FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BSICAS

Sede Central

Manual de Prcticas de Laboratorio de Biologa

General

Elaborado por:
Mariela Leal Barrantes
Gabriela Chavarra Soley
Mayori Grimaldo Salazar
Maritza Alfaro Arroyo

San Pedro, Costa Rica

I Cuatrimestre, 2012

CRONOGRAMA DE PRCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGA GENERAL

PARA EL I CUATRIMESTRE 2012
FECHA
1
2
3
4
5

Medicina, Odontologa y Farmacia

Introduccin
Microscopio
Organizacin Celular
Transporte
Biomolculas

Catlisis enzimtica

7
8
9

EXAMEN
Mitosis y Meiosis
Extraccin ADN y Genealoga
Determinacin de grupos sanguneos y
Gentica de Poblaciones
Anlisis de Folculos Pilosos y Cuerpos de
Barr
Exposiciones
Exposiciones
EXAMEN
----------------

10
11
12
13
14
-

Biologa
Introduccin
Microscopio
Organizacin Celular
Transporte
Biomolculas
Taxonoma: uso de clave dicotmica para
clasificar plantas
EXAMEN
Mitosis y Meiosis
Extraccin ADN y Genealoga
Determinacin de grupos sanguneos y
Gentica de Poblaciones
Anlisis de Folculos Pilosos y Cuerpos de
Barr
Clculo de diversidad utilizando insectos
Exposiciones
EXAMEN
Gira en fecha a convenir con el profesor

Evaluacin de laboratorios
Rubros
Quices
Tareas y Trabajo en Clase
Folleto
Exmenes
Trabajo de investigacin
Giras

Odontologa 30%
25
15
15
25
20

Farmacia y Medicina 25%

25
15
15
25
20

Biologa 40%
25
5
15
25
20
10

Gua para la elaboracin del trabajo final del curso

Formato del resumen

Mrgenes estndar: 2.5 cm superior, derecho e inferior. 3.0 cm izquierdo.
Letra Times New Roman o Arial tamao 12, espaciado 1.5 (espacio y medio) o 1.15, sin
sangra, sangra al inicio de cada prrafo dejar cinco espacios, sin espacios entre
prrafos (texto continuo).
El ttulo puede venir con una fuente de mayor tamao siempre y cuando no supere 14.
Los subttulos pueden ir numerados, subrayados, en negrita o itlica, pero con igual
tamao que el resto del documento.
Citas dentro del texto y referencias de acuerdo con las normas explicadas abajo. Sin
notas al pie.

Estructura del resumen

La extensin mxima del resumen es de 2 hojas (4 pginas) y la mnima 1 hoja (2
pginas). El objetivo es que los estudiantes aprendan a sintetizar de forma coherente la
informacin.
No lleva Portada, solamente escriban el ttulo completo (no el tema) y debajo el nombre
de los estudiantes, por ejemplo:
Aplicacin de clulas madres en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson
Ernesto Hernndez, Greivin Vega y David Tayver.
Debe hacer una pequea introduccin pero sin poner la palabra introduccin,
sencillamente continan escribiendo despus de los nombres de los integrantes. Al final
de esta parte tienen que poner al menos un objetivo general (Recuerden que los
objetivos comienzan con un infinitivo, por ejemplo: Indagar los avances mdicos en el
tratamiento del Parkinson).
El desarrollo del tema es libre de formato: pueden separar esta seccin por apartados o
escribir todo seguido. Sin embargo, debe seguir un orden lgico y mencionar
brevemente todos los datos de la exposicin.
Al final del resumen deben llegar al menos a una conclusin general personal o dar
recomendaciones.
Deben colocar las referencias bibliogrficas utilizadas (bibliografa).
No colocar Anexos ni fotografas para rellenar espacios. Todas las imgenes se colocan
solamente en la exposicin.
Recuerden que deben entregar el resumen en la semana 11, en su respectivo horario, a
la direccin de correo electrnica de su profesor de laboratorio o en forma personal
(dependiendo la disposicin del profesor). Adems, el da de la exposicin deben dar
una copia escrita o digital a cada compaero.
Citas dentro del texto: cuando escriba una idea que no les pertenece debe anotar la fuente de
la siguiente manera al final del prrafo o la frase: apellido del autor o autores, fecha de
publicacin (Leal, 2008), (Leal y Barrantes, 2009), (Alvarado et al., 2007).
Reglas para escribir una bibliografa: en esta seccin deben indicarse todos los documentos
utilizados y citados en la realizacin del trabajo, es decir, libros, tesis, revistas, pginas de
internet, etc. Esta parte debe ir organizada en orden alfabtico segn el apellido del primer autor

del documento y luego si existe ms de una cita para un mismo autor se debe ordenar por aos,
de los ms viejos a los ms nuevos.
A continuacin se brindan algunos ejemplos de cmo citar las referencias en el listado final
siguiendo el formato APA (Se recomienda utilizar por lo menos 5 citas bibliogrficas):
Libro, informe, folleto o medio audivisual:
Autor, A. A. (Ao). Ttulo del trabajo: Subttulo. Localizacin: editorial.
Whitmore, T. C. (1998). An introduction to Tropical rain forest. (2 ed.) New York: Oxford
University Press.
Captulo de un libro o artculo de una antologa:
Autor, A. A. (Ao). Ttulo del captulo. En: editor (Eds.) Ttulo del libro (pginas del
captulo). Localizacin: editorial.
Mchargue, L. A. y Hartshorn, G. S. (1991). Carapa guianensis (Meliaceae) (Cedro macho,
caobilla). Plantas. En: Janzen, D.H. (ed.) Historia natural de Costa Rica (pp. 209-210).
(2 ed.). Costa Rica: Editorial Universidad de Costa Rica.
Revista, Semanario o peridico:
Autor, A. A. (Ao). Ttulo del artculo. Ttulo de la publicacin, volumen (nmero):
pginas.
Schaufeli, W, Martinez, I., Pinto, A., Salanova, M., & Bakker, A. (2002). Burnout and
engagement in university students. A cross-national study. Journal of Cross-Cultural
Psychology, 33 (5): 464-481.
Autor, A. A. (Ao, mes da). Ttulo del artculo. Ttulo del diario [tipo de medio]. pgina
o indicador del idioma. Disponible: [fecha de acceso].
valos, A. (2008, mayo 13). Hospitales con muchos interinos en Enfermera. La Nacin, El
Pas
[en
lnea],
Espaol.
Disponible:
http://www.nacion.com/ln_ee/2008/mayo/13/pais1504703.html [2008, mayo 13]
Tesis:
Autor, A. A. (Ao). Ttulo de la tesis. Grado de la tesis. Universidad o Instituto, pas.
Pginas.
Arias-Le Claire, H. (2000). Dispersin de semillas de dos especies arbreas comerciales
diseminadas por vertebrados en bosques fragmentados de Sarapiqu, Costa Rica. Tesis
de Maestra. CATIE, Costa Rica. 69 p.
Fuentes de Internet:
Tenga cuidado con las pginas que usa en internet. Recuerde que cualquier persona puede
publicar informacin ah, la cual puede no ser veraz o actualizada. Si lo hace que sea de
pginas de instituciones reconocidas a nivel mundial en biofsica o fisiologa. Tambin
pueden ser organizaciones especializadas en el tema que le corresponde o en su carrera.
Autor, A. A. o institucin. (ao de publicacin). Ttulo del artculo. [Tipo de medio]
Consultado: (da, mes, ao). Disponible en: exacta de internet.
Universidad Latina de Costa Rica. (2004). Informacin general sobre la Universidad Latina de
Costa Rica. Aspectos generales y antecedentes de la Universidad Latina de Costa Rica.
[en lnea]. Consultado: (21, agosto, 2008). Disponible en: http://www.ulatina.ac.cr/

Documentos sin autor:

Ensayos sobre teora y metodologa de la investigacin educacional (serie 3, Planteamientos
tericos y metodolgicos, N 4) (1973). Mxico: Ministerio de Educacin, Direccin de
Planeamiento, Departamento de Investigaciones Educacionales.
Publicacin gubernamental:
National Institute of Mental Health. (1990). Clinical training in serious mental illness (DHHS
Publication NADM 90-1679). Washington, DC: US Government Printing Office.

Evaluacin del trabajo:

Resumen (Trabajo escrito) 5%
Se considerar dentro de la evaluacin el tiempo de entrega dentro del resumen tanto al
profesor como a sus compaeros.
Formato 2%
Contiene las secciones indicadas y con los formatos adecuados.
La presentacin es adecuada (No empastar).
Redaccin, ortografa y coherencia.
Presenta bibliografa.
Contenido 3%
El contenido es actual y de relevancia.
El trabajo es original y no una copia de internet.
El trabajo est bien estructurado y con buenas ideas.
Exposicin 15%
1. Dominio: muestra claro dominio del tema, presenta una secuencia lgica de ideas, no se
contradicen en la exposicin y entrega del resumen a sus compaeros.
2. Expone de una manera fluida (no leen todo de papeles o la pantalla).
3. Presentacin: usa material audiovisual adecuado (buena escogencia de textos, no muy
recargado, letra e imgenes claras y legibles) y hay una dinmica en la exposicin.
4. Responde adecuadamente a las preguntas del profesor y sus compaeros.
5. Cumplen con los tiempos de exposicin.
6. Entrega el resumen a sus compaeros.

NDICE

Reglas de Laboratorio
Prctica 1: EL MICROSCOPIO COMPUESTO
Prctica 2: ORGANIZACIN CELULAR
Prctica 3: TRANSPORTE A TRAVS DE LAS MEMBRANAS BIOLGICAS. SMOSIS Y
DIFUSIN
Prctica 4: PROPIEDADES DE LAS PRINCIPALES BIOMOLCULAS
Prctica 5: CATLISIS ENZIMTICA
Prctica 6: DIVISIN CELULAR: MITOSIS, MEIOSIS. ENTRECRUZAMIENTO Y
ABERRACIONES CROMOSMICAS
Prctica 7: EXTRACCIN DE ADN Y GENEALOGAS
Prctica 8: DETERMINACIN DE GRUPOS SANGUNEOS Y GENTICA DE
POBLACIONES
Prctica 9: ANLISIS DE FOLCULOS PILOSOS Y CUERPOS DE BARR
Prctica 10: TAXONOMA: USO DE CLAVE DICOTMICA PARA CLASIFICAR PLANTAS
Prctica 11: CLCULO DE DIVERSIDAD UTILIZANDO INSECTOS
GIRA DE BIOLOGA GENERAL
BIBLIOGRAFA

1
2
10
14
19
24
28
38
43
48
54
58
61
62

Reglas del Laboratorio

Dentro de las Instalaciones de Laboratorio, se exigir en todo momento el uso de una gabacha
blanca de manga larga. En las sesiones se exigir tambin, el uso de un manual de prcticas de
laboratorio, as como el material que con antelacin se les solicite para efectuar cada prctica.

Al finalizar cada sesin de laboratorio el estudiante deber lavar los implementos que utiliz en
cada prctica, dejar la mesa de trabajo limpia, depositar la basura en los basureros que se le
indiquen segn sea el tipo de material con el que se est trabajando en la prctica, dejar los
microscopios en posicin de trabajo, firmar la hoja de asistencia y llevar el manual a la
profesora para que revise la labor del da.

Cuando trabaje con el microscopio recuerde que al finalizar el trabajo, apague el equipo, limpie
con papel seda las partes pticas y con un pao las partes mecnicas. Colquelo en su
posicin de trabajo y cbralo con la funda o estuche.

La asistencia a los laboratorios es OBLIGATORIA, se permite un mximo de dos ausencias

justificadas. Con dos llegadas tardas se completara una ausencia y con tres ausencias el
estudiante pierde automtica e irrevocablemente el curso.

Los estudiantes con pelo largo debern recogerlo, y slo se permite el uso de zapatos
completamente cerrados en el laboratorio. No se permite el uso de reproductores de MP3, Ipod,
computadoras porttiles y celulares en el Laboratorio, as como en el examen. Queda
terminantemente prohibido fumar o ingerir alimentos mientras los estudiantes se encuentren en
los Laboratorios. Tampoco se permite el ingreso al Laboratorio de personas ajenas al curso.

Al iniciar y/o finalizar cada sesin (es decisin del profesor) de laboratorio se har un quiz que
puede incluir la materia vista en la prctica y la teora del tema de inters. Estos quices no se
reponen bajo ninguna circunstancia, as que si el estudiante no llega al laboratorio tendr un
cero en la nota.

Prctica 1: EL MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO

OBJETIVOS
1- Reconocer las diferentes partes que integran el microscopio ptico compuesto.
2- Realizar preparaciones de muestras para observar en el microscopio ptico compuesto.
3- Usar correctamente el microscopio ptico compuesto.

FUNDAMENTO TERICO
En el rea de la biologa es necesario estudiar estructuras celulares y sus componentes, sin
embargo, nuestro ojo no es capaz de diferenciar objetos menores a 0.1 mm, por lo que
frecuentemente utilizamos diversos instrumentos que nos permiten eliminar esta barrera. As,
una herramienta empleada comnmente, es el microscopio ptico compuesto.
Hay diversos tipos de microscopios, los ms usados son el microscopio ptico compuesto y el
microscopio estereoscopio. Asimismo, existen otros tipos, los cuales son empleados para reas
ms especializadas en determinados campos de la biologa, como por ejemplo el microscopio
de campo oscuro, el microscopio de fluorescencia, