Fases de crecimiento bacteriano.

Cuando se inoculan las bacterias en medio de crecimiento lquido y se encuentra la poblacin con intervalos es posible graficar la curva de crecimiento bacteriano que muestra el crecimiento de las clulas en funcin del tiempo. Hay cuatro fases bsicas de crecimiento: de retraso, logartmica o exponencial, estacionaria y de declinacin o muerte. La fase de retraso es el tiempo en el que el nmero de clulas cambia muy poco porque hay escasa o nula divisin celular, y puede durar dependiendo de la bacteria de una hora a varios das. Sin embargo durante este periodo de tiempo las bacterias no estn inactivas, la colonia bacteriana atraviesa una intensa actividad metablica que comprende sobre todo la sntesis de enzimas y diversas molculas. La fase logartmica o exponencial es cuando las bacterias comienzan a dividirse y entran en un periodo de crecimiento o de crecimiento logartmico. La replicacin bacteriana alcanza su actividad mxima y llega a un mnimo constante, la representacin grfica de esta etapa es una lnea recta. Esta fase es tambin el momento en el que las clulas presentan mayor actividad metablica, sin embargo es en esta etapa cuando las bacterias son ms sensiblesa las condiciones adversas como frmacos o radiacin. La fase estacionaria es cuando la tasa de crecimiento disminuye, el nmero de muertes microbianas compensa el de clulas nuevas y la poblacin se estabiliza. La actividad metablica de las clulas que sobreviven tambin se torna ms lenta en esta fase. La fase de muerte se puede observar cuando el nmero de bacterias que han muerto supera al nmero de nuevas clulas formadas. Esta fase contina hasta que la poblacin disminuye a una pequea fraccin de clulas ms resistentes o hasta que si morfologa cambia de manera espectacular, lo que dificulta su identificacin.

Para poder cuantificar y observar el crecimiento bacteriano existen diversos mtodos, como conteo en placa de Neubauer y en recuento en placa con diluciones seriadas, filtracin de membrana, tambin otros conteos bajo el microscopio, y el mtodo por turbidimetra, que se clasifica en los mtodos indirectos. Busqu en la biblioteca central el libro que me encarg consultar, pero no lo encontr aunque si exista, as que de varias fuentes bibliogrficas obtuve la siguiente resea y busqu tambin como desarrollar la metodologa. Mtodos indirectos. Turbidimetra. Este es un mtodo prctico ya que es un buen mtodo para controlar el crecimiento bacteriano. Cuando las bacterias se multiplican en un medio lquido este se torna turbio o nebuloso por las clulas. El instrumento utilizado para medir la turbidez es un espectrofotmetro. En el espectrofotmetro un haz de luz se transmite a travs de una suspensin bacteriana a una clula fotoelctrica. Cuando la cantidad de bacterias aumenta, menos luz alcanza la clula fotoelctrica, este cambio de luz se registra en la escala del instrumento como porcentaje de transmisin, Tambin se puede determinar como una medicin logartmica del instrumento denominada absorbancia. La absorbancia se utiliza para graficar el crecimiento bacteriano. Cuando las bacterias estn en fase logartmica de crecimiento o de declinacin la representacin de la absorbancia frente al tiempo forma una lnea casi recta.

Encontr en un libro una metodologa para medir la curva de crecimiento de E. coli y se plantea a continuacin: 1) Siembre 0.1 ml de la bacteria en 13 tubos con 10 ml de caldo nutritivo a partir de un cultivo lquido. 2) Incube todos los tubos a 37 C 3) Deje un tubo con el mismo medio estril, sin inocular, como testigo y gurdelo en el refrigerador. Este tubo servir para ajustar el espectrofotmetro a 100% de transmitancia antes de las lecturas. 4) A intervalos de una hora saque el tubo y determine la transmitancia con el espectrofotmetro 5) Dibuje la curva con los valores obtenidos, conforme se efectu el crecimiento de la bacteria.