre el platillo
ne de piezas con masa de diversa magni- de pesaje una masa desconocida que se
tud. El juego est por lo general compues- equilibra al retirar, del lado del contrape-
to por las siguientes piezas: so, masas de magnitud conocida, utilizan-
do un sistema mecnico de levas hasta que
se alcance una posicin de equilibrio. El
Tipo de masa Capacidad2
fulcro generalmente est descentrado con
Piezas simples 1 g, 2 g, 5 g, 10 g, 20 g, 50 g, relacin a la longitud de la viga de carga y
100 g, 200 g y 500 g colocado cerca del frente de la balanza.
Piezas fraccionales 2 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 50 mg, Cuando se coloca una masa sobre el plati-
100 mg, 200 mg y 500 mg llo de pesaje y se libera la balanza del me-
canismo de bloqueo, el movimiento de la
viga de carga se proyecta mediante un sis-
4. Balanza de plato superior. Este tipo de tema ptico a una pantalla localizada en
balanza dispone de un platillo de carga cola parte frontal del instrumento.
locado en la parte superior, el cual es so-
portado por una columna que se mantiene
en posicin vertical por dos pares de guas
que tienen acoples flexibles. El efecto de la
fuerza, producido por la masa, es transmi-
tido desde algn punto de la columna ver-
tical o bien directamente o mediante al-
gn mecanismo a la celda de carga. La exi-
gencia de este tipo de mecanismo consiste
en mantener el paralelismo de las guas
con una exactitud de hasta 1 m. Las
desviaciones de paralelismo causan un
error conocido como de carga lateral que
se presenta cuando la masa que est sien-
do pesada muestra diferencias, si la lectu-
ra se toma en el centro del platillo o en Ilustracin 11: Balanza de sustitucin
uno de sus extremos. El esquema que se in-
cluye a continuacin explica el principio de
operacin, el cual algunos fabricantes han Verificacin de operacin
introducido a las balanzas electrnicas.
A continuacin, se describe el procedimiento
utilizado para verificar el funcionamiento de
una balanza mecnica tpica. La descripcin del
proceso se basa en la balanza de sustitucin.
1. Verificar que la balanza est nivelada. La ni-

velacin se logra mediante mecanismos de
ajuste roscado, ubicados en la base de la ba-
lanza. El nivel se logra centrando una burbu-
ja sobre una escala visible en la parte frontal
de la base de la balanza.
2. Comprobar el punto cero. Colocar en cero los

Ilustracin 10: Balanza de plato superior controles y liberar la balanza. Si la escala de
lectura no se mantiene en cero, es necesario
2
Manual of Basic Techniques for a Health Laboratory, Geneve, World Health Organization, 2nd. Edition, 2003.
45
ajustar el mecanismo de ajuste de cero que es 3. Verificar el ajuste de sensibilidad.
un tornillo estriado ubicado en posicin hori- 4. Limpiar el platillo de pesaje.
zontal cerca al fulcro. Para esto es necesario
bloquear la balanza y ajustar suavemente el Frecuencia: Anual
citado mecanismo. El proceso contina hasta 1. Calibrar la balanza y documentar el proceso.
que el cero ajuste correctamente en la escala 2. Desensamblar y limpiar los componentes in-
de lectura. ternos. Se debe seguir el proceso definido
por el fabricante, o contratarse una firma es-
3. Verificar y ajustar la sensibilidad. Esta se reajus- pecializada para el efecto.
ta siempre que se haya efectuado algn ajus-
te interno. Se efecta con una pesa patrn co-
nocida y se procede siguiendo estos pasos: Balanzas electrnicas
a) Bloquear la balanza. Las balanzas electrnicas involucran tres ele-

b) Colocar un peso patrn en el platillo, equi- mentos bsicos3:
valente al rango de la escala ptica.
c) Colocar la graduacin de la dcada de pe- 1. El objeto a ser pesado que se coloca sobre el
so inferior en uno (1). platillo de pesaje ejerce una presin que est
d) Liberar la balanza. distribuida de forma aleatoria sobre la super-
e) Ajustar el punto cero. ficie del platillo. De all, mediante un meca-
f) Colocar nuevamente la graduacin de la d- nismo de transferencia palancas, apoyos,
cada de peso inferior en cero (0). La balanza guas, se concentra la carga del peso en
deber marcar 100. Si la escala marca menos una fuerza simple [F] que puede ser medida.
o ms que 100, se debe ajustar el control de [F = Pa] La integral de la presin sobre el
sensibilidad. Esto supone bloquear la balan- rea permite calcular la fuerza.
za, levantar la cubierta superior y girar el tor-
nillo de sensibilidad: si la escala marca ms de 2. Un transductor de medida, conocido con el
100, girar el tornillo en el sentido de las agujas nombre de celda de carga, produce una seal
del reloj, es decir, hacia abajo. Si la escala mar- de salida proporcional a la fuerza de carga, en
ca menos de 100, es necesario desenroscar el forma de cambios en el voltaje o de frecuencia.
tornillo. Luego se repite el proceso hasta que
quede ajustada la balanza (ajustar en cero y la 3. Un circuito electrnico anlogo digital que fi-
sensibilidad). nalmente presenta el resultado del pesaje en
forma digital.
4. Confirmar el freno del platillo. Este se en-
cuentra montado sobre un eje roscado que,
cuando est bloqueada la balanza, toca el
platillo para evitar que oscile. En caso de de-
sajuste se debe rotar suavemente el eje, has-
ta que la distancia entre el freno y el platillo
sea cero cuando la balanza est bloqueada.
Mantenimiento de la balanza mecnica
El mantenimiento de las balanzas mecnicas es-

t limitado a las siguientes rutinas:
Frecuencia: Diaria
1. Verificar el nivel.
2. Verificar la graduacin de cero.
Ilustracin 12: Elementos de las balanzas
electrnicas
3
Kupper, W., Balances and Weighing, Mettler Instrument Corp., Princeton-Hightstown, NJ.
46
Balanzas 4
Las balanzas de laboratorio operan de acuerdo al Sistema de procesamiento de la seal

principio de compensacin de fuerza electromag-
ntica, aplicable a desplazamientos o torques don- El sistema de procesamiento de la seal est
de se combina la exactitud de los componentes me- compuesto por el circuito que transforma la
cnicos con los sistemas automticos de lectura. seal elctrica, emitida por el transductor de
medida en datos numricos que pueden ser
Funcionamiento. Las partes mviles (platillo ledos en una pantalla. El proceso de la seal
de pesaje, columna de soporte [a], bobina, indi- comprende las siguientes funciones:
cador de posicin y carga [G] objeto en proce-
so de pesaje) son mantenidas en equilibrio en 1. Tara. Se utiliza para colocar en cero el va-
flotacin por una fuerza de compensacin [F] lor de la lectura, con cualquier carga den-
que es igual al peso. La fuerza de compensacin tro del rango de capacidad de la balanza.
es generada por el flujo de una corriente elctri- Se controla con un botn ubicado general-
ca, a travs de una bobina ubicada en el espacio mente en el frente de la balanza.
de aire existente en un electroimn magneto
cilndrico. La fuerza F es calculada mediante la 2. Control para ajuste del tiempo de integra-
ecuacin [F = I x l x B], donde: I = corriente cin. Los valores de peso son promediados
elctrica, l = longitud total del alambre de la durante un perodo predefinido de tiem-
bobina y B = intensidad de flujo magntico po. Dicha funcin es muy til cuando se re-
en el espacio de aire del electroimn. quiere efectuar operaciones de pesaje en
condiciones inestables. Por ejemplo: pre-
Con cualquier cambio en la carga peso/masa, sencia de corrientes de aire o vibraciones.
el sistema mvil mecnico responde, despla-
zndose verticalmente una fraccin de distan- 3. Redondeo del resultado. En general las ba-
cia, detectada por un fotosensor [e], que como lanzas electrnicas procesan datos interna-
resultado enva una seal elctrica al servoam- mente de mayor resolucin que aquellos
plificador [f] que cambia el flujo de corriente que se presentan en la pantalla. De esta
elctrica que pasa por la bobina del magneto forma se logra centrar exactamente la ba-
[c], de forma que el sistema mvil retorne a la lanza en el punto cero, cuando la balanza
posicin de equilibrio al ajustarse el flujo mag- es tarada. El valor interno neto se redon-
ntico en el electroimn. En consecuencia, el pe- dea en la pantalla.
so de la masa G se puede medir de forma indi-
recta, a partir del flujo de corriente elctrica que 4. Detector de estabilidad. Se utiliza en ope-
pasa por el circuito midiendo el voltaje [V], a tra- raciones de pesaje secuencial y permite
vs de una resistencia de precisin [R]. [V = I x R]. comparar los resultados entre s. Cuando
A la fecha han sido desarrollados muchos siste- el resultado se mantiene, es liberado y
mas que utilizan la electrnica para efectuar puesto en pantalla, aspecto que se detecta
mediciones muy exactas de masa y peso. El es- al encenderse el smbolo de la unidad de
quema que se presenta a continuacin explica la peso seleccionada.
forma en que funciona la balanza electrnica.
5. El procesamiento electrnico de las seales
permite disponer de otras funciones tales co-
mo conteo de partes, valor porcentual, valor
objetivo, entre otras. Dichos clculos son rea-
lizados por el microprocesador, de acuerdo
con las instrucciones que el operador ingresa
a travs del teclado de la balanza.
Clasificacin de balanzas
La Organizacin Internacional de Metrologa

Legal (OIML) ha clasificado las balanzas en
cuatro grupos:
Ilustracin 13: Principio fuerza de
compensacin
47
Balanzas 4
De este esquema es necesario destacar lo Operacin de la balanza electrnica

siguiente:
La operacin de una balanza electrnica mo-
1. Las funciones incorporadas pueden llegar derna est claramente definida en el manual
a ser numerosas. de operacin que suministran los fabrican-
2. Se pueden seleccionar diversas unidades tes. En general se debe cumplir el siguiente
de medida. procedimiento:
3. Es posible conocer la fecha y la hora en las
cuales se realizan las mediciones. 1. Permitir que la balanza equilibre sus condi-
4. Se pueden imprimir y documentar los pro- ciones con las del ambiente donde de en-
cedimientos realizados. cuentra instalada.
5. Es posible seleccionar el idioma.
2. Permitir que la balanza se precaliente antes
de iniciar las actividades. Normalmente basta
SERVICIOS REQUERIDOS que la misma se encuentre conectada al siste-
ma de alimentacin elctrico. Algunos fabri-
Para instalar y utilizar satisfactoriamente una cantes sugieren que se deje transcurrir un pe-
balanza, se requiere lo siguiente: rodo de tiempo de al menos 20 minutos,
desde el momento en que se energiza hasta
1. Disponer de un ambiente que no presente el momento en que se inicia la utilizacin de
corrientes de aire, cambios bruscos de la misma. Las balanzas analticas Clase I re-
temperatura y que est libre de polvo. quieren al menos 2 horas antes de iniciar su
utilizacin.
2. Tener un mesn perfectamente nivelado.
Es ideal una plataforma de alta inercia, ais- 3. Verificar que la balanza se encuentre calibra-
lada de las estructuras ubicadas en la ve- da. Las balanzas electrnicas por lo general
cindad, para reducir el efecto de las vibra- disponen de una calibracin hecha en fbrica,
ciones que emiten ciertos equipos como almacenada en la memoria, la cual puede uti-
centrfugas y refrigeradores. La misma de- lizarse si no se dispone de masas de calibra-
be tener un rea suficiente para instalar la cin. Si se requiere realizar la calibracin, se
balanza y aquel equipo auxiliar con el que debe disponer de masas calibradas para poder
se interacta en los procesos de pesaje. De efectuar el procedimiento que indique el fa-
igual manera se debe prever el espacio re- bricante. Las masas calibradas utilizadas deben
querido por los cables de interconexin, cumplir o exceder las tolerancias ASTM. Como
corriente elctrica, conexin al sistema de informacin general se incluye a continuacin
informacin, a la impresora, etc. una tabla que presenta las tolerancias acepta-
das para las masas ASTM Clase 15.
3. Evitar que en la vecindad se encuentren
instalados equipos que produzcan campos
magnticos elevados o vibraciones como Peso (gramos) Lmite superior (g) Lmite inferior (g)
centrfugas, motores elctricos, compreso-
100 100,0003 99,9998
res y generadores.
200 200,0005 199,9995
4. Evitar que se encuentre bajo la influencia 300 300,0008 299,9993
directa de los sistemas de aire acondicio- 500 500,0013 499,9988
nado corrientes de aire y de la luz solar.
1 000 1000,0025 999,9975
5. Disponer de una toma elctrica en buen esta- 2 000 2000,0050 1999,9950
do, dotada con polo a tierra provista de inte- 3 000 3000,0075 2999,9925
rruptores, que cumpla con la normatividad
5 000 5000,0125 4999,9875
elctrica vigente en el pas o el laboratorio.
5
Field Services Handbook for High Precision Scales, IES Corporation, Portland, Oregon, 2004.
49
4. Seguir las instrucciones que indica el fabri- fundamental se destaca que la calibracin se de-
cante en el manual de operacin. be realizar con base en los lineamientos de la
OIML o de otra entidad equivalente como puede
ser la Sociedad Americana para Ensayo de Mate-
Calibracin de las balanzas riales (ASTM), instituciones que han desarrollado
metodologas para clasificar las pesas o masas pa-
El proceso de calibracin de balanzas debe trn, utilizadas en los procesos mencionados. A
ser realizado por personal capacitado espec- continuacin, se incluye la tabla de clasificacin
ficamente en esta actividad. Como aspecto de pesas de referencia que utiliza la OIML.
Tabla de clasificacin de pesos de referencia OIML6
CLASE DESCRIPCIN TOLERANCIA INCERTIDUM- FRECUENCIA DE

BRE PERMITIDA RECALIBRACIN
E1 Pesas de acero inoxidable sin marcas o cma- 0,5 ppm en 1 kg 1/3 de la 2 aos
ra de ajuste tolerancia
E2 Pesas de acero inoxidable sin marcas o cma- 1,5 ppm en 1 kg 1/3 de la 2 aos
ra de ajuste tolerancia
F1 Pesas de acero inoxidable con botn roscado 5 ppm en 1 kg 1/5 de la 1 ao
para proteger cmara de ajuste tolerancia
F2 Pesas de bronce plateado 15 ppm en 1 kg 1/5 de la 1 ao
tolerancia
M1 Pesas de bronce que no se corroan o man- 50 ppm en 1 kg 1/5 de la 1 ao
chen o de fundicin de hierro con terminado tolerancia
en pintura de buena calidad
M2 Pesas de bronce o fundicin de hierro (pesas 200 ppm en 1 kg 1/5 de la 1 ao
de comercio) tolerancia
Cualquier proceso de calibracin debe reali- balanza. La tabla que se muestra a continua-
zarse utilizando un peso patrn, y los resulta- cin complementa la anterior y es una gua
dos obtenidos se analizarn para determinar que ayuda a determinar el tipo de peso pa-
si se encuentran dentro de las tolerancias trn que debe utilizarse en los procesos de
aceptables. Se deben seleccionar los pesos calibracin de una balanza en funcin de su
patrn, dependiendo de la capacidad de la capacidad.
Tabla de pesos patrn a utilizar segn capacidad de la balanza
RESOLUCIN
CAPACIDAD
100 g 10 g 1g 100 mg 10 mg 1 mg 0,1 mg 0,01 mg
Hasta 200 g - - - M1 M1 F2 F1 E2
200 g a 1 kg - - M1 M1 F2 F1/E2 E2 E2
1 kg a 30 kg M2 M2 M1 F2 E2 E2 E2 -
30 kg a 100 kg M2 M1 F2 F1 E2 - - -
Ms de 100 kg M2 M1/F2 F1 E2 - - - -
6
Guidelines for calibration in laboratories, Drinking Water Inspectorate By LGC (Teddington) Ltd., December 2000.
50
Balanzas 4
RUTINAS DE MANTENIMIENTO 2. Limpiar externa e internamente la cmara

de pesaje. Verificar que los vidrios estn li-
La balanza se caracteriza por ser un instru- bres de polvo.
mento de alta precisin. Por tal motivo las ru-
tinas de mantenimiento a cargo del operador 3. Verificar que los mecanismos de ajuste de
son mnimas y se encuentran limitadas a las la puerta frontal de la cmara de pesaje
siguientes: funcionen adecuadamente.
Actividades diarias Muy importante: Nunca lubricar una balanza

a menos que el fabricante lo indique expresa-
1. Limpiar el platillo de pesaje, para que este mente. Cualquier sustancia que interfiera con
se encuentre libre de polvo o suciedad. La los mecanismos de la balanza retardan su res-
limpieza se efecta con una pieza de tela puesta o alteran definitivamente la medida.
limpia que puede estar humedecida con
agua destilada. Si es necesario retirar algu-
Nota: Por lo general, el fabricante o el re-
na mancha, se puede aplicar un detergen-
presentante en instalaciones especializadas
te suave. Tambin se puede usar un pincel
realiza el mantenimiento de las balanzas,
de pelo suave para remover las partculas
siguiendo procedimientos que varan de-
o el polvo que se hubiesen depositado so-
pendiendo del tipo y modelo de balanza.
bre el platillo de pesaje.
Tabla de solucin de problemas (balanza electrnica)

La balanza no enciende. Cable de interconexin desconectado o Revisar conexin. Ajustar cable conector si es
mal ajustado en la balanza. del caso.
La toma elctrica desenergizada. Verificar alimentacin elctrica.
La lectura del peso es incorrecta. La balanza no fue puesta en cero antes Colocar en cero la balanza; repetir la medida.
de la lectura.
La balanza mal calibrada. Calibrar de acuerdo con el procedimiento re-
comendado por el fabricante.
La balanza desnivelada. Nivelar la balanza.
La balanza no muestra en pantalla las Unidades mal seleccionadas. Revisar el procedimiento definido por el fabrican-
unidades deseadas de medida. te para seleccionar la unidad de medida requerida.
La unidad requerida no habilitada. Habilitar la unidad de medida de acuerdo al
procedimiento definido por el fabricante.
No se puede cambiar la configuracin El men puede estar bloqueado. Verificar si el interruptor de bloqueo est acti-
del men de la balanza. vado. Desactivar si es del caso.
La balanza es incapaz de guardar las No se ha oprimido la tecla Fin, para ter- Verificar la forma en que se realizan los cam-
selecciones o cambios. minar el proceso. bios o selecciones, de acuerdo con el manual
del fabricante. Repetir la seleccin o cambio.
Apagar, esperar un momento y encender
nuevamente.
La lectura de la balanza es inestable. Vibracin en la superficie del mesn. Colocar la balanza sobre una superficie estable.
Puerta frontal de la balanza abierta. Cerrar la puerta frontal para efectuar la
medicin.
51
La interfase RS232 no funciona. Cable de interconexin mal ajustado. Verificar la conexin del cable de interconexin.
La pantalla presenta lecturas incomple- Microprocesador bloqueado. Apagar la balanza y un momento despus en-
tas o se encuentra bloqueada. cenderla. Si la situacin persiste, solicitar servicio
tcnico al representante.
La pantalla presenta un cdigo de Verificar los cdigos de error en el manual de la
error. balanza.
Tabla de errores funcionales y sus posibles causas
ERROR FUNCIONAL CAUSA PROBABLE

Lecturas no reproducibles (histresis). Suciedad en la celda de medicin.
La celda de medicin mal ensamblada.
Lecturas no lineales. Sistema electrnico defectuoso.
Sistema mecnico en malas condiciones.
Lectura digital avanza continuamente en una direccin. Sistema electrnico defectuoso.
Cambia la temperatura del ambiente.
La lectura digital avanza y retrocede continuamente. Celda de medicin sucia.
Sistema electrnico defectuoso.
Problemas ambientales como corrientes de aire, electricidad
esttica o vibraciones.
La pantalla digital en blanco o muestra signos sin sentido. Sistema electrnico defectuoso.
La pantalla indica condicin de sobrecarga o carga negativa Celda de medicin daada por sobrecarga.
sin que exista carga aplicada.
Celda de medicin ensamblada de forma errnea.
La balanza no puede calibrarse. Batera de calibracin defectuosa.
Sistema electrnico defectuoso.
Celda de medicin ensamblada de forma incorrecta.
DEFINICIONES BSICAS Error de carga lateral. Desviacin que se pre-

senta en los resultados cuando se pesa un ob-
ASTM. Sociedad Americana de Ensayo de jeto, colocndolo en diferentes posiciones del
Materiales (American Society for Testing and platillo de pesaje. Por ejemplo: entre el centro
Materials). del platillo y luego en uno de sus bordes.
Calibracin. Determinacin del valor correc- Error de linealidad. Diferencia que se pre-
to de la lectura de un instrumento, por medi- senta cuando la balanza se carga de manera
cin o comparacin de la misma contra un es- sucesiva, incrementando la cantidad de peso
tndar o patrn. Una balanza se calibra me- en igual magnitud hasta lograr su mxima ca-
diante la utilizacin de pesas patrn. pacidad, para luego descargarla siguiendo un
proceso anlogo al mencionado. Las diferen-
Carga lateral. Habilidad de una balanza pa- cias que se presentan entre las lecturas obte-
ra leer de forma consistente el valor de las nidas y los valores aritmticos, correspon-
masas, sin importar la posicin de las mismas dientes a las pesas utilizadas, se interpretan
sobre el platillo de pesaje. En ingls se deno- como la no-linealidad.
mina cornerload.
52
Balanzas 4
Error de sensibilidad. Desviacin constante Masa. Propiedad de la materia que se manifies-

a travs del rango de pesaje o capacidad de ta a travs de fenmenos tales como la atrac-
una balanza. cin de los cuerpos, mediante la fuerza de gra-
vedad o mediante la inercia resistencia a cam-
Exactitud. Suma de todos los errores de la biar el estado de reposo o movimiento bajo. La
balanza. Se le denomina banda tota de error. unidad fundamental para expresar el concepto
de masa es el kilogramo [kg].
Histresis. Diferencia que se presenta en los
resultados cuando se aumenta o disminuye la Masas certificadas. Masas que cumplen con
carga en la balanza. las tolerancias definidas por los entes de certifi-
cacin. Los estndares ASTM clases 1 a 4 son de
Linealidad. Concepto que aplica a la capacidad amplia utilizacin y son referencia obligada pa-
o habilidad de una balanza para lograr lecturas ra realizar las rutinas de calibracin.
exactas de peso de masas menores a la de su ca-
pacidad total. Si se dibujara una grfica entre OIML. Oficina Internacional de Metrologa
peso, comparado con la indicacin de peso en Legal.
una balanza perfectamente lineal, el resultado
final sera una lnea recta. Para determinar el Sensibilidad. Masa ms pequea que puede
error de linealidad de una balanza, se deben uti- ser detectada por la balanza. Tambin se en-
lizar masas certificadas. El procedimiento que tiende como la masa ms pequea que la ba-
permite calcular las diferencias de linealidad lanza medir correctamente.
consiste en efectuar lecturas con masas certifica-
das la misma masa con y sin precarga. La dife- Trazabilidad. Posibilidad de relacionar el
rencia entre las dos lecturas permite calcular el grupo de medidas de un instrumento con un
error de linealidad. estndar definido.
53
Bibliografa
Explorer Pro. Instruction Manual, Ohaus Corporation, Part N 80250955, 2003.
(www.ohaus.com)
Field Services Handbook for High Precision Scales, IES Corporation, Portland, Oregon, 2004.
Guidelines for calibration in laboratories, Drinking Water Inspectorate By LGC (Teddington)

Ltd., December 2000.
(http://www.dwi.gov.uk/regs/crypto/..%5Ccrypto%5Cpdf%5CCalibration%20guidelines.pdf)
Kupper, W., Balances and Weighing, Mettler Instrument Corp., Princeton-Hightstown, NJ.
Mantenimiento y reparacin del equipo de laboratorio, diagnstico por imagen y hospital,

Ginebra, Organizacin Mundial de la Salud, 1996.
Manual of Basic Techniques for a Health Laboratory, Geneve, World Health Organization,
2nd. Edition, 2003.

Voyager Pro, Instruction Manual, Ohaus Corporation, Part N 80251000, 2003.

(www.ohaus.com)
54
CAPTULO 5
Bao de Mara
15-108 Baos de Mara
16-772 Baos de Mara, con agitador
BAO DE MARA cuya capacidad puede seleccionarse entre

los 2 y los 30 litros.
El bao de Mara es un equipo que se utiliza
en el laboratorio para realizar pruebas sero-
lgicas y procedimientos de incubacin, ESQUEMA BAO DE MARA
aglutinacin, inactivacin, biomdicos, far-
macuticos y hasta industriales. Por lo gene- Se presenta a continuacin un esquema bsico
ral, se utilizan con agua, pero tambin per- de un bao de Mara. En el mismo es posible
miten trabajar con aceite. Los rangos de diferenciar el control electrnico, la pantalla,
temperatura en los cuales normalmente son la cubierta que es un accesorio opcional y el
utilizados estn entre la temperatura am- tanque. No se muestran algunos componentes
biente y los 60 C. Tambin se pueden selec- que pueden instalarse en estos equipos como
cionar temperaturas de 100 C, utilizando el termmetro y la unidad de agitacin, para
una tapa de caractersticas especiales. Los mantener uniforme la temperatura.
baos de Mara son fabricados con cmaras
Ilustracin 16: Bao de Mara
55
PRINCIPIOS DE OPERACIN y resistencia a las condiciones ambientales
propias de un laboratorio. Las resistencias
Los baos de Mara estn constituidos por un pueden ser las siguientes:
tanque fabricado en material inoxidable, el
cual tiene montado en la parte inferior del De inmersin. Se caracterizan por estar
mismo un conjunto de resistencias elctricas, instaladas dentro de un tubo sellado. Es-
mediante las cuales se transfiere calor a un tn ubicadas en la parte inferior del reci-
medio como agua o aceite, que se mantiene piente y se encuentran en contacto directo
a una temperatura preseleccionada a travs con el medio a calentar.
de un dispositivo de control termo par, ter-
mostato, termistor o similar que permite se- Externas. Se encuentran ubicadas en la
leccionar la temperatura requerida por los di- parte inferior pero son externas al tanque;
versos tipos de anlisis o pruebas. Dispone de estn protegidas por un material aislante
un cuerpo externo donde se encuentran ubi- que evita prdidas de calor. Este tipo de
cados los controles mencionados, el cual se resistencias transfiere el calor al fondo del
fabrica en acero y se recubre generalmente tanque por medio de conduccin trmica.
con pintura electrosttica de alta adherencia
Ilustracin 17: Resistencias de inmersin y externa
Dependiendo del tipo de bao, algunos dis- controlado para mantener la temperatura lo
ponen de una serie de accesorios como siste- ms uniforme posible. Se muestra a continua-
mas de agitacin, que imprimen al medio cacin una tabla que describe los principales ti-
lefactor un movimiento cuidadosamente pos de baos de Mara.
Tipos de baos de Mara
CLASE RANGO DE TEMPERATURA

Baja temperatura Temperatura ambiente hasta 60 C
Temperatura ambiente hasta 100 C con cubierta
Alta temperatura Temperatura ambiente hasta 275 C. Cuando se requiere lograr temperaturas superiores a
los 100 C, es indispensable utilizar fluidos diferentes al agua, debido a que el punto de
ebullicin de la misma a condiciones normales es de 100 C.
Este tipo de baos utiliza generalmente aceites cuyos puntos de ebullicin son mucho ms
elevados.
Isotrmicos Temperatura ambiente hasta 100 C con accesorios y/o sistemas de agitacin (con agua)
56
tiene componentes elementos resistivos montaje que, para el efecto, suministran
que podran causar quemaduras si se to- los fabricantes. Verificar la posicin del
can desprevenidamente, incluso despus bulbo del termmetro o de la sonda tr-
de transcurrido un perodo de tiempo con- mica, para asegurar que las lecturas sean
siderable despus de apagar el equipo. correctas.
5. Trabajar las sustancias que generan humos 3. Si se utiliza agua como fluido de calenta-
colocando el bao de Mara dentro de una miento, verificar que la misma sea limpia. Al-
cabina extractora de humos o en un lugar gunos fabricantes recomiendan aadir pro-
muy bien ventilado. ductos que eviten la formacin de algas.
6. Recordar que los lquidos que se trabajan 4. Colocar el interruptor principal N 11 en la

dentro del recipiente del bao de Mara pue- posicin de encendido. Algunos fabrican-
den producir quemaduras si inadvertidamen- tes han incorporado controles con micro-
te se coloca la mano dentro del mismo. procesadores que inician rutinas de auto-
verificacin, una vez que se acciona el in-
7. Tener en cuenta que el bao de Mara es- terruptor de encendido.
t diseado para ser utilizado con un lqui-
do en el interior del recipiente. Si el mismo 5. Seleccionar la temperatura de operacin.
se seca, la temperatura del recipiente pue- Se utilizan el botn de Men N 2 y los bo-
de llegar a ser muy alta. Utilizar siempre la tones para ajuste de parmetros.
bandeja difusora para colocar los recipien-
tes dentro del tanque del bao de Mara. 6. Seleccionar la temperatura de corte en
Esta ha sido diseada para distribuir la aquellos baos que disponen de este con-
temperatura de forma uniforme. trol. Este es un control de seguridad que
corta el suministro elctrico, si se sobrepa-
8. Evitar utilizar el bao de Mara si alguno sa la temperatura seleccionada. Esta se se-
de los controles falla: el de temperatura o lecciona tambin a travs del botn de
el de lmite. Men y se controla con los botones de
ajuste de parmetros.
Uso del bao de Mara 7. Evitar utilizar el bao de Mara con sustan-
cias como las que se indican a continuacin2:
Antes de usar el bao de Mara, se debe veri- a) Blanqueadores.
ficar que el mismo se encuentra limpio y que b) Lquidos con alto contenido de cloro.
se encuentran instalados los accesorios que c) Soluciones salinas dbiles como cloruro
van a utilizarse. Los pasos que normalmente de sodio, cloruro de calcio o compuestos
se siguen son estos: de cromo.
d) Concentraciones fuertes de cualquier
1. Llenar el bao de Mara con el fluido que ha- cido.
br de utilizarse para mantener uniforme la e) Concentraciones fuertes de cualquier sal.
temperatura agua o aceite. Verificar que, f) Concentraciones dbiles de cidos hidro-
colocados los recipientes que van a calentar- clrico, hidrobrmico, hidroidico, sulfri-
se, el nivel del mismo se encuentre entre 4 y co o crmico.
5 cm del borde superior del tanque. g) Agua desionizada, pues causa corro-
sin y tambin perforaciones en el acero
2. Instalar los instrumentos de control que, inoxidable.
como termmetros y agitadores, puedan
ser requeridos. Utilizar los aditamentos de
1
Los nmeros que identifican los controles corresponden exactamente a los mostrados en el esquema de los baos de Mara.
2
Fisher Isotemp economy water baths, Instructions: Fisher Scientific, Part N 103412, Rev. E., 2004.
58
Bao de Mara 5
Mantenimiento 4. Limpiar el interior del tanque con un de-

tergente suave. Si se presentan indicios de
corrosin, existen en el mercado sustancias
Advertencia: Antes de efectuar cualquier para limpiar el acero inoxidable. Frotar
actividad de mantenimiento, desconectar suavemente con esponjas sintticas o equi-
el equipo de la toma de alimentacin valentes. Evitar la utilizacin de lana de
elctrica. acero para remover manchas de xido, de-
bido a que las mismas dejan partculas de
acero que podran acelerar la corrosin.
Los baos de Mara son equipos que no son
muy exigentes desde el punto de vista de 5. Evitar doblar o golpear el tubo capilar del
mantenimiento. Las rutinas recomendadas control de temperatura que generalmen-
estn principalmente enfocadas a la limpieza te se encuentra ubicado en el fondo del
de los componentes externos. A continua- tanque.
cin, se sealan las rutinas ms comunes.
6. Limpiar con agua limpia el exterior y el in-
terior del bao de Mara.
Limpieza
Frecuencia: Mensual
Lubricacin
1. Apagar y desconectar el equipo. Esperar a Frecuencia: Diaria
que el mismo se enfre para evitar riesgos
de quemaduras accidentales. Esta actividad es para baos de Mara que
disponen de unidad o sistema de agitacin.
2. Extraer el fluido utilizado para el calenta-
miento. Si es agua, puede verterse a un si- Lubricar el eje del motor elctrico del agita-
fn. Si es aceite, recolectar en un recipien- dor. Colocar una gota de aceite mineral en el
te con capacidad volumen adecuada. eje, para que se mantenga una buena condi-
cin de lubricacin entre los rodamientos del
3. Retirar la rejilla de difusin trmica que se motor y el eje del mismo.
encuentra ubicada en el fondo del tanque.

No hay energa elctrica. Bao de Mara desconectado. Conectar bao de mara.
Interruptor defectuoso. Cambiar interruptor.
Fusible defectuoso. Sustituir fusible.
El bao de Mara no calienta. Control de temperatura desgraduado. Graduar control de temperatura.
Resistencia(s) defectuosa(s). Cambiar resistencia(s).
Control lmite desgraduado. Graduar control lmite.
La temperatura es superior a la Control de temperatura defectuoso. Cambiar control de temperatura.
seleccionada.
Verificar seleccin de parmetros.
Las muestras se calientan lentamente. Tanque vaco o con muy poco fluido. Llenar tanque hasta el nivel recomendado.
La temperatura aumenta muy Resistencia(s) defectuosa(s). Cambiar resistencia(s).
lentamente.
Control de temperatura defectuoso. Sustituir control de temperatura.
59
DEFINICIONES BSICAS positan por atraccin de las cargas elctricas,
sobre la pieza que quiere pintar, cubrindola
Agitador. Dispositivo diseado para aadir completamente. Se introduce entonces la
energa cintica a un fluido contenido en un pieza cubierta de partculas de pintura en un
recipiente, con el fin de mantener homog- horno elctrico que funde las partculas de
neas sus propiedades; por ejemplo: tempera- pintura, haciendo que las mismas se adhieran
tura, color, densidad. con gran fortaleza sobre la pieza.
Bandeja difusora. Dispositivo que se coloca Resistencia (elctrica). Propiedad que tie-
en el fondo de los baos de Mara, con el fin nen las diferentes sustancias o materiales, en
de soportar los recipientes que se colocan virtud de la cual se impide en mayor o menor
dentro del tanque; adems, permite que las grado el paso de la corriente elctrica. En los
corrientes de conveccin trmica, que se ge- textos se identifica la resistencia con la letra
neran en el fluido que contiene el tanque, [R]. Para un cuerpo de seccin uniforme, por
circulen de arriba - abajo - arriba, mantenien- ejemplo: un alambre, la resistencia [R] es una
do la temperatura de forma homognea en magnitud directamente proporcional a la
los niveles seleccionados por el operador. Por longitud [l] e inversamente proporcional al
lo general, la bandeja difusora es de acero rea seccional [a]. La resistencia se represen-
inoxidable. ta mediante la siguiente ecuacin:
Fusible. Dispositivo de seguridad que prote- l

R=kx
ge los circuitos elctricos de los excesos de co- a
rriente. Se fabrican con materiales cuyas di-
mensiones y propiedades los habilitan para donde:
trabajar bien dentro de unas condiciones pre- k = constante que depende de las unidades
definidas. Si por alguna razn se extralimitan empleadas
los parmetros de diseo, se funde el mate- l = longitud del conductor
rial y se interrumpe el paso de corriente. a = rea seccional del conductor
Pintura electrosttica. Procedimiento me- La unidad de resistencia es el ohmio y se re-

diante el cual se genera una gran diferencia presenta normalmente por la letra griega .
de potencial (80-150 kw) entre la pieza que
se quiere pintar y la unidad de atomizacin Resistencia de inmersin. Resistencia elc-
que suministra la pintura, en forma de part- trica que se encuentra instalada dentro de un
culas finamente pulverizadas. Las partculas tubo sellado. Se utilizan generalmente para
de pintura se cargan elctricamente y se de- calentar fluidos como agua o aceite.
Bibliografa
Fisher Isotemp economy water baths, Instructions: Fisher Scientific, Part N 103412, Rev. E.,
2004. (http://www.fisherlabequipment.com/productinfo.htm)
Fisher Isotemp water baths, Instructions: Fisher Scientific, Part N 102370, Rev. K., 2004.
(http://www.fisherlabequipment.com/productinfo.htm)

Venegas, J., Texto de fsica, Fono-foto y electrologa, Cali, Colombia, Editorial Norma.
60
CAPTULO 6
Cabina de seguridad biolgica
15-148 Campanas microbiolgicas
CABINA DE SEGURIDAD BIOLGICA PROPSITOS DEL EQUIPO
Es un equipo diseado para controlar los ae- La cabina de seguridad biolgica se utiliza
rosoles y micropartculas asociados al manejo con estos fines:
del material biolgico, potencialmente txi-
cos o infecciosos, que se generan en los labo- 1. Proteger al trabajador de los riesgos aso-
ratorios como resultado de actividades como ciados al manejo de material biolgico po-
la agitacin y centrifugacin, el uso y manejo tencialmente infeccioso.
de pipetas, la apertura de recipientes con 2. Proteger la muestra que se est analizan-
presiones internas diferentes a la atmosfri- do para que no se contamine.
ca, utilizando condiciones apropiadas de ven- 3. Proteger el medio ambiente.
tilacin. Las cabinas se han diseado para
proteger al usuario, al ambiente y la muestra Las cabinas se utilizan para el trabajo rutina-
con la que se trabaja. Se las conoce tambin rio relacionado con patgenos parsitos,
como Cabinas de flujo laminar y/o gabinetes bacterias, virus, hongos, el cultivo de clulas
de bioseguridad. y, bajo condiciones muy precisas, el manejo
de los agentes txicos.
ILUSTRACIN CABINA DE SEGURIDAD

BIOLGICA PRINCIPIOS DE OPERACIN
La cabina de seguridad biolgica es una cmara

construida generalmente en acero, que dispone
de una ventana frontal en vidrio, de altura va-
riable que posee un sistema de ventilacin con-
formado por un motor elctrico, un ventilador y
un conjunto de ductos que, al estar funcionan-
do, generan una condicin de presin negativa
en el interior de la cabina comparada con la pre-
sin del ambiente en el laboratorio, condicin
que produce que el aire fluya dentro de la cabi-
na a travs de la abertura frontal, generando
una cortina de aire que protege al operador. In-
ternamente, el aire es conducido a travs de una
serie de rejillas y ductos, para finalmente ser tra-
tado mediante filtros HEPA1. Dependiendo del
diseo de la cabina, el aire es reciclado dentro
del laboratorio o extrado y renovado en diver-
sas proporciones. El aire que en las cabinas Cla-
se II fluye desde el filtro hacia la superficie de
trabajo es de tipo laminar. A continuacin, se
presenta un resumen del tipo de cabinas exis-
Ilustracin 19: Cabina de seguridad biolgica tentes y sus principales caractersticas.
1
HEPA: High Efficiency Particulate Air
61
Resumen cabinas de seguridad biolgica
TIPO DE ILUSTRACIN CARACTERSTICAS

CABINA
Clase I 1. Proteccin ofrecida: al operador y al
Tipo A ambiente.
2. Velocidad del aire al ingresar a la cabi-
na: 38 cm/s.
3. Adecuada para trabajar con agentes
clasificados con nivel de bioseguridad2
1, 2 3.
4. Sistema de filtracin: HEPA, colocado
en la extraccin. Puede estar o no aco-
plado a un sistema de extraccin co-
nectado al exterior.
5. Desventaja: No protege el producto
con el cual se trabaja.
Clase II 1. Proteccin ofrecida: al operador, al pro-

Tipo A ducto y al ambiente.
na: 38 cm/s.
clasificados con nivel de bioseguridad
1, 2 3.
4. Sistema de filtracin: dos filtros HEPA,
uno colocado sobre la superficie de tra-
bajo; el segundo en el sistema de ex-
traccin de la cabina, el cual puede es-
tar o no acoplado a un sistema de ex-
traccin conectado al exterior. Si se
acoplan al exterior, utiliza un acople ti-
po campana.
5. Reciclan aproximadamente el 70 % del
volumen de aire y renuevan un 30 %.

Tipo B1 ducto y al ambiente.
2. Velocidad del aire al ingresar a la cabina:
50,8 cm/s.
3. Adecuada para trabajar con agentes cla-
sificados con nivel de bioseguridad 1, 2
3.
4. Sistema de filtracin: dos filtros HEPA. Ex-
trae mediante un ducto el aire potencial-
mente contaminado (70 %) y recicla den-
tro de la cabina despus de filtrarlo el ai-
re tomado del exterior, a travs de la reji-
lla frontal (30 %).
5. Todos los ductos biolgicamente conta-
minados presurizados negativamente.
6. Permite trabajar cantidades mnimas de
qumicos txicos y radionucleidos.
2
Ver clasificacin de niveles de bioseguridad de los agentes en el subttulo Seguridad biolgica, ubicado a continuacin
del resumen de las cabinas.
62
TIPO DE ILUSTRACIN CARACTERSTICAS

CABINA
Tipo B2 ducto y al ambiente.
na: 50,8 cm/s.
1, 2 3.
4. Sistema de filtracin: dos filtros HEPA.
Se le conoce como cabina de extrac-
cin total. No tienen ningn tipo de
recirculacin.
6. Dispone de ducto de extraccin; per-
mite trabajar con qumicos txicos y
radionucleidos.

