Taller 8. Inmunohematología

Universidad Industrial de Santander
Escuela de Microbiología
Práctica Profesional I
Denerieth Ximena Espinel Mesa 2110695
Diana Marcela Rueda Bueno 2110565
Taller 8. Inmunohematología
Primera Parte:
1. ¿Cuál es el significado de las pruebas cruzadas?
Las pruebas cruzadas pretransfusionales intentan detectar reacciones Ag-Ac potenciales antes de que
la sangre sea transfundida. Cada unidad de sangre extraida debe ser examinada y clasificada de
forma individual para descartar incompatibilidades entre el donante y el receptor, a fin de que la
transfusión se realice con las máximas garantías. Las pruebas de compatibilidad se realizan antes de
transfundir la sangre para asegurarse de que los hematíes del donante son compatibles con el
paciente. Comprende las siguientes determinaciones:
 Tipaje de grupo ABO y Rh del receptor.
 Detección e identificación de Acs en el suero del receptor.
 Tipaje correcto de grupo ABO y Rh del donante.
 Detección de Acs en el donante.
 Pruebas cruzadas (compatibilidad pretransfusional).
2. ¿Cuál es el mecanismo por el cual un medio de albúmina 30% aumenta la sensibilidad de la

reacción de aglutinación?
Uso de albúmina sérica bovina: los anticuerpos que no aglutinan eritrocitos suspendidos en solución
salina, en ocasiones, los aglutinan cuando están suspendidos en albúmina bovina, esto es posible
porque la albúmina provoca un incremento en la constante dieléctrica del medio en el que están
suspendidos los eritrocitos y una disminución del potencial zeta. La constante dieléctrica de un medio
es una medida de su habilidad para disipar cargas.
No todos los anticuerpos de los grupos sanguíneos aumentan su actividad en las pruebas de
albúmina. Los anti-A, anti-B y anti-Lewis muestran reducción de su actividad en presencia de
albúmina; este influye en el grado de hidratación de la membrana, lo cual puede alterar la orientación
estérica del determinante antigénico o puede disminuir la entropía disponible para dirigir la reacción.
3. ¿Cuál es el mecanismo por el cual el suero de Coombs aumenta todavía más la sensibilidad de la
reacción de aglutinación?
Los complejos solubles pueden ponerse de manifiesto utilizando el suero de Coombs (anti
inmunoglobulina humana), capaz de reconocer los determinantes antigénicos del anticuerpo univalente
sobre una partícula, produciendo aglutinación. Es necesario realizar lavados antes de agregar el suero
de Coombs para eliminar todos los anticuerpos no unidos a la partícula.
4. ¿Cómo se interpretarían los resultados del cuadro en el caso de que se hubiesen realizado las
pruebas cruzadas con todos los pares de muestras?
D1 y R1: Coombs positivo, me indica presencia de anticuerpos unidos a la membrana del glóbulo rojo
del donante.
D2 y R2: Pruebas cruzada menor positiva, lo cual indica presencia de anticuerpos en el suero del
donador contra los eritrocitos del receptor, solo que se presentaría una reacción en menor grado, que
una prueba mayor positiva.
D3 y R3: Coombs positivo en la prueba menor, me indica glóbulos rojos del receptor recubierto con
inmunoglobulinas unidos a la membrana y/o complemento en vivo.
D4 y R4: Presencia de anticuerpos en el suero del receptor contra los globulos rojos del donante,
incompatibilidad de grupo.
D5 y R5: Pruebas cruzadas negativas, ideal para realización de la transfusión sanguínea. Aconsejable
la transfusión.
5. ¿Cuáles ensayos habrán sido descartados por los resultados de la tipificación? Dé posibles
ejemplos de grupos sanguíneos de Dador y Receptor en esos casos.
Teniendo en cuenta la tabla anterior, serían las parejas: D1 y R1, D4 y R4
En los casos de una prueba cruzada positiva es importante descartar la presencia de autoanticuerpos
no–HLA, los cuales son irrelevantes para trasplantar y se traducen como resultados falsos positivos.
La prueba de Coombs aparte de utilizarse para determinar una posible incompatibilidad de grupo
sanguíneo a la hora de una transfusión también se utiliza para diagnosticar la enfermedad hemolítica
del recién nacido debida a incompatibilidad sanguíneo materno-fetal. En el momento del nacimiento la
madre puede haber quedado expuesta a antígenos de los hematíes del bebé y puede haber generado
anticuerpos contra los hematíes de su hijo. Este sería el caso de un bebé Rh-positivo cuya madre es
Rh-negativo. Anteriormente, la presencia de anticuerpos frente al antígeno Rh constituía la causa más
frecuente de enfermedad hemolítica del recién nacido, si bien actualmente esta situación es rara
gracias al uso de tratamientos preventivos administrados a la madre durante y después de
cada embarazo. La prueba de Coombs directa se utiliza principalmente para determinar si
una anemia hemolítica, en la que la tasa de destrucción de los hematíes o células rojas de la sangre
es superior a la tasa de producción de las mismas, es debida a la presencia de anticuerpos frente a los
hematíes.
6. Discuta cuál(es) sería(n) Dador(es) posible(s) para el correspondiente Receptor
D3 y R3: Aunque en la prueba cruzada menor, presenta coombs positivo, podría hacerse la
transfusión y controlar con medicamento la reacción pues esta se presentará en un menor grado.
D5 y R5: Pruebas cruzadas negativas, ideal para realización de la transfusión sanguínea. Aconsejable
la transfusión.
Las pruebas cruzadas mayor y menor se deben realizar siempre para asistir en la provisión de
productos de eritrocitos compatibles y la posibilidad de aminorar las reacciones adversas a la
transfusión. Así un donador posible es el cual no presenta reacción alguna en estas pruebas.
(Feldman,2008)
7. Los resultados de las pruebas le permitirían transfundir glóbulos rojos lavados, ¿si se aconsejara
ese tratamiento en el paciente? ¿En qué caso(s)?
Para transfundir glóbulos rojos lavados es necesario realizar la prueba mayor (D) o del donador, la cual
permite confirmar si existe compatibilidad ABO entre el receptor y el donador. En esta se detectan
anticuerpos en el suero del paciente que no se hayan demostrado en la prueba de tamizaje (PANEL), y
se utilizan 2 gotas de suero del receptor más 1 gota de eritrocitos lavados del donador. La transfusión
de GRL solo está indicada en:
a. Prevención de reacciones alérgicas recurrentes o graves.
b. Transfusiones intrauterinas.
8. ¿Qué otras pruebas serológicas se efectúan en las muestras de un banco de sangre para evitar
riesgos a los pacientes transfundidos?
 Anticuerpos contra sífilis

