FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL FARMACIA Y

BIOQUMICA

BIOQUMICA CLNICA I

CADENA RESPIRATORIA Y FOSFORILACION OXIDATIVA

DOCENTE:
Q.F. NELSON RICARDO ARTEGA TELLEZ

ESTUDIANTES:
Daleska Herrera Paredes 2013-38766
Lizbeth Mamani Arocutipa 2014-125031
Jessyca Mayta Jaliri 2014-125024
Eder Frank Almanza Quispe 2015-125005
Elsa Salamanca Choque 2012-36765
Keysee Mamani Mamani 2014-125014
Stony Becerra Villaroel 2015-125016
Sinthia Maribel Mamani Cori 2015-125008
Yoel Claros Ninaja 2013-38753
Abraham Cruz Centeno 2014-125004
TACNA 2017
1
DEDICATORIA

A Jehov Dios por protegernos y

bendecirnos da a da, a nuestras
familias; quienes nos apoyan
incondicionalmente, a nuestro docente
de Bioqumica Clinica I, Dr. Nelson; por
impartir sus sabios conocimientos y
darnos la oportunidad de realizar esta
pequea investigacin, y a nuestros
compaeros por su apoyo moral.

Los autores.

2
 AGRADECIMIENTOS

Por medio del presente trabajo damos a conocer nuestros sinceros

agradecimientos a nuestros compaeros y amigos de clase quienes nos
brindaron su apoyo incondicionalmente.

Tambin al docente Q.F. Nelson Arteaga Tellez que por su dedicacin y esmero
en el desarrollo de cada una de las clases del presente curso.

3
 NDICE

DEDICATORIA 02
AGRADECIMIENTOS 03
NDICE 04
INTRODUCCIN 05
CAPITULO I

COMPLEJOS DE CADENA RESPIRATORIA 06

CAPITULO II

INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE ELECTRONES 10

CAPITULO III

FOSFORILACION OXIDATIVA. HIPTESIS 15

CAPITULO IV

INHIBIDORES DEL CONTROL RESPIRATORIO 25

CAPITULO V

BOMBA DE PROTONES 35

CAPITULO III

ENVENENAMIENTO Y CADENA RESPIRATORIA 38

CONCLUSIONES 46
BIBLIOGRAFA 47

4
 INTRODUCCIN

Los transportadores de electrones NADH y FADH2, originados

fundamentalmente en el ciclo de Krebs, pero tambin en otros procesos
catablicos, albergan el poder reductor que les confieren los electrones
"energticos" que transportan.

Esa energa ser liberada, poco a poco, a lo largo de la cadena respiratoria que
tiene lugar en las crestas y en la membrana mitocondrial interna. En dicha
membrana existen cuatro complejos enzimticos transportadores de electrones:
el complejo NADH deshidrogenasa, el complejo citocromo b-c1, el complejo
citocromo oxidasa y el

Tanto el NADH como el FADH2 ceden los electrones "energticos" a la cadena

formada por esos tres transportadores y, a medida que pasan de un
transportador a otro, los electrones van liberando energa. Esa energa (segn la
teora quimiosmtica de Mitchell) permite el bombeo de protones desde la matriz
mitocondrial al espacio intermembranoso de la mitocondria. De este modo se
genera un gradiente electroqumico de protones, con una concentracin de
protones mayor en el espacio intermembrana que en la matriz.

La fuerza protn-motriz generada, impulsa los protones a travs de las ATP

sintasas presentes en la membrana mitocondrial interna, permitiendo la unin
del ADP a un grupo fosfato, con la consiguiente formacin de ATP. El conjunto
de estos procesos, que culminan con la formacin de ATP, constituyen la
fosforilacin oxidativa.

Aunque no es del todo exacto, se considera que una molcula de NADH permite
la formacin de 3 molculas de ATP, mientras que una de FADH2 slo aportar
2 ATP.Tanto los electrones como los protones, que han sido impulsados a lo
largo de la cadena respiratoria, deben unirse a un aceptor final. En la respiracin
aerobia el aceptor ltimo de electrones (y protones) es el O2, que al unirse al H2,
forma H2O como producto final.

5
 CAPITULO I

COMPLEJOS DE CADENA RESPIRATORIA

LA CADENA RESPIRATORIA

La cadena respiratoria est formada por una serie de transportadores de

electrones situados en la cara interna de las crestas mitocondriales y que son
capaces de transferir los electrones procedentes de la oxidacin del sustrato
hasta el oxgeno molecular, que se reducir formndose agua.

La Cadena Transportadora de Electrones constituye junto a la fosforilacin

oxidativa uno de los dos procesos que integran la cadena respiratoria. En este
proceso se oxidan los cofactores que previamente se redujeron en el Ciclo de
Krebs, y los electrones que ellos ceden son transportados a lo largo de la
secuencia de reacciones de oxidacin reduccin, hasta el aceptor final de
electrones, que es el oxgeno.

Transportadores redox mitocondriales

Se han identificado cuatro complejos enzimticos unidos a membrana interna

mitocondrial. Tres de ellos son complejos transmembrana, que estn embebidos
en la membrana interna, mientras que el otro est asociado a membrana. Los
tres complejos transmembrana tienen la capacidad de actuar como bombas de
protones. El flujo de electrones global se esquematiza de la siguiente forma:

NADH Complejo I Q Complejo III Citocromo c Complejo IV H2O

Complejo II

COMPLEJOS DE LA CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

Complejo I: NADH - CoQ reductasa.
Complejo II: Succnico - CoQ reductasa.
Complejo III: CoQH2, - citocromo c reductasa.
Complejo IV: Citocromo c oxidasa.

6
 COMPLEJO I

Nombre NADH Deshidrogenasa

NADH:ubiquinona xido-
reductasa
Masa Molar 850 kDa
Subunidades 43
Proteicas
Grupos FMN, centros Fe-S
Prostticos
Inhibidores Amital
rotenona
Pieridicina A
El complejo I o NADH deshidrogenasa o NADH: ubiquinona
oxidoreductasa capta dos electrones del NADH y los transfiere a un
transportador liposoluble denominado ubiquinona (Q). El producto reducido, que
se conoce con el nombre de ubiquinol (QH2) puede difundir libremente por la
membrana. Al mismo tiempo, el Complejo I transloca cuatro protones a travs de
membrana y produce un gradiente de protones.

El flujo de electrones ocurre de la siguiente forma:

El NADH es oxidado a NAD+, y reduce al FMN a FMNH2 en un nico paso que

implica a dos electrones. El siguiente transportador de electrones es un centro
7
Fe-S que slo puede aceptar un electrn y trasferirlo a la ubiquinona generando
una forma reducida, denominada semiquinona. Esta semiquinona vuelve a
reducirse con el otro electrn que quedaba, generando el ubiquinol, QH 2.
Durante este proceso, cuatro protones se translocan a travs de la membrana
interna mitocondrial, desde la matriz hacia el espacio intermembrana.

COMPLEJO II

Nombre Succinato Deshidrogenasa

Masa Molar 140 kDa

Subunidades Proteicas 4

Grupos Prostticos FAD, centros Fe-S

Inhibidores

El "Complejo II" o Succinato deshidrogenasa, no es un bomba de protones.

Es la nica enzima del ciclo de Krebs asociado a membrana. Este complejo dona
electrones a la ubiquinona desde el succinato (que se transforma en fumarato) y
los transfiere a la ubiquinona mediante el FAD.

COMPLEJO III

Nombre Ubiquinona-citocromo C oxido-reductasa

Masa Molar 250 kDa

Subunidades Proteicas 11

Grupos Prostticos Hemos, Fe-S

Inhibidores Antimicina A

8
El "complejo III" o Complejo Citocromo b-c 1 O Citocromo reductasa ;
obtiene dos electrones desde QH2 y los transfiere a dos molculas de citocromo
c, que es un transportador de electrones hidrosoluble que se encuentra en el
espacio intermembrana de la mitocondria. Al mismo tiempo, transloca cuatro
protones a travs de la membrana por los dos electrones transportados desde el
ubiquinol.

COMPLEJO IV

Nombre Citocromo Oxidasa

Masa Molar 160 kDa

Subunidades Proteicas 13

Grupos Prostticos Hemos, CuA, CuB

Inhibidores CN- (cianuro)

Monoxido de Carbono.