Tipo B3 o A/B3 ducto y al ambiente.
na: 50,8 cm/s.
1, 2 3.
4. Sistema de filtracin: dos filtros HEPA.
6. Se le conoce como cabina combinada.
Puede conectarse mediante un ducto y
se la denomina como de Tipo B3. Si ca-
rece del mismo, es una Tipo A. Recicla el
70 % del volumen dentro de la cabina.
Clase III 1. Proteccin ofrecida: al operador, al pro-

ducto y al ambiente.
2. Sistema de filtracin: dos filtros HEPA
en serie en la extraccin y un filtro HE-
PA en la admisin.
clasificados con nivel de bioseguridad 4.
4. Cabina totalmente sellada. El ingreso y
extraccin de elementos se efectan a
travs de una caja de paso de doble
puerta. La manipulacin de los mate-
riales los realiza el investigador, a tra-
vs de guantes sellados en el frente de
la cabina.
63
SEGURIDAD BIOLGICA3 SERVICIOS REQUERIDOS
Los microorganismos, con base en el anlisis Entre los servicios que se requieren para que
de factores como la patogenicidad, la dosis una cabina funcione adecuadamente, se en-
infecciosa, los modos de transmisin, la varie- cuentran los siguientes:
dad de huspedes que pueden utilizar, la dis-
ponibilidad de medidas preventivas y trata- 1. Un rea dentro del laboratorio protegida
mientos efectivos, han sido clasificados en de las corrientes de aire que provienen de
cuatro categoras: ventanas o sistemas de aire acondiciona-
do. Igualmente la cabina debe ubicarse
1. Nivel de riesgo 1. Lo conforman agentes alejada de las zonas de circulacin del la-
biolgicos que es muy improbable que cau- boratorio, para evitar que las corrientes de
sen enfermedades en humanos sanos o ani- aire producidas por el paso de personas
males. (Bajo riesgo individual y comunitario). pudiera llegar a afectar la cortina de aire
dentro de la cabina. Tambin se debe veri-
2. Nivel de riesgo 2. Lo conforman patge- ficar que la cabina no se instale al lado de
nos que pueden causar enfermedades a otro tipo de cabinas, como las utilizadas
los humanos o animales; pero en circuns- para extraer vapores qumicos.
tancias normales es improbable que sean
peligrosos para trabajadores de los labora- 2. Una acometida elctrica, dotada de los
torios, la comunidad, los animales doms- respectivos elementos de control y seguri-
ticos o el ambiente. Las exposiciones en el dad; una toma elctrica con polo a tierra.
laboratorio raramente producen enferme-
dades graves; hay disponibles medidas 3. Una mesa firme y bien nivelada, diseada
preventivas y tratamientos efectivos y el para soportar el peso de la cabina y permi-
riesgo de diseminacin es limitado. (Ries- tir al operador trabajar con comodidad.
go individual moderado, riesgo comunita- Debe disponer de espacio libre para colo-
rio limitado). car los pies y su altura debe ser adecuada.
3. Nivel de riesgo 3. Son patgenos que 4. El piso del lugar debe ser plano y estar
usualmente causan enfermedades graves a bien nivelado.
los seres humanos y a los animales, y pro-
ducen un impacto econmico serio; sin 5. Deben respetarse las reas libres que reco-
embargo, no es comn su contagio por mienda el fabricante alrededor de la cabi-
contacto casual de un individuo a otro. Las na. Asimismo debe verificarse que la altu-
enfermedades que producen son tratables ra piso - techo del sitio donde se instala
por agentes antimicrobiales o antiparasi- sea la recomendada, para que pueda fun-
tarios. (Alto riesgo individual, bajo riesgo cionar sin inconvenientes.
comunitario).
6. Las cabinas tipo B requieren necesaria-
4. Nivel de riesgo 4. Son patgenos que mente un ducto de extraccin, el cual de-
usualmente producen enfermedades muy be estar dotado de los dispositivos de con-
graves para los seres humanos o los anima- trol requeridos: vlvulas reguladoras que
les, las cuales a menudo no disponen de permitan aislar o regular el flujo de aire.
tratamientos y se contagian fcilmente de
un individuo a otro o de animal a humano 7. Las acometidas de gases deben encontrar-
o viceversa, directa o indirectamente o por se en la vecindad inmediata de la cabina, a
contacto casual. (Alto riesgo individual, al- fin de facilitar la conexin a las vlvulas de
to riesgo comunitario). servicio.
3
The Laboratory Biosafety Guidelines, 3rd. Edition-Draft, Health Canada, 2001.
64
8. La cabina debe certificarse anualmente Al finalizar la colocacin de los elementos,

para verificar el cumplimiento de los re- se debe permitir que el flujo de aire barra
quisitos establecidos en la Norma NSF 49. la cabina durante aproximadamente 3 5
minutos, para eliminar cualquier partcula
que se hubiera producido o liberado du-
USO DE LA CABINA rante la carga de materiales y equipos.
La correcta utilizacin de la cabina de segu- 5. Iniciar las actividades. Introducir lentamen-

ridad biolgica se logra al cumplir las si- te las manos en el rea de trabajo. Realizar
guientes indicaciones: los procesos y tareas de forma metdica y
cuidadosa; de las reas limpias a las reas
1. Planificar con anticipacin el trabajo que potencialmente contaminadas. Mantener
se realizar en la cabina de seguridad bio- los elementos al menos 10 cm detrs de la
lgica. Determinar qu procedimientos y rejilla frontal; procurar realizar las activida-
equipos sern utilizados. Coordinar con des que pudieran resultar ms contami-
los dems profesionales del laboratorio el nantes o riesgosas hacia el fondo del rea
tiempo de utilizacin de la cabina, a fin de trabajo de la cabina. Evitar el uso de lla-
de evitar interrupciones o trfico indesea- mas abiertas como las de los mecheros,
do mientras la misma est en uso. pues rompen el patrn de flujo laminar y
se corre el riesgo de quemar el filtro. Evitar
2. Encender la cabina. Apagar la lmpara UV retirar las manos del rea de trabajo hasta
si la misma se encuentra encendida. En- que todos los procedimientos programa-
cender la lmpara de luz fluorescente y el dos hayan sido realizados y el material po-
ventilador de la cabina. Verificar que las tencialmente peligroso haya sido dispuesto
rejillas, delantera y trasera, se encuentran en la bolsa de bioseguridad o en los reci-
libres de obstrucciones. Preparar el rea pientes dispuestos para las pipetas y los ob-
de trabajo. Permitir que la cabina funcio- jetos cortopunzantes.
ne libremente por al menos 15 minutos.
6. Limpiar la cabina, permitiendo que el aire
3. Lavar las manos y antebrazos con jabn fluya libremente por 3 5 minutos al ter-
germicida. Vestir los elementos de protec- minar todos los procedimientos.
cin personal: bata/gabacha de manga lar-
ga con puos ajustados, anteojos protec- 7. Descontaminar la superficie de todos
tores y mscara, si la situacin lo amerita. aquellos materiales y equipos que hayan
Preparar las superficies interiores de la ca- estado en contacto con el material biol-
bina aplicando etanol al 70 % o un desin- gicamente contaminado. Aplicar etanol al
fectante adecuado. Permitir que estas se 70 % o un desinfectante adecuado y per-
sequen por la accin del flujo del aire. mitir que el mismo se seque. Levantar los
equipos y materiales y desinfectar el rea
4. Cargar e instalar nicamente los materia- ubicada debajo de los mismos. Cubrir los
les y equipos requeridos por la prueba o recipientes abiertos antes de ser removi-
ensayo. Diferenciar las reas limpias de las dos del rea de trabajo. Remover los ma-
reas sucias. Colocar el material de forma teriales segn corresponda (a la incubado-
que no se crucen los materiales sucios con ra, al autoclave).
los materiales limpios, ni se impida la libre
circulacin del aire interno a travs de las 8. Descartar los guantes y dems elementos
rejillas delanteras o traseras. Colocar una de proteccin personal. Disponerlos de la
bolsa de bioseguridad para almacenar los forma establecida en el laboratorio. Lavar
materiales desechados, un recipiente con las manos con agua y jabn abundantes.
desinfectante para las pipetas y un reci-
piente para guardar los elementos puntia- 9. Apagar el ventilador, la lmpara fluores-
gudos. Evitar colocar objetos muy grandes, cente; cerrar la abertura frontal y encen-
cerca uno de otro, dentro de la cabina. der la lmpara ultravioleta.
65
Nota: En caso de que se presente un derrame RUTINAS DE MANTENIMIENTO
dentro de la cabina mientras la misma est en
uso, esta debe mantenerse en operacin y to-
dos los objetos o equipos que resulten invo- Advertencia: El mantenimiento de los
lucrados deben recibir un proceso de descon- componentes internos solo debe ser reali-
taminacin de superficie. Esto evitar que se zado por personal entrenado y debida-
liberen contaminantes desde la cabina. mente certificado. Para efectuar el mante-
nimiento de los componentes internos,
previamente debe efectuarse una descon-
Descontaminacin de la cabina taminacin. Para realizar las rutinas, deben
usarse elementos de proteccin personal.
La descontaminacin de la cabina de seguri-
dad biolgica es una actividad que debe rea-
lizarse de forma previa a la realizacin de El mantenimiento general requerido por la
trabajos de mantenimiento que impliquen cabina de seguridad biolgica es, en general,
apertura de sus superficies o componentes sencillo de realizar. Las rutinas y las frecuen-
internos. Siempre que se requiera efectuar cias se muestran a continuacin.
alguno de los procesos que se indican a con-
tinuacin, previamente debe descontaminar- Frecuencia: Semanal
se la cabina.
1. Descontaminar la superficie de trabajo y
1. Cambio de filtros. las superficies interiores de la cabina con
etanol al 70 %.
2. Realizacin de pruebas que requieran ac-
ceder a las superficies interiores o expues- 2. Limpiar el cristal de la puerta frontal y la
tas de la cabina. superficie de la lmpara ultravioleta, utili-
zando una solucin limpiadora domstica.
3. Antes de realizar pruebas de certificacin
cuando la cabina haya sido utilizada con 3. Verificar la lectura del manmetro de pre-
agentes clasificados como de riesgo biol- sin que permite conocer la magnitud de
gico de nivel 2 3. la cada de presin del aire, que fluye a
travs del filtro HEPA. Registrar la fecha y
4. Antes de trasladar la cabina a una localiza- la lectura en la bitcora de la cabina.
cin diferente.
Frecuencia: Mensual
5. Cuando se hayan presentado derrames de
sustancias con agentes de alto riesgo. 1. Limpiar las superficies exteriores, en espe-
cial, el frente y la parte superior utilizando
El procedimiento de descontaminacin ms una pieza de tela hmeda, a fin de retirar
adecuado debe definirlo el profesional res- el polvo.
ponsable de la seguridad industrial y riesgos
profesionales. En el anexo G del Estndar NSF 2. Desinfectar y remover la superficie de tra-
49, se encuentra descrito el procedimiento bajo con etanol al 70 % o una solucin de-
para descontaminar las cabinas utilizando Pa- sinfectante adecuada.
raformaldehdo despolimerizado. Exclusiva-
mente profesionales que hayan recibido la 3. Desinfectar la superficie del comparti-
capacitacin correspondiente deben realizar miento inferior con etanol al 70 % o una
dicho procedimiento. solucin desinfectante adecuada.
4. Verificar el estado de las vlvulas de servicio.
5. Realizar las tareas de frecuencia semanal.
66
Frecuencia: Anual 2. Levantar la ventana frontal a su mxima

posicin.
1. Efectuar el proceso de certificacin segn li-
neamientos establecidos en la Norma NSF 49. 3. Descontaminar las superficies interiores y
la lmpara UV.
2. Verificar con un radimetro la intensidad
de la lmpara UV4. Sustituir si es del caso. 4. Desconectar la alimentacin elctrica a la
cabina.
3. Comprobar el estado de la lmpara fluo-
rescente. Sustituir si es del caso. 5. Desencajar el tubo UV de sus conectores
girndolo 90 grados; a continuacin, insta-
4. Realizar las tareas de frecuencia mensual. lar un repuesto de las mismas caractersti-
cas del original. Algunos fabricantes han
instalado las lmparas sobre una placa lo-
Remocin de la superficie de trabajo calizada en el frente de la cabina, que es
necesario destornillar y levantar para que
Para la remocin de la superficie de trabajo, quede a la vista el montaje de la lmpara.
se requiere realizar lo siguiente: Una vez hecho esto, se puede sustituir la
lmpara como se indic al inicio de este
1. Descontaminar la superficie antes de numeral.
removerla.
2. Aflojar y remover los tornillos de fijacin Mantenimiento especializado

ubicados en la parte delantera de la super-
ficie de trabajo. Eventualmente, la cabina podra requerir
mantenimiento especializado. Se indican a
3. Aflojar pero no retirar los tornillos de fija- continuacin algunos procedimientos que
cin ubicados en la parte trasera. tendran que ser contratados con firmas es-
pecializadas cuando se requiera y que ten-
4. Levantar del borde frontal y retirar halan- dran que realizarse siguiendo las indicacio-
do hacia la parte frontal de la cabina. nes que los productores han consignado en
sus manuales de servicio tcnico.
5. Descontaminar la parte interior de la su-
perficie de trabajo. 1. Certificacin anual de acuerdo a los linea-
mientos de la Norma NSF 49.
6. Al ensamblar, realizar en orden inverso las ac-
tividades descritas en los numerales 2, 3 y 4. 2. Cambio de motores. Generalmente, utili-
zan rodamientos sellados libres de mante-
nimiento y funcionan por induccin me-
Cambio de la lmpara ultravioleta diante control de frecuencia, por lo que
carecen de escobillas. Pueden trabajar
Para cambiar la lmpara ultravioleta, de- aos(*)5.
ben seguirse las indicaciones del fabrican-
te. Por lo general, se efectan los siguien- 3. Cambio de ventiladores. (*)
tes procedimientos:
4. Cambio de filtro HEPA. (*). La frecuencia de
1. Encender la cabina y dejarla funcionar du- cambio depende de la intensidad de uso de
rante cinco minutos. la cabina y del sistema de control ambien-
tal que se tenga instalado en el laboratorio.
4
La vida til de las lmparas UV es de aproximadamente 7 500 horas. Algunos fabricantes sugieren sustituirla anualmente.
5
(*) Requieren procedimientos especializados de descontaminacin previa.
67
Si hay un buen control de aspectos como el 7. Prueba de proteccin al personal, al pro-
polvo, el filtro podra llegar a durar mu- ducto y ensayos biolgicos de contamina-
chos aos. cin cruzada. La prueba determina si los
aerosoles son contenidos por la cabina, si
5. Reparacin del sistema electrnico de con- los contaminantes externos alcanzan la zo-
trol: alarmas de control de flujo, posicin na de la mesa de trabajo y si los aerosoles
de la ventana, controles de velocidad. son reducidos por la cabina.
6. Reparacin / limpieza de vlvulas regulado- 8. Prueba de estabilidad. Determina si la ca-

ras de flujo, ajuste de acoples tipo campana. bina tiene estabilidad estructural. Analiza
la resistencia al volcamiento, a la distor-
sin por el efecto de fuerzas aplicadas, a la
Certificacin de la cabina deflexin de la superficie de trabajo some-
tida a condiciones de carga y la resistencia
El proceso de certificacin de las cabinas de seal ladeo de la superficie de trabajo bajo
guridad biolgica est reglamentado por el condiciones de carga.
Estndar NSF 49, el cual aplica a todas las cabi-
nas Clase II. El mismo define materiales, crite- 9. Prueba de velocidad del flujo vertical. De-
rios de diseo y construccin, parmetros de termina la velocidad del aire que se desplaza
operacin y pruebas que permiten garantizar verticalmente hacia la superficie de trabajo.
que la cabina es segura y adecuada para los
trabajos que se realizan en ella. Se presenta a 10.Prueba de velocidad del flujo de ingre-
continuacin la lista de pruebas que incluye el so. Determina la velocidad a la que ingre-
estndar mencionado. Detalles de los mismos sa el flujo a la cabina, a travs de la aber-
deben consultarse en el Estndar. El proceso tura frontal, y el volumen de extraccin de
de certificacin incluye las siguientes pruebas: la cabina.
1. Prueba de estanqueidad. Se realiza sobre 11.Prueba de patrones de humo. Determi-

las superficies exteriores. Determina si na si el flujo del aire, a lo largo de todo el
uniones, empaques, penetraciones y solda- permetro de la abertura frontal, va hacia
duras estn libres de fugas. la cabina y si el flujo vertical va hacia aba-
jo, no presenta puntos muertos o reflujos
2. Prueba de fugas de los filtros HEPA. De- sobre la superficie de trabajo.
termina la integridad de los filtros HEPA
de suministro y extraccin, sus alojamien- 12.Prueba de fugas del drenaje. Define la
tos y marcos de montaje. capacidad de contencin de derrames ba-
jo la superficie de trabajo.
3. Prueba de aumento de temperatura.
Determina cul es el aumento mximo de 13.Prueba de funcionamiento del sistema
temperatura en la cabina, cuando en la motor/ventilador. Determina si el siste-
misma se encuentran en operacin el ven- ma brinda la presin esttica requerida.
tilador y las luces.
14.Prueba del sistema elctrico. Determina
4. Prueba de ruido. Determina cul es el ni- si existen riesgos potenciales de descargas
vel de ruido producido por la cabina. elctricas. Mide las corrientes de fuga, la
polaridad, el funcionamiento del sistema
5. Prueba de intensidad luminosa. Deter- de proteccin de fallas de tierra y la resis-
mina cul es la intensidad luminosa en la tencia del circuito a tierra.
superficie de trabajo de la cabina.
6. Prueba de vibraciones. Determina la canti-

dad de vibracin presente en la cabina, cuan-
do la misma se encuentra funcionando.
68
EVALUACIN FUNCIONAL (ALTERNATIVA) estn de acuerdo con las recomendaciones

que al respecto ha definido el fabricante.
En caso de que se dispongan cabinas de segu-
ridad biolgica en el laboratorio, pero no se 2. Evaluacin operacional. Comprueba que
encuentren en la zona de ubicacin del labo- la cabina funciona de acuerdo con sus ca-
ratorio de servicios autorizados de certifica- ractersticas de diseo y fabricacin.
cin, el personal responsable de manteni-
miento tiene la alternativa de efectuar proce- 3. Evaluacin de desempeo. Verifica la ca-
dimientos de revisin anuales basados en el pacidad de la cabina para brindar un espa-
Estndar NSF 49 que, debidamente documen- cio adecuado de trabajo en condiciones de
tados, permitiran identificar con bajos nive- operacin normales y crticas.
les de incertidumbre si la cabina se encuentra
en buen estado y su operacin es normal6. En la tabla que se incluye a continuacin se
Como actividades a realizar se destacan las sealan los parmetros a tener en cuenta en
siguientes: la evaluacin funcional, los cuales por lo ge-
neral se incluyen en la planilla7 de inspeccin
1. Evaluacin de instalacin. Verifica que que se disea para el efecto.
las condiciones de instalacin de la cabina
Tabla de evaluacin funcional de cabinas de seguridad biolgica
PARMETROS OBSERVACIN
Identificacin institucional de la cabina Marca, modelo, tipo, serie, ubicacin, cdigo de inventario, fecha.
Elctricos
Voltaje Medicin de voltaje. Requiere voltmetro.
Amperaje Medicin de amperaje. Requiere voltmetro o pinza amperimtrica.
Motor/ventilador Verificacin de temperatura de operacin. Verificar nivel de ruido y vibracin.
Iluminacin - Fluorescente Confirmacin del nmero de horas de operacin de las lmparas y de su inten-
- Ultravioleta sidad lumnica. Requiere radimetro.
Tomas elctricas Revisin de integridad, calidad del contacto y voltajes disponibles.
Interruptores Control de estado e integridad.
Integridad cables y conectores Verificacin visual.
Alarmas Comprobacin de estado y calibracin.
Fsicos
Acabados internos/externos Verificacin visual.
Estado filtros y prefiltros Verificacin visual. No deben existir fugas ni en el material filtrante ni en los sellos.
Empaques y sellos Verificacin visual. No deben existir fugas.
Ventana deslizante Verificacin visual.Debe poder moverse suavemente y conservar las posiciones seleccionadas.
Operacionales
Velocidad del flujo Control de velocidades de acuerdo con la clase y tipo de cabina. Requiere anemmetro.
Nivel de ruido Requiere sonmetro.
Diferencial de presin en el filtro HEPA Tomar lectura del manmetro de la cabina.
6
La evaluacin funcional se fundamenta necesariamente en la disponibilidad institucional o zonal de tcnicos
e ingenieros debidamente capacitados y experimentados.
7
Cada institucin disea sus propios formatos para el registro administrativo y tcnico de mantenimiento.
69
PARMETROS OBSERVACIN
Desempeo
Conteo de partculas Mtodo definido en los Federal Standard 209D, E. Requiere generador de DOP,
fotmetro y contador de partculas.
Condiciones del rea de instalacin
Temperatura Requiere termmetro: aproximada de 20-22 C.
Humedad Requiere higrmetro: aproximada de 45-55 %.
Limpieza Debe ser adecuada.
Corrientes de aire No debe haber corrientes que afecten el funcionamiento de la cabina.
Tabla de solucin de problemas8

No encienden la luz ni el sistema de Cabina desconectada de la toma Verificar que la cabina est conectada a una
ventilacin de la cabina. elctrica. toma elctrica y que el cable est bien conec-
tado en la caja elctrica de la cabina.
No hay alimentacin elctrica en la Confirmar que la toma elctrica est energiza-
acometida. da y que el disyuntor no est desactivado
proteccin termomagntica. Inicializar nue-
vamente los interruptores.
El ventilador de la cabina funciona, pe- Lmpara defectuosa. Reemplazar la lmpara. Utilizar una de las
ro la lmpara no enciende. mismas caractersticas de la original.
Lmpara mal conectada. Revisar la conexin de la lmpara. Ajustar a la
posicin correcta.
Proteccin termomagntica del disyun- Reconectar el disyuntor.
tor activada.
Alambrado de la lmpara desconectado. Revisar alambrado de la lmpara.
Balasto de la lmpara defectuoso. Reemplazar balasto.
El ventilador no gira pero la luz enciende. Ventana frontal cerrada. Abrir la ventana hasta la posicin de trabajo.
Motor del ventilador defectuoso. Reemplazar el conjunto motor-ventilador.
Motor del ventilador desconectado. Revisar las conexiones del motor.
El manmetro indica un aumento en la La retencin de partculas en el filtro Proceso normal durante la vida til del filtro.
cada de presin a travs del filtro. HEPA ha aumentado.
Bloqueo en las rejillas o ranuras de Verificar que las rejillas no se encuentren obs-
retorno. truidas con algn equipo o material.
Obstruccin en el conducto de Comprobar que no existan bloqueos o restric-
extraccin. ciones en el conducto de extraccin.
Bloqueo o restriccin bajo la superficie Verificar que el conducto bajo la superficie de
de trabajo. trabajo se encuentre libre de obstrucciones.
8
Purifier Delta Series, Biological Safety Cabinets, Users Manual, Kansas City, Labconco Corporation, Part
N 36960-20, Rev. A ECO B296.
70

Se presenta contaminacin en las Procedimientos de trabajo inadecuados. Revisar que la cabina se utiliza de acuerdo a
muestras que se trabajan en la cabina. los procedimientos y a las buenas prcticas.
Restricciones en las ranuras de retorno Comprobar que el retorno y el sistema de extrac-
o bloqueo del ducto de extraccin. cin se encuentren libres de obstrucciones.
Factores externos a la cabina afectan Verificar la instalacin de la cabina y los procedi-
los patrones de flujo dentro de la mis- mientos que se estn realizando.
ma y causan contaminacin.
Filtro HEPA defectuoso. Sustituir filtro HEPA y certificar la cabina.
DEFINICIONES BSICAS Estn construidas de microfibras de boro sili-

cato que han sido unidas con un pegante re-
Aerosol. Suspensin de partculas diminutas sistente al agua. El medio filtrante se encuen-
slidas o lquidas que se dispersan en un gas. tra plegado dentro de un marco, con el fin de
El dimetro medio de las mismas oscila entre incrementar el rea de filtracin.
10-4 y 10-7 cm.
Flujo laminar. Fenmeno de la mecnica de
Aire de suministro. Aire que entra a la ca- los fluidos, en el cual cada punto de un flui-
bina a travs de la abertura frontal o de trado se mueve con velocidad uniforme a lo lar-
bajo y que reemplaza el aire extrado de la go de lneas paralelas entre s. Se presenta
cabina. cuando el nmero de Reynolds [Re] es menor
a 3 000.
Cabina de seguridad biolgica. Equipo
diseado para controlar aerosoles y micro- Luz ultravioleta. (UV). Radiacin electro-
partculas, asociados al manejo de material magntica cuya longitud de onda se encuen-
biolgico potencialmente infeccioso que se tra comprendida entre los 200 y los 390 nm.
generan en los laboratorios como resultado Se utiliza en las cabinas de seguridad biolgi-
de actividades como agitacin y centrifuga- ca porque tiene propiedades bactericidas.
cin, uso y manejo de pipetas, apertura de
recipientes con presiones internas diferentes NSF. Acrnimo de National Sanitation Foun-
a la atmosfrica, entre otros, utilizando con- dation, organizacin sin nimo de lucro dedi-
diciones apropiadas de ventilacin, para cada a la investigacin, educacin y el servi-
proteger al usuario, al ambiente y la mues- cio, que busca resolver problemas que rela-
tra con la que se trabaja. cionan al ser humano y su entorno. Su misin
es promover la salud y el enriquecimiento de
Certificacin. Procedimiento mediante el la calidad de vida, a travs de la conservacin
cual se establece que el funcionamiento de y el mejoramiento del ambiente. Los estnda-
una cabina de seguridad biolgica cumple res de la NSF suministran los criterios bsicos
con los criterios y requerimientos mnimos para promover la salubridad y la proteccin
para poder operar con seguridad. El Estndar de la salud pblica.
NSF 49 aplica a las cabinas Clase II, Tipo A, B1,
B2 y B3. Superficie de trabajo. Superficie que se uti-
liza cuando se realiza algn trabajo, opera-
Descontaminacin. Remocin o destruc- cin o actividad dentro de la cabina de segu-
cin de agentes infecciosos; remocin o neu- ridad biolgica.
tralizacin de agentes txicos.
Txico. Sustancia que tiene un efecto fisiol-
Filtro HEPA. Filtro que tiene la capacidad gico adverso sobre los sistemas biolgicos.
de remover partculas cuyo dimetro medio
es de 0,3 m con una eficiencia del 99,97 %.
71
Bibliografa
Cabinas de Seguridad Biolgica. Uso, Desinfeccin y Mantenimiento, Washington D. C., Or-
ganizacin Panamericana de la Salud, 2002.
Class II (Laminar flow) Biohazard Cabinetry, NSF International Standard, NSF-49-1992.
Prez, W., Mantenimiento de cabinas de flujo laminar, Memorias Taller Internacional sobre
Calidad en el Laboratorio de Salud Pblica, Bogot, Instituto Nacional de Salud, 2003.
Personnel & Product Protection: A Guide To Biosafety Enclosures, Kansas City, Labconco
Corporation, 1993.
Primary Containment for Biohazards: Selection, Installation and Use of Biological Safety Ca-
binets, Washington D. C., U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Di-
sease Control and Prevention and National Institutes of Health, 2nd. Edition, 2000.
Purifier Delta Series, Biological Safety Cabinets. Users Manual, Kansas City, Labconco Cor-
poration, Part N 36960-20, Rev. A ECO B296.

The Laboratory Biosafety Guidelines, 3rd. Edition-Draft, Health Canada, 2001.

(www.Hc-sc.gc.ca/hpb/lcdc/biosafety)
72
Centrfuga 7
COMPONENTES DE LA CENTRFUGA 4. Base.
Los componentes ms importantes de una 5. Tapa.

centrfuga son los siguientes5:
6. Carcaza.
El control elctrico/electrnico que dispone
generalmente de los siguientes elementos: 7. Motor elctrico.
1. Control de encendido y apagado, control 8. Rotor. Existen rotores de diverso tipo, los
de tiempo de operacin temporizador, ms comunes son los de ngulo fijo, los de
control de velocidad de rotacin en algu- cubo pivotante, los de tubo vertical y los
nas centrfugas, control de temperatura de tubo casi vertical, los cuales se explican
en centrfugas refrigeradas, control de a continuacin.
vibraciones mecanismo de seguridad y
sistema de freno.
Tipos de rotores
2. Sistema de refrigeracin, en las centrfu-
gas refrigeradas. Las centrfugas utilizan diversas clases de ro-
tores. Dentro de los ms utilizados estn los
3. Sistema de vaco, en ultracentrfugas. (No siguientes:
consta en la ilustracin).
Tipos de rotores
TIPO DE ROTOR CARACTERSTICAS ESQUEMA CORTE TRANSVERSAL

Rotores de ngulo fijo Son rotores de propsito general. Mantienen los
tubos en un ngulo fijo [] que por diseo est
especificado entre los 20 y los 45 grados. Se utili-
zan para sedimentar partculas subcelulares. El
ngulo acorta la trayectoria de las partculas y los
tiempos de centrifugado, si se comparan con los
rotores de cubo pivotantes.
Rotores de cubo Se utilizan para realizar estudios isopcnicos se-

pivotante paraciones como una funcin de la densidad y
estudios de tasa zonal separaciones como una
funcin de los coeficientes de sedimentacin,
donde se requiere mxima resolucin de zonas de
la muestra.
Rotores de tubo vertical Este tipo de rotor mantiene los tubos paralelos al
eje de rotacin. As se logran obtener bandas se-
paradas, a travs del dimetro de tubo y no la lon-
gitud del tubo. Estos rotores se usan para realizar
estudios isopcnicos y en algunos casos separacio-
nes de tasa zonal, donde la reduccin del tiempo
de centrifugado es importante. Estos rotores utili-
zan tubos de diseo especial.
5
Los nmeros que identifican cada componente corresponden a los indicados en el esquema.
75
Centrfuga 7
3. Si la centrfuga es refrigerada, requiere de mismos sean utilizados. Cumplir con las

un espacio libre en el lado del condensa- indicaciones de uso y cuidado que especifi-
dor, para que pueda haber una transferen- ca el fabricante.
cia de calor adecuada.
3. Utilizar los rotores nicamente en las cen-
4. Un mueble en el cual puedan guardarse trfugas para las cuales han sido fabrica-
los accesorios que, como los rotores alter- dos. No intercambiar rotores sin verificar
nos, complementan la dotacin de las la compatibilidad con la centrfuga en la
centrfugas. cual se instala.
4. Registrar los parmetros de operacin pa-

RUTINAS DE MANTENIMIENTO ra cada rotor en una bitcora, para poder
determinar su vida til remanente y ges-
Las rutinas de mantenimiento que requiere tionar a tiempo la adquisicin de los
una centrfuga dependen de mltiples facto- reemplazos.
res, tales como la tecnologa incorporada, la
intensidad de uso, la capacitacin de los 5. Utilizar las recomendaciones de velocidad
usuarios, la calidad de la alimentacin elctri- mxima y densidad de las muestras que re-
ca y las condiciones del ambiente donde se comienda el fabricante. Cada rotor est di-
encuentra instalada. A continuacin, se pre- seado para soportar un mximo nivel de
sentan las recomendaciones generales para la esfuerzo; dichas especificaciones deben ser
adecuada utilizacin y las rutinas de mante- respetadas rigurosamente.
nimiento ms comunes para garantizar una
correcta operacin. Las rutinas o reparacio- 6. Acatar las recomendaciones relativas a re-
nes especializadas dependern de las reco- ducir la velocidad de operacin cuando se
mendaciones que, para cada marca y modelo, trabaja con soluciones de alta densidad,
establezcan los fabricantes. con tubos de acero inoxidable o adaptado-
res plsticos. Los fabricantes suministran la
Recomendacin prioritaria: Verificar que informacin correspondiente.
nicamente el personal que haya recibido y
aprobado la capacitacin de manejo, uso, 7. Utilizar rotores de titanio si se trabaja con
cuidado y riesgos de la centrfuga la opere. Es soluciones salinas frecuentemente.
responsabilidad de los directores de los labo-
ratorios vigilar y tomar las precauciones que 8. Proteger el recubrimiento de los rotores
consideren oportunas para que el personal para evitar que se deteriore el metal base.
que las opera entienda las implicaciones de No utilizar detergentes alcalinos o solucio-
trabajar esta clase de equipo. nes limpiadoras que pudieran remover la
pelcula protectora. Los rotores, general-
mente fabricados de aluminio [Al], estn
RECOMENDACIONES DE CONSERVACIN recubiertos por una pelcula de aluminio
Y MANEJO ADECUADO6 anodizado que protege la estructura del
metal.
Rotores
9. Utilizar cepillos plsticos en las actividades
1. Registrar la fecha de compra de cada de limpieza de los rotores. Los cepillos me-
uno de los rotores, incluyendo informa- tlicos rayan el recubrimiento protector y
cin relacionada con el nmero de serie esto genera fuentes de futura corrosin,
y modelo. que se aceleran bajo las condiciones de
operacin que acortan la vida til rema-
2. Leer y entender los manuales de los ro- nente del rotor.
tores, equipo y tubos, antes de que los
6
http://www.sunysb.edu/facilities/ehs/lab/cs.shtml
77
10. Lavar el rotor inmediatamente en el caso suave, diluido en una relacin de 1:10 en
de que se presenten derrames de sustan- agua y un cepillo de textura suave no me-
cias corrosivas. tlico. Evitar usar lavaplatos automticos.
11. Secar el rotor con aire seco, siempre que 2. Evitar el uso de alcohol y acetona, pues di-
haya sido limpiado y enjuagado con chos materiales afectan la estructura de
agua. los tubos. Los fabricantes recomiendan el
tipo de solvente que debe utilizarse con
12. Almacenar los rotores de tubo vertical o cada tipo de material con que se fabrican
tubo casi vertical, con el lado superior ha- los tubos de centrifugacin.
cia abajo y sin las respectivas tapas.
3. Evitar secar los tubos en un horno de secado.
13. Almacenar los rotores en ambientes se- Secar siempre con un chorro de aire seco.
cos. Evitar dejarlos en la centrfuga.
4. Verificar si los tubos utilizados son reutili-
14. Almacenar los rotores de cubo pivotante zables o no. Si son desechables, utilizarlos
sin las tapas de los compartimentos. solo una vez.
15. Lubricar las roscas y los anillos tipo O, 5. Para esterilizar, previamente es necesario
de acuerdo con las recomendaciones del verificar el tipo de material del tubo, pues
fabricante. no todos soportan la esterilizacin por ca-
lor. La cristalera se esteriliza normalmente
16. Observar las recomendaciones relaciona- con vapor a 121 C durante 30 minutos.
das con tiempos de garanta y vida til de
cada tipo de rotor. 6. Almacenar los tubos y las botellas en un lu-
gar seco, oscuro y fresco, alejado de fuen-
17. Evitar utilizar rotores a los cuales se les ha tes de vapores qumicos o fuentes de ra-
terminado el perodo de vida til. diacin ultravioleta.
18. Utilizar blindajes si se usa la centrfuga 7. Verificar los niveles de llenado y el selle en
con material radiactivo. los tubos de pared delgada, para evitar su
colapso dentro del rotor por accin de la
19. Cargar o descargar los rotores dentro de fuerza centrfuga. Cumplir las recomenda-
una cabina de seguridad biolgica, si se ciones de los fabricantes.
trabaja con materiales clasificados como
de bioriesgo de nivel II o superior.
Mantenimiento preventivo
20. Nunca tratar de abrir la tapa de una cen-
trfuga que est funcionando y nunca in-
tentar detener el rotor con la mano. Advertencia: Nunca efectuar una in-
tervencin tcnica en una centrfuga,
si la misma no ha sido previamente
Tubos descontaminada.
El cuidado de los tubos abarca aspectos como

el llenado del tubo, la seleccin adecuada de Las rutinas de mantenimiento ms importan-
temperatura, las limitaciones de velocidad de tes que se le efectan a una centrfuga son
centrifugacin, el lavado y la esterilizacin. Las estas:
principales recomendaciones en relacin con
los aspectos mencionados son las siguientes: Frecuencia: Mensual
1. Lavar los tubos, adaptadores y dems acce- 1. Verificar que los componentes externos de
sorios a mano, utilizando un detergente la centrfuga se encuentren libres de polvo
78
Centrfuga 7
y de manchas. Evitar que el rotor se afecte medido no debe variar ms de 10 % del

por derrames. Limpiar el compartimiento tiempo programado.
del rotor, utilizando un detergente suave.
6. Verificar la velocidad de rotacin real con-
2. Comprobar que el mecanismo de acople y tra la seleccionada, utilizando una carga
ajuste de los rotores se encuentre en buen normal. La comprobacin se efecta con
estado. Mantener lubricados los puntos un tacmetro o un fototacmetro. Si la
que recomienda el fabricante. compuerta no es transparente, debe se-
guirse el procedimiento que para el efecto
3. Verificar el estado del mecanismo de cierre indique el fabricante.
/ seguridad de la tapa de la centrfuga,
pues es fundamental para garantizar la se- 7. Confirmar el funcionamiento del sistema
guridad de los operadores. El mecanismo de freno.
mantiene cerrada la tapa de la centrfuga,
mientras el rotor se encuentra girando. 8. Verificar el funcionamiento del sistema de
refrigeracin; solo en centrfugas refrige-
4. Confirmar la lubricacin de los elementos radas. Las actividades ms importantes son
que recomienda el fabricante, como sellos las siguientes:
tipo O. Utilizar siempre lubricantes de
acuerdo con las recomendaciones del fa- a) Controlar que las temperaturas seleccio-
bricante frecuencia y tipo de lubrican- nadas no difieran ms de 3 C, de las
tes. En centrfugas de fabricacin recien- temperaturas medidas con el termme-
te se usan rodamientos sellados que no re- tro digital.
quieren lubricacin.
b) Verificar el estado del filtro de la toma de
5. Verificar el estado de los empaques y jun- aire. Si es filtro se encuentra obstruido,
tas de estanqueidad. limpiar o sustituir por un equivalente.
c) Efectuar una limpieza detallada de las

Frecuencia: Anual aletas difusoras del condensador, para
eliminar la suciedad que se deposita so-
1. Verificar que las tarjetas electrnicas se en- bre ellas. Esto mantiene las tasas de
cuentren limpias y bien conectadas. transferencia de calor, segn las especifi-
caciones de diseo. Si se detecta un fun-
2. Comprobar el grupo de control, el cual dis- cionamiento anormal, solicitar servicio
pone de selectores de velocidad, tiempo tcnico especializado.
de centrifugado, temperatura de opera-
cin, alarmas e instrumentos anlogos o d) Verificar el estado de las escobillas del
digitales para registrar los parmetros de motor, si la centrfuga dispone de motor
operacin de la centrfuga. con escobillas. Sustituir por nuevas de la
misma especificacin original, en caso
3. Verificar el cumplimiento de normas elc- de ser requerido. Realizar esta rutina ca-
tricas. Utilizar un analizador de seguridad da seis meses.
elctrica: pruebas de resistencia a tierra,
corrientes de fuga.
4. Si la centrfuga es refrigerada, comprobar Nota: Evitar derrames de lquidos sobre el

la temperatura mediante el termmetro teclado de control. Los teclados de mem-
electrnico. La temperatura no debe va- brana deben operarse con la yema de los
riar ms de 3 C. dedos. Evitar que el operador utilice la
punta de la ua, pues termina perforando
5. Examinar la exactitud de los controles de la membrana de proteccin.
tiempo. Utilizar un cronmetro. El tiempo
79
Herramientas e instrumentacin requerida 2. Un analizador de seguridad elctrica o un
instrumento para medir corrientes de fuga
Para poder realizar las inspecciones de man- 3. Un cronmetro.
tenimiento requeridas normalmente por una 4. Un termmetro electrnico con exactitud
centrfuga, son necesarios los siguientes ins- de 0,5 C para centrfugas refrigeradas
trumentos o herramientas: nicamente.
5. Un tacmetro o fototacmetro.
1. Una llave para apretar o aflojar la tuerca
del rotor.
Rotores7

Vibracin severa. Rotor desbalanceado. Balancear la carga del rotor. Llenar todos los
tubos opuestos con el mismo nivel de lquido
de la misma densidad.
Distribuir simtricamente el peso de tubos
opuestos.
Cargar los rotores de ngulo fijo o de tubo
vertical de forma simtrica.
Velocidad seleccionada cerca del rango Seleccionar una velocidad de rotacin fuera
de velocidad crtica del rotor. del rango de velocidad crtica.
Rotor mal montado. Verificar el montaje del rotor. Comprobar que
se encuentre bien ajustado.
Falta lubricacin en los suportes de los Lubricar los ejes de pivote segn recomenda-
rotores de cubo pivotante. cin del fabricante. Por ej. cada 250 procedi-
mientos de centrifugado.
Tapas de los rotores, canister o cubos Produccin de vaco durante la Abrir el conducto de ventilacin en la parte su-
difciles de aflojar despus de la centrifugacin. perior del rotor o cubo, para eliminar el vaco.
centrifugacin.
Roscas contaminadas con suciedad, lu- Efectuar limpieza rutinaria a las roscas y lubri-
bricantes secos o partculas metlicas. car. Utilizar insumos recomendados por los
fabricantes.
Tubos

Los tubos presentan fugas. Tapas mal aseguradas. Ajustar las tapas.
Tubos demasiado llenos. El menisco deber estar ms bajo para preve-
nir las fugas.
En tubos sin tapa, se ha excedido el ni- Verificar las recomendaciones de volumen y la
vel mximo recomendado. velocidad de centrifugado recomendada.
En tubos de sello rpido, se presume un Presionar suavemente, despus de sellar en
sellado deficiente. caliente solo si no se afecta el contenido. Si
se presentan fugas, sellar de nuevo.
7
Rotors and Tubes for Beckman Coulter J2, J6 and Avanti J series centrifuges, Users Manual, Palo Alto, California,
The Spinco Business Center of Beckman Coulter, 2001.
80
Centrfuga 7

Los tubos se rajan o rompen. Los tubos pueden romperse o volverse Calentar hasta 2 C, si la muestra est conge-
frgiles si se usan por debajo del lmite lada, antes de centrifugar. Evaluar antes de
de la temperatura recomendada. centrifugar el comportamiento de los tubos a
baja temperatura.
Los tubos se vuelven frgiles con la Desechar tubos vencidos, utilizar nuevos.
edad y el uso.
Sistemas varios

El interruptor principal est en posicin No hay energa elctrica. Verificar suministro de energa elctrica.
de encendido pero la centrfuga no
funciona.
La tapa de la centrfuga no abre. Centrfuga apagada. Encender la centrfuga. Presionar la manija y
abrir la tapa.
El indicador de balanceo se activa. Carga a centrifugar desbalanceada. Balancear la carga a centrifugar.
Centrfuga desnivelada. Nivelar la centrfuga.
Existe vibracin a baja velocidad. Mecanismo de ajuste del rotor flojo. Ajustar correctamente el sistema de fijacin.
Carga desbalanceada. Verificar el balanceo de la carga a centrifugar.
Velocidad seleccionada cercana al pun- Seleccionar una velocidad de rotacin ms
to de resonancia del rotor. elevada o utilizar un tipo de rotor diferente.
Existen fluctuaciones en la velocidad Correas de transmisin en mal estado (*). Apagar la centrfuga. Verificar la condicin y
de rotacin. estado de las correas. Las correas deben estar
templadas.
La velocidad de rotacin no llega a la Escobillas defectuosas. Apagar la centrfuga. Verificar el estado de las
velocidad seleccionada. escobillas. Sustituir si es del caso por otras de
la misma especificacin de las originales.
Calibracin del control de velocidad Ajustar calibracin del control de velocidad.
desajustado.
La cmara est fra pero el rotor caliente. Seleccin incorrecta de la temperatura. Verificar seleccin de la temperatura.
El testigo de estado de escobillas est Escobillas en mal estado. Apagar la centrfuga. Verificar estado. Sustituir
encendido. escobillas por otras de igual especificacin.
* Procedimiento vlido en centrfugas, con sistema de transmisin de potencia por correas.
DEFINICIONES BSICAS de un motor. Por lo general, las escobillas son

fabricadas en grafito de textura muy blanda
Densidad. Masa de un cuerpo por unidad de y son un insumo que debe cambiarse con re-
volumen. gularidad (cada seis meses) en los motores
que las utilizan.
m Se expresa generalmente en
[D = ]
V gramos por cm3. Fuerza centrfuga. Fuerza que acta sobre
una partcula y trata de alejarla del centro de
Escobilla. Dispositivo mediante el cual se efec- rotacin; se entiende tambin como la ten-
ta la transmisin de la energa elctrica, entre dencia que tiene todo slido en rotacin a ale-
la acometida externa cables en estado estti- jarse del eje. Es uno de los componentes del
co y los componentes internos en rotacin vector de inercia que equilibra el conjunto de
81
Centrfuga 7
Bibliografa
Mantenimiento y reparacin de equipos de laboratorio, diagnstico por imagen y hospital,
Ginebra, Suiza, Organizacin Mundial de la Salud, 1996.
Manual de operacin y cuidados del equipo del laboratorio clnico, Proyecto de manteni-
miento hospitalario, San Salvador, El Salvador, GTZ-Ministerio de Salud Pblica, 1998, 5-7.
(http://www.gruposaludgtz.org/proyecto/mspas-gtz/Downloads/Laboratorio-Clinico.pdf)
Rotors and Tubes for Beckman Coulter J2, J6 and Avanti J series centrifuges, Users Manual,
Palo Alto, California, The Spinco Business Center of Beckman Coulter, 2001.
(http://arcturi.swmed.edu/cue/centrifuges/JR%26T.pdf)
Rotors and Tubes for Beckman Coulter tabletop preparative ultracentrifuges Optima TM
MAX and MAX C, Users Manual, Palo Alto, California, The Spinco Business Center of Beck-
man Coulter, 2001.
SERO-FUGE Centrifuge, Mod 0521 and 0522, Operator manual, Clay Adams, Division of Bec-
ton Dickinson and company.

