Manual de Practicas Biometrica Hermatica PDF

Manual de prcticas de laboratorio
Biometra Hemtica
ALUMNO:
T.L.C. Sara E. Cambero Martnez

GRUPO:
C.B.T.i.s. 41 Belisario Domnguez
01/02/2012
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
Guia prctica para flebotomia ..................................................................................................... 3

INTRODUCCIN ....................................................................................................................... 3
LA SEGURIDAD PRIMERO ........................................................................................................... 3
REQUISITOS GENERALES PARA LA SEGURIDAD PERSONAL ............................................................... 3
MEDIDAS ESPECFICAS DURANTE LA FLEBOTOMA ......................................................................... 3
FACTORES PRE-ANALTICOS QUE AFECTAN LAS PRUEBAS: .............................................................. 4
INTERFERENCIAS: .................................................................................................................... 5
IDENTIFICACIN DEL PACIENTE................................................................................................... 5
LA PREPARACION DEL PACIENTE: ............................................................................................... 6
E T I C A: ............................................................................................................................. 7
PREPARACIN DEL EQUIPO ....................................................................................................... 7
EL PROCEDIMIENTO DE LA FLEBOTOMA ....................................................................................... 8
PROBLEMAS DURANTE LA EXTRACCIN VENOSA. ........................................................................ 10
LA PUNCIN CAPILAR: ............................................................................................................ 13
ORDEN DE LLENADO DE LOS TUBOS: ......................................................................................... 15
CONSIDERACIONES EN PACIENTES HOSPITALIZADOS:................................................................... 15
EXTRACCIN SANGUNEA EN PACIENTES CON VENOCLISIS: ........................................................... 16
EL ETIQUETADO: ................................................................................................................... 16
CUIDADOS DEL PACIENTE POSTERIOR A LA EXTRACCIN: ............................................................. 17
TRANSPORTE DE LA MUESTRA ................................................................................................. 17
AL TERMINAR SU LABOR.......................................................................................................... 17
Prctica 1 F l e b o t o m i a ................................................................................................... 18
Prctica 2 Recuento eritrocitario y determinacion de hematocrito ............................................. 23
Prctica 3 Dosificacion de hemoglobina .................................................................................. 30
Prctica 4 Formula roja y clasificacion de anemias .................................................................. 35
Prctica 5 Eritrosedimentacion globular y recuento de reticulocitos ........................................... 39
Prctica 6 Recuento de leucocitos totales ............................................................................... 44
Prctica 7 Recuento diferencial de leucocitos .......................................................................... 49
Anexo 1 .................................................................................................................................. 54
Anexo 2 .................................................................................................................................. 56
Bibliografia: ............................................................................................................................. 57
CUARTO SEMESTRE 2 T.L.C. SARA CAMBERO

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
GUIA PRCTICA PARA FLEBOTOMIA
Introduccin
La flebotoma constituye una de las etapas ms importantes en el trabajo del laboratorio clnico. Por una parte
representa el primer contacto entre el laboratorio y sus pacientes y desde el punto de vista de la muestra
sangunea, la enorme importancia que conlleva una muestra apropiadamente colectada, la seguridad de su
origen y el correcto envasado y transporte, constituyen factores fundamentales en la evaluacin e informe de los
exmenes a realizar.
El personal que ha de realizar la coleccin de la muestra sangunea, debe tener presente que en el trato correcto
del paciente, su orientacin y la habilidad para realizar su trabajo, est la cara del Laboratorio Clnico ante la
comunidad que ha de servir.
El presente protocolo pretende ser una gua para el personal encargado de la coleccin de las muestras
sanguneas, tal que sta funcin sea estandarizada en sus aspectos tcnicos y estableciendo las pautas
necesarias en bioseguridad y de aquellos factores que pueden afectar la calidad de la muestra.
La seguridad primero
T eres un recurso altamente entrenado y valioso.
No permitas que un accidente ponga en peligro tu vida.
T eres el nico que puede practicar y hacer cumplir los procedimientos de seguridad para tu propia
proteccin y la de tus compaeros de trabajo.
Requisitos generales para la seguridad personal
Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar bata durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio.
Cuando se va a extraer muestra, es requisito la utilizacin de guantes de proteccin. Es recomendable el uso
de lentes de proteccin.
No se permite comer ni tomar en el rea de trabajo.
No se permite fumar.
Aplicacin de cosmticos: No permitido en el rea de trabajo.
Lentes de contacto: No se permite su manipulacin en el rea de trabajo.
Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrs su cabello, de forma tal que no entren en
contacto con superficies contaminadas.
Lavado de las manos: Las manos deben ser lavadas con frecuencia durante todo el da de labor, antes y
despus del contacto con los pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio.
Medidas especficas durante la flebotoma

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Practique las precauciones universales mnimas con todo paciente a ser atendido.
Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que
garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.
Limpie su mesa antes de iniciar sus labores.
Si el paciente tose con frecuencia, colquese una mascarilla.
Evite tocar reas visiblemente infectadas del paciente.
Tome precauciones al manipular las agujas y lancetas.
No deje agujas y lancetas usadas en la mesa de trabajo; descartar inmediatamente en su contenedor
apropiado.
No coloque el protector a la aguja.
Si hay derrame de sangre, limpie con Hipoclorito de sodio al 10%.
Limpie el torniquete con alcohol etlico despus de cada extraccin.
Cambie los guantes si se han manchado de sangre u otros fluidos corporales.
Siempre que sea posible, cambie los guantes entre pacientes.
Al terminar su labor, qutese los guantes y lvese bien las manos.
Si ocurre un pinchazo con aguja conteniendo sangre de un paciente HIV positivo, informe inmediatamente al
jefe del laboratorio y dirjase a la clnica del empleado o a riesgos profesionales.
Evite que los nios toquen o jueguen con los equipos de la flebotoma.
Factores pre-analticos que afectan las pruebas:

Es importante tener presente que existen muchos factores que pueden afectar las pruebas de laboratorio,
algunos de los cuales pueden ser evitados con una adecuada orientacin al paciente y una correcta tcnica de
extraccin sangunea. A continuacin enumeraremos algunos de estos factores y recomendaciones al respecto.
1. La ansiedad y la tensin mental o fsica puede afectar los niveles de muchos componentes sanguneos.
Tal es el caso de las concentraciones de Prolactina, Cortisol, Catecolamina, Aldosteronas y Renina.
Tambin puede elevar la cuenta de leucocitos.
2. Se recomienda evitar ejercicios fsicos vigorosos durante 3 das previos a la toma de muestra, ya que
pueden alterar los niveles de CPK, LDH, AST potasio, glucosa, lactato, prolactina y cortisol.
3. El ritmo diurno de algunos fluidos corporales muestran fluctuaciones durante el da. Por ejemplo los
niveles de cortisol son altos en la maana, pero decrecen en la tarde. Los niveles de hierro tienden a
caer durante el da.
4. La situacin diettica del paciente puede ser importante para ciertas pruebas. Tal es el caso de las
variaciones en la concentracin de lpidos despus de una comida grasosa. El suero sanguneo muestra
una apariencia lechosa debido a la presencia de triglicridos y quilomicrones. Estos sueros
hiperlipidmicos influyen en las mediciones, por lo que se recomienda tomar muestra despus de un
periodo de ayuno, usualmente de toda la noche.
5. La ingestin de etanol induce cambios en la composicin de los lpidos corporales. De particular inters
son las enzimas hepticas, como la fosfatasa alcalina, transaminasas, gama glutamil transferasa y otros
componentes como la glucosa, triglicridos, uratos y lactato.
6. El fumar puede producir variaciones en los resultados de algunos componentes como la lipasa, amilasa,
colesterol, glucosa e igualmente afecta la absorcin gstrica en la prueba de tolerancia a la glucosa.
7. La ciruga y la inyeccin intramuscular provoca un aumento en la concentracin de creatincinasa.
8. La exploracin rectal o la manipulacin prosttica, puede causar un aumento en la concentracin del
antgeno prosttico especfico.
9. Los anticonceptivos orales afectan profundamente la actividad estrognica y conducen al aumento de
muchas protenas como la tiroxina, cortisol y las hormonas sexuales.
10. Medicamentos como barbitrico y fenitoina, inducen enzimas hepticas con valores elevados.
11. Evite extraer sangre arriba de una inyeccin intravenosa previa, ya que las concentraciones de muchos
compuestos pueden resultar errneamente altos o bajos.

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12. Evite provocar hemlisis durante el proceso de extraccin o llenado de los tubos, lo cual afectar
algunas pruebas relevantes. La hemlisis puede ocurrir tambin por exceso de residuos del alcohol
utilizado durante la desinfeccin del sitio a puncionar. Tambin puede ser debido a un incremento en la
fragilidad capilar y alto volumen de clulas empacadas, especialmente en recin nacidos.
13. Evite agitar con fuerza los capilares para microcoleccin de muestra, ya que puede provocar su
hemlisis.
14. Evite puncionar en un rea con hematoma, fstulas, quemaduras, escoriaciones de la piel, cicatrices o
del costado en que se ha realizado mastectoma reciente.
15. Verifique condiciones de ayuno para las pruebas que lo requieran.
16. Las pruebas seriadas como curvas de tolerancia, post-prandial, post-ejercicios, etc. deben monitorearse
en el tiempo adecuado, por lo que tienen prioridad.
17. En el caso de las pruebas seriadas, deben rotularse los tubos con la hora de toma de la muestra.
Interferencias:
Los tubos con anticoagulante deben invertirse suavemente y colocarlos en posicin vertical, para evitar el
contacto prolongado con el tapn de caucho.
Algunos compuestos se pueden adsorber al tubo. Tal es el caso de la hormona ACTH y la paratiroidea que se
adsorben al vidrio con facilidad, por lo que se recomienda tubos de plstico.
Los separadores de suero se utilizan para separar el suero libre del cogulo de sangre. Estos pueden ser de
gel de silicn, poliester o perlas de vidrio. En algunos casos debido a problemas en la centrifugacin y a altas
temperaturas, pueden quedar gotas de gel dentro del suero. Se ha demostrado que estas gotas de gel
pueden interferir con algunas mediciones. Es conocido que la progesterona se reduce apreciablemente
cuando se almacena sobre gel por varios das. Igualmente ocurre con la lidocana, fenobarbital, fenitoina y
Carbamacepina.
Algunas hormonas polipeptdicas de bajo peso molecular, como la ACTH, glucagn, gastrina y otras
hormonas intestinales, se destruyen rpidamente por enzimas presentes en la sangre. Por lo que es
necesario centrifugar la muestra a baja temperatura, 10 minutos despus de la toma y almacenar el suero o
plasma inmediatamente a 20 C.
Aquellos tubos con anticoagulantes deben ser llenados exactamente hasta la marca, cualquiera sea el
mtodo que se utilice para extraer la sangre, para evitar que la concentracin del anticoagulante sea
demasiada alta, tal que afecte el sistema de medicin.
Identificacin del paciente

