CITOGENTICA HUMANA

Emmanuel Alcntar Casas.

Pablo Csar Chvez lvarez.
Ana Odalys Chvez Vargas.
Alondra Fariva Rodrguez Reyes.
Jos Angel Vzquez de la Cruz.
Karen Raquel Velasco Ascencio.
Introduccin a la citogentica
Consiste en el estudio de los cromosomas su estructura y su herencia y es la
primera en ofrecer una perspectiva gentica mdica basada en el genoma
completo.
3. Citogentica Humana:

3.1. Cromosomas: estructura y funcin;

3.2. Aberraciones cromosmicas;

3.3. Correlacin cariotipo-fenotipo;

3.4. Citogentica molecular.

Cromosomas
CROMOSOMAS
los cromosomas son la
estructura condensada de la
cromatina nuclear, observable
durante la metafase1
 el genoma contenido dentro de
las clulas somticas est
constituido por 46 cromosomas,
dispuestos en 23 pares.

De estos 22 son semejantes en

hombres y mujere (autosomas);
su numeracin va del mayor al
menor.

El restante corresponde con los

cromosomas sexuales XX, XY.
 cada cromosoma humano
est constituido por una
sola hebra continua de ADN
dispuesta en forma de
cadena lineal.
en el interior de la celula se
disponen formando la
cromatina.
Estructura y funcin
de los cromosomas
 Centrmero
Es el sitio que mantiene unidas a las dos cromtidas hermanas.
Media la interaccin entre el huso mittico y el cromosoma durante la
divisin celular.
Est formado por secuencia de ADN satlite de tipo alfoide asociado a
protenas CENP.
 TELMERO
Son los extremos de los brazos cromosmicos y tienen una estructura
especial (ADN cuadruplexo) que protege al cromosoma de su degradacin
por los extremos y que adems permite la replicacin de los extremos
cromosmicos mediante la actuacin de enzimas especficas como las
telomerasas.
 Crommero
Crommero: son regiones ms condensadas de los cromosomas que se
observan al microscopio como partculas discretas y que suelen verse con mayor
claridad en determinados estados celulares, como por ejemplo, en paquitena de la
Profase-I meitica en algunas especies.
CARIOTIPO
Aberraciones Cromosmicas
Son observadas en 0.6% de los recin nacidos vivos.

Puede condicionar cuadros con repercusin clnica muy importante.

Son responsables de la mitad de los abortos espontneos.

 Alteraciones cromosmicas numricas
Es una alteracin donde existen ms de dos juegos de cromosomas en un
individuo.

Triploide (3 juegos de cromosomas).

Tetraploide (4 juegos de cromosomas).
Pentaploide (5 juegos de cromosomas).
Hexaploide (6 juegos de cromosomas).
Heptaploide o septaploide (7 juegos de cromosomas).
Octaploide (8 juegos de cromosomas).
Nonaploide (9 juegos de cromosomas).
Decaploide (10 juegos de cromosomas).
Dodecaploide (12 juegos de cromosomas).
 Triploida
Es la poliploida ms frecuente.

Es el responsable del 7.5% de los abortos espontneos.

Cuentan con un cariotipo 69 XXX, 69 XXY o 69 XYY

 Triploida por dignia
Ocurre cuando un espermatozoide normal fecunda un vulo con doble carga
gentica (diploide).

Retraso grave en el crecimiento intrauterino

Macrocefalia
Placenta muy pequea
Oligohidramnios
Sndrome de Klinefelter XXY
Sndrome Super Hembra XXX
 Triploida por diandrina
Ocurre cuando un vulo normal es fecundado por dos espermatozoides al mismo
tiempo o rara vez por un espermatozoide diploide.

Molas hidatiformes
Preeclampsia
Coriocarcinoma

Crecimiento restringido
Oligohidramnios
Mltiples malformaciones
Sndrome Super Macho XYY
Tetraploida

Despus de la mitosis no se completa la

divisin citoplasmtica.

92 XXXX, 92 XXYY
 Aneuploidas
Ganancia o prdida de un cromosoma individual.

Representan del 3 al 4% de todos los embarazos reconocidos.

Monosoma a la prdida de un cromosoma.

Trisoma a la ganancia de un cromosoma.

 Monosoma

Tiene consecuencias muy graves,

casi siempre son letales.
 Trisoma
Muchas de ellas no son compatibles con la vida.

Trisoma 16

Una de las trisomas ms frecuentes en abortos

espontneos.

Trisoma 21

La trisoma ms frecuente en RN vivos con alguna

condicin aneuploide.
Aberraciones cromosmicas estructurales

Pueden ser balanceadas (ganancia) y desbalanceadas

(prdida).

Rotura y reunin del AND

La prdida tiene efectos ms devastadores que la

ganancia.
 Delecin

Prdida de material gentico. Terminales e intersticiales

 Duplicacin
Ganancia de material cromosmico.

Monosimas y trisomas parciales.

 Anillo
Se origina por la prdida de los segmentos terminales de ambos brazos.

Mosaicismo pigmentario.
 Isocromosoma
Cromosoma que muestra una imagen espejo a ambos lados del centrmero.

Sndrome de Pallister-Killiam
 Insercin
Un fragmento de un cromosoma se integra en otro.

Sndrome de Tourette
 Inversin
Se necesita de dos sitios de rotura para que un segmento gire 180

Sndrome de Ambras
 Translocacin
Intercambio de dos segmentos entre dos o ms cromosomas.
Correlacin Cariotipo-Fenotipo
Fenotipo
Se le conoce como la expresin del Genotipo del ser vivo en funcin del ambiente

Cuenta con rasgos tanto fsicos, como conductores. No todo lo visible.

A diferencia del Genotipo, que se mide en el ADN. Fenotipo puede ser, en algunos
casos observado en la apariencia externa de un organismo.
Cariotipo
Llamado tambin Cariograma, se define como la estructura del patrn
cromosmico de un ser vivo representado en un cdigo, que define las
caractersticas de los cromosomas, ordenados de acuerdo a su morfologa y
tamao, que representan en general a la especie a la que pertenezca.
TRISOMA 21 (SNDROME DE DOWN)
SNDROME DE DOWN
Entre 65 y 80% de las concepciones con trisoma 21 se pierden de manera
espontnea y en recin nacidos vivos la frecuencia es de 1 en 700.
TRISOMA 21
TRISOMA 18 (SNDROME DE EDWARDS)
SNDROME DE EDWARDS
Frecuencia de 1 en 6000 recin nacidos vivos. Predominio franco del sexo
femenino, se asocia con edad materna avanzada. Ms de 90% de productos con
esta cromosomopata se pierden de manera espontnea durante la gestacin.

Sndrome de Edwards (Fenotipo)

Peso bajo Dolicocefalia (Cierre de sutura sagital)

Poca grasa subcutnea Occipucio prominente

Llanto dbil Micrognatia

Hipotona (Seguida de espasticidad) Esternn corto

Cardiopatas Divertculo de Meckel

TRISOMA 18
TRISOMA 13 (SNDROME DE PATAU)
SNDROME DE PATAU
Frecuencia de 1 en 12000 a 20000 recin nacidos vivos. El promedio de
supervivencia es de 130 das y casi el 90% de los casos mueren antes del ao.

Sndrome de Patau(Fenotipo)

Microcefalia Polidactilia

Zonas de aplasia cutis congnita Criptorquidia

Holoprosencefalia Cardiopatas

Microftalmia (ciclopa) Poliquistosis renal

Labio paladar hendido Utero bicorne

:3

TRISOMA 13
DELECIN 4P (SNDROME DE
WOLF-HIRSCHHORN)
DELECIN 4P
El sndrome de Wolf-Hirschhorn se debe a la
delecin (terminal) del brazo corto del
cromosoma 4, tiene una prevalencia de 1 en
50000 con un predominio 2:1 del sexo femenino.

Hipotona Retraso Psicomotor Yelmo Griego

Coloboma de Iris Paladar hendido

Cardiopatas
DELECIN 5P (SNDROME DE
CRI-DU-CHAT)
DELECIN 5P (Maullido de
Gato)
Resulta ms difcil de detectar debido a que su
fenotipo es menos distintivo; sin embargo, los
afectados presentan durante el primer ao un
llanto agudo.

Microcefalia Micrognatia Pliegues palmares

transversos Retraso mental

Prognatismo

Encanecimiento prematuro
CITOGENTICA MOLECULAR
Qu es la citogentica molecular?
Biologa molecular y citogentica convencional.
Tcnicas sofisticadas de anlisis.
Informacin complementaria o nica.
Identificar anomalas cromosmicas (E y D)
Estudio de anomalas
Numricas.
Estructurales submicroscpicas.
Patologas de origen gentico.
De microdelecin.
No diagnosticadas con citogentica convencional.
Un poco que historia...
Se inicia en la dcada de 1950
Se ha utilizado la tcnica de bandeo G, para encontrar
alteraciones cromosmicas y cncer.
Desde 1980 la tcnica ms utilizada ha sido FISH
LIMITANTES DE CITOGENTICA
CONVENCIONAL
1. Se requieren clulas vivas en divisin para obtener
cromosomas analizables
2. El anlisis cromosmico es complejo y consumidor de
tiempo
3. La resolucin de las tcnicas clsicas de bandeo an con
cromosomas en prometafase es de 5 a 10 Mb.
CITOGENTICA MOLECULAR

Se basan en el marcaje en colores de segmentos conocidos de DNA

de 100-300 pb.
La sonda se desnaturaliza junto con el DNA de la muestra y luego se
les permite hibridarse entre s.
TIPOS DE SONDAS:
Sondas centromricas
Sondas de secuencia especfica de locus (LSI)
Sondas telomricas
Sondas subtelomricas
Sondas de pintado cromosmico
OTRAS TCNICAS...
Si se desconoce la regin alterada FISH es una opcin, o bien para el genoma
completo, M-FISH o SKY.