 Virus de inmunodeficiencia humana (VIH)
 Virus de la hepatitis C (VHC),
 Antígeno de superficie de la hepatitis B
9. ¿Por qué un paciente politransfundido tiene más riesgo de enfermedad hemolítica por transfusión
incompatible, aun cuando siempre hubiera recibido sangre compatible de grupo ABO y RH?
Las reacciones hemolíticas agudas fatales con la transfusión ocurren en 1:250.000 a 1:1.000.000
transfusiones, usualmente (>90%) por incompatibilidad ABO, debido a error en la identificación del
paciente o del espécimen sanguíneo. Los aloanticuerpos contra eritrocitos pueden lisar estas células
en la circulación o cubrirlas, acelerando su remoción por el sistema retículo-endotelial. Otros
anticuerpos que causan hemólisis intravascular incluyen el anti-Duffy, anti-Kelly y anti-Lewis. Esta
reacción no ocurre con componentes del plasma ni con plaquetas. La rápida destrucción celular
generalmente involucra al sistema ABO, ya que los anticuerpos anti-A y anti-B fijan complemento y
están preformados.
10. ¿Qué grupos sanguíneos tipifica para el análisis pre-transfusional? ¿Por qué?
Grupos: A, B, AB, O y el factor RH
Porque: Diferentes sistemas antigénicos se caracterizan por inducir a la formación de anticuerpos en

intensidades diferentes; por lo que algunos son más comunes y otros, más raros. Estos son los
sistemas comúnmente relacionados a las temidas reacciones de transfusiones hemolíticas.
Reacciones contra antígenos eritrocitarios también pueden causar la DHRN, causada por el factor Rh+
del padre y del bebé y el Rh– de la madre (DHRN) cuya causa generalmente se asocia a diferencias
antigénicas relacionadas al sistema Rh
11. Describa las técnicas de tipificación utilizadas.
- Tipificación ABO de la sangre del donante y el receptor : se realiza para evitar la transfusión de
hematíes incompatibles. Como norma, la sangre seleccionada para la transfusión debe ser del
mismo grupo ABO que la del receptor. En situaciones urgentes o cuando el tipo ABO correcto
es dudoso, pueden emplearse hematíes del grupo O para pacientes de cualquier tipo ABO.
- Tipificación Rh: determina si el factor Rh Rh0(D) está presente (Rh-positivo) o ausente (Rh-
negativo) en los hematíes. Los pacientes Rh-negativos siempre deben recibir sangre Rh-
negativa, excepto en situaciones de urgencia vital en que no se disponga de este tipo de
sangre. Los individuos Rh-positivos pueden recibir sangre Rh-positiva y Rh-negativa. En
ocasiones, los hematíes de algunas personas Rh-positivas reaccionan débilmente en la prueba
de tipificación Rh estándar (D débil, o Du, positivo), pero siguen considerándose Rh-positivas.
- Investigación de anticuerpos antieritrocitarios irregulares: se realiza rutinariamente en las
muestras pretransfusionales procedentes de futuros receptores Los anticuerpos irregulares son
específicos para antígenos de grupos sanguíneos eritrocitarios diferentes del A y el B, como
Rh0(D), Kell (K) o Duffy (Fya). Su detección precoz es importante porque pueden causar
enfermedad hemolítica del recién nacido y reacciones transfusionales graves.
- Prueba de la antiglobulina indirecta (prueba de Coombs indirecta) es el método que se emplea

para detectar los anticuerpos antieritrocitarios irregulares. Los hematíes reactivos se mezclan
con el suero del paciente, se incuban, se lavan, se añade globulina antihumana y se observa si
aparece aglutinación. Esta prueba puede ser positiva en presencia de un anticuerpo de grupo
irregular o cuando un anticuerpo libre (no unido a hematíe) está presente en anemias
hemolíticas autoinmunes. Una vez que se detecta un anticuerpo, se determina su especificidad.
- Prueba de la antiglobulina directa (prueba de Coombs directa) detecta anticuerpos que

recubren los hematíes del paciente in vivo. Los hematíes lavados se tratan directamente con
globulina antihumana y se observa si se produce aglutinación. Una prueba positiva, si se
correlaciona con los hallazgos clínicos, sugiere la presencia de anemia hemolítica, reacción
transfusional o EHRN.
12. Describa la metodología seguida para realizar las pruebas cruzadas.

Todas las pruebas pretransfusionales tienen su fundamento en que el organismo está dotado de
un sistema inmunológico que reconoce los antígenos extraños y los distingue de los antígenos
propios, desencadenando una respuesta inmune específica para dicho antígeno. La metodología
llevada a cabo es la siguiente:
- Identificación del receptor y de la muestra de sangre del mismo.
- Determinación del grupo ABO y Rh de la sangre del receptor.
- Detección de Ac en suero o en plasma del receptor.
- Seleccionar los componentes sanguíneos de los grupos ABO y Rh que son compatibles con el
receptor.
- Confirmar el grupo sanguíneo del donante, o de la bolsa del donante.