Todas las muestras deben ir acompaadas de una solicitud debidamente formulada. La solicitud debe contener la
siguiente informacin:
a) La identificacin completa del paciente:
Nombre completo
Sexo
Nmero de cdula o seguro social
Datos para su localizacin
Sala y nmero de cama si est hospitalizado
Nmero de telfono si es ambulatorio
b) Mdico solicitante:
Nombre completo
Especialidad
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Registro
c) Pruebas que se realizarn
d) Es deseable que la solicitud incluya informacin clnica de utilidad
Diagnstico
Ingestin de drogas
Restricciones especiales
e) Fecha de orden y fecha de coleccin
f) Iniciales del flebotomista
g) Hora de extraccin.
LA PREPARACION DEL PACIENTE:

La primera impresin y las observaciones inmediatas pueden ser tiles para el flebotomista. Ayudarn a
establecer el tipo de paciente, el sitio de la puncin, las precauciones necesarias y la forma correcta para el trato
del paciente.
El paciente espera de usted un trato profesional, corts y de comprensin, ya que l est frente a usted porque le
aqueja su salud. La comunicacin afectiva es determinante en la relacin con el paciente.
Hable con el paciente. Explique el procedimiento a seguir.
Identificacin del paciente:
La identificacin correcta del paciente es obligante. Pregunte su nombre completo y nmero de cdula o seguro
social. Si se trata de un paciente hospitalizado, observe su brazalete de identificacin y su nombre en la cama.
Vigilancia del paciente:

Observe si el paciente est sudoroso, agitado, sedado.
Personalidad del paciente:

Observe si el paciente es agresivo, arrogante, conflictivo.
Evite cualquier discusin con el paciente. De ser as, llame al jefe del laboratorio. Trate de calmarlo y sea
comprensivo. Sin embargo, usted siempre tiene la opcin de no atender un paciente agresivo que pueda causar
lesin a usted o a s mismo. Comunique de sta situacin a la persona encargada de la sala.
Si se trata de un nio agresivo o combativo, solicite ayuda para hacer la extraccin.

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E T I C A:
En todo momento debe mantener la tica y confidencialidad del paciente y sus pruebas. Los Cdigos de tica de
los trabajadores de la salud, prohben estrictamente que los aspectos de salud del paciente sean divulgados con
propsitos no profesionales.
Se deben evitar crticas, temas polticos, atencin de asuntos personales y conversaciones que distraigan o
dilaten la adecuada atencin del paciente.
No d preferencia a familiares ni amistades, tal que afecte la atencin de los pacientes.
Preparacin del equipo
Tubos de coleccin: Los tubos estn predeterminados para llenarse con un determinado volumen de sangre
por vaco. El tapn de caucho est codificado por color, de acuerdo a su uso o sus aditivos.
TUBO CON TAPON ROJO

USO: Qumica, Inmunologa, Banco de sangre
ADITIVO: Ninguno
TUBO CON TAPON ROJO

USO: Qumica
ADITIVO: Gel - Separador
TUBO CON TAPON MORADO

USO: Hematologa
ADITIVO: Anticoagulante EDTA
TUBO CON TAPON CELESTE

USO: Pruebas de Coagulacin
ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio
Agujas: Estn numeradas dependiendo de su calibre. Para coleccin de sangre para hemogramas, se
recomienda una aguja de un dimetro de 0.8 mm (21G) para evitar dao a las clulas. Las agujas de 0.9 mm
a 1.1 mm de dimetro (20G 19G) se utilizan normalmente para puncin venosa en adultos.
Jeringuillas: De 3, 5, 10 y 20 cc
Adaptador para tubos-Vacutainer: Se utilizan para tubos al vaco.

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Torniquete: Recomendable de 2 tamaos para adultos y nios y de preferencia deben ser planos.
Alcohol: Etlico o Isoproplico al 70%.
Algodn
Gasa
Guantes
Curita o venda adhesiva
Iodo.
Frascos para hemocultivos.
El procedimiento de la flebotoma
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones ms favorables para evitar errores. Esto incluye la
absoluta identificacin del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en
posicin cmoda, de preferencia en una silla especial para venipuncin con descanso para los brazos y si est en
cama, preferiblemente acostado.
Seleccin del sitio a puncionar:
Al proceder a seleccionar el sitio a puncionar, evite reas con hematoma, fstulas, quemaduras, escoriaciones de
la piel o cicatrices. Si se trata de un paciente hospitalizado evite tomar muestra de un brazo que se est utilizando
con venoclisis o del costado en que se ha realizado una mastectoma reciente.
La palpacin:
Antes de proceder a puncionar, se debe escoger la vena. La mejor manera es realizando una palpacin de las
mismas para esa decisin. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadas por arriba del sitio seleccionado, para
visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por ms de 3 minutos, para evitar la
hemoconcentracin.
Las venas ms utilizadas para la venipuncin, estn localizadas en el rea antecubital. Entre stas tenemos:
a) Vena Cubital: Es la ms larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del
brazo.
b) Vena Ceflica: Tiene iguales caractersticas de la anterior, pero es un poco menos gruesa.
c) Vena Baslica: Es ms pequea que las anteriores. Esta vena est cerca de la arteria braquial, por lo
que su puncin es riesgosa y su rea es ms sensible y dolorosa para el paciente.

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Al palpar hgalo con la punta de sus dedos, tratando de seguir el rastro de las venas. Aqu tambin son tiles sus
conocimientos en la anatoma de las venas de las extremidades superiores. En ocasiones si no visualiza la vena,
puede forzar la sangre dentro de la vena a travs de un suave masaje de abajo hacia arriba.
PALPACIN DE LAS VENAS
La Descontaminacin:
Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe proceder a descontaminar el rea con alcohol etlico o
isoproplico al 70% utilizando algodn y con movimientos circulares del interior al exterior. Debe tener presente
que una vez realizada la descontaminacin, no debe volver a tocar el rea venosa.
DESCONTAMINACION DEL AREA
La puncin venosa:
Ahora est preparado para realizar la extraccin sangunea.
El brazo debe estar preferiblemente en posicin cmoda horizontalmente. Con el torniquete en posicin, haga
que el paciente cierre y abra el puo de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puo
cerrado.
Si se trata de un nio, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del codo del paciente, para evitar
que doble el brazo durante la extraccin.
Extraccin con jeringuilla:
Cuando vaya a proceder a realizar la extraccin con jeringuilla, usted debe tener presente el calibre a utilizar y el
tamao de la jeringuilla segn el volumen a extraer.
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a) Coloque la punta de la aguja en un ngulo de 15 a 30 grados sobre la superficie de la vena escogida y atraviese
la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el lumen de la vena.
b) Apretando firmemente la jeringuilla, debe jalar el mbolo con movimiento continuo para extraer la sangre
hasta el volumen requerido. Evite presionar fuertemente la aguja durante la extraccin.
c) Afloje el torniquete para que la sangre fluya mejor y remueva la aguja del brazo con movimiento suave al
terminar de colectar, sin apretar el rea de la puncin con el algodn.
d) Presione el algodn sobre el sitio de la puncin aplicando una presin adecuada y no excesiva para evitar
la formacin de hematoma.
e) Llenar los tubos en su orden.

f) Descarte la jeringuilla y aguja en un contenedor apropiado.
g) Colocar un curita o venda en el sitio de la puncin.
Problemas durante la extraccin venosa.

Diversos problemas pueden surgir durante la coleccin de sangre venosa y pudiera no obtenerse sangre o su
coleccin sea incompleta.
a) Colocacin correcta de la aguja:

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Coloque la aguja con el bisel hacia arriba

b) Cambio en la posicin de la aguja. Movimiento de retroceso que
la saca del lumen venoso.
c) Movimiento hacia delante que atraviesa la vena.
c) Movimiento de la aguja, tal que el bisel de la aguja quede contra la pared de la vena, afectando la entrada de la
sangre
d) Colapso de la vena:
En estos casos, afloje el torniquete para incrementar el flujo sanguneo, remueva la aguja ligeramente y vuelva a
redireccionarla.
d) Formacin de hematoma:
Si se forma un hematoma bajo la piel adyacente al sitio de la puncin, afloje el torniquete y retire la aguja. Aplique
presin firmemente sobre el hematoma.
e) Sangre arterial:

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Pudiera suceder que se atraviese una arteria, en estos casos la sangre se observa de un color rojo brillante.
Retire la aguja y aplique presin por 5 minutos.
Como prevenir los hematomas:
Puncione solamente la pared superior de la vena.

Remueva el torniquete antes de remover la aguja.
Escoja las venas superficiales mayores.
Aplique presin sobre el sitio de la puncin.
Como prevenir la hemlisis:
La hemlisis de una muestra sangunea puede ocurrir por diversas razones entre las que se pueden enumerar:
o Trauma con una aguja de calibre muy pequeo.
o Por contaminacin con agentes antispticos.
o Agitacin violenta o excesiva de los tubos.
o Demasiado tiempo en ser analizadas las muestras o en ser separado el cogulo de sangre.
o Incremento en la fragilidad capilar de los eritrocitos o alto volumen de clulas empacadas,
especialmente en neonatos.
o Presin excesiva para mejorar el flujo sanguneo.
o En tubos no llenados al vaco, puede ocurrir hemlisis al llenarlos haciendo una fuerte presin
sobre el mbolo provocando un chorro de sangre muy fuerte.
Los componentes ms afectados son aquellos cuya concentracin son ms altas en las clulas que en el plasma,
por ejemplo, in potasio, fosfato, deshidrogenasa lctica, aspartato aminotransferasa, hierro srico, etc. De ms
est decir que la hemlisis afecta en diversa medida la lectura espectrofotomtrica de los componentes
sanguneos.
La hemlisis puede ser prevenida tomando en cuenta los siguientes elementos:
a) Mezcle los tubos con aditivos anticoagulantes lentamente por 5 a 10 veces, inmediatamente despus
de ser llenado el tubo.
b) Evite extraer sangre de un hematoma.
c) Acerque el bisel de la aguja a la pared interna del tubo, para evitar el choque fuerte de la sangre
contra el fondo del tubo.
d) Est seguro que el sitio de la puncin est seco del antisptico.
e) Evite una puncin traumtica.
f) Evite la agitacin vigorosa de los tubos.
g) Evite el calentamiento de los tubos.

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Causas de la Hemoconcentracin:
o Aplicacin prolongada del torniquete. La presin hidrosttica causa que algo de agua y
elementos filtrables escapen al espacio extracelular. Esto tiene efectos tambin sobre el
empaque celular.
o Masaje vigoroso del sitio a puncionar.
o Esclerosis u obstruccin venosa.
Extraccin con vacutainer:
En ocasiones, especialmente cuando se requiere colectar muchos tubos para diversas pruebas en secciones
distintas, es sumamente til el uso del adaptador vacutainer o similar, el cual nos permite llenar cuantos tubos
sean necesarios.
En estos casos, una vez hecha la puncin, sostenga firmemente el vacutainer con una mano y con la otra inserte,
llene y retire cuantos tubos requiera.
EXTRACCION CON VACUTAINER
La Puncin Capilar:
La obtencin de sangre por puncin capilar es particularmente til en las siguientes circunstancias:
1. Si la puncin venosa es peligrosa para el paciente.

2. No se puede accesar las venas recomendadas.
3. Las venas se estn utilizando para administrar medicamentos.
4. El volumen de sangre requerido no justifica una extraccin venosa.
Estas circunstancias se aplican a:
a) Neonatos.
b) Lactantes.
c) Nios.
d) Adultos con quemaduras severas.
e) En pacientes muy obesos.
f) En caso de terapias intravenosas.
La puncin cutnea se puede llevar a cabo en:
a) La superficie ms lateral o ms medial de la planta del pie.
b) La superficie medial plantar del dedo gordo del pie.
c) La superficie lateral del dedo medio o anular, preferiblemente.
d) El lbulo de la oreja, evitando la mejilla.

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TIPOS DE PORTA-LANCETA
El procedimiento de la Puncin Capilar:
Una vez escogido el sitio de la puncin, puede dar un ligero masaje al rea para concentrar la sangre.
Limpie el sitio con alcohol etlico o isoproplico al 70%.
Con una mano sostenga el dedo o rea a puncionar y con la otra sostenga la lanceta.
Haga la puncin con la lanceta, realizando un movimiento rpido, firme y profundo.
Despus de puncionar, descartar la primera gota de sangre, que contiene lquido tisular, limpindolo con el
algodn.
Presione el dedo para hacer salir la sangre, procurando sea de manera ininterrumpida.
Una vez tomada la muestra, sellar los tubos capilares con sellador o los microtubos con su tapa.
Los microtubos y capilares con anticoagulantes deben ser invertidos suavemente por lo menos 10 veces para
evitar su coagulacin.
Coloque el algodn sobre el sitio puncionado haciendo presin para parar el sangramiento.
SITIO RECOMENDADO PARA LA PUNCION CAPILAR
Consideraciones adicionales de la puncin capilar:

a) La mala circulacin causa modificaciones en la concentracin de ciertos componentes sanguneos, por ejemplo
el in potasio y del fosfato, debido a la contaminacin con lquido tisular, causada por la presin que se aplica para
obtener la muestra.
b) Al escoger el sitio de la puncin, evite hacerlo en dedos con quemaduras, excoriaciones o cianticos.
c) Las muestra para mediciones de Ph y gases sanguneos en tubos capilares de vidrio heparinizados deben ser
llenados sin formacin de burbujas de aire. Sellar inmediatamente un extremo del tubo y coloca una pequea
barra magntica en direccin ascendente dentro del tubo. Colocar en agua con hielo, evitando la contaminacin de
la muestra.
PUNCION CAPILAR CON PORTA-LANCETA
Coleccin en Neonatos:
El pie del neonato es el sitio apropiado para colectar muestra sangunea por puncin capilar.
Es recomendable la pre-limpieza del pie con una gasa tibia para incrementar el flujo sanguneo.
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El siguiente diagrama ilustra con el color verde los sitios de puncin recomendados.
Limpie el rea seleccionada con alcohol etlico al 70%.

Mantenga firmemente el pie del neonato para evitar cualquier movimiento.
Usando una lanceta estril realice la puncin con movimiento rpido, firme y profundo.
Limpie con el algodn la primera gota obtenida. Utilice una ligera presin para obtener las gotas de
sangre requeridas. No haga presin excesiva o masajes, que puedan provocar que la sangre se diluya
con lquido tisular.
Llene los microtubos requeridos.
TUBOS DE MICRO-COLECCION
Al terminar mantenga presin sobre el sitio de la puncin con gasa o algodn para parar el
sangramiento.
Descarte la lanceta en un receptculo apropiado.
Orden de llenado de los tubos:

La sangre coleccionada debe ser llenada en un orden especfico para evitar contaminacin cruzada de aditivos
entre los tubos. El orden recomendado es el siguiente:
1. El primer tubo a ser llenado es el de hemocultivo, si tambin se ha ordenado sta prueba.

2. Los siguientes tubos corresponden a los tubos sin aditivos, tal es el caso de los tubos con tapn rojo para
qumica y serologa.
3. Los tubos para pruebas de coagulacin, indicados por el tapn celeste. Estos tubos Nunca pueden ser los
primeros.
4. Los siguientes tubos son aquellos que contienen aditivos especialmente para evitar coagulacin, as:
o 4.1 - Tubo con heparina (Tapn verde oscuro)
o 4.2 - Tubo con EDTA (Tapn color lavanda).
o 4.3- Tubo con Oxalato (tapn verde claro).
Nota: Los tubos con aditivos deben ser rpida y completamente mezclados.
Consideraciones en pacientes hospitalizados:

Los pacientes hospitalizados constituyen el mayor reto para el flebotomista. Ello incluye circunstancias muy
especiales tales como pacientes gravemente enfermos, en ocasiones en estado de coma, con equipo de soporte
respiratorio, quemaduras graves, pacientes psiquitricos, neonatos en incubadoras, etc. que exigen un esfuerzo
especial al personal encargado de la extraccin de sangre.
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Por todo lo anterior enumeraremos algunas recomendaciones que han de ser tenidas en cuenta al momento de
atender estos pacientes:
a) Debe haber una plena identificacin del paciente. Si el paciente est despierto, pregntele su nombre. En todo
caso debe comprobar la identificacin del paciente con el nombre colocado en la cama y su brazalete de
identificacin que puede estar en el brazo o el tobillo.
b) Tome en cuenta todos los aspectos explicados referente a pacientes con venoclisis o que reciben drogas
intravenosas.
c) Pida ayuda cuando va a atender pacientes psiquitricos o agresivos, para evitar causarle un dao durante la
puncin.
d) Limpie con alcohol el torniquete despus de cada extraccin.
e) Siga las instrucciones de bioseguridad con todos los pacientes, especialmente las indicadas en la entrada de
las salas de pacientes potencialmente peligrosos.
f) No colecte sangre de una extremidad edematosa.
g) En caso de pacientes con lnea arterial, las muestras de sangre deben ser extradas por el mdico, a excepcin
de la muestra por tiempo de coagulacin, que debe ser tomada del otro brazo y lo cual puede hacerlo el tcnico.
Extraccin sangunea en pacientes con venoclisis:

A pesar de que ste procedimiento no est indicado para ser realizado por el personal de flebotoma del
laboratorio clnico, hemos adicionado el mismo con la intencin de que el personal conozca el procedimiento para
extraer sangre por debajo del sitio intravenoso.
o Cierre la llave del fluido intravenoso, al menos 2 minutos antes de hacer la puncin.
o Aplique el torniquete por debajo del sitio intravenoso.
o Seleccione una vena diferente a la utilizada en la conexin intravenosa existente.
o Realice la puncin. Deje escapar aproximadamente 5 ml de sangre y descrtela antes de
colectar la muestra para los exmenes.
o Retire el torniquete.
o Aplique presin sobre la vena para parar el sangramiento.
o Abra la llave del fluido intravenoso.
o No se retire sin confirmar que el paciente est bien.
Nota: No se debe colectar sangre obtenida de un brazo con fstula, cnula o heparina, sin consultar al mdico
tratante o a la enfermera.
El Etiquetado:
El etiquetado de los tubos debe realizarse inmediatamente posterior a la extraccin sangunea. Es incorrecto
rotular los tubos previamente a la puncin. En el caso de pacientes hospitalizados, sta tarea se realiza en la
cama del paciente.
El etiquetado puede incluir:
a) Nombre del paciente

b) Nmero de cdula o seguro social, el cual debe coincidir exactamente con el formulario de
solicitud de examen.
c) Fecha de la puncin. Colocar la hora si es muestra seriada.
d) Iniciales del flebotomista.

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BIOMETRIA HEMATICA
Una muestra del etiquetado de los tubos puede ser el siguiente:
CUIDADOS DEL PACIENTE POSTERIOR A LA EXTRACCIN:

Una vez realizada la extraccin, es nuestra responsabilidad asegurarnos que el paciente se encuentra apto para
levantarse de la silla y retirarse. Algunos pacientes sufren de mareos, debilitamiento y desmayo posterior a una
extraccin.
Para evitar que se caiga y se haga dao, debemos observarlo y preguntarle si est bien, antes de indicarle que se
retire.
Si el paciente est sudoroso, con la cara muy blanca o tiembla, pudiera necesitar nuestra ayuda, ya sea
hacindole oler sales de amonio o alcohol. En caso de posible desmayo, debemos indicarle que coloque la
cabeza entre sus piernas, para ayudar a irrigar de sangre su cerebro.
Si fuera necesario, podemos acostarlo hasta que se reponga.
En el caso de los nios, debemos asegurarnos que mantengan el curita o venda para evitar sangramiento
posterior.
Los pacientes especialmente los ancianos que estn en ayunas, debemos darle indicaciones para que pronto
desayunen, a fin de evitar desmayos.
Transporte de la muestra
Una vez que se haya colectado la muestra sangunea, sta debe ser llevada pronto al laboratorio para su
procesamiento. Algunas pruebas exigen que el suero sea separado cuanto antes del cogulo sanguneo, para
evitar alteraciones en la composicin o niveles de algunos metabolitos.
De ms est decir que la muestra debe ser acompaada por su correspondiente formulario de solicitud de
examen.
AL TERMINAR SU LABOR
Una vez terminada su labor en la extraccin de muestras sanguneas el personal tiene la obligacin de dejar
limpio y ordenado su puesto, con el fin de que el mismo pueda ser utilizado por otro personal con las condiciones
apropiadas de trabajo.
Esta labor incluye la limpieza del rea, el ordenamiento de los tubos, jeringuillas y agujas sobrantes y la
colocacin de restos de basura en su recipiente.
Al terminar sus funciones, debe informar al jefe de sala o a la persona asignada para su relevo, con el fin de
mantener la continuidad de las labores.

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BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA No. 1
FLEBOTOMIA
OBJETIVO:
Aplicar sus conocimientos previos de la anatoma del sistema circulatorio, para realizar una extraccin
sangunea venosa. Concientizndose de la importancia de su desempeo en la rehabilitacin del paciente, a si
mismo, valorando las medidas de tica y bioseguridad.
INTRODUCCION:
FLEBOTOMIA: es el proceso de colectar sangre como una medida teraputica, con el fin de diagnosticar
adecuadamente la causa de la enfermedad.
VENIPUNTURA: o venipuncin, es la extraccin de sangre por una vena.
Los lugares ms habituales de realizar esta puncin son la flexura del codo, venas de la mano, mueca y tobillo.
En la flexura del codo existe una anastomosis especial entre la vena baslica y ceflica formado entre ellas una
especie de anclaje que evita que estas venas se muevan lo que facilita la flebotoma.
PUNCION CAPILAR
Este tipo de flebotoma se utiliza en pacientes que no permiten una adecuada puncin venosa; facilita al
flebotomista la obtencin de muestra sin causar traumatismos al paciente.
Esta puncin capilar se realiza en las yemas de los dedos de las manos, en el lbulo de la oreja o en los
talones de los pies.
A continuacin se mencionaran algunas de las ms frecuentes causas en las que se recomienda
puncin capilar:
En pacientes quemados severamente, quienes presentan deshidratacin y su circulacin sangunea es
deficiente.
En pacientes de oncologa cuyas venas se reservan con fines teraputicos (quimioterapia).
En pacientes obesos cuyas venas son demasiado profundas.
En pacientes geritricos en los que las venas son poco accesibles y demasiado frgiles.
En nios y bebes prematuros cuyas venas son inaccesibles.

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BIOMETRIA HEMATICA
En el caso de los bebes prematuros o nios menores de 1 ao se recomienda hacer la puncin capilar en la
planta de los pies, en las zonas laterales, evitando la parte central, que es donde se concentran gran cantidad de
arterias y venas axial como el hueso, pudiendo ocasionar infecciones o daos en tendones y cartlagos.
Sin embargo este tipo de punciones (capilar en dedo y en taln) puede frecuentemente sufrir hemlisis, esto
debido ha:
Que se presiona demasiado el dedo o el pie, lo que evita una buena circulacin sangunea.
Fragilidad en los eritrocitos, esto es frecuente en los recin nacidos.
Que en la piel no se haya secado el alcohol al hacer la puncin, provocando la hemlisis.
MATERIAL:
1. Jeringas (5 10 mL).
2. Agujas desechables.
3. Torniquete.
4. Torundas de algodn o gasas.
5. Alcohol isoproplico al 70 %.
6. Tubos desechables adecuados a la muestra requerida.
7. Gradilla.
8. Recipiente de recoleccin para desechos infecto-contagiosos.
9. Banda adhesiva.
PROCEDIMIENTO:
1. RECEPCION DEL PACIENTE.- Es sumamente importante recibir al paciente con amabilidad, establecer
una comunicacin cordial y atenta para lograr su confianza. Por lo tanto, se debe llevar un registro
adecuado del paciente, y as evitar confusiones y errores tanto de la o las muestras que se le van a
obtener, as como de sus resultados. Se sugiere considerar los siguientes aspectos :
a. Nombre, sexo y edad del paciente.
b. Nmero de registro.
c. Fecha y hora en que la muestra fue tomada.
d. Nombre del mdico que atiende al paciente.
e. Diagnostico presuntivo.
f. Frmacos administrados.
g. Nombre o iniciales de la persona responsable de la flebotoma.
2. El paciente debe de estar en una posicin cmoda, en un lugar iluminado y accesible al tcnico.
3. Preguntarle al paciente a qu hora fue su ltima comida.
4. Colocar el torniquete.
5. Localizar la vena a puncionar, en caso de no ser visible, utilizar el tacto palpando la vena; cuando el
paciente tiene venas difciles de palpar, ya sea porque son muy delgadas o estn ocultas, es necesario

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BIOMETRIA HEMATICA
dar un masaje al brazo hacia abajo, estimulando la circulacin sangunea; bajar los brazos del paciente
para que las venas se llenen de sangre por la gravedad; o aplicarle compresas con agua caliente en el
brazo (con el calor las venas se ensanchan , logrando as su visualizacin).
6. Hacer asepsia de la zona a puncionar, en UN SOLO SENTIDO con una torunda con alcohol isopropilico.
7. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba y siguiendo la trayectoria de la vena.
8. Extraer la sangre, girando poco a poco el mbolo de la jeringa hacia fuera.
9. Quitar el torniquete.
10. Sacar la aguja de un solo movimiento, sin lastimar
11. Presionar con la torunda de algodn, a forma de compresa, el sitio de la extraccin.
12. Trasvasar la sangre a los tubos segn sea el uso de la muestra.
13. Rotular tubos con la muestra.
14. Aplicar una banda adhesiva en el sitio de la puncin.
REACCIONES QUE PUEDE PRESENTAR EL PACIENTE DURANTE LA FLEBOTOMIA:

Desmayo: Se recomienda suspender la extraccin, retirar la aguja, bajar los brazos y la cabeza del
paciente y colocarle compresas de agua fra en el cuello.
Nauseas: Aplicar compresas de agua fra, preparar un recipiente en caso de evacuacin.
Shock hipoglucemico: Los primeros signos son: sudor fro, semblante plido, debilidad, temblores
corporales y confusin mental.
Convulsiones: El paciente puede estar inconsciente o con movimientos convulsivos, NO restringir los
movimientos, retirar los muebles que puedan ocasionarle dao; generalmente la convulsin pasa en
pocos minutos. Llamar al mdico en caso necesario.
Paro cardiaco: El paciente estar sin pulso ni respiracin, las pupilas dilatadas y la piel con un tono azul
o gris. Inmediatamente acudir a personas certificadas en resucitacin cardio pulmonar, y llamar al
mdico.
PARTES DE LA JERINGA Y AGUJA
BISEL

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BIOMETRIA HEMATICA
REPORTE DE LABORATORIO
Ensenada, Baja California a _______ de _____________________ del 20 _____
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO: (explique su experiencia personal durante la extraccin de sangre, al desempear los papeles de
paciente y de flebotomista)
Nombre y firma de quien realiz el estudio:

EST. T.L.C.
Nombre y firma de quien supervis el

estudio: T.L.C.

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BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 1
1. Con sus propias palabras explica que es FLEBOTOMIA?
2. Cules son los sitios ms comunes para realizar una flebotoma?
3. En qu casos se puede realizar una puncin en el taln del pie?
4. Mencione 5 datos importantes del paciente durante la recepcin, para realizar un adecuado registro de sus
exmenes a realizarle:
5. Si tenemos a un paciente con venas difciles de visualizar, que se sugiere hacer, para realizar una
extraccin exitosa?
6. Investigue y explique el trmino: hemolisis

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BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA No. 2
RECUENTO ERITROCITARIO Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO
INTRODUCCION:
EL RECUENTO DE ERITROCITOS es un examen de sangre que determina el nmero de glbulos rojos (GR)
que tiene una persona. La cantidad de oxgeno recibida por los tejidos corporales depende de cuntos glbulos
rojos tenga la persona y de qu tan bien stos estn funcionando. El recuento de eritrocitos, leucocitos y
plaquetas son expresados en concentracin (clulas por unidad de volumen de sangre); en este caso que es el
mtodo manual es de mm.
FUNDAMENTO DEL METODO MANUAL:

Para EL RECUENTO DE ERITROCITOS, la sangre se diluye con una solucin isotnica, conservando ntegros a
los eritrocitos, impidiendo a su vez, que se hinchen o se contraigan, pero tambin esta solucin destruye a los
leucocitos. Luego, esta dilucin se coloca en una cmara de Neubauer con la ayuda de una pipeta automtica,
Pasteur o de Thoma y se cuentan cada uno de los eritrocitos al microscopio con el objetivo de 40X, para calcular
el nmero de eritrocitos por mm.
Es preciso que cuando se interprete los resultados del conteo eritrocitario, se complemente con otras medidas de
la biometra hemtica, es decir, con la hemoglobina, el hematocrito, la VCM, la HCM y la VMHC.
No obstante, los valores disminuidos pueden deberse a:

Alteraciones dietticas
Anemias ocasionadas por causas varias
Cncer
Enfermedades sistmicas
Embarazo
Fibrosis de mdula sea
Hemorragias
Los valores aumentados a:
Cardiopatas
Enfermedades pulmonares crnicas
Estancias en lugares de gran altitud
Poliglobulia de diferentes causas.
El hematocrito
Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologas, como es el caso de
las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total,
o lo que es lo mismo, el porcentaje de clulas que transportan oxgeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugacin. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relacin porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
La finalidad que se persigue con esta prueba es la de confirmar el diagnostico de varias patologa o afecciones.
Los valores altos de hematocrito puede deberse a afecciones tales como:
Cardiopatas
Hemoconcentracin o eritrocitosis
Deshidratacin
Eclampsia durante el embarazo
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BIOMETRIA HEMATICA
Enfermedades pulmonares crnicas

Policitemia primaria o secundaria
Shock
Sin embargo, los valores disminuidos nos pueden indicar:
Anemia
Hemodilucin
Hemorragia
Fallos en la mdula sea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc.)
Embarazo
Hemorragias
Hipertiroidismo
Hemolisis por una transfusin
Leucemia
Problemas de alimentacin
Artritis reumatoide.
MATERIAL BIOLOGICO:
Sangre total
REACTIVOS:
Liquido de Hayem o solucin de Dacie
E.D.T.A. al 10 %
MATERIAL NECESARIO:
Pipeta de Thoma
Hemacitmetro (cmara de Neubauer)
Boquilla
Microscopio
Contador celular
Tubos capilares
Micro centrfuga
Plastilina selladora
PROCEDIMIENTO:
Para recuento de eritrocitos:
1. Obtener sangre total siguiendo el protocolo ya conocido
2. Con la boquilla y la pipeta de Thoma aspirar sangre hasta la marca 0.5 (SIN BURBUJAS)
3. Aspirar diluyente (Hayem o Dacie) hasta la marca 101 de la pipeta
4. Agitar la pipeta por 3 min.
5. Desechar las 5 o 6 primeras gotas de la pipeta de Thoma
6. Colocar el cubreobjetos sobre la cmara de Neubauer y llenarla, tratando que fluya libremente por
difusin el liquido evitando llenar en exceso o formacin de burbujas
7. Dejar en reposo 2 o 3 minutos el Hemacitmetro con el fin de que los eritrocitos sedimenten
8. Localizar la cuadricula de la cmara de Neubauer con el objetivo seco dbil (10X); enseguida enfocar
con seco fuerte (40X)
9. El recuento se realizara en los cuadros ms pequeos de la cmara, contando los hemates localizados
en los 4 cuadros de los extremos y en el del centro, haciendo un total de 5 cuadros. (VER FIGURAS
MAS ABAJO)
10. Realizar los clculos para determinar la cantidad de eritrocitos resultantes
Nota: Se puede realizar con la pipeta automtica, se toma 20 L (0,02mL) de sangre total con anticoagulante, o
sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que contenga 4 mL de solucin de Hayem (aqu se tiene una