Acida de Sodio

El complejo IV o citocromo c oxidasa; capta cuatro electrones de las cuatro

molculas de citocromo c y se transfieren al oxgeno (O2), para producir dos
molculas de agua (H2O). Al mismo tiempo, se translocan cuatro protones al
espacio intermembrana, por los cuatro electrones. Adems "desaparecen" de la
matriz 2 protones que forman parte del H2O.

Entonces se da la reaccin final de la cadena respiratoria es la reduccin de O2

a H2O .

El O2 molecular es un aceptor terminal de electrones ideal, debido a su alta

afinidad por los electrones, proporciona una gran fuerza impulsora
termodinmica.

9
 CAPITULO II

INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE ELECTRONES

1. Inhibicin de la transferencia electrnica

Cianuro, CO: Complejo IV, citocromo oxidasa

La afinidad de la Hemoglobina por el monxido de carbono es

casi 300 superior a la que tiene por el oxgeno. Un ambiente en el
cual hay apenas 100 ppm de CO es suficiente para que la
formacin de Hemoglobina llegue a 16 %. La situacin empeora
adems ya que la unin de CO a uno de los grupos Hem de la
Hemoglobina aumenta la afinidad por el oxgeno de los otros tres
grupos Hem de la molcula, por lo cual la entrega o liberacin del
oxgeno a los tejidos est muy afectada.

Se ha observado que el estatus clnico de los pacientes no se

correlaciona bien con los niveles de carboxihemoglobina, por lo
que se considera que, aunque la afinidad de los componentes de
la cadena respiratoria por el CO es menor que por el oxgeno, la
inhibicin del citocromo oxidasa por el CO juega tambin un papel
en la intoxicacin por monxido de carbono. El CO se une a la
forma reducida del hierro (Fe ++) de los grupos Hem de la
Citocromo Oxidasa.

El cianuro afecta a prcticamente todas las metaloenzimas, pero

sus principales efectos txicos derivan de su unin al Fe+++ en
los grupos Hem del citocromo oxidasa, inhibiendo el
funcionamiento de la Cadena de Transporte de Electrones.

10
FIGURA N 01. Paso de los electrones
a travs del complejo IV. Tres protenas
esenciales en el flujo elctrico son las
subunidades I, II, III. La estructura mayor
incluye las 10 protenas restantes del
complejo. La transferencia electrnica a
travs del complejo IV comienza con le
citocromo C (parte superior). Dos
molculas de citocromo C reducidas
donan un electrn cada una al centro
binuclear CuA . A partir de aqu los
electrones pasan a travs del hemo a al
centro Fe-Cu(citocromo a3 y se reduce a
su forma peroxi (22 ; no mostrada aqu)
gracias a dos electrones del centro Fe-
Cu. La aportacin de dos electrones
adicionales del citocromo c (arriba, en
total 4 electrones)convierte el 22 en dos
molculas de agua, consumiendo cuatro
protones sustrato de la matriz.
Simultneamente se bombean cuatro
protones ms desde la matriz por un
mecanismo todava desconocido.

Antimicina A, Mixotiazol: Complejo III Ubiquinona-citocromo

C oxido-reductasa

El complejo presenta dos sitios de unin diferenciados para la

ubiquinona, QN y QP, que son los sitios de inhibicin por dos
frmacos que bloquean la fosforilacion oxidativa.

(a) La antimicina A bloquea el flujo de electrones desde el hemo

bH a Q, se une a QNa cercano al hemo de bH en el lado N
(matriz) de la membrana.

(b) El mixotiazol, que impide el flujo de electrones desde QH2 a la

protena ferro-sulfurada de Rieske, se unen en Qp, cercano al
centro 2Fe-2S y al hemo bL del lado P de la membrana. La
estructura dimerica es esencial para la funcin del complejo III.
11
 La interfase entre monmeros forma dos cavernas, cada uno
con un sitio QP de un monmero y otra con un sitio del otro.
Los intermedios de la ubiquinona se mueven en el interior de
estas cavernas protegidas.

El Complejo III cristaliza en dos conformaciones distintas. En

una, el centro Fe-S de Rieske est cercano a su aceptor
electrnico, el hemo del citocromo 1, pero a relativa distancia
del citocromo b y del sitio de unin del 2 en el que el centro
Fe-S se ha desplazado del citocromo 1 hacia el citocromo b.
Se cree que la protena de Rieske oscila entre estas dos
conformaciones al ser primero reducida y a continuacin
oxidada.

FIGURA N 02. Complejo del citocromo (Complejo III)

12
 Rotenona, Amital, Piericidina A: Complejo I (NADH
Deshidrogenasa)

Amital (un barbiturato), la rotenona (producto vegetal utilizado

frecuentemente como insecticida) y el antibitico piericidina A
inhiben el flujo electrnico desde los centros Fe-S del Complejo I a
la ubiquinona, con el consecuente del bloqueo global del proceso
de la fosforilacion oxidativa.

FIGURA N 03. NADH: ubiquinona oxidorreductasa (complejo I). EL complejo I cataliza la trasferencia de
un ion hidruro desde el NADH al FMN, a partir del cual pasan dos electrones a travs de una serie de centros
Fe-S a la protena ferrosulfurada N-2 situada en el brazo del complejo orientado hacia la matriz.

La transferencia de electrones desde N-2 a la ubiquinona, que se encuentra en el brazo situado en la

membrana, genera QH2, el cual difunde por la capa lipdica. Esta transferencia de electrones tambin
promueve la expulsin desde la matriz de cuatro protones por par de electrones. Este potencial
electroqumico impulsa la sntesis de ATP.

13
RESUMEN DEL FLUJO DE ELECTRONES Y PROTONES A TRAVS DE
LOS 4 COMPLEJOS DE LA CADENA RESPIRATORIA.

Los electrones llegan a Q va complejos I y II. Q reducido (QH2) acta de

transportador mvil de electrones y protones. Pasa electrones al Complejo III, el
cual pasa a otro eslabn de conexin mvil, el citocromo c. El complejo IV
transfiere electrones desde el citocromo c reducido al O2. El flujo electrnico a
travs de los complejos I, II y IV va acompaado del flujo de protones desde la
matriz al espacio intermenbrana.
Recuerde que los electrones de la -oxidacin de los cidos grasos tambin
pueden entrar en la cadena respiratoria a travs de Q.

14
 CAPITULO III

FOSFORILACION OXIDATIVA. HIPTESIS

FOSFORILACION OXIDATIVA

PETER DENNIS MITCHELL (1920 - 1992)

-Interesado inicialmente en la penicilina, a partir

de 1961 trabaj en el estudio sobre el
almacenamiento de la energa en los seres
vivos para ser posteriormente transportada a los
puntos de utilizacin por medio de las molculas de
ATP.

-As la energa liberada por el traslado de electrones en la cadena respiratoria

se conserva mediante la fosforilacin del ADP, que se convierte nuevamente en
ATP, proceso denominado FOSFORILACIN OXIDATIVA.

-En 1978 fue galardonado con el Premio Nobel de Qumica por sus trabajos
sobre el INTERCAMBIO DE ENERGA BIOLGICA MEDIANTE LA TEORA DE
LA QUMICA OSMTICA.

FOSFORILACION OXIDATIVA

Esquema actual del sistema mitocondrial de la fosforilacin oxidativa.

15
Los equivalentes reducidos que se generan en el metabolismo (NADH, FADH2)
son cidos oxidados por la cadena de transporte de electrones. La energa libre
generada en esta reaccin se emplea para bombear protones (puntos rojos)
desde la matriz mitocondrial hasta el interior de las crestas mitocondriales, para
dar lugar a la fuerza protn-motriz.

Cuando ste se disipa a travs del retorno a la matriz de los protones a travs
de la ATP sintasa, la energa almacenada se emplea para fosforilar el ADP con
un grupo fosfato para formar ATP.

El modelo actual cubre algunos problemas suscitados por el anterior. En primer

lugar, todos los componentes activos de la cadena de transporte de electrones
se encuentran exclusivamente en las crestas mitocondriales y formando
supercomplejos, en la imagen representado por el supercomplejo I1III2IV1. Esto
permite canalizar de unos complejos a otros las molculas de transferencia de
electrones.

Previamente se pensaba que difundan libremente. En segundo lugar, la

diferencia de pH, uno de los componentes de la fuerza protn-motriz junto con el
potencial de membrana () es de tan slo 0,55 unidades, equivalente a 32 mV,
insuficiente para impulsar la fosforilacin.

Sin embargo, existen circunstancias locales que aumentan este pH en un factor

de 2 unidades.