- Realizar pruebas cruzadas o test de aglutinación enfrentando suero o plasma del receptor con
hematíes del donante.
 Prueba mayor: se utilizan dos gotas de suero del receptor más una gota de eritrocitos
lavados del donador.
 Prueba menor: dos gotas de suero o plasma del donador más una gota de eritrocitos del
receptor.
- Etiquetar los componentes con la información del receptor
13. ¿Por qué son necesarios ambos ensayos -tipificación y pruebas cruzadas- para disminuir los
riesgos de una transfusión?
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de anticuerpos son de suma importancia, ya que permiten que
los antígenos y anticuerpos puedan ser detectados ayudando a prevenir la transfusión de sangre
incompatible, y proveen al paciente de máxima seguridad. Se deben realizar estas pruebas a parte de
la tipificación del paciente y el donante debido a que aunque los sistemas ABO y Rh son los más
importantes no son los únicos y existe una gran variedad de antígenos y anticuerpos que pueden llevar
a una incopatibilidad.
14. ¿Cuantas clases de inmunoglobulina G se han descrito?
Existen 4 clases de inmunoglobulina G en humanos, llamadas en orden de su abundancia en suero

(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4). La IgG2 posee una baja afinidad de unión del receptor Fc a las células
fagocíticas y no puede cruzar la barrera trasplacentaria. La IgG4 es la única que no activa el
complemento. Todas las IgG tienen una vida media de 21 días a excepción de la IgG3 la cual solo
dura en promedio 7 días.
15. Cuáles son las propiedades más comunes de las IgG?
- Las IgG son el principal anticuerpo en la sangre y en el fluido extra celular.
- Puede unirse al patógeno causando su inmovilización y su aglutinación, puede revestir su

superficie (opsonización) lo que permite el reconocimiento del patógeno por las células
fagocíticas, puede activar la vía clásica del complemento y neutralizar toxinas.
- Se ha visto involucrada en las reacciones de hipersensibilidad tipo II y III.
- Esta proteína especializada es sintetizada por el organismo en respuesta a la invasión de

bacterias, hongos y virus.
- Es la inmunoglobulina más abundante del suero, con una concentración de 600-1.800 mg por
100 mL.1
- Constituye el 80% de las inmunoglobulinas totales
16. ¿Cuál es la constitución molecular de la IgM?
La IgM tiene la estructura de un pentámero porque está formada por cinco monómeros de cuatro
cadenas cada uno (dos cadenas H y dos cadenas L), lo que le proporciona a cada molécula diez sitios
activos de combinación con los determinantes antigénicos. Las IgM tienen un PM elevado, de 970 kDa
y una concentración aproximada de 1.5 mg/mL de suero. Cada monómero tiene un PM aproximado de
180 kDa. El contenido de carbohidratos es de aproximadamente 10-12% que están distribuidos en
diferentes dominios constantes de las cadenas H.
17. ¿Cuáles otras inmunoglobulinas conoce usted?
18. ¿Cuáles son los anticuerpos más comunes de los grupos sanguíneos?
Anti A
Anti B
Anti D
19. Escriba 6 características especiales de los grupos sanguíneos
 Su antigenicidad (antígenos ABO)
 Incompatibilidad de los grupos mayores con los menores.
 Son heredables (Codominancia)
 Por lo general poseen anticuerpos opuestos al antígeno de su grupo.
 EL receptor universal es el grupo AB+y el dador universal es el OO negativo
 El grupo O es la ausencia de los antígenos en la membrana
20. ¿Cuáles inmunoglobulinas cruzan la placenta y cómo producen la Enfermedad Hemolítica del
Recién Nacido (E.H.R.N.)?
Cuando la sangre Rh positivo del feto se pone en contacto con la sangre Rh negativo de su madre
durante el embarazo o el parto, estimula la producción de anticuerpos en la madre contra el
antígeno Rh positivo del feto o el recién nacido. Estos anticuerpos son del tipo IgG, los cuales
cruzan la barrera placentaria y se incorporan a la circulación fetal, en donde se forman los
complejos antígeno –anticuerpo en los eritrocitos Rh positivos del feto.
Una vez producidos los anticuerpos por la madre Rh inmunoglobulina G (IgG) pueden cruzar
libremente la placenta a la circulación fetal, donde se forman complejos antígeno-anticuerpo con los
eritrocitos Rh positivos del feto y, finalmente se destruyen, lo que resulta en un feto aloinmune que
propiciara anemia hemolítica.
21. ¿Qué es la E.H.R.N.?
La enfermedad hemolítica del recién nacido (EHRN) se caracteriza por el acortamiento de la vida
media de los hematíes fetales debido a la acción de anticuerpos maternos que atraviesan la placenta.
A pesar del término EHRN, el proceso comienza en la vida intrauterina, por lo que se ha propuesto el
nombre de enfermedad hemolítica del feto y recién nacido.
La EHRN se inicia durante la vida intrauterina por la hemólisis de los hematíes fetales recubiertos de
anticuerpos. La anemia resultante conlleva una disminución de la capacidad de transporte de oxígeno
y como mecanismo de compensación una hiperplasia intramedular de la serie roja y liberación a
sangre periférica de formas inmaduras (erythroblastosis fetalis) . Cuando la capacidad de
compensación de la médula es superada, aparece la hematopoyesis extramedular en hígado y bazo,
lo que origina distorsión de la circulación portal, hipertensión portal y ascitis. La hipoalbuminemia
causada por la disminución de la síntesis de albúmina en el hígado da lugar a una disminución en la
presión oncótica con la aparición de edema generalizado, ascitis, e incluso derrame pleural y
pericárdico (hydrops fetalis.
22. ¿A qué se llama respuesta inmunológica?

El significado del término inmune se asocia históricamente a un mecanismo de protección. Deriva de la
palabra latina: immunis que significa: libre, exento de ciertos oficios, obligaciones, impuestos y
castigos. El término se extendió para aplicarlo a personas que, después de haber padecido una
enfermedad infecciosa, como la peste o la viruela, quedaban exentos de ataques ulteriores. La
evidencia de que productos derivados de las células participantes en la inmunidad pueden mediar
respuestas neuroendocrinas, originó la propuesta de que el sistema inmune actúa como un órgano
receptor periférico que transmite información al cerebro relacionada con respuestas a estímulos
antigénicos externos e internos. Al respecto, Blalock y Smith postularon que hay una utilización
compartida de ligandos y receptores de mediadores inmunes y neuroendocrinos, por lo que llamaron al
sistema inmune “el sexto sentido”. El sistema inmune no existe en un órgano definido. Es un conjunto
de tejidos, células y moléculas que interaccionan y forman un frente común para integrar una
respuesta: la llamada respuesta inmune. La mayoría de las veces esta respuesta es de naturaleza
defensiva y se produce ante un agente exógeno o endógeno, que resulta extraño al organismo,
denominado antígeno (Ag). El sistema inmune está capacitado para reconocer lo que le es propio y así
mantener la individualidad del organismo.
(Vega-Robledo, G.B. La respuesta inmune. Medigraphic. Revista Facultad de Medicina UNAM. México,
2008. Vol 51 (3); p: 128-129.)
23. ¿Cuántos tipos de respuesta inmune se conocen?
Respuesta inmune innata (Natural)
La defensa innata ante las infecciones tiene como principio el reconocimiento de lo ajeno o extraño,
pero de forma inespecífica; es decir, actúa igual ante cualquier agente agresor y no varía la intensidad
de su respuesta aunque se repita la agresión más de una vez. Forman parte:
• Defensa de superficie
• Factores humorales
• Fagocitosis
• Respuesta inflamatoria
• Acción de los interferones
• Acción de la célula NK.
Respuesta Inmune adaptativa (Adquirida)
La inmunidad adaptativa, que se desarrolla cuando los agentes infecciosos logran evadir los
mecanismos innatos de defensa y está generada por la penetración de una dosis inicial de antígenos,
se hace efectiva sólo después de varios días; tiempo requerido para que los linfocitos T y B
reconozcan a dichos antígenos, se diferencien y se conviertan en células efectoras.
Sus características, a diferencia de la inmunidad innata son:
• Especificidad
• Memoria
• Diversidad
• Multifactorialidad
24. ¿Qué es respuesta inmune primaria y secundaria?

En la respuesta primaria primero se produce IgM, y luego IgG, siendo en ella la contribución global de
la IgM más importante. En cambio, en la respuesta secundaria se produce mucha mayor cantidad de
IgG que de IgM.
Las células B de memoria quedan en reposo (G0) durante muchos años (incluso persisten durante
toda la vida).
La respuesta secundaria posee una serie de importantes diferencias cualitativas y cuantitativas con
respecto a la respuesta primaria:
Diferencias cuantitativas:
 Se inicia más rápidamente (menor fase lag)
 Alcanza más intensidad (100 o 1000 veces mayor)
 Dura más tiempo, como se comprueba por la fase de meseta más prolongada y su declive más
lento.
Diferencias cualitativas:
 Ocurre cambio de clase, produciéndose preferentemente IgG, aunque también IgA e IgE
 Tiene lugar la maduración de afinidad por hipermutación somática y selección "darwiniana" de

los linfocitos con receptores de mayor afinidad.
25. ¿Qué es el factor Rh?
Mucopolisacárido dotadode fuertes propiedades antigénicas y ligadas a la superficie del hematíe. Se

llama así por las dos primeras letras del nombre específico del Macacu Rhesus, dado que en esos
monos los hematíes de todos los individuos contienen ese factor (Botella & Clavero, 1993)
Segunda Parte: Taller
1. ¿De cuál de las siguientes parejas podría ser hijo Facundo si tiene grupo sanguíneo A? ¿Podría
tener un hermano perteneciente al grupo O?
a) Padre AB, Madre O;
A B
O AO BO
O AO BO
b) Padre O, Madre O;
O O
O OO OO
O OO OO
c) Padre B, Madre A
B O
A AB AO
O BO OO
Rta: Tanto la opción A como la C, tienen una probabilidad del 25% de tener un hijo A, sin embargo solo
la opción C, podría tener una probabilidad del 25% de tener un hijo O.
Rawson AJ, Abelson NM. Studies of blood group antibodies. IV. Physicochemical differences between
iso-anti-A,B and iso-anti-A or iso-anti-B. J Immunol. 1960;85:640-7.
2. Explicar la posible descendencia de una pareja en la cual el padre es AO y la madre del grupo O.
¿En qué porcentaje se podría producir enfermedad hemolítica del recién nacido?
O O
A AO AO
O OO OO
Rta: Hay una probabilidad del 50% que un hijo sea del grupo AO y padezca EHRN y 50% que sea del
grupo O. La EHRN por incompatibilidad ABO (EHRN-ABO) entre la madre y el recién nacido es la más
frecuente de las EHRN y se produce en gestantes de grupo O con hijo A, B o AB. Esto es así, porque
los individuos de grupo O además de la inmunoglobulina (Ig) M natural contra el antígeno ABO del cual
carecen, presentan cierta cantidad de IgG. Así pues, la IgG anti-A o anti-B presente en el suero de la
gestante de grupo O podrá atravesar la placenta y unirse a los hematíes fetales o del recién nacido.
Salvo raras excepciones se produce en gestantes de grupo A o B.
Aloinmunización por anticuerpos antieritrocitariosfetomaternos, por incompatibilidad RhD. a)