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BIOMETRIA HEMATICA
dilucin de 1:200). Se deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cmara con la misma
pipeta usando un nuevo tip.
PARTES DE LA PIPETA DE THOMA:
ILUSTRACION PARA EL LLENADO DE LA CAMARA DE NEUBAUER
CONTEO DE GLOBULOS ROJOS

Cuadrantes dentro de la camara de neubauer donde se realizara el conteo celular, contaremos cada uno de los
globulos rojos que encontremos en los cuadrantes que estan marcados con la letra R y en el orden como se
indica en las flechas

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BIOMETRIA HEMATICA
De los 25 cuadrados en que se encuentra subdividido, se cuentan los cuatro angulares y el central, con un
recuento total representativo de 1/5 de milmetro cuadrado. Sobre la base de una dilucin de 200, de un recuento
2
de 1/5 mm y una profundidad de 0.1 mm, el clculo se efecta como sigue:
3
Eritrocitos contabilizados X 5 X 200 X 10 = NUMERO DE ERITROCITOS POR mm , o bien
3
Eritrocitos contabilizados X 10,000 = NUMERO DE ERITROCITOS/ mm
Para determinacin de hematocrito:
Con el valor del hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologas, como es el caso
de las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del
total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de clulas que transportan oxgeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugacin. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relacin porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
PROCEDIMIENTO:
1. Utilice tubos capilares de 7 cm de largo por 1 mm de grosor, llenar las partes del capilar, con sangre
venosa bien homogeneizada.
2. Cerrar la punta del tubo capilar sellando a la llama del mechero (evite quemar el paquete globular) o con
plastilina.
3. Centrifugar por 5 min. a 10,000 rpm
4. Leer el resultado en escalas comerciales, de la siguiente manera:
a.
extremo inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de la lnea horizontal
correspondiente al cero.
b. Desplace el tubo a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el nmero 100 quede al
nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la columna de eritrocitos contine
sobre la lnea cero. El tubo debe encontrarse completamente en posicin vertical.
c. La lnea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicar la fraccin de volumen
de stos.
La disposicin celular es:

eritrocitos.
Fuente: Manual de tcnicas bsicas para un laboratorio de salud. OPS, N 2.

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BIOMETRIA HEMATICA
TUBO DE MICROHEMATOCRITO Y METODOS DE LECTURA DEL VOLUMEN DE CELULAS EMPACADAS.
CAUSAS DE ERROR EN RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS:

o Agitado imperfecto.
o Suciedad del material.
o Error en la aspiracin de sangre y dilucin hasta las marcas correctas.
o Desecamiento del lquido en la cmara de recuento.
o Errores en el recuento y en el clculo.
o Olvido de descartar el liquido de dilucin de la pipeta antes de cargar la cmara
o Carga excesiva de la cmara
CAUSAS DE ERROR EN DETERMINACION DE HEMATOCRITO:

o Velocidad inadecuada al centrifugar.
o Actividad muscular del paciente antes de la toma de muestra.
o Exceso de anticoagulantes.
o Prolongado uso del torniquete.
o Quemar el paquete globular al cerrar el capilar.
o Utilizar sangre hemolisada.
VALORES NORMALES:
HOMBRES MUJERES UNIDADES

6
Eritrocitos (RBC) 5.4 (4.6 6.0) 4.8 (3.9 5.0) 10 L
Hematocrito (HTO) 45 (42 52) 42 (36 48) %

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BIOMETRIA HEMATICA
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO:
PARAMETRO RESULTADO VALOR DE REFERENCIA
ERITROCTIOS (RBC)
HEMATOCRITO (HTO)
CALCULOS:
COMENTARIO:
Nombre y firma de quien realiz el

estudio: EST. T.L.C.
Nombre y firma de quien
supervis el estudio: T.L.C.

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BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 2
RECUENTO DE ERITROCITOS Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO
1. Con tus propias palabras, explica Para qu nos sirve el recuento de glbulos rojos, en un examen de
salud?
2. Qu enfermedades o patologas se pueden considerar al tener un recuento eritrocitario bajo?
3. El recuento de glbulos rojos elevado En qu casos clnicos se presenta?
4. Qu es lo que mide el hematocrito (Hto)?
5. Menciona 3 enfermedades que nos puedan arrojar un Hto. elevado:
6. Menciona 5 patologas que nos puedan dar un Hto bajo:
7. El conteo de eritrocitos con el mtodo manual, puede tener errores y afectar al resultado de la prueba;
menciona al menos 3 de estas causas de error:
8. Menciona 3 causas de error para el hematocrito:
9. Que clculos aritmticos se deben realizar para obtener el nmero total de glbulos rojos contabilizados:
10. Cul es la modificacin que se realizo en la dilucin de la sangre con el reactivo de Hayem, para hacer
el recuento eritrocitario?

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BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA No. 3
DOSIFICACION DE HEMOGLOBINA
INTRODUCCION:
La hemoglobina es el componente principal de los glbulos rojos constituye el 95% del peso eritrocitario,
es una protena conjugada que sirve de vehculo para el transporte de O2 y CO2. Est constituida por 4
estructuras de hem unidas a una de globina.
La hemoglobina es el mejor ndice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno
como para bicarbonato por parte del eritrocito.
Tanto la concentracin de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa el nmero de
eritrocitos. Desde el punto de vista de la evaluacin de la integridad hematolgica, la determinacin de
hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de eritrocitos.
Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los sndromes anmicos) estn
definidas por la concentracin de la hemoglobina.
La determinacin de la hemoglobina por mtodos electrnicos, se obtiene por el mtodo de la
cianometahemoglobina que determina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la
carboxihemoglobina, mediante un pequeo hemoglobinmetro incorporado al equipo.
El mtodo de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comit Internacional para la
Estandarizacin de Hematologa (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el ms
recomendado.
Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estndares satisfactorios y la
capacidad de cuantificar todas las formas de Hb de importancia clnica. Es el mtodo de eleccin para efectuar
estudios cientficos sobre anemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pblica.
Los niveles de hemoglobina por debajo de los niveles normales pueden deberse a:
- Anemia (diversos tipos)
- Sangrado
- Deficiencia de eritropoyetina (por enfermedad renal)
- Intoxicacin con plomo
- Desnutricin
- Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6
- Sobre hidratacin
- Destruccin de los glbulos rojos asociada con una reaccin a transfusin
La hemoglobina alta es normalmente debido a un aumento del nmero o anormalidad de los glbulos rojos. Las
causas incluyen:
Vivir en una gran altura
Fumar
Enfermedad cardaca congnita
Cicatrices y engrosamiento del tejido pulmonar (fibrosis pulmonar)
Policitemia vera
La deshidratacin, como de la diarrea severa o sudoracin excesiva
La enfermedad renal
El uso de esteroides anabolizantes
FUNDAMENTO
Al mezclar la sangre con el reactivo de DRABKIN, se transforma la hemoglobina en

cianometahemoglobina, la intensidad de color de esta reaccin es medida en un fotocolormetro o
espectrofotmetro.
Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
La reaccin se da as:
El reactivo de Drabkin contiene cianuro potsico y ferrocianuro potsico.
El ferrocianuro hace pasar el hierro de la hemoglobina del estado ferroso (Fe++) al frrico (Fe+++) para formar
metahemoglobina, la cual se combina con cianuro potsico y da un pigmento estable, la cianometahemoglobina.
La intensidad del color se mide mediante un fotmetro a una longitud de onda de 540 nm. La densidad ptica de
la solucin es proporcional a la concentracin de hemoglobina.
FUNDAMENTO DE ESPECTROFOTOMETRIA:
La base de la colorimetra y la espectrofotometra es que muchas sustancias tienen color propio, o pueden dar
lugar a productos finales coloreados en ciertas reacciones qumicas. Hay una relacin entre la intensidad de este
color y la concentracin del producto final, o sea la concentracin de uno o varios de los reactivos; de esta
manera, la intensidad del color puede utilizarse para medir la concentracin. Para este fin se emplean los
espectrofotmetros, que son instrumentos para la medicin del color (Mathew, 1977)
REACTIVOS:
Reactivo de Drabkin
MATERIAL:
Tubos de ensaye de 13 X 100 mm
Pipeta de Sal o micropipetas
Espectrofotmetro (VER ANEXO 1)
Celdas analticas
Pipetas de 5 mL
Plumones sharpie
MATERIAL BIOLOGICO:
Sangre total venosa con EDTA
PROCEDIMIENTO:
1. Obtener una muestra de sangre total

2. Prender el fotocolormetro o el espectrofotmetro y esperar a que alcance la temperatura adecuada para
su funcionamiento.
3. Dispensar exactamente 5ml de reactivo de Drabkin en 2 tubos de ensayo, rotulados uno como BLANCO
(B) y el otro como PROBLEMA (P).
4. Homogeneizar la muestra sangunea
5. Medir exactamente 20 L (0.02 ml) de la sangre en la micro pipeta de Salhi.
6. Eliminar el exceso de sangre que queda en las paredes externas de la pipeta antes de introducirla en la
solucin de Drabkin.
7. Llevar la pipeta hasta el fondo del tubo y depositar la sangre, procurando lavar las paredes internas de la
pipeta; esto se logra mediante aspiraciones y expulsiones consecutivas de reactivo dentro del tubo.
Evitar la formacin de burbujas.
8. Tapar el tubo y mezclar varias veces por inversin.
9. Dejar reposar por 10 minutos para que se produzca la hemlisis total de las clulas rojas y se complete
la reaccin.
10. Transferir la solucin a las cubetas del fotocolormetro, para su lectura la cual se realizara de la siguiente
manera:
a. Colocar el haz de luz a la longitud de onda adecuada (en este caso es de 540 nm)
b. Colocar en una cubeta de lectura el reactivo del tubo Blanco (no contiene muestra) y ajustar el
aparato a 0 (cero) de absorbancia.
c. En otra cubeta colocar el reactivo con la muestra problema y leer la absorbancia que nos
indique el espectrofotmetro. Anotar la lectura.
Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
11. Calcular la concentracin de hemoglobina, utilizando la curva de calibracin o multiplicando por una
constante que resulta de la calibracin del mtodo.
CALCULOS:
Se divide la absorbancia del problema entre la absorbancia del estndar, el resultado se multiplica por la
concentracin del estndar.
Conc Hb Pac. = Abs. Prob. X Conc. STD = __?___ gr/dL HEMOGLOBINA

Abs. Std
Valores de referencia:
Estos varan segn la edad, el sexo y la altura sobre el nivel del mar:
Varones adultos: 13 - 18 g/dL

Mujeres adultas: 12 - 16 g/dL
Lactantes - nios: 11 - 16 g/dL
Recin nacidos: 14 - 24 g/dL
Posible valor crtico: <5 g/dL
CAUSAS DE ERROR
Errores en la obtencin de la sangre. La estasis prolongada causada por usar ms de un minuto

el torniquete en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobina
en las muestras de sangre venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario cuando se ejerce una
presin excesiva en el sitio de puncin y aumenta el flujo de los lquidos tisulares diluyendo la
muestra de sangre.
La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces o, de preferencia, usar
un mezclador mecnico.
Errores de pipeteo o de dilucin.
Muestra de sangre con coagulo.
Sangre lipemia.

