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Cuaderno Bioquímica Humana PDF
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FACULTAD DE MEDICINA
CUADERNO DE PRCTICAS
BIOQUMICA HUMANA
Grado en Medicina
1. Prctica #1:
2. Prctica #2:
Introduccin
Los lpidos son un grupo de compuestos qumicamente diverso que desempean funciones
biolgicas muy variadas. Los lpidos en el organismo provienen tanto de la sntesis de novo como
de la dieta. Al ser compuestos apolares (insolubles en agua) necesitan un sistema de transporte
para su distribucin por el organismo. Para poder circular en el plasma, se unen a protenas
especficas (Apolipoprotenas) formando estructuras complejas, que se denominan lipoprotenas
(Lps). Las Lps son estructuras esfricas cuyo ncleo central, hidrofbico, contiene el colesterol
esterificado y los triacilgliceroles (triglicridos; TG) y est rodeado por una capa hidroflica externa
compuesta de fosfoacilgliceroles, protenas y colesterol libre.
Existen diversos tipos de Lps. Las principales Lps del plasma son: Quilomicrones (QM),
lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL), lipoprotenas de densidad intermedia (IDL)
lipoprotenas de baja densidad (LDL) y lipoprotenas de alta densidad (HDL).
COMPOSICIN DIAMETRO
CLASE % ORIGEN Y FUNCIN
% LPIDOS
PROTENAS
(nm)
85 % TG
7% PL
QM 2% COL
0.5-2% Hasta 500 Transporte de TG de la dieta.
2% EST. COL.
55% TG
18% PL
VLDL 7% COL
8% 28-70 Transporte de TG sintetizados en el hgado.
12% EST. COL
23% TG
19% PL Formados por la digestin parcial de VLDL.
IDL 19% 25-27
9% COL. Precursores de LDL.
29% EST. COL
6% TG
8% PL Formados por digestin de IDL. Transporte de
LDL 22% 20-25
22% COL colesterol a los tejidos perifricos.
42% EST. COL
3-5% TG Transporte reverso del colesterol.
5-25% PL
HDL 3-33% COL
40-56% 8-11 Intercambio de apolipoprotenas y steres de
13-17% EST.COL colesterol con QM y VLDL.
Una concentracin elevada de QM y/o VLDL por encima de valores normales, se asocia a una
elevacin en la concentracin de triacilgliceroles. Un aumento de LDL caracteriza a la
hipercolesterolemia familiar.
Cualquier alteracin en los niveles normales de lpidos plasmticos (fundamentalmente colesterol
y triglicridos) se conocen como DISLIPEMIAS. Son una serie de diversas condiciones patolgicas
cuyo nico elemento comn es una alteracin del metabolismo de los lpidos, con su consecuente
alteracin de las concentraciones de lpidos y lipoprotenas en la sangre.
Sin embargo, puede ser que un mismo paciente tenga una causa primaria y secundaria de
dislipemia. Esto sucede cuando la dislipemia persiste despus de haber corregido la causa
secundaria.
DIAGNOSTICO CLINICO
Se basa en las alteraciones de los niveles sricos, de las lipoprotenas y de sus lpidos y/o de la
presencia de depsitos de ellos en la piel y tendones. La determinacin cuantitativa de las
lipoprotenas es compleja, de tal manera que el diagnstico se hace con la evaluacin de sus
lpidos componentes.
Lpidos Sricos:
Todo ello expresado en mg/dl y siempre que los niveles de triglicridos sean menores de 400
mg/dl. El C-LDL es considerado el mejor indicador clnico de riesgo cardiovascular.
CT < 200
Col-HDL 40 hombres
60 mujeres
SUPUESTO EXPERIMENTAL:
Un trabajador de una empresa multinacional sin ningn sntoma patolgico destacable acude a
hacerse un chequeo rutinario. Durante la entrevista refiere al facultativo que debido a su tipo de
trabajo hace una vida muy sedentaria y ha aumentado de peso en los ltimos aos. Por otro lado,
su alimentacin es rica en hidratos de carbono y lpidos. En cuanto a sus antecedentes familiares,
su padre y su abuelo sufrieron enfermedades cardiovasculares.
1. Determinar en el suero del paciente los niveles de TG, colesterol total, colesterol HDL, LDL.
2. Qu conclusiones se pueden sacar a la vista de los resultados?
Entre otros parmetros que se pueden determinar estn: colesterol total, colesterol transportado
por las HDL (lipoprotenas de alta densidad), colesterol transportado por las LDL (lipoprotenas de
baja densidad), triglicridos y otras apoprotenas particulares.
