14-09-2016

Discrepancias ABO

Discrepancias ABO
Guillermo Herrera C

Discrepancias ABO
Es necesario antes de transfundir obtener
muestras suficientes de sangre para completar
cualquier estudio adicional.
Las pruebas pueden ser discrepantes debido a
problemas intrnsecos de los eritrocitos o del
suero, debido a problemas relacionados a la
prueba o por errores tcnicos.

Resultados pruebas con eritrocitos no

complementan los de las pruebas de suero.
Cuando aparece una discrepancia, deben quedar
registrados, su interpretacin debe esperar hasta que
se resuelva.
Cuando es necesario transfundir imperiosamente se
debe administrar clulas O del tipo Rh apropiando
antes de completar el estudio.

Discrepancias ABO
Las discrepancias deben ser sealadas segn
los resultados obtenidos de acuerdo a
resultados negativos cuando se esperaban
resultados positivos o bien se ha obtenido
resultados positivos cuando las pruebas
deberan haber sido negativas.

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Anticuerpos monoclonales

Resultados Falsos Negativos

Omitir agregar reactivos o suero.
No identificar una hemlisis .
El uso de una relacin suero glbulos rojos no
adecuada.
Centrifugacin insuficiente.
Incubacin a temperaturas inadecuadas.
Interpretar o registrar incorrectamente los
resultados de las pruebas.

Resultados Falsos positivos

Sobrecentrifugacin .
Uso de reactivos globulares o sricos
contaminados.
Material de vidrio sucio.
Interpretacin o registro equivocado de los
resultados de las pruebas.
Interpretar un cogulo de fibrina.

Que Hacer
Repetir la prueba con la misma muestra.
Repetir usando solucin salina como diluyente
de las clulas en caso que estas hayan sido
suspendidas en suero o plasma previamente.

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Si Persiste

Obtener una nueva muestra.

Lavar los glbulos rojos de la muestra.
Retipificar los eritrocitos testigos.
Aumentar el tiempo de incubacin.
Incubar a temperaturas inferiores a 20 C.
Potenciar la reaccin con enzimas
proteolticas.

De utilidad

Prueba autologa o autocontrol.

Inversa con Gr O, A2.
Test de antiglobulina humano indirecto.
Lectinas.
Antgenos solubles.
Pruebas adsorcin elucin.

Clasificacin directa

Clasificacin directa

Receptor de TMO o de transfusin podra

tener GR de mas de un grupo ABO (quimeras).
Subgrupos de A y B.
Pacientes con Leucemia.

Alteraciones heredables de la membrana, que

faciliten procesos poliaglutinables.
Concentraciones anormales de protenas
sericas, gelatina de wharton, soluciones de
macromolculas infundidas.

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Posibles causas de discrepancia

Categora

Posibles causas de discrepancia

Categora

Causas

Leucemia/ malignidad
Reactividad eritrocitaria dbil o nula

Reactividad eritrocitaria en campo mixto

Hemorragea feto-materna

Transfusin intrauterina fetal

Quimerismo de gemelos o disprmico

(tetragamtico)
Relacionado con la edad (< 4 6 meses p
ancianos)

Sustancia de grupo sanguneo soluble excesiva

Autoaglutininas /exceso de protenas
recubriendo gr.

Reactividad del suero dbil o nula

Trasplante
Autoanticuerpos Aloanticuerpos fros
Anticuerpos a un componente del reactivo
Reactividad del suero Excesiva

Antgeno B adquirido

Subgrupo ABO
Hipogammaglobulinemia

Glbulos rojos sin lavar (protenas en plasma o

anticuerpos al componente del reactivo en el
suero del paciente.
Traspalnte

Protena excesiva en el suero

Transfusin de los componentes del pasma
Trasplante
Infusin de inmunoglobulina intravenosa

Fenmeno B(A)
Transfusin fuera de grupo

Red blood cell antigen changes

Sistema sanguneo

Efecto Malignidad

Localizacin
cromosoma

Reportado en

ABO

Decreased A and/or B
with increased H
Decreased A and/or B
with decreased H

A and B
transferase
gene 9q34
Fucosyl
transferase H
gene 19q13

AML
CML
MDS
Hodgkins disease

Apparent loss of
A and/or B

Trasplante

Transfusin

Trasplante

Reactividad eritrocitaria excesiva

Causas
Transfusin reciente

Subgrupo ABO

Gastric carcinoma
Pancreatic
carcinoma
Ovarian carcinoma
Colon carcinoma
Cholangiocarcinoma

Clasificacin directa
Concentraciones altas de sustancias de grupo
sanguneo A o B en el suero, podra neutralizar
los anticuerpos usados en la tipificacin.
Anticuerpos contra los colorantes empleados
para teir los reactivos anti-A y anti-B.

