Universidad Austral de Chile

Facultad de Ciencias Agrarias

Escuela de Agronoma

Calibracin de refractmetro Brix para la

determinacin del contenido de Inmunoglobulina
G en calostro bovino

Memoria presentada como parte de los

requisitos para optar al ttulo de
Ingeniero Agrnomo

Smiljan Antonio Lozic Silva

Valdivia Chile
2013
 i

INDICE DE MATERIAS

Captulo Pgina

RESUMEN 1

SUMMARY 3

1 INTRODUCCIN 4

2 REVISIN BIBLIOGRFICA 5

2.1 Calostro como aportador de inmunidad para terneros 5

2.1.1 Caractersticas del calostro bovino 5

2.1.2 Importancia del aporte de calostro para los terneros 6

2.1.3 Enfermedades transmitidas por el calostro bovino 6

2.1.4 Tratamiento del calostro contra agentes infecciosos 7

2.2 Importancia de las inmunoglobulinas del calostro bovino 7

2.2.1 Mtodo de absorcin de inmunoglobulinas calostrales 8

2.2.2 Funcin de la inmunoglobulina G 8

2.2.3 Cantidad de IgG consumida 9

2.3 Mtodos de determinacin de inmunoglobulinas en calostro bovino 9

2.3.1 Radioinmunodifusin o inmunodifusin radial (RID) 10

2.3.2 Ensayo de inmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISA) 10

 ii

2.3.3 Espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS) 10

2.3.4 Calostrmetro 11

2.3.5 Refractmetro Brix 12

2.3.5.1 Ventajas de utilizar el refractmetro Brix 12

3 MATERIAL Y METODOS 14

3.1 Origen de la muestra 14

3.2 Duracin de trabajo 14

3.3 Lugar de realizacin 14

3.4 Obtencin de muestras 14

3.4.1 Conservacin de las muestras 14

3.4.2 Determinacin de IgG 15

3.5 Capacidad de diagnostico efectivo del mtodo Brix 16

3.6 Anlisis y correccin de datos 17

3.7 Anlisis estadstico 17

4 18
PRESENTACIN Y DISCUSIN DE RESULTADOS

4.1 Distribucin de muestras 18

4.2 Correlacin entre mtodos de determinacin de IgG por NIRS y por 20

Brix

4.3 Concentracin de inmunoglobulinas segn nmero de lactancias 21

4.4 Punto de corte para Brix 23

 iii

5 CONCLUSIONES 25

6 BIBLIOGRAFA 26
 iv

INDICE DE CUADROS

Cuadro Pgina

1 Comparacin entre la composicin del calostro y la leche entera 6

2 Capacidad de diagnostico efectivo del mtodo Brix 23

 v

INDICE DE FIGURAS

Figura Pgina

1 Estimacin de la concentracin de IgG (g/L) por medio de 19

espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS), en
muestras de calostro, de un rebao de vacas Holstein

2 Diagrama de distribucin de lecturas obtenidas por refractmetro Brix, 20

para la determinacin de IgG, de un total de 105 muestras de calostro,
de un rebao de vacas Holstein

3 Correlacin entre las lecturas por Refractmetro Brix y NIRS de IgG en 21

muestras de calostro (n = 105)

4 Correlacin entre las muestras de calostro analizadas por el 22

refractmetro Brix y la espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo
cercano (NIRS) estratificadas por lactancia (n = 61)
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RESUMEN

El calostro es el alimento ms importante para el ternero dentro de las primeras 24 horas

de nacido ya que es aqu donde ocurre la transferencia pasiva de anticuerpos. Es de vital
importancia conocer su calidad y son los niveles de inmunoglobulina G (IgG) los que se
usan como indicador para estimar la inmunidad pasiva que el ternero ha adquirido.

El presente estudio busca tener una nueva y mejor herramienta de terreno para evaluar la
calidad del calostro, su nombre es Refractmetro Brix y es un instrumento que es capaz
de determinar slidos solubles en la solucin, los cuales en el calostro son principalmente
IgG. El estudio consisti en analizar muestras de calostro, de 105 vacas Holstein con
distinto nmero de partos, mediante el mtodo de espectroscopa de reflectancia en el
infrarrojo cercano (NIRS) para la determinacin de IgG y correlacionar estos valores, con
los grados Brix obtenidos en las mismas muestras.

El objetivo general fue determinar las caractersticas del refractmetro Brix como mtodo
para la evaluacin indirecta de la calidad del calostro en vacas lecheras.

Se obtuvieron los valores de referencia de las muestras identificando los diferentes

contenidos de IgG mediante NIRS. Paralelamente se procedi a dar lectura con el
refractmetro Brix, considerando que el inters era poder diferenciar muestras con valores
iguales o mayores de 50g/L. La informacin de ambas lecturas se analiz a travs de
ecuaciones de regresin, tanto para el rebao completo, como diferenciado por nmero
de partos de manera de poder discriminar el efecto sobre la lectura Brix. Los resultados
indicaron un R2 = 0,5659 entre la lectura Brix y NIRS de todas las muestras. Cuando se
analiz diferenciando vaquillas de primer parto y vacas de ms de un parto, el equipo no
pudo discriminar adecuadamente las concentraciones de IgG que provenan de vaquillas
de primer parto, principalmente dada por la alta variabilidad de las concentraciones de IgG
del calostro de estas (R2 = 0,185), mientras que para las vacas de segundo parto en
adelante, s se pudo discriminar de manera adecuada las concentraciones de IgG (R2 =
0,728). Finalmente para determinar la capacidad de diagnostico efectivo del mtodo Brix
se hizo un anlisis estadstico, para determinar los Brix a partir del cual existen mas de
50 gr de IgG por Lt de calostro, donde se recomend para este rebao el punto de corte
de 18Brix.
 2

En este estudio se pudo concluir que el Refractmetro Brix es un mtodo que funciona
para la determinacin de calostros de buena calidad (50 g/L o mas), en vacas de segundo
parto en adelante, pero sin embargo no predice exactamente el contenido de IgG del
calostro.
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SUMMARY

Colostrum is the most important feed for the calf during the first 24 hours of life. It is at this
time when possive transference of antibodies occurs.the measurement of the colostrum`s
quality and IgG levels are increasingly relevent at this time. Levels of inmunoglobulin G
(IgG) are used as indicators to estimate the amount of passive immunity a new born
acquires.

The present study seeks to test and avaluate a better fieldwork tool to evaluate colostrum
quality, its name is Brix Refract-meter (BRIX), instrument capable of determining solible
solids in solution, which in colostrum IgG is the main solid.

The study evaluated IgG content of colostrum samples in 105 holstein cows of different
parity by the Near Infrared Spectrometry (NIRS) testing method and correlated to the Brix
Refract-meter readings of the same samples.

The general objetive to determine the Brix Refract meter characteristics as tool to estimate
indirectly colostrum quality in dairy cows.

Reference data for IgG contents of the different colostrum sample from NIRS were
registred. At the same time samples were read with the Brix refractometer aiming to
discriminate between sample equal or higher than 50g/L of IgG contents. Information was
analized as regressions of the whole hard or separating by parity in order to be able to
determine its effect over the Brix readings.

Results showed a R2 = 0.5659 between BRIX and NIRS for the complete herd. But, when
analyzing the Brix refractometer was not able to discriminate in heifers frist calving
adequately the IgG contents (R2 = 0.185), suspected mainly because of the high variability
of heifer colostrum. On the contrary when Brix reading was compared to NIRS in cows of 2
or more the Brix testing achieved adequate readings (R2 = 0.728).

Finally to determine the effective diagnostic capacity of the BRIX reading scale to a quality
colostrum ( 50g/L) a statistical analysis was performed were scale reading of 18 was
considered of having at least 50 g/L of IgG in colostrum, therefore of good quality.
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1 INTRODUCCION

Actualmente el mtodo ms utilizado en las lecheras para la determinacin de la calidad

del calostro en terreno es el calostrmetro, el cual es un instrumento frgil e impreciso ya
que sus mediciones son afectadas por la temperatura, adems de ser un mtodo lento de
evaluacin. El refractmetro Brix es un instrumento fcil de usar, til y aplicando slo una
gota de calostro ofrece una lectura en cuestin de segundos, adems mide slidos para
determinar la calidad del calostro. Esta medicin no es afectada por la temperatura y
ahorra el envi de la muestra al laboratorio para la determinacin de slidos totales.

Su uso permitir y facilitar la toma de decisiones acertadas en el manejo del calostro y

el adecuado y ms preciso suministro de inmunoglobulinas al ternero.

En el presente trabajo se da a conocer la calibracin de un refractmetro Brix para la

determinacin del contenido de Inmunoglobulina G (IgG) en calostro bovino como
estimador de calidad en rebaos lecheros. Se utilizara como mtodo de referencia el de
espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS).

El objetivo general es determinar las caractersticas del refractmetro Brix como mtodo
para la evaluacin indirecta de la calidad del calostro en vacas lecheras.

Los objetivos especficos son:

- Correlacionar la medicin de grados Brix con el nivel de inmunoglobulina G en el

calostro.

- Comparar la valoracin indirecta de calidad o contenido de IgG del refractmetro

con la determinacin por NIRS

- Elaborar una curva de calibracin para el refractmetro Brix en base a una

correlacin con la determinacin de IgG por NIRS.

- Evaluar la sensibilidad y especificidad del mtodo.

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2 REVISION BIBLIOGRAFICA

2.1 Calostro como aportador de Inmunidad para teneros.

El calostro es ampliamente reconocido como el factor ms importante en la determinacin

de la salud y la supervivencia del ternero recin nacido. Adems de la reduccin del
riesgo de morbilidad y mortalidad antes del destete, existen tambin beneficios
adicionales a largo plazo que estn asociados con la transferencia pasiva exitosa, estos
incluyen reduccin de la mortalidad en el perodo posterior al destete, mejora la tasa de
ganancia de peso y la eficiencia alimenticia, la reduccin de la edad al primer parto, la
mejora de la produccin de leche en la primera y segunda lactancia, y la tendencia de
reduccin de mortalidad durante la primera lactancia (GODDEN, 2008).

2.1.1 Caractersticas del calostro bovino. Tras el parto, la glndula mamaria segrega
un lquido cuya composicin y aspecto son muy diferentes a los de la leche normal, el
calostro, su color es entre amarillento a parduzco e incluso con un tinte francamente
rojizo, de consistencia viscosa y siempre turbio, emite un olor peculiar, suele tener sabor
salobre, reaccin dbilmente acida, siendo muy rico en enzimas, sobre todo en catalasa y
al dejarlo reposar se divide en dos capas, la superior ms opaca y la inferior ms clara
(ROSELL y DOS SANTOS,1952). El calostro contiene ms grasa (6.7 % vs 3.2 %), ms
protena (14 % vs 3.2 %), ms minerales y vitaminas (A, D y E) que la leche normal
(VELASCO, 2011).

En la etapa calostral, la actividad de sntesis de la glndula mamaria no se encuentra

an plenamente desarrollada, adems el lquido secretado contiene una elevada
proporcin de inmunoglobulinas procedentes de la sangre. Por este hecho, el calostro
tiene una propiedad especial, pues las inmunoglobulinas son anticuerpos que protegen al
recin nacido contra las infecciones, sin embargo es desechada para el consumo
humano. La etapa calostral es corta, al cabo de pocos das el lquido secretado muestra
ya las propiedades de la leche normal (ALAIS, 1985).
 6

CUADRO 1 Comparacin entre la composicin del calostro y la leche entera.

COMPONENTES (%) Nmero de ordeas

1 2 3 4 5 11
Calostro Leche de transicin Leche entera
Slidos totales 23.9 17.9 14.9 13.9 13.6 12.5
Grasas 6.7 5.4 3.9 3.7 3.5 3.2
Protenas 14 8.4 5.1 4.2 4.1 3.2
Anticuerpos 6 4.2 2.4 0.2 0.1 0.09
Lactosa 2.7 3.9 4.4 4.6 4.7 4.9
Minerales 1.11 0.95 0.87 0.82 0.81 0.74
Vit A, ug/dl 295.0 .. 113.0 .. 74.0 34.0

FUENTE: CAMPOS (2007).

2.1.2 Importancia del aporte de calostro para los terneros. La adecuada transferencia
pasiva de inmunoglobulinas es fundamental para la supervivencia y la salud de los
terneros tras el nacimiento a travs del calostro (CHIGERWE et al.., 2008). Si el productor
maneja mal las primeras 24 horas de vida de un ternero, puede afectar realmente a este
para el resto de su vida y poner en peligro su capacidad para producir leche cuando
crezca (QUIGLEY, 2010), la tasa de mortalidad de terneras en la etapa de pre-destete es
alta y oscila entre 8 y 11% (NAHMS, 1993) y una tercera parte de estas muertes ocurre
dentro de las primeras tres semanas de vida, debido principalmente a la falla en la
transferencia de inmunidad pasiva (WELLS et al.., 1996). El calostro contiene una alta
concentracin de inmunoglobulinas que proporcionan proteccin contra la infeccin
microbiana (WHEELER et al.., 2007), los componentes del calostro son principalmente
tres clases de inmunoglobulinas que son la IgG, IgM e IgA (KORHONEN et al.., 2000),
IgG (particularmente IgG1) es el ms abundantes en el calostro bovino (STELWAGEN et
al.., 2009), que comprende alrededor de 80 a 90% de las inmunoglobulinas totales
(KORHONEN et al.., 2000).

2.1.3 Enfermedades transmitidas por el calostro bovino. El calostro es fundamental

para la proteccin del ternero recin nacido contra las enfermedades infecciosas en las
primeras semanas y meses de vida. Sin embargo, el calostro tambin puede representar
una de las primeras exposiciones potenciales de los terneros lecheros a los agentes
infecciosos, incluyendo Mycoplasma spp., Mycobacterium paratuberculosis, coliformes
fecales y Salmonella spp. (STREETER et al., 1995; STEELE et al., 1997; WALZ et al.,
 7

1997). La contaminacin bacteriana del calostro es una preocupacin porque las bacterias
patgenas pueden actuar directamente para causar enfermedades como la diarrea o
septicemia. Adems, se cree que las bacterias en el calostro pueden interferir con la
absorcin pasiva de anticuerpos del calostro en la circulacin y provocar una reduccin de
la transferencia pasiva de inmunidad en los terneros (JAMES et al., 1981 y POULSEN et
al., 2002).

2.1.4 Tratamientos del calostro contra agentes infecciosos. Hace ya varios aos se
ha aumentado el inters por la alimentacin con calostro pasteurizado para reducir la
transmisin de agentes patgenos infecciosos a los terneros. Sin embargo las primeras
investigaciones para pasteurizar el calostro utilizando los mtodos convencionales y las
temperaturas que normalmente se utilizan para pasteurizar la leche, a dado resultados
menos que aceptables, ya que resulta en una reduccin de hasta el 32% de
concentracin de inmunoglobulina G (IgG), y reduca las concentraciones sricas de IgG
en terneros que fueron alimentados con calostro pasteurizado (GODDEN et al., 2003;
STABEL et al., 2004). sin embargo, este problema puede ser resuelto mediante el uso de
una baja temperatura, ha mayor tiempo. En la mayora de las situaciones, el tratamiento
trmico de calostro a 140 F (60 C) durante 60 minutos debera ser suficiente para
mantener las concentraciones de IgG, mientras que la eliminacin de patgenos
importantes, como la Listeria monocytogenes, E. coli, Salmonella enteritidis (McMARTIN
et al., 2006; GODDEN et al., 2003). Una prueba de campo puso de manifiesto que cuando
el calostro es sometido a un tratamiento trmico a 140 F durante 60 minutos, y se
alimenta a los terneros, estos experimentan mejoras significativas en la eficiencia de
absorcin de los anticuerpos del calostro y tenan concentraciones de IgG en suero
significativamente mayor a las 24 horas despus de su nacimiento, comparados con los
terneros alimentados con calostro crudo (HAGMAN et al., 2006). Este beneficio se piensa
que es debido al hecho de que hay un nmero significativamente menor de bacterias
presentes en el calostro tratado trmicamente.

2.2 Importancia de las inmunoglobulinas del calostro bovino.

Las inmunoglobulinas (Igs) son protenas que se encuentran en el torrente sanguneo, son
componentes del sistema inmunolgico cuya funcin es neutralizar, y ayudar a destruir
bacterias, as como otras partculas extraas que hayan invadido el cuerpo. Los terneros
recin nacidos requieren asistencia inmune pasiva transferida por la madre a travs del
calostro, reflejndose el fracaso de la transferencia pasiva en una baja concentracin de
 8

inmunoglobulinas en los terneros. Este mecanismo de defensa representa para los

terneros una garanta de viabilidad en el medio; por lo tanto, la falla en la transferencia
pasiva de anticuerpos se refleja directamente en la generacin de prdidas econmicas
por muerte y enfermedades de los terneros (ALONSO, 2008).

2.2.1 Mtodo de absorcin de inmunoglobulinas calostrales. Cuando los terneros

recin nacidos son alimentados con calostro de buena calidad, los anticuerpos son
absorbidos a travs del intestino que se encuentra permeable; ellos ayudan a combatir las
infecciones e incrementan la posibilidad de supervivencia (ALONSO, 2008). El trmino
intestino abierto se refiere a la capacidad nica del enterocito neonatal para la absorcin
no selectiva e intacta de las molculas grandes, tales como inmunoglobulinas, por
pinocitosis. A partir de ah, las molculas de inmunoglobulina se transportan a travs de la
clula y se liberan en los linfticos de la exocitosis, despus de lo cual entran en el
sistema circulatorio a travs del conducto torcico. En un proceso conocido como el
cierre'', la eficiencia de la absorcin de inmunoglobulinas del calostro a travs del epitelio
intestinal del ternero disminuye linealmente con el tiempo desde el nacimiento, para cerrar
completamente en aproximadamente 24 horas. Alimentar con calostro despus de que el
intestino se ha cerrado todava ofrece el beneficio de la inmunidad local en el lumen del
intestino, pero la absorcin de inmunoglobulinas en la circulacin ya no se produce
(GODDEN, 2008)

2.2.2 Funcin de la inmunoglobulina G. Las inmunoglobulina G constituyen el 80 al

85% de todas las inmunoglobulinas del calostro bovino y su funcin es identificar y ayudar
a destruir agentes patgenos que causan enfermedades. Las inmunoglobulinas
especficas del calostro se forman en la ubre, ya sea por las vacunaciones, o bien porque
la madre gener anticuerpos a determinada enfermedad padecida (ALONSO, 2008). Hay
2 isotipos de IgG y estas son la IgG1 e IgG2, estas inmunoglobulinas trabajan juntas para
proporcionar al ternero la inmunidad pasiva (inmunidad proporcionada por la vaca y no
sintetizados por el becerro) hasta que se desarrolla la inmunidad activa propia del ternero.
Las inmunoglobulinas que se ingieren por el ternero son absorbidas por las clulas
epiteliales del intestino delgado, pasa en los espacios linfticos y luego a la circulacin
sangunea. Este mecanismo de transferencia (transferencia pasiva) comienza disminuir
aproximadamente un 12 a 23 h despus del nacimiento y deja en promedio a las 24 h
(McCOY et al., 1970).
 9

Aunque el nivel de inmunoglobulina que proporciona una proteccin adecuada variar con
la exposicin a enfermedades infecciosas, el estrs, el medio ambiente y la temperatura.
Un objetivo de ingestin de 10 mg/ml se ha sugerido como un nivel mnimo de IgG en el
suero de los terneros de aproximadamente 24 horas de vida para evitar el fracaso de la
transferencia pasiva (ALIANZA BOVINA EN ADMINISTRACIN Y NUTRICIN, 1995).

2.2.3 Cantidad de IgG consumida. DAVIS y DRACKLEY (1998) sugieren como regla
general que 100 gramos de IgG deben ser consumidas tan pronto como sea posible, para
lograr 10 g/L de IgG srica.

Sin embargo, es necesario considerar que el volumen de calostro a entregar para lograr
los 100 gr de IgG varan segn el volumen del plasma del ternero, que a sido estimado
puede varar entre 6,5% y 14,5% del peso vivo (ELIZONDO, 2007), la eficiencia aparente
de absorcin que varia entre 21% y 50%; y la concentracin de IgG del calostro que debe
ser como mnimo 50 g/L para realizar un aporte considerable a la inmunidad pasiva del
ternero (GODDEN et al., 2009).

2.3 Mtodos de determinacin de inmunoglobulinas en calostro bovino.

La concentracin de Inmunoglobulina G (IgG) del calostro es la medida de determinacin

ms comn de la calidad del calostro y esta puede variar considerablemente de una vaca
a otra y por esto idealmente, debe hacerse la prueba de calidad para evitar la
alimentacin con calostro de mala calidad. Comnmente se utiliza el calostrmetro que
puede ser utilizado para detectar y segregar el calostro de baja calidad, en base a su
densidad, pero los resultados pueden ser inexactos debido a los cambios de temperatura.
Otro mtodo que puede ser utilizado para determinar la calidad del calostro es el mtodo
de Elisa utilizado en inmunologa, ya sea para la cualitativa o cuantitativa deteccin de
antgenos; tambin est el mtodo de espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo
cercano (NIRS) que es una alternativa a los mtodos tradicionales para anlisis qumicos
el cual nos puede dar a conocer las concentraciones de IgG del calostro. Por otro lado se
encuentra el mtodo mas aceptado universalmente a nivel de laboratorio que es el de
radioinmunodifusin o inmunodifusin radial (RID), la cual es una tcnica que se utiliza
rutinariamente para medir la concentracin de diferentes antgenos solubles en fluidos
biolgicos. El mtodo de deteccin de calidad de calostro por medio de mediciones con
refractmetro Brix es un mtodo que da una lectura de grados Brix que pueden ser
correlacionados con una determinada cantidad de IgG, este mtodo es rpido y muy
prctico por lo que es uno de los mtodos mas recomendados para su uso en terreno.
 10

2.3.1 Radioinmunodifusin o inmunodifusin radial (RID). Hasta la fecha, esta ha

sido una tcnica muy popular debido a de su amplia disponibilidad y simplicidad. Las
muestras son tpicamente aplicadas a las placas petri en un gel de agarosa establecidas
con el anticuerpo. Durante la incubacin, la muestra difunde a travs del gel, con la IgG
formando un precipitado complejo con el anticuerpo. El dimetro del anillo es proporcional
a la cantidad presente de IgG. Una curva de calibracin es construida utilizando
estndares de concentracin conocida, e incgnitas se leen en contra de esta curva.
Muchos diferentes kits estn disponibles comercialmente. Sin embargo, es importante
tener en cuenta que el mtodo de cuantificacin de estndar primario puede variar entre
los fabricantes. La tcnica es muy adaptable, despus de haber sido reportado para el
anlisis cuantitativo de IgG en muestras humanas, ovinas, caprinas, equinas y porcinas,
adems de calostro bovino y la leche (LEYTON et al., 2007).

2.3.2 Ensayo de inmunoabsorcin ligado a enzimas (Elisa). En general, las tcnicas

de ELISA son ampliamente utilizadas en inmunologa, ya sea para la deteccin cualitativa
o cuantitativa de antgenos. En este contexto, se basan en la interaccin entre el antgeno
(IgG bovino) y anticuerpos producidos contra el antgeno. Muchos formatos de ELISA
estn disponibles, dependiendo de la secuencia del antgeno y anticuerpo. Para la
cuantificacin de IgG bovino, anticuerpos producidos contra IgG bovino (tpicamente
policlonal) estn enlazadas a la superficie de plstico de un ELISA de 96 pocillos placa de
microtitulacin y las muestras se aplican directamente a la superficie, lo que resulta en
unin de IgG especfica para el anticuerpo. La deteccin y cuantificacin se basan en
medicin colorimtrica de la envolvente anticuerpo-enzima conjugado e interpolacin con
una curva estndar. La medicin cuantitativa de IgG usando tcnicas de ELISA es comn
en los estudios de estabilidad de IgG, donde existen diversos efectos provocados por
condiciones de procesamiento tales como temperatura o pH. La tcnica tambin se
adapta fcilmente para mostrar la actividad especfica contra los patgenos seleccionados
(LEYTON et al., 2007)

2.3.3 Espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS). La tcnica

NIRS, es una ciencia combinada alternativa a los mtodos tradicionales para anlisis
qumicos que, dentro de sus aplicaciones, permite determinar la composicin nutricional
de distintos alimentos (ALOMAR y FUCHSLOCHER, 1998; FAUGHEY y SHARMA, 2000).

La espectroscopa se basa esencialmente en la interaccin de la radiacin

electromagntica y la materia a ser analizada (REEVES, 2000). El funcionamiento bsico
 11

de esta tcnica, busca la absorcin de energa por parte de las molculas constituyentes
de la materia y su posterior reaccin vibratoria, de extensin o doblamiento, de los
enlaces covalentes que las conforman (ALOMAR y FUCHSLOCHER, 1998).

MORCILLO (1974) y OSBORNE et al.. (1993), sealan que la radiacin electromagntica,

puede ser considerada como un conjunto de ondas armnicas simples, las que ondulan
interconectadas entre s mediante campos elctricos perpendiculares a la direccin de
propagacin y campos magnticos con la misma frecuencia y perpendicular al campo
elctrico, siendo stos los que interactan con la materia objetivo. Por su parte, un
movimiento de onda armnico simple, puede ser caracterizado por las propiedades del
seno de sta, tales como; frecuencia (nmero de ciclos por segundo de la onda) y longitud
de onda. Adems, para caracterizar la radiacin electromagntica, es de uso frecuente el
trmino de nmero de onda, el cual se define como; el recproco de la longitud de onda
expresado en centmetros, que a la vez se considera como ciclos por centmetro de
radiacin emitida (inverso de la longitud de onda).

La interaccin de la radiacin infrarroja con una muestra puede ser registrada mediante
un espectro de transmitancia o reflectancia. Este se define como la representacin grfica
de la radiacin infrarroja incidente (transmitida o absorbida) en funcin de la longitud de
onda (o nmero de onda) de la misma (MORCILLO, 1974).

Dentro de sus ventajas, siguiendo protocolos previamente establecidos, es posible contar

con una tcnica de alta precisin, exactitud, no destructiva, rpida y que requiere de una
mnima o nula preparacin de la materia en estudio (GIVENS et al., 1997). De manera
contraria, la principal desventaja de NIRS, sealada por ALOMAR y FUCHSLOCHER
(1998), es el requerir de instrumentos para espectroscopa de alta precisin y valor
comercial, aunque para OSBORNE et al.. (1993), sera la dependencia de NIRS a los
mtodos empricos tradicionales de anlisis qumicos de alimentos.

2.3.4 Calostrmetro. El calostrmetro es un mtodo para estimar la calidad del calostro.

Este mtodo mide la gravedad especfica del calostro y estima gammaglobulinas totales,
sobre la base de una relacin estadstica. El calostrmetro ha sido ampliamente utilizado
para estimar la concentracin de IgG en el calostro, ya que existe una relacin estadstica
muy alta entre las gammaglobulinas y la gravedad especfica, esto permiti a los usuarios
del hidrmetro de estimar, con razonable certeza, la cantidad de la globulina en el
calostro. Se estima entonces la inmunoglobulina en el calostro basado en que la mayora
de las globulinas en el calostro se encuentra como inmunoglobulina. El problema ms
 12

comn es la temperatura del calostro, esto se observ cuando una muestra de calostro
medida con un calostrmetro podra ser considerado de alta calidad a una temperatura de
5 C, pero sera de mala calidad entre 35 y 40 C. Por lo tanto, si utiliza un calostrmetro,
es importante usarlo a una temperatura fija. El fabricante recomienda el uso del
calostrmetro en 22 C (QUIGLEY, 1998). Otro problema se refiere a la composicin del
calostro. Las cantidades de los componentes del calostrotales como las protenas en
grasa y sin inmunoglobulinas pueden afectar a la gravedad especfica, aumentando as el
error asociado con el calostrmetro. Adems, el calostro de vacas Jersey difiere de la de
Holstein, y estas diferencias pueden dar lugar a errores, tambin ocurre que la relacin
entre la gravedad especfica y total de IgG en el calostro no es una relacin lineal simple
que era consistente para todos los animales (QUIGLEY 1998).

PRITCHETT et al. (1997) indica que la relacin entre la gravedad especfica y la IgG no
fue lineal, sino curvilnea, esto hace que la prediccin del total de IgG en el calostro sea
incluso ms difcil.

2.3.5 Refractmetro Brix. Habitualmente el refractmetro Brix se utiliza para medir

lquidos como el vino o jugos para determinar la cantidad de slidos solubles en la
solucin, tambin se puede usar para medir rpidamente la calidad del calostro para
aportar a los terneros recin nacidos (ZIMMERMAN, 2010). El refractmetro, utilizado por
las instalaciones de las ternereras est diseado para medir el valor Brix de una solucin.

La escala Brix se utiliza para indicar el contenido de azcar de una solucin, pero esta
escala ha sido adaptada para su uso en las explotaciones agrcolas en las lecheras
(MILK PRODUCTS, 2011). La investigacin realizada por BIELMANN et al.. (2010)
determin que un valor Brix de 22% es adecuado para determinar si el calostro es de una
buena calidad (calostro debe medir 22%). Un valor Brix de 22% ser equivalente a 50
gramos por litro de IgG, que es donde comienza la zona verde en el calostrmetro (es
decir, de buena calidad).

2.3.5.1 Ventajas de utilizar refractmetro Brix. El refractmetro Brix es un instrumento

fcil de usar, til y ofrece una lectura en cuestin de segundos (QUIGLEY, 2010), adems
de ser barato. Un refractmetro Brix ofrece importantes ventajas sobre un calostrmetro
porque la precisin del instrumento no parece ser afectada por la temperatura de la
muestra (BIELMANN et al., 2008). En el pasado la determinacion de la calidad del
calostro ha requerido el uso de herramientas de diagnstico imprecisos y frgiles (es
decir, calostrmetro), mientras que la medicin de slidos totales en la leche pasteurizada
 13

ha requerido la presentacin de muestras de leche para laboratorios (BIELMANN, 2008).

En los ltimos aos, las lecheras y los predios de produccin de terneros han estado
recurriendo al uso de refractmetros Brix para estimar la IgG de concentracin en el
calostro materno y/o medir y monitorear los slidos totales en la leche pasteurizada
(BIELMANN, 2008 y ZIMMERMAN, 2010).

La composicin de nutrientes (por ejemplo, slidos totales, grasa, protena) de leche

pasteurizada de residuos puede ser muy variable en el da a da debido a la variacin en
la poblacin de vacas (proporcin de vacas frescas vs tratada) o adicin inadvertida de
agua de lavado, lo que conduce a nutrientes incompatibles, consumo deprimido y
potencialmente menor crecimiento de los terneros antes del destete. Mientras que el
seguimiento real de las concentraciones de grasa y protena es difcil, un refractmetro
Brix puede ser utilizada para estimar el porcentaje total de slidos de la leche.
Posteriormente, deseados slidos totales de la alimentacin lquida se pueden adquirir
mediante la adicin de sustitutos lcteos. Para la determinacin de slidos totales con un
refractmetro Brix, el valor Brix debe ser convertido mediante una ecuacin establecida
(MOORE et al.,2009).
 14

3 MATERIALES Y METODOS

3.1 Origen de la muestra.

Las muestras de calostro provinieron de un rebao lechero de vacas Holstein

pertenecientes al predio del Instituto de Investigacin Agropecuaria (INIA) Quilamapu,
Regin del Bo Bo.

3.2 Duracin del trabajo.

Fase de obtencin de muestras: 29 de noviembre del 2011 al 1 de marzo del 2012.

Fase de anlisis de datos: 1 de junio del 2012 al 31 agosto del 2012

3.3 Lugar de realizacin de los anlisis.

Laboratorio de Nutricin Animal del Instituto de Produccin Animal (IPA), Universidad

Austral de Chile, Valdivia.

3.4 Obtencin de las muestras.

Las muestras de calostro fueron obtenidas a partir 105 vacas de entre uno y siete partos,
el calostro se obtuvo mediante ordea mecnica, desviando el flujo hacia el tarro lechero
directamente desde la unidad de ordea, obtenindose 4 litros de de producto completo.
Desde aqu, el calostro se trasvasij a un balde previamente lavado. En este recipiente, la
secrecin se homogeneiz para asegurar que la muestra sea representativa, luego de
esto las muestras fueron almacenadas en tubos de ensayo, plsticos con tapa rosca, de
50ml en los cuales fueron congelados y registrados con el nmero de crotal de cada
animal junto con una planilla que indicaba la fecha del muestreo, las mediciones de lacto
decmetro, cantidad de litros de la primera ordea y el nmero de partos de cada vaca.
Las muestras fueron transportadas al Laboratorio de Nutricin Animal de el Instituto de
Produccin Animal de la Universidad Austral de Chile.

3.4.1 Conservacin de las muestras. En el laboratorio se procedi a guardar las

muestras en un congelador a una temperatura de -20C, para conservarlas hasta el
momento en que fueran analizadas.
 15

3.4.2 Determinacin de IgG. Para realizar los anlisis de determinacin de IgG, eran
extradas del congelador slo las muestras que iban a ser analizadas, sometindolas a
una descongelacin lenta a 4 C para evitar que la muestra de calostro se desnaturalice.
Al momento de analizar las muestras ya descongeladas, estas se dejan a temperatura
ambiente, luego son homogenizadas para obtener una dispersin adecuada del contenido
de la muestra y dejarlas listas para ser analizadas.

Estas fueron sometidas a dos tipos de mediciones: la primera, fue la medicin de Brix
que consiste en agregar alrededor de tres gotitas de la muestra de calostro en el prisma
del refractmetro Brix, tapar la muestra con el cubre objetos y mirar a travs del ocular del
instrumento, en donde se observa una franja de color azul que indica los Brix que
contiene la muestra, la precisin con la cual la franja azul indica el valor de Brix en el
instrumento depende de la densidad de la muestra, ya que en muestras de calostros ms
densos, la franja azul estaba muy definida e indicaba de manera mas exacta los Brix,
mientras que en las muestras menos densas se observo una franja azul borrosa y menos
definida, por lo cual estas muestras de calostro fueron medidas tres veces con el fin de
sacar un promedio y obtener un dato mas exacto. Luego de cada medicin, el
refractmetro Brix era limpiado para que no quede ningn resto de calostro que pueda
contaminar la prxima muestra.

A continuacin las muestras fueron sometidas al sistema de espectroscopa de

reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS), el cual consiste en depositar 1mL de de
muestra de calostro sobre el porta objeto de la cubeta y luego sellar con el cubre objeto
de cristal de cuarzo, con esto se busca que la muestra quede esparcida
homogneamente y sin burbujas de aire en la superficie del cristal ya que estas interfieren
considerablemente la medicin, al igual que cualquier cuerpo que no corresponda a la
muestra de calostro, finalmente la muestra es introducida en el equipo NIRS el cual est
calibrado para entregar computacionalmente una curva que permite determinar la
cantidad de inmunoglobulina G de la muestra de calostro. Este proceso fue repetido dos
veces por cada muestra con el fin de disminuir errores de medicin y obtener un valor
ms preciso. Despus de cada medicin las cubetas y el cubre objeto del instrumento
eran aseados minuciosamente para no dejar restos de calostro que puedan contaminar la
evaluacin de la prxima muestra.
 16

3.5 Capacidad de diagnstico efectivo del mtodo Brix.

El instrumento utilizado es un refractmetro manual de 0 a 32Brix, marca MRC, modelo

REF-113ATC.

Se realiz un anlisis estadstico para proponer el punto de corte de Brix que sea capaz
de predecir de mejor manera los 50 g de IgG por litro de calostro que necesita el ternero
para un adecuado aporte de anticuerpos, para esto se usaron tres parmetros, la
sensibilidad (Se) que fue definida como la capacidad para que el mtodo Brix estime
correctamente los valores sobre 50 g/L NIRS, la especificidad (Sp) que es la capacidad
de la prueba Brix para detectar valores menores a 50 g/L NIRS, el valor predictivo positivo
(VPP) se defini como la probabilidad de que una muestra de calostro, evaluada
mediante NIRS, obtenga un resultado positivo para la lectura por Brix y la precisin se
defini como la capacidad de el refractmetro para discriminar correctamente las
muestras positivas ( >= 50g IgG/L) y negativas ( < 50g IgG/L) entre los discriminados de
la misma forma por NIRS.

En base a estas asociaciones, la sensibilidad (Se), especificidad (Sp), valor predicativo

positivo (VPP), y la precisin se calcularon segn las frmulas:

Posteriormente se elabor un cuadro esquemtico indicando los diagnsticos correctos

positivos (a), diagnsticos correctos negativos (b), diagnsticos incorrectos positivos (c) y
diagnsticos incorrectos negativos (d). En el mismo cuadro se observan adems los
valores de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y precisin de los mtodos
diagnsticos utilizados y se indica cuando alguno de estos parmetros demuestra
 17

diferencias estadsticamente significativas entre lo observado por los mtodos

diagnsticos utilizados.

3.6 Anlisis y correlacin de datos.

Teniendo las lecturas de los Brix y la determinacin de cantidad de IgG, obtenidas por el
mtodo NIRS, en muestras de calostro, se procede a analizar y correlacionar los datos.

El primer anlisis realizado es el de distribucin de los valores de IgG entregados por el

equipo NIRS, en donde se separaron las muestras segn su contenido de IgG en
intervalos de 10 gramos de IgG por litro de calostro, indicando el valor de corte aceptable
de 50 g/L, a continuacin se procedi a analizar la distribucin de los grados Brix de las
muestras en intervalos de 1 Brix, partiendo de 11 hasta 32 Brix, una vez analizadas las
muestras individualmente con cada mtodo, se procedi a hacer la correlacin entre las
lecturas entregadas por Refractmetro Brix y los datos obtenidos del equipo NIRS, de
IgG. Tambin con esta Correlacin se hizo un segundo estudio, esta vez estratificando las
muestras segn nmero de lactancias, en dos grupos, el primero fue de muestras
provenientes de vacas de primera lactancia y el segundo grupo fue de segunda lactancia
en adelante.