(http://web.princeton.edu/sites/ehs/labsafetymanual/sec7i.htm)
83
84
CAPTULO 8
Destilador de agua
15-136 Unidades de destilacin
DESTILADOR DE AGUA molculas de agua, de las molculas de otras

sustancias o elementos que se encuentran
La palabra destilador proviene de la palabra mezclados o diluidos. El vapor de agua se re-
latina distillare que significa vaporizar los l- colecta y se lleva a travs de un condensador,
quidos por medio del calor. El destilador de donde el vapor se enfra y vuelve a la fase l-
agua que se usa en el laboratorio purifica el quida. Entonces, el condensado se recoge en
agua corriente, mediante procesos controla- un tanque de almacenamiento diferente. El
dos de vaporizacin y enfriamiento. Al aplicar agua destilada presenta mejores caractersti-
energa trmica al agua en fase lquida, luego cas de pureza comparada con el agua co-
de un proceso de calentamiento, se convierte rriente; prcticamente se encuentra libre de
en vapor de agua. Esto permite separar las sustancias que la contaminen.
ESQUEMA DEL DESTILADOR DE AGUA
Ilustracin 21: Destilador de agua
PROPSITO DEL DESTILADOR DE AGUA servicios de salud, especialmente en las uni-

dades de laboratorio, lavado y esterilizacin,
El destilador permite obtener agua de gran y diettica. En el laboratorio el nivel de pure-
pureza, a partir del agua potable como la su- za ser mayor mientras ms especializados
ministrada normalmente por los servicios de sean los procedimientos. Por ejemplo: la pre-
acueducto de los centros urbanos. El agua paracin de reactivos o de material biolgico
destilada se caracteriza por carecer de slidos requiere agua de la ms alta calidad y la des-
en suspensin y es utilizada en mltiples apli- tilacin es uno de los procesos fundamenta-
caciones en los centros para la prestacin de les para lograrlo. (Aunque no el nico que
85
pudiera ser requerido). El agua utilizada en energa trmica generada mediante resis-
los laboratorios debe estar libre de pirge- tencias elctricas de inmersin, que trans-
nos, con una concentracin de slidos totales miten, mediante conduccin directa, ener-
no mayor de 1 ppm, cuyos valores de pH es- ga trmica al agua. Esto hace que la tem-
tn comprendidos entre 5,4 y 7,2 y su resis- peratura del agua aumente, hasta que, a
tencia elctrica sea no menor de 3 x 105 condiciones normales (presin atmosfrica
ohm/cm a 25 C1. igual a una atmsfera, y aceleracin de la
gravedad igual a 9,80665 m/s2), el agua en
fase lquida se transforma en agua en fase
PRINCIPIOS DE OPERACIN vapor a 100 C.
El funcionamiento de un destilador est ba- 2. Nivel de agua. Es un dispositivo que permi-

sado en un fenmeno que se presenta libre- te regular la cantidad de agua dentro del ge-
mente en la naturaleza y es conocido como el nerador de vapor. Se encuentra conectado
ciclo del agua. La energa proveniente del sol directamente a la acometida que suministra
calienta el agua de los mares y transforma el agua que utiliza el destilador. Cuando la
parte de la misma en vapor de agua. Dicho cantidad de agua en fase lquida contenida
vapor se concentra en nubes que, cuando las en el tanque de ebullicin disminuye, el dis-
condiciones atmosfricas son adecuadas, se positivo permite recuperar la cantidad de l-
enfra y condensa, volviendo a la superficie quido que se ha evaporado.
en forma de lluvia.
3. Vlvula de control. Es un dispositivo me-
cnico o electromecnico que permite re-
Funcionamiento del destilador de agua gular el flujo de agua hacia el tanque del
generador de vapor.
El destilador de agua reproduce el fenmeno
natural. Su configuracin y diseo varan de- 4. Acometida hidrulica. Es la red que su-
pendiendo de los volmenes de agua reque- ministra el agua en fase lquida al tanque
ridos. Se presenta a continuacin una explica- del generador de vapor.
cin general de las partes que integran un
destilador y se describe cmo funcionan. 5. Agua en fase lquida. Es el agua que se
encuentra dentro del tanque del genera-
1. Generador de vapor. Tambin se le cono- dor de vapor. Recibe la energa trmica
ce como tanque de ebullicin. Este compo- que transfieren las resistencias de inmer-
nente es el recipiente en el cual se almace- sin y se convierte a fase vapor, cuando se
na el agua que va a ser destilada. Por lo ge- cumplen las condiciones de presin y tem-
neral, dispone de una acometida hidrulica peratura requeridas.
que permite reponer el agua que se evapo-
ra y destila. Se fabrica generalmente en vi- 6. Resistencias de inmersin. Son disposi-
drio en pequeos destiladores o en acero tivos que generan calor cuando a travs de
inoxidable, cobre recubierto con estao o los mismos circula una corriente elctrica.
titanio en mquinas de gran capacidad. Se encuentran aisladas por una capa de ce-
Puede disponer de controles de nivel, flujo rmica y protegidas del ambiente externo
y calidad del agua de alimentacin, que por una coraza metlica.
protegen el destilador en caso de que se
presente alguna irregularidad en el sumi- 7. Salida del agua de refrigeracin. Es la
nistro de agua. Como fuente de energa se lnea que conduce el agua que se ha utili-
utiliza el vapor de agua proveniente de zado para condensar el vapor de agua, re-
una caldera o generador de vapor, o la tirando al mismo energa trmica.
1
Warming cabinets, sterilizers, and associated equipment, Division 11 - Equipment, USACE/NAVFAC/ AFCESA,
UFGS-11710, July 2003.
86
8. Condensador. Es un dispositivo en el facilita la circulacin del aire desde la par-

cual el vapor pierde energa trmica, se te inferior del destilador.
enfra y vuelve a la fase lquida. Para ace-
lerar el proceso se utilizan mtodos de 2. Acometida hidrulica de agua potable. Es
conveccin forzada, mediante la circula- tpico encontrar que la acometida hidruli-
cin de fluidos aire o agua a baja tem- ca requerida tiene un dimetro de 1/2" .
peratura alrededor del conducto, a travs Sin embargo, para asegurar una operacin
del cual fluye el vapor. sin inconvenientes, debe evaluarse la cali-
dad del agua con la que se alimenta el des-
9. Filtro. Los destiladores disponen de fil- tilador y determinar si es necesario instalar
tros de carbn activado que se colocan a un sistema de tratamiento3 que evite la
la salida del condensador o a la salida del presencia de incrustaciones o sedimentos
colector, con el fin de eliminar sabores o dentro del tanque del generador de vapor
partculas que pudieran estar presentes y sobre las resistencias de inmersin. El
en el vapor que se condensa. agua potable se utiliza para alimentar el
generador de vapor y para refrigerar el
10. Depsito de agua destilada. Es un dis- condensador4.
positivo en el cual se recolecta el fluido
que se ha sometido al proceso de destila- 3. Acometida hidrulica de agua destilada. El
cin. El agua destilada debe almacenarse agua destilada que se produce es recolec-
en recipientes especiales fabricados prin- tada inicialmente en un tanque de almace-
cipalmente en materiales plsticos, para namiento. En equipos de gran capacidad
evitar que se presente contaminacin i- se distribuye desde el mismo, mediante
nica. Se utilizan para el efecto recipientes una red, a los puntos de consumo. En equi-
de polietileno, polipropileno o politetra- pos pequeos o medianos, se transfiere a
fluoruroetileno2. recipientes desde los cuales se utiliza en
los puntos de consumo.
SERVICIOS REQUERIDOS 4. Acometida hidrulica sanitaria. Se utiliza

para drenar la acumulacin de impure-
Dependiendo del diseo, la capacidad y el ti- zas que pueden acumularse en el tanque
po de destilador, los servicios requeridos po- del generador de vapor. Implica utilizar
dran variar. Los servicios ms comunes son un sifn que debe estar ubicado cerca al
los siguientes: destilador.
1. Ambiente bien ventilado donde pueda insta- 5. Acometida elctrica. Debe estar dotada de
larse el equipo. Es necesario debido a que el los dispositivos de control y seguridad,
destilador transfiere calor a un fluido y esto cumplir con las normas elctricas naciona-
aumenta la temperatura del lugar donde se les o internacionales que utilice el labora-
instale. Es necesario dejar espacios libres alre- torio, y estar dimensionada a la potencia
dedor del destilador de forma que se facilite de los elementos resistivos que utiliza el
el flujo de aire. Dado que algunos destila- destilador. Por lo general, el voltaje es de
dores se encuentran montados dentro de 220 V, 60 Hz o de 240 V, 60 Hz.
una caja metlica, esta normalmente re-
quiere ser instalada sobre un soporte que
2
Mantenimiento y reparacin de equipos de laboratorio, diagnstico por imagen y hospital, Ginebra, Organizacin
Mundial de la Salud, 1996.
3
Los sistemas de tratamiento de agua han sido diseados para retirar las sustancias que normalmente se encuentran
presentes en el agua, debido a la gran capacidad solvente de la misma. Las sustancias son por lo general iones inor-
gnicos aniones y cationes, entre los que se encuentran bicarbonatos, sulfitos, cloruros, calcio, magnesio, sodio,
potasio, hierro manganeso, nitratos y trazas de muchos otros.
4
Algunos fabricantes refrigeran el condensador mediante la utilizacin de ventiladores, los cuales hacen circular aire
sobre las aletas del condensador, generando procesos de transferencia de calor mediante conveccin forzada desde
la superficie de difusin al medio ambiente.
87
la utilizacin de un producto qumico, di-
Nota: Verificar siempre las recomendacio-
seado especialmente para remover los
nes de instalacin del fabricante del equi-
depsitos formados. Dicho producto debe
po, para asegurar que el destilador opera-
seleccionarse de acuerdo con las caracte-
r de acuerdo a los parmetros de diseo.
rsticas del agua que est siendo utilizada
y que se determinan mediante un anlisis
qumico del agua.
Rutinas de mantenimiento
5. Drenar la cantidad de agua contenida en el
Las rutinas de mantenimiento dependen del di- tanque de generacin hasta que su nivel es-
seo y la capacidad del destilador. Las rutinas t aproximadamente 10 cm por encima del
que se describen en el presente manual han sido sitio de ubicacin de la sonda de nivel o de la
enfocadas tomando un destilador dotado con resistencia de inmersin verificar que se en-
un tanque generador de vapor fabricado en ace- cuentre ubicado a ms altura sobre el fondo
ro inoxidable que opera con resistencias de in- del tanque, para asegurar que todos estos
mersin y cuyo condensador es refrigerado me- elementos queden sumergidos en el agua.
diante un ventilador que impulsa aire, sobre o a
travs de las aletas difusoras del condensador. 6. Aadir el producto qumico recomendado,
en funcin de las caractersticas del agua.
Advertencia: Antes de realizar cualquier 7. Mezclar bien.

inspeccin o rutina de mantenimiento, veri-
ficar que el destilador se encuentra apagado 8. Permitir que el qumico opere durante to-
y desconectado de la acometida elctrica. da la noche. El fabricante del producto
utilizado recomienda los tiempos para re-
mover los sedimentos.
Inspeccin y limpieza del tanque genera-
dor de vapor 9. Drenar el contenido del tanque, a la ma-
Frecuencia: Mensual ana siguiente.
1. Retirar el panel de proteccin o abrir la 10. Aadir agua limpia, lavar y drenar hasta
puerta que permite acceder al tanque de estar seguros de que el qumico utilizado
ebullicin o generador de vapor. haya sido completamente removido, jun-
to con los residuos minerales removidos
2. Retirar la tapa del tanque de ebullicin. de las superficies afectadas.
3. Verificar visualmente si las paredes interio- 11. Reinstalar la tapa.

res o las resistencias de inmersin presentan
depsitos de slidos o sedimentos alrededor 12. Colocar los paneles frontales o ajustar la
de la superficie. La cantidad de depsitos puerta.
presentes depender de la calidad del agua
con la que se alimente el destilador. Si se 13. Operar normalmente el equipo.
comprueba la acumulacin de dichos sedi-
mentos, debe limpiarse para evitar que se
daen las resistencias de inmersin5. Advertencia: Bajo ninguna circunstancia
destilar la solucin utilizada para remover
4. Limpiar los depsitos acumulados. Por lo los sedimentos.
general, el proceso de limpieza requiere
5
Los minerales que se depositan sobre el recubrimiento de las resistencias de inmersin tienen la particularidad de ser
muy malos conductores del calor, por lo que impiden una eficiente transferencia de calor entre la resistencia de in-
mersin y el agua en proceso de destilacin. Esto hace que la temperatura de la resistencia aumente por encima de
aquella que normalmente alcanzara en condiciones normales de operacin, deteriorando su estado e integridad.
88
Cambio del filtro de carbn activado 6. Retirar el condensador. Aspirar la sucie-

Frecuencia: Cada tres meses dad, polvo y pelusa, acumulada sobre la
superficie de las aletas difusoras. (Tambin
Normalmente, el filtro de carbn activado se puede utilizarse aire comprimido o una
instala aguas abajo del sistema dispensador, brocha humedecida con agua y jabn).
que proviene del tanque de almacenamiento
de agua destilada. Se encuentra montado en 7. Enjuagar el conjunto.
una carcaza instalada sobre la lnea de distri-
bucin del agua destilada. Por lo general, es 8. Secar.
un dispositivo de fcil sustitucin. El proceso
que generalmente se realiza es el siguiente: 9. Ensamblar nuevamente siguiendo un or-
den contrario al descrito.
1. Desenroscar la tapa del filtro.
2. Retirar el elemento filtrante usado. Esterilizacin del tanque de

almacenamiento de agua destilada
3. Instalar un nuevo elemento filtrante de las Frecuencia: Ocasional
mismas caractersticas del original.
Antes de iniciar la operacin de un nuevo
4. Reinstalar la tapa del filtro. destilador de agua, se recomienda verificar
que el tanque de almacenamiento del agua
destilada se encuentre estril y limpio. Para
Advertencia: El elemento filtrante ajusta efectuar la esterilizacin, se recomienda
dentro de la carcaza del filtro, mediante utilizar un proceso de tipo qumico usando
sellos tipo anillo o rings que deben ser ins- un blanqueador domstico a base de cloro.
talados con cuidado en las ranuras para El procedimiento a seguir se presenta a
evitar fugas de agua destilada. continuacin:
1. Verificar que el interruptor general se en-

Limpieza del condensador cuentre apagado.
Frecuencia: Anual
2. Abrir el panel frontal para acceder al tan-
1. Para la limpieza del condensador, es necesa- que de almacenamiento del producto
rio retirar los paneles protectores o abrir la destilado.
puerta que permite acceder al condensador.
3. Retirar el filtro de carbn activado del
2. Verificar que el destilador de encuentre alojamiento.
desconectado de la acometida elctrica.
4. Preparar una solucin de blanqueador de
3. Remover el conjunto del condensador. Desco- cloro hasta que se obtenga una concentra-
nectar el sistema de acople para ingreso de vapor cin de 200 ppm y aadirla al tanque de
y el acople que conecta el condensador al tan- almacenamiento.
que de almacenamiento del producto destilado.
5. Permitir que la solucin interacte con el
4. Remover los tornillos que ajustan y ensam- tanque, por al menos tres horas.
blan el conjunto del ventilador con el con-
densador. Desconectar los terminales del 6. Vaciar el tanque de almacenamiento utili-
ventilador de sus puntos de conexin. zando la lnea de drenaje.
5. Retirar el ventilador y limpiar la suciedad 7. Encender el destilador y dejar que el tan-

que se haya acumulado en la superficie de que de almacenamiento se llene con agua
los labes. Lubricar el sistema de roda- destilada.
miento con aceite mineral (dos gotas).
89
8. Drenar nuevamente el tanque de almacenamiento. 10. Permitir que el destilador llene el tanque
de almacenamiento con agua destilada.
9. Colocar el filtro de carbn activado en su El filtro de carbn activado remover
alojamiento. cualquier remanente del blanqueador de
cloro utilizado.

El destilador no produce agua destilada. No hay suministro de energa. Verificar que el conector elctrico est bien
ajustado en la toma elctrica.
Confirmar que haya energa elctrica en el cir-
cuito que alimenta el destilador.
Verificar que el interruptor principal est en la
posicin encendido.
Comprobar que haya agua en el generador de
vapor o cmara de ebullicin.
Resistencia de inmersin quemada. Verificar la integridad de la resistencia de in-
mersin. Medir continuidad elctrica o resis-
tencia en ohmios del calefactor. Sustituir por
otra de las mismas caractersticas del original.
El destilador presenta agua a su El destilador o alguno de sus compo- Comprobar que el filtro de carbn activado se
alrededor. nentes mal instalado. encuentre bien instalado y que el agua fluya a
travs de l.
Verificar que el tanque colector de condensa-
do se encuentre bien ubicado.
Confirmar que las instalaciones de drenaje no
presentan fugas.
El destilador presenta vapor a su Ventilacin inadecuada del destilador. Verificar que el destilador dispone de espacios
alrededor. libres a su alrededor. Tambin que dispone de
espacio libre en la parte trasera. (Adems, que
no est pegado a la pared).
Comprobar que no haya objetos que interfie-
ran el flujo libre del aire hacia el destilador.
Remover cualquier objeto que afecte el libre
flujo.
El ventilador de refrigeracin no funciona. Verificar el estado del ventilador. Si est energi-
zado y no funciona, sustituir el ventilador por
otro de las mismas caractersticas del original.
El agua destilada tiene sabor. Filtro de carbn activado agotado. Reemplazar el filtro de carbn activado.
90
DEFINICIONES BSICAS filtracin; tambin se le conoce como du-

reza de carbonatos.
Destilacin. Proceso mediante el cual se ca- Dureza permanente. Est determinada
lienta un fluido en fase lquida hasta que se por todas las sales de calcio y magnesio,
transforma en fase vapor, posteriormente se excepto carbonatos y bicarbonatos. No
enfra y se condensa nuevamente a fase lqui- puede ser eliminada por ebullicin del
da. El proceso de destilacin se utiliza para agua y tambin se le conoce como dureza
separar sustancias que se encuentran mezcla- de no carbonatos.
das, aprovechando las diferencias en volatili-
dad de las sustancias involucradas. Tambin Interpretacin de la dureza:
se utiliza la destilacin para obtener la sus- Dureza como CaCO3 Interpretacin
tancia ms voltil en forma ms pura. Para 0-75 agua suave
obtener sustancias muy puras se recurre a 75-150 agua poco dura
procesos de destilacin consecutivos, a fin de 150-300 agua dura
eliminar progresivamente sustancias con la > 300 agua muy dura
que se encuentran mezclados. En el caso del _____________________________________
agua, esta se encuentra mezclada con diver- En agua potable, el lmite mximo permi-
sos elementos qumicos. sible es de 300 mg / l de dureza.
Disolucin. Mezcla homognea de propie- En agua para calderas, el lmite es de

dades uniformes de dos o ms sustancias. Se 0 mg / l de dureza.
caracteriza por no existir interaccin qumica
entre los componentes de la mezcla. El com- Dureza clcica (DCa++). Cantidad de calcio
ponente que existe en mayor proporcin y presente en el agua.
que generalmente se encuentra en estado l-
quido se denomina disolvente y el que se en- Dureza magnsica (DMg++). Cantidad de
cuentra en menor cantidad, soluto. magnesio presente en el agua.
Dureza. Caracterstica qumica del agua de- Dureza total [Dt]. Cantidad en solucin de
terminada por el contenido de carbonatos, calcio [Ca] y magnesio [Mg] como cationes,
bicarbonatos, cloruros, sulfatos y ocasional- sin tener en cuenta la naturaleza de los anio-
mente nitratos de calcio y magnesio. La dure- nes presentes en el agua. Se expresa como
za es indeseable en algunos procesos. Existen ppm (partes por milln) de carbonato de cal-
dos tipos de dureza: cio. Su frmula es: CaCo3.
Dureza temporal. Est determinada por
el contenido de carbonatos y bicarbona- Incrustacin. Denominacin que se otorga a
tos de calcio y magnesio. Puede ser elimi- los slidos en suspensin que se depositan en
nada por ebullicin del agua y posterior forma de capas sobre la superficie de los reci-
eliminacin de precipitados formados por pientes que los contienen.
91
Bibliografa
American Society for Testing and Materials, Annual book of Standards 1994, Determinacin
de dureza en agua, Mtodo ASTM D 1126-92.
(http://members.tripod.com/Arturobola/dureza.htm#Bibliografa)
AquaSource ADWS6, Owners Manual, By Apollo by Midmark, Versailles, Ohio, AMI5000,

Rev. 12/03. (http://www.documark.com/Documents/a/ami50000.pdf)
AquaSource ADWS50, Owners Manual, By Apollo by Midmark, Versailles, Ohio,

AMI50010, Rev. 4/99. (http://www.documark.com/Documents/a/ami50010.pdf)
AquaSource, Water Distillation Systems: Apollo Dental Products Inc. Clovis, CA 93612
AMM60014, Rev. 4/00. (http://www.documark.com/Documents/a/amm60014.pdf)
Mantenimiento y reparacin de equipos de laboratorio, diagnstico por imagen y hospital,

Ginebra, Organizacin Mundial de la Salud, 1996.

Warming cabinets, sterilizers, and associated equipment, Division 11 - Equipment, USACE

/NAVFAC/AFCESA, UFGS-11710, July 2003.
(http://www.ccb.org/online/docs/ufgshome/pdf/11710.pdf))
92
CAPTULO 9
Diluidor
15-133 Diluidores
DILUIDOR componentes y pueden ser gaseosas, lquidas

o slidas. El diluidor es un equipo de labora-
El diluidor se utiliza para diluir. Diluir provie- torio que permite preparar mezclas general-
ne de la palabra latina diluere y significa aa- mente lquidas hasta que se cumpla una rela-
dir lquido a una disolucin. Disolver es pene- cin o proporcin concentracin entre los
trar y dividir las molculas de un cuerpo sli- elementos que constituyen la mezcla, para
do. Disolucin es la fragmentacin de una que puedan ser utilizados en distintos tipos
sustancia en molculas o iones dispersos ho- de procesos diagnsticos. La identificacin de
mogneamente en un lquido, por lo gene- este equipo est generalizada mediante el
ral, agua. Tambin se definen las disoluciones uso de la palabra inglesa dilutor.
como mezclas homogneas de dos o ms
ESQUEMA DEL DILUIDOR
Ilustracin 22: Esquema diluidor
PROPSITO DEL DILUIDOR PRINCIPIOS DE OPERACIN
El propsito del diluidor es preparar mezclas de El diluidor tiene varios componentes que inte-
sustancias, para lograr concentraciones y vol- ractan coordinadamente para manejar y mez-
menes determinados de una solucin o sustan- clar volmenes de lquidos con gran precisin, lo
cia, tal como se hace con una pipeta, con la ven- que permite preparar disoluciones comprendi-
taja de que el proceso puede ser automtico o das entre 1 l y 25 ml. El diluidor tiene, por lo
programado. Los diluidores varan en tamao y general, los siguientes componentes:
complejidad. Su capacidad depende del fabri-
cante, pero es comn encontrar que pueden 1. Un sistema propulsor
controlar volmenes comprendidos entre 25 l 2. Un sistema de control
(microlitros) y 25 ml (mililitros). 3. Un sistema dispensador
93
Sistema propulsor que al desplazarse en uno u otro sentido
cambia la posicin del pistn. Complementan
Generalmente est conformado por sistemas las jeringas y sus sistemas de desplazamiento
de desplazamiento positivo como los que tie- un conjunto de vlvulas que controlan los
nen una jeringa. En el diluidor se utiliza una procesos de aspiracin y suministro. La confi-
o ms jeringas seleccionables de diversa ca- guracin del diluidor depende de los tipos y
pacidad para controlar los volmenes a mez- modelos de los diversos fabricantes.
clar o diluir. Los pistones de las mencionadas
jeringas son propulsados por un mecanismo
que controla su posicin. Los volmenes aspi- Sistema de control
rados o entregados se calculan mediante la
ecuacin: Los diluidores modernos tienen un sistema de
control que puede ser automtico o controla-
V = Al do por microprocesadores. Estos ltimos per-
miten seleccionar y controlar lo siguiente:
donde:
V = fraccin de volumen entregada por la 1. Procesos de mezcla y/o disolucin de sus-
jeringa cuando el pistn tiene un tancias (programables)
desplazamiento l. 2. Suministro de volmenes predefinidos
A= rea del pistn. 3. Velocidades de succin o suministro
4. Nmero de ciclos requeridos
El volumen total aspirado o entregado es la 5. Tamao o volumen de las jeringas seleccionadas
integral correspondiente. 6. Tiempos
7. Ciclos de cebado y limpieza
l1
8. Procedimientos de verificacin de la calidad
V = A l
lo
Para dar una mejor idea de la complejidad tc-
Controlando de manera exacta el desplaza- nica alcanzada, se incluye a continuacin un
miento del pistn, se puede lograr un buen esquema del sistema de control, basado en un
control sobre los volmenes manipulados. El microprocesador que presenta algunas de las
sistema de desplazamiento es accionado me- funciones que incluye un diluidor. Los contro-
diante un motor elctrico que mueve un sis- les de este tipo de dispositivos, en general, son
tema de tuerca y tornillo de gran precisin, simtricos si se manejan dos inyectores.
Ilustracin 23: Control del diluidor
94
Diluidor 9
Sistema dispensador han sido igualmente tenidas en cuenta en el

proceso de diseo y fabricacin, para que re-
El sistema dispensador est compuesto por un sulten adecuadas con la actividad seleccionada.
conjunto de jeringas de alta precisin y de dis- Dichos conductos se interconectan utilizando
positivos denominados dispensadores, median- acoples que es posible ajustar mediante mani-
te los cuales se suministran los fluidos segn vo- pulacin manual. Normalmente, las jeringas se
lmenes y velocidades seleccionadas. Dichas je- encuentran clasificadas de acuerdo con el uso
ringas se seleccionan e instalan en el diluidor, jeringas para reactivos, diluyentes, muestras,
dependiendo de las densidades y viscosidades, y y el volumen que es necesario manipular. La ta-
los volmenes de los fluidos objeto de manipu- bla que se presenta a continuacin muestra un
lacin. Los fluidos son transportados a travs de ejemplo de la forma en que se encuentran cla-
conductos flexibles, cuyas caractersticas di- sificadas de acuerdo con su tamao y volme-
metros, longitudes, compatibilidad qumica nes procesados.
Tabla de tamaos de jeringa/volmenes manejados
Parte N Modelo Tamao Rango Tamao ductos1

(Depende del (Depende del jeringa (Volumen Soluciones Lquidos
fabricante) fabricante) procesado) acuosas viscosos
Df Df 25 l 2,5-25 l 18 18
Df Df 50 l 5-50 l 18 18
Df Df 100 l 10-100 l 18 18
Df Df 250 l 25-250 l 18 18
Df Df 500 l 50-500 l 18 18
Df Df 1 l 100-1 000 l 18 18
Df Df 2,5 ml 250-2 500 l 18 12
Df Df 5 ml 500-5 000 l 12 12
Df Df 10 ml 1 000-10 000 l 12 12
Df Df 25 ml 2 500-25 000 l 12 12
A continuacin, se incluye un esquema en el SERVICIOS REQUERIDOS

que es posible ver los componentes del siste-
ma dispensador (jeringa y dispensador). El diluidor debe ser instalado en un mesn o
superficie de trabajo limpia, bien nivelada, se-
ca y alejada de lugares donde pueda haber va-
pores que puedan afectar su funcionamiento.
Se debe disponer de un rea libre alrededor

del equipo para facilitar la ventilacin y el pa-
so de los cables y lneas de interconexin, con
otros dispositivos como depsitos de solven-
te, computadores o sistemas de suministro.
Se estima que el espacio libre alrededor del
diluidor es de aproximadamente 10 cm.
Ilustracin 24: Jeringa y dispensador
1
Tabla 2.4, Microlab 501A, 503A, 504A, Users Manual, Hamilton Company.
95
Debe haber una toma elctrica en buen esta- contacto con dicha solucin y que se hayan
do con polo a tierra, de 115 V, 60 Hz. Tambin eliminado las burbujas de aire que pudieran
existen fabricantes que producen diluidores existir. Este proceso se conoce en ingls como
que operan a 220 V, 60 Hz. Prime. Para cebar el sistema se conecta el di-
luidor a un recipiente en el cual se encuentra
la citada solucin y se hace funcionar, recolec-
RUTINAS DE MANTENIMIENTO tando la solucin utilizada en otro recipiente
para su disposicin final.
Las rutinas estn enfocadas principalmente a
eliminar los contaminantes que puedan de- 2. Limpiar el sistema. Para efectuar la limpie-
positarse sobre las superficies interiores de za, se hace circular un fluido complemento
los mecanismos y/o conductos que utiliza el de la solucin limpiadora utilizada. (Con-
fluido durante su desplazamiento. Las rutinas sultar las recomendaciones del fabricante).
ms comunes son las siguientes: Es comn utilizar agua desionizada como
fluido de limpieza. Dependiendo de las
sustancias procesadas en el diluidor, tam-
Limpieza de superficies exteriores bin pueden utilizarse otros agentes de
Frecuencia: Diaria limpieza como etanol, urea, o una solu-
cin de blanqueador a base de cloro di-
Advertencia: Desconectar el diluidor de la suelto en agua desionizada con una con-
toma de alimentacin elctrica, antes de centracin del 10 %.
iniciar los procesos de limpieza externa.
Limpieza del sistema de conduccin
1. Limpiar las superficies exteriores, utilizan- de fluidos
do un trapo limpio humedecido con un de- Frecuencia: Antes de colocar en servicio por
tergente suave mezclado con agua. primera vez
2. Frotar suavemente las superficies del dilui- 1. Preparar un recipiente con solucin de lim-
dor y de los accesorios. pieza y colocar el tubo de llenado dentro
del mismo. (Los fabricantes recomiendan
3. Secar las superficies tratadas. utilizar agentes de limpieza compatibles
con los materiales de diluidor).
Advertencia: Evitar que la humedad
2. Colocar la sonda de mano dentro del re-
inunde el compartimiento de los compo-
cipiente de la solucin de limpieza o
nentes elctricos o electrnicos.
dentro del recipiente para recolectar el
desperdicio.
Limpieza de jeringas, mangueras o 3. Seleccionar un ciclo de cebado o imprima-

conductos cin hasta que la trayectoria que recorre el
Frecuencia: Diaria fluido quede limpia.
4. Retirar el tubo de llenado de la solucin

Advertencia: Si el diluidor ha estado en con-
limpiadora y colocarlo dentro de un reci-
tacto con sustancias peligrosas, se deben res-
piente con agua desionizada. Iniciar nue-
petar los procedimientos de seguridad y pre-
vamente un ciclo de cebado o imprima-
vencin implementados en el laboratorio.
cin, hasta que la trayectoria del fluido
quede libre de solucin limpiadora. Des-
1. Cebar el sistema con una solucin de limpie- cargar el fluido de enjuague dentro del re-
za. Consultar al fabricante para definir exac- cipiente de desperdicio.
tamente cul utilizar. Verificar que la totali-
dad de los elementos del sistema entren en 5. Suspender el ciclo de cebado.
96
Diluidor 9
6. Colocar el sistema propulsor del fluido en 3. Almacenar las jeringas en sus empaques
la posicin de descanso. originales.
7. Utilizar el sistema, pues se encuentra lim- 4. Cubrir el cuerpo del diluidor para prote-
pio y listo. gerlo de partculas de polvo.
5. Almacenar.
Procedimiento para almacenar el
diluidor
Frecuencia: Cuando se almacene por un pe- Control de calidad
rodo de tiempo prolongado
El control de calidad de los diluidores es simi-
1. Purgar e imprimar el sistema utilizando lar al de las pipetas. Para resolver las inquie-
metanol (facilita el secado). tudes, se solicita ver la explicacin que al res-
pecto se ha efectuado en el captulo corres-
2. Remover los tubos y las jeringas. pondiente a las pipetas.