Incompatibilidad RhD negativo (mamá), RhDpositivo (feto). b) Aloinmunización, producción de
anticuerpos anti-RhD (mamá), contra eritrocitos fetales RhD positivos.
Rosenfield RE. A-B hemolytic disease of the newborn. Analysis of 1480 cord blood specimens, with
special reference to the direct anti-globulin test and to the group O mother. Blood. 1955;10:17-28.
3. En sendas tipificaciones de 7 muestras de sangre se obtuvieron los siguientes resultados:
Invers
Muestra Directa Discrepancia Causas Solución
a
Lavar los eritrocitos
varias veces para
eliminar componentes
séricos o químicos que
puedan estar causando
Autoanticuerpos- Anemia hemolítica
5 AB B reacciones positivas,
Haloanticuerpos autoinmune
adsorción-elución de
Acs para determinación
indirecta de grupo
sanguíneo.
Incrementar potencia de
reacción inversa,
incubando el suero del
paciente con los
Ancianos, recién eritrocitos a temperatura
Disminución de nacidos, ambiente por 15
6 B AB
anticuerpos inmunosuprimidos minutos. Si esto no
o leucemias logra incrementar la
reacción, la mezcla
puede ser incubada a
4°C por 15 minutos, con
un autocontrol.
7 A O Presencia de Acs tales como Se debe hacer RAI.
haloanticuerpos anti P, M, los
cuales reaccionan
a temperatura
ambiente pueden
reaccionar con las
células que se
utilizan para la
inversa, si estas
expresan el
correspondiente
Ag.
reacción inversa,
paciente con los
Ausencia de nacidos, ambiente por 15
8 B AB
un autocontrol.
reacción inversa,
paciente con los
Ausencia de nacidos, ambiente por 15
9 O AB
un autocontrol.
Detección, análisis y resolución de discrepancias en el grupo sanguíneo ABO. Araceli Nieto

Rodríguez. Técnica Laboratorista. Banco de Sangre del Hospital Gonzalo Castañeda, Instituto de
Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado.
4. Se realiza una prueba de Coombs Indirecta para investigar anticuerpos incompletos en una muestra
de suero. Se siguen los siguientes pasos:
Incubación a 37°C del suero problema con GR que portan el Ag adecuado.
Agregado de suero de Coombs.
Observación de aglutinación.
El resultado negativo indicaría ausencia de anticuerpos contra el Ag en cuestión. ¿Puede asegurar el
resultado, según la metodología seguida? Si hubo error, ¿cómo procedería?
No se puede asegurar un resultado confiable según la metodología utilizada, ya que se omiten pasos
importantes enunciados a continuación:
- Lavar los GR del donante en solución salina normal

- Colocar dos gotas de suero del receptor en cada tubo
Fase de sensibilización de los eritrocitos
- Agregar eritrocitos lavados a cada tubo de ensayo
- Mezclar con suave agitación e incubar a 37°C por 15 minutos
Lavado de eritrocitos
- Lavar los GR 3 veces con una solución salina normal, decantando cuanta solución sea posible,
en el último lavado.
Adición del suero antiglobulina humana
- Agregar una o dos gotas del suero de Coombs
- Mezclar bien, centrifugar y resuspender los eritrocitos
- Observar aglutinación y validar si el control dio positivo
5. Se realiza una prueba de Coombs Indirecta para investigar anticuerpos incompletos en una muestra
de suero. Se sigue la técnica adecuada y se observa aglutinación. ¿Se puede asegurar ese resultado,
teniendo en cuenta que no se realizaron ensayos controles? ¿Qué controles debería efectuar?
No. Siempre se debe montar la prueba con un tubo control positivo, el cual debe aglutinar, así, se
garantiza que el reactivo utilizado mantiene su actividad biológica (Ballester, de la Campa, & Pérez,
2010).
7. Indique el probable genotipo RH de la descendencia de las siguientes parejas e identifique los

individuos Rho positivos.
Padre DCe/dce; Madre DCe/Dce : Rh positivos

*DCe/DCe 25%
*DCe/Dce 25%
*DCe/dce 25%
* Dce/dce 25%
Padre DCe/Dce; Madre dce/dce:

*DCe/dce 50%
*Dce/dce 50%
Padre DcE/Dce; Madre DcE/Dce

DcE/DcE 25%
DcE/Dce 50%
Dce/Dce 25%
8. ¿Pueden coexistir en una misma muestra de glóbulos rojos los antígenos D, C, E, c y e? En caso
afirmativo, ¿cuál sería el genotipo más probable de ese individuo?
Si, el genotipo más probable seríaCDe/cDE (Fischer-Race) o R1R2 (Wiener).
9. Si el padre es Rho positivo heterocigoto y la madre Rho negativo; ¿pueden producirse problemas
por incompatibilidad materno-fetal?
Si, porque el feto será Rh positivo y durante el embarazo, sus los glóbulos rojos pueden pasar al
torrente sanguíneo de la madre a través de la placenta.Si la madre es Rh negativo, su sistema
inmunitario trata a las células fetales Rh positivas como si fuesen una sustancia extraña y crea
anticuerpos contra dichas células sanguíneas fetales. Debido a que toma tiempo para que la madre
desarrolle anticuerpos, con frecuencia, los primeros bebés no se ven afectados, a menos que la madre
haya tenido embarazos interrumpidos o abortos espontáneos anteriormente que sensibilizaron su
sistema inmunitario. Sin embargo, todos los hijos que ella tenga después de esto que también sean Rh
positivos pueden resultar afectados. Gracias al uso de inmunoglobulinas llamadas RhoGAM, este
problema se ha vuelto infrecuente en los lugares que brindan acceso a buenos cuidados prenatales.
10. Se puede esperar incompatibilidad materno-fetal del sistema RH cuando la madre es de grupo O
Rho + y el hijo O Rho negativo ¿Por qué?
No, porque la madre es Rh positiva, es decir, posee el antígeno D sobre la superficie de sus eritrocitos
y por lo tanto no producirá anticuerposcontra el mismo. El feto tampoco producirá gammaglobulinas
anti-D a pesar de ser Rh negativo, debido a que no se encuentra sensibilizado y no cuenta con un
sistema inmune totalmente desarrollado.
11. ¿Cómo puede demostrarse que un individuo es Rho heterocigota? ¿Puede emplearse la misma
metodología que para demostrar que un individuo porta los antígenos rh’/hr'?
Un individuo es Rho heterocigota cuando el alelo D se presenta de la siguiente manera: Dd, el alelo D
es el que determina el Rh positivo, donde el 45% de los Rh positivos son homocigotos (DD) y 55%
heterocigotos (Dd); y así es como lo explica la nomenclatura de Fisher-Race.
En cuanto a la nomenclatura de Wiener, nombra Rh o rh, según posea o no el determinante antigénico
D. Wiener denomina rh’ a la presencia del antígeno C, rh’’ a la presencia de antígeno E, hr' a la
presencia del antígeno c, y hr’’ a la presencia del antígeno e. Por tanto un individuo que porte los
antígenos rh’/hr' significa que se presenta de la siguiente manera: Cc
En un servicio de Hemoterapia
se reciben 5 muestras de sangre de donadores (D) para sendos pacientes receptores (R) que
necesitan transfusiones.
En el laboratorio se realizan los ensayos de tipificación y, en los casos que corresponde, se continúan
los estudios de las pruebas cruzadas.
Si las pruebas hubieran sido realizadas en los 5 pares de muestras, los resultados hubiesen sido los
siguientes (los signos - y + indican ausencia o presencia de aglutinación):
12. ¿Cuál de estos parámetros representa un riesgo asociado con la medicina transfusional?
A. Los riesgos inmunológicos.
B. Los riesgos ocasionados por enfermedades infecciosas emergentes.
C. Los riesgos vinculados con el VIH.
D. Todas son correctas.
Aunque la transfusión de sangre es una práctica segura, su empleo conlleva riesgos, que han
aumentado con la aparición de la pandemia del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) y
de otras enfermedades emergentes y reemergentes. Por otro lado persisten los riesgos
inmunológicos e infecciosos debido al uso de la sangre alogénica, los ocasionados por los errores,
el almacenamiento de los componentes, el incremento de los viajes y migraciones humanas y los
nuevos riesgos que resulten del efecto de los cambios climáticos sobre la transmisión de
determinados agentes infecciosos por vía de sus vectores y de la transfusión.
13. Para cruzamientos en los que ambos progenitores sean AB, Rh positivo y MN, indique cuales de
los siguientes descendientes son posibles:
A. AB, Rh positivo, MN
B. O, Rh positivo, MN
C. A, Rh negativo, M
D. B, Rh negativo, N
E. O, Rh negativo, M
Debido a que al ser ambos progenitores Rh positivo el individuo solo podrá ser Rh positivo y al ser los
progenitores AB este nunca podrá ser O.
14. Indique la o las opciones correctas:
A. Sólo las parejas en las que los dos integrantes son heterocigotas para el sistema MN podrán
aparecer descendientes M, N o MN.
B. Los individuos de grupo sanguíneo AB podrán tener descendientes de los grupos A, B, AB y O.
C. No se espera que haya descendientes Rh negativo en parejas en las que ambos integrantes sean
Rh positivo.
D. En parejas en las que los dos integrantes son Rh negativo y uno de ellos A y el otro B, se
espera que el total de la descendencia sea Rh negativo pero pueden aparecer los 4 grupos
sanguíneos para el sistema ABO.
E. Los loci de los tres sistemas (MN, Rh y ABO) están ligados.
Padre Rh negativo
Madre Rh negativo Hijos Rh negativo
B O
A AB AO
O BO OO
Hijos: 100% Rh negativo, 25% AB, 25% A, 25% B y 25% O
15. En relación al sistema de grupos sanguíneos ABO:
A. La relación existente entre dos de los alelos del sistema es de dominancia incompleta.
B. Si existiese dominancia completa entre todos los alelos el sistema presentaría sólo tres
fenotipos (grupos sanguíneos) distintos.
C. Uno de los alelos es recesivo (completamente) frente a los demás.
D. Sólo uno de todos los posibles heterocigotas presenta un fenotipo "propio" (que no comparte con
ningún otro genotipo) y es posible reconocerlo por ello.
E. Dos de los alelos codifican para glicosiltransferasas.
En algunos casos, el gen dominante no logra encubrir por completo la expresión del gen recesivo, sino
que ambos se expresan parcialmente. En los individuos heterocigotas aparece entonces un tercer
fenotipo, diferente del dominante y el recesivo, e intermedio entre los dos. A estos tipos de herencia se
les da el nombre de “dominancia incompleta”
Sistema de grupos sanguíneos ABO en los humanos. Los homocigotas para el alelo I A (IA IA)
presentan o expresan fenotípicamente el grupo sanguíneo A, es decir antígenos en la superficie de los
glóbulos rojos de tipo A. Los homocigotas para el alelo IB (IB IB), expresan fenotipo de grupo B, el
heterocigota en cambio IA IB) tiene grupo AB es decir tiene ambos tipos de antígenos A y B.
16. En una pareja, el padre es de fenotipo "A" y la madre de fenotipo "B" para grupos sanguíneos.
Teniendo en cuenta que el padre es heterocigoto y la madre es homocigota, los fenotipos posibles de
los hijos son
A. A, O
B. A, AB
C. B, O
D. AB, B
Padre
A O
B AB BO
Madr
e B AB BO
Hijos: 50% AB y 50% B
17. Los fenotipos sanguíneos para el sistema ABO, que pueden mostrar anticuerpos anti B son
A. O, A, B
B. O, A, AB
C. O, A
D. O, B
18. Los genotipos posibles de la descendencia de una mujer AB y un hombre BO son:
A. AB, BO, AO, BB