9
Recuento de leucocitos muy elevado (50.0 x10 /L).
Instrumento incorrectamente calibrado.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:

EST. T.L.C.

estudio: T.L.C.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO No. 3
1. Qu es un espectrofotmetro?
2. Para qu nos es til el espectrofotmetro?
3. Con tus propias palabras, explica como se realiza la lectura del haz de luz en el espectrofotmetro:
(laboratorio)
4. Para la determinacin de la hemoglobina, usaremos un espectrofotmetro, menciona como haremos el

procedimiento de la lectura de las absorbancias: (laboratorio)
5. Qu es la hemoglobina y para que nos es til?
6. Qu clculos se efectuarn para obtener la concentracin de hemoglobina en nuestro paciente?
7. En qu ocasiones patolgicas podremos obtener una hemoglobina baja?
8. En qu patologas se puede encontrar una hemoglobina alta?
9. Menciona 3 causas de error que podemos tener al realizar esta prueba de manera manual:
10. Segn tus caractersticas fsicas, cuales serian TUS valores de hemoglobina normales?

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA No. 4
FORMULA ROJA Y CLASIFICACION DE ANEMIAS
OBJETIVO:
Realizar una formula roja mediante la medicin de cada uno de los parmetros que la integran: recuento
de eritrocitos, medicin de la hemoglobina, Hematcrito y clculo de los valores absolutos de la concentracin de
hemoglobina; para poder diagnosticar y clasificar una anemia.
INSTRUCCIONES:
Tomar una muestra de sangre y realizar CADA UNO DE LOS RECUENTOS que ya hemos realizado
(eritrocitos, Hematcrito y dosificacin de hemoglobina) con el material requerido para cada prueba. Anotar y
hacer clculos correspondientes para determinar y clasificar anemias. Y finalmente realizar el reporte
correspondiente a cada paciente.
CLASIFICACION DE ANEMIAS POR MEDIO DE LA DETERMINACIONES DE LOS INDICES ABSOLUTOS

La anemia es una deficiencia en la cantidad o calidad de los glbulos rojos y frecuentemente es
secundaria a alguna enfermedad subyacente.
Para diagnosticar a un paciente con anemia debemos clasificar que tipo de anemia est cursando, es
necesario realizar algunos clculos para la determinacin del tamao, contenido y concentracin de hemoglobina
en los glbulos rojos. Estos ndices han resultado tiles para la caracterizacin morfolgica de las anemias y
pueden calcularse a partir del recuento de glbulos rojos, de la concentracin de hemoglobina y del hematocrito.
El Volumen Corpuscular Medio (VCM o VGM) da idea DEL TAMAO promedio DE CADA ERITROCITO, se
calcula con la siguiente frmula:
VGM= Hto X 10
Eritroc.
HCM: Hemoglobina Corpuscular Media es la CANTIDAD HEMOGLOBINA PRESENTE en los eritrocitos, se

calcula:
HCM= Hb (g /dL) x 10
Eritroc.
CMHC: Concentracin Corpuscular Media de Hemoglobina, es la CONCENTRACIN media de Hb en un

volumen determinado de eritrocitos, y se calcula:
CMHC= Hbx 100

Hto.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
LIMITES NORMALES SIGNIFICADO

VGM 82 97 fl Normal Normoctico
Aumentado Macroctico
Disminuido Microctico
HCM 26 34 pg Normal Normocrmico
Disminuido Hipocrmico
CMHC 31 37 % Normal Normocrmico
Disminuido Hipocrmico
CALCULOS:

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
PARAMETRO RESULTADO/UNIDADES VALOR DE REFERENCIA

ERITROCITOS (RBC)
HEMATOCRITO (HTO)
HEMOGLOBINA
V.G.M.
H.C.M.
C.M.H.C.
COMENTARIO:

EST. T.L.C.

estudio: T.L.C.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 4
1. Qu es la hemoglobina?
2. Menciona tres tipos diferentes de hemoglobinas:
3. Qu es la anemia?
4. Cules son los valores normales de hemoglobina en hombres y mujeres adultos?
5. Para qu son tiles los valores absolutos que se obtienen a partir de la concentracin de la
hemoglobina, del nmero de eritrocitos y del hematocrito?
6. Generalmente en las anemias microcticas hipocrmicas, Cmo se resultan los ndices absolutos?
7. Menciona al menos tres pruebas de laboratorio que se deban realizar adicionalmente a la formula roja
(biometra hemtica), como auxiliares al diagnostico de anemia:
8. Menciona cinco sntomas que se pueden manifestar por causa de anemia:
9. Menciona tres posibles tratamientos que se pueden emplear para combatir la anemia:
10. Mencione 3 tipos de anemia que se puedan manifestar en los seres humanos:

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA No. 5
ERITROSEDIMENTACION GLOBULAR Y RECUENTO DE RETICULOCITOS
La eritrosedimentacin globular es una prueba que se usa ampliamente para estudiar la actividad de
diversas enfermedades. La velocidad de sedimentacin de los glbulos rojos se refiere al tiempo que tardan en
separarse del plasma. Se le mide en MILIMETROS POR HORA.
La velocidad de sedimentacin es un examen hematolgico que no est incluido en el desarrollo de un
hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta anormal en las
enfermedades funcionales, as como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
FUNDAMENTO:
La eritrosedimentacin depende de la formacin de ROULEAUX, de la concentracin de fibringeno y
de la concentracin de globulinas alfa y beta en el plasma. La concentracin de las diversas protenas
plasmticas afecta la eritrosedimentacin y en muchas enfermedades se altera la relacin entre las protenas, con
la consiguiente aceleracin de la eritrosedimentacin. Una disminucin en el nmero de glbulos rojos tambin la
acelera y en algunos laboratorios se corrige su resultado en los casos de anemia. Adems de las elevaciones
producidas en procesos infecciosos e inflamatorios, se producen elevaciones fisiolgicas en el embarazo y
durante la menstruacin. La VSG disminuye en la anemia falciforme y en las 39fibringeno39 severas.
FENOMENO DE ROULEAUX:
El ROULEAUX o formacin de pilas de monedas, es un fenmeno que consiste en que los glbulos se
aglomeran en masas. Las causas de este fenmeno radican en el plasma o en el suero y no estn influidas por la
temperatura. La administracin de algunos medicamentos puede producir este fenmeno. Otras veces se trata
de una causa intrnseca al paciente, que tiene un desequilibrio de sus protenas (aumento del 39fibringeno o
aparicin de protenas anormales).
Observado en el microscopio, el fenmeno de Rouleaux es caracterstico: se ven los glbulos reunidos
en filas, apilados por sus caras planas, varias filas se entrecruzan en diversos planos, produciendo un grumo el
cual puede ser visto de forma macroscpica (a simple vista)
INTERPRETACION CLINICA:
La VSG es un buen ndice de la presencia de procesos infecciosos activos como la tuberculosis o la
endocarditis bacteriana subaguda, el lupus eritematoso diseminado, las carditis reumticas, ciertas neoplasias,
embarazo ectpico, etc. Sirve igualmente para controlar la actividad evolutiva de las infecciones mencionadas.
MATERIAL:
Tubos de Wintrobe
Pipetas Pasteur
Gradilla de wintrobe
Reloj cronometro
Papel secante
Guantes
PROCEDIMIENTO (METODO DE WINTROBE):

1. Mezclar la muestra de sangre
2. Llenar de sangre una pipeta Pasteur
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BIOMETRIA HEMATICA
3. Introducir la punta de la pipeta Pasteur hasta el fondo del tubo de Wintrobe

4. Lentamente vaciar la sangre e ir retirando la pipeta arrastrndola por la pared interna del tubo
EVITANDO la formacin de burbujas de aire.
5. El tubo se llena hasta la marca cero y se coloca en una gradilla en posicin vertical.
6. INMEDIATAMENTE activar el cronometro que indique 1 hora, durante la cual ocurrir el fenmeno
de Rouleaux
7. Transcurrida la hora se leern los milmetros que haya sedimentado la muestra de sangre
8. La escala se lee hacia abajo, representando cada numero 10 mm o 1 cm.
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres: 0 9 mm/hr
Mujeres y nios: 0 15 mm/hr
CAUSAS DE ERROR:
1. Uso de anticoagulante incorrecto (heparina aumenta el resultado).
2. Exceso de anticoagulante (aumenta)
3. Posicin inadecuada del tubo (que este ladeado el tubo)
4. Aglomeracin anormal de los glbulos rojos en pilas de monedas.
CUENTA DE RETICULOCITOS
FUNDAMENTO:
La investigacin de reticulocitos es una de las pruebas ms tiles en la investigacin de la causa de la
anemia, pues nos d idea del estado de la produccin de glbulos rojos por la mdula sea.
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teir con el azul de cresil brillante.
Este colorante en combinacin con una misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la
temperatura (bao mara) se produce la coloracin de estos eritrocitos jvenes visualizndose en los frotices
sanguneos por microscopa
REACTIVOS:
Azul brillante de cresilo
MATERIAL:
Tubos de ensaye 13 X 75 mm
Papel parafilm
Plumn sharpie
Portaobjetos
Contador celular (pianito)
Aceite de inmersin
Microscopio
Reloj cronometro
PROCEDIMIENTO:
1. En un tubo de ensaye chico se depositan tres gotas de sangre con EDTA
2. Se agregan 3 gotas de reactivo
3. Mezclar el tubo y tapar con parafilm
o
4. Incubar a 37 C por 10 minutos.
5. Hacer frotis en un portaobjetos
6. Leer en el microscopio con el objetivo de inmersin (100X)
7. Se leern varios campos, contando 300 eritrocitos en total, incluyendo a los reticulocitos
8. Se har un clculo de regla de tres simple para obtener el valor porcentual de los reticulocitos
encontrados.
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BIOMETRIA HEMATICA
Recin nacidos: 3 6 %
Adultos: 0.5 1.5 %
INTERPRETACION CLINICA:
Causas de aumento
El nmero de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las que existe un incremento de la
eritropoyesis, tales como en la hemlisis, como respuesta a sangrados o tras el inicio de un tratamiento
antianmico que ha resultado eficaz.
Causas de disminucin
Como la produccin de reticulocitos es necesaria para compensar las prdidas fisiolgicas de glbulos rojos
maduros, una disminucin de su nmero es la expresin de un estado arregenerativo o hiporregenerativo de la
serie roja. Esta circunstancia es tpica de anemias aplsicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y
neoplsicas.
CALCULOS:

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BIOMETRIA HEMATICA
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:

EST. T.L.C.

estudio: T.L.C.

