Seminarios de Microbiologa 1er Bloque Medios de cultivo - Prof.

Antonio Domnech

Seminarios de Microbiologa - Primer Bloque

Profesora responsable: Dra. Elena Garca-Valds

Caractersticas de los medios de cultivo

Definicin
Un medio de cultivo es un conjunto de componentes
que crean las condiciones necesarias para el
desarrollo de los microorganismos.

Prof. Antonio Domnech

Composicin
Macronutrientes.
Micronutrientes o elementos traza.
Factores de crecimiento.

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Macronutrientes

Micronutrientes

Forma normal del nutriente en el

ambiente

Forma suministrada
en el medio de cultivo

Carbono (C)

CO2, compuestos orgnicos

Glucosa, malato, acetato,

piruvato, aminocidos, extractos
compuestos

Hidrgeno (H)

H2O, compuestos orgnicos

H2O, compuestos orgnicos

Elemento

Oxgeno (O)
Nitrgeno (N)
Fsforo (P)
Azufre (S)
Potasio (K)

Cromo (Cr)
Cobalto (Co)
Cobre (Cu)

H2O, O2, compuestos orgnicos

H2O, O2, compuestos orgnicos

Manganeso (Mn)

NH3,NO3-, N2, compuestos orgnicos

nitrogenados

Inorgnico: NH4Cl, (NH4)2SO4,

KNO3, N2

Molibdeno (Mo)

PO43-

KH2PO4, Na2HPO4

H2S, SO42-,compuestos orgnicos con S,

sulfuros metlicos (FeS, CuS, ZnS, NiS, etc.)

Na2SO4, Na2S2O3 Na2S, cistena y

otros compuestos orgnicos
azufrados

K+ en solucin o como varias sales de K

KCl, KH2PO4

Mg2+ en solucin o como varias sales de Mg

MgCl2, MgSO4

Sodio (Na)

Na+ en solucin, NaCl o como otras sales de Na

NaCl

Calcio (Ca)

Ca2+ en solucin, CaSO4 o como otras sales de

Ca

CaCl2

Hierro (Fe)

Fe2+ o Fe3+ en solucin, FeS, Fe(OH)3 o como

otras sales de Fe

FeCl3, FeSO4, varias soluciones

de hierro quelado (Fe3+ EDTA,
Fe3+ citrato, etc.)

Magnesio (Mg)

Elemento

Nquel (Ni)
Selenio (Se)
Tungsteno (W)
Vanadio (V)
Zinc (Zn)
Hierro (Fe)

Funcin celular
Requerido en los mamferos para el metabolismo de la glucosa. Se
desconoce si los microorganismos lo requieren
Vitamina B12; transcarboxilasa (bacterias del cido propinico)
En la respiracin, citocromo c oxidasa; en fotosntesis, plastocianina y
en algunas superxido dismutasas
Activador de muchas enzimas; presente en algunas superxido
dismutasas y en la enzima que rompe el agua en fototrofos oxignicos
Algunas enzimas que contienen flavinas; nitrogenasas, nitrato
reductasa, sulfito reductasa, DMSO-TMAO reductasas y algunas formato
deshidrogenasas
La mayora de las hidrogenasas; coenzima F430 de metangenos,
deshidrogenasa del monxido de carbono y ureasa
Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y el aminocido
seleniocistena
Algunas formato deshidrogenasas y oxotransferasas de los
hipertermfilos
Vanadio nitrogenasa; bromo peroxidasa
Anhidrasa carbnica, alcohol deshidrogenasa, ARN y ADN polimerasa, y
muchas protenas que se unen al ADN
Citocromos, catalasas, peroxidasas, protenas con hierro y azufre,
oxigenasas y todas las nitrogenasas

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Factores de crecimiento
Vitamina

Funcin

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Constituyentes habituales
Agentes gelificantes: agar.

cido p-aminobenzoico

Precursor del cido flico

cido flico

Tiamina (B1)