En primer lugar, la ATP sintasa forma dmeros y filas que comban y dan forma a
la cresta mitocondrial, haciendo que el espacio interno tenga tan slo 20 4 nm.

El espacio entre la membrana interna y externa es menor, de 12 2,5 nm, pero

cuenta con poros lo suficientemente grandes como para estar en equilibrio con
el citoplasma. Los protones se concentran gracias al "efecto superficie" y al
rpido flujo desde las fuentes de protones a los sumideros.

La fosforilacin oxidativa es un proceso metablico que utiliza energa liberada

por la oxidacin de nutrientes para producir adenosina trifosfato (ATP).

Se le llama as para distinguirla de otras rutas que producen ATP con menor
rendimiento, llamadas "a nivel de sustrato". Se calcula que hasta el 90% de la
energa celular en forma de ATP es producida de esta forma.
16
Consta de dos etapas: en la primera, la energa libre generada mediante
reacciones qumicas redox en varios complejos multiproteicos conocidos en su
conjunto como cadena de transporte de electrones se emplea para producir, por
diversos procedimientos como bombeo, ciclos quinona/quinol o bucles redox, un
gradiente electroqumico de protones a travs de una membrana asociada en un
proceso llamado quimiosmosis.

La cadena respiratoria est formada por tres complejos de protenas principales

(complejo I, III, IV), y varios complejos "auxiliares", utilizando una variedad de
donantes y aceptores de electrones. Los tres complejos se asocian en
supercomplejos para canalizar las molculas transportadoras de electrones, la
coenzima Q y el citocromo c, haciendo ms eficiente el proceso.

La energa potencial de ese gradiente, llamada fuerza protn-motriz, se libera

cuando se translocan los protones a travs de un canal pasivo, la enzima ATP
sintasa, y se utiliza en la adicin de un grupo fosfato a una molcula de ADP
para almacenar parte de esa energa potencial en los enlaces anhidro "de alta
energa" de la molcula de ATP mediante un mecanismo en el que interviene la
rotacin de una parte de la enzima a medida que fluyen los protones a travs de
ella. En vertebrados, y posiblemente en todo el reino animal, se genera un ATP
por cada 2,7 protones translocados. Algunos organismos tienen ATPasas con un
rendimiento menor.

Existen tambin protenas desacopladoras que permiten controlar el flujo de

protones y generar calor desacoplando ambas fases de la fosforilacin oxidativa.

Aunque las diversas formas de vida utilizan una gran variedad de nutrientes, casi
todas realizan la fosforilacin oxidativa para producir ATP, la molcula que
provee de energa al metabolismo. Esta ruta es tan ubicua debido a que es una
forma altamente eficaz de liberacin de energa, en comparacin con los
procesos alternativos de fermentacin, como la gluclisis anaerbica.

Pese a que la fosforilacin oxidativa es una parte vital del metabolismo, produce
una pequea proporcin de especies reactivas del oxgeno tales como
superxido y perxido de hidrgeno, lo que lleva a la propagacin de radicales
libres, provocando dao celular, contribuyendo a enfermedades y, posiblemente,
al envejecimiento. Sin embargo, los radicales tienen un importante papel en la

17
sealizacin celular, y posiblemente en la formacin de enlaces disulfuro de las
propias protenas de la membrana interna mitocondrial. Las enzimas que llevan
a cabo esta ruta metablica son blanco de muchas drogas y productos txicos
que inhiben su actividad.

GLUCONEOGENESIS

La gluconeognesis es una ruta metablica anablica que permite la sntesis

de glucosa a partir de precursores no glucdicos (los cuales ni provienen ni son
glcidos).

Incluye la utilizacin de varios aminocidos, lactato, piruvato, glicerol y cualquiera

de los intermediarios del ciclo de los cidos tricarboxlicos (o CICLO de Krebs)
como fuentes de carbono para la va metablica. Todos los aminocidos, excepto
la leucina y la lisina, pueden suministrar carbono para la sntesis de glucosa.

La gluconeognesis ocurre casi exclusivamente en el hgado (10% en los

riones).

Es un proceso muy importante, ya que en estados metablicos como el ayuno

los organismos superiores son capaces de sintetizar glucosa a partir de otras
sustancias.

Algunos tejidos, como el cerebro, los eritrocitos, el rin, la crnea del ojo y el
msculo, cuando el individuo realiza actividad extenuante, requieren de un

18
aporte continuo de glucosa, obtenindola a partir del glucgeno proveniente del
hgado, el cual solo puede satisfacer estas necesidades de 10 a 18 horas.

Despus de este periodo, la glucosa almacenada en el hgado disminuye

drsticamente. Debido a ello comienza la formacin de glucosa a partir de
sustratos diferentes al glucgeno.

GLUCLISIS

Es la ruta metablica, formada por diez reacciones enzimticas, mediante la que

se degrada una molcula de glucosa hasta dos molculas de piruvato, adems
de producir energa en forma de ATP y de NADH.

Es una ruta metablica universalmente distribuida en todos los organismos y

clulas.

Su funcin es la degradacin de glucosa y otros monosacridos para la

obtencin de energa.

Fases:

La fase preparativa: implica la transformacin y escisin de la

glucosa en dos triosas fosfato, el gliceraldehdo-3-fosfato y la
dihidroxiacetona fosfato, entre las cuales existe un equilibrio. En esta
fase se produce un gasto energtico: dos molculas de ATP por
molcula de glucosa. La finalidad de esta fase es la de activar y
preparar las molculas de glucosa, para su posterior procesamiento.

La fase de beneficios o de rendimiento energtico: implica la

transformacin de la molcula de gliceraldehdo-3 -fosfato en piruvato,
mediante una serie de reacciones que liberan energa. Se obtienen
cuatro molculas de ATP y dos de NADH + H+ por molcula de
glucosa, por lo que se libera ms energa que la gastada en la fase
preparatoria, lo que da una ganancia neta de 2 ATP y 2 NADH + H+
por molcula de glucosa. La energa que se obtiene de la oxidacin
del gliceraldehdo-3-fosfato la aprovecha la clula para desempear
todo tipo de funciones celulares. Esta fase de rendimiento se produce
19
 dos veces por cada molcula de glucosa que se hidroliza, ya que en
cada una de las vueltas se metaboliza una de las dos triosas fosfato
en las que se escindi la glucosa.

CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs (ciclo del cido ctrico o ciclo de los cidos tricarboxlicos) es
una ruta metablica, es decir, una sucesin de reacciones qumicas, que forma
parte de la respiracin celular en todas las clulas aerbicas, donde es liberada
energa almacenada a travs de la oxidacin del acetil-CoA derivado de
carbohidratos, grasas y protenas en dixido de carbono y energa qumica en
forma de trifosfato de adenosina (ATP). En clulas eucariotas se realiza en la
matriz mitocondrial. En las procariotas, el ciclo de Krebs se realiza en el
citoplasma.

Adems, el ciclo proporciona precursores de ciertos aminocidos, as como el

agente reductor NADH que se utiliza en numerosas reacciones bioqumicas. Su
importancia central para muchas vas bioqumicas sugiere que fue uno de los
primeros componentes establecidos del metabolismo celular y seala un origen
abiognico.

En organismos aerbicos, el ciclo de Krebs es parte de la va catablica que

realiza la oxidacin de glcidos, cidos grasos y aminocidos hasta producir
CO2, liberando energa en forma utilizable: poder reductor y GTP (en algunos
microorganismos se producen ATP).

El metabolismo oxidativo de glcidos, lpidos y protenas frecuentemente se

divide en tres etapas, de las cuales el ciclo de Krebs supone la segunda. En la
primera etapa, los carbonos de estas macromolculas dan lugar a acetil-CoA, e
incluye las vas catablicas de aminocidos (p. ej. desaminacin oxidativa), la
beta oxidacin de cidos grasos y la gluclisis. La tercera etapa es la fosforilacin
oxidativa, en la cual el poder reductor (NADH y FADH2) generado se emplea
para la sntesis de ATP segn la teora del acomplamiento quimiosmtico.

20
El ciclo de Krebs tambin proporciona precursores para muchas biomolculas,
como ciertos aminocidos. Por ello se considera una va anfiblica, es decir,
catablica y anablica al mismo tiempo.

REGULACIN DE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA

Debido a que el transporte de electrones esta acoplado a la translocacin de

protones, el flujo de electrones a travs del sistema de transporte de electrones
se regula por la magnitud de la PMF. Mientras ms alta es la fuerza, ms baja la
proporcin de transporte de electrones, y viceversa.

Bajo condiciones de reposo, con una carga alta de energa en las clulas, la
demanda para sntesis nueva de ATP se limita y, aunque la PMF esta alta, el
flujo de electrones hacia la matriz de la mitocondria a travs de la ATP sintasa
es mnima. Cuando las demandas de energa se incrementan, como durante la
actividad muscular rigurosa, el ADP en el citosol se incrementa y es
intercambiado con el ATP de la mitocondria por medio del transportador
transmembrana nucletido de anedina, la translocasa ADP/ATP.

Las concentraciones altas de ADP hacen que la PMF sea descargada a tiempo
de que los protones fluyen a travs de la ATP sintasa, regenerando as la
cantidad de ATP.

As, mientras la proporcin del transporte de electrones depende de la PMF, la

magnitud de la PMF en cualquier momento refleja la carga de energa de la
clula. A su vez la carga de energa, o ms precisamente la concentracin de
ADP, normalmente determina la proporcin del transporte de electrones por
principios de accin de masa.

La proporcin del transporte de electrones usualmente se mide al determinar la

proporcin de consumo de oxgeno y a esto se refiere como la tasa de respiracin
celular.

La tasa de respiracin se conoce como estado 4 cuando la carga de energa es

alta, la concentracin de ADP es baja, y el transporte de electrones est limitado
por el ADP.

21
El metabolismo celular es una maquinaria de autorregulacin por la permanencia
en la homeostasis, por este motivo es la demanda de energa celular la que
regula el proceso de fosforilacin oxidativa ya que el ATP se sintetiza slo
cuando es necesario para no desestabilizar otras rutas metablicas.

A nivel de organelo, la mitocondria presenta una velocidad de respiracin o

consumo de O2 dependiente del sustrato ADP disponible para la fosforilacin.
Esta dependencia se llama control por aceptor de la respiracin. Esto significa
que a mayor concentracin de ADP, mayor velocidad de sntesis de ATP y a su
vez, la concentracin de ADP est regulada por la ley de accin de masas y
depende de las concentraciones de ATP y Pi en la matriz mitocondrial.

Debido a que el metabolismo celular es integrativo, procesos como la gluclisis,

la beta oxidacin de los cidos grasos y la oxidacin del acetilCoA en el ciclo de
Krebs coordinan el control de la fosforilacin oxidativa.

Menor [ATP] implica mayor velocidad de estas rutas metablicas; mayor [ATP]
implica disminucin de las mismas. El efector responsable del anterior con el
ATP, el ADP y el Pi.

MECANISMOS DE FOSFORILACIN OXIDATIVA-HIPOTESIS

1953- Slater- Hiptesis Qumica.

En 1953, Slater propone la hiptesis del acoplamiento qumico, que postula la

existencia de un intermediario qumico rico en energa comn entre la reaccin
de transferencia electrnica productora de energa y la reaccin consumidora de
energa en la que se forma ATP. Esta hiptesis no fue aceptada por la
inextistencia de las suficientes pruebas experimentales.

1964- Boyer- Hiptesis Conformacional.

El 1964, Boyer propuso la hiptesis del acoplamiento conformacional, que

postula que la captura y transmisin de la energa tiene lugar por un cambio
conformacional en algunas protenas. Tampoco fue aceptada por la misma razn
que la anterior.
22
 1961- Mitchell- Hiptesis Quimiosmtica.

Peter Mitchell propuso la "hiptesis quimiosmtica" en 1961.Esta teora propone

esencialmente que la mayor parte de la sntesis de ATP en la respiracin celular,
viene de un gradiente electroqumico existente entre la membrana interna y el
espacio intermembrana de la mitocondria, mediante el uso de la energa de
NADH y FADH2 que se han formado por la ruptura de molculas ricas en
energa, como la glucosa.

Quimiosmosis en una mitocondria.

Las molculas como la glucosa, son metabolizadas para producir acetil-CoA

como un intermediario rico en energa. La oxidacin de acetil-CoA en la matriz
mitocondrial est acoplada a la reduccin de una molcula transportadora como
NAD+ y FAD.

Los transportadores traspasan electrones a la cadena transportadora de

electrones en la membrana mitocondrial interna, que luego los traspasan a otras
protenas en la cadena transportadora.

La energa disponible en los electrones se usa para bombear protones desde la

matriz, a travs de la membrana mitocondrial interna, guardando energa en
forma de un gradiente electroqumico transmembrana. Los protones se
devuelven a travs de la membrana interna, mediante la enzima ATP-sintasa.

El flujo de protones de vuelta a la matriz mitocondrial mediante la ATP-sintasa,

provee de suficiente energa para que el ADP se combine con fsforo inorgnico
para formar ATP. Los electrones y protones en la ltima bomba proteica de la
cadena transportadora son llevados al oxgeno (O2) para formar agua (H2O).

sta fue una propuesta radical en su tiempo, y no fue bien aceptada. La visin
que prevaleca era que la energa de la transferencia electrnica se almacenaba
es un intermediario estable de alta energa, un concepto mas conservativo del
punto de vista qumico.

El problema de ste viejo paradigma fue que nunca se encontr aquel

intermediario, y la evidencia del bombeo de protones por los complejos de la
Cadena de Transporte de electrones creci de forma tal, que no pudo ser

23
ignorada. Eventualmente, el peso de la evidencia comenz a favorecer la
hiptesis quimiosmtica, y en 1978, el Premio Nobel de qumica fue entregado a
Peter Mitchell.

El acoplamiento quimiosmtico es importante en la produccin de ATP en el

cloroplasto y muchos tipos de bacteria

La teora quimiosmtica enunciada por Peter Mitchell, explica cmo la energa

derivada del transporte de electrones por la cadena de transporte de electrones
se utiliza para producir ATP a partir de ADP y Pi. La bomba de protones: el
transporte de electrones est acoplado al transporte de H+ a travs de la
membrana interna mitocondrial desde el espacio intermembranal.

Este proceso crea simultneamente a travs de la membrana interna

mitocondrial un gradiente elctrico (con ms cargas positivas en el exterior de la
membrana que en la matriz mitocondrial) y un gradiente de pH (el exterior de la
membrana est a un pH ms cido que el interior). La energa generada por este
gradiente es suficiente para realizar la sntesis de ATP.

24
 CAPITULO IV

INHIBIDORES DEL CONTROL RESPIRATORIO

1) INHIBIDORES DE LA ATP SINTETASA

Existen varias drogas y toxinas que inhiben la fosforilacin oxidativa. Aunque

estas toxinas inhiben slo una enzima en la cadena de transporte de electrones,
la inhibicin de cualquier paso detiene el resto del proceso.

1. OLIGOMICINA

Es un macrlido producido por bacterias del tipo Streptomyces. Este

antibitico es usado generalmente para investigaciones cientficas. Es
muy txico para seres humanos.

Acta especficamente bloqueando el canal de protones en la fraccin F O,

se fija en el tallo de la ATP sintasa, inhibiendo el canal de protones, por
tanto previniendo el reingreso de protones en la matriz mitocondrial.

Como los gradientes de pH y elctricos no se pueden disipar en presencia

de la oligomicina, el transportador de protones se detiene por la dificultad
para el bombeo de ms protones contra los gradientes muy inclinados y
como consecuencia de esta se inhibe tambin a la cadena de transporte
de electrones, por lo tanto disminuir el consumo de O 2 y se acumular
NADH y FADH2.

25
2. AUROVERTIN

Los aurovertins son una familia de antibiticos relacionados al hongo

Calcarisporium arbuscula. Inhiben la Fosforilacin oxidativa en las
mitocondrias y en muchas especies de bacterias. Aurovertins B y D tienen
idnticas propiedades biolgicas y son ms potentes que el aurovertin A.

Los aurovertins inhiben la bomba de protones F1 Fo - ATP sintasa por

unin a -subunidades en su sector cataltico F1. Este es un dominio
globular que puede ser liberado como una hidrolasa ATP hidrosoluble por
disrupcin de un delgado tallo que se une a la membrana de dominio de
ATP-Sintasa. En la enzima unida a la membrana, tanto la hidrlisis de ATP
y la sntesis se inhiben, al igual que la hidrlisis de ATP por F1-ATPasa
aislada. La inhibicin de los aurovertins no es competitiva con nucletidos.
Tres -subunidades estn presentes en el complejo ATP sintasa; cada -
subunidad contiene un sitio de unin al nucletido que est directamente
involucrado en la catlisis.