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BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 5
ERITROSEDIMENTACION Y RECUENTO DE RETICULOCITOS
1. Explique que es el fenmeno de rouleaux:
2. Qu son los reticulocitos?
3. En qu casos patolgicos se presenta un aumento en la sedimentacin globular?
4. Por qu se les llama reticulocitos a estas clulas?
5. Explique cules son las unidades en las que se mide la eritrosedimentacin globular y porque:
6. Qu indican los valores anormales de los reticulocitos?
7. Mencione 2 causas de error que pueden alterar el resultado de la velocidad de sedimentacin globular:
8. Se han mencionado varios sinnimos de la prueba que mide la sedimentacin de la sangre, Cules son
estos?

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA 6
RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES
INTRODUCCION: Efectuaremos un recuento de leucocitos totales de un paciente.

Esto nos servir de referencia para determinar si hay algn proceso infeccioso activo. Al efectuar el recuento total
no encontraremos diferenciacin entre los 5 tipos de leucocitos normales (neutrfilos, monocitos, linfocitos,
basfilos y eosinfilos). En esta prctica nos limitaremos a contar manualmente los leucocitos totales dados en
3
mm o litros.
FUNDAMENTO: En el mtodo de Turk se utiliza un solucin de acido actico al 2% que tiene como funcin lisar
los eritrocitos para evitar interferencias en el recuento.
MATERIAL UTILIZADO:
1. Pipeta de Thoma para LEUCOCITOS
2. Cmara de Neubauer
3. Microscopio
4. Contador celular
5. Boquilla
REACTIVO UTILIZADO:
Reactivo de Turk
PROCEDIMIENTO: Se requiere de sangre total con EDTA

1. Pipetear sangre con la pipeta de Thoma y la boquilla, hasta la marca de 0.5 evitando la formacin de
burbujas.
2. Limpiar la pipeta para ELIMINAR el exceso de sangre
3. Aspirar reactivo de Turk hasta la marca 11, EVITANDO las BURBUJAS.
4. Se retira la boquilla de la pipeta y esta se agita vigorosamente por 3 min.
5. Preparar la cmara de Neubauer.
6. Se eliminan las 3 primeras gotas de la dilucin.
7. Colocar una gota en la cmara de Neubauer y dejar reposar por 3 min. para que se asienten los
leucocitos.
8. Leer al microscopio con objetivo de 10X y el contador celular, SOLO EN LOS 4 CUADROS GRANDES
de la cmara de Neubauer, como se indica en la figura.
9. Realizar clculos correspondientes.
3
CALCULOS: El total de clulas en estos 4 mm se multiplica por 50 (factor obtenido entre la dilucin de la sangre
y la profundidad de la cmara).

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
El recuento de glbulos blancos se realizara en las 4 CUADRICULAS GRANDES que estn en las orillas,
en este dibujo estn MARCADAS con la letra W (White). Y con el OBJETIVO DE 10X
3
LEUCOCITOS TOTALES/ mm = clulas contadas X 50
3
5,000 10,000/mm
9
5.00 10.00 X10 /L
SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES:

Un bajo nmero de glbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
Insuficiencia de la mdula sea (por ejemplo: debido a infeccin, tumor o cicatrizacin anormal)
Enfermedades vasculares del colgeno (como el lupus eritematoso)
Enfermedad del hgado o el bazo
Radioterapia o exposicin a la radiacin
Un alto nmero de glbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
Anemia
Enfermedades infecciosas
Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoidea o alergia)
Leucemia
Estrs emocional o fsico severos
Dao tisular (como, por ejemplo, quemaduras), entre otros

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PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
CALCULOS:

EST. T.L.C.

estudio: T.L.C.

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BIOMETRIA HEMATICA

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BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 6
RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES
1. Qu es la leucopoyesis?
2. Cuntas especies de leucocitos existen en la sangre, y cules son?
3. El valor elevado de leucocitos totales, que significado clnico tiene?
4. A que se le conoce como leucopenia?
5. Qu enfermedades pueden manifestar una leucopenia?
6. Mencione al menos 3 enfermedades que manifiesten leucocitosis:
7. Cules son los valores normales de leucocitos totales?
8. Cul es el efecto del reactivo de Turk, para permitir la observacin de los glbulos blancos con ms
facilidad?
9. Dibuje un esquema que represente lo observado en el microscopio al hacer el conteo de los glbulos
blancos y explique ampliamente el proceso para realizarlo.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICA 7
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
INTRODUCCION: El recuento diferencial de leucocitos es una parte rutinaria de la biomtrica hemtica que
puede ser til en la valoracin de una infeccin o inflamacin, en la determinacin de los defectos de intoxicacin
posible por sustancias qumicas o drogas, en el monitoreo de trastornos sanguneos como la leucemia, y en los
efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia. El procedimiento consta de una toma de sangre, la
misma se disemina en un portaobjetos de vidrio y luego se tie. A continuacin se determina el porcentaje de
cada tipo de leucocitos.
FUNDAMENTO: Los leucocitos son parte fundamental del tejido hemtico y presentan las siguientes
caractersticas: son clulas que tienen un mayor dimetro que los eritrocitos, presentan un ncleo de forma
irregular, su citoplasma presenta algunas granulaciones las cuales son teidos con diferentes colorantes, y la
cromatina del ncleo puede ser de diferentes densidades.
Pueden distinguirse 5 tipos de leucocitos maduros (neutrfilos, eosinfilos, basfilos, monocitos y linfocitos)
basndose en general en las siguientes caractersticas:
Tamao de la clula
Forma del ncleo
Contenido de grnulos
Consistencia de la cromatina nuclear
Coloracin de los grnulos
El 65% de leucocitos corresponde a los GRANULOCITOS: Eosinfilos, Basfilos y Neutrfilos.

El 35% corresponde a los AGRANULOCITOS: Monocitos y Linfocitos.
Los leucocitos se desplazan por medio de movimientos amiboideos saliendo de los vasos sanguneos y llegando
a los tejidos, por medio de la DIAPEDESIS. Estas clulas vagabundas son importantes en las reacciones de
defensa contra enfermedades y en general en infecciones, puesto que pueden fagocitar cuerpos extraos y
bacterias.
Tienen una importante funcin en las reacciones inmunolgicas de nuestro organismo favoreciendo la produccin
de anticuerpos.
MATERIAL:
Portaobjetos de vidrio
Palillos aplicadores de madera
Papel secante
Plumn sharpie
Contador celular
Cronometro
Aceite de inmersin
Alcohol metanol fijador
Eosina bufferizada
Policromo
PROCEDIMIENTO:
1. Homogenizar la muestra sangunea y ANTES de 3 hrs. realizar un frotis
2. Empleando un aplicador de madera, depositar una pequea gota de sangre en el extremo de un
portaobjetos totalmente limpio.
Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
3. Con el borde de otro portaobjetos a 20 o 30 grados, tocar la gota, esperar a que la sangre se distribuya
por capilaridad en el extremo del portaobjetos extensor y deslizarlo suavemente sobre el otro
portaobjetos, en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del
primer portaobjetos (NOTA: revisar clase de leucopoyesis para recordar la forma de hacer el frotis)
4. Dejar secar el frotis.
5. Teir el frotis con la tincin correspondiente de la siguiente manera:
a. fijar la extensin en metanol absoluto aproximadamente 30 segundos.
b. teir con la solucin de Eosina bufferizada por 20 segundos.
c. enjuagar con agua de la llave.
d. introducir la extensin en solucin de azul de policromo durante 30 segundos.
e. enjuagar con agua de la llave, dejar escurrir el agua y dejar secar al aire libre.
6. colocar una gota de aceite de inmersin y leer al microscopio con el objetivo de 100x.
7. se har un recuento de 100 clulas blancas en total, DIFERENCIANDO cada una de ellas segn sus
caractersticas antes citadas. (VER CLASE LEUCOPOYESIS)
8. evaluar la morfologa de eritrocitos, leucocitos y plaquetas y reportar anormalidades.
Cellular Relativo (%)
Neutrfilos en Banda 0-5
Neutrfilos segmentados 45 - 65
Linfocitos 30 - 40
Monocitos 3-8
Eosinfilos 1-5
Basfilos 0-1
VARIACIONES FISIOLGICAS
La frmula diferencial vara con la edad.
El nio en trminos generales, posee ms linfocitos que el adulto normal y alrededor de los 10 aos comienza a
estabilizarse en los valores normales del adulto.
9
El anciano presenta un recuento de leucocitos entre 3.1 - 8.5 x 10 /L y el recuento diferencial tiene una media de
65 +/- 10% de polimorfo nucleares neutrfilos y linfocitos de 30 +/- 9%.
9
En el embarazo y sobre todo en el ltimo trimestre, la leucocitosis puede llegar a 15 x 10 /L, con un aumento de
polimorfo nucleares neutrfilos y bandas neutrfilos.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
RECUENTO TOTAL
LINFOCITOS
MONOCITOS
NEUTROFILOS SEGMENTADOS
NEUTROFILOS EN BANDA
EOSINOFILOS
BASOFILOS
OTROS
COMENTARIO:

EST. T.L.C.