B. AO, BB, AA, AB
C. AB, OO, BO, BB
D. AB, AO, BB, AA
A B
B AB BB
O AO BO
19. Se solicita confirmación del fenotipo de un paciente que fue tipificado como A2 en el laboratorio.
Los resultados esperables en una prueba sérica con glóbulos rojos A1, A2, B y O, en este paciente,
respectivamente son
A. Negativa o Positiva (+++) - Negativa - Positiva (++++) - Negativa
B. Negativa - Negativa - Positiva (++++) - Negativa
C. Negativa - Positiva (++++) - Positiva (++++) - Negativa
D. Positiva (++) - Positiva (++++) - Positiva (++++) – Negativa
20. El fenotipo del sistema ABO de una persona que presenta anticuerpos contra las células A1, A2, y
B es
A. AB
B. A1
C. O
D. A2
21. Las pruebas de antiglobulina humana o pruebas de Coombs detectan inmunoglobulinas de clase
IgG y/o fracciones de complemento unidas a los glóbulos rojos, tanto in vivo como in vitro. Una
prueba de antiglobulina directa está indicada en la siguiente situación
A. Realización de la parte final de las pruebas de compatibilidad
B. Rastreo e identificación de anticuerpos irregulares
C. Diagnóstico de anemia hemolítica autoinmune
D. Estudio de la anemia hemolítica del recién nacido en el suero materno
La prueba de Coombs directa se utiliza principalmente para determinar si una anemia hemolítica,
en la que la tasa de destrucción de los hematíes o células rojas de la sangre es superior a la tasa
de producción de las mismas, es debida a la presencia de anticuerpos frente a los hematíes. Esto
puede suceder en anemias hemolíticas autoinmunes en las que la persona produce anticuerpos
frente a antígenos de sus propios hematíes (autoanticuerpos). Algunos ejemplos serían ciertos
trastornos autoinmunes como el lupus eritematoso sistémico, enfermedades malignas como la
leucemia linfocítica crónica y linfomas, y ciertas infecciones como la neumonía por micoplasma y
la mononucleosis. También hay quién puede desarrollarla como consecuencia de la toma de
ciertos medicamentos, como penicilina.
También se utiliza para diagnosticar la EHRN debida a incompatibilidad sanguíneo materno-fetal.

En el momento del nacimiento la madre puede haber quedado expuesta a antígenos de los
hematíes del bebé y puede haber generado anticuerpos contra los hematíes de su hijo.
La prueba de Coombs directa también puede utilizarse para evaluar una posible reacción transfusional.
Si después de haber recibido una transfusión de sangre se presenta fiebre u otros síntomas sugestivos
de una reacción hemolítica transfusional, la prueba de Coombs directa indicará si la persona ha
generado anticuerpos contra los hematíes transfundidos. Si se detecta anticuerpos fijados a la
superficie de los hematíes, éstos pueden ser destruidos (hemolizados) o eliminados de la circulación
antes de lo normal.
22. El estudio pretransfusional de un paciente que será sometido a cirugía ortopédica y para quien se
solicitaron tres unidades de sangre total, mostró los siguientes resultados en la fase inicial
(temperatura ambiente) de las pruebas de compatibilidad:
Prueba mayor: Hemólisis total
Prueba menor: Negativa
Autocontrol: Negativo
En este caso se debe
A. Buscar otra unidad, ya que existe un anticuerpo Ig M fijador de complemento en el receptor
B. Transfundir las células porque existe una incompatibilidad menor de poca importancia clínica
C. Transfundir la unidad de sangre total porque existe compatibilidad entre donante y receptor
D. Realizar una prueba de la antiglobulina directa al paciente porque probablemente sus células
están sensibilizadas
Cuando la Prueba Menor, la Prueba Mayor o ambas son incompatibles nos obliga a ratificar
inicialmente los Grupos Sanguíneos ABO y Rho(D), posteriormente demostrar la presencia y
especificidad de anticuerpos irregulares en el plasma del donador si la prueba menor fue incompatible;
o en suero del Receptor si la prueba mayor fue la incompatible.
(Rodríguez-Quezada, F. Simposio de inmunohematología: Uso y aplicaciones de reactivos especiales
en el laboratorio de inmunohematología. Medigraphic. Gaceta Médica de México. México, 2003. Vol.
139 (3); p: 23-25)
23. Una persona de grupo sanguíneo A le puede dar sangre a una persona de grupo sanguíneo:
A. B y O
B. A y B
C. A y AB
D. AB y O
24. Con respecto al sistema ABO

A. El grupo 0 (cero) es receptor universal
B. Se tienen Anticuerpos anti A si uno está expuesto a un grupo sanguíneo A
C. Los Antígenos del sistema ABO son el A, el B y el O
D. La enfermedad hemolítica del recién nacido se asocia al IgG
El receptor universal es AB+

El grupo sanguíneo A tiene anticuerpos anti- B
Los antígenos del sistema ABO son el A y el B. El O no tiene y por eso recibe el nombre “cero”.
La etiopatogenia de la EHRN está basada en la incompatibilidad de grupo sanguíneo madre/neonato,
lo que origina el desarrollo de una respuesta inmunitaria en la madre (excepto en la incompatibilidad
ABO, donde los anticuerpos están preformados), el paso de anticuerpos de la clase IgG a través de la
placenta y su unión a la membrana del hematíe.
25. ¿Qué tipo de sangre puede recibir un paciente O negativo?