Metabolismo de compuestos de un carbono; transferencia de

grupos metilo
Biosntesis de cidos grasos; -descarboxilaciones; algunas
reacciones de fijacin de CO2
Reduccin y transferencia de restos monocarbonados; sntesis de
desoxirribosa
Transferencia de grupos acilo en la descarboxilacin del piruvato y
-cetoglutarato
Precursor del NAD+; transferencia de electrones en reacciones de
oxido-reduccin
Precursor de la coenzima A; activacin del acetilo y derovados
acilados
Precursor del FMN, FAD en flavoprotenas implicadas en transporte
de electrones
-descarboxilaciones; transcetolasa

Vitaminas B6

Transformaciones de aminocidos y cetocidos

Grupo Vitamina K

Transporte de electrones; sntesis de esfingolpidos

Agentes selectivos: sales biliares,

Hidroxamatos

Compuestos que unen hierro; solubilizacin y transporte del hierro

al interior celular

antibiticos...

Biotina
Cobalamina (B12)
cido lipoico
cido nicotnico (niacina)
cido pantotnico
Riboflavina

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Tipos de medios de cultivo

Slidos y lquidos.
Medio definido (sinttico) y medio complejo.
Medio mineral o basal: compuestos inorgnicos.
Medio mnimo: medio basal + 1 fuente de carbono.
Medio rico: todos los requerimientos nutritivos.
Medio de enriquecimiento.
Medio selectivo.
Medio diferencial.

Extractos: levadura, carne, hgado, semillas...

Peptonas: soja, carne, gelatina, casena...
Sistemas amortiguadores: fosfatos...
Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta,
rojo de fenol...
Agentes reductores: microaerofilia o
anaerofilia.

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Medio definido y medio complejo

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Manuales de medios de cultivo

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Actividad 1 Medios de cultivo

Metodologa
Actividad individual.
Consulta del material disponible.
Anotar en la plantilla correspondiente las caractersticas de los
microorganismos seleccionados.

Plantilla 1
Microorganismo

Oxgeno

Gram

Morfologa
celular

Oxidasa

Catalasa

Motilidad

Cocos

Bacilos

Escherichia coli
Salmonella spp.
Vibrio cholera
Clostridium
perfringens
Campylobacter
jejuni
Staphylococcus
aureus

Anaerobio
Aerobio
(facultativo)
Microaerfilo

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Actividad 1 Medios de cultivo

Actividad 1 Medios de cultivo

Plantilla 2
Medio de cultivo

Recursos
Citrato de
Simmons

McConkey

Hierro
de
Kliger

Baird
Parker

TriptosaSulfitoCicloserina
(TSC)

Manuales de medios de cultivo

1. http://www.panreac.es/pdf/ManualCultimed_completo.pdf
2. http://www.scharlab.com/docs/ebooks/descargarpdf.php?i
d=6
3. http://www.condalab.com/

Escherichia coli
Salmonella spp.
Klebsiella pneumoniae

Manual de anlisis microbiolgico

Clostridium
perfringens

1. http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-toc.html

Staphylococcus
aureus

Libros y artculos
Madigan, M. T. y otros (2003): Brock: Biologa de los
Microorganismos. 10 edicin. Prentice Hall Inc, Madrid.

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Actividad 1 Medios de cultivo

Actividad 1 Medios de cultivo

Imagen de microscopa electrnica y placa de cultivo

Organismo

Medio

Grupo

Escherichia coli

Mc Conkey

Salmonella spp.

Mc Conkey

Klebsiella pneumoniae

Citrato de
Simmons

Pseudomonas aeruginosa

Cetrimide

Plantilla 3 www.condalab.com
Medio
Acetate differential
Agar
BCP Glucose Agar
Fecal Coliforms
Broth Base
Koser Citrate Broth
Mannitol Nitrate
Motility Medium
Mio Medium
MR-VP Medium
Sim Medium

Clostridium perfringens

TSC

Tryptone Byle Salts

Agar
TTC Chapman Agar

Staphylococcus aureus

Baird Parker

Urea Indol Broth

VRBG

Water &
Beverages

Meat &
Fish
Industry

Dairy
products

Bakery

Processed
Foods

Beer
industry

Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Grupo 5
Grupo 6

Waste
Water

Cosmetic
Industry

Pharmaceutical
industry