El nmero de sitios de unin de aurovertin por conjunto F1 es incierto,

pero hay al menos un sitio de unin de alta afinidad (Kd-1, M), y uno o
dos sitios adicionales con afinidades (Kd -4-6, uM). Un sitio tiene baja
afinidad en presencia de ADP pero alta afinidad en presencia de ATP.

26
3. VENTURICIDIN

Las venturicidinas son un grupo de antimicticos compuestos. Son

macrolidos de 20 miembros que inhiben la fosforilacion oxidativa y
ATPasas mitocondriales. Las venturicidinas A y B son glicsidos utilizados
en el estudio funcional mitocondrial. El primer miembro de esta clase se
aisl a partir de bacterias de la clase Streptomyces en 1961. Los
miembros adicionales de esta clase fueron posteriormente aislados y
caracterizados. Una sustancia antifngica "aabomycin A" fue aislado
de Streptomyces en 1969. Sin embargo, en 1990 se inform de que
aabomycin A es en realidad una mezcla 3:1 de dos componentes
relacionados, que luego fueron nombrados aabomycin A1 y A2
aabomycin. Las estructuras de estos mostraron ser idnticas a las de los
compuestos previamente caracterizados venturicidin A y venturicidin B,
respectivamente. Un nuevo anlogo, venturicidin C, se inform
recientemente de un Streptomyces aislado de respiraderos trmicos
asociados con el fuego de carbn Ruth Mullins en Kentucky.

Se ha observado que la venturicidina A, un compuesto antibitico y

antifngico, es un inhibidor potencial de la H + -ATPasa de E. coli. Los
experimentos sugieren que este compuesto inhibe fuertemente el
transporte de protones impulsado por ATP y la hidrlisis de ATP. Estudios
ms detallados muestran que la Venturicidina A acta sobre el sector de
la membrana F0. Se ha informado que la F0 bovina purificada produce
canales de K + sensibles a la tensin. Venturicidina A demuestra la
capacidad de disminuir drsticamente la probabilidad abierta del canal. La
venturicidina A es un inhibidor de ATP-S.

Venturicidin B es un antibitico que se ha informado de ser un potente

inhibidor de la ATP-S (mitocondrial ATP sintasa complejo). Este
compuesto interfiere con la porcin F0 de los canales K + y H + -ATPasa
localizados en la membrana y disminuye la probabilidad de que los
canales se abran. Al bloquear la transferencia de protones a travs de la
membrana, Venuricidin B provoca una suspensin en la actividad de ATP
sintasa.

27
 Venturicidin A Venturicidin B

4. DCCD

Diciclohexilcarbodiimida (DCCD), un reactivo soluble en lpidos, es

utilizada como intermediario qumico y agente acoplador en la sntesis
de pptidos.

Bloquea el transporte de protones F0 y CF0mediante su unin covalente a

un residuo carboxilo de glutmico del canal de H de la H - ATPasa del
plasmalema (F0 y CF0).

En estas condiciones el gradiente de protones que se produce es mayor

que lo normal, sin embargo la energa potencial de ste no puede ser
utilizada para producir ATP.

As mismo, podra interaccionar con alguna protena de la cadena redox

o con un posible canal de H de la misma. Su actuacin bloquea el flujo
de H, lo que adems nos permitir dilucidar si el eflujo de H y el influjo
de K estn acoplados directa o indirectamente.

28
 2) Desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa

En condiciones normales el transporte de electrones (la oxidacin del NADH y el

FADH2 por el O2) y la fasforilacion oxidativa (la sntesis de ATP) estn acopladas
con firmeza debido a la impermeabilidad de la membrana mitocondrial interna al
pasaje de los protones. De este modo, la nica forma de que los H+ reingresen
en la matriz es a travs de la porcin F0 de la ATP sintasa traslocadora de
protones. En el estado en reposo, cuando la fosforilacin oxidativa es mnima, el
gradiente electroqumico a travs de la membrana mitocondrial interna se
intensifica a tal punto que la energa libre para bombear los protones adicionales
es mayor que lo que puede recolectar la cadena de transporte de electrones, en
consecuencia se inhibe el transporte posterior de electrones.

29
a) Compuestos desacoplantes no fisiolgicos

Sin embargo se encontraron muchos compuestos, incluido el 2,4-

dinitrofenol (DNP) y la carbonil-cianuro-p-
trifluorometoxifenilhidrazona (FCCP), que "desacoplan" este proceso.
La hiptesis quimioosmtica proporcion una base racional para la
comprensin del mecanismo por el cual actan estos compuestos
desacoplantes.

La presencia de un agente en la membrana mitocondrial interna que la

vuelve permeable a los H+ desacopla al fosforilacin oxidativa del
transporte de electrones mediante la generacin de una ruta de disipacin
del gradiente electroqumico de protones que no requiere la sntesis de
ATP. Por lo tanto, el desacoplamiento permite que el transporte de
electrones proceda sin obstculos aun cuando est inhibida la sntesis de
ATP. El DNP y la FCCP son cidos lipoflicos dbiles que en consecuencia
pasan con facilidad a travs de las membranas.

En un gradiente de pH, los protones unidos sobre el lado acdico de la

membrana se difunden a travs y se liberan sobre el lado alcalino y por lo
tanto disipan el gradiente (fig. 1). De este modo, estos compuestos
desacoplantes son ionforos transportadores de protones.

30
 Fig. 1: Desacoplamiento de la fosforilacion oxidativa: Los ionoforos transportadores de
protones, DNP y FCCP, desacoplan la fosforilacion oxidativa del transporte de lectrones,
mediante la descarga del gradiente electroqumico generado por el transporte de
electrones.

Aun antes de que se conociera el mecanismo de desacoplamiento, se

reconoca que las velocidades metablicas aumentaban en presencia de
ciertos compuestos. Los estudios realizados en la Stanford University en
los comienzos del siglo XX documentaron el incremento en la respiracin
y la prdida de peso causados por el DNP. El compuesto se utiliz incluso
como una "pldora para adelgazar" durante varios aos. Segn palabras
de Efraim Racker (A New Look at Mechamisms in Bioenergetics, p. 155):
A pesar de las advertencias de los cientficos de Stanford, algunos
mdicos emprendedores comenzaron a administrar dinitrofenol a
pacientes obesos sin las precauciones adecuadas. Los resultados fueron
sorprendentes. Lamentablemente, en algunos casos el tratamiento no
slo elimin las grasas sino tambin a los pacientes, y numerosos casos
fatales se publicaron en el Journal of the American Medical Association
(JAMA) en 1929. Esto desalent a los mdicos durante un tiempo...

b) Generacin de calor en el tejido adiposo pardo por el

desacoplamiento bajo control hormonal.

La disipacin de un gradiente electroqumico de H+ generado por el

transporte de electrones y el desacoplamiento de la sntesis de ATP,
produce calor. La generacin de calor es la funcin fisiolgica del tejido
adiposo pardo (grasa parda). ste es diferente al tejido adiposo tpico
(blanco) dado que, a pesar de tener grandes cantidades de
triacilgliceroles, contiene numerosas mitocondrias cuyos citocromos le
dan una coloracin parda. Los mamferos recin nacidos que carecen de
pelaje, como los seres humanos y los mamferos que hibernan, contienen
grasa parda en su cuello y en la parte superior de su espalda, que funciona
en la termognesis sin temblor, esto es, como una "almohadilla trmica
biolgica". (La hidrlisis del ATP que se produce durante la contraccin

31
del msculo al temblar, o cualquier otro movimiento, tambin produce
calor. La termognesis sin temblor, es por medio de la ciclizacin del
sustrato.)

El mecanismo de generacin de calor en la grasa parda involucra el

desacoplamiento regulado de la fosforilacin oxidativa en sus
mitocondrias. Estas mitocondrias contienen termogenina (tambin
llamada protena de desacoplamiento (UCP1)), una protena
homodimrica de subunidades de 307 residuos que actan como un canal
para controlar la permeabilidad a los protones de la membrana
mitocondrial interna. En los animales adaptados al fro la termogenina
constituye hasta un 15% de las protenas de la membrana mitocondrial
interna de la grasa parda. El flujo de protones a travs de este canal
proteico es inhibido por las concentraciones fisiolgicas de nucletidos de
purina (ADP, ATP, GDP y GTP), pero esta inhibicin puede revertirse por
accin de los cidos grasos libres. Los componentes de este sistema
interactan bajo el control hormonal.