A. A, B, AB o O negativo
B. Sólo O negativo
C. Sólo AB negativo
D. AB, A o B negativo
Referencias bibliográficas
MedlinePlus. (28 de Enero de 2013). Incompatibilidad rh. Consultado: abril 23 de 2015. Obtenido de:
www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001600.htm
Arbeláez, C. 2009. Sistema de grupo sanguíneo ABO. Medicina & Laboratorio; 15 (7-8).
Cotorruelo, Carlos, Biondi, Claudia, García Borrás, Silvia, Racca, Liliana, Brunetti, Daniel, Di Mónaco,
René, &Racca, Amelia. (2006). Aloinmunización a un antígeno del sistema Rh de alta
frecuencia. Medicina (Buenos Aires), 66(1), 46-48.
VILLEGAS, D. DURÁN, R. et al., Enfermedad hemolítica del recién nacido porincompatibilidad

ABO.Rev Cubana Pediatr 2007; 79(4)
ROJAS, C. GUTIÉRREZ, R. Transfusión de sangre. Disponible en: http://l-

transfusiondesangre.blogspot.com/2011/09/grupos-sanguineos_17.html Consultado: 23/04/15
García, F. Fundamentos de Inmunología. Universidad Nacional Autónoma de México. México, D.F.

1997. pág. 275
Delves. Martin. Burton. Roitt. Inmunología. 11ª Edición. Editorial Médica Panamericana. Argentina.
2008
Ballester, A., de la Campa, J., & Pérez, M. (2010). Manual de Prácticas Médicas-Hospital Hermanos
Ameijeiras. Obtenido de Prueba de Coombs:
http://www.sld.cu/galerias/pdf/sitios/hematologia/prueba_de_coombs.pdf.pdf

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Universidad Industrial de Santander

1. ¿Cuál es el significado de las pruebas cruzadas?

 Tipaje de grupo ABO y Rh del receptor.

 Detección e identificación de Acs en el suero del receptor.

 Tipaje correcto de grupo ABO y Rh del donante.

 Detección de Acs en el donante.

 Pruebas cruzadas (compatibilidad pretransfusional).

2. ¿Cuál es el mecanismo por el cual un medio de albúmina 30% aumenta la sensibilidad de la

Teniendo en cuenta la tabla anterior, serían las parejas: D1 y R1, D4 y R4

6. Discuta cuál(es) sería(n) Dador(es) posible(s) para el correspondiente Receptor

 Anticuerpos contra sífilis

Grupos: A, B, AB, O y el factor RH

Porque: Diferentes sistemas antigénicos se caracterizan por inducir a la formación de anticuerpos en

- Prueba de la antiglobulina indirecta (prueba de Coombs indirecta) es el método que se emplea

- Prueba de la antiglobulina directa (prueba de Coombs directa) detecta anticuerpos que

12. Describa la metodología seguida para realizar las pruebas cruzadas.

- Identificación del receptor y de la muestra de sangre del mismo.

- Determinación del grupo ABO y Rh de la sangre del receptor.

- Detección de Ac en suero o en plasma del receptor.

- Confirmar el grupo sanguíneo del donante, o de la bolsa del donante.

- Etiquetar los componentes con la información del receptor

14. ¿Cuantas clases de inmunoglobulina G se han descrito?

Existen 4 clases de inmunoglobulina G en humanos, llamadas en orden de su abundancia en suero

15. Cuáles son las propiedades más comunes de las IgG?

- Las IgG son el principal anticuerpo en la sangre y en el fluido extra celular.

- Puede unirse al patógeno causando su inmovilización y su aglutinación, puede revestir su

- Se ha visto involucrada en las reacciones de hipersensibilidad tipo II y III.

- Esta proteína especializada es sintetizada por el organismo en respuesta a la invasión de

- Constituye el 80% de las inmunoglobulinas totales

16. ¿Cuál es la constitución molecular de la IgM?

17. ¿Cuáles otras inmunoglobulinas conoce usted?

 Su antigenicidad (antígenos ABO)

 Incompatibilidad de los grupos mayores con los menores.

 Son heredables (Codominancia)

 Por lo general poseen anticuerpos opuestos al antígeno de su grupo.

 EL receptor universal es el grupo AB+y el dador universal es el OO negativo

 El grupo O es la ausencia de los antígenos en la membrana

21. ¿Qué es la E.H.R.N.?

22. ¿A qué se llama respuesta inmunológica?

23. ¿Cuántos tipos de respuesta inmune se conocen?

Respuesta inmune innata (Natural)

Respuesta Inmune adaptativa (Adquirida)

Sus características, a diferencia de la inmunidad innata son:

24. ¿Qué es respuesta inmune primaria y secundaria?

 Se inicia más rápidamente (menor fase lag)

 Alcanza más intensidad (100 o 1000 veces mayor)

 Tiene lugar la maduración de afinidad por hipermutación somática y selección "darwiniana" de

25. ¿Qué es el factor Rh?

Mucopolisacárido dotadode fuertes propiedades antigénicas y ligadas a la superficie del hematíe. Se

Segunda Parte: Taller

Aloinmunización por anticuerpos antieritrocitariosfetomaternos, por incompatibilidad RhD. a)

3. En sendas tipificaciones de 7 muestras de sangre se obtuvieron los siguientes resultados:

Detección, análisis y resolución de discrepancias en el grupo sanguíneo ABO. Araceli Nieto

- Lavar los GR del donante en solución salina normal

7. Indique el probable genotipo RH de la descendencia de las siguientes parejas e identifique los

Padre DCe/dce; Madre DCe/Dce : Rh positivos

Padre DCe/Dce; Madre dce/dce:

Padre DcE/Dce; Madre DcE/Dce

Si, el genotipo más probable seríaCDe/cDE (Fischer-Race) o R1R2 (Wiener).

14. Indique la o las opciones correctas:

Madre Rh negativo Hijos Rh negativo

Hijos: 100% Rh negativo, 25% AB, 25% A, 25% B y 25% O

15. En relación al sistema de grupos sanguíneos ABO:

Hijos: 50% AB y 50% B