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Discrepancias prueba inversa

Subgrupos de A (A2- A2B) con presencia de
anti-A1.
Pacientes que presenten ttulos altos de
crioaglutininas.

Images in Transfusion Medicine

Dextrosa 5% en agua, 20 ml
flash previa instalacin de la
transfusin.

A 45-year-old gentleman with diffuse large B-cell lymphoma was found to have a
hemoglobin (Hb) level of 8.3 g per dL.
After transfusion with group-specific, crossmatch-compatible red cells (RBCs) in AS-1
preservative solution, the transfusion
line was incorrectly flushed with D5W (5% dextrose in water).With approximately 20 mL of
flush, aggregates of
RBCs were observed in the line; nursing staff was alerted and the line was immediately
clamped.Transfusion reaction
investigation identified no clinical or laboratory evidence for hemolysis or other organ
damage and the posttransfusion
Hb level was appropriate.
Studies of RBCs in D5W have been reported; aggregation occurs with room temperature
incubation at RBC:D5W
ratios of 1:5 or above, proceeding to hemolysis only when mixtures are incubated at 37C.
Aggregation may be due to a
low-ionic-strength salinelike effect wherein the D5W solution reduces the zeta potential
between RBCs allowing them
to more closely approximate.Osmotic membrane damage may also occur with exposure to
D5W.Hemolysis with 37C
incubation of RBCs in hypotonic solution (such as D5W) is reminiscent of the incubated
osmotic fragility test, where
heating is thought to accelerate metabolic demand with subsequent depletion of the
intracorpuscular ATP pool,
leading to reduced resistance to membrane insult and hemolysis. Current AABB standards
limit the solutions which
may be mixed with RBCs. This image illustrates the effect of an inappropriate solution.

Problemas Relacionados Con La Muestra en la

Evaluacin.
Si se utilizan muestras no coaguladas
completamente.
Las concentraciones proteicas anormales, el
uso de expansores plasmticos de alto peso
molecular.

Discrepancias prueba inversa

Anticuerpos distintos a los evaluados (anti-A y
anti-B), pueden aglutinar a los GR testigos.
Anti-M , anti-P1
Anticuerpos frente a los componentes de los
diluyentes empleados para mantener a los
glbulos testigos.

Volume 48, June 2008 TRANSFUSION 1049

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Discrepancias prueba inversa

Pacientes inmunodeficientes.Pruebas sericas
de los lactantes menores de 4-6 meses.

Resolucin de las Discrepancias

Repetir la prueba con la misma muestra.
Obtener una nueva muestra.
Controlar la historia Clnica del paciente.

Transfusin reciente con componentes

plasmticos con aglutininas ABO distintas a las
del receptor.

Resolucin De Las Discrepancias

Evaluar los glbulos rojos con anti-A,B antiA1 anti-H .
Si se sospecha de anti- A1 probar con varias
muestras A1 y A2.
Revisar la pesquisa de anticuerpos con GR
grupo O.
Incubar las muestras a temperatura ambiente
durante 30 min. En caso de antgenos y
anticuerpo dbiles.

Caso 1
Paciente hombre de 47 aos con historia de suceptibilidad a neumona,
asociada a sepsis ltima hospitalizacin.
Clasificacin ABO
Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Anti-D

GRA1

GRB

PA

4+

(-)

4+

4+

(-)

(-)

(-)

Ideas:
Edad del paciente.
Glbulos rojos testigos.
Repetir
Potenciar accin de anticuerpos en prueba srica.