Los cidos grasos libres activan la termognesis en las mitocondrias de la

grasa parda. Esto contrarresta los efectos inhibitorios de los nucletidos
de purina, y, por lo tanto, estimula el flujo a travs del canal de protones y
desacopla al transporte de electrones de la fosforilacin oxidativa. La
hormona noradrenalina controla la concentracin de cidos grasos en el
tejido adiposo pardo, y el cAMP acta como un segundo mensajero.

Bajo la estimulacin de la noradrenalina (fig. 2), el componente adenilato

ciclasa del sistema receptor de noralfenalina sintetiza cAMP. A su vez, el
cAMP activa por va alostrica la protencinasa A (PKA), que activa por
fosforilacin la triacilglicerol lipasa sensible a hormonas. Por ltimo, la
lipasa activada hidroliza los triacilgliceroles para producir cidos grasos
libres que abren el canal de protones.

32
Fig. 2. Mecanismo de desacoplamiento de Ia fosforilacion oxidativa inducido por hormonas en Ia
mitocondria de Ia grasa parda. 1) la noradrenalina se une a su receptor de Ia superficie celular.
2) El complejo noradrenalina-receptor estimula a la adenilatociclasa, por consiguiente hace que
los nivcles de cAMP aumenten. 3) La union del cAMP activa a la proteincinasa A (PKA). 4) La
PKA fosforila a la triacilglicerol lipasa sensible a hormonas y la activa. 5) Los triacilgliceroles se
hidrolizan, y se producen cidos grasos libres. 6) Los cidos grasos libres superan el bloqueo
que los nucletidos de purinas realizan sobre el canal de protones formado por la termogenina,
lo que permite que los H+ ingresen en la mitocondria y desacoplen la sntesis de ATP.

c) Otros tejidos contienen homlogos a la UCP

A pesar de que primero pareca que slo las mitocondrias de la grasa

parda contenan protenas desacoplantes, en el presente se sabe que
otros tejidos contienen homlogos a la UCP1. La UCP2 se expresa en
muchos tejidos, incluido el tejido adiposo blanco, mientras que la UCP3
se encuentra en los tejidos adiposos pardo y blanco y en el msculo. El
papel metablico de la UCP2 y la UCP3 no est claro, aunque hay indicios
de que la UCP2 participa en la termognesis inducida por la dieta (en vez
de la inducida por el fro).

33
 3) TRANSPORTE DE ATP Y ADP

La fuerza protn-motriz tambin sirve para impulsar varios procesos de

transporte esenciales para la fosforilacin oxidativa, aunque el papel principal del
gradiente de protones en las mitocondrias es suministrar energa para la sntesis
de ATP. La membrana mitocondrial interior necesita transportadores
especializados para el ADP y Pi desde el citosol hacia el interior de la
mitocondria, al sitio donde se puede resntetizar a ATP, ya que la membrana
mitocondrial interna es generalmente impermeable a las molculas con carga.
Por tanto hay dos sistemas especficos que transportan ADP y P i a la matriz y
ATP hacia el citosol externo. Un transportador de nucletidos de adenina
translocasa y fosfato translocasa son los dos sistemas que intervienen. La
nucletido de adenina translocasa une ADP y es por tanto la encargada en
transportar una molcula de ADP desde el citosol hacia el interior de la
mitocondria, a la vez que exporta un ATP desde la matriz de nuevo hacia el
citosol. Fosfato translocasa transporta en Pi junto con un protn a la matriz.

La ATP-ADP translocasa se inhibe de forma especfica por concentraciones muy

pequeas de actractilsido (un glicsido vegetal) o el cido bongcrquico
(un antibitico obtenido de un moho). El atractilsido se une a la translocasa
cuando su centro de unin a nucictidos se orienta hacia el citoplasma. Mientas
que el cido bongcrquico se une cuando este centro est orientado hacia la
matriz mitocondrial. La fosforilacin oxidativa se detiene poco despus de aadir
cualquiera de estos inhibidores, lo que demuestra que la ATP-ADP translocasa
es esencial para mantener cantidades adecuadas de ADP que acepten la
energa asociada con la fuerza protnmotriz.

34
 CAPITULO V

BOMBA DE PROTONES

Una bomba de protones son complejos enzimticos integrales de membrana

que es capaz de movilizar protones a travs de la membrana de una clula, de
la mitocondria o de cualquier otro compartimento subcelular.

En la cadena de transporte de electrones se secuestra protones de la matriz

mitocondrial y se translocan al espacio intermembranal. Este transporte de
protones, que est acoplado a la propia cadena de transporte de electrones, crea
un gradiente tanto en pH como en carga elctrica y establece un potencial
electroqumico que acta como una batera o reserva de energa para la clula
(como condensador elctrico).

Las bombas encargadas de bombear los protones gracias al paso de los

electrones son las llamadas bombas redox (que se corresponden con los
complejos mitocondriales de la cadena de transporte: los complejos I, III y IV). El
bombeo de protones se realiza en contra gradiente, por lo que supone un gasto
de energa que es proporcionado por el flujo deelectrones de la cadena
respiratoria.

La membrana mitocondrial interna funciona, pues, de manera similar a un dique

en un ro, bloqueando el flujo de protones hacia la matriz; los protones solo
pueden regresar a la matriz a travs de las ATP sintasas; lo hacen a favor de
gradiente y ello genera energa en forma de ATP.

35
36
PROCESO DE FOSFORILACION OXIDATIVA DONDE INTERVIENEN LAS
BOMBAS DE PROTONES

ATP SINTASA:
SUBCOMPLEJO F0
GIRATORIO Y
SUBCOMPLEJO F1:
Los protones que pasan por
las subunidades C y alfa
causan su rotacin.
Las subunidades B captan
ATP+Pi y liberan ATP.
Se forman 3 moleculas de
ATP por cada giro completo
del complejo.

37
 CAPITULO VI

ENVENENAMIENTO Y CADENA RESPIRATORIA

ENVENENAMIENTO

Debido a que en presencia de estos inhibidores de la Cadena de Transporte

de elctrones no se libera energia, la snteses de ATP tambien se detiene. Los
mas importantes inhibidores conocidos de la cadena de transporte de electrones
son el Amital, la Rotenona, el Antimycin A, el Monoxido de Carbono (CO), la
Azida sodica y los Cianuros.

Amital, un barbiturato, y la Rotenona, un producto vegetal obtenido de las plantas

que se usa como insecticida y pesticida, bloquean la cadena de transporte
electronico entre la NADH deshidrogenasa (Complejo I) y la CoQ.

Como consecuencia, ellos impiden la utilizacion del NADH como donante de

equivalentes de reduccion a la cadena respiratoria. Sin embargo, el flujo de
electrones que resulta de la reduccion-oxidacion del Complex II no es afectada,
ya que los electrones entran en un punto posterior al bloqueo, a traves de la
Coenzima Q.

El efecto del Amital ha sido observado in vitro, ya que la intoxicacion con amital
y otros barbituratos afecta principalmente al Sistema Nervioso Central al actuar
sobre los canales de iones sensibles al GABA, un efecto no relacionado con la
accion del amital sobre el Complejo I.

Las intoxicaciones por Rotenona son muy raras. De hecho, algunas tribus
humanas solian pescar echando en el agua extractos de raices conteniendo
Rotenona, la cual es facilmente absorbible por los peces a traves de las
branquias. La rotenona afectaba la cadena respiratoria de los peces y estos
morian y flotaban en la superficie. Estos peces eran consumidos posteriormente
sin afectar a los seres humanos, ya que los residuos de rotenona en los peces

38
eran absorbidos con dificultad por el tracto gastrointestinal. En aquellos casos en
que la rotenona se ha ingerido en forma concentrada, generalmente irrita
severamente las mucosas provocando vomitos. Sin embargo, sus efectos
toxicos no deben ser menospreciados.

Es interesante notar que la Rotenona y el MPTP (una neurotoxina), que tambien

afecta al Complejo Respiratorio I, cuando se administran de forma intravenosa,
causan sintomas y signos muy parecidos a la enfermedad de Parkinson. Estas
substancias afectan primariamente a las neuronas de la substancia nigra.
Aparentemente la secuencia de eventos es: afectacion del Complejo I, afectacion
del metabolismo mitocondrial, acumulacion de radicales libres, muerte celular,
liberacion de substancias toxicas y destruccion de otras celulas.