-Cncer y genotoxicidad

-Alteraciones intra cromosmicas (inversiones, microdeleciones y

microduplicaciones).
FISH EN METAFASE
Linfocitos, fibroblastos, amniocitos, vellosidades
corinicas, clulas de aspirado de mdula sea o tumores
slidos.
Se observa de manera directa en el cromosoma
10 clulas.
SONDAS CENTROMRICAS
DNA centromrico alfoide altamente repetitivo
Detectan de forma simultnea ms de un cromosoma
Aneuploidas (metafase e interfase)
Cromosomas marcadores y dicntricos.
SONDAS DE SECUENCIA NICA
Deteccin de deleciones imperceptibles con citogentica
clsica
Rupturas que con frecuencia se reparan por
recombinacin no allica
Sondas locus especficas (DiGeorge o velocardiofacial
1/2000-1/300).
SONDAS DE FUSIN Y RUPTURA GNICA
Sondas de locus especfico
Diagnstico de cncer hematolgico
Identifica dos regiones con diferentes fluorocromos, que
estn involucrados en traslocacin y formacin de genes
quimricos.
SONDAS SUBTELOMRICAS

Rearreglos crpticos subtelomricos ( duplicaciones o

deleciones) se pueden estudiar en metafase.
Recombinacin entre repetidos telomricos terminales y
repetidos asociados a telmeros
Deleciones asociadas a retraso mental idioptico
Dismorfias
Polimorfismos
SONDAS DE TINCIN DE CROMOSOMA
COMPLETO
La mayora de las duplicaciones
cromosmicas se detecta con
sondas de tincin
70% de alteraciones
intracromosmicas
SONDA DE TINCIN COMPLETA DE 24
CROMOSOMAS
El M-FISH y SKY son hibridaciones con sondas de tincin completas
de los 24 cromosomas (X y Y)
Idetificancin de aberraciones intercromosmicas estructurales y
rearreglos complejos
Imperceptibles a inversiones y puntos de ruptura
Muestras tumorales

M-FISH utiliza diferentes fluorocromos para lograr un bandeo por

color
HIBRIDACIN GENMICA COMPARATIVA SOBRE
CROMOSOMAS (CGH) Y SOBRE MICROARREGLOS
(aCGH).
Muestras con escasa divisin mittica (tumores slidos)
El CGH detecta ganancias y/o prdidas de segmentos cromosmicos
de 10 a 20 Mb.
Resolucin de hasta 1 Mb (aCGH)
Muestras tumorales revelando posibles oncogenes o genes
supresores
SONDAS UTILIZADAS EN INTERFASE

Las sondas de tincin no son recomendables para

diagnstico de aneuploidas o alteraciones estructurales.
Sondas centromricas para deteccin de aberraciones
cromosmicas numricas.
Detectar aneuploidas y poliploidas (SC).
Amniocitos para deteccin temprana de embriones
aneuploides
 Protenas quimricas y oncogenes (mdula sea y otros)
Las sondas locus especficas para microdeleciones o
microduplicaciones menores
FISH para espermatozoides aneuploides
Sondas centromricas + locus especficas para deteccin
de alteraciones cromosmicas estructurales en interfase.
ANLISIS DE FISH EN INTERFASE
Las clulas no deben presentar ncleos encimados
Membrana ntegra
En cromosomas o regiones cromosmicas se debe
considerar encontrar seales del mismo color, del mismo
tamao e intensidad.
Se considera normal cuando el 95% de los ncleos
presentan el patrn de seales normal.
1. Hibridacin In Situ Fluorescente (FISH)
2. Hibridacin Genmica Comparada (CGH)

Descartar anomalas crpticas o submicroscpicas en cariotipos normales.

Identificar cromosomas marcadores.
Refinar las anomalas presentes en los cariotipos complejos.
Hibridacin In Situ Fluorescente
Marcar una hebra de ADN o ARN (sonda).
Emparejamiento complementario en ARN o ADN en muestra de tejido o
cromosoma.
Marca con trazadora qumica o radioactiva.
Permite visualizacin.
Hibridacin in situ convencional
Tres tipos principales de sondas:

Centromricas.
De pintado cromosmico.
De locus especfico.
Hibridacin Genmica Comparada.
Hibridacin de miles de sondas de ADN.
Anlisis de ganancias o prdidas cromosmicas.
Slo alteraciones desbalanceadas.
Cambios secuencias de ADN en tumores
 Ventajas
HIBRIDACIN GENMICA Pequea cantidad de ADN.
No requiere clulas en
COMPARADA divisin.
Permite estudiar material
congelado.
Detecta ganancias y prdidas
de ADN en todo el genoma.
Desventajas
Slo se detectan alteraciones.
Requiere infiltracin tumoral
mnima del 50%.
No permite cuantificacin de
ganancias o prdidas.
No detecta ganancias de ADN
menores de 4-5Mb ni prdidas
de 10-20 Mb.
Utilidad de la citogentica en el estudio de las
neoplasias
Calidad de bandas cromosmicas.
Subgrupos clnicos asociados a CCE.
Alteraciones favorables 22q leucemia aguda no linfoblstica.
Valor pronstico de hallazgos citogenticos
Cambio cromosmico primario (...)
Cambio cromosmico secundario (...)
Clulas citogeneticamente normales.
Presencia de DMS o de regiones HSR (...)