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Caso 2
Cuantificacin inmunoglobulinas
IgA

< 7 mg/dl (79-347 mg/dl)

IgM

< 4 mg/dl (48-333 mg/dl)

IgG

< 48 mg /dl (614-1440 mg/dl)

Clasificacin
Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Anti-D

GRA1

GRB

PA

4+ cm

(-)

4+ cm

4+

(-)

4+

(-)

Cm = campo mixto.
Clasisficacin ABO discrepancia, no se resuelve al incubar inversa
15 min a temperatura ambiente, seguido de 15 min a 4C.Las
causas de la ausencia de anticuerpos esperados en un adulto
incluyen subgrupo ABO, hipogamaglobulinemia o historia de
trasplante.Electroferesis de proteinas revelo baja presencia de
gammaglobulinas.

Ideas:
Muestra de cordn recin nacido.
Paciente transfundido con O.
Paciente trasplantado.
Transformacin por neoplasia.

Caso 3
Calsificacin

Paciente 60 aos MDS, uso de la Citometra de flujo para dilucidar estos

Casos.

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Anti-D

GRA1

GRB

PA

3+

3+

3+

4+

4+

4+

3+

Ideas:
lavar los hematies.
Muestra de puncin o va.
Administracin de soluciones con la transfusin.
Pedir nueva muestra.

23:28

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Images in Transfusion Medicine

Dextrosa 5% en agua, 20 ml flash

previa instalacin de la transfusin.

A 45-year-old gentleman with diffuse large B-cell lymphoma was found

to have a hemoglobin (Hb) level of 8.3 g per dL.
After transfusion with group-specific, crossmatch-compatible red cells
(RBCs) in AS-1 preservative solution, the transfusion
line was incorrectly flushed with D5W (5% dextrose in water).With
approximately 20 mL of flush, aggregates of
RBCs were observed in the line; nursing staff was alerted and the line
was immediately clamped.Transfusion reaction
investigation identified no clinical or laboratory evidence for hemolysis
or other organ damage and the posttransfusion
Hb level was appropriate.
Studies of RBCs in D5W have been reported; aggregation occurs with
room temperature incubation at RBC:D5W
ratios of 1:5 or above, proceeding to hemolysis only when mixtures are
incubated at 37C. Aggregation may be due to a
low-ionic-strength salinelike effect wherein the D5W solution reduces
the zeta potential between RBCs allowing them
to more closely approximate.Osmotic membrane damage may also occur
with exposure to D5W.Hemolysis with 37C
incubation of RBCs in hypotonic solution (such as D5W) is reminiscent of
the incubated osmotic fragility test, where
heating is thought to accelerate metabolic demand with subsequent
depletion of the intracorpuscular ATP pool,
leading to reduced resistance to membrane insult and hemolysis.
Current AABB standards limit the solutions which
may be mixed with RBCs. This image illustrates the effect of an
inappropriate solution.

Caso 4: Paciente 44 aos sexo masculino, clasificado en tres

oportunidades O.
Clasificacin
Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Anti-D

GRA1

GRB

PA

(-)

(-)

3+

4+

(-)

(-)

Ideas:

repetir la clasificacin.
Ocupar otros antisueros (clones distintos).
Usar clasificacin en gel.
Incubar por ms tiempo los anticuerpos con los
glbulos rojos.
Adsorber y eluir reaccionando con glbulos B.

Volume 48, June 2008 TRANSFUSION 1049

23:28

Caso 5

Subgrupo B
Clasificacin
Anti-A
An ti-B
(-)
(-)

Anti-A,B
(-)

Anti-D
AGH 2+

GRA11
4+

GRB
4+

PA
(-)

Cual es su tipificacin ABO, Rh D?

Discrepancia en prueba directa e inversa.
Aglutinacin en tubo con anti-B, anti-AB despus incubacin 4-6 hrs a
temperatura ambiente.
Prueba inversa y autocontrol a 4 C no altero los resultados.
Estudio absorcin elusin.

Hacer TAD si es positivo no se informa Rh D.

Eluir el anticuerpo para tipificar Rh D.
Usar anti- D IgM.

23:28

14-09-2016

Caso 6
Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Anti-D

Anti-D

GR A1

GRB

PA

(-)

(-)

(-)

(-)

2+

4+

4+

(-)

Anti-D IgM no detecta variante D VI

Anti-D gM/IgG detecta variante D VI
Cmo se interpretan los resultados dependiendo de la procedencia de la
muestra, donante o paciente?