Antimycin A es un antibiotico producido por Streptomyces griseous que ha sido

usado como veneno para controlar alguna especies de peces. Antymicin A
interfiere con el flujo de electrones desde el citocromo bH en el Complex III (Q-
cytochrome c oxidoreductasa). En presencia de esta substancia, el
citocromo bH puede ser reducido pero no oxidado, y consecuentemente, el
citocromo c permanece oxidado, al igual que los citocromos a ya3 del Complejo
IV.

El monoxido de carbono (CO) es responsable a nivel mundial por mas del 50

% de las muertes por envenenamiento. Es incoloro e inodoro; puede formarse
en grandes cantidades como resultado de la combustion incompleta de
combustibles: los tubos de escape de maquinarias , hornos, estufas, son fuentes
importantes. El cigarro aumenta los niveles de carboxihemoglobina del
fumador.

La intoxicacion por monoxido de carbono causa trastornos en la entrega de

oxygeno a los tejidos y en su utilizacion celular. La afinidad de la Hemoglobina
por el monoxido de carbono es casi 300 superior a la que tiene por el oxigeno.
Un ambiente en el cual hay apenas 100 ppm de CO es suficiente para que la
formacion de Hemoglobina llegue a 16 %. La situacion empeora ademas ya que
la union de CO a uno de los grupos Hem de la Hemoglobina aumenta la afinidad

39
por el oxigeno de los otros tres grupos Hem de la molecula, por lo cual la entrega
o liberacion del oxigeno a los tejidos esta muy afectada. Debido a su alto
consumo de oxigeno, el cerebro y el corazon son los organos mas afectados. La
mioglobina tiene mas afinidad aun por el CO que la Hemoglobina, por lo que el
musculo cardiaco esta severamente afectado y el paciente presenta una
marcada hipotension. Como ya fue descrito anteriormente, la intoxicacion por
CO es una importante causa de muerte en todo el mundo.

Se ha observado que el estatus clinico de los pacientes no se correlaciona bien

con los niveles de carboxihemoglobina, por lo que se considera que aunque la
afinidad de los componentes de la cadena respiratoria por el CO es menor que
por el oxigeno, la inhibicion de la citocromo oxidasa por el CO juega tambien un
papel en la intoxicacion por monoxido de carbono. El CO se une a la forma
reducida del hierro (Fe ++) de los grupos Hem de la Citocromo Oxidasa.

De una forma opuesta, en el envenamiento por Cianuro la inhibicion de la

cadena respiratoria si desempenha un rol primario. La intoxicacion por cianuro
es frecuente en pacientes que inhalan humo de fuegos industriales o
residenciales. Tambien se ve este tipo de intoxicacion en personas relacionadas
profesionalmente con el cianuro o sus derivados en ciertas industrias. El
envenenamiento intencional con cianuro puede verse en personas con acceso a
estos compuestos. El cianuro afecta a practicamente todas las
metaloenzimas, pero sus principales efectos toxicos derivan de su union al
Fe+++ en los grupos Hem de la citocromo oxidasa, inhibiendo el funcionamiento
de la Cadena de Transporte de Electrones.

Las Azidas afectan a la cadena respiratoria de una forma muy similar al cianuro,
inhibiendo a los grupos Hem de los citocromos en la Citocromo
Oxidasa (Complex IV). Las azidas son usadas en los airbags, en la produccion
de detonantes (explosivos) y como preservativo del suero y de algunos reactivos
quimicos y biologicos. Se han reportado casos de intoxicacion por azida en
humanos.

40
Como resultado de la accion de cualquiera de estos inhibidores, se detienen las
reacciones redox de la cadena respiratoria, no se libera energia, las bombas de
protones no funcionan, por lo que no hay protones que regresen a traves del
complejo V, y la produccion de ATP cesa.

CADENA RESPIRATORIA

Conceptos Generales
La misin de la cadena transportadora de electrones es la de crear un gradiente
electroqumico que se utiliza para la sntesis de ATP. Dicho gradiente
electroqumico se consigue mediante el flujo de electrones entre diversas
sustancias de esta cadena que favorecen en ltimo caso la translocacin de
protones que generan el gradiente anteriormente mencionado. De esta forma
podemos deducir la existencia de tres procesos totalmente dependientes:

Un flujo de electrones desde sustancias individuales

Un uso de la energa desprendida de ese flujo de electrones que se utiliza
para la translocacin de protones en contra de gradiente, por lo que
energticamente estamos hablando de un proceso desfavorable.
Un uso de ese gradiente electroqumico para la formacin de ATP
mediante un proceso favorable desde un punto de vista energtico.

La Cadena Respiratoria

La cadena respiratoria es la ltima etapa de la degradacin de los nutrientes, as

como de los productos de degradacin de otros compuestos de origen
endgeno. Es tambin la etapa en que se conserva, en forma de ATP, la mayor
parte de la energa contenida en esos compuestos. La cadena respiratoria
comprende dos procesos:

1. Un proceso exergnico: la cadena transportadora de electrones, que

comprende la oxidacin de los cofactores reducidos hasta la reduccin
del aceptor final de los electrones, el oxgeno, que se transforma en agua.
Este proceso libera energa y se forman de nuevo los cofactores oxidados

41
 que vuelven a participar en el ciclo de Krebs. La energa liberada se
conserva en forma de un gradiente de protones.
2. Un proceso endergnico: la fosforilacin oxidativa, que consiste en la
sntesis del ATP, que est acoplado a este transporte electrnico pues
utiliza el gradiente de protones que se forma a partir de la energa que se
libera en la cadena transportadora de electrones.

Ambos procesos de la cadena respiratoria se localizan en la membrana interna

de la mitocondria.

La cadena transportadora consiste de una serie de transportadores que actan

secuencialmente y que estn unidos a la membrana interna. Los transportadores
son protenas integrales de membrana con grupos prostticos capaces de
aceptar y/o donar 1 o 2 electrones.

Los transportadores realizan 3 tipos de transferencias en todo ste proceso:

1. Transferencia directa de electrones (asociada a metales)

2. Transferencia de tomo de hidrgeno H+ + e-
3. Transferencia de in hidruro H- (H+ + 2e-)

42
Existen 5 tipos de molculas transportadoras de electrones en ste proceso:

1. NAD+ y NADP+

La mayor cantidad de electrones es provisto de las enzimas de tipo

deshidrogenasas, presentes en las vas catablicas, y los envan a
nucletidos de amina o flavina.

NAD+ y NADP+ son carriers electrnicos solubles que pueden acoplarse

reversiblemente a las deshidrogenasas, y que son incapaces de atravesar la
membrana interna mitocondrial, pero son capaces de aportar sus electrones
a la cadena transportadora de manera indirecta.

El NADH lleva sus electrones al Complejo I o NADH-deshidrogenasa, y el

NADPH otorga electrones a variadas reacciones anablicas en nuestro
organismo.

2. Flavoprotenas

Son protenas que poseen flavin-mononucleotidos (FMN) o Flavin-adenin-

dinucleotido (FAD) unidos de forma covalente a su sitio activo. El nucletido
de flavina oxidado puede aceptar 1 o 2 electrones, como semiquinona o
FMNH2/FADH2respectivamente. La transferencia electrnica ocurre, puesto
que la protena tiene un potencial de reduccin mayor que el del compuesto
oxidado.

Las flavoprotenas pueden actuar como intermediarios entre reacciones en

las que se donan 2 electrones (como deshidrogenaciones) o 1 electrn
(cmo la reduccin de quinona a hidroquinona)

3. Ubiquinona

Tambin llamada coenzima Q (CoQ o simplemente Q), la ubiquinona es una

benzoquinona con una larga cadena lateral isoprenoide.

Su nombre viene del ingls UBIquitous QUINONE (Quinona ubicua u

omnipresente)

La ubiquinona puede actuar como puente entre un dador de 2 electrones y

un aceptor de 1 electrn, adems, puesto que Q es una molcula pequea

43
 e hidrofbica, puede difundir a travs de la membrana interna mitocondrial y
actuar como una lanzadera (shuttle) de equivalentes de reduccin entre otros
transportadores menos mviles.

4. Protenas Ferro-sulfuradas

Son protenas que contienen Fe3+ asociado con azufre (S), sea ste
inorgnico o como el encontrado en las cadenas laterales de Cistena (Cys)...

Van de frmulas sencillas donde participa 1 tomo de Fe3+, hasta motivos

mas complejos donde actan mas de 4 tomos de Fe 3+.