Los valores adems fueron analizados de manera estadstica para determinar el valor de
corte del instrumento Brix, que indique muestras por sobre o bajo 50 g/L NIRS, para esto
fueron evaluados los valores de 18, 20, 21 y 22Brix.

3.7 Anlisis estadstico.

La significancia estadstica de las variables de la prueba (Se, Sp, VPP y precisin) para
las muestras en estudio, se determin mediante Chi-cuadrado o la prueba exacta de
Fisher considerando un intervalo de confianza del 95%. Las diferencias se consideraron
estadsticamente significativas cuando P<0,05. Para la realizacin de todos los anlisis
estadsticos se utiliz el Software GraphPad Prism 5.00.
 18

4 PRESENTACION Y DISCUSIN DE RESULTADOS

A continuacin se presentan los resultados obtenidos en el anlisis de muestras de

calostro de un rebao de 105 vacas Holstein de distintas lactancias, para la obtencin de
valores indicadores de su calidad, a travs de la medicin indirecta del contenido de IgG.
Estos valores fueron obtenidos por lecturas entregadas por un refractmetro Brix y
comparados con los valores de gramos de inmunoglobulina G por litro de calostro
estimados mediante espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS).

4.1 Distribucin de muestras.

Las lecturas de las muestras de calostro para contenido de IgG (g/L) por NIRS, fluctuaron
entre 17,5 a 190,9 gr de IgG/L de calostro (Figura 1). Las vacas evaluadas presentaron
una concentracin promedio de 94,5 g/L, mientras que la mediana fue de 92,3 g/L.

En la Figura 1 se presenta la distribucin de los valores de IgG estimados por NIRS para
las muestras de calostro evaluadas, en donde se observa que el 60% de las muestras se
encuentran en un rango de valores de entre 50 a 110 g/L, El 25,7% del total de muestras
presentan una concentracin entre 91 a 110 g/L. Solo el 13,3% de las muestras
presentaron contenidos de IgG por debajo del nivel de corte de 50 g/L no calificando
dentro del valor mnimo de calidad o contenido de IgG requerido para un adecuado
suministro de inmunidad a los terneros.
 19

FIGURA 1 Estimacin de la concentracin de IgG (g/L) por medio de espectroscopa

de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS), en muestras de calostro,
de un rebao de vacas Holstein

En la Figura 2 se observa la distribucin de las muestras de calostro analizadas para este

estudio, con respecto a los grados Brix obtenidos por estas. Las lecturas obtenidas
variaron entre 11 a 32 Brix, en donde el 16,19% de las muestras estn en valores bajo
18 Brix, el 22,85% de las muestra se encuentran entre 18 y 22 Brix y un 60,95 % de las
muestras est por sobre los 22 Brix.

El ltimo rango indica el valor de 32 Brix ya que este es el mximo que marca el
refractmetro Brix, con el cual se desarrollo el estudio. Adems destaca el rango de entre
23 a 23,9 Brix ya que dentro de este se encontr la mayor frecuencia de muestras, las
que representan un 13.3% del total, siendo la media de 23,36 Brix, mientras que ninguna
de las muestras evaluadas estuvo dentro de el rango de 12 a 12,9 Brix.

Cabe destacar que al observar por el ocular del refractmetro Brix no es posible distinguir
claramente entre decimales, ya que la lnea que indica los grados Brix no siempre est
bien definida y muchas veces se muestra un tanto borrosa, pero si nos permite visualizar
dentro de que rango de grados Brix se encuentra la muestra, por lo que los rangos
utilizados en esta figura son para ubicar con claridad las muestras de acuerdo a los
grados Brix que obtuvieron. A raz de esto, BIELMANN et al.. (2010), plantea que los
estudios futuros que implican el uso del refractmetro Brix debe tener en cuenta la
aparicin de una banda ancha en lugar de una lnea definida a travs de la escala. Sin
embargo, quizs lecturas que estn por encima del nivel de 25 Brix son de poca
 20

relevancia para la utilidad prctica debido a que estos niveles estn muy por encima del
sugerido punto de corte (22Brix), por lo tanto estas lecturas no son importantes para
decidir entre buena y mala calidad del calostro, pero si son importantes al decidir si el
ternero deber consumir 2 o 4litros de calostro para lograr una adecuada inmunidad
pasiva, o si se destina el calostro de menor calidad a la alimentacin del ternero en los
das sucesivos o de otros terneros de mayor edad.

FIGURA 2 Diagrama de distribucin de lecturas obtenidas por refractmetro Brix,

para la determinacin de IgG, de un total de 105 muestras de calostro,
de un rebao de vacas Holstein.

4.2 Correlacin entre mtodos de determinacin de IgG por NIRS y por Brix.

El coeficiente de correlacin entre las lecturas del refractmetro Brix y los valores
entregados por el equipo NIRS para la determinacin de IgG, en calostro, obtuvo un valor
de R2 = 0.5659, el cual incluso es mayor a un estudio realizado por BIELMANN et al..
(2010), donde obtuvieron un R2 = a 0.5. Esta diferencia puede estar dada por el porcentaje
de grasa de las muestras, por lo tanto, el volumen y la proporcin de protena del calostro
tendra un efecto en la precisin del refractmetro Brix, adems, glbulos de grasa y las
micelas de casena en el calostro puede alterar el ndice de refraccin de este (FOX y
MCSWEENEY, 1998). SKIDMORE et al. (2008) dieron a conocer que el nivel de grasa de
una muestra puede resultar en una banda ancha de color, la cual posteriormente puede
afectar el valor registrado por el refractmetro Brix. Por lo tanto, es posible que las
 21

diferencias en el contenido de grasa del calostro de diferentes individuos pudieran influir

en los resultados obtenidos de este.

FIGURA 3 Correlacin entre las lecturas por Refractmetro Brix y NIRS de IgG en
muestras de calostro (n = 105).

La Figura 3 asocia las lecturas entregadas por el refractmetro Brix y la cantidad de IgG
(g/L) que contienen las muestras de calostro analizadas por NIRS, haciendo una
correlacin entre ambas mediciones. Podemos observar que en general hay un alto grado
de correlacin entre los grados Brix y las concentraciones de IgG estimadas por NIRS
obtenindose un R2 = 0,5659, sin embargo, existen muestras que se escapan de la lnea
de tendencia ya sea por sobre o por debajo de esta, esto podra explicarse por diferencias
en el contenido de grasa que conforman el calostro y que puede ser variable para cada
individuo, alterando principalmente las mediciones del refractmetro Brix,

4.3 Concentracin de Inmunoglobulinas segn nmero de lactancias.

Es de conocimiento comn que el calostro de las vacas de primer parto es inferior en su

contenido de Ig en comparacin con las vacas de ms de un parto y que este aumente
gradualmente en vacas Holstein al aumentar el nmero de partos. (OYENIYI y HUNTER
1978).