estudio: T.L.C.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
CUESTIONARIO 7
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
1. Cul es la utilidad del estudio de las extensiones sanguneas?
2. Qu caractersticas celulares se deben observar para diferenciar a los leucocitos y poder clasificarles?
3. Adems de evaluar la serie blanca, Qu otras cosas deben ser evaluados al observar una extensin
sangunea?
4. Qu caractersticas de calidad, debe tener la extensin sangunea para realizar la lectura diferencial?
5. Qu significado clnico tiene un aumento de los eosinfilos?
6. Cmo se le llama a la elevacin de los linfocitos y qu significado tiene?
7. Mencione 3 enfermedades o patologas que produzcan una neutrofilia:
8. Menciones 3 patologas que manifiesten una linfopenia:
9. Elabore un esquema de un campo visual del microscopio, e indique las clulas observadas

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
ANEXO 1
Espectrofotmetro
Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la longitud
de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones.
Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir
la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra
ESPECTROFOTOMETRIA:
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en funcin de la longitud de
onda. Cada componente de la solucin tiene su patrn de absorcin de luz caracterstico. Comparando la longitud
de onda y la intensidad del mximo de absorcin de luz de una muestra versus soluciones estndar, es posible
determinar la identidad y la concentracin de componentes disueltos en la muestra (solucin incgnita).
Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de laboratorio son varias: es rpida, precisa,
verstil, fcil de usar y eficiente en costo. Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y versatilidad en
los ltimos aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables en un laboratorio de qumica
analtica.
La espectrofotometra se usa para diversas aplicaciones, como:
Anlisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigacin,

Estandarizacin de colores de diversos materiales, como plsticos y pinturas,
Deteccin de niveles de contaminacin en aire y agua,
Y determinacin de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.
La espectrofotometra ultravioleta-visible usa haces de radiacin del espectro electromagntico, en el rango UV

de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran
utilidad para caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200
a 400 nm se le conoce tambin como rango de uv cercano, la espectrofotometra visible solamente usa el rango
del campo electromagntico de la luz visible, de 400 a 800 nm.

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
Un espectrmetro tpico posee cuatro componentes bsicos: una fuente de radiacin que tiene intensidad
constante en el rango de longitud de onda que cubre (usualmente es lmpara de tungsteno para luz visible, y
deuterio para ultravioleta), un compartimiento para la muestra, un monocromador que separa la banda de longitud
de onda deseada del resto del espectro y la dispersa al compartimiento de la muestra, y un foto detector, que
mide cuantitativamente la radiacin que pasa por la muestra.
En general, los espectrmetros miden en % de transmitancia (T) y absorbancia (A). El por ciento de transmitancia
se refiere a la cantidad de radiacin que pasa a travs de la muestra y alcanza el detector. Una solucin lmpida,
no absorbente, mostrara una lectura de 100% de transmitancia en un espectrofotmetro calibrado. Las unidades
de absorbancia van de 0 a 2. Las medidas de absorbancia son frecuentemente usadas en qumica analtica, ya
que la absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y la concentracin de la sustancia en sta.
El espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de onda
particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. El
espectrofotmetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850
nm). El largo de onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda
escogido. Luego la luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra
y llega a un tubo fotogrfico, donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%)
de transmitancia

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
ANEXO 2
VALORES NORMALES EN LA BIOMETRIA HEMATICA
PARAMETRO LIMITES NORMALES UNIDADES
9
Leucocitos 5.0 10.0 10 /L
12
Eritrocitos 3.5 5.7 10 /L
Hemoglobina 12.0 17.2 g/dL
Hematcrito 36.1 50.3 %
MCV 82.2 97.4 fL
MCH 26.0 34.0 Pg
MCHG 31.0 37.0 %
RDW (ADE) 11.6 37.6 %
9
Plaquetas 150 450 10 /L
MPV 7.8 11.0 fL
Linfocitos 20.5 51.1 %
Monocitos 1.7 9.3 %
Granulocitos 42.2 75.2 %
Eosinfilos 0 0.7 %
Bandas 0 0.2 %

Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIOMETRIA HEMATICA
BIBLIOGRAFIA:
1. Garza D and Becan-McBride K. Phlebotomy Handbook, 2nd Ed. Norwalk, Connecticut: Appleton and Lange:
1989.
2. National Committee for Clinical Laboratory Standards; Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Venipuncture, 3rd Ed. Document H3-A3. Vol. 11 No. 10, 1991.
3. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Skin Puncture. Document H4-A3. Vol. 11 No. 11, 1991.
4. Phelan, S. Phlebotomy Techniques: A Laboratory Workbook. Chicago, Ill.: American Society of Clinical
Pathologists: 1993.
5. University of Iowa Hospital and Clinics, Pediatric Phlebotomy Training Manual. 1994.
6. University of Iowa Hospital and Clinics, Phlebotomy Training Manual. 1994.
7. Mejora Continua de la Calidad. Gua para los laboratorios clnicos de Amrica Latina. Editores: M.L.Castillo
de Snchez y M.E.Fonseca Yerena en colaboracin con COLABIOCLI. Editorial Mdica Panamericana.
8. Virtual Phlebotomy: A Computer Aided Course of Instruction.
http://www.parsons.umaryland.edu/~vguy/phleb.htm
9. California Phlebotomy Training. http://www.scpt.com/PhlebotomyViews.html
10. Virtual Hospital: CLIA. Pre-Analytical Factors Affecting Laboratory Results.
http://www.vh.org/Providers/CME/CLIA/Phlebotomy/Phlebotomy.html
11. Center for Phlebotomy Education. http://www.phlebotomy.com
12. Medstat Utah. http://www.medstat.med.utah.edu/webpath/tutorial/PHLEB/PHLEB.html
Autor:
Eric Caballero J.
ecaballe[arroba]cwpanama.net
http://www.ventajas.com/foro/view.cgi?header_id=235
http://reina.4life.biz/enfermedades.aspx?eId=107
Mathew, L. (1977). Metodos de laboratorio. Mexico, D.F.: Nueva Editorial Interamericana, S.A. de C. V.
Espinoza, Eligio (2009). Manual de hematologa. Unison, Universidad de Sonora

Muoz Zambrano, Mara E.; Morn Cortijo, Cecilia G. Manual de procedimientos de laboratorio en tcnicas
bsicas de hematologa. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2005.
Theme, Color Atlas of Hematology 2004 Theme ABC OF CLINICAL HAEMATOLOGY Second Edition Edited by
DREW PROVAN Senior Lecturer, Department of Hematology, Barts and the London, Queen Marys
BORBOLLA Escoboza, Jos Rafael; Principios de hematologa. Primera edicin, Mxico, D.F. MASSON DOYMA
MEXICO, S.A.; 2005

Q.F.B. JORGE ECHAVE

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Manual de prcticas de laboratorio

T.L.C. Sara E. Cambero Martnez

Guia prctica para flebotomia ..................................................................................................... 3

CUARTO SEMESTRE 2 T.L.C. SARA CAMBERO

GUIA PRCTICA PARA FLEBOTOMIA

Requisitos generales para la seguridad personal

Medidas especficas durante la flebotoma

CUARTO SEMESTRE 3 T.L.C. SARA CAMBERO

Factores pre-analticos que afectan las pruebas:

CUARTO SEMESTRE 4 T.L.C. SARA CAMBERO

Identificacin del paciente

LA PREPARACION DEL PACIENTE:

Vigilancia del paciente:

Personalidad del paciente:

CUARTO SEMESTRE 6 T.L.C. SARA CAMBERO

Preparacin del equipo

TUBO CON TAPON ROJO

TUBO CON TAPON ROJO

TUBO CON TAPON MORADO

TUBO CON TAPON CELESTE

Adaptador para tubos-Vacutainer: Se utilizan para tubos al vaco.

CUARTO SEMESTRE 7 T.L.C. SARA CAMBERO

Alcohol: Etlico o Isoproplico al 70%.

Curita o venda adhesiva

Frascos para hemocultivos.

CUARTO SEMESTRE 8 T.L.C. SARA CAMBERO

e) Llenar los tubos en su orden.

g) Colocar un curita o venda en el sitio de la puncin.

Problemas durante la extraccin venosa.

CUARTO SEMESTRE 10 T.L.C. SARA CAMBERO

Coloque la aguja con el bisel hacia arriba

c) Movimiento hacia delante que atraviesa la vena.

CUARTO SEMESTRE 11 T.L.C. SARA CAMBERO

Puncione solamente la pared superior de la vena.

CUARTO SEMESTRE 12 T.L.C. SARA CAMBERO

1. Si la puncin venosa es peligrosa para el paciente.

CUARTO SEMESTRE 13 T.L.C. SARA CAMBERO

El procedimiento de la Puncin Capilar:

Consideraciones adicionales de la puncin capilar:

Limpie el rea seleccionada con alcohol etlico al 70%.

Orden de llenado de los tubos:

1. El primer tubo a ser llenado es el de hemocultivo, si tambin se ha ordenado sta prueba.

Consideraciones en pacientes hospitalizados:

Extraccin sangunea en pacientes con venoclisis:

a) Nombre del paciente

CUARTO SEMESTRE 16 T.L.C. SARA CAMBERO

Una muestra del etiquetado de los tubos puede ser el siguiente:

CUIDADOS DEL PACIENTE POSTERIOR A LA EXTRACCIN:

CUARTO SEMESTRE 17 T.L.C. SARA CAMBERO

CUARTO SEMESTRE 18 T.L.C. SARA CAMBERO

CUARTO SEMESTRE 19 T.L.C. SARA CAMBERO

REACCIONES QUE PUEDE PRESENTAR EL PACIENTE DURANTE LA FLEBOTOMIA:

PARTES DE LA JERINGA Y AGUJA

CUARTO SEMESTRE 20 T.L.C. SARA CAMBERO

Ensenada, Baja California a _______ de _____________________ del 20 _____

Nombre y firma de quien realiz el estudio:

Nombre y firma de quien supervis el

CUARTO SEMESTRE 21 T.L.C. SARA CAMBERO

1. Con sus propias palabras explica que es FLEBOTOMIA?

2. Cules son los sitios ms comunes para realizar una flebotoma?

3. En qu casos se puede realizar una puncin en el taln del pie?

6. Investigue y explique el trmino: hemolisis

CUARTO SEMESTRE 22 T.L.C. SARA CAMBERO

Ensenada, Baja California a _ de ___________ del 20 _

Ensenada, Baja California a _ de ___________ del 20 _

Conc Hb Pac. = Abs. Prob. X Conc. STD = ?_ gr/dL HEMOGLOBINA

Ensenada, Baja California a _ de ___________ del 20 _

Ensenada, Baja California a _ de ___________ del 20 _

Ensenada, Baja California a _ de ___________ del 20 _