Protenas de Rieske: variantes de las protenas ferro-sulfuradas, dnde el

Fe3+ se agrupa a 2 residuos de Histidina, en vez de Cistena.

En la transferencia electrnica mitocondrial, actan al menos 8 protenas

ferro-sulfuradas.

5. Citocromos

Los citocromos son protenas que presentan un cofactor Hemo (Fe3+).

Existen 3 tipos de citocromos de inters en sta etapa: citocromo a,

citocromo b y citocromo c, los que son distinguibles por sus diferencias en el
espectro de absorcin de luz.

En los citocromos a y b, los cofactores Hemo estn unidos fuertemente, pero

no covalentemente con la protena, mientras que en el citocromo c, el grupo
hemo se une de forma covalente con la protena mediante residuos de Cys.

El Potencial de reduccin del Fe3+, en el grupo Hemo de los citocromos,

depende de la interaccin con las cadenas laterales de la protena, por lo
que es diferente para cada citocromo.

El citocromo a y b son protena integrales de la membrana interna de la

mitocondria, mientras que el citocromo c de las mitocondras es soluble, y se
asocia de forma electrosttica con la parte externa de la membrana interna.

En este punto la clula ha ganado solo 4 ATP, 2 en la gluclisis y dos en el ciclo

de Krebs, sin embargo ha capturado electrones energticos en 10 NADH2 y 2

44
FADH2. Estos transportadores depositan sus electrones en el sistema de
transporte de electrones localizado en la membrana interna de la mitocondria.

La cadena respiratoria est formada por una serie de transportadores de

electrones situados en la cara interna de las crestas mitocondriales y que son
capaces de transferir los electrones procedentes de la oxidacin del sustrato
hasta el oxgeno molecular, que se reducir formndose agua.

Como resultado de esta transferencia de electrones, los transportadores se

oxidan y se reducen alternativamente, liberndose una energa que en algunos
casos es suficiente para fosforilar el ADP y formar una molcula de ATP. Se trata
de la fosforilacin oxidativa que permite ir almacenando en enlaces ricos en
energa la energa contenida en las molculas NADH2, FADH2, NADPH2, que
se liberan en la gluclisis y en el ciclo de Krebs y que ser ms tarde fcilmente
utilizada. Toda cadena respiratoria que comience por el NAD conduce a la
formacin de 3 ATP mientras que si comienza por el FAD produce slo 2 ATP.
El rendimiento energtico del NADP es similar al del NAD, as como el del GTP
lo es al del ATP.

Dicha tabla corresponde al proceso de una molcula de glucosa.

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 CONCLUSIONES

_ La fosforilacin oxidativa es un proceso bioqumico que ocurre en las

clulas. Es el proceso metablico final (catabolismo) de la respiracin
celular, tras la gluclisis y el ciclo del cido ctrico.

_ La fosforilacin oxidativa se produce en las membranas biolgicas.

_ El NADH y FADH2, son molculas donadores de electrones las cuales se

utilizan en un mecanismo intrincado (que implica a numerosas enzimas
como la NADH-Q reductasa, la citocromo c oxidasa y la citocromo
reductasa), gracias a la bomba H+ que moviliza los protones contra un
gradiante de membrana.

_ El complejo proteico llamado ATP-sintasa situado en la membrana

mitocondrial interna (MMI), permite a los protones pasar a travs en
ambas direcciones; genera el ATP cuando el protn se mueve a favor de
gradiente.

_ Cada molcula de NADH contribuye a formar entre 2 y 3 molculas de

ATP, mientras que cada FADH2 contribuye a un mximo de 2 molculas
de ATP.

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BIBLIOGRAFA
http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/bioquimica-estructural-y-
metabolica/materiales-de-clase/Tema-13.-Cadena-de-transporte-
electronico.pdf
https://drleivaenriquez.files.wordpress.com/2007/06/cadena-respiratoria-
fosforilacion.pdf
http://www.odon.uba.ar/uacad/bioquimica/docs/clase%2014cadenarespiratori
afosforilacionoxidativa2012
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jaislocr/rutas_metabolicas/cadena_r
espiratoria.pdf
Lehninger. PRINCIPIOS DE BIOQUIMICA. David L. Nelson, Michael M. Cox.
https://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/11/23/inhibidores-de-la-
cadena-de-transporte-de-electrones/
http://www.ffis.es/volviendoalobasico/4fosforilacion_oxidativa.html
https://es.slideshare.net/Regaladiux/fosforilacin-oxidativa-20563387
http://lucero-bioqumica.blogspot.pe/2009/04/fosforilacion-oxidativa.html
https://themedicalbiochemistrypage.org/es/oxidative-phosphorylation-
sp.php#stoichiometry
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/teoria%20quimiosmotica.html
Bioquimica jhon w. Baynes metabolismo oxidativo mitocondrias
Champe, Harvey, Ferrier, Pamela C., Richard A., Denise R. (2005).
6. Bioqumica (tercera edicin). MCGRAW HILL. pp. 88-91
GLASER E, NORLING B, KOPECKY I, and ERNSTER L. "Comparison of the
Effects of Oligomycin and Dicyclohexylcarbodiimide on Mitochondria1
ATPase and Related Reactions" Eur J Biochem f21, 525-531 (1982)
MARK J. vAN RAAIJ, JAN PIETER ABRAHAMS, ANDREW G. W. LESLIE,
AND JOHN E. WALKER - The structure of bovine Fl-ATPase complexed with
the antibiotic inhibitor aurovertin B (1996).
Brufani, M.; Keller-Schierlein, W.; Loeffler, W.; Mansperger, I.; Zaehner, H.
(1968). "Metabolic products of microorganisms. LXIX. Venturicidin B,
cotrycidin, and the sugar structural units of venturicidin A and B". Helvetica
Chimica Acta. 51 (6): 12931304.

47
 Aizawa, Shojiro; Nakamura, Yuko; Shirato, Shiro; Taguchi, Ryusuke;
Yamaguchi, Isamu; Misato, Tomomasa (1969). "Aabomycin A, a new
antibiotic. I. Production, isolation, and properties of aabomycin A". Journal of
Antibiotics. 22 (10): 457462.
Universidad de Extremadura, Departamento de Biologa y Produccin de
vegetales. Estudio de los flujos netos simultneos de H y K y la actividad
Redox en races aeroponicas estriles de plntulas de Girasol. (Octubre,
1997)
Christopher K. Mathews, K. E. Van Holde, Kevin G. Ahern.
15. Bioqumica (tercera edicin). Pearson Educacin, S.A. pp. 600-615.
https://books.google.com.pe/books?id=r5bedH_aST0C&pg=PA867&lpg=PA8
67&dq=desacoplamiento+de+la+fosforilaci%C3%B3n+oxidativa&source=bl&
ots=RmmQeRudO5&sig=is6Dq7aSAAu06LyP4tZjtLbLR6g&hl=es-
419&sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q&f=true
https://books.google.com.pe/books?id=FXDiqLK6GmAC&pg=PA578&lpg=PA
578&dq=Desacoplamiento+de+la+fosforilaci%C3%B3n+y+el+transporte+ele
ctr%C3%B3nico&source=bl&ots=UrNyzg11JF&sig=sCubGM1OkNhAVd3kuE
SBfAqTgoY&hl=es&sa=X&redir_esc=y#v=snippet&q=Desacoplamiento&f=fal
se
https://books.google.com.pe/books?id=HZaC45m9lMMC&pg=PA178&lpg=P
A178&dq=desacoplamiento+de+la+fosforilaci%C3%B3n+oxidativa&source=
bl&ots=jpQ2Ktc0uI&sig=_GYm_Sj31SZF2VWV5Pdj0fiDDBE&hl=es-
419&sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q=desacoplamiento&f=true
https://books.google.com.pe/books?id=HRr4MNH2YssC&pg=PA532&lpg=PA
532&dq=desacoplamiento+de+la+fosforilaci%C3%B3n+oxidativa&source=bl
&ots=LUyKH1vo7v&sig=yovtfpBxTcolhG6x-AV6krBzLTE&hl=es-
419&sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q=desacoplamiento%20&f=false
https://es.wikibooks.org/wiki/Bioqu%C3%ADmica/Cadena_de_Transporte_de
_Electrones
https://temasdebioquimica.wordpress.com/tag/cadena-respiratoria/
https://respiracioncelular.wordpress.com/cadena-respiratoria/

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