En un estudio realizado por BIELMANN et al.. (2010), en donde se hizo una calibracin de
dos refractmetros Brix (optico y digital) como mtodo para evaluar la calidad del calostro
bovino, utilizando Inmunodifusin Radial (RID) como mtodo de determinacin de IgG en
laboratorio, se evidenci que la concentracin de Ig aumenta con las lactancias ya que los
 22

contenidos de IgG fueron inferiores a 50g/L en la mayora de las vacas de primer parto,
sin embargo, el promedio de calificaciones de grados Brix tanto para los instrumentos
pticos y digitales fueron similares.

Tanto en el presente estudio, como tambin en los ya citados, es evidente que el nmero
de lactancias de las vacas influyen sobre la concentracin de IgG del calostro (Figura 4).

FIGURA 4 Correlacin entre las muestras de calostro analizadas por el

refractmetro Brix y la espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo
cercano (NIRS) estratificadas por lactancia (n =61).

Para la elaboracin de la Figura 4 se utilizaron 61 muestras, 25 pertenecan a vacas de

primer parto y 36 a vacas de segundo parto en adelante, el resto de las muestras no fue
posible su evaluacin ya que no contaban con registros de partos.

En la Figura 4 se muestra que en el calostro proveniente de vaquillas de primer parto en

general no existe una buena relacin (R2 = 0,185) entre los grados Brix y los valores
entregados por el NIRS, producto de una gran dispersin de datos. Sin embargo, para las
muestras de calostro de vacas de segundo parto en adelante se encontr una buena
relacin entre los dos mtodos de evaluacin, obtenindose un R2 de 0,728. De los
resultados obtenidos en esta figura se observa que, para las muestras analizadas, existe
una mayor correlacin entre la lectura por Brix y la determinacin por NIRS a partir del
segundo parto lo que indicara calostros ms homogneos en su composicin. Pero no se
puede afirmar que el contenido de IgG es menor en el primer parto ya que existen varias
muestras de primera lactancia en que los contenidos de IgG incluso son mayores que en
 23

lactancias posteriores. Lo importante es que la efectividad con la que el refractmetro Brix

indica la calidad del calostro aumenta considerablemente en calostros de segunda
lactancia en adelante.

4.4 Punto de corte para Brix.

BIELMANN et al. (2010). sealan que una muestra de calostro positiva o de calidad
aceptable, obtenida mediante radio inmunodifusin (RID), se define como aquella que
contiene una concentracin de IgG igual o superior a 50 g/L. En el caso de este ensayo se
utilizo el mismo criterio pero la concentracin fue medida a travs del mtodo de
espectroscopia de reflectancia en el infrarrojo cercano (NIRS). En el estudio de
BIELMANN se considero una lectura de 22Brix como referencia de valor mnimo.

Con la idea de buscar el punto de corte mas adecuado para este estudio, que estime los
50gr de IgG por Lt de calostro, se analiz estadsticamente mediante Chi-cuadrado y
considerando un intervalo de confianza de 95%, el porcentaje de sensibilidad,
especificidad, precisin y valor predictivo positivo de las muestras para los valores de 18,
20, 21 y 22Brix, como se muestra el Cuadro 2.

CUADRO 2 Capacidad de diagnostico efectivo del mtodo Brix

% Brix
18 20 21 22
Se 94,24 a 83,81 b 78,42 b 69,53 c
Sp 65,12 a 90,00 a 93,02 a 97,67 a
P 90,34 a 84,59 a 80,37 a 73,29 a
VPP 94,6 b 98,3 a 98,6 a 99,5 a
-Se: Sensibilidad, Sp: Especificidad, P: Precisin y VPP: Valor predictivo positivo. Las
letras a, b y c indican si existe diferencia estadsticamente significativa entre las variables,
cuando P<0,05, considerando un intervalo de confianza de un 95%.

En el Cuadro 2 se muestra que para el valor de 18Brix se obtuvo la mayor capacidad

(94,24%) para que el refractmetro Brix estime correctamente el valor de IgG del calostro,
para la especificidad, que indica la capacidad de la prueba Brix para detectar valores
menores de 50g/L y para la precisin que es la capacidad del mtodo para detectar
valores sobre o bajo 50 g/L no se present una diferencia estadsticamente significativa
entre los distintos grados Brix evaluados. Sin embargo, para el valor predictivo positivo,
 24

que se defini como la probabilidad de que una muestra de calostro, evaluada mediante
NIRS, obtenga un resultado positivo para la lectura de Brix, el menor valor fue para los
18Brix que obtuvo una diferencia estadsticamente significativa con respecto a los otros
valores.

Para este rebao se recomienda utilizar el punto de corte de 18Brix ya que es el con
mayor capacidad de detectar correctamente calostros que posean sobre 50 g/L y si bien
este valor obtuvo un VPP inferior a los dems, hay que considerar que es de mayor
importancia que el calostro aportado al ternero sea de buena calidad con el fin de
favorecer el traspaso de inmunidad pasiva.
 25

5 CONCLUSIONES

- El Refractmetro Brix es un mtodo que funciona para la determinacin de

calostros de buena calidad (50 g/L o mas), en vacas de segundo parto en
adelante, sin embargo no, predice exactamente el contenido de IgG del calostro.

- La precisin con la cual la franja azul del refractmetro indica el valor Brix en el
instrumento depende de la densidad de la muestra, ya que en muestras de
calostros ms densos, la franja azul est muy definida e indica de manera ms
exacta los Brix, mientras que en las muestras menos densas se observa una
franja azul borrosa y menos definida.

- Existe un alto grado de correlacin entre los grados Brix y las concentraciones de
IgG estimadas por NIRS, sin embargo, existen muestras que se escapan de la
lnea de tendencia.

- En el calostro proveniente de vaquillas de primer parto en general no existe una

relacin entre los grados Brix y los valores entregados por el NIRS, producto de
una gran dispersin de datos. Sin embargo para las muestras de calostro de vacas
de segundo parto en adelante si se encontr una relacin entre los dos mtodos
de evaluacin.

- Para este rebao se recomienda usar el punto de corte de 18Brix ya que es el con
mayor capacidad de detectar correctamente calostros que posean sobre 50 g/L,
que son los calostros que finalmente se utilizaran para el correcto aporte de
anticuerpos para los terneros.
 26

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