El diluidor no enciende. Falla en la alimentacin elctrica. Revisar acometida elctrica.
Cable de alimentacin elctrica Conectar cable de alimentacin elctrica.
desconectado.
Fusible de proteccin abierto. Revisar fusible de proteccin. Sustituir por un
equivalente si el mismo se encuentra abierto.
El diluidor opera bien, pero no hay Posible dao en la pantalla LCD o en Verificar que el control est bien conectado al
mensajes o indicaciones en la pantalla. los diodos emisores de luz LED. sistema propulsor.
Llamar al servicio tcnico del fabricante.
Las teclas del control no funcionan. El diluidor est en modo Pausa. Presionar el botn Marcha/Fin para finalizar la
carrera del pistn.
El diluidor est atascado. Falla interna. Presionar el botn Marcha/Fin para finalizar la
carrera del pistn y reiniciar el ciclo.
Llamar al servicio tcnico del fabricante, si la
falla persiste.
El diluidor no aspira o dispensa. Tubos de los sistemas hidrulicos de- Verificar que los tubos, jeringas y conectores
fectuosos o bloqueados. estn libres de bloqueos. Limpiar o sustituir.
Conexiones incorrectas de tubos o Comprobar que los tubos, uniones, acoples y je-
jeringas. ringas utilizadas se encuentran bien ajustados.
Sistema propulsor defectuoso. Llamar al servicio tcnico del fabricante.
Vlvulas defectuosas. Remover las vlvulas. Verificar el sello de las
mismas, limpiar y reinstalar. Sustituir por una
vlvula equivalente en caso de ser requerido.
97
El diluidor produce resultados imprecisos. Existe aire en el circuito del fluido. Verificar que los tubos de aspiracin se en-
cuentren completamente sumergidos dentro
de los recipientes que contienen los reactivos.
Confirmar que los diversos conectores se en-
cuentran ajustados.
Verificar que las jeringas se encuentren co-
rrectamente instaladas y no presentan fugas.
Comprobar que los tubos o vlvulas no pre-
sentan fugas.
Reducir la velocidad de operacin de la jerin-
ga para eliminar problemas de cavitacin.
Tubo de descarga mal seleccionado en Verificar el tamao recomendado del tubo uti-
relacin con la capacidad de la jeringa. lizado y los acoples del mismo. Para volme-
nes pequeos utilizar las dimensiones reco-
mendadas por el fabricante.
Aparece un pequeo espacio de aire en Tubo de aspiracin sucio. Cambiar o limpiar el tubo de aspiracin.
la punta de la sonda despus de la as-
piracin final. Modo de aspiracin incorrecto. Reducir la velocidad de aspiracin.
Existe presencia de aire en forma per- Se presenta cavitacin en el sistema. La Reducir la velocidad del sistema propulsor. Recor-
sistente o fugas constantes en la tra- velocidad de aspiracin es muy alta. dar que, mientras ms viscosos sean los fluidos,
yectoria del fluido. deben manipularse a menor velocidad.
Acoples flojos, gastados o defectuosos. Ajustar los acoples con la mano. Sustituir los
tubos por otros de dimensin acorde al fluido
procesado.
Pistn defectuoso o jeringa daada. Reemplazar el pistn o la jeringa.
Vlvula defectuosa. Reemplazar la vlvula.
El diluidor se recalienta. Ventilacin inadecuada. Revisar la ventilacin.
Temperatura del ambiente demasiado Revisar el sistema de acondicionamiento de
alta. aire del ambiente.
Ciclo de trabajo muy intenso. Utilizar el diluidor con menor intensidad.
DEFINICIONES BSICAS Concentracin. Medida de la cantidad de so-

luto presente en una disolucin, desde el punto
Cavitacin. Fenmeno que se presenta en de vista de la qumica. El concepto se aplica con
los fluidos cuando alcanzan condiciones de mayor frecuencia a las soluciones y se expresa
alto vaco. (La presin disminuye hasta que se como la cantidad de un soluto que se encuentra
alcanza la presin de vapor del fluido). Esto disuelto en un solvente. La concentracin se ex-
produce diversos fenmenos como la vapori- presa de diversas formas; las ms comunes son:
zacin de los gases disueltos en el lquido o, molaridad [M], molalidad [m], normalidad [N],
en el caso del agua, la formacin de burbujas tanto por ciento de soluto.
de vapor que colapsan tras un lapso de tiem-
po infinitesimal, horadando las superficies de Diluir. Reducir la concentracin de soluto en
los conductos en los puntos localizados en la una mezcla, aadiendo otro fluido. El fluido
vecindad inmediata del lugar de ocurrencia que se aade se conoce como diluyente.
del fenmeno. En los diluidores se presenta
cuando se utilizan jeringas de gran capaci- Disolucin. Estado que se presenta como re-
dad, con velocidades elevadas de propulsin. sultado del proceso de intercalar totalmente
las molculas de una sustancia slida, con las
98
Diluidor 9
molculas de una sustancia lquida, o las mol- Normalidad [N] (de un soluto). Nmero de
culas de una sustancia lquida con las molcu- equivalentes de soluto, por cada litro de diso-
las de otra sustancia lquida. El componente lucin final:
ms abundante se llama solvente o disolvente Eq
y el menos abundante, soluto. Para determinar N=
una disolucin de volumen V2 y concentracin Vol (L)
C2 a partir de una disolucin concentrada de
concentracin C1, se calcula el volumen V1 me- Peso equivalente [PE] (de una sustancia).
diante la siguiente ecuacin: Resultado de dividir el peso molecular [PM]
de la sustancia por su valencia:
V2C2
V1 =
C1 PM (g)
PE =
Dispensador. Dispositivo utilizado para dis- Valencia
tribuir lquidos.
Peso/Volumen. Relacin muy utilizada en
Dispensar. Distribuir un fluido; puede hacer- bioqumica clnica. Expresa la masa del soluto
se a volumen constante o de forma progresiva. en gramos o submltiplos de este, por unidad
de volumen en litros o submltiplos de litro.
Equivalente gramo [Eq]. Masa en gramos de Por ejemplo: g/l, mg/ml.
soluto, dividido por su peso equivalente [PE]:
Solucin. Mezcla homognea de una o ms
masa(g)
Eq = sustancias disueltas en otra sustancia. A la
PE(g) sustancia disuelta se le da el nombre de solu-
to, mientras que la sustancia que disuelve se
Mol. Peso molecular (PM) del soluto expresa- llama solvente. El solvente existe en mayor
do en gramos: cantidad que el soluto en una solucin.
masa(g)
moles =
PM Nota: Para medir concentraciones extre-
madamente bajas, se utiliza otro tipo de
Molalidad [m]. Nmero de moles de una notacin, conocida como notacin "parte
sustancia dada, por cada 1 000 g de solvente. por-unidad". Por ejemplo: partes por mi-
As una solucin m molal se obtiene al aadir lln (ppm) significa que existe una par-
m moles de la sustancia a 1 000 g de agua. tcula de una sustancia dada por cada
999 999 partculas de otras sustancias.
Molaridad [M] (de un soluto). Nmero de mo-
les de soluto por cada litro de disolucin final.
Una solucin N Molar de un cido se obtiene al
aadir N moles del cido al agua hasta obtener
un (1) litro de solucin. Normalmente, la fr-
mula empleada es la siguiente:
moles
M=
Vol (L)
99
Bibliografa
Salgado, J., Hover., R., Biologa molecular y celular, Curso 2003-2004.
Sienko, M., Plane, R., Qumica, Madrid, Mc Graw Hill Co., 1971.
The Microlab 500 Series: Microlab 501A, Microlab 503A, and Microlab 504A, Users Ma-
nual, Hamilton, Part Number 69175, Rev. D.
The Microlab 500 Series: Microlab 510B, 530B, and 540B, and Microlab 511C, 531C, and
541C, Users Manual, Hamilton, Part Number 69176, Rev. D.

100
CAPTULO 10
Dispensador
16-274 Dispensadores de lquidos para laboratorio
DISPENSADOR en diseo como los utilizados en microbiolo-

ga, bacteriologa, inmunologa y farmacolo-
El dispensador es un equipo de la familia de ga. Finalmente hay unidades de dispensa-
las pipetas y los diluidores. La palabra dispen- cin automatizadas, controladas mediante
sar proviene de la preposicin inseparable dis programas de computador, que se utilizan en
que implica privacin, y de la palabra latina instituciones de gran demanda de servicios
pensum que significa tarea. En el laboratorio en donde se han automatizado los procedi-
se encuentran diversas clases de dispensado- mientos. Este captulo presenta los dispensa-
res, los hay para atender las necesidades del dores de tipo porttil por considerar que son
rea de qumica, pero tambin modelos que los ms comunes.
efectan una labor anloga, aunque varan
ESQUEMA Y FOTOGRAFA DEL DISPENSADOR
Esquema Fotografa
Ilustracin 25: Dispensador
101
PROPSITO DEL DISPENSADOR Principios de operacin
El dispensador es un equipo multipropsito Los dispensadores modernos, por lo general,

que puede utilizarse en el laboratorio para estn controlados por microprocesadores y
realizar las siguientes actividades: disponen de los siguientes componentes2:
1. Aspirar y dispensar volmenes de lquidos 1. Selector de volumen. Grada el volumen

o soluciones que no requieren mayor que se requiere dispensar. La seleccin he-
exactitud. cha se muestra directamente en la panta-
lla del dispensador.
2. Distribuir un volumen de lquido o solu-
cin almacenado en un recipiente conte- 2. Pantalla digital. Presenta los datos relacio-
nedor en volmenes parciales predefini- nados con la funcin seleccionada, tales
dos, mediante un dispositivo de suministro como volumen seleccionado, tipo de pun-
(dispensaciones repetitivas con volumen fi- ta colocada y la informacin relacionada
nal constante). con los mensajes de alarma o error que
puedan generarse durante la operacin.
3. Mezclar una solucin mediante operacio- Ejemplo: batera baja o punta mal selec-
nes sucesivas de aspiracin y dispensacin, cionada para el volumen seleccionado.
utilizando un dispositivo de aspiracin y
suministro. 3. Palanca de dosificacin. Permite efectuar
la dosificacin accionando un mbolo que
4. Titular. Determinar la concentracin de se encuentra acoplado a una bomba de
una solucin, midiendo exactamente los desplazamiento positivo tipo jeringa, en el
volmenes dispensados (dispensaciones cual acciona un pistn a lo largo de un ci-
consecutivas hasta lograr el punto final). lindro para desplazar un volumen.
5. Diluir. Reducir la concentracin de una so- 4. Palanca de llenado. Dispositivo mecnico que
lucin, utilizando mezclas controladas. acciona el mbolo de la bomba de desplaza-
(Adicin de dos reactivos a un vial frasco miento positivo para aspirar los volmenes.
comn).
5. Botn de expulsin. Mecanismo que libera
6. Utilizar como una pipeta (aspirar un volu- el elemento de dispensacin de la cabeza
men y luego dispensarlo). de dosificacin.
7. Distribuir medios de cultivo en placas Petri. 6. Acople del dispensador. Es el vstago me-
Generalmente para esta funcin se utilizan diante el cual el elemento dosificador se
dispensadores automatizados, dotados de acopla a la cabeza dispensadora, contiene
accesorios para mover las placas de Petri y un sistema de sellos y guas para asegurar
almacenarlas una vez dispensado el medio su ajuste adecuado.
de cultivo. Para aplicaciones puntuales pe-
quea escala, la distribucin de medios de 7. Escala de dosificacin. Permite conocer el
cultivo se efecta utilizando jeringas plsti- volumen mximo que puede dispensar con
cas desechables con agujas N 161. el elemento de dosificacin seleccionado.
En algunos casos, tambin permite saber
Dichas actividades normalmente pueden cul es el volumen remanente.
programarse en el dispensador, siguiendo
las instrucciones que para el efecto brinda el 8. Elemento de dispensacin. Depsito que
fabricante. contiene la solucin que se aspira o se
1
Product Information Sheet. 3cc Syringes. For dispensing and plating Methocult.
http://www.stemcell.com/technical/28230_28240-PIS.pdf
2
La numeracin de la descripcin corresponde a la utilizada en la ilustracin.
102
Dispensador 10
suministra en ciclos de dispensacin. Hay 11. Depsito de bateras. (No mostrado en la

una gran variedad, dependiendo del mo- ilustracin).
delo. Los hay sencillos y combinados (con
varias puntas de dispensacin).
Componentes de dispensacin
9. Punta de dispensacin. Permite suministrar
o succionar las soluciones con las cuales se Para que el dispensador realice las operaciones
trabaja. La punta constituye un elemento arriba mencionadas, se requiere utilizar una se-
indispensable para la correcta operacin rie de accesorios que han sido diseados para
del dispensador, y se encuentra ubicada en realizar tareas especficas. En la ilustracin que
el elemento de dispensacin. Sin esta es se presenta a continuacin, se muestran algunos
imposible utilizar el dispensador. de los modelos disponibles.
10.Un interruptor de encendido/apagado.

(No mostrado en la ilustracin).
Ilustracin 26: Elementos dispensadores
Volmenes utilizados Capacidad elemento Rango volmenes

dispensador dispensados
Los dispensadores han sido desarrollados pa- 0,1 ml 1-20 l
ra trabajar con rangos predefinidos de volu-
0,2 ml 2-40 l
men. Cuando se requiera utilizarlos deber
considerarse el tipo de solucin que se pre- 1 ml 10-100 l
tende trabajar y los volmenes a dispensar. 5 ml 50-500 l
Los fabricantes ofrecen diversos modelos.
10 ml 100 l a 2 ml
Se presenta una tabla con rangos tpicos de
trabajo. 25 ml 250 l a 5 ml
103
SERVICIOS REQUERIDOS Frecuencia: Diaria
Dependiendo del tipo de dosificador, se re- 1. Limpiar el dispensador con una pieza de
quiere contar con unas condiciones mnimas, tela humedecida con un detergente suave.
entre las que se destacan las siguientes:
2. Desinfectar el dispensador utilizando iso-
1. Verificar que el dispensador haya sido disea- propanol al 60 %.
do para trabajar con las soluciones que se
pretenden utilizar. Verificar la compatibilidad 3. Evitar que la humedad inunde el interior
de los materiales en el manual de uso y ope- del control electrnico y/o los mecanismos.
racin que suministra el fabricante.
2. Un ambiente limpio, dotado de puestos de Cambio de batera

trabajo bien dimensionados y de una bue-
na ventilacin e iluminacin. 1. Abrir el compartimiento de la batera. Por
lo general, solo debe deslizarse una tapa
3. Verificar que la temperatura del ambiente de la posicin "cerrada" a la posicin
donde se utiliza sea estable, con un rango "abierta".
de variacin de 0,5 C, que se encuentre
entre los 4 y los 40 C, es ptima una tem- 2. Retirar la batera agotada. Procesar como
peratura de 20 C. desecho siguiendo las recomendaciones.
4. Utilizar los elementos de proteccin ade- 3. Instalar una batera con iguales caracters-
cuados, si se trabaja con materiales txicos ticas de la original. Verificar la polaridad
o que conlleven riesgo biolgico. elctrica para que quede bien instalada.
Antes de colocarla en su alojamiento, lim-
5. Utilizar las puntas que el fabricante ha di- piar la superficie de contacto con una pie-
seado para cada aplicacin en particular. za de tela limpia.
4. Cerrar y ajustar la tapa.

El mantenimiento del dispensador es sencillo.

Las rutinas detalladas a continuacin desta-
can las actividades ms importantes:

No es posible instalar los componentes Componente defectuoso. Solicitar servicio tcnico especializado.
dispensadores en la cabeza de
Componente dispensador contaminado. Observar si existe algn tipo de obstruccin.
dosificacin.
Limpiar si es necesario. Solicitar servicio tcni-
co especializado.
Dispositivo dispensador no puede ser Falla en el sistema electrnico. Reiniciar equipo. (Apagar y encender). Selec-
retirado de la cabeza de dosificacin. cionar opcin de extraccin manual.
Falla en el mecanismo de ajuste. Verificar si el pistn se desplaza hacia adelan-
te y atrs. Retirar el cilindro sobre un recipien-
te para retener desperdicios.
La punta del dispositivo dispensador Punta defectuosa. Sustituir punta dispensadora.
gotea.
104
Dispensador 10

Dispositivo dispensador tipo pipeta Punta dispensadora mal ajustada. Liberar la punta dispensadora del cono de
gotea. ajuste. Ajustar firmemente.
Punta dispensadora mal seleccionada. Verificar el tipo de punta definida por el fabricante.
Pistn o sello del pistn daados. Reemplazar el pistn y los sellos. Utilizar re-
puestos suministrados por el fabricante.
La pantalla presenta la seal de batera Batera agotada. Reemplazar batera.
baja.
La pantalla no presenta ninguna seal. Batera agotada. Reemplazar batera.
Sistema electrnico defectuoso. Solicitar servicio tcnico especializado.
La pantalla presenta seales de error. Solicitar servicio tcnico especializado.
La pantalla presenta error de llenado. Lquido insuficiente para dispensar. Verificar que el volumen disponible para dis-
pensar sea adecuado. Si no lo es, cargar o as-
pirar un volumen que resulte adecuado a la
cantidad que se quiere dispensar.
La pantalla presenta error de volumen Se ha tratado de aspirar ms lquido Dispensar. Revisar la operacin que trata de
completo. del que puede recibir el recipiente de hacerse.
almacenamiento o la punta utilizada.
La pantalla presenta error de punta La punta instalada en el equipo no es- Verificar qu tipo de punta est diseada pa-
seleccionada. t diseada para realizar la operacin ra realizar la operacin. Sustituir la punta.
que se pretende.
Punta defectuosa. Colocar punta nueva, con las mismas especifi-
caciones de la original.
DEFINICIONES BSICAS volmenes a dispensar y de las caractersticas

de la solucin.
Disco Petri. Plato de poca profundidad ela-
borado en vidrio o plstico que se usa para Medio de cultivo. Material lquido o slido
efectuar cultivos de microorganismos en el desarrollado con propsitos mdicos para
laboratorio. cultivar e identificar microorganismos capa-
ces de producir enfermedades (patgenos).
Elemento dispensador. Dispositivos utili-
zados con una cabeza dispensadora para Mezclar. Agregar sustancias sin que exista
transferir una solucin a la placa o recipien- reaccin qumica entre las mismas. En una
te donde ser examinado o almacenado. Las mezcla homognea, la composicin y el as-
caractersticas de los elementos dispensado- pecto deben ser iguales en todas las partes de
res varan de acuerdo con la magnitud de los la misma.
105
Bibliografa
Dilutors and dispensers, Hamilton Company. (www.hamiltoncompany.com)
Manual de Instruccin, Dispensador Eppendorf 5222, Hamburg, Eppendorf AG. B 5522

900.028-01/0301.
Multipette Pro Instruction manual, Hamburg, Eppendorf AG. B 4985 900.014-02/1103.

(http://www.eppendorf.com/script/cms-newspic.php)
Multipette R Plus, Instruction manual, Hamburg, Eppendorf AG B 4981 900.010-09/0904.

(http://www.eppendorf.com/script/cms-newspic.php)
Product Information Sheet, 3cc Syringes, For dispensing and plating Methocult.
(http://www.stemcell.com/technical/28230_28240-PIS.pdf)

106
CAPTULO 11
Espectrofotmetro
15-082 Espectrofotmetros de ultravioleta
15-083 Espectrofotmetros de luz visible/ultravioleta
15-084 Espectrofotmetros de luz visible
ESPECTROFOTMETRO
La palabra espectrofotmetro se deriva de la pa-

labra latina spectrum, que significa imagen, y de
la palabra griega phos o photos, que significa
luz. El espectrofotmetro, construido mediante
procesos avanzados de fabricacin, es uno de los
principales instrumentos diagnsticos y de inves-
tigacin desarrollados por el ser humano. Utili-
za las propiedades de la luz y su interaccin con
otras sustancias, para determinar la naturaleza
de las mismas. En general, la luz de una lmpa-
ra de caractersticas especiales es guiada a travs Espectrofotmetro moderno
de un dispositivo que selecciona y separa luz de http://www.biochrom.co.uk/images/spectro/ultro100pro_white.jpg
una determinada longitud de onda y la hace pa-
sar por una muestra. La intensidad de la luz que
sale de la muestra es captada y comparada con PROPSITO DEL EQUIPO
la intensidad de la luz que incidi en la muestra
y a partir de esto se calcula la transmitancia de El espectrofotmetro se usa en el laboratorio
la muestra, que depende de factores como la con el fin de determinar la concentracin de
concentracin de la sustancia. una sustancia en una solucin, permitiendo
as la realizacin de anlisis cuantitativos.
FOTOGRAFAS DEL ESPECTROFOTMETRO
PRINCIPIOS DE OPERACIN
Como principio bsico se considera que la luz

es una forma de energa electromagntica,
que en el vaco tiene una velocidad constan-
te [C] y universal de aproximadamente 3 x 108
m/s. En cualquier otro medio (transparente)
por el que pase la luz, su velocidad ser lige-
ramente inferior y podr calcularse mediante
la siguiente ecuacin:
C
v0 =
Espectrofotmetro clsico n
http://ekoineko.nucleo.pl/en/spektofotometry.html#
107
donde: los que destacan la reflexin, refraccin, di-
v= velocidad a travs del medio por el fraccin, absorcin, difusin, polarizacin y
que pasa la luz otros que son utilizados en diversos instru-
n= ndice de refraccin del medio, cuyo mentos y dispositivos. La siguiente tabla
valor oscila, por lo general, entre 1,0 muestra los rangos de longitud de onda en
y 2,5 donde se utiliza el espectro luminoso para
realizar pruebas de espectrofotometra.
La energa electromagntica dispone de una
muy amplia gama de longitudes de onda. Al-
gunos ejemplos se muestran en la siguiente Regin del Rango de la longitud de onda
espectro luminoso
tabla1:
Ultravioleta 10-200 nm (nanmetros)
Tipo de energa Rango de la longitud

Ultravioleta cercano 200-280 nm
electromagntica de onda Luz visible 380-780 nm
Ondas de radio De pocos metros a pocos kilmetros Infrarrojo cercano 780-3 000 nm
Ondas de radar De 1 a 10 cm Infrarrojo medio 3 000-20 000 nm
Ondas infrarrojas -6
De 1 a 10 micras (10 m) Infrarrojo lejano 30 000-300 000 nm
Luz visible De 300 a 700 nm (nanmetros)
Rayos X De 0,1 a 0,5 (ngstrom) Con respecto a la interaccin de la luz con la
Rayos gama Aprox. 0,0012 (ngstrom) materia, el siguiente esquema ayuda a enten-
der la complejidad de los fenmenos que
ocurren:
La luz, al pasar o interactuar con diversos me-
dios, presenta una serie de fenmenos, entre
Ilustracin 27: Interaccin de la luz con la materia
1
Lobkowicz, F., Melissinos, A., Physics for Scientists and Engineers, vol. II, Philadelphia, WB SAUNDERS CO., 1975.
108
Espectrofotmetro 11
El esquema muestra que la radiacin incidente La absorbancia [A] se relaciona con la transmi-
[Io] sufre una serie de transformaciones. Parte tancia [T] mediante la siguiente ecuacin:
de la misma se refleja [Ir], parte se transmite [It],
parte se difunde [Id] y parte se absorbe e incide 1 Io
A = Log10 = Log10 = Log1010 x c x l = x c x l
directamente en fenmenos como la fluores- T IT
cencia [If]. Los fenmenos en los que se basa la
espectrofotometra son principalmente la absor-
cin y la transmisin. Para entender cmo se uti- El siguiente esquema explica el fenmeno de la
lizan, es necesario adicionalmente tener en absorbancia A:
cuenta la ley de Beer Lambert.
Ley de Beer Lambert. Se conoce tambin co-

mo ley de Beer o de Beer Lambert Bouguer e
identifica la relacin existente entre la concen-
tracin de la muestra y la intensidad de la luz
transmitida a travs de la misma. Con relacin a
la ley en mencin hay implcitos dos conceptos:
transmitancia [T] y absorbancia [A].
La transmitancia [T] es la fraccin de la luz inci-

dente que a una determinada longitud de onda
pasa a travs de la muestra. Se define por la si- Ilustracin 28: Fenmeno de absorbancia
guiente relacin:
It Las curvas que se presentan a continuacin

T= muestran cmo vara la absorbancia [A] y la
Io
transmitancia [T] en funcin de la concentracin
donde: [C], de acuerdo con la ley de Beer Lambert, en la
It = intensidad de la radiacin transmitida que se basa la espectrofotometra2.
Io = intensidad de la radiacin incidente
El porcentaje de transmitancia [%T] puede ex- Grfica transmitancia

presarse por la siguiente ecuacin:
It
%T = x 100
Io
La concentracin de molculas absorbentes de

luz en la muestra es proporcional a la absorban-
cia [A] de la muestra. Matemticamente se ex-
presa as:
A=xlxc
donde:
1
A= absorbancia medida A = Log
= coeficiente de absortividad molar T
[litros/moles/cm]
l = distancia de la trayectoria recorrida
por la luz dentro de la muestra
c= concentracin de la muestra [moles/litros]
2
Instruction Manual, Spectrophotometer, SmartSpec 3000, Catalog N 170-2501.
109
Espectrofotmetro 11
Fuente luminosa Portador de muestras
Dependiendo del tipo de espectrofotometra, la Est diseado para sostener la muestra que se
fuente luminosa puede ser una lmpara con fi- quiere analizar dentro del rayo de luz de longi-
lamento de tungsteno para luz visible, o una tud de onda determinada por el monocromador.
lmpara de arco de deuterio para luz ultraviole- El elemento que contiene la muestra es una cel-
ta. Algunos fabricantes han diseado espectro- da o cubeta, por lo general, rectangular. Las cel-
fotmetros con lmparas intermitentes de xe- das o cubetas se fabrican de vidrio, si se requie-
nn de alta duracin que emiten luz en el ran- ren efectuar estudios en el rango de los 340 a los
go de la luz visible y ultravioleta. La lmpara o 1 000 nm y de slice, si el anlisis est en el rango
lmparas vienen montadas de fbrica en una comprendido entre los 220 y los 340 nm. Tam-
base que permite asegurar una determinada bin hay celdas en materiales plsticos como es-
posicin, para que se mantengan las condicio- tireno o poliestireno. El portador de muestras lo
nes de ajuste ptico y enfoque cuando est en disean los fabricantes de acuerdo al tipo de es-
operacin o se requiere reemplazarla. La ener- pectrofotmetro y de muestra a analizar, por
ga radiante tpica que emite una lmpara de ello se encuentran portadores de muestra con
tungsteno est entre los 2 600 y los 3 000 K microceldas, aunque tambin tubos de ensayo y
(grados Kelvin). otras variantes como las celdas de flujo continuo.
Monocromador Sistema detector
Est compuesto por un conjunto de elementos. El sistema de deteccin puede estar diseado
En general, dispone de una rendija o ranura de con fotoceldas, fototubos, fotodiodos o foto-
entrada que limita la radiacin lumnica produ- multiplicadores. Esto depende de los rangos de
cida por la fuente y la confina en un rea de- longitud de onda, de la sensibilidad y de la velo-
terminada, un conjunto de espejos para pasar cidad de respuesta requeridas. El sistema de de-
la luz a travs del sistema ptico, un elemento teccin recibe la energa lumnica proveniente
para separar las longitudes de onda de la ra- de la muestra y la convierte en una seal elctri-
diacin lumnica, que puede ser un prisma o ca proporcional a la energa recibida. La seal
una rejilla de difraccin, y una rendija de salida elctrica puede ser procesada y amplificada, pa-
para seleccionar la longitud de onda con la ra que pueda interpretarse a travs del sistema
cual se desea iluminar la muestra. Las rejillas de de lectura. En la tabla que se incluye a continua-
difraccin tienen la ventaja de eliminar la dis- cin, se presenta un resumen de las ventajas y
persin no lineal y son insensibles a los cambios desventajas de los dispositivos normalmente
de temperatura. usados en los sistemas de deteccin.
Tabla de ventajas y desventajas dispositivos de deteccin
ELEMENTO VENTAJAS DESVENTAJAS

Fotoceldas Econmicas Longitud de onda limitada entre 400 y 750 nm.
Pequeas Baja sensibilidad.
Robustas Respuesta lenta a cambio de intensidad
lumnica.
No requieren fuentes de energa ni amplifica- Agotamiento.
dores de seal.
La seal es muy dependiente de la temperatura.
Fototubos Se fabrican para que sean sensibles entre los Requieren calibraciones, dependiendo de la
190 y los 650 nm. Tambin entre los 600 y los temperatura del ambiente en que se encuen-
1 000 nm. tra instalado el equipo.
Se agotan con altos niveles de iluminacin.
111
ELEMENTO VENTAJAS DESVENTAJAS
Fotodiodos Carecen de partes mecnicas mviles.
Adquieren datos espectrales de forma simultnea.
Disponen de un rango dinmico amplio.
Brindan excelente reproducibilidad de la longi-
tud de onda.
Fotomultiplicadores Son ms sensibles que los fototubos y las Pueden quemarse, si la luz diurna penetra
fotoceldas. cuando estn trabajando.
Trabajan en rangos ms amplios de longitudes Son costosos.
de onda.
Tienen respuestas ms rpidas a los cambios Necesitan fuente de alto voltaje.
de intensidad luminosa.
No se agotan como las fotoceldas. Se usan solo en espectrofotmetros especializados.
Pueden ser fabricados con sensibilidad a la luz

en todo el rango de la luz ultravioleta y visible.
(Desde 190 hasta 900 nm).
Sistema de lectura acuerdo con las normas y estndares im-

plementados en el pas. En los pases ame-
La seal que sale del detector recibe diversas ricanos se utilizan, por lo general, voltajes
transformaciones. Se amplifica y se transforma de 110 V y frecuencias de 60 Hz.
para que su intensidad resulte proporcional al
porcentaje de transmitancia/absorbancia. Existen 2. Un ambiente limpio, libre de polvo.
sistemas de lectura de tipo anlogo (muestra la
magnitud leda sobre una escala de lectura) o di- 3. Una mesa de trabajo estable, que est ale-
gital (muestra la magnitud leda en una pantalla). jada de equipos que generen vibraciones
(centrfugas, agitadores).
Los indicadores de tipo anlogo reciben tradicio-
nalmente el nombre de metros. Su exactitud de-
pende, entre otros factores, de la longitud de la MANTENIMIENTO DEL
escala y del nmero de divisiones que tenga. ESPECTROFOTMETRO
(Mientras ms divisiones, ms exacto). Su princi-
pal desventaja es que pueden ser mal ledos, por Los espectrofotmetros, en general, son equi-
la fatiga de los operadores o errores, cuando dis- pos muy especializados y costosos. Su conserva-
ponen de varias escalas, al tratar de identificar cin depende en gran medida de la forma de
las escalas sobre las que deben realizar la lectura. instalacin y utilizacin. El medio ambiente
que los rodea y la calidad de los servicios de
Los indicadores digitales usualmente presentan los electricidad constituyen factores de primordial
resultados en una pantalla, en forma de caracteres importancia, para que los equipos puedan
alfanumricos luminosos. Esto los hace menos pro- prestar los servicios de acuerdo con las especifi-
pensos a que se cometan errores de lectura. caciones para los que fueron fabricados. Las ru-
tinas de mantenimiento que pueden llegar a
requerir varan en complejidad, van desde la
SERVICIOS REQUERIDOS limpieza cuidadosa de sus componentes hasta
procedimientos especializados, que solo deben
Para el funcionamiento de un espectrofot- realizar tcnicos o ingenieros que hayan recibi-
metro se requiere lo siguiente: do la capacitacin correspondiente y dispon-
gan de la informacin tcnica desarrollada por
1. Una fuente de suministro elctrico de los fabricantes y que se ajustan a los distintos
112
1. Revisar que la estructura de la mesa de tra- 1. Apagar el espectrofotmetro y desconec-
bajo, donde se encuentra instalado el estar el cable de alimentacin elctrica.
pectrofotmetro, est en buen estado.
2. Usar una jeringa para limpiar el porta-
2. Comprobar la estructura general del es- muestras. Absorber la mayor cantidad de
pectrofotmetro. Verificar que los boto- lquido que pueda extraerse.
nes o interruptores de control, los cierres
mecnicos, estn montados firmemente y 3. Secar el portamuestras con un hisopo de
su sealacin o identificacin sea clara. algodn tipo medicinal.
3. Controlar que los accesorios estn limpios, 4. Utilizar papel especial para la limpieza de
no presenten grietas y su estado funcional lentes o un trozo de tela limpia de textura
sea ptimo. suave, libre de hilazas, para limpiar la ven-
tana de la fotocelda.
4. Confirmar que los elementos mecnicos de
ajuste tuercas, tornillos, abrazaderas, 5. Limpiar el exterior del instrumento con
etc. se encuentren ajustados y en buen una pieza de tela humedecida con agua
estado. destilada. Incluir la pantalla, los controles
y el teclado.
5. Revisar que los conectores elctricos no
presenten grietas o rupturas. Comprobar
que estn unidos correctamente a la lnea. Limpieza de cubetas de cuarzo. Para man-
tener en buenas condiciones las cubetas de
6. Verificar que los cables no presenten em- cuarzo, se recomienda realizar el siguiente
palmes ni aislantes rados o gastados. procedimiento:
7. Revisar que los cables, abrazaderas y ter- 1. Lavar las cubetas utilizando una solucin
minales estn libres de polvo, suciedad o alcalina diluida como NaOH, 0,1 M y un
corrosin. Tampoco deben presentar des- cido diluido tal como HCl, 0,1 M.
gastes o seales de mal estado.
2. Enjuagar las cubetas varias veces con
8. Examinar que el sistema de puesta a tierra agua destilada. Usar siempre cubetas lim-
interno y externo sea estandarizado, de pias cuando se requiere tomar medidas
un tipo aprobado, sea funcional y est ins- de absorbancia.
talado correctamente.
3. Efectuar procedimientos de limpieza rigu-
9. Controlar que los conmutadores o inte- rosos y cuidadosos a las cubetas, siempre
rruptores de circuito, los portafusibles y los que se utilicen muestras que pudieran de-
indicadores, se encuentren libres de polvo, positar pelculas. Algunos fabricantes reco-
suciedad o corrosin. miendan utilizar detergentes especiales
para limpiar las cubetas.
10.Comprobar que los componentes elctricos
externos funcionen sin sobrecalentamientos.
Cambio de bateras. Diversas clases de es-
pectrofotmetros utilizan bateras para man-
Mantenimiento general tener en memoria datos asociados a los an-
lisis como fecha y horas. El procedimiento es
Limpieza de derrames. En caso de que se similar en las diversas clases de equipo. Se re-
produzca un derrame en el sistema porta- comienda seguir este procedimiento:
muestras, debe limpiarse el derrame median-
te el siguiente procedimiento: 1. Verificar que en la pantalla del instrumen-
to aparezca la indicacin de batera baja.
114
Espectrofotmetro 11
2. Apagar el espectrofotmetro. de la conexin elctrica a la lmpara. (En

algunos equipos podra no ser necesario,
3. Desconectar el cable de alimentacin pues la base de montaje dispone de meca-
elctrica. nismos de contacto directos a los termina-
les de contacto de la lmpara).
4. Abrir el compartimiento de las bateras y
retirar las bateras agotadas. 7. Instalar una lmpara nueva con las mis-
mas caractersticas de la original. Usar
5. Limpiar los puntos de contacto elctrico. guantes para evitar impregnar con huellas
digitales la superficie de la lmpara.
6. Instalar bateras nuevas, con las mismas es-
pecificaciones de las originales. 8. Reconectar los cables de alimentacin
elctrica a la lmpara.
7. Cerrar de nuevo el compartimiento.
9. Ajustar nuevamente los tornillos que suje-
8. Reconectar el equipo. tan la lmpara.
9. Ajustar nuevamente los datos de fecha y 10. Ajustar nuevamente los tornillos que ase-
hora. guran la tapa del compartimiento de la
lmpara.
Cambio de bombillo/lmpara. El bombillo 11. Reconectar el espectrofotmetro.

es un elemento de consumo, por tanto su vi-
da til es limitada y debe preverse que en al- 12. Encender el equipo y realizar el procedi-
gn momento ser necesario sustituirlo, bien miento de recalibracin del equipo esti-
porque se quem, o porque ha sufrido proce- pulado por el fabricante.
sos de evaporacin y metalizacin interna, y
la luz emitida ya no cumple con las especifi-
caciones requeridas para ser utilizada en pro- Mantenimiento preventivo
cesos de espectrofotometra. El proceso de
cada modelo difiere y deben siempre seguir- El mantenimiento preventivo del espectro-
se las indicaciones del fabricante del equipo. fotmetro debe responder a las rutinas y
Los procesos comunes a seguir se presentan a frecuencias recomendadas por el fabricante.
continuacin. A continuacin, se presenta un grupo de ru-
tinas bsicas que puede ser realizada en el
1. Verificar que el bombillo no funciona o laboratorio.
existe alguna seal o indicacin de que
tiene una falla. En equipos modernos apa- 1. Limpiar externamente el espectrofotme-
recer una seal en la pantalla o un cdi- tro, incluyendo los controles, pantallas o
go de error. En equipos antiguos se ver metros de medicin. Esto se puede reali-
que el bombillo no encendi. zar con una pieza de tela fina similar a la
textura de los pauelos humedecida con
2. Apagar el espectrofotmetro. agua destilada.
3. Desconectar el cable de alimentacin. 2. Inspeccionar y limpiar el cable de alimen-

tacin elctrica.
4. Desajustar los tornillos que aseguran la ta-
pa del compartimiento de la lmpara. 3. Verificar que la lmpara est limpia y en
buen estado. Si no funciona, instalar una
5. Desajustar los tornillos que fijan el meca- nueva, con las mismas especificaciones de
nismo que sujeta la lmpara. la original. En los espectrofotmetros mo-
dernos, el estado de la lmpara es detecta-
6. Desajustar los tornillos que fijan los cables do automticamente mediante el software
115
que controla el estado y el funcionamien- BUENAS PRCTICAS DE USO
to del equipo, por lo que es fcil determi- DEL ESPECTROFOTMETRO
nar en qu momento es necesario cambiar
la lmpara. Efectuar el cambio de la lm- 1. Efectuar la calibracin del espectrofot-
para y realizar el ajuste posterior siguien- metro, cada vez que se realiza el anlisis
do el procedimiento recomendado por el de un grupo de muestras.
fabricante.
2. Mantener cerrada la tapa del portamues-
4. Revisar el fusible de proteccin. Antes de tras durante el proceso de medicin, para
abrir el alojamiento del fusible, compro- asegurar una lectura adecuada.
bar que el espectrofotmetro est apaga-
do y que sus contactos se encuentren lim- 3. Evitar reutilizar las cubetas desechables.
pios y en buen estado. Si es necesario
reemplazarlo, colocar uno nuevo con las 4. Utilizar nicamente cubetas de cuarzo,
mismas caractersticas del recomendado para efectuar anlisis por debajo de los
por el fabricante. 310 nm.
5. Colocar el instrumento en la configura- 5. Evitar el uso de cubetas plsticas, si se uti-

cin operacional. lizan solventes orgnicos.
6. Accionar el interruptor de encendido para 6. Utilizar cristalera de boro silicato de alta

permitir un funcionamiento por cinco (5) calidad para preparar los estndares. Evi-
minutos. Verificar lo siguiente: tar el uso de cristalera de sodio xido de
a) Si las lmparas o indicadores piloto sodio siempre que sea posible, debido a
funcionan. que el contacto prolongado con los estn-
b) Si el indicador de lectura permanece en dares puede permearla y, en consecuen-
cero (0). cia, producir resultados errneos.
c) Si la luz de la fuente funciona.
7. Limpiar cuidadosamente las cubetas de vi-
7. Realizar una prueba de corriente de fuga drio despus de utilizarlas. Desechar
en las posiciones de encendido y apagado. aquellas que presenten rayones en la su-
a) Verificar el polo a tierra y la polaridad perficie pulida.
correcta.
b) Verificar la polaridad correcta sin polo a 8. Utilizar en lo posible reactivos de alta ca-
tierra. lidad. Reactivos de baja calidad pueden
c) Verificar la polaridad inversa sin polo a causar contaminacin incluso en concen-
tierra. traciones muy bajas. Los diluyentes utili-
zados agua o solventes debern estar li-
8. Calibrar el panel frontal del espectrofo- bres de impurezas.
tmetro siguiendo las instrucciones del
fabricante. 9. Verificar que las muestras o estndares no
se han desgasificado dentro de las cube-
9. Medir la sensibilidad del equipo. tas. Este fenmeno produce burbujas so-
bre la superficie interna de las cubetas y
10. Realizar una prueba siguiendo la ley de errores en las lecturas.
Beer.
10. Tener en cuenta, cuando se pretenda uti-
11. Regresar el espectrofotmetro a la confi- lizar nuevos procedimientos, que no todas
guracin inicial, si la calibracin se ha las sustancias cumplen con la ley de Beer.
efectuado con xito. Efectuar pruebas de linealidad sobre el
rango de concentraciones a ser utilizadas.
Se recomienda preparar un grupo de solu-
ciones fuertes conocidas y verificar los
116
Espectrofotmetro 11
resultados. Los fenmenos que afectan la c) Absorciones que no obedezcan la ley re-
ley de Beer son los siguientes: quieren dibujar una grfica de estndares
a) Las altas concentraciones por asociacin conocidos, que indicar lectura versus con-
molecular de especies inicas. centracin, de forma que la lectura de las
b) Variaciones en la hidratacin a bajas incgnitas pueda ser relacionada a las con-
concentraciones producen cambios en la centraciones desde la grfica.
naturaleza de los iones complejos.
Espectrofotmetro automatizado4

El espectrofotmetro no se energiza. Interruptor de encendido/apagado est Mover el interruptor a la posicin encendido.
en posicin apagado.
No hay energa elctrica en la toma de Verificar alimentacin elctrica general. Compro-
alimentacin. bar que no se haya disparado alguna seguridad.
Mal conectado el cable de alimenta- Conectar firmemente el cable de alimentacin.
cin elctrica.
Los botones del teclado no responden. Inicializacin incompleta del equipo Apagar el equipo y encenderlo nuevamente.
durante el arranque.
Activacin de un comando equivocado
Puerto serial RS 232 no responde. Inicializacin incompleta del equipo Apagar el equipo y encenderlo nuevamente.
Cable de interconexin mal conectado. Verificar conexin.
Pantalla LCD difcil de leer. Control de contraste desajustado. Ajustar contraste.
Sistema de iluminacin de fondo quemado. Llamar al representante.
Impresora atascada. Papel trmino arrugado entre la cabeza Remover el exceso de papel con unas pinzas
de impresin y la placa trmica al mode punta fina.
mento de rasgar/cortar el papel. Apagar el equipo, retirar el papel y reinstalar
nuevamente.
El papel de la impresora no se autoali- Papel de la impresora instalado Apagar el equipo, reinstalar rollo de papel.
menta o avanza. errneamente.
Borde delantero del papel no alineado Apagar equipo. Reinstalar rollo de papel. Cor-
o doblado. tar borde delantero y alinear nuevamente en
el sistema de alimentacin.
Control de alimentacin de papel no Llamar al representante.
responde.
La cubeta no entra en el compartimien- Cubeta de tamao equivocado. Usar cubetas del tamao especificado por el
to portamuestras. fabricante.
Mecanismo de ajuste de la cubeta mal Corregir posicin del mecanismo de ajuste.
localizado.
4
Instruction Manual, Spectrophotometer, SmartSpecTM 3000, Catalog N 170-2501, BIO-RAD Laboratories.
117
La lectura presenta fluctuaciones. Hay interferencias en el recorrido de la Verificar que la cubeta no presente rayones.
luz.
Verificar que no hay partculas flotando en la
cubeta.
Frotar las paredes de la cubeta con una pieza
de tela limpia.
Verificar que el rango seleccionado de trabajo
es adecuado para la muestra bajo anlisis.
La lectura presenta valores negativos. No hay muestra. Aadir una muestra a la solucin.
No hay lectura de absorbancia.
Colocacin incorrecta de la cubeta. Verificar la orientacin de la ventana de la
cubeta.
Seleccin errnea de la longitud de onda. Ajustar la longitud de onda al rango compati-
ble con el anlisis.
Equipo calibrado errneamente con Calibrar con una solucin estndar o con agua
una muestra en lugar de una solucin destilada.
estndar.
Espectrofotmetro no automatizado5

Lmpara excitadora no enciende. Filamento roto. Reemplazar lmpara.
Fusible de seguridad quemado. Reemplazar fusible.
Resistencia en el filamento de la lmpara. Reemplazar lmpara.
Voltaje errneo. Revisar voltaje. Revisar fuente de alimentacin.
Lecturas bajas en el metro o galvan- Lmpara excitadora defectuosa. Reemplazar lmpara.
metro.
Fotocelda sucia o defectuosa. Limpiar o reemplazar fotocelda.
Circuito amplificador defectuoso. Cambiar o reparar circuito amplificador.
Bajo voltaje en la lmpara excitadora. Ajustar voltaje.
Indicacin inestable del medidor. Diodo Zener estabilizador defectuoso. Reemplazar diodo Zener.
DEFINICIONES BSICAS distintos. Por ejemplo: la luz ultravioleta pro-

mueve los electrones a rbitas de mayor nivel
Absorcin. Fenmeno que se presenta cuan- energtico; la luz infrarroja produce vibra-
do los tomos o molculas de una sustancia cin atmica y las microondas, rotacin at-
absorben luz. La energa incidente interacta mica. La energa absorbida se pierde por ca-
con la estructura de la materia, transfirindo- lor o radiacin.
le energa que la lleva a un estado energti-
co superior. (Los electrones de la sustancia ngstrom. Unidad de longitud que equivale
son promovidos a rbitas de mayor nivel a 10-10 m. Su smbolo es []. Se utiliza para
energtico). Dependiendo de la longitud de realizar mediciones a nivel de radiacin X o
onda de la luz incidente, se producen efectos gama.
5
Seminario Taller Operacin y Mantenimiento de Espectrofotmetros, Proyecto Subregional de Mantenimiento,
Convenio RE-HS-02, OPS/OMS.
118
= diferencia en la longitud de onda de dos
ranuras adyacentes
Ilustracin 31: Rejilla de difraccin
Bibliografa
Castellanos, J., Sistema de capacitacin tcnica, Mantenimiento de equipo mdico, Mdu-
lo Laboratorio Clnico, submdulo 2, espectrofotmetro, Bogot, Colombia, Fondo Nacio-
nal Hospitalario, Divisin de Ingeniera y Mantenimiento, 1989.
DR/2010 Spectrophotometer, Instrument Manual, Loveland, Colorado, Hach Company,

1999.
Instruction Manual, SmartSpec Tm 3000 Spectrophotometer, Catalog N 170-2501:BIO-RAD

Laboratorios, 4006168 Rev. D.
Jenway Spectrophotometer, model 6305, UV/VISIBLE range, Operating Manual, Gransmore

Green, Felsted, Dunmow, Essex, England, Jenway Company, 1999.
Lobkowicz, F., Melissinos A., Physics for Scientist and Engineers, vol. 2, Philadelphia. W. B.
Saunders Company, 1975.
Seminario Taller Operacin y Mantenimiento de Espectrofotmetros, Proyecto Subregional

de Mantenimiento, convenio RE-HS-02 OPS/OMS, 1992.

(http://www.biochrom.co.uk/images/spectro/ultro100pro_white.jpg)
(http://elchem.kaist.ac.kr/vt/chem-ed/spec/spectros.htm)
(http://en.wikipedia.org/wiki/Spectrophotometer)
120
PRESIN
CICLO N MATERIALES TEMP. C GRFICA TPICA
kg/cm2
4 Lquidos en recipientes 121 1,1
abiertos o semicerrados.*
* Los tiempos dependen
del volumen de la carga.
No hay vaco en el
enfriamiento.
Convenciones: A: Pretratamiento. Ciclos de vaco e inyeccin de vapor alternados. (Procesos 1, 2, 3).

Proceso 4: Esterilizacin
C: Postratamiento (Proceso 5: vaco y secado)
D: Homologacin de presiones internas y externas
Nota: El proceso de lquidos no tiene vaco a continuacin de la esterilizacin. El en-
friamiento es natural.
Nota: Los tiempos de los ciclos de esterilizacin se ajustan a la altura sobre el nivel del mar del lu-
gar donde se encuentra ubicado el autoclave. Los fabricantes suministran las tablas de la compen-
sacin a tener en cuenta. Por lo general, mientras ms alto est ubicado el equipo, ms prolonga-
do ser el tiempo de esterilizacin.
Control de calidad 1. Indicadores del proceso de esteriliza-

cin. Estn diseados para supervisar el
Para que un producto pueda considerarse es- funcionamiento de los autoclaves. Inclu-
tril, es necesario verificar que todas las eta- yen instrumentos que controlan parme-
pas que conforman el proceso de esteriliza- tros como temperatura, tiempo y presin
cin se hayan realizado correctamente. Para termmetros, manmetros y cronme-
verificar el cumplimiento de todas las condi- tros y registran el desarrollo del proceso.
ciones, se ha desarrollado una serie de prue- Los sistemas de registro de los autoclaves
bas que evalan las caractersticas del proce- modernos microprocesador registran to-
so y su influencia sobre la actividad de los mi- dos los parmetros del ciclo de esteriliza-
croorganismos. Hay evaluaciones sobre la cin e inclusive rechazan el ciclo, en caso
temperatura, la presin, el tiempo, la humede presentarse alguna anomala. Final-
dad y el comportamiento general del equipo, mente, en esta categora se encuentra una
a fin de certificar que cumpla y funcione de prueba denominada test de Bowie-Dick,
acuerdo con procedimientos que han demos- que evala la eficiencia de la bomba de va-
trado su validez y confiabilidad. Existen tam- co, utilizando una hoja que cambia de co-
bin pruebas o indicadores que permiten lor de forma uniforme, si el proceso se ha
certificar la muerte de los microorganismos. realizado a satisfaccin. Caso contrario, el
Para certificar la calidad de los procesos de color en la hoja es desigual.
esterilizacin, se ha desarrollado una serie
de pruebas de distinta categora, entre las 2. Indicadores qumicos. Son pruebas de
que se destacan las siguientes: tipo qumico que cambian de color o de
estado cuando se exponen a las diversas
128
Ilustracin 33: Espacios requeridos Ilustracin 34: Acometida aire
por el autoclave comprimido
2. Acometida elctrica, dimensionada a los 5. Sistema de desage diseado para recolec-

consumos del equipo. Si el autoclave es au- tar agua caliente.
tnomo, es decir, dispone de su propio ge-
nerador de vapor, la acometida elctrica 6. Acometida de vapor. Si el autoclave no dis-
debe estudiarse en detalle, pues la poten- pone de su propio generador de vapor, de-
cia requerida podra ser significativamente be ser alimentado desde el sistema gene-
alta. Son tpicas demandas de potencia de rador de vapor de la institucin (sala de
21 kw, 38 kw, 48 kw y superiores, para que mquinas, caldera). La instalacin de sumi-
funcione el generador de vapor. La acome- nistro debe cumplir con requisitos como
tida deber contar con las seguridades y vlvula de corte, filtro, manmetro e insta-
protecciones requeridas. Los voltajes tpi- lacin, para recolectar el condensado con
cos requeridos por los autoclaves son 220 V, filtro y trampa de vapor, como se indica en
60 Hz, o 380 V, 60 Hz trifsico. el esquema adjunto.
3. Acometida de agua, dimensionada a los

consumos del equipo en volumen y pre-
sin. Mientras ms grande el equipo, ma-
yor consumo. El agua que consume el auto-
clave debe haber recibido los tratamientos
requeridos para eliminar los slidos en sus-
pensin, que puedan afectar negativamen-
te el funcionamiento de las electrovlvulas
y dems dispositivos electrohidrulicos.
4. Algunos esterilizadores requieren aire

comprimido, pues sus controles son co-
mandados mediante presin neumtica.
Por lo general, la presin requerida vara
de 5x105 Pa a 9,9x105 Pa. El esquema ad-
junto muestra los requerimientos mnimos
de la instalacin (vlvula de corte, filtro y
Ilustracin 35: Acometida de vapor
manmetro).
130
Autoclave 12
7. El autoclave debe ser operado exclusiva- 7. Controlar que no se presenten fugas de

mente por personal que haya recibido y vapor en ninguno de los sistemas que ope-
aprobado capacitacin especializada en ran en el autoclave.
este tipo de procesos.
8. Limpiar con un trapo hmedo el frente del
autoclave: controles, indicadores, manijas.
El autoclave es un equipo que demanda su- Mantenimiento semanal

pervisin y mantenimiento preventivo per- Responsable: Operador del equipo
manente, debido a la gran cantidad de
componentes y tecnologas que lo integran. 1. Limpiar el filtro del drenaje de la cmara
Se enfoca el mantenimiento hacia aquellas de esterilizacin. Retirar cualquier residuo
rutinas bsicas que pueden realizar los ope- retenido en l.
radores del equipo. Para realizar el mante-
nimiento detallado, debern seguirse las 2. Limpiar internamente la cmara de esteri-
instrucciones definidas en los manuales de lizacin, utilizando productos de limpieza
servicio de los fabricantes. que no contengan cloro. Incluir en la lim-
pieza las guas de las canastas usadas para
colocar los paquetes.
Verificaciones diarias
3. Limpiar con una solucin acetificada, si se
Antes de iniciar los procesos de esterilizacin, esterilizan soluciones con cloro. El cloro
debern realizarse las siguientes verificaciones: causa corrosin incluso en implementos de
acero inoxidable. Lavar a continuacin con
1. Colocar una nueva plantilla o carta en el agua abundante.
dispositivo de registro, para documentar
el desarrollo del ciclo de esterilizacin. 4. Limpiar las superficies externas inoxidables
con un detergente suave. Eventualmente,
2. Controlar que las plumillas registradoras podra utilizarse un solvente como el cloro
disponen de tinta. etileno, procurando que este no entre en
contacto con superficies que tengan recu-
3. Asegurar que las vlvulas de suministro de brimientos de pintura, sealizaciones o cu-
agua fra, aire comprimido y vapor estn biertas plsticas.
abiertas.
5. En autoclaves con puerta de accionamien-
4. Accionar el interruptor que permite calentar to manual, verificar que los mecanismos
la camisa del autoclave. Este control, al acti- ajustan bien y que su operacin es suave.
varse, permite el ingreso de vapor a la cami-
sa de la cmara de esterilizacin. Al ingresar 6. Drenar el generador de vapor (en equipos
el vapor, empieza el proceso de calentamien- que disponen de este accesorio). Para esto
to de la cmara de esterilizacin. Mantener se abre una vlvula, ubicada en la parte in-
la puerta del autoclave cerrada hasta el mo- ferior del generador, que permite extraer
mento que se coloque la carga a esterilizar, su contenido. Por lo general, se hace al fi-
para evitar prdidas de calor. nalizar las actividades de la semana. Seguir
las recomendaciones que para este prop-
5. Verificar que la presin de la lnea de su- sito indica el fabricante del equipo.
ministro de vapor sea de al menos 2,5 bar.
7. Nunca utilizar lana de acero para limpiar
6. Comprobar el estado de los manmetros y internamente la cmara de esterilizacin.
de los termmetros.
131
Autoclave 12
Ilustracin 36: Generador de vapor
Mantenimiento anual MANTENIMIENTO DE COMPONENTES

Responsable: Tcnico del autoclave ESPECIALIZADOS
1. Limpiar todos los filtros. Se incluyen, a continuacin, algunas rutinas

especializadas que se aplican a componentes
2. Comprobar y ajustar el nivel del tanque de del equipo cuando requieren servicio tcnico.
alimentacin de agua, para que se en- Dado que los autoclaves disponen de mlti-
cuentre dentro de los 20 mm del mximo ples alternativas y diseos, las rutinas aqu es-
nivel. tipuladas podran ser aplicables solo a deter-
minados equipos.
3. Verificar y ajustar la tensin de los resortes
de las vlvulas de diafragma.
Mantenimiento de vlvulas solenoides
4. Desmontar, limpiar y ajustar las vlvulas de
seguridad. 1. Verificar el sonido que emiten las bobinas o
solenoides (humming en lengua inglesa). El
5. Cambiar el filtro de aire. ruido excesivo es una advertencia de sobreca-
lentamiento, debido a corrientes elctricas
6. Efectuar un proceso general de esteriliza- anormalmente altas a travs del solenoide.
cin comprobando en detalle: presin, La corriente alterna aumenta cuando la im-
temperatura, tiempos requeridos para pedancia [Z] del circuito disminuye, esto suce-
completar cada fase del ciclo, estado de las de cuando el solenoide no se encuentra ade-
lmparas de sealizacin del proceso, fun- cuadamente rodeado por un circuito cerrado
cionamiento del sistema de registro. Veri- de hierro. Un espacio de aire en el circuito
ficar que el funcionamiento se encuentre magntico puede ser causado por suciedad,
dentro de las tolerancias definidas por el que evita que la armadura alcance su posi-
fabricante. cin final cuando el solenoide est energiza-
do. Limpiar cuidadosamente los alojamientos
7. Efectuar, adicionalmente, las mismas ruti- de la bobina y su ncleo, para no interferir al
nas recomendadas cada tres meses. pistn en su desplazamiento por alguna cla-
se de suciedad.
133
2. Reemplazar los sellos tipo anillo o rings 1. Alojar la tapa.
existentes entre el solenoide y el cuerpo
de la vlvula, cuando estos elementos ha- 2. Retirar la malla.
yan sido desensamblados.
3. Limpiar cuidadosamente.
3. Antes de realizar cualquier desensamblaje,
comprobar cul es la posicin en que se 4. Reinstalar la malla.
encuentra instalada la vlvula solenoide.
Algunas poseen indicaciones claras sobre 5. Colocar nuevamente la tapa.
cmo van instaladas, pero otras carecen de
tal informacin.
4. Cuando se desmonta una vlvula solenoi-
de servoasistida, controlar en qu posicin All se incluyen los problemas ms comunes.
se encuentran los orificios que la comuni- Dada la diversidad de marcas, modelos y tec-
can con el medio de trabajo, para poder nologa disponibles, es conveniente que los
ensamblar de nuevo cuando se efecte el usuarios sigan las instrucciones contenidas en
ensamble de la vlvula. los manuales de uso de los autoclaves instala-
dos en el servicio.
Limpieza del filtro de vapor
Advertencia: Antes de desensamblar el fil-

tro de vapor, disipar la presin de vapor en el
sistema.

El testigo de esterilizacin no indic Cmara de esterilizacin mal cargada o Revisar distribucin de la carga. Revisar canti-
la finalizacin exitosa del ciclo de cargada en exceso. dad de carga. Ajustar de acuerdo a las reco-
esterilizacin. mendaciones del fabricante.
Trampa de vapor defectuosa. Revisar trampa de vapor.
Reparar o sustituir.
Tiempo de esterilizacin inadecuado. Revisar tiempo de esterilizacin. Ajustar al ti-
po de ciclo.
No se alcanz la temperatura y la pre- Revisar seleccin de temperatura. Revisar presin
sin de esterilizacin seleccionada. de vapor correspondiente al ciclo seleccionado.
Revisar posibles fugas de vapor en la puerta em-
paque o en los dispositivos de control de paso.
Penetracin de vapor insuficiente. Reducir la cantidad de paquetes a ser esterili-
zados; esto permite un mejor flujo del vapor.
Pretratamiento defectuoso. Ha quedado Solicitar servicio tcnico especializado para
demasiado aire dentro de la cmara. revisar el sistema de vaco.
Indicador biolgico mal seleccionado Revisar especificaciones de uso del indicador
para el ciclo realizado. biolgico. Repetir el ciclo de esterilizacin.
Se interrumpe el ciclo de esterilizacin Presiones de vapor, agua o aire inade- Revisar presiones de alimentacin de vapor,
sin razn aparente. cuadas. En consecuencia, no se accio- agua o aire. Ajustar sistemas de regulacin.
nan los dispositivos de regulacin y
control servoasistidos.
134
Autoclave 12

Material esterilizado sale hmedo. Trampa de vapor defectuosa. Revisar/limpiar trampa de vapor. Sustituir
trampa.
Drenaje de la cmara de esterilizacin Revisar sistema de drenaje. Limpiar.
obstruido.
Autoclave demasiado cargado. Reducir la cantidad de carga en la cmara. Re-
petir el ciclo de esterilizacin.
El autoclave no est bien nivelado. Nivelar el autoclave.
El indicador biolgico es positivo. Indicador biolgico mal seleccionado. Utilizar un indicador biolgico de otro lote o fabri-
cante. Registrar cuidadosamente los parmetros.
Presin de vapor demasiado baja. Empaque de la puerta defectuoso. Revisar el empaque; reemplazar el empaque.
Fuga de vapor interna en otro disposi- Revisar trampas, electrovlvulas, etc.
tivo del autoclave.
Presin de vapor excesiva. Autoclave demasiado cargado con ma- Reducir la carga del autoclave.
terial textil.
Autoclave descalibrado. Calibrar el autoclave.
DEFINICIONES BSICAS Camisa. Espacio ubicado alrededor de la cma-

ra de esterilizacin, a travs del cual circula va-
Asepsia. Conjunto de procedimientos para por. Su funcin es transferir calor a la cmara de
lograr la ausencia de microorganismos. esterilizacin, en las etapas de pretratamiento
(remocin de aire) y postratamiento (secado del
Atmsfera. Antigua unidad de presin que material esterilizado).
equivale a 101 325 Pa (pascales) o a 14,69 li-
bras por pulgada cuadrada. Bar. Unidad de presin que equivale a 105 Pa
(Pascales).
Calidad. Propiedad termodinmica que, por
lo general, se identifica con la letra [X] y se Descontaminacin. Procedimiento que tie-
define como la relacin existente entre la ne el propsito de disminuir la cantidad de
masa de vapor y la masa total de la sustancia microorganismos de un objeto o artculo, pa-
en condiciones de saturacin. ra que sea segura su manipulacin. El trmi-
no cubre aquellos objetos que se utilizan en
Calor hmedo. Mtodo de esterilizacin los procedimientos de atencin a un paciente
que elimina microorganismos por desnatura- y que puedan ser afectados por fluidos, sus-
lizacin de las protenas, que se acelera por la tancias corporales o materia orgnica.
presencia de agua (vapor).
Desinfeccin. Proceso que utiliza medios fsi-
Cmara de esterilizacin. Espacio donde se cos o qumicos, mediante el cual se destruyen
colocan los objetos que requieren ser esterili- de los objetos inanimados formas de vida en
zados. Cuando se efecta el proceso de este- estado vegetativo. (Se excluyen las esporas).
rilizacin la cmara se llena de vapor a pre-
sin, alcanzando temperaturas directamente Esterilizacin. Conjunto de acciones me-
relacionadas con las presiones seleccionadas. diante las cuales se destruye toda forma de
Dispone de una puerta que la sella durante el vida, incluyendo esporas de objetos inanima-
ciclo de esterilizacin y, mediante un sistema dos, con procedimientos fsicos, qumicos y
de seguridades, solo es posible abrirla una gaseosos.
vez que haya terminado el proceso de esteri-
lizacin y se haya homogenizado la presin Inspeccin. Evaluacin visual de los artculos la-
interna con la atmosfrica. vados en bsqueda de desperfectos o suciedad
135
que pudieran interferir en los procesos de es- son la cinta de enmascarar termosensible
terilizacin. Es un proceso de gran responsa- cambia de color cuando se alcanzan deter-
bilidad y debe realizarse utilizando ayudas minadas condiciones de temperatura y las
como lupas para precisar pequeos detalles. esporas del B. Stearothermophilus.
Limpieza. Remocin mecnica de toda mate- Trampa de vapor. Dispositivo diseado para
ria extraa ubicada en las superficies de obje- restringir el paso de vapor y permitir el paso
tos inanimados; por lo general, comprende la del condensado.
utilizacin de agua limpia combinada con al-
gn detergente. Es un procedimiento bsico Vlvulas servoasistidas. Tipo de vlvulas
que se efecta antes de que los objetos sean solenoides que dependen de la presin del
sometidos al proceso de esterilizacin propia- medio en el que trabajan para cerrar o abrir.
mente dicho. La limpieza puede realizarse Por lo general, disponen de membranas con
utilizando mtodos manuales o automticos, pequeos orificios a travs de los cuales sumi-
pero debe entenderse que no es un procedi- nistran el medio de trabajo.
miento que destruye microorganismos, sino
que nicamente disminuye la cantidad de Vlvula solenoides. Dispositivos electro-
microorganismos. magnticos de control que se utilizan en ml-
tiples aplicaciones. Se conocen tambin con
Pascal (Pa). Unidad de presin del Sistema el nombre de electrovlvulas. Mediante una
Internacional, que corresponde a la fuerza de bobina que se energiza o desenergiza, se
un newton (N) que acta sobre un (1) metro controla la posicin de un pistn que permi-
cuadrado Pa = 1N / m2. te o impide el paso de un fluido dentro de un
circuito determinado. Se utilizan en circuitos
Testigo de esterilizacin. Indicadores de ti- hidrulicos, neumticos, vapor, vaco. Los fa-
po qumico o biolgico que permiten verifi- bricantes han desarrollado un gran nmero
car si un objeto o material fue sometido a de diseos para aplicaciones especializadas.
procesos de esterilizacin. Los ms conocidos
136
Autoclave 12
Bibliografa
Autoclave GE-660, Control Unit A2, Getingeverken N 660 A2 8301.
Ginesta, N., "La nueva generacin de miniclaves: Un pequeo esterilizador de vapor con las
prestaciones de los grandes", Antonio Matachana, Barcelona. XIII Congreso Internacional
del CEDEST, en El autoclave, Revista del Club Espaol de Esterilizacin, ao 14, N 2, 2002.
Instrucciones funcionamiento Autoclave 80L-1, Antonio Matachana, IM-001.81.
Manual de Esterilizacin y Desinfeccin, Santiago de Chile, Unidad de Infecciones Intrahos-

pitalarias de la Red de la Divisin Asistencial, Ministerio de Salud.
(http://odontologia.uchile.cl/catedras/operator/operato/manualfinal.pdf)
Manual de operacin para equipos esterilizadores y destiladores, San Salvador, Proyecto de

Mantenimiento Hospitalario, Ministerio de Salud - GTZ, 1998.
Manual de operacin de autoclave, San Salvador, Proyecto de Mantenimiento Hospitalario,

Ministerio de Salud - GTZ, 1997.
Sentry "220" Sterilizer, Straightline and Cylindrical, MA-2, Service Manual, Rochester, N.Y.,
Castle Sybron Corporation.
Sterilisateur vapeur, UltraClave M9/M11, Manuel dinstallation et dutilisation, Midmark

Corporation, N 03-0920-02 Rev. B, 1998.

137
138
CAPTULO 13
Estufa de secado
14-410 Horno de secado
ESTUFA DE SECADO
La estufa de secado es un equipo que se uti-

liza para secar y esterilizar recipientes de vi-
drio y metal en el laboratorio. Se identifica
tambin con el nombre Horno de secado. Los
fabricantes han desarrollado bsicamente
dos tipos de estufa: las que operan mediante
conveccin natural y las que operan median-
te conveccin forzada. Las estufas operan,
por lo general, entre la temperatura ambien-
te y los 350 C. Se conocen tambin con el
nombre de Poupinel o pupinel.
FOTOGRAFAS DE ESTUFA DE SECADO1
PROPSITO DE LA ESTUFA
La estufa de secado se emplea para esterilizar

o secar el material de vidrio y metal utilizado
en los exmenes o pruebas, que realiza el la-
boratorio y que proviene de la seccin de la-
vado, donde se enva luego de ser usado en
algn procedimiento. La esterilizacin que se
efecta en la estufa se denomina de calor se-
co y se realiza a 180 C durante 2 horas; la
cristalera, al ser calentada por aire a alta
temperatura, absorbe la humedad y elimina
la posibilidad de que se mantenga cualquier
actividad biolgica debido a las elevadas
temperaturas y a los tiempos utilizados.
PRINCIPIOS DE OPERACIN
Las estufas de secado constan, por lo general,

de dos cmaras: una interna y una externa. La
cmara interna se fabrica en aluminio o en ma-
terial inoxidable, con muy buenas propiedades
1
http://www.precisionsci.com/lab/products/ov_t160.htm
139
para transmitir el calor; dispone de un conjun- La resistencia [R] puede ser calculada con la
to de estantes o anaqueles fabricados en siguiente ecuacin:
alambre de acero inoxidable, para que el aire
L
circule libremente, all se colocan los elemen- R=
tos que requieren ser secados o esterilizados A
mediante calor seco. Se encuentra aislada de
la cmara externa por un material aislante donde:
que mantiene internamente las condiciones = resistividad del material de la resistencia
de alta temperatura y retarda la transferen- L = longitud del alambre de la resistencia
cia de calor al exterior. La cmara externa A = rea de alambre de la resistencia
est fabricada en lmina de acero, recubier-
ta con una pelcula protectora de pintura La estufa tiene una puerta metlica que tam-
electrosttica. El calor interno es generado bin dispone de su aislamiento trmico y est
mediante conjuntos de resistencias elctri- dotada de una manija fabricada igualmente en
cas, que transfieren la energa trmica a la material aislante, para evitar que el calor del
cmara interna. Dichas resistencias se ubi- interior llegue a ser una amenaza para las ma-
can en la parte inferior de la estufa. El calor nos del operador. La puerta est instalada so-
dentro de la cmara interna se transfiere y bre la parte frontal del cuerpo de la estufa, me-
distribuye mediante conveccin natural o diante un conjunto de bisagras que permiten
conveccin forzada (estufa con ventiladores su apertura logrando ngulos hasta de 180.
internos).
La estufa moderna se controla mediante un
La potencia energa por unidad de tiempo mdulo con microprocesadores desde el cual es
disipada por una resistencia elctrica puede posible seleccionar los parmetros de opera-
ser calculada mediante la siguiente ecuacin: cin del equipo y sus alarmas, y programar la
realizacin de ciclos o procesos trmicos, me-
P = I2R diante los cuales se controlan no solo las tem-
peraturas, sino tambin la forma como las mis-
donde: mas deben variar en el tiempo, a travs de fa-
I = intensidad de la corriente elctrica ses o etapas de calentamiento/enfriamiento
medida en amperios [A] natural o sostenimiento de la temperatura
R = resistencia elctrica medida en ohmios dentro de ciertos lmites de tiempo. Las estufas
[] operan normalmente desde condiciones de
temperatura ambiente hasta los 350 C. Algu-
Dado que la energa no se crea ni se destruye, nos fabricantes disponen de modelos con ran-
sino que se transforma, es posible calcular la gos no tan amplios de operacin.
energa trmica equivalente de los elementos
resistivos. Para el caso de un alambre resistivo, Las estufas antiguas disponen simplemente
la cantidad de calor [q] que disipa puede cal- de un conjunto de resistencias cuya opera-
cularse mediante la siguiente ecuacin2: cin es controlada mediante un termostato.

I2R = qr02L En la tabla que se incluye a continuacin, se
muestra la relacin de temperatura/tiempo
donde: requerida para efectuar procesos de esterili-
R = resistencia del alambre resistivo zacin con calor seco, como los que se pue-
I = intensidad de la corriente elctrica den lograr en las estufas de secado.
r0 = radio exterior del alambre
2
Se ha colocado el ejemplo correspondiente de la transferencia de calor de una resistencia tipo alambre de geome-
tra circular. Para otras geometras deben efectuarse los ajustes correspondientes.
140
Estufa de secado 13
Tabla de temperatura/tiempo de 1. No usar en la estufa materiales o sustan-

esterilizacin por calor seco3 cias que sean inflamables o explosivas.
Temperatura C Tiempo (minutos)4 2. Evitar derrames interiores de soluciones

cidas o que formen vapores corrosivos,
180 30 para evitar la corrosin de las superficies y
170 60 estantes interiores.
160 120
3. Utilizar elementos de proteccin personal
150 150 (guantes aislados, anteojos de seguridad y
140 180 pinzas para colocar o retirar sustancias o
121 360 elementos dentro de la estufa de secado).
Rutina de operacin
SERVICIOS REQUERIDOS
Por lo general, se realiza el siguiente
Para poder ser utilizada, la estufa de secado procedimiento:
requiere lo siguiente:
1. Activar el interruptor general, presionan-
1. Disponer de un mesn de trabajo de con- do el botn identificado habitualmente
textura fuerte y bien nivelado. con una [I].
2. Acondicionar alrededor de la estufa un es- 2. Presionar la tecla identificada como

pacio libre de al menos 5 cm y de un espa- Programa.
cio para colocar el material que deber ser
procesado en el equipo. 3. Seleccionar la temperatura de operacin.
Para ello se presiona la tecla marcada con el
3. Instalar una toma elctrica en buen estado signo (+), hasta obtener en la pantalla la
con polo a tierra debidamente dimensiona- temperatura seleccionada. La estufa empe-
da, para suministrar la potencia elctrica que zar el proceso de calentamiento hasta que
consume la estufa, que deber cumplir con la se alcance la temperatura seleccionada.
normativa elctrica nacional o internacional
que utilice el laboratorio y no deber estar a 4. Si la estufa es programable, se deben se-
ms de 1 m del equipo. El voltaje tpico utili- guir las instrucciones que para cada caso
zado es de 110 V o 220 V/60 Hz. particular defina el fabricante y que per-
miten definir parmetros adicionales co-
4. Verificar que el circuito elctrico disponga mo tiempos, formas de calentamiento y
de los dispositivos de proteccin requeri- alarmas.
dos para garantizar una adecuada alimen-
tacin elctrica.
CONTROL DE LA ESTUFA
OPERACIN DE LA ESTUFA A continuacin, se presenta un esquema de

uno de los controles que utilizan las estufas
La operacin de la estufa requiere tener en de secado modernas.
cuenta una serie de precauciones para su co-
rrecta operacin. Entre las ms importantes
se encuentran las siguientes:
3
Manual de Esterilizacin y Desinfeccin, Santiago de Chile, Ministerio de Salud.
4
Los tiempos se cuentan solo desde el momento que se alcanza la temperatura correspondiente.
141
Estufa de secado 13
De la ilustracin del circuito se destacan los si- Los procedimientos pueden variar depen-
guientes elementos: diendo del tipo de estufa y las particulari-
dades de diseo incluidas por los diversos
1. Interruptor general. Energiza o desenergi- fabricantes.
za la estufa.
2. Control. Permite controlar las funciones de Advertencia: Antes de efectuar cualquier

la estufa (temperatura, tiempos, formas rutina de mantenimiento en la estufa, ve-
de calentamiento o enfriamiento, modos rificar que esta se encuentra a temperatu-
de operacin seleccionados en el laborato- ra ambiente y se ha desconectado la toma
rio, tales como precalentamiento, esterili- de alimentacin elctrica.
zacin, deshidratacin, acondicionamien-
to, secado e inclusive horneado).
3. Resistencias. Elementos calefactores que Acceso a los componentes electrnicos

transforman la energa elctrica en ener- Frecuencia: Cuando se requiera
ga trmica.
Los componentes electrnicos de la estufa se
4. Sistemas indicadores. Dispositivos que encuentran usualmente en la parte inferior
complementan el control general. Permi- de esta. Para poder revisarlos se requiere pro-
ten conocer si la estufa est energizada, si ceder como se explica a continuacin:
se encuentra en operacin.
1. Desconectar la estufa de la toma de ali-
mentacin elctrica.
CONTROL DE CALIDAD
2. Desplazar la estufa hacia adelante hasta
El control de calidad en las estufas es un po- que la parte frontal de la base se encuen-
co difcil de realizar, por cuanto la tcnica de tre alineada con el borde de la superficie
esterilizacin por calor seco tiene como par- de trabajo.
metros crticos la temperatura y el tiempo.
Por lo general, se usan como indicadores bio- 3. Colocar dos cuas de aproximadamente 3
lgicos esporas de Bacillus subtilis, variedad cm de espesor bajo cada uno de los sopor-
Nger, que deben incubarse por varias horas tes frontales. Esto elevar la parte delante-
despus del proceso de esterilizacin. La car- ra de la estufa y facilitar la inspeccin de
ga inicial de esporas del indicador biolgico los elementos electrnicos una vez que se
oscila entre 5 x 105 y 1 x 106. Su efectividad retire la tapa inferior.
depende de la difusin del calor, la cantidad
de calor disponible y la prdida de calor. La 4. Retirar los tornillos que aseguran la tapa
accin microbicida est condicionada por la inferior y levantarla. Entonces, pueden re-
presencia de materia orgnica o suciedad en visarse los componentes del control elec-
el artculo. La esterilizacin por calor seco de- trnico. Por lo general, se ubican en este
be limitarse a materiales que no puedan este- compartimiento los siguientes elementos:
rilizarse en autoclaves.
a) El control programable
b) Un relevo de seguridad
RUTINAS DE MANTENIMIENTO c) El interruptor general y el disyuntor
(breaker) estn combinados en un mismo
El mantenimiento que requiere una estufa de dispositivo.
secado no es complicado, ni precisa rutinas
peridicas de mantenimiento de complejidad 5. Reinstalar la tapa una vez terminada la
tcnica avanzada. Se presentan, a continua- revisin.
cin, rutinas generales de mantenimiento
que deben efectuarse cuando se requieran.
143
Cambio de las resistencias calefactoras 4. Instalar un ventilador de las mismas espe-
Frecuencia: Cuando se requiera cificaciones del original; conectar los ca-
bles que alimentan el ventilador a los
El procedimiento que se explica a continua- terminales.
cin deber realizarlo personal que disponga
de buenos conocimientos de electricidad. 5. Reinstalar la cubierta de proteccin.
1. Desconectar la estufa de la toma de ali-

mentacin elctrica. Cambio del empaque de la puerta
Frecuencia: Cuando se requiera
2. Desmontar el termmetro del alojamiento
ubicado en la parte superior de la cmara. El empaque de la puerta usualmente es de
silicona.
3. Abrir la puerta y retirar los estantes.
1. Apagar la estufa y abrir la puerta.
4. Desconectar la sonda del termmetro.
2. Aflojar los seguros que retienen el
5. Retirar los tornillos que aseguran el panel empaque.
inferior.
3. Retirar el empaque utilizando un destorni-
6. Retirar el panel inferior fuera de la cmara. llador para desencajarlo de la gua de re-
tencin. Evitar esfuerzos excesivos que
7. Retirar los tornillos que aseguran los ca- puedan deformar el alojamiento.
bles de alimentacin elctrica de las resis-
tencias y desconectar los terminales que 4. Instalar el empaque de repuesto iniciando
los fijan a las resistencias. la labor por la parte superior. A continua-
cin, desplazar el resto del empaque hacia
8. Retirar los tornillos que aseguran las resis- los lados, asegurndolo con los elementos
tencias y las resistencias fuera de la estufa. de montaje que lo fijan a la puerta. Termi-
nar el procedimiento en la parte inferior
9. Instalar resistencias nuevas de las mismas de la puerta, tal como se hizo en la parte
caractersticas de las originales. superior.
10.Reinstalar los elementos retirados y reco-

nectar los componentes elctricos. Cambio del termo par
Frecuencia: Cuando se requiera
Cambio del ventilador de enfriamiento 1. Abrir el compartimiento del control

Frecuencia: Cuando se requiera electrnico.
Para cambiar el ventilador de enfriamiento, 2. Retirar los cables conectores del termo par
que se encuentra generalmente en la parte de sus puntos de conexin en la tarjeta del
inferior, se sigue el procedimiento que se ex- controlador.
plica a continuacin:
3. Aflojar el montaje del termo par de la par-
1. Proceder tal como se ha explicado para abrir el te superior de la estufa y retirarlo hacia la
compartimiento de elementos electrnicos. parte delantera hasta dejar expuesta una
longitud libre del cable conector de por lo
2. Desconectar los terminales de la alimenta- menos 15 cm.
cin elctrica del ventilador.
4. Cortar el cable del termo par, para poder
3. Desmontar los tornillos de fijacin del retirar la envoltura del termo par.
ventilador.
144
Estufa de secado 13
5. Asegurar los extremos cortados del termo Cambio de las bisagras de la puerta
par defectuoso, con los cables del termo Frecuencia: Cuando se requiera
par de reemplazo. Utilizar cinta para evi-
tar que se suelten. Para cambiar las bisagras de la puerta, se pro-
cede como se explica a continuacin:
6. Halar suavemente el termo par defectuoso
fuera del compartimiento electrnico, 1. Abrir la puerta y levantarla de las bisagras.
mientras se guan los cables del nuevo,
atados a los del viejo, hasta el lugar que 2. Retirar los tornillos de montaje de la bisa-
les corresponde dentro del compartimien- gra defectuosa.
to electrnico.
3. Retirar la bisagra defectuosa.
7. Conectar los cables del termo par nuevo a
los terminales de conexin que les corres- 4. Colocar la bisagra nueva y asegurarla con
ponde. Verificar que se mantiene la polari- los tornillos de montaje.
dad original.
5. Reinstalar la puerta.
8. Reensamblar la cubierta protectora.

No hay energa. La estufa no est conectada. Conectar estufa a toma elctrica.
El interruptor de encendido se encuen- Accionar el interruptor de encendido.
tra apagado.
Disyuntor defectuoso. Cambiar el disyuntor.
Tarjeta de control defectuosa. Sustituir tarjeta de control.
Cable conector abierto. Revisar/reparar cables conectores.
Temperatura errtica elevada. Termo par defectuoso. Sustituir termo par.
Controlador defectuoso. Sustituir controlador.
La estufa presenta fallas de calenta- Se seleccion una temperatura inferior Cambiar la seleccin de la temperatura. Espe-
miento. a la actual. rar a que esta descienda por debajo de la tem-
peratura seleccionada.
Termo par defectuoso. Sustituir el termo par.
Resistencia calefactora defectuosa. Sustituir resistencia calefactora.
Relevo defectuoso. Sustituir relevo.
Controlador defectuoso. Reemplazar controlador.
La pantalla de datos actuales muestra Circuito del termo par abierto. Verificar conexin del termo par o sustituir el
el mensaje "abierto". termo par.
145
DEFINICIONES BSICAS conoce como efecto Seebeck, en honor a su
descubridor, el fsico alemn Thomas Seebeck.
Calor. Forma de energa que es transferida, a
travs del lmite de un sistema a una tempe- Resistencia. Propiedad que tienen las dife-
ratura dada, a otro sistema o vecindario a rentes sustancias o materiales, en virtud de la
una menor temperatura, por la diferencia de cual se impide en mayor o menor grado el pa-
temperatura entre los dos sistemas. Cuando so de la corriente elctrica. En los textos se
un sistema de gran masa [M] se pone en con- identifica la resistencia con la letra [R]. Para
tacto con otro sistema de pequea masa [m], un cuerpo de seccin uniforme; por ejemplo:
que est a temperatura diferente del prime- un alambre, la resistencia [R] es una magni-
ro, la temperatura resultante final se encuen- tud directamente proporcional a la longitud
tra cerca de la temperatura inicial del sistema [l] e inversamente proporcional al rea sec-
de mayor masa. Se dice, entonces, que una cional [a]. La resistencia se representa me-
cantidad de calor Q ha sido transferida del diante la siguiente ecuacin:
sistema de mayor temperatura al sistema de
menor temperatura. La cantidad de calor Q l
es proporcional al cambio en temperatura R=kx
a
T. La constante de proporcionalidad [C], lla-
mada la capacidad calrica del sistema, permi-
te establecer la siguiente relacin Q = CT, donde:
de la cual se infiere que una de las conse- k = constante que depende de las unidades
cuencias del cambio de temperatura en un empleadas
sistema es la transferencia de calor. l = longitud del conductor
a = rea seccional del conductor
Disyuntor. Dispositivo de control elctrico
que permite energizar o desenergizar un La unidad de resistencia es el ohmio y se re-
equipo o dispositivo. Se denomina tambin presenta normalmente por la letra griega .
interruptor. En lengua inglesa se identifica
como breaker. Termostato. Dispositivo que regula la tem-
peratura de un sistema. Opera usualmente
Par termoelctrico. Componente formado mediante la expansin de uno de sus compo-
por dos materiales diferentes, unidos por los nentes, que mecnicamente acciona otro ele-
extremos, que generan una corriente elctri- mento como, por ejemplo, un interruptor
ca cuando una de las uniones est a mayor que controla alguna funcin.
temperatura que la otra. Este fenmeno se
146
Estufa de secado 13
Bibliografa
Fisher Series 100 Isotemp Gravity Convected Ovens, Instructions N 0-0812-10/1166, 1980.
Holman, J., Heat transfer, New York, Mc Graw Hill Co., 1972.
Isotemp Programmable Ovens 800 Series, Instruction Manual, Fisher Scientific Company,
Part N 104502, 2003.
Manual de Esterilizacin y Desinfeccin, Santiago de Chile, Unidad de Infecciones Intrahos-

pitalarias de la Red de la Divisin Asistencial, Ministerio de Salud.
(http://odontologia.uchile.cl/catedras/operator/operato/manualfinal.pdf)
Melissinos, A., Lobkowicz, F., Physics for Scientists and Engineers, vol. I, Philadelphia, W. B.
Saunders Co., 1975.
Operating and services procedures for series Fisher Series 200 Isotemp Gravity Convected
Ovens, Model 215 G, Part N 43853, 0-0812-07/1182.

147
148
CAPTULO 14
Incubadoras
15-151 Incubadora aerbica
15-152 Incubadora anaerbica
INCUBADORA FOTOGRAFAS DE INCUBADORAS
La palabra incubadora proviene de la palabra

latina incubare que significa empollar. Es un
equipo diseado para mantener una cmara
a temperatura, atmsfera y humedad contro-
ladas, con el fin de conservar organismos vi-
vos en un entorno que resulte adecuado pa-
ra su crecimiento. Entre las aplicaciones ms
comunes, se citan las siguientes: incubacin
de cultivos bacteriolgicos, virales, micolgi-
cos, celulares, determinacin de la demanda
biolgica de oxgeno (DBO) y conservacin
de biolgicos. Las incubadoras varan en
complejidad y diseo. Algunas nicamente
controlan la temperatura, mientras que
otras, adems, controlan la composicin
atmosfrica.
Incubadora estndar
Finalmente, algunas disponen incluso de la http://www.fisherlabequipment.com/incubator.htm
capacidad para lograr condiciones de tempe-
ratura por debajo de la temperatura ambien-
te y, en consecuencia, incluyen sistemas de re-
frigeracin. Se infiere de lo anterior que, de-
pendiendo del diseo y las especificaciones
requeridas, pueden encontrarse en el merca-
do incubadoras que controlan temperaturas
desde los 10 C y van hasta los 75 C o un po-
co ms. Con relacin al control atmosfrico,
algunas incubadoras disponen de inyeccin
de CO2 para lograr condiciones especiales de
atmsfera, bajo las cuales se incrementa el
crecimiento de diversas especies de organis-
mos y clulas.
Incubadora de baja temperatura

http://www.fisherlabequipment.com/incubator.htm
149
PRINCIPIOS DE OPERACIN Conveccin trmica
La incubadora es un equipo que utiliza di- En las incubadoras que funcionan mediante
versos medios de transferencia de calor y conveccin trmica, el calor generado por el
control ambiental, para obtener unas con- sistema de resistencias es transferido a un
diciones bajo las cuales se puedan efectuar fluido aire que circula en la cmara de in-
procedimientos especializados de laborato- cubacin, transfiriendo el calor a las mues-
rio. En general, disponen de un sistema de tras; la eficiencia de este proceso depende de
resistencias elctricas que se controlan me- los patrones de flujo del mismo. En general el
diante dispositivos como termostatos o aire ingresa a la incubadora por la parte infe-
controles microprocesados. En cuanto a los rior y es calentado en un compartimiento,
sistemas de transferencia de calor, las incu- desde el cual fluye a la cmara de incubacin,
badoras utilizan bsicamente la conduccin siguiendo patrones uniformes de flujo, para
y la conveccin natural o forzada. finalmente salir al exterior a travs de un
conducto ubicado en la parte superior de la
incubadora.
Conduccin trmica
La ecuacin bsica que explica el comporta-
En las incubadoras que funcionan por con- miento es2:
duccin trmica, el conjunto de resistencias
elctricas transfiere directamente el calor a
las paredes de la cmara, donde se incuban q = hA(TW - T )
las muestras. Las resistencias constituyen una
regin de alta temperatura, mientras que la
cmara es una regin de menor temperatura. donde:
La transferencia de energa trmica se pre- q = cantidad de calor transferido por conveccin
senta siempre desde la regin de mayor tem- h = coeficiente de conveccin de transferen-
peratura hacia la regin de menor tempera- cia de calor
tura, segn la siguiente ecuacin1: A = rea a travs de la cual se realiza la trans-
ferencia de calor
T TW = temperatura en la superficie de la
q = -kA resistencia
x
T = temperatura del fluido
donde:
Algunas incubadoras disponen tambin de
q= cantidad de calor trasferido por con-
ventiladores que hacen circular el aire, por lo
duccin
que el proceso de conveccin es forzado. En
k= conductividad trmica del material
el esquema que se presenta a continuacin se
A = rea de transferencia de calor
muestran tres criterios de diseo utilizados
T gradiente de temperatura en la direc-
= cin del flujo de calor en las incubadoras: conduccin trmica, con-
x veccin natural y conveccin forzada.
El signo menos () se introduce en la ecua-

cin para que se cumpla la segunda ley de la
termodinmica.
1
Ecuacin bsica de transferencia de calor, deducida por el fsico y matemtico francs Joseph Fourier.
2
Ecuacin de transferencia de calor por conveccin, desarrollada por Isaac Newton (ley de enfriamiento).
150
Incubadoras 14
Ilustracin 39: Formas de transferencia de calor
Cuando se requiere obtener temperaturas en y dems funciones de la incubadora. Cada pro-

la cmara de incubacin inferiores a la tem- ductor ha desarrollado sus propios diseos.
peratura ambiente [Ta], es necesario instalar Los datos relacionados con los niveles de tem-
en la incubadora un sistema de refrigeracin peratura programados o alcanzados y dems
que le permita extraer cantidades de calor informacin son presentados en pantallas
adicionales, de forma que la temperatura en construidas con base en diodos emisores de
la cmara de incubacin sea ms baja que la luz (LED).
temperatura del ambiente. Dicho sistema es
operado mediante el sistema de control de Para que una incubadora regule adecuada-
temperatura de la incubadora. mente la temperatura, debe existir una dife-
rencia entre la temperatura de la cmara
Algunos fabricantes han incorporado en sus [Tc] y la temperatura ambiente [Ta] de al
diseos cmaras de agua que rodean la c- menos 5 C. Si la temperatura de la cmara
mara de incubacin. El agua en estado l- [Tc] debe ser inferior a la temperatura am-
quido es una sustancia que tiene mayor ca- biente [Ta], se requiere que la incubadora
pacidad de absorcin y retencin trmica. sea de baja temperatura, es decir, que dis-
Este diseo es particularmente til cuando ponga de un sistema de refrigeracin, me-
se requieren garantizar condiciones muy es- diante el cual sea posible reducir la tempe-
tables de temperatura dentro de la cmara ratura de la cmara [Tc] a una temperatura
de incubacin. inferior a la del ambiente [Ta].
Cuando se necesitan atmsferas especiales, se Resumen: Si Tc>Ta, la incubadora no requie-

han diseado incubadoras que inyectan gases re sistema de refrigeracin. Si Tc<Ta, la incu-
como dixido de carbono (CO2) y mantienen badora es de baja temperatura y requiere de
concentraciones del mismo en la cmara de sistema de refrigeracin.
incubacin que varan entre el 3 % y el 5 %.
En consecuencia la adquisicin de incubado-
Los sistemas de control de temperatura se ba- ras depende del tipo de procedimientos que
san en la utilizacin de termostatos bimet- realiza el laboratorio. Entonces, las especifi-
licos o de expansin de fluidos o de pares caciones tcnicas deben ser estudiadas y defi-
termoelctricos o termistores, o diversos ele- nidas cuidadosamente, para que la adquisi-
mentos semiconductores que utilizando cir- cin responda a las necesidades reales de ca-
cuitos electrnicos permiten, mediante el uso da laboratorio.
de microprocesadores, controlar la temperatura
151
CONTROLES DE LA INCUBADORA fabricacin reciente. Los nmeros que identifi-
can cada elemento en el esquema se explican a
El esquema que se muestra a continuacin da continuacin.
una idea del tipo de controles que normalmen-
te es posible encontrar en una incubadora de
Ilustracin 40: Control de incubadora
1. Un interruptor general para encender o operacin. Si el sistema calefactor est en

apagar el equipo. Algunos productores in- operacin, se enciende el LED identificado
cluyen en el mismo un breaker de protec- como Calor; si se est programando la in-
cin. El interruptor dispone de dos posicio- cubadora, se enciende el LED identificado
nes. En la posicin [I], se energiza la incu- como Programa.
badora. En la posicin [O], se desconecta la
incubadora. 6. El teclado corresponde a la zona del con-
trol, donde se encuentran ubicados los bo-
2. Una pantalla que permite ver los parme- tones de seleccin y de control.
tros seleccionados. Por ejemplo: tempera-
tura seleccionada, temperatura de alarma Cada fabricante utiliza controles ajustados al
(mximo y mnima). diseo de incubadora, pero en general todos
disponen de los controles a los que se ha he-
3. Dos botones de control que normalmente cho mencin. La secuencia de accionamiento
se identifican con las palabras Men y Se- de los mismos normalmente se explica en los
leccin o Set en ingls. Estos permiten pro- manuales de uso de los fabricantes.
gramar la operacin de las incubadoras y
determinar los niveles de alarma. En general con el botn denominado Men,
se elige el parmetro con el que se quiere tra-
4. Dos botones de seleccin que permiten bajar y, al presionar los botones de seleccin,
aumentar o disminuir las temperaturas re- se aumentan o disminuyen hasta el punto en
queridas. Los botones de seleccin se utili- donde lo requiere el operador. A continua-
zan en combinacin con los botones de cin, se confirma la seleccin realizada en el
control. botn Seleccin o Set en ingls.
5. Un conjunto de diodos emisores de luz o

LED que informan sobre el estado de
152
Incubadoras 14
SERVICIOS REQUERIDOS existen componentes que en operacin

podran actuar como fuentes de ignicin.
Las incubadoras requieren para su funciona-
miento las siguientes condiciones: 2. Evitar el derrame de soluciones cidas en
el interior de la incubadora. Estas deterio-
1. Una acometida elctrica dimensionada de ran los materiales internos de la cmara
acuerdo con los estndares elctricos utili- de incubacin. Procurar manejar sustan-
zados en el pas. La toma elctrica que ali- cias cuyo pH sea neutro en lo posible. Evi-
menta la incubadora no debe estar a ms tar incubar sustancias que generen humos
de 1,5 m del lugar seleccionado para la ins- corrosivos.
talacin de la incubadora. La acometida
elctrica normalmente debe suministrar 3. Evitar colocar recipientes sobre la cubierta
un voltaje de 120 V, 60 Hz o de 220-240 V, inferior que protege los elementos cale-
50/60 Hz y disponer de su respectiva aco- factores resistivos.
metida a tierra.
4. Emplear elementos de proteccin perso-
2. Un espacio libre a los lados de la incubado- nal cuando se utiliza la incubadora: an-
ra y tambin en la parte trasera del equi- teojos de seguridad, guantes, pinzas para
po, con el fin de permitir el paso de los ca- colocar y retirar recipientes.
bles y la ventilacin requerida por la incu-
badora para su funcionamiento normal. 5. Evitar permanecer frente a una incubado-
Dicho espacio se estima entre 5 y 10 cm. ra que se encuentre con la puerta abierta.
Algunas sustancias emiten humos o vapo-
3. Un lugar del laboratorio donde la varia- res no recomendables para respirar.
cin de temperatura sea mnima.
6. Calibrar la incubadora en el lugar de ins-
4. Una estantera o mesn, firme y nivelado, talacin para constatar su uniformidad y
capaz de sostener el peso de la incubado- estabilidad.
ra. El peso de una incubadora de tres es-
tantes se estima entre 60 y 80 kg. 7. Verificar la temperatura de operacin de
la incubadora en horas matutinas y ves-
5. Reguladores de presin, mangueras y aco- pertinas, con instrumentos certificados:
ples, para las incubadoras que utilizan di- termmetro, termo par, etc.
xido de carbono (CO2). Adems, anclajes
que permitan asegurar el cilindro de alta 8. Registrar cada inconformidad detectada
presin que contiene el CO2. en la bitcora de la incubadora. Explicar si
se tomaron acciones correctivas.
RUTINAS DE MANTENIMIENTO Y 9. Verificar que la temperatura de la incuba-

USO DE LA INCUBADORA dora no vare ms de un grado centgrado
(+/ 1 C).
Se presentan a continuacin las rutinas genera-
les de operacin y mantenimiento que puede 10. Aadir un agente inhibidor microbiano
llegar a requerir una incubadora. Los procedi- de carcter no voltil, si se requiere insta-
mientos especficos deben realizarse siguiendo lar dentro de la incubadora un recipiente
las recomendaciones de cada fabricante. con agua para mantener una determina-
da cantidad de humedad.
Recomendaciones de uso
Recomendaciones de limpieza
1. No utilizar una incubadora en presencia
de materiales inflamables o combustibles, 1. Desconectar la incubadora antes de iniciar
debido a que en el interior del equipo los procesos de limpieza.
153
Incubadoras 14
Tabla de solucin de problemas capacitacin especializada en operacin y

mantenimiento de incubadoras. Casos espe-
Normalmente, las situaciones comunes que cializados deben atenderse siguiendo las re-
se presentan en la siguiente tabla debe reali- comendaciones de los fabricantes.
zarlas personal que haya recibido y aprobado
Incubadora normal

La incubadora no enciende. No hay energa en la red de alimenta- Revisar el estado de la acometida elctrica.
cin elctrica.
El interruptor de encendido/apagado Colocar el interruptor en la posicin encendido.
est en la posicin apagado.
El cable de alimentacin elctrica est Revisar cable o sustituirlo.
defectuoso.
La incubadora presenta fallas de calen- El control de temperatura est defectuoso. Revisar y ajustar o sustituir control de temperatura.
tamiento.
La resistencia calefactora est defectuosa. Sustituir resistencia. Colocar repuesto con las
mismas caractersticas del original.
La conexin de la resistencia calefacto- Limpiar puntos de conexin. Ajustar la conexin.
ra est defectuosa.
El par termoelctrico est defectuoso. Reemplazar par termoelctrico.
La temperatura seleccionada es menor Revisar especificacin de la incubadora. Solo
que la temperatura ambiente. las incubadoras refrigeradas pueden operar
en este tipo de condiciones. En condiciones
normales la temperatura ambiente es menor
que la temperatura de la incubadora.
El relevo est defectuoso. Sustituir relevo.
El empaque(s) de la puerta est defec- Cambiar empaque(s) de la puerta.
tuoso(s).
Alarma permanece encendida y la tem- La temperatura seleccionada ha sido Esperar a que la temperatura actual disminu-
peratura es mayor que la seleccionada. cambiada a un valor menor que el lmi- ya hasta la temperatura seleccionada.
te mximo definido para la alarma.
El control de temperatura est defectuoso. Sustituir control de temperatura.
El relevo de estado slido est defectuoso. Sustituir relevo.
La pantalla muestra continuamente El diodo de alarma centellea. Permitir que la incubadora se enfre hasta que
una seal de falla. Usualmente los LED se estabilice en la temperatura seleccionada
muestran las letras EEE. de operacin.
El diodo de alarma centellea. Permitir que la incubadora se enfre hasta que
se estabilice en la temperatura seleccionada
de operacin.
155
Incubadora de baja temperatura

El control de la incubadora no funciona. El interruptor est apagado. Encender el interruptor principal.
No hay alimentacin elctrica. Verificar circuito de alimentacin elctrica.
Lecturas de temperatura errticas (su- Hay acumulacin de escarcha alrede- Descongelar segn proceso definido por el
periores o inferiores a la especificada). dor del evaporador. fabricante.
Reducir la temperatura de enfriamiento.
Temperatura uniforme en la cmara de in- Hay acumulacin de escarcha alrede- Descongelar segn proceso definido por el
cubacin, pero superior a la seleccionada. dor del evaporador. fabricante.
El flujo interior de aire est bloqueado Reorganizar los contenedores para permitir el
por contenedores de muestras. flujo de aire.
Temperatura superior o inferior a la selec- El control de temperatura podra re- Calibrar segn procedimiento definido por el
cionada. querir calibracin. fabricante.
El control se desconecta estando en El voltaje de lnea es inadecuado. Verificar el voltaje de lnea, este no debe variar
operacin. ms del 5 % del voltaje especificado en la placa.
Acometida elctrica fuera de norma.
El compresor no funciona, aunque el El protector trmico del compresor est Verificar el voltaje de lnea, este no debe va-
LED de enfriamiento est encendido. abierto. riar ms del 5 % del voltaje especificado en la
placa.
Lecturas de temperatura superiores a El relevo de enfriamiento est defectuoso. Sustituir relevo de enfriamiento.
las seleccionadas y disparo de alarma
El compresor est defectuoso. Sustituir compresor. Cargar refrigerante y cali-
por encima de los 40 C.
brar. (Procedimiento especializado que requie-
re herramientas especiales).
DEFINICIONES BSICAS Par termoelctrico. Componente formado

por dos materiales diferentes unidos por los
Conduccin trmica. Forma de transferen- extremos que generan una corriente elctri-
cia de calor dentro de una sustancia, en la ca, cuando una de las uniones est a mayor
cual el calor fluye del punto de mayor tempe- temperatura. Este fenmeno se conoce como
ratura al punto de menor temperatura. efecto Seebeck en honor a su descubridor, el
fsico alemn Thomas Seebeck.
Conveccin trmica. Forma de transferen-
cia de calor a travs del movimiento de un Resistencia. Propiedad de las diferentes sus-
fluido. tancias o materiales, en virtud de la cual se
impide en mayor o menor grado el paso de la
DBO. Demanda biolgica de oxgeno. Indica- corriente elctrica. En los textos se identifica
dor de la contaminacin de un efluente. Se la resistencia con la letra [R]. Para un cuerpo
mide mediante el consumo de oxgeno di- de seccin uniforme; por ejemplo: un alam-
suelto por parte de microorganismos que bre, la resistencia [R] es una magnitud direc-
descomponen la materia orgnica presente tamente proporcional a la longitud [l] e in-
en el propio efluente. La DBO se mide como versamente proporcional al rea seccional
la masa en miligramos de oxgeno utilizado [a]. La resistencia se representa mediante la
por un litro de muestra del efluente, cuando ecuacin siguiente:
se incuba a 20 C durante 5 das.
LED. Diodo emisor de luz, en ingls light emi- l

R=kx
sion diode. Dispositivo electrnico muy utili- a
zado para presentar datos en pantallas.
156
Incubadoras 14
donde: de bajo costo que se utilizan en diversas aplica-

k = constante que depende de las unidades ciones, una de las ms comunes es el control de
empleadas temperatura.
l = longitud del conductor
a = rea seccional del conductor Termostato. Dispositivo que regula la tem-
peratura de un sistema. Por lo general, opera
La unidad de resistencia es el ohmio y se re- mediante la expansin de uno de sus compo-
presenta usualmente por la letra griega . nentes que mecnicamente acciona otro ele-
mento como, por ejemplo, un interruptor
Termistor. Componente electrnico cuya resis- que controla alguna funcin.
tencia vara con la temperatura. Son dispositivos
Bibliografa
Holman, J., Heat Transfer, New York, Mc Graw Hill Co., 1972.
Isotemp Standar Incubator 600 Series, Instruction manual, Fisher Scientific, Part N 95587,
Rev. K, 2003.
Isotemp Forced Air Incubator 600 Series, Instruction manual, Fisher Scientific, Part N
102886, Rev. D, 2003.
Isotemp Large Capacity Refrigerated Incubator, Model 304 & 304R, Fisher Scientific, Cat.
11-679-304 & 11-679-304R.
Low Temperature Incubator, Model 307A, Operating and Service Instructions, Fisher
Scientific, Part N 88732, 1993.
Millipore Laboratory Incubator, User Guide, Millipore Corporation, P36008, Rev. A., 2000.

157
158
PROPSITO DEL EQUIPO tecnolgico de estos equipos ha permitido fa-
bricar una enorme cantidad de modelos de
El microscopio es un instrumento de precisin aplicacin especializada en la industria y la
conformado por subsistemas pticos lentes, academia, y ha sido fundamental para el desa-
filtros, prismas, condensadores; mecnicos rrollo del conocimiento humano y para enten-
elementos para controlar la posicin de la der el funcionamiento de la naturaleza.
muestra en el espacio tridimensional X, Y, Z;
elctricos transformadores y sistemas de ilu-
minacin, y electrnicos cmaras, sistemas PRINCIPIOS DE OPERACIN
de televisin, etc., que interactan entre s
para amplificar y controlar la formacin de El microscopio ha sido construido utilizando
imgenes de objetos de tamao reducido, culas propiedades fsicas de los lentes al interac-
yas caractersticas no alcanzan a ser detecta- tuar con la luz. Un lente es un elemento p-
das por el ojo humano. tico, fabricado por lo general en vidrio, que
tiene la propiedad de refractar la luz. Es de
Por lo general, para observar las muestras se dimensiones calculadas con superficies gene-
requiere que estas hayan sido preparadas de ralmente parablicas o esfricas. Si los rayos
acuerdo con tcnicas que permiten resaltar los de luz que inciden sobre una de las superfi-
detalles a observar. El microscopio constituye cies del lente convergen al salir del mismo en
una ayuda diagnstica de primer orden en el un punto F, el lente se conoce como positivo
rea de salud, en especialidades como hema- o convergente; si el lente dispersa los rayos
tologa, bacteriologa, parasitologa y la for- luminosos que lo atraviesan, se denomina di-
macin de recursos humanos. (Existen micros- vergente o negativo. Los lentes positivos
copios con aditamentos especializados para (convergentes), como el que se presenta a
que los estudiantes efecten las observacio- continuacin, constituyen la base sobre la
nes, dirigidos por un profesor). El desarrollo cual se fabrican los microscopios.
Ilustracin 41: Lente positivo (convergente)
En la ilustracin es posible identificar el foco La ilustracin que se muestra a continuacin

[F] lugar donde se concentran los rayos lumi- resume los conceptos relacionados con el
nosos y la forma en que es refractada la luz funcionamiento de los lentes, los cuales se
al atravesar el lente. La distancia entre el len- aplican en el diseo y fabricacin de los ele-
te y el foco [D] se conoce universalmente co- mentos pticos del microscopio.
mo distancia focal.
160
Microscopio 15
Un objeto [h], ubicado a una distancia [a] del lente, produce una imagen [h], a una distancia [b],
donde [h>h].
Relaciones matemticas que gobiernan la construccin de lentes:
1/f = 1/a+1/b, donde:
f = distancia al foco. (Lugar donde se concentran las ondas luminosas); [a] = distancia del lente al
objeto y [b] = distancia del lente a la imagen. La magnificacin [M] de un lente se define como
[M] = h/h = b/a.
Ilustracin 42: Funcionamiento del lente
Explicacin. Cuando un objeto bien ilumina- La magnificacin [M] de un lente est defini-
do [h] se coloca a una distancia [a] a la iz- da por la relacin que existe entre el tamao
quierda de un lente convergente, los rayos de del objeto y el tamao de la imagen y se re-
luz que provienen del mismo son refractados presenta por la ecuacin:
al cruzarlo. El rayo que proviene de la parte
superior del objeto, que cruza el eje ptico
del lente en el punto focal [F], es refractado h b
M= =
por las dos superficies del mismo y sale en h a
una direccin paralela al eje ptico. El rayo
que parte paralelo al eje ptico y cruza el len-
te en la parte superior es refractado y cruza, donde:
a travs del punto focal [F] del lado de la ima- [h] y [h] corresponden respectivamente a las
gen hasta que se cruza con el primer rayo a dimensiones de la imagen y del objeto, y [a] y
una distancia [b] del lente, donde se forma la [b] a las distancias existentes entre el lente y el
imagen. En el caso presentado, la distancia punto donde se forma la imagen, y entre el
[a] es mayor que la distancia focal [f], por lo lente y el punto donde se encuentra el objeto.
que se forma una imagen real e invertida a
una distancia [b] a la derecha del lente. La
distancia focal [F] est relacionada a las dis-
tancias [a] y [b] por la ecuacin:
1 1 1
= +
F a b
161
DIAGRAMA DEL EQUIPO (ISOMTRICO Y CORTE)1
Ilustracin 43: Corte del microscopio
1
La numeracin corresponde a la descripcin de componentes que se presenta a continuacin.
162
Microscopio 15
Componentes
Los componentes principales de los subsistemas son los siguientes:
N SISTEMA N COMPONENTES
1 Cabeza binocular 1 Oculares
2 Tubo binocular
3 Cabeza binocular
2 Revlver portaobjetivos 4 Revlver portaobjetivos
5 Objetivos
3 Plataforma, platina o carro por- 6 Condensador
tamuestras y condensador
7 Diafragma de apertura
8 Portafiltros
9 Lente de campo amplio
21 Control de altura del condensador
23 Plataforma, platina o carro portamuestras
4 Iluminador 10 Cristal de cierre con portafiltros
11 Palanca de graduacin del campo luminoso del diafragma
12 Espejo cncavo
13 Lmpara incandescente
14 Portalmpara con anillo de ajuste
15 Lente colector
16 Espejo
5 Cuerpo del microscopio 17 Transformador interno
18 Restato de control
19 Cable de alimentacin
20 Control de ajuste macro/micromtrico
22 Brazo del microscopio
24 Base
*Ver ubicacin de componentes en la ilustracin 43.
SERVICIOS REQUERIDOS en la plataforma. Dichos microscopios son de

mxima utilidad en regiones alejadas de los
Normalmente, los microscopios utilizan ener- centros urbanos, donde no existen lneas de
ga elctrica de 110 V/60 Hz o 220 V/60 Hz. Al- interconexin elctricas y se utilizan en briga-
gunos disponen de una fuente regulada que das de salud. Otras clases de microscopios re-
permite variar la intensidad lumnica. Tam- quieren de preinstalaciones especiales. Un mi-
bin existen microscopios que, en lugar de croscopio de fluorescencia necesita una cabina
bombillos, disponen de un espejo, mediante oscura para poder efectuar las observaciones.
el cual se dirige la luz hacia la placa ubicada
163
DESCRIPCIN DE FALLAS POTENCIALES enfoque y se vuelve a ensamblar. Si los lentes
POR COMPONENTES del ocular presentan roturas debido a circuns-
tancias fuera de control golpes por cada, uso
indebido, debe cambiarse el ocular.
Cabeza binocular
Cabeza binocular
El estado de la cabeza binocular tiene un efec-

to directo sobre la calidad de la imagen del mi-
croscopio. Cualquier suciedad adherida a los
componentes pticos de la cabeza afecta la ca-
lidad de la imagen. Este componente puede
llegar a ensuciarse debido a situaciones deriva-
das del trabajo normal en el laboratorio como
las generadas en el cambio de oculares, la ins-
talacin de accesorios como cmaras fotogr-
Descripcin ficas o el simple olvido de colocar los tapones
1. Ocular cuando no est en uso el microscopio. Sus
2. Tubo binocular componentes ms importantes son prismas y
3. Cabeza binocular (prismas, lentes y espejos) espejos.
Prismas. Tienen una superficie reflectora

plateada que puede oxidarse con el tiempo
Oculares y perder capacidad reflectiva. Algunos pris-
mas solamente disponen de una capa de
El problema ms frecuente que afecta los ocu- pintura reflectora aplicada sobre la superfi-
lares es la presencia de polvo o suciedad, la cie de sus caras, a travs de la cual la luz en-
cual puede ser externa en las superficies exte- tra y sale.
riores o interna en las superficies interiores.
Dicha suciedad o polvo produce sombras que En el caso de daos en la superficie reflec-
interfieren con la muestra bajo anlisis, espe- tora, el prisma puede ser removido, limpia-
cialmente cuando se usan objetivos de alto po- do, replateado o repintado, instalado y ali-
der (40X-100X). Si la suciedad es externa, la re- neado en la cabeza binocular. Esta clase de
paracin se realiza limpiando las superficies de mantenimiento es altamente complejo y
los lentes y, si es interna, desensamblando el solo lo realizan laboratorios especializados
objetivo, limpiando las superficies internas, o empresas que brindan servicios de mante-
reensamblando y verificando el estado final. nimiento especializado. La remocin de
prismas, sin el entrenamiento y la herra-
Tambin los lentes de los oculares se ven afec- mienta adecuada, puede producir graves
tados por rayones, especialmente en aquellos desajustes en la calidad de la imagen e in-
que ya tienen largo tiempo de servicio. Los clusive la rotura del componente.
mismos se producen por descuidos en los pro-
cedimientos de limpieza y por uso de elemen-
tos inadecuados en dichos procesos. Los rayo- Espejos. Tienen sus superficies reflectoras
nes producen sombras en el campo visual del directamente expuestas y son susceptibles a
ocular, similares a los de una telaraa. Desa- la oxidacin. Si es necesario repararlos, se
fortunadamente, este tipo de defecto obliga a desmonta y se retira el espejo de la cabeza
cambiar el ocular. Algunos disponen de meca- binocular y se sustituye por uno nuevo, que
nismos de enfoque que a veces se traban. Pa- se corta, cementa y alinea directamente en
ra reparar se desensambla el ocular, se aplica el sitio de montaje.
solvente a la rosca, se limpia el mecanismo de
164
Microscopio 15
Iluminador Espejos
Los espejos se caracterizan por tener una su-

perficie reflectiva directa, aplicada sobre el
cuerpo del espejo. En microscopios de fabri-
cacin reciente, generalmente se encuentra
protegida por un recubrimiento. En equipos
antiguos, la capa reflectora no dispona de
tales recubrimientos, por lo que estaba ex-
puesta a la oxidacin.
Bombillo incandescente
El bombillo es un componente de consumo. Tie-

Descripcin
ne una determinada vida til y por esto se debe
10.Cristal de cierre con portafiltros
planificar su adquisicin de forma que siempre
11.Palanca de graduacin del campo luminoso
del diafragma
est disponible un repuesto en el laboratorio o
12.Espejo cncavo en la institucin donde se encuentra instalado el
13.Lmpara incandescente equipo. La instalacin del bombillo se realiza si-
14.Portalmpara con anillo de ajuste guiendo las instrucciones del fabricante. Algu-
15.Lente colector nos equipos, como los microscopios pticos de
16.Espejo fluorescencia, utilizan bombillos especiales
lmparas de mercurio o xenn que requieren
procedimientos de montaje y calibracin que,
Es un elemento fundamental para la utilizacin aunque sencillos, se deben efectuar segn las re-
del microscopio. Si el sistema de iluminacin no comendaciones de los fabricantes. El voltaje su-
funciona bien, el microscopio puede quedar fue- ministrado al microscopio debe corresponder al
ra de uso, dado que la intensidad luminosa y el especificado por el fabricante. De lo contrario,
contraste son fundamentales para la identifica- se corren riesgos innecesarios que afectan la ca-
cin y observacin de la muestra estudiada. Di- lidad de la iluminacin. Algunos microscopios
versos factores afectan el sistema de iluminacin; utilizan transformadores internos o externos y
los ms comunes son la suciedad o deterioro de sistemas de regulacin de voltaje.
los componentes pticos como espejos y lentes,
fallas en los voltajes de alimentacin o la utiliza-
cin de bombillos diferentes a los recomendados Plataforma, platina o carro
por los fabricantes. Las anomalas mencionadas portamuestras y condensador
producen pequeas sombras en el campo de vi-
sin, intensidad de luz insuficiente o falta de ho-
mogeneidad en la iluminacin.
Suciedad interna
Aparece debido a que los sistemas de iluminacin

no estn sellados para impedir el ingreso de polvo
y partculas. El polvo que ingresa al sistema produ- Componentes
ce difusin y disminucin en la cantidad de luz 6. Condensador
proyectada sobre la muestra. Las partculas gran- 7. Diafragma de apertura
des producen sombras que dificultan la observa- 8. Portafiltros
cin. Para corregir el problema, se desensambla el 9. Lente de campo amplio
21.Control de altura del condensador
iluminador, se limpian sus componentes, se en-
23.Platina, plataforma o carro portamuestras
samblan y alinean de nuevo sus componentes.
165
Condensador Revlver portaobjetivos
El condensador controla la forma en que la

luz se concentra o contrasta sobre la muestra
bajo observacin. Est compuesto por ele-
mentos pticos y mecnicos. Los elementos
pticos estn constituidos por lentes; los ele-
mentos mecnicos, por dispositivos que per-
miten controlar la posicin de los elementos
Componentes
pticos y la cantidad de luz que llega a la
muestra mediante un diafragma mecnico. 4. Revlver portaobjetivos
5. Objetivos
Normalmente, los componentes pticos son
afectados por la presencia de polvo. El mismo El mantenimiento del revlver portaobjetivos es
debe ser limpiado de forma similar a la utili- sencillo. Internamente dispone de un trinquete
zada con los sistemas de lentes. Se limpian que permite alinear cada uno de los objetivos
con un pincel fino de pelo de camello, con el con el tren ptico del microscopio. Simplemen-
cual se remueve el polvo que se haya deposi- te, se gira con suavidad hasta que el mecanismo
tado sobre sus superficies. Los componentes del trinquete ajusta la posicin correcta del si-
mecnicos requieren, para su ajuste, de herra- guiente objetivo. Cada fabricante define el n-
mientas de caractersticas especiales. Cada fa- mero de objetivos que pueden ser montados en
bricante dispone de sus propios diseos. Las el revlver; lo comn es encontrar revlveres
rutinas habitualmente estn enfocadas a pro- que aceptan desde tres hasta cinco objetivos. El
cedimientos de limpieza, ajuste y lubricacin. mantenimiento busca mantener limpio, lubrica-
do y bien ajustado el mecanismo rotatorio.
Platina o carro portamuestras Los objetivos reciben rutinas de limpieza de sus

superficies pticas externas. Los de inmersin re-
La platina o carro portamuestras est consti- quieren que, cada vez que se termine de utilizar
tuido por una serie de componentes que in- el objetivo, se limpie el aceite para evitar que,
teractan entre s y que tienen como prop- por capilaridad, este invada la estructura ptica
sito controlar la posicin de la muestra bajo interna del objetivo.
anlisis. El carro dispone de movimientos de
translacin en sentidos X/Y, que el operador
controla a travs de botones macro/microm- Cuerpo del microscopio
tricos independientes; adems, el carro dispo-
ne de dispositivos de tensin que permiten
graduar la suavidad de los movimientos y
unas guas tipo "cola de milano" que normal-
mente se lubrican. En la parte superior estn
instaladas las platinas o uas de sujecin de
las lminas portamuestras. El mantenimiento
busca mantener limpios, lubricados y bien
ajustados estos mecanismos.
Componentes
17. Transformador interno
18. Restato de control
19. Cable de alimentacin
20. Control ajuste macro/micromtrico
22. Brazo del microscopio
166
Microscopio 15
El cuerpo del microscopio est diseado para Instalacin y almacenamiento

recibir y soportar los componentes ya descritos
cabeza binocular, carro portamuestras, con- 1. Asegurarse que el ambiente o rea en que
densador y revlver portaobjetivos y algunos se instale el microscopio est protegido o
otros como el transformador y dems elemen- protegida del polvo y la humedad. El am-
tos elctricos/electrnicos que forman parte biente ideal debe disponer de un sistema
del sistema de iluminacin del microscopio. de aire acondicionado que garantice aire
libre de polvo o partculas, control de hu-
El mantenimiento del cuerpo del microscopio medad y control de temperatura de ma-
consiste bsicamente en mantener limpia la su- nera permanente.
perficie, removiendo la grasa, suciedad o elemen-
tos que hayan podido afectar su presentacin y 2. Verificar que el ambiente o rea en que se
estado. Es necesario tener especial cuidado con instale el microscopio disponga de seguri-
sustancias qumicas que pueden ser corrosivas y dad: puerta con cerradura para evitar su
los tintes que se utilizan en los laboratorios para sustraccin no autorizada.
teir las placas portamuestra.
3. Confirmar que el lugar seleccionado para
ubicar el microscopio est alejado de lu-
MANTENIMIENTO GENERAL gares como pocetas de agua o donde se
DEL MICROSCOPIO trabajen sustancias qumicas, para evitar
que el equipo resulte afectado por un de-
Ante todo es necesario enfatizar que el mi- rrame o salpicadura. Tambin deben evi-
croscopio es un equipo de alta precisin. La tarse sitios que tengan luz solar directa.
integridad de sus componentes pticos, me-
cnicos y elctricos debe ser observada, a fin 4. Verificar que el lugar seleccionado cuente
de conservarlo en las mejores condiciones. con una toma elctrica en buen estado, cu-
Cada elemento del microscopio ha sido de- yo voltaje est ajustado en magnitud y fre-
sarrollado utilizando las ms avanzadas tc- cuencia con los cdigos y normas elctricas,
nicas de fabricacin. El ensamble de sus y que resulte compatible con el del sistema
componentes y su ajuste se realiza en fbri- de iluminacin del microscopio. En caso de
ca, utilizando equipos especializados que, que el microscopio utilice espejo, debe es-
mediante tcnicas de medicin avanzadas, tar ubicado cerca de una ventana que per-
controlan las tolerancias requeridas entre mita una buena iluminacin, pero sin estar
los diversos componentes del equipo. La lim- directamente expuesto a la luz solar.
pieza del ambiente en el que se utiliza, su
instalacin y uso cuidadoso resultan funda- 5. Instalar el microscopio sobre una superfi-
mentales para lograr una larga vida til. cie nivelada de estructura rgida, bajo la
cual exista espacio suficiente para que el
La humedad, el polvo y las malas condicio- usuario microscopista coloque sus pier-
nes de alimentacin elctrica, el mal uso o nas y como consecuencia pueda acercar el
instalacin inadecuada resultan contrapro- cuerpo hacia el microscopio y la cabeza
ducentes para su correcta conservacin. El hacia los oculares, sin forzar la columna
mantenimiento del microscopio implica mu- vertebral: cuello y espalda.
cho cuidado, paciencia y dedicacin. Debe
ser efectuado nicamente por personal que 6. Para facilitar la colocacin del microsco-
haya recibido capacitacin en el equipo y pista, proporcionar una silla de altura va-
que disponga de la herramienta especializa- riable, que le brinde un buen soporte
da que se requiere para intervenir. Se pre- lumbar; si es del caso, tambin proveer un
sentan a continuacin las recomendaciones apoyo para los pies, situado al frente del
generales para la instalacin y el manteni- sitio de trabajo, no en la silla. El propsito
miento necesarios para mantener un micros- es lograr que la columna vertebral est lo
copio en buen estado de funcionamiento y ms recta posible y se reduzca la flexin
que estn al alcance del microscopista. de los hombros y el cuello.
167
7. Evitar que en sitios cercanos al lugar de 3. Papel para limpieza de lentes. Se consigue
instalacin del microcopio haya equipos normalmente en las pticas. Si no es posi-
que produzcan vibraciones como centrfu- ble conseguir este material, se puede susti-
gas o refrigeradores. tuir con papel absorbente suave o con al-
godn tipo medicinal. Tambin puede uti-
8. Procurar no mover el microscopio de su si- lizarse un trozo de seda suave.
tio de instalacin y con mayor razn si el
mismo se utiliza intensamente cada da. 4. Una pieza de gamuza muy fina. Se puede
conseguir en peleteras.
9. Cubrir el microscopio con un protector de
polvo si no se usa por perodos de tiempo 5. Una pera de caucho para soplar aire. Se
largos; tomar precauciones para que no lo puede fabricar en el laboratorio un dispo-
afecten excesos de humedad. Mientras ms sitivo con este propsito, acoplando una
seco el ambiente, menos probabilidad de pipeta tipo Pasteur, con la pera de caucho.
que se presente crecimiento de hongos. El
protector puede ser de plstico o de tela si- 6. Una cubierta plstica. Se utiliza para pro-
milar en calidad a la utilizada en la fabrica- teger el microscopio del ambiente externo
cin de pauelos, que no suelte pelusa. cuando no est en uso. Tambin podra
utilizarse una bolsa de tela de textura simi-
10. En zonas de humedad alta, guardar el milar a la de los pauelos.
croscopio durante la noche, en una cabina
provista de un bombillo de mximo 40 W. 7. Un pincel suave de pelo de camello o un
Esto ayuda a mantener seco el entorno y re- pincel fino para pintura. Lo importante es
duce la probabilidad de que se presente for- que el pelo del pincel sea natural, de longi-
macin de hongos. Si se utiliza esta alterna- tud uniforme, textura muy suave, est seco
tiva, verificar que disponga de orificios que y libre de grasa. En los almacenes que dis-
permitan la ventilacin del interior. tribuyen artculos de fotografa, es posible
conseguir este accesorio. Tambin es posi-
ble encontrar un equivalente en tiendas es-
Procedimientos de limpieza pecializadas en suministro de cosmticos.
La limpieza del microscopio es una de las ru- 8. Un paquete 250 g de material desecante
tinas ms importantes y debe considerarse un (silica gel). Este material se utiliza para
procedimiento rutinario. Para realizar la ruti- mantener controlada la humedad en la ca-
na de limpieza se requiere lo siguiente: ja de almacenamiento del microscopio, si
la misma es hermtica. Este material cam-
Materiales: bia de color cuando se encuentra saturado
de humedad, aspecto que permite detec-
1. Una pieza de tela limpia, de textura simi- tar si requiere ser sustituido o renovado.
lar a la de los pauelos. Cuando est en buen estado, por lo gene-
ral, es de color azul; cuando se encuentra
2. Una botella de lquido para limpieza de len- saturado de humedad, es de color rosado.
tes. Se consigue en las pticas. Normalmente
no afecta los recubrimientos de los lentes y 9. Bombillos y fusibles de repuesto. De la clase
tampoco afecta los pegantes o cementos utili- instalada por el fabricante o un equivalente
zados para el montaje de los mismos. Entre los de las mismas caractersticas del original.
lquidos de limpieza ms utilizados se encuen-
tran el etil ter, el xileno y la gasolina blanca.
Precaucin: Algunos fabricantes recomien- Nota: Todos los materiales requeridos

dan no utilizar alcoholes o acetonas, debido para efectuar la limpieza deben mante-
a que pueden afectar disolver los cemen- nerse limpios y guardados en recipientes
tos o pegantes utilizados para fijar los lentes. que los protejan del entorno externo.
168
Microscopio 15
Limpieza de los elementos pticos necesita abrirlos para efectuar la limpieza.

Nunca debe abrirse un ocular u objetivo, si
En un microscopio se encuentran dos tipos de no se cuenta con un ambiente limpio en el
elementos pticos: los externos, que estn en cual realizar el procedimiento de limpieza.
contacto con el ambiente que rodea el equipo, Las superficies pticas interiores se limpian
y los internos, que se encuentran dentro del con el pincel de pelo de camello y con la
cuerpo del microscopio las partes internas de pera para soplar aire, siguiendo un proce-
los objetivos, oculares, espejos, prismas, con- dimiento anlogo al anteriormente expli-
densador, iluminador, etc. y que no tienen un cado; se recomienda no desmontar por
contacto directo con el ambiente que rodea el ningn motivo los elementos pticos para
equipo. Los procedimientos de limpieza, aun- no alterar las tolerancias de ensamble del
que similares, difieren en cuanto al cuidado y fabricante. Si se desmontan, sera necesa-
precauciones que deben preverse. rio alinear nuevamente los elementos y es-
to solo es factible siguiendo instrucciones
1. Los elementos pticos externos de los precisas del fabricante. La limpieza de los
oculares, los objetivos, el condensador y objetivos se limitar a conservar limpios
el iluminador se limpian frotando suave- los lentes frontal y posterior.
mente la superficie de los mismos, con el
pincel de pelo de camello. Esto remueve 3. Si se detectan residuos de aceite de inmer-
las partculas de polvo que hayan podido sin en la superficie de los lentes, este de-
encontrarse depositadas sobre la super- be removerse utilizando papel especial
ficie de los mismos. A continuacin, se para limpieza de lentes o algodn tipo
utiliza la pera para soplar chorros de ai- medicinal. A continuacin, la superficie
re sobre la superficie de los lentes y ase- del lente debe limpiarse con una solucin
gurar que los mismos quedan libres de compuesta de 80 % ter petroleum y 20 %
polvo. Si el polvo se encuentra adherido 2-Propanol2.
a la superficie ptica, se utiliza la pieza
de tela limpia y de forma muy suave se
efecta un pequeo movimiento circu- Limpieza del cuerpo del microscopio
lar, sin ejercer mayor presin sobre la su-
perficie del lente. Con la pera se sopla 1. El cuerpo del microscopio puede ser lim-
nuevamente la superficie del lente. Esto piado con una solucin jabonosa que re-
retira las partculas adheridas. Podra sulta til para remover la suciedad exter-
tambin utilizarse una pieza de gamuza na. La solucin jabonosa corta la grasa y el
fina. En este caso se instala la pieza de aceite. La misma puede aplicarse con un
gamuza en la punta de un pequeo cilin- cepillo pequeo. Despus de que la grasa
dro de dimetro ligeramente inferior al y la suciedad hayan sido removidas, debe
del lente y, sin ejercer mayor presin, se limpiarse el cuerpo del microscopio con
efecta una rotacin de la misma sobre una solucin 50/50 de agua destilada y
la superficie del lente. Finalmente, con etanol al 95 %.
la pera, se sopla aire sobre la superficie
del lente. Esto basta para limpiar las su-
perficies externas. La pieza de gamuza Nota: Esta solucin no es adecuada para
puede humedecerse con agua destilada. limpiar las superficies pticas.
2. En condiciones adecuadas de instalacin,

las superficies interiores de los elementos
pticos no deben resultar afectadas por la 2. Las partes mecnicas, integradas por los
presencia de polvo o partculas. Si por al- mecanismos de ajuste macro/micromtrico
guna circunstancia aparecen partculas so- ajuste grueso y fino, el mecanismo de
bre la superficie interior de los lentes, se ajuste del condensador y los mecanismos
2
Manual of Techniques for a Health Laboratory, World Health Organization, 53-66, Geneva, 2nd. Edition, 2003.
169
del carro portamuestras o plataforma, delos barnices de recubrimiento de los ele-
ben ser lubricados de forma peridica con mentos pticos podran deteriorarse. Lim-
aceite fino de mquina, para permitir su piar estas superficies con un pincel de pe-
desplazamiento suave. lo de camello o una pera para soplar aire.
5. Evitar dejar el microscopio sin los oculares.

Mantenimiento del microscopio Colocar los tapones si requiere retirar los
oculares para evitar el ingreso de polvo o
Entre las rutinas ms importantes para mante- partculas a la cabeza binocular.
ner un microscopio en condiciones adecuadas
de operacin, se encuentran las siguientes: 6. No dejar el microscopio guardado en una
caja, en ambientes hmedos.
1. Verificar el ajuste de la plataforma mec-
nica. La misma debe desplazarse suave- 7. Evitar presionar los objetivos contra las
mente, en todas las direcciones (X-Y) y de- "Placas", puesto que se podran producir
be mantener la posicin que selecciona o daos en la laminilla o el lente frontal del
define el microscopista. objetivo. Enfocar el microscopio de forma
lenta y cuidadosa.
2. Comprobar el ajuste del mecanismo de en-
foque. El enfoque que selecciona el micros- 8. Mantener limpia la plataforma o carro
copista debe mantenerse. No debe variar la portamuestras.
altura asignada por el microscopista.
9. No desensamblar los componentes pti-
3. Verificar el funcionamiento del diafragma. cos, pues se pueden producir desalinea-
mientos. Las superficies pticas deben lim-
4. Limpiar todos los componentes mecnicos. piarse en primera instancia con un pincel
de pelo de camello; a continuacin, con
5. Lubricar el microscopio de acuerdo con las gamuza o papel especial para lentes.
recomendaciones del fabricante.
10. Utilizar las dos manos para levantar el mi-
6. Confirmar el ajuste de la ua fijalminas. croscopio. Con una mano sostenerlo por
el brazo, y con la otra sostener su base.
7. Verificar el alineamiento ptico.
11. Evitar tocar con los dedos la superficie de la
bombilla cuando se la cambia. Las huellas
Precauciones digitales disminuyen la intensidad lumnica.
1. Evitar limpiar los componentes pticos 12. Verificar que el voltaje de alimentacin es
con etanol, debido a que estos lquidos el correcto para prolongar la vida til de
afectan los elementos pticos. Tampoco la bombilla; siempre que sea posible, utili-
limpiar la base o la plataforma con xileno zar la menor intensidad luminosa que re-
o acetona. sulte til para realizar las observaciones.
2. No utilizar papel ordinario para limpiar los len- 13. Conectar el microscopio a travs de un es-
tes, dado que en sus componentes constituti- tabilizador de voltaje, si el voltaje de ali-
vos podra haber elementos de alta dureza mentacin no es estable.
que podran rayar la superficie de los lentes.
3. No tocar los lentes con los dedos, para evi- Cuidados especiales en climas clidos
tar las huellas digitales.
Tanto en climas clidos como en secos el prin-
4. No limpiar el interior de los lentes de ocu- cipal problema que afecta al microscopio es el
lares u objetivos con telas o papel, ya que polvo, ya que afecta las partes mecnicas y a
170
Microscopio 15
los sistemas pticos. Dicho problema se puede desecante est en buenas condiciones;
controlar mediante los siguientes procesos: caso contrario, sustituirlo o regenerarlo.
1. Proteger siempre el microscopio con una 3. Limpiar el microscopio de forma peridica.

cubierta plstica, cuando no est en uso. Usar guantes de ltex si tiene que tocar los
lentes. Esto evita que las huellas digitales
2. Limpiar el microscopio con aire, utilizando una de adhieran a la superficie y disminuye los
pera de caucho, al finalizar el turno laboral. riesgos o probabilidad de crecimiento de
hongos donde quedaron impresas las hue-
3. Limpiar los lentes con un pincel de pelo de llas digitales.
camello o con un cepillo de aire. Si el pol-
vo permanece unido a la superficie ptica, 4. Si ninguna de las alternativas menciona-
intentar removerlo con papel especial pa- das es factible, ubicar el microscopio en un
ra lentes, pero frotando la superficie de lugar que tenga buena circulacin de aire.
forma muy suave, para evitar rayones. Cuando el microscopio no est en uso, po-
dra colocarse bajo la luz solar de forma di-
recta, por perodos cortos de tiempo. Esto
Cuidados especiales para climas reduce la humedad y el riesgo de que crez-
hmedos can hongos en las superficies del equipo.
En climas hmedos, por lo general calurosos, 5. El aire acondicionado control de tempe-

los microscopios suelen ser afectados por ratura y humedad evita significativamen-
hongos, que se forman principalmente sobre te el crecimiento de los hongos en los mi-
la superficie de los lentes, en las ranuras de croscopios. Sin embargo, esta no es una
los tornillos y bajo la pintura protectora. En opcin que disponga una gran cantidad
caso de no protegerse el equipo de forma de laboratorios. Si el servicio de aire acon-
adecuada, podra quedar inservible en muy dicionado no es continuo en el rea donde
corto plazo. Los cuidados que se detallan a se encuentra instalado el microscopio, se
continuacin ayudan a prevenir la formacin deben tomar precauciones para controlar
de hongos: la humedad.
1. Almacenar el microscopio durante la no-

che en una caja dotada de un bombillo Remocin de la pelcula de hongos
elctrico que no exceda los 40 W de poten-
cia. El bombillo debe estar instalado en la 1. Revisar y limpiar con frecuencia el micros-
parte superior de la caja, cerca de la cabe- copio, utilizando los procedimientos men-
za binocular y debe estar encendido du- cionados en el presente captulo. Contro-
rante toda la noche. La caja debe disponer lar las condiciones de humedad donde se
de orificios para permitir la circulacin del usa y almacena el microscopio. Si se man-
aire. Se debe evitar que la temperatura del tiene una ventilacin adecuada, disminuye
interior de la caja no exceda los 50 C, pala posibilidad de que se inicie la formacin
ra que no se afecten las propiedades de los de hongos en el microscopio.
lubricantes del microscopio.
2. Si se detecta un crecimiento de hongos, uti-
2. Si no es posible utilizar la caja con el bom- lizar una mota de algodn humedecida en
billo elctrico, como alternativa se puede una solucin limpiadora de hongos que
utilizar un material desecante como silica normalmente es ter o xilol. Frotar suave-
gel o arroz. Cuando use el agente desecan- mente siguiendo un movimiento circular, a
te, verificar que el microscopio est guar- lo largo de toda la superficie del lente.
dado en una caja o protegido con una cu- Tambin puede realizar un movimiento os-
bierta protectora que puede ser fabricada cilatorio, hacia adelante y hacia atrs o iz-
en tela de caractersticas similares a la de quierda-derecha-izquierda, ejerciendo so-
los pauelos. Verificar que el agente bre la superficie del lente una presin muy
171
moderada. Si es necesario, repetir el proce- para control de humedad, colocar all el mi-
dimiento con una nueva mota de algodn. croscopio, encender la lmpara y cerrar la
puerta de la misma.
3. Cuando se termine la remocin de la pel-
cula de hongos, limpiar con una mota de
algodn limpio. Frecuencia: Cada mes
Nota: Los hongos solo pueden ser remo- 1. Remover las partculas de polvo que pueda
vidos cuando su crecimiento se limita a la tener el cuerpo del microscopio. Usar una pie-
superficie de los lentes. Si dicho creci- za de tela humedecida con agua destilada.
miento no se atiende a tiempo, el hongo
puede penetrar el cuerpo del lente. Si es- 2. Retirar las partculas de polvo de los ocula-
te es el caso, el lente se pierde, all ya es res, objetivos y del condensador. Utilizar la
imposible removerlo. pera para soplar aire. A continuacin, lim-
piar la superficie de los lentes con solucin
limpiadora de lentes. No aplicar directa-
Atencin: Si el microscopio se utiliza con mente esta solucin a los lentes, sino en
elementos potencialmente contaminados, papel para limpiar lentes y luego frotar
debe ser limpiado con mayor frecuencia. suavemente la superficie de los mismos
con el papel mencionado.
3. Retirar el mecanismo de sujecin de las

Cuidado del microscopio placas portamuestras; limpiar cuidadosa-
mente y reinstalar.
Frecuencia: Diaria (despus del uso)
1. Limpiar el aceite de inmersin del objetivo Frecuencia: Cada seis meses

100X. Usar papel para limpieza de lentes o
en su defecto algodn tipo medicinal. Como complemento a las rutinas mensuales de
mantenimiento se recomienda lo siguiente:
2. Limpiar el carro portamuestras.
1. Efectuar una inspeccin visual general del
3. Limpiar el condensador. microscopio. Verificar que cada componen-
te se encuentre en buen estado, est lim-
4. Colocar el restato de control de intensi- pio y est bien ajustado mecnicamente.
dad luminosa en la posicin mnima y lue-
go apagar completamente el sistema de 2. Verificar que en el lugar de instalacin se
iluminacin. conserven las condiciones de buena venti-
lacin, control de humedad y temperatura.
5. Cubrir el microscopio con una funda protec-
tora plstica o de tela. Asegurar que que- 3. Comprobar la calidad del sistema elctrico
da ubicado en un lugar bien ventilado, en que alimenta el microscopio. Verificar la
el cual estn controlados la humedad y la integridad de los conectores, los fusibles y
temperatura. Si se dispone de caja de alma- la lmpara incandescente.
cenamiento ventilada dotada con bombillo
172
Microscopio 15
Tabla para la solucin de problemas
Sistema de iluminacin

El sistema de iluminacin no enciende. El cable de alimentacin elctrica est Conectar el cable de alimentacin elctrica.
desconectado.
El fusible de proteccin est quemado. Reemplazar el fusible de proteccin.
El bombillo est quemado. Reemplazar el bombillo de iluminacin. Ase-
gurar que el mismo quede bien alineado.
El interruptor de encendido est defectuoso. Reemplazar el interruptor de encendido.
El sistema de iluminacin no produce El sistema elctrico presenta fallas de Revisar y reparar el sistema elctrico. Conec-
luz uniforme. voltaje. tar el microscopio mediante un estabilizador
de voltaje.
El conector del microscopio a la toma Conectar bien el enchufe a la toma. Si alguno
de pared est flojo. de los elementos est defectuoso, sustituirlo.
El bombillo est mal instalado y no Reinstalar el bombillo.
hace buen contacto.
El bombillo presenta metalizado o pun- Sustituir el bombillo de iluminacin.
tos negros sobre su superficie.
La muestra no es iluminada de forma La fuente de luz no est centrada. Rectificar el alineamiento del condensador.
uniforme.
El objetivo no se encuentra bien centrado. Girar lentamente el revlver portaobjetivos
hasta que suene el trinquete de ajuste.
La muestra es iluminada defectuosa- El iris del diafragma est casi cerrado. Abrir el iris del diafragma hasta que la ilumi-
mente. nacin sea adecuada.
El condensador est muy alejado (muy Acercar el condensador.
bajo).
Los lentes del condensador presentan Limpiar el condensador. Retirar el polvo con
polvo o crecimiento de hongos. pincel. Remover el hongo con solucin para
limpieza de lentes.
Hay excesivo contraste en la imagen. El iris del diafragma del condenador Abrir un poco el iris del diafragma.
est casi cerrado.
La imagen es poco clara y con brillo. El iris del diafragma del condensador Cerrar un poco el iris del diafragma.
est muy abierto.
Sistema mecnico

La plataforma portamuestras no man- La tensin de ajuste de la plataforma Ajustar el mecanismo de tensin de la plata-
tiene su posicin y la imagen se desen- portamuestras est floja. forma.
foca continuamente.
La plataforma portamuestras no puede La plataforma mecnica est bloquea- Aflojar el mecanismo de bloqueo de la plata-
ser levantada a su lmite superior. da muy bajo. forma. Ajustar a la altura deseada. Reajustar
el mecanismo de bloqueo.
173
Sistema ptico

Mala calidad de la imagen en el objeti- Los lentes presentan hongos. Remover los hongos utilizando una solucin
vo 40X. limpiadora. Seguir las instrucciones del fabri-
cante del dispositivo.
Lentes daados. Revisar el objetivo. Verificar si los lentes pre-
sentan rayones, picaduras o muescas. Reem-
plazar el objetivo.
Lentes accidentalmente untados con Remover cuidadosamente el aceite con papel
aceite de inmersin. para limpieza de lentes.
El objetivo de inmersin no brinda im- El objetivo est siendo usado sin aceite Colocar aceite de inmersin sobre la placa.
genes claras. de inmersin.
El aceite de inmersin es de bajo ndice Utilizar aceite de buena calidad.
de refraccin.
El aceite de inmersin ha invadido el Limpiar los lentes con papel especial para lim-
interior del objetivo. piar lentes. Si la limpieza externa no es solu-
cin, enviar el objetivo a un laboratorio espe-
cializado para su reparacin. (Desmonte de
lentes, limpieza, cambio de sellos, cementa-
cin, realineacin y ensamble).
Polvo o suciedad visible en el campo de Polvo sobre el lente colector de la fuen- Retirar las partculas de polvo con un pincel
visin. te de iluminacin. de pelo de camello.
Polvo sobre el lente superior del con- Retirar las partculas de polvo con un pincel
densador. de pelo de camello.
Polvo en el ocular. Retirar las partculas de polvo con un pincel
de pelo de camello.
DEFINICIONES BSICAS apertura numrica permiten que un mayor

nmero de rayos oblicuos de luz pase por los
Acetona. Lquido incoloro, oloroso, miscible lentes frontales del objetivo, produciendo
en agua de excelente capacidad, disolvente una resolucin ms alta de la imagen. Mate-
de gran nmero de sustancias orgnicas. Pun- mticamente se expresa as:
to de ebullicin: 56 C. Frmula qumica:
NA = nSen()
CH3 - CO - CH3
donde:
Apertura numrica. Medida de la habilidad NA = apertura numrica
que tiene un objetivo para concentrar la luz y n = ndice de refraccin (n = 1 aire; n = 1,52
distinguir pequeos detalles de un objeto. aceite de inmersin)
Normalmente, el valor de la apertura num- = ngulo de apertura. A mayor ngulo, ma-
rica se encuentra grabado en el costado del yor apertura numrica, mayor aumento.
cuerpo del objetivo. Mayores valores de
174
Microscopio 15
Apertura numrica Expresin matemtica Su densidad es 0,806 g/cm3. Su punto de ebu-

llicin es de 78,3 C. Frmula qumica:
NA = n x Sen
0,27= 1 x Sen(16)
CH3 - CH2OH
Magnificacin
aprox. 10X
ter. Sustancia lquida derivada de los alco-
holes por eliminacin de una molcula de
agua, entre dos molculas de alcohol. Es un
disolvente excelente, poco soluble en agua,
muy voltil e inflamable. Punto de ebullicin:
NA = n x Sen 35 C. Frmula qumica:
0,42= 1 x Sen(25)
Magnificacin CH3 - CH2 - O - CH2 - CH3
aprox. 20X
Foco. Lugar donde, como resultado de la re-
fraccin de la luz, se concentran los rayos que
atraviesan un lente. Si los rayos de luz conver-
gen en un punto, el lente es positivo y el fo-
co real; si los rayos de luz divergen, el lente es
NA = n x Sen
negativo y el foco virtual.
0,68=1 x Sen(43)
Magnificacin
aprox. 40X ndice de refraccin. Valor que se calcula
comparando la velocidad de la luz en el va-
co, con la velocidad de la luz en un segundo
medio de mayor densidad. Se representa nor-
malmente por la letra [n] o [n], en la litera-
tura tcnica o en las ecuaciones matemticas.
Ocular. Conjunto de lentes diseado para

Campo de visin. Dimetro del campo de proyectar una imagen real o virtual, depen-
visin en milmetros, medido en el plano in- diendo de las relaciones que existan con
termedio de la imagen. El dimetro del cam- otros conjuntos de lentes del microscopio.
po en un microscopio ptico se expresa por el Como su nombre lo indica, a travs del mis-
nmero del campo de visin, o sencillamente mo, el microscopista observa la imagen.
como nmero de campo.
Profundidad de campo. Grosor del espci-
Diafragma. Dispositivo que controla el flujo men o muestra que es razonablemente claro
de luz a travs del microscopio. Hay diafrag- a un determinado nivel de enfoque.
mas de dos tipos: el diafragma de apertura
que ajusta el ngulo de apertura en el mi- Profundidad de foco. Rango sobre el cual
croscopio, y el diafragma de campo que regu- el plano de la imagen puede ser movido,
la el tamao de la imagen del instrumento. El manteniendo una claridad estable.
propsito de los diafragmas en los microsco-
pios pticos es prevenir que lleguen, a los Rango til de magnificacin. [RUM] de
planos de formacin de imgenes, rayos de una combinacin objetivo/ocular se define
luz con aberraciones severas y asegurar una por la apertura numrica del sistema. Para
adecuada distribucin de luz, tanto en la percibir los detalles de una imagen, se re-
muestra como en el espacio de la imagen. quiere de una magnificacin mnima, la
cual tradicionalmente est comprendida
Etanol. Lquido incoloro de olor agradable y entre 500 y 1 000 veces la apertura num-
sabor quemante. Se le conoce tambin como rica [AN] del objetivo. {Aceptables desde
alcohol etlico. Disolvente de amplio uso in- RUM= (500) x [AN] hasta (1 000) x [AN]}.
dustrial. Se usa en la industria farmacutica.
175
Resolucin. Habilidad para distinguir los de- Xileno. Ismero del etilbenceno que se ob-
talles finos de una placa o muestra particular. tiene del alquitrn de hulla. Se emplea como
Entre los factores que ms influyen para lograr disolvente y tambin en la preparacin de co-
una buena resolucin, se encuentran la aper- lorantes y lacas. Punto de ebullicin: 138 C /
tura numrica, la clase de muestra, la ilumina- 144 C. Frmula qumica:
cin, la correccin de aberraciones y el tipo de
CH3
contraste utilizado. Es una de las caractersti- C6H4
cas ms importantes de un microscopio. CH3
Revlver portaobjetivos. Dispositivo mec- Propanol. Se conoce tambin como alcohol

nico diseado para montar los objetivos y isoproplico. Se prepara por hidratacin del
permitir su intercambio rpido, a travs de propeno. Se emplea como disolvente y en la
un movimiento rotatorio. Su capacidad de- preparacin de acetona. Punto de ebullicin:
pende del tipo de microscopio. En general va- 83 C. Frmula qumica:
ra entre tres y cinco objetivos.
CH3 - CHOH - CH3
Bibliografa
Devore, G., Muoz, E., Qumica Orgnica, Mxico D. F., Publicaciones Cultural S.A., 1969.
Manual of Basic Techniques for a Health Laboratory, World Health Organization, Geneve,
2nd. Edition, 2003.
Microscopio Lavobal 2, Instrucciones para el uso, Boletn N 30-G060-4, Carl Zeiss Jena, DDR.
The Microscope, a Practical Guide, New Delhi, India, World Health Organization, Regional
Office for South-East Asia, 1999.

Venegas, J., Texto de Fsica. Fono-foto y electrologa, Cali, Colombia, Editorial Norma.
Nikon: (http://www.microscopyu.com/articles/formulas/formulasfieldofview.html)
Definiciones y procesos:
(http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/methods/microscopy/microscopy.html)
Historia, Galileo:
(http://www.twingroves.district96.k12.il.us/Renaissance/University/Inventions/Microscope)
176
CAPTULO 16
Pipetas
15-166 Pipetas
PIPETAS
Las pipetas son dispositivos que se utilizan pa-

ra medir o transvasar pequeos volmenes de
lquido de un recipiente a otro, con gran exac-
titud; se caracterizan por carecer de un dep-
sito. Las pipetas tienen gran diversidad de mo-
delos. Inicialmente, se fabricaron en vidrio; en
la actualidad, existe una amplia gama de op-
ciones. Se destacan las pipetas de volumen fijo
y las de volumen variable, las cuales en gene-
ral disponen de controles mecnicos. Tambin
se han introducido recientemente en el merca-
do pipetas que disponen de controles de tipo
electrnico. En el presente captulo se tratan
los aspectos referentes al mantenimiento y ca-
libracin1 de las pipetas mecnicas, las cuales
se conocen como pipetas tipo Gilson. Esquema pipeta monocanal
FOTOGRAFA Y ESQUEMA DE PIPETAS

PROPSITO DE LA PIPETA
Las pipetas son dispositivos de amplia utiliza-

cin en los laboratorios clnicos y de investi-
gacin. Se utilizan para suministrar cantida-
des muy exactas de fluidos.
PRINCIPIOS DE OPERACIN DE LA PIPETA
La pipeta mecnica o de pistn funciona ge-

neralmente transmitiendo la fuerza que un
operador, de forma manual, ejerce sobre un
mbolo que se encuentra unido a un pistn
mediante un eje que lo desplaza a lo largo de
un cilindro de longitud fija, forzando un volu-
men predefinido de lquido fuera de la pipeta.
Fotografa pipeta multicanal
1
La calibracin debe ser realizada exclusivamente por personal capacitado, siguiendo estndares internacionales como
el BS ES ISO 8655-6:2002. Los instrumentos de trabajo deben estar debidamente calibrados por instituciones nacionales
o internacionales, responsables de verificar el cumplimiento de los estndares internacionales de medicin.
177
Las pipetas a pistn en general son de dos ti- Cada uno de los tipos mencionados pipetas
pos: las de volumen fijo que dispensan un vo- de volumen fijo y pipetas de volumen varia-
lumen predeterminado de lquido, el cual es ble puede ser subdividido en dos subtipos: A
conocido como volumen nominal [Vn], y las de y B. Las pipetas del subtipo A se denominan
volumen variable, las cuales permiten ajustar pipetas de desplazamiento por aire, debido a
el volumen a ser dispensado dentro de un que existe un volumen de aire entre la cabe-
rango determinado en las especificaciones de za del pistn y el lquido en el cilindro. (Ver
la pipeta. La variacin en el volumen se logra pipeta N 1). A las pipetas del subtipo B se les
modificando la longitud de la carrera del pis- denomina pipetas de desplazamiento positi-
tn dentro del mbolo. En estas, el volumen vo o de desplazamiento directo, debido a
nominal es el lmite superior del rango de vo- que el pistn se encuentra en contacto direc-
lumen de la pipeta, de acuerdo con las especi- to con el lquido. (Ver pipeta N 2). El esque-
ficaciones dadas por el fabricante. ma que se incluye a continuacin permite di-
ferenciar los tipos de pipetas mencionados.
Ilustracin 44: Clases de pipetas
Las pipetas de desplazamiento de aire tienen Tabla de convencin de color

la ventaja de presentar menos riesgos de con- en las pipetas
taminacin cuando se usan continuamente,
pero no son tan exactas como las de despla-
Volumen dispensado por la Color caracterstico
zamiento positivo, cuando se trabaja con vo- pipeta. Rango en utilizado para identificarla
lmenes muy pequeos de lquido, debido a microlitros l
la compresibilidad del aire. Todas las pipetas 0,1-2,5 l Negro
de pistn disponen de puntas desechables,
0,5-10 l Gris
para minimizar los riesgos de contaminacin;
se recomienda utilizar siempre las puntas su- 2,0-20 l Gris/Amarillo
ministradas por el fabricante, para garantizar 10-100 l Amarillo
el ajuste de las mismas al cuerpo de la pipeta,
50-200 l Amarillo
as como los volmenes a dispensar. Para faci-
litar la identificacin de estos volmenes, los 100-1 000 l Azul
fabricantes han adoptado un cdigo de color 500-2 500 l Rojo
que facilita la identificacin de los volme-
nes a dispensar. La tabla que se incluye a con-
tinuacin muestra la convencin de color
mencionada.
178
Pipetas 16
SERVICIOS REQUERIDOS Recomendaciones generales
Para utilizar una pipeta se requiere que el la- 1. Verificar que la pipeta se encuentra en po-
boratorio brinde unas condiciones adecuadas sicin vertical, cuando se requiera aspirar
de comodidad, limpieza e iluminacin. Las un lquido. La posicin vertical garantiza
condiciones generales son las siguientes: que no se presente incertidumbre por va-
riaciones mnimas en la cabeza del lquido.
1. Verificar que la temperatura del ambiente
donde se utiliza sea estable, con un rango 2. Confirmar la recomendacin que efecta
de variacin de 0,5 C, que se encuentre el fabricante de la pipeta con relacin a la
entre los 15 C y los 30 C, siendo ptima profundidad mnima de inmersin de la
una temperatura de 20 C. punta de la pipeta, cuando se requiere as-
pirar lquidos. Las profundidades varan de
2. Confirmar que la humedad relativa del acuerdo con el tipo y capacidad de la pipe-
ambiente sea superior al 50 %. Las pipetas ta. Una gua general se muestra en la si-
y muestras o materiales con los que se tra- guiente tabla2:
baja deben estar estabilizados a las condi-
ciones del laboratorio, por lo que se reco-
mienda que se encuentren en el mismo Tabla de profundidad de inmersin de
con dos o tres horas de anticipacin al mo- la punta de la pipeta segn volumen
mento en que se realiza el trabajo.
Volumen de la pipeta Profundidad de la inmersin
3. Evitar trabajar con las pipetas bajo la in- (l) (mm)
fluencia de la luz solar directa.
1-100 2-3
4. Utilizar los elementos de proteccin ade- 100-1 000 2-4
cuados, si se trabaja con materiales txicos 1 000-5 000 2-5
o que conlleven riesgo biolgico.
3. Humedecer previamente las puntas de las

USO DE LA PIPETA pipetas que funcionan por desplazamien-
to de aire para mejorar la exactitud. Para
Para obtener resultados exactos, precisos y lograr la humidificacin mencionada, se
sobre todo confiables, es necesario que los opera varias veces la pipeta con la solucin
operadores de pipetas conozcan en detalle de trabajo, dispensando el contenido en el
los procedimientos relacionados con su utili- recipiente de desperdicio. Esto reduce la
zacin. Esto se logra mediante capacitacin y posibilidad de que se aspiren burbujas de
seguimiento detallado del uso de las pipetas. aire, cuando se aspiran lquidos de densi-
Se presentan a continuacin lineamientos ge- dad elevada o lquidos con propiedades hi-
nerales para el uso adecuado de los dispositi- drofbicas. El proceso mencionado permi-
vos en mencin. te homogeneizar la humedad en la cma-
ra de aire de la pipeta volumen de aire
entre la cabeza del pistn y la superficie
Advertencia: Antes de utilizar una pipe- del lquido. No es necesaria la prehumidi-
ta, verificar que la misma se encuentra de- ficacin en pipetas que dispensan volme-
bidamente calibrada y que es adecuada nes inferiores a 10 l. Tampoco es necesa-
para realizar el trabajo que se requiere ria la humidificacin previa en las pipetas
desarrollar. a pistn de desplazamiento positivo.
2
Blues, J., Bayliss, D., Buckley, M., The calibration and use of piston pipette, UK, National Physical Laboratory, Teddington,
Middlesex, 2004, pg. 6. (www.npl.co.uk)
179
4. Remover, despus de llenar la pipeta, cual- del recipiente que vara entre los 30 y los
quier gota que se adhiera a la punta de la 45, y estar ubicada entre 8 y 10 mm sobre
pipeta. El procedimiento que se sigue con- la superficie del lquido contenido.
siste en tocar, con la punta de la pipeta,
suavemente la pared del recipiente que
contiene el lquido aspirado. Podra reque- Mtodo convencional de uso
rirse un material absorbente, teniendo cui-
dado de no tocar el orificio de la punta de Se describen a continuacin las actividades ge-
la pipeta y tomando las precauciones del nerales requeridas para utilizar una pipeta me-
caso, si el material presenta algn tipo de cnica por desplazamiento de aire. El operador
contaminacin. debe tener en cuenta las recomendaciones es-
pecficas del fabricante, observacin que tam-
5. Dispensar el lquido contenido en la pipe- bin debe acatarse cuando se utilicen pipetas
ta tocando con la punta de esta la pared controladas electrnicamente. El esquema que
del recipiente receptor. La punta de la pi- se incluye muestra la descripcin de los proce-
peta debe formar un ngulo con la pared sos que se explican a continuacin.
Ilustracin 45: Fases del uso de la pipeta
1. Colocar una punta nueva, ajustada a las recomendacin que suministre el fabrican-
especificaciones de la pipeta, en el porta- te. Confirmar que la pipeta se encuentra
puntas de la pipeta. Evitar contaminar la en posicin vertical. Este proceso corres-
punta con otras sustancias. Verificar que la ponde al mostrado en la posicin 1B (pri-
misma queda bien ajustada. mera a la izquierda).
2. Presionar el mbolo suavemente hasta el 4. Liberar el mbolo de forma suave para

primer tope. Hasta este momento la punta que la pipeta absorba el lquido (posicin
de la pipeta no debe estar sumergida en el 2A). Verificar que el mbolo se desplace
lquido. hasta la posicin del lmite superior. Espe-
rar al menos dos segundos, antes de retirar
3. Sumergir la punta de la pipeta en el lqui- la punta de la pipeta del lquido.
do. Verificar la profundidad recomendada
en la tabla incluida en el numeral 2 de las 5. Colocar la punta de la pipeta contra la pa-
recomendaciones generales o utilizar la red del recipiente en el cual ser dispensado
180
Pipetas 16
el lquido. Verificar que el ngulo formado realizar rutinas especficas de los diversos mo-
entre la punta de la pipeta y la pared del ele- delos, de acuerdo con las instrucciones de los
mento receptor est entre los 30 y los 45. Si manuales suministrados por los fabricantes.
el recipiente receptor ya tiene algn nivel de
lquido, evitar que la punta de la pipeta que-
de sumergida en el mismo (posicin 3A). Inspeccin
Frecuencia: Diaria
6. Dispensar el contenido de la pipeta presio-
nando el mbolo de forma suave pero firme, Las pipetas son dispositivos que requieren ins-
hasta el primer tope (posicin 4B). Mantener pecciones frecuentes para detectar desgastes
en todo momento el contacto entre la punta anormales o daos y/o verificar que las mismas
de la pipeta y la pared del recipiente recep- se encuentran en buenas condiciones de funcio-
tor. Frotar la punta de la pipeta contra la pa- namiento. La inspeccin debe cubrir los siguien-
red de 8 a 10 mm, para asegurar que no que- tes aspectos:
de ninguna gota de lquido pegado a la pun-
ta de la pipeta. 1. Verificar la integridad y ajuste de los meca-
nismos. Los mismos deben poder moverse
7. Presionar el mbolo suavemente hasta que de forma suave. El pistn debe desplazar-
alcance el segundo tope en la carrera del pis- se suavemente.
tn (posicin 5C). Esto expulsa cualquier frac-
cin de lquido que hubiera podido quedar 2. Confirmar que el portapuntas no presente
en la punta de la pipeta, al forzar el aire de distorsiones o marcas de desgaste, dado que
la cmara a travs del orificio de la punta de es esencial para la exactitud de las medidas.
la pipeta. Mantener el mbolo presionado en Verificar el ajuste de las puntas.
el segundo tope, mientras se retira la pipeta
del recipiente receptor. Una vez retirada la 3. Colocar una punta y llenarla con agua desti-
pipeta, liberar suavemente el mbolo hasta lada. La pipeta no debe presentar ningn ti-
la posicin lmite superior. po de fuga.
8. Desechar la punta de la pipeta. Para esto ac-

cionar el botn del mecanismo de expulsin Limpieza y descontaminacin
(posicin 6).
1. Verificar cada da que la pipeta se encuentra
Nota: Si se utiliza una pipeta de volumen va- limpia, en sus superficies interiores y exterio-
riable, primero se debe seleccionar el volu- res. Si se detecta suciedad, la misma debe lim-
men que necesita ser dispensado. Para esto piarse utilizando un solvente adecuado o una
deben seguirse las instrucciones que al res- solucin jabonosa. Revisar las recomendacio-
pecto indique el fabricante. Normalmente, nes del fabricante relativas a la compatibili-
los controles de volumen se encuentran ubi- dad que tienen los materiales con que est
cados en la parte superior de la pipeta y es fabricada la pipeta para seleccionar aquellos
necesario que el operador aprenda a enten- solventes que no produzcan efectos dainos
der y diferenciar las escalas. a la integridad de los componentes.
2. Esterilizar la pipeta siguiendo las indicaciones

RUTINAS DE MANTENIMIENTO de los fabricantes. Algunas pipetas se pue-
den esterilizar en un autoclave, utilizando un
Se sealan a continuacin los lineamientos ge- ciclo de 121 C y un tiempo estimado de 20
nerales de las rutinas de mantenimiento re- minutos; algunas requieren ser desensambla-
queridas por las pipetas mecnicas. Se deben das para que el vapor est en contacto con
3
Las pipetas que se pueden esterilizar con vapor disponen de una marca que permite identificarlas; el fabricante proporcio-
na los requerimientos de desensamble.
181
sus componentes internos3. El desensamble Si los componentes interiores fueron conta-
consiste en liberar o desenroscar el cuerpo minados accidentalmente, todas las superfi-
central de la pipeta, siguiendo los procedi- cies debern ser limpiadas con un detergen-
mientos indicados por los fabricantes. Para de- te y luego con agua destilada. Si los anillos o
sensamblar o ensamblar algunas pipetas, se sellos en O requieren ser cambiados, debern
requiere utilizar un conjunto de herramientas ser sustituidos por repuestos de las mismas
llaves que normalmente proporcionan los caractersticas de los originales. Debe tenerse
fabricantes, junto con la pipeta en el momen- en cuenta que este tipo de sellos vara depen-
to de la venta. La pipeta solo debe ensamblar- diendo de la marca, tipo y modelo.
se de nuevo, cuando el ciclo de esterilizacin
haya terminado y la temperatura se haya esta- 3. Lubricar el mbolo y el pistn con grasa sili-
bilizado con la del ambiente. En ese momento conada especial4 para pipetas. La grasa men-
se verifica que los componentes se encuentren cionada ha sido especialmente desarrollada
secos y se procede al ensamble. Algunos fabri- para ser utilizada en las pipetas. Utilizar siem-
cantes recomiendan esterilizar la pipeta, utili- pre la recomendada por el fabricante. Retirar
zando una solucin de isopropanol al 60 % y, cualquier exceso de lubricante con un papel
a continuacin, lavar los componentes con absorbente.
agua destilada, secar y ensamblar.
4. Ensamblar siguiendo un proceso inverso al
3. Si una pipeta ha sido utilizada con sustancias utilizado para desensamblar.
peligrosas para la salud, es responsabilidad
del usuario asegurar que est completamen-
te descontaminada, antes de que la misma
sea utilizada en otros procedimientos o sea
retirada del laboratorio. Es conveniente dili-
genciar un reporte que indique su marca,
modelo, nmero de serie, sustancias con las
que trabaj y sustancias o procedimientos
con las que fue tratada o limpiada.
Mantenimiento
Frecuencia: Semestral
Una pipeta que se utiliza diariamente debe ser

sometida a los siguientes procedimientos para
garantizar su correcto funcionamiento:
1. Desensamblar la pipeta. Seguir el procedi-

miento que para el efecto describe el fabrican-
te, en el manual de uso y mantenimiento de la
pipeta. (El procedimiento vara dependiendo
de la marca, tipo y modelo). Normalmente, se
desensambla el cuerpo principal de la pipeta
del sistema eyector de puntas, desenroscando
el cuerpo de la pipeta del cilindro.
2. Limpiar los anillos en O, el mbolo y las pa-

Ilustracin 46: Desensamble de una
redes interiores del cilindro antes de lubricar.
pipeta5
4
La grasa siliconada existe en diversas especificaciones. Por lo tanto, debe utilizarse la recomendada por el fabricante de las pipetas.
5
Despiece basado en el Maintenance and Service Manual for Genex Mechanical Pipettes, Single Channel, Variable models, Rev. 2 /
121199.
182
Pipetas 16
Conceptos de calibracin de pipetas por la densidad del agua). En la prctica se rea-

liza un grupo de mediciones, a las que se aplican
La calibracin de las pipetas se realiza utilizando correcciones que compensen cualquier variacin
procedimientos completamente estandarizados y que las aparten de las condiciones estndar de
cuya eleccin depende principalmente del volu- temperatura y presin atmosfrica y cualquier
men de las muestras obtenidas para efectuar la evaporacin que resulte importante durante el
calibracin. Mientras ms pequeo sea el volu- tiempo que duren los ensayos. Este tipo de en-
men, ms exigente y costoso el proceso de calibra- sayo permite las siguientes actividades:
cin. En este captulo se realiza una breve descrip-
cin del proceso gravimtrico, el cual se utiliza con 1. Comparar diversos tipos de pipetas entre s
pipetas que dispensan volmenes comprendidos para detectar si hay diferencias entre ellas.
entre los 20 l (microlitros) y 1 ml (mililitro).
2. Controlar la precisin y la exactitud de una
pipeta.
Elementos y equipos6 requeridos
3. Controlar la exactitud y la precisin de un lo-
1. Una balanza analtica te de pipetas.
2. Un termmetro de tipo electrnico con reso- 4. Controlar factores atribuibles a la utilizacin

lucin de 0,1 C o mejor, capaz de medir en de una pipeta por diversos usuarios.
el rango de temperatura en el cual se realiza
el ensayo, cuya sonda pueda ser sumergida
en el lquido bajo anlisis. Procedimiento7
3. Un higrmetro con una incertidumbre es- El procedimiento que se explica a continuacin es

tndar de 10 % o mejor vlido para las pipetas que funcionan por despla-
zamiento de aire. Comprende los siguientes pasos:
4. Un barmetro con una incertidumbre estn-
dar de 0,5 kPa o mejor 1. Instalar una punta nueva en la pipeta.
5. Un cronmetro 2. Succionar con la pipeta agua destilada del

recipiente de almacenamiento y desecharla
6. Micropipetas de varios volmenes en el recipiente de desperdicio al menos 5
veces, para estabilizar la humedad del volu-
7. Puntas desechables de varios volmenes men de aire en el interior de la pipeta.
8. Viales de fondo plano 3. Aadir agua al recipiente que se utilizar pa-

ra pesar, hasta que se obtenga una altura del
9. Agua bi o tridestilada y desgasificada lquido de al menos 3 mm.
10. Recurso humano entrenado 4. Registrar la temperatura del agua, la presin

ambiental y la humedad relativa.
Principio 5. Reemplazar la tapa del recipiente de pesa-

do, si aplica.
El procedimiento se basa en medir el volumen
de una muestra de agua, a partir de la masa de 6. Registrar el peso que presenta la balanza o
agua que dispensa una pipeta de capacidad co- efectuar la tara para que la lectura de la mis-
nocida. (Dividiendo la masa de agua dispensada ma quede en cero (0).
6
Los equipos a utilizar en la calibracin de la pipeta deben estar certificados por un laboratorio de calibracin acreditado.
7
El procedimiento presentado es una gua general. Para detalles completos, consultar estndares como el BS ES ISO 8655-
6:2002.
183
7. Llenar la pipeta con agua del recipiente de 2. Convertir cada valor de masa a volumen a 20 C,
almacenamiento y dispensarla en el reci- dividiendo la masa para la densidad del agua
piente de pesado. Expulsar la totalidad del ajustada a la mencionada temperatura.
agua. (Tal y como se ha descrito en el nume-
ral 7 del Mtodo convencional de uso). El Mi
Vi =
trabajo se realiza de la misma forma que se D
utiliza la pipeta de forma cotidiana.
3. Calcular el volumen promedio de los volme-
8. Registrar el nuevo peso detectado por la balanza. nes calculados en el numeral 2. (Suma de los
volmenes, dividido para el nmero de
9. Repetir los pasos 7 y 8 por nueve (9) veces muestras). Aplicar los ajustes por fenmenos
adicionales, registrando al final de cada ciclo tales como el empuje del aire sobre la masa
el peso que registra la balanza. flotacin. Para esto se multiplica cada ma-
sa por un factor de correccin [Z].
10. Registrar la temperatura del lquido en el re-
cipiente de pesado, al final del dcimo ciclo X = Vi n x Z
y medir el tiempo transcurrido desde el inicio
de las mediciones.
4. Calcular la desviacin estndar de la muestra.
11. Evaluar si la evaporacin ha sido significa- 1 n
tiva, (caso crtico cuando se trabaja con pi- [S] S =

n-1
x (Xi - XAV) 2
petas de volumen muy pequeo). Si as se i=1
estima, se debe permitir que trascurra un

perodo de tiempo adicional [Ta], igual al
5. Calcular el coeficiente de variacin.
utilizado durante las diez mediciones, y
cuando se complete, efectuar una nueva S
[Cv] CV(%) = x 100
lectura del peso que registra la balanza. XAV
12. Dividir la masa de agua perdida por evapo-

A continuacin, se muestra una tabla que con-
racin en el tiempo adicional [Ta] por el n-
tiene el resumen de las frmulas matemticas
mero total de muestras analizadas (diez). Es-
mencionadas.
to dar un indicativo promedio de la masa
de lquido perdida, debido a evaporacin
por ciclo, cifra que debe aadirse a cada una
Frmulas
de las lecturas de masa realizadas.
S
X= Vi nxZ Cv(%) =
XAV
x 100
Clculos
1 n XAV - XNom
Para efectuar los clculos se procede como se S= x (Xi-XAV) 2 D(%) =
XNom
describe a continuacin: n-1
i=1
1. Calcular la masa del agua dispensada por la Mi

Es = X - Vn Vi =
pipeta en cada ciclo. Restar la lectura registra- D
da correspondiente al final del ciclo anterior
Convenciones: Convenciones:
de la registrada en el presente ciclo y conti-
X = valor promedio del volumen Cv(%) = coeficiente de
nuar as hasta el final. Si se considera adecua-
S = desviacin estndar variacin
do, sumar la masa promedio correspondiente Z = factor de ajuste en D(%) = inexactitud
a la evaporacin calculada por ciclo. (l / mg)8
8
Los valores de Z dependen de la temperatura y la presin para el agua destilada. Deben consultarse en publicacio-
nes especializadas como el Estndar BS EN ISO 8655-6:2002, Anexo A.
184
Pipetas 16

La pipeta presenta fugas. Punta colocada de forma incorrecta en Instalar la punta de acuerdo a procedimiento
la pipeta. definido por el fabricante.
Cuerpos extraos entre la punta y su Limpiar acople. Retirar la punta y limpiar el
cono de ajuste. cono de ajuste. Instalar una punta nueva.
Cuerpos extraos entre el pistn y el Desensamblar y limpiar el conjunto cilindro-
anillo/sello en O alojado en el cilindro. /pistn. Lubricar y ensamblar.
Lubricante insuficiente en el pistn y o Desensamblar y lubricar adecuadamente.
el sello en O.
Sello en O doblado o daado. Reemplazar sello en O. Desensamblar, limpiar,
reemplazar sello, lubricar y ensamblar.
Pistn contaminado. Limpiar el pistn y lubricar ligeramente.
Cono inferior flojo. Ajustar el cono inferior.
Gotas visibles dentro de la punta de la Humidificacin no homognea de la Instalar una punta nueva en la pipeta.
pipeta. pared plstica.
La pipeta presenta inexactitudes. Operacin incorrecta de la pipeta. Revisar los procedimientos de uso y corregir
errores detectados.
Cuerpos extraos bajo el botn de Limpiar el montaje del botn.
accionamiento.
Punta de la pipeta mal instalada. Revisar el montaje de la punta de la pipeta.
Instalar una punta diferente, adecuada a las
especificaciones de la pipeta.
Interferencia en la calibracin. Recalibrar de acuerdo a procedimiento estan-
darizado. Revisar procedimiento de uso.
Punta contaminada. Instalar una punta nueva.
La pipeta presenta inexactitudes con Calibracin inadecuada. Recalibrar la pipeta utilizando procedimiento
determinados lquidos. estandarizado.
Ajustar la calibracin si se utilizan lquidos de
viscosidad alta.
El botn de control no se mueve suave- Pistn contaminado. Limpiar y lubricar ligeramente.
mente o presenta alta resistencia al
Sello contaminado. Desensamblar la pipeta, limpiar todos los se-
accionarlo.
llos o reemplazarlos si es necesario. Lubricar
ligeramente.
Pistn daado. Reemplazar el pistn y los sellos del pistn.
Lubricar ligeramente.
Vapores de solvente han entrado en la Desenroscar la unin central de la pipeta. Ven-
pipeta. tilar, limpiar el pistn y lubricar ligeramente.
185
DEFINICIONES BSICAS Por otra parte, la masa inercial se entiende
como la resistencia a cambiar el estado de
Coeficiente de variacin [CV]. Parmetro movimiento, cuando se le aplica una fuerza a
estadstico que representa la fraccin de la un objeto. (Un objeto, con una masa inercial
desviacin tpica con respecto a la media. pequea, cambia su estado de movimiento
con mayor facilidad que uno que tenga una
Densidad. Relacin que existe entre la masa de mayor masa inercial, cuando se les aplica una
un cuerpo y el volumen que el mismo ocupa. La misma fuerza).
densidad promedio de un objeto es igual a su
masa total dividida por su volumen total. Se Microgramo [g]. Unidad de peso que equi-
identifica mediante la letra griega Ro []. En el vale a 1 x 10-6 gramos (g).
Sistema Internacional de Unidades, la densidad
se mide en kilogramos por metro cbico [kg/m3]. Miligramo [mg]. Unidad de peso que equi-
vale a 1 x 10-3 gramos (g).
Desviacin estndar [S]. Parmetro esta-
dstico que se utiliza para determinar el error Microlitro [l]. Unidad de capacidad que
global de una muestra. equivale a 1 x 10-6 litros (l). Un (1) l de agua
pesa exactamente un (1) mg y tiene un volu-
Error (de una medida). Diferencia que se men de 1 mm3.
presenta entre el valor medido y el valor
correcto. Mililitro [ml]. Unidad de capacidad que
equivale a 1 x 10-3 litros (l). Un (1) ml de agua
Exactitud. Concepto relacionado con los pesa exactamente 1 g y tiene un volumen de
errores que presentan las medidas. Se dice 1 cm3.
que un instrumento es exacto cuando los va-
lores de un grupo de mediciones se acercan Precisin. Concepto relacionado con los
bastante al valor real. errores que presentan las medidas. Se dice
que un instrumento o mtodo es preciso
Masa. Propiedad fsica de los cuerpos relacio- cuando en ensayos independientes, al repetir
nada con la cantidad de materia que estos una medida, se obtienen resultados similares.
contienen. En fsica hay dos cantidades a las
que se denomina masa. La masa gravitacional Rango. Diferencia entre el mximo y el mni-
que es una medida de la forma en que un mo valor que lee o mide un instrumento.
cuerpo interacta con el campo gravitacio-
nal. (Si la masa del cuerpo es pequea, el Volumen. Cantidad de espacio fsico que
cuerpo experimenta una fuerza menor que la ocupa la masa. Se calcula dividiendo la masa
que experimentara si su masa fuera mayor). por la densidad promedio.
186
Pipetas 16
Bibliografa
Blues, J., Bayliss, D., Buckley, M., The calibration and use of piston pipettes, National Physi-
cal Laboratory, Teddington, Middlesex, UK, 2004. (www.npl.co.uk)
Digital pipette, Guide to Justor 100 series pipettes, Nichiryo Co., LTD.
Maintenance and Service Manual for Genex Mechanical Pipettes, Rev. 2/121199.
Mantenimiento y reparacin del equipo de laboratorio, diagnstico por imagen y hospital,

Ginebra, Organizacin Mundial de la Salud, 1996, 52-55.
Manual de instrucciones, Eppendorf Serie 2000.

(http://www.brinkmann.com/pdf/bs-manuals/ReferenceSeries2000.pdf)
Standard Operating Procedure for Pipettes, Brinkmann/Eppendorf SOP. 5101-201C,

Brinkmann Instruments Inc, 2001. (http://www.brinkmann.com/pdf/5101-C201.pdf)
The Finnpipette, Instructions for Use, Labsystems, Helsinki, Finland.

187
188
9. Evitar colocar materiales combustibles cer- 3. Colocar la unidad con la superficie calefac-
ca del equipo. tora hacia abajo.
10.Evitar colocar recipientes cuyo peso exceda 4. Retirar los tornillos que fijan la tapa infe-
la capacidad definida por el fabricante. rior y removerla.
5. Ubicar y desconectar los cables que ali-

RUTINAS DE MANTENIMIENTO mentan las resistencias elctricas (en mo-
delos que utilizan estos elementos).
El plato caliente con agitador es un equipo
diseado para trabajar en condiciones nor- 6. Desconectar los cables existentes entre el
males, sin que presente mayores exigencias control del equipo y las resistencias.
de mantenimiento. Este equipo bien instala-
do y operado funciona sin problemas duran- 7. Retirar los tornillos que fijan la cubierta supe-
te muchos aos. En este documento se expo- rior a la base. Verificar que no se afecten las
nen las rutinas generales de mantenimiento conexiones a las resistencias calefactoras.
que recomiendan los fabricantes. Procedi-
mientos especializados deben realizarse si- 8. Orientar la nueva superficie cermica, tal
guiendo cuidadosamente las recomendacio- como se encuentra montada la superficie
nes de los fabricantes. cermica a cambiar.
9. Observar cmo se encuentran colocados los

Limpieza seguros de la cubierta cermica daada. Re-
Frecuencia: Mensual tirar dichos seguros y colocar los elementos
calefactores y aislantes dentro de la nueva
1. Limpiar el equipo en una posicin vertical, superficie, conservando la misma alineacin
para evitar que los agentes de limpieza lle- y distribucin que tena en la cubierta origi-
guen a los componentes internos. nal. Colocar los nuevos seguros.
2. Utilizar un detergente suave. Aplicarlo so- 10.Reconectar los siguientes componentes en

bre las superficies externas, utilizando una un proceso inverso al arriba descrito.
pieza de tela de calidad similar a la de los
pauelos.
Reemplazo de fusibles
3. Verificar que el equipo se encuentre com- Frecuencia: Cuando se requiera
pletamente seco antes de volver a conectar.
Si el plato est conectado y el interruptor prin-
cipal en la posicin de encendido, pero no hay
Reemplazo de superficies cermicas efecto calefactor, es posible que sea necesario
Frecuencia: Cuando se requiera sustituir el fusible. El proceso es el siguiente:
A continuacin, se presentan las recomenda- 1. Colocar el interruptor principal en la posi-

ciones generales aplicables a la sustitucin de cin apagado y desconectar el cable de ali-
las superficies cermicas. mentacin elctrica.
1. Verificar que el plato caliente se encuentre 2. Retirar, con un destornillador de pala, la

desconectado y fro. Esto evita el riesgo de tapa del compartimiento del fusible.
que se produzca un choque elctrico o se
presente una quemadura. 3. Reemplazar el fusible por uno nuevo de
las mismas especificaciones del original.
2. Manejar con extremo cuidado el equipo,
pues una superficie cermica rota tiene 4. Colocar la cubierta del compartimiento del
bordes cortantes muy peligrosos. fusible.
191
Bibliografa
Fitzgerald, A., Kingsley, C., Kusko, A., Electric Machinery, Mc Graw Hill Co., 1971.
Instructions for replacement on ceramic top on Fisher 11-500 series, Hotplates and Stirrers,
Part N 103177, 1998.
Instruction manual for Fisher Isotemp Digital, Instructions Part N 104612, Rev. A. Pitts-
burg, Fisher Scientific, 2001.
Instruction manual for Fisher Scientific Stirrers, Hotplates and Stirring Hotplates, Pittsburg,
Fisher Scientific.

(http://www.mastrad.com/hotplate1.jpg)
193
194
Aislamiento trmico. Es un conjunto de SERVICIOS REQUERIDOS
materiales que tiene la propiedad de retar-
dar la transferencia de calor. Su funcin con- Para su funcionamiento, los refrigeradores
siste en evitar que la energa trmica del me- requieren las siguientes previsiones:
dio ambiente pueda llegar al entorno que se
pretende refrigerar, con la misma rapidez 1. Acometida elctrica con polo a tierra ade-
que el sistema de refrigeracin extrae la cuada a los requerimientos de voltaje y
energa trmica del interior. Todo equipo de frecuencia del equipo. En general los refri-
refrigeracin dispone del aislamiento trmico geradores, dependiendo de su capacidad,
adecuado, para lograr que la temperatura in- pueden conseguirse en versiones que fun-
terior sea inferior a la temperatura del medio cionan con 115 V, 60 Hz; 208/230 V, 60 Hz.
ambiente. El mejor aislante trmico es el va- Debe preverse que las acometidas elctri-
co. En los refrigeradores se utilizan diversos cas cumplan con las normativas elctricas
materiales; entre los ms comunes y usados, nacionales o internaciones que utilice el
se encuentran el poliuretano en forma de es- laboratorio.
puma y la lana de vidrio. Asimismo, se acos-
tumbra fabricar las superficies interiores en 2. Si se instala ms de un refrigerador que
materiales como plstico ABS. dependa de un mismo circuito elctrico, se
debe verificar que la capacidad potencia
Vlvulas de servicio. Son dispositivos que se elctrica y las seguridades del mismo sean
utilizan para cargar el circuito de refrigeracin adecuadas para suministrar la potencia
con el fluido refrigerante. A travs de las mis- que demandan los refrigeradores.
mas, se conectan los sistemas de vaco y de car-
ga de refrigerante requeridos, para que el re- 3. Conectar directamente el refrigerador a la
frigerador opere de acuerdo con las condicio- toma elctrica. Nunca instalar un refrige-
nes de diseo establecidas por el fabricante. rador en una toma elctrica sobrecargada
Normalmente, su utilizacin est limitada al fa- o que presente deficiencias de voltaje. En
bricante y a personal tcnico especializado. (No lo posible, evitar el uso de extensiones
se indican en el esquema de refrigeracin). elctricas. La toma elctrica no debe estar
a ms de 2 m del lugar seleccionado para
Protector trmico. Es un dispositivo de pro- instalar el refrigerador.
teccin que debe activarse y desconectar el
compresor, en caso de que ocurran sobrecar- 4. Instalar el refrigerador sobre una superfi-
gas o sobrecalentamientos que afecten las cie nivelada, previendo que se disponga
bobinas de campo del compresor. (Pertenece de un espacio libre alrededor del equipo.
al sistema elctrico y no se indica en el siste- Los refrigeradores en la base disponen de
ma de refrigeracin). un sistema de nivelacin que permite ajus-
tar las pequeas diferencias de nivel que
pudiera tener el piso. Se acostumbra dejar
Nota: Tanto el evaporador como el condensa- un espacio libre de 15 cm a los lados, y en
dor estn fabricados con materiales que pre- la parte trasera para facilitar la ventilacin
sentan muy buenas propiedades de conduc- del condensador.
cin trmica como aluminio [Al] y cobre [Cu].
Para mejorar la transferencia de calor, se han 5. Evitar instalar el refrigerador bajo la luz
incorporado, en los condensadores y evapora- solar directa o cerca de fuentes de calor
dores, sistemas de ventilacin que inducen como radiadores o calentadores. Recordar
procesos de conveccin forzada. Para lograr que mientras mayor sea la diferencia de
las diferentes temperaturas de refrigera- temperatura entre el ambiente y el con-
cin que se requieren en los laboratorios o densador, la transferencia de calor ser
en la industria en general, los fabricantes han ms eficiente.
desarrollado diversidad de diseos y de flui-
dos refrigerantes, los cuales utilizan depen-
diendo de los resultados esperados.
198
Refrigerador 18
Se aprecian en el esquema los siguientes controles: 3. Una vez desmontados los estantes o cajones,
limpiar las paredes interiores del refrigera-
1. Un interruptor general, accionado por llave dor, utilizando un detergente suave. Secar
antes de montar los accesorios interiores.
2. Indicadores de puerta abierta, batera ba-
ja, condicin tcnica anormal 4. Aplicar a los cajones un detergente suave
con un trapo hmedo. Frotar con cuida-
3. Botones para aumentar o disminuir par- do. Secar los cajones y reinstalarlos en los
metros dispositivos de montaje disponibles en el
refrigerador.
4. Pantalla indicadora
Advertencia: Evitar el uso de lana de ace-

RUTINAS DE MANTENIMIENTO ro u otros abrasivos para efectuar la lim-
pieza de los estantes o los cajones. Evitar
Los refrigeradores son equipos que en general el uso de gasolina, nafta o adelgazantes,
no son muy exigentes desde la perspectiva de porque estos daan los plsticos, el empa-
mantenimiento, aunque s son exigentes con que o la pintura de las superficies.
relacin a la calidad de los sistemas de alimen-
tacin elctrica. Si se conectan a circuitos elc-
tricos de buena calidad y se verifica que ten-
gan buena ventilacin alrededor del equipo, Limpieza del condensador
pueden funcionar aos sin demandar servicios Frecuencia: Cada 6 meses
tcnicos especializados. El circuito de refrige-
racin es sellado en fbrica y no dispone de 1. Desconectar el cable de alimentacin elctrica.
componentes que puedan requerir manteni-
miento rutinario. Se describen a continuacin 2. Verificar la posicin donde se encuentra
las rutinas de mantenimiento ms comunes. instalado el condensador. Los fabricantes
lo colocan principalmente en la parte infe-
rior y en la parte trasera del equipo. Algu-
Refrigeradores de conservacin nos refrigeradores lo tienen instalado en
la parte superior.
Limpieza interior
Frecuencia: Trimestral 3. Retirar la rejilla de proteccin y el filtro de
proteccin del condensador (No todos los
1. Verificar que los estantes interiores del re- fabricantes proveen filtro).
frigerador se encuentran limpios. General-
mente se fabrican en malla metlica, a la 4. Retirar la suciedad y el polvo depositados
cual se le aplica un recubrimiento para evi- sobre la superficie del condensador. Utili-
tar la corrosin. Para limpiarlos debe reti- zar una aspiradora dotada de un cepillo de
rarse del refrigerador cualquier material succin. Recorrer toda la superficie del
que pudiera interferir la labor de limpieza. condensador para retirar la suciedad o el
Mover los estantes vacos hacia adelante. polvo acumulado. Verificar que tanto la
Aplicar un detergente suave con un trapo superficie de los tubos como la superficie
hmedo, frotar suavemente, las superfi- de las aletas conductoras de calor queden
cies superiores e inferiores. Secar y reubi- limpias. Aspirar tambin el filtro (si se dis-
car en la posicin original. pone de este elemento).
2. Si el refrigerador dispone de cajones, la la- 5. Reinstalar la cubierta.

bor de limpieza es similar. Desocupar los
cajones y desmontarlos de los dispositivos 6. Conectar el refrigerador a la acometida
de ajuste. Retirarlos del refrigerador. elctrica.
201
3. Afecta la conservacin de la temperatura.
Advertencia: Si el condensador no se lim-
pia, se interfiere el proceso de transferencia
4. Incrementa los costos de operacin.
de calor y el refrigerador podra "calentarse"
o funcionar con temperaturas diferentes a
las seleccionadas.
Descongelar
Muchos refrigeradores modernos disponen

Empaque de la puerta de ciclos automticos para descongelar el
evaporador, a fin de evitar que se presenten
El empaque de la puerta es un componente acumulaciones de escarcha. Normalmente,
que debe permanecer en buen estado para dichos ciclos se realizan mediante la activa-
que el refrigerador opere correctamente. Pa- cin de un conjunto de resistencias elctricas
ra verificar su estado se procede como se ex- que de forma rpida eliminan la escarcha
plica a continuacin. presente. Algunos fabricantes prefieren que
este ciclo se realice bajo el criterio de quien
1. Abrir la puerta. opera el refrigerador y su accionamiento es
manual. Se presenta a continuacin el proce-
2. Insertar una tira de papel de unos 5 cm de dimiento recomendado para descongelar.
ancho, entre el empaque de la puerta y el
reborde del cuerpo del refrigerador donde 1. Verificar que el espesor de la escarcha sea
se aloja el empaque. superior a 8 mm.
3. Cerrar la puerta. 2. Retirar el contenido de los compartimientos.
4. Halar suavemente el papel desde el exterior. 3. Desconectar el refrigerador.

El papel debe presentar una resistencia a ser
desplazado hacia afuera. Si el papel puede 4. Dejar la puerta abierta.
retirarse sin presentar resistencia, el empa-
que debe ser sustituido. Efectuar este proce- 5. Retirar el agua a medida que esta se acu-
dimiento cada 10 cm alrededor de todo el mula en los compartimientos. Utilizar una
permetro sobre el cual acta el empaque. esponja o una pieza de tela absorbente.
6. Colocar una toalla para evitar que el agua

Advertencia: Un empaque en malas con- descongelada moje la parte frontal e infe-
diciones produce varios inconvenientes en rior del refrigerador.
el funcionamiento del refrigerador:
Advertencia: Nunca utilizar elementos

1. Permite el ingreso de humedad, que se con- cortopunzantes para retirar el hielo o la
densa y congela en el interior del evaporador. escarcha del evaporador. Tal accin puede
perforar la pared del evaporador y permi-
2. Incrementa el tiempo de operacin del tir la fuga del fluido refrigerante, causan-
compresor para mantener la temperatura do una falla grave que solo puede ser re-
seleccionada. parada en un taller especializado.
202
Refrigerador 18

El refrigerador no funciona. Equipo desconectado. Verificar conexin del refrigerador.
No hay electricidad en circuito de ali- Comprobar acometida elctrica.
mentacin.
Verificar el interruptor general (breaker).
El refrigerador funciona de forma con- Termostato ajustado a alta temperatura. Confirmar ajuste del termostato.
tinua sin efecto frigorfico.
Refrigerador congelado. Ajustar el termostato a una temperatura me-
nos baja.
Descongelar el refrigerador.
El refrigerador presenta fluctuaciones Control de temperatura descalibrado. Calibrar la temperatura de operacin segn
de temperatura. procedimiento definido por el fabricante.
Condensador sucio. Limpiar condensador, de acuerdo a procedi-
miento citado en rutinas de mantenimiento.
El refrigerador presenta temperatura Puerta abierta. Verificar que la puerta est bien ajustada.
alta.
Falla en la alimentacin elctrica. Confirmar que la acometida elctrica funciona
correctamente.
Se coloc una carga a temperatura alta (l- Esperar a que el refrigerador retire el calor de
quidos o slidos) dentro del refrigerador. la carga.
El compresor no funciona. Verificar funcionamiento del compresor.
Comprobar si est encendida una de las alarmas.
El compresor funciona, pero hay hielo Verificar si funcionan los ventiladores del
en el evaporador. evaporador.
El compresor funciona, no hay hielo en Se requiere una verificacin completa del sis-
el evaporador y funcionan bien los ven- tema de refrigeracin. Llamar al servicio tcni-
tiladores del evaporador. co especializado.
Al operar el refrigerador se escuchan El protector trmico ha desconectado Verificar si el voltaje de alimentacin es el
sonidos similares a un clic. el compresor. correcto.
OPERACIN DEL REFRIGERADOR II o internacionales. El voltaje no debe variar

ms de +10 % o 5 % del voltaje de placa.
Caso II: Refrigerador de ultrabaja Hay refrigeradores que demandan poten-
temperatura cias de aproximadamente 12 kw, por lo
que es indispensable una acometida elc-
La operacin de los refrigeradores de ultra- trica dimensionada a tales cargas.
baja temperatura implica seguir un procedi-
miento recomendado por los fabricantes, pa- 2. Seleccionar un lugar que disponga de piso
ra lograr las condiciones de trabajo estipula- firme, bien nivelado en todos los senti-
das en el diseo del equipo. Se destacan las dos y ventilado y libre de la influencia de
siguientes recomendaciones comunes a cual- la luz solar directa o de la influencia de
quier refrigerador: fuentes de calor. Algunos fabricantes esti-
pulan la temperatura ambiente adecuada
1. Conectar el refrigerador a una toma elctri- entre los 10 C y los 32 C. El espacio libre
ca con polo a tierra de dedicacin exclusiva, a los costados y en la parte trasera debe
en buen estado de operacin y que est di- ser de al menos 15 cm. La puerta se debe
mensionada para brindar la potencia elc- poder abrir libremente hasta un ngulo
trica requerida por el refrigerador, que de 90. Normalmente, los fabricantes in-
cumpla con las normas elctricas nacionales cluyen aditamentos para la nivelacin del
203
refrigerador, ubicados en la base, junto con que utilizan los refrigeradores en mencin. El
los soportes o rodamientos de sustentacin. esquema es de tipo general, por lo que segu-
ramente se encontrarn diferencias con los
controles que utilizan los diversos fabrican-
ENCENDIDO DEL REFRIGERADOR tes. El mismo se incluye a continuacin y es
bsico para entender los procedimientos de
Para entender los procedimientos de opera- operacin que se explican en seguida.
cin del refrigerador, se ha preparado un es-
quema de un tablero de control similar a los
Ilustracin 52: Control refrigerador ultrabaja temperatura
Procedimientos operacin seleccionada. Esperar un tiempo

adecuado para que el refrigerador alcance la
1. Conectar el cable de alimentacin elctrica temperatura seleccionada.
a la toma de suministro elctrico.
4. Seleccionar las temperaturas lmite a las que
2. Girar la llave, a la posicin de encendido. debern accionarse las alarmas. General-
La pantalla debe iluminarse indicando la mente, las temperaturas lmites superiores e
temperatura del gabinete y un diodo emi- inferiores no varan ms de un 10 % de la
sor de luz indicar que el refrigerador se temperatura de operacin. Las alarmas, por
encuentra energizado. Esta accin pondr lo general, se ajustan cuando ya el refrigera-
en marcha el compresor y los ventiladores dor ha obtenido una temperatura cercana a
del evaporador y del condensador. su punto de operacin. El procedimiento
consiste en activar el control de alarmas y se-
3. Seleccionar la temperatura de operacin del leccionar las temperaturas lmites superiores
refrigerador, por lo general, se accionan va- e inferiores, de forma que se active la alarma
rios botones de forma simultnea; el botn si por algn motivo se exceden dichos lmi-
correspondiente al control de temperatura y tes. Se debe seguir el procedimiento que re-
los botones para incrementar o disminuir la comienda el fabricante. Usualmente, el con-
temperatura. Una vez seleccionada la tem- trol dispone de un botn que permite desac-
peratura deseada, se liberan los controles. tivar las alarmas y tambin de la opcin para
La pantalla mostrar la temperatura de probar el funcionamiento de las mismas.
204
Refrigerador 18
5. Los refrigeradores de ultrabaja temperatura Descongelar

disponen de otra serie de alarmas que avi-
san a los operadores sobre la ocurrencia de Cuando sea necesario descongelar el refrigera-
eventos que pudieran afectar el adecuado dor, debe procederse de la siguiente manera:
funcionamiento del refrigerador. Entre los
mismos se encuentran los siguientes: 1. Trasladar los productos que se mantienen
refrigerados a otro refrigerador de carac-
Falla en la alimentacin elctrica tersticas similares de operacin.
Bajo voltaje 2. Apagar el refrigerador y permitir que el interior

del mismo alcance la temperatura ambiente.
Temperatura ambiente demasiado alta
3. Retirar el hielo y el agua acumulada en el
Temperatura de lmite superior superada interior del refrigerador.
Temperatura de lmite inferior superada 4. Si se presentan olores extraos, lavar el in-

terior del refrigerador con bicarbonato de
sodio y agua tibia.
5. Limpiar el exterior con un detergente suave,
Las rutinas de mantenimiento de los refrige- secar y luego aplicar una cera protectora.
radores de baja temperatura se encuentran
enfocadas a los siguientes aspectos:
Advertencia: Nunca utilizar elementos corto-
punzantes para retirar el hielo o la escarcha del
Limpieza del condensador evaporador. Tal accin puede perforar la pared
Frecuencia: Cada 6 meses del evaporador y permitir la fuga del fluido re-
frigerante, causando una falla grave que solo
1. Retirar la rejilla protectora. puede ser reparada en un taller especializado.
2. Retirar y limpiar el filtro. Si est demasia-

do obstruido, sustituir por otro de las mis- Mantenimiento de la batera del
mas caractersticas del original. sistema de alarma
Frecuencia: Aproximadamente cada dos o tres aos
3. Verificar el funcionamiento del ventilador.
Usualmente, la batera del sistema de alarma
4. Aspirar el condensador y sus aletas difusoras. debe cambiarse una vez que haya completa-
do su ciclo de vida til. Para sustituirla se pro-
5. Reinstalar la rejilla protectora y el filtro. cede como se describe a continuacin.
1. Remover la tapa frontal. Por lo general,

Advertencia: Si el condensador no se limpia, se
la(s) batera(s) se encuentra(n) inmediata-
interfiere el proceso de transferencia de calor y
mente detrs de la misma.
el refrigerador podra "calentarse" o funcionar
con temperaturas diferentes a las seleccionadas.
2. Desconectar los terminales de conexin.
3. Retirar la batera agotada.

Integridad del sello de la puerta
4. Instalar una batera de las mismas caracte-
Se recomienda que, de forma peridica, se rsticas de la original.
verifique la integridad del sello de la puerta.
El mismo debe permanecer en buen estado y 5. Conectar los terminales.
no presentar roturas, pinchazos o rasgaduras.
6. Reinstalar la tapa.
205

Indicador de bajo voltaje encendido. Voltaje inadecuado en la toma de ali- Verificar el voltaje de alimentacin. Compro-
mentacin elctrica. bar la acometida y los sistemas de proteccin
de la misma.
Indicador de filtro sucio encendido. Verificar limpieza del filtro. Limpiar el filtro de proteccin del condensa-
dor. Si el mismo est saturado de suciedad,
sustituir por otro de las mismas caractersticas
del original.
Indicador de batera baja encendido. Batera agotada. Sustituir batera por otra de las mismas espe-
cificaciones de la original.
El refrigerador no funciona. Equipo desconectado. Conectar el equipo a la toma de alimentacin
elctrica.
Fusible quemado. Sustituir fusible por otro de las mismas carac-
tersticas del original.
El refrigerador funciona de forma Temperatura de operacin selecciona- Disminuir la temperatura seleccionada.
continua. da a un punto muy bajo.
El refrigerador funciona de forma con- Condensador sucio. Limpiar condensador.
tinua sin efecto frigorfico.
Ventilacin inadecuada. Verificar y corregir la ventilacin.
Equipo congelado. Descongelar el refrigerador.
Otros procedimientos adicionales de mantenimiento requieren de herramienta e instrumentacin especializada.
DEFINICIONES BSICAS infiere que una de las consecuencias del cambio

de temperatura en un sistema es la transferen-
BTU. Unidad para determinar la transferencia cia de calor.
de calor en el Sistema Ingls. BTU es el acr-
nimo de British Thermal Unit. Un BTU es la Calora. Cantidad de calor que debe ser
cantidad de calor que debe ser transferido transferida a un gramo de agua, para que su
para aumentar la temperatura de una libra temperatura aumente 1 C. Esta definicin
de agua de 63 F a 64 F. aplica exactamente cuando, a condiciones
normales (presin atmosfrica igual a 760
Calor. Forma de energa transferida, a travs mm Hg, aceleracin de la gravedad igual a
del lmite de un sistema a una temperatura da- 9,81 m/s2), la temperatura del gramo de agua
da, a otro sistema o vecindario a una menor aumenta de 14,5 a 15,5 C.
temperatura, por virtud de la diferencia de tem-
peratura entre los dos sistemas. Cuando un sis- Calor especfico. Cantidad de calor requeri-
tema de gran masa [M] es puesto en contacto da para aumentar en un grado la unidad de
con otro sistema de pequea masa [m] que se masa.
encuentra a temperatura diferente del primero,
se observa que la temperatura resultante final Calor latente. Cantidad de energa trmica
se encuentra cerca de la temperatura inicial del requerida para que en una sustancia ocurra
sistema de mayor masa. Se dice entonces que un cambio de fase. Por ejemplo: de fase lqui-
una cantidad de calor Q ha sido transferida del da a fase vapor.
sistema de mayor temperatura al sistema de me-
nor temperatura. La cantidad de calor Q es Calor sensible. Cantidad de energa reque-
proporcional al cambio en temperatura T. La rida para aumentar la temperatura del fluido
constante de proporcionalidad [C], llamada la refrigerante, al absorber calor. Por ejemplo:
capacidad calrica del sistema, permite estable- cantidad de calor requerida para aumentar la
cer la siguiente relacin Q=CT , de la cual se temperatura de 15 a 20 C, o de 30 a 40 C.
206
Refrigerador 18
Entropa. Propiedad del estado de un siste- Fluido refrigerante. Sustancia que se utiliza
ma de mltiples partculas. Los cambios dife- como medio en los procesos de absorcin de
renciales de entropa se expresan mediante la calor.
ecuacin siguiente:
Mquina trmica. Dispositivo que opera
dQ en un ciclo termodinmico y realiza una
dS =
T cierta cantidad positiva de trabajo como re-
sultado de la transferencia de calor entre un
donde: cuerpo a alta temperatura a un cuerpo a ba-
dQ: calor absorbido de una reserva a tempe- ja temperatura.
ratura T durante un cambio infinitesimal
reversible del estado Proceso adiabtico. Proceso en el cual no
T: temperatura de la reserva hay transferencia de calor. Implica que Q = 0.
Para cualquier ciclo reversible se cumple la si-

guiente ecuacin:
dQ
S = dS = =0
T
Si el ciclo es irreversible, se tiene que:
dQ
S = T
<0
Bibliografa
General purpose laboratory refrigerator/freezer, Instruction Manual, Pittsburgh, Fisher
Scientific, Part N 102778, Rev. D, 2002.
Gordon, J., Sonntag, R., Fundamentals of Classical Thermodynamics, New York, John Wiley
and Sons, 2nd. Edition, 1976.
Hernndez, E., Fundamentos de aire acondicionado y refrigeracin, Mxico, Editorial Limu-

sa, 1973.
Instruction Manual, Fisher Scientific Isotemp Laboratory Freezers, Part N 102999, Rev. H.
Pittsburgh, Fisher Scientific Co., 2003.
Installation and Operation, Laboratory Refrigerators, REVCO.

(http://www.revco-sci.com/support/manuals/labfrz2.pdf)
Melissinos, A., Lobkowicz, F., Physics for Scientists and Engineers, vol. I, Philadelphia, W.B.
SAUNDERS CO., 1975.

207
208

Manual - de - Mantenimiento (Equipos de Laboratorio)

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MANUAL DE MANTENIMIENTO PARA

rea de Tecnologa y Prestacin

Unidad de Medicamentos Esenciales, Vacunas

Washington D. C., 2005

Tecnologa y Prestacin de Servicios de Salud (THS)

Organizacin Panamericana de la Salud, 2005

La mencin de determinadas sociedades mercantiles o de nombres comerciales de ciertos productos no im-

Captulo undcimo 107

Captulo duodcimo 121

Captulo decimotercero 139

Captulo decimocuarto 149

Captulo decimosexto 177

Captulo decimosptimo 189

Captulo decimoctavo 195

Ilustracin 1: Conjunto de equipos para pruebas ELISA 16

ANALIZADOR DE ELISA PRINCIPIOS DE OPERACIN

El analizador de ELISA es un espectrofotme- El analizador de ELISA es un espectrofotme-

Equipos requeridos para efectuar ensa- La ilustracin que se presenta a continuacin

Ilustracin 1: Conjunto de equipos para pruebas ELISA

Fases mecnicas de un ensayo utilizando pipetas multicanal, se llenan los vasos o

4. Finalmente, cuando se han completado las de color en la solucin, brindando un me-

5. Verificar si el desplazamiento de la placa se

Los filtros de calibracin disponen de al me- Mantenimiento bsico

4. Si no se dispone de filtro de calibracin, Mantenimiento preventivo

placa. Comparar las lecturas. No deben 3. Limpiar el mecanismo de avance de la placa.

Tabla de solucin de problemas

PROBLEMA CAUSA PROBABLE REMEDIO

PROBLEMA CAUSA PROBABLE REMEDIO

DEFINICIONES BSICAS reacciones. El lavador de ELISA utiliza buffers

Universal Medical Device Nomenclature System (UMDNS), Product Categories Thesaurus,

Ilustracin 2: Lavador de ELISA

Ilustracin 3: Perfiles de los pozos, tcnica de ELISA

Proceso de lavado Aspiracin y dispensacin simult-

Mantenimiento bsico Mantenimiento preventivo

1. Verificar el volumen dispensado. 1. Desensamblar y limpiar los conductos y co-

Tabla de solucin de problemas

PROBLEMA CAUSA PROBABLE REMEDIO

DEFINICIONES BSICAS pruebas de ELISA. PBS es el acrnimo de

Existen tambin placas que han recibido tra- TMB/H2O2. (Tetrametilbenzidina/Perxido de

Good technique for ELISA Assay, GTI, Inc.

Universal Medical Device Nomenclature System (UMDNS), Product Categories Thesaurus,

ANALIZADOR DE pH [HCO3]. El organismo mantiene el equilibrio

Dicho dispositivo se comporta como una cel-

Ilustracin 4: Esquema de un analizador de pH

COMPONENTES con las letras Cal 1 y Cal 2. Si el analizador

Ilustracin 5: Clases de electrodos

CIRCUITO TPICO de un analizador de pH. Cada fabricante dis-

Ilustracin 6: Circuito de control analizador de pH

Tabla 2: Descripcin elementos circuito de control

SISTEMA ELEMENTO DESCRIPCIN

SERVICIOS REQUERIDOS garantizar la calidad y exactitud de las lectu-

Tambin existen analizadores de pH de tipo 2. Calibracin de dos puntos. Se realiza si se

Los analizadores de pH normalmente deben

4.3. Colocar el electrodo en la solucin de pH Procedimientos generales de manteni-

MANTENIMIENTO GENERAL DEL

Los analizadores de pH disponen de dos pro- Frecuencia: Cada cuatro meses

14. Recordar que el electrodo es un elemento de

Tabla de solucin de problemas

PROBLEMA CAUSA PROBABLE REMEDIO

Electrodo sucio. Limpiar electrodo y calibrar.

DEFINICIONES BSICAS Una sustancia cida tiene una mayor canti-

En toda disolucin acuosa existe un equilibrio

Disolucin. Mezcla homognea de propie- Mol. Cantidad de cualquier sustancia cuya