Para la cuantificacin del colesterol se utiliza un kit comercial que incluye las
enzimas y los sustratos necesarios para las reacciones que permite la valoracin
colorimtrica del contenido de colesterol (Spinreact).
+ H
H2OO CEH
CEH
R-COOH
RCOOH
R CO 2 +
HO
+ O
O2
COD
COD + HH22OO2
2
HO O
COLESTEROL
COLESTEROL 4-COLESTENONA
4 - COLESTENONA
H3C C C NH2
H3C C C N O
+
H3C N C O +
H3C N C O
POD
N
+ OH 2H O
+ 2 H22O22
POD N
+ 44 H O
H2O
2
4 4-AMINOFENAZONA
- AMINOFENAZONA FENOL
FENOL QUINONIMINA
QUINONIMINA
1) Una colesterol ester hidrolasa (CEH) hidroliza los steres de colesterol a colesterol y
cidos grasos libres.
2) Una colesterol oxidasa (COD) oxida todo el colesterol a colestenona y perxido de
hidrgeno
3) El perxido de hidrgeno es sustrato de una peroxidasa (POD) que junto con 4-
aminofenazona da lugar a la formacin de una quinona roja. La cantidad de esta
quinona (505 nm) es proporcional a la concentracin de colesterol de la muestra.
Procedimiento:
Al igual que en el caso del colesterol, tambin se usa un kit comercial (Spinreact)
que contiene los enzimas y sustratos necesarios para cuantificar
colorimtricamente la cantidad de triacilgliceroles en la muestra:
1. SIGNIFICADO CLINICO
La glucosa es la mayor fuente de energa para las clulas del organismo. El nivel de glucosa es la
cantidad de glucosa (azcar) que contiene la sangre, tambin se denomina glucosa en suero
glucemia y se mide en milimoles por litro (mmol/L) o en miligramos por decilitro (mg/dL).
Se considera que hay una intolerancia a la glucosa cuando se sobrepasa esta concentracin en
condiciones postprandiales, e hiperglucemia basal si la concentracin de glucosa en ayunas est por
encima de los valores normales. Si la alteracin es grave, se excretan cantidades elevadas de glucosa
por la orina ya que se sobrepasa la capacidad de los tbulos renales para reabsorberla. Esto lleva
unido una sintomatologa caracterstica de polidipsia, polifagia y poliuria. En una fase ms avanzada,
si el control no es adecuado pueden aparecer micro o macroangiopatias. Este sndrome es definido
como DIABETES y es el ms comn de los desordenes metablicos, afectando al 5-10% de la
poblacin en las paises occidentales.
Las normas de la ADA y de la organizacin mundial de la Salud (OMS) recomendaron las siguientes
categora de diabetes:
- Diabetes tipo 1
- Diabetes tipo 2
- Diabetes mellitus gestacional (DMG)
- Otros tipos de diabetes
Si bien existen varios tipos de diabetes, la gran mayora de casos corresponde a dos clases
principales; la diabetes mellitus tipo 1 y la tipo 2 . En la primera, el evento patognico ms relevante
es la destruccin masiva de las clulas del pncreas, de manera que la secrecin de insulina es nula
o insignificante. En la diabetes tipo 2, la deficiencia hormonal no es tan marcada y el trastorno
principal es la resistencia de los tejidos perifricos a la accin de la hormona.
REACTIVOS
PROTOCOLO
A partir de la disolucin estndar de glucosa (100 mg/dl), se preparan las siguientes disoluciones
para la curva patrn de glucosa:
1 Sol. D -------- 1 ml
(100 l )
2 Sol. C -------- 1 ml
(100 l )
3 Sol B --------- 1 ml
(100 l )
Muestra 1
4 0 min 90 l 1 ml
(10 l )
Muestra 2
5 30 min 90 l 1 ml
(10 l )
Muestra 3
6 60 min 90 l 1 ml
(10 l )
Muestra 4
7 120 min 90 l 1 ml
(10 l )
PROCEDIMIENTO
Pipetear en cada uno de los tubos las cantidades indicadas y agitar en vortex
Incubar a 37C en bao termosttico durante 5 minutos.
Parar la reaccin aadiendo a todos los tubos 1 ml de NaCl 0.9 %
Ajustar el espectrofotmetro a cero con el blanco y leer las absorbancias a 340 nm
CUESTIONES
Representar los valores de glucosa frente al tiempo e interpretar los resultados de la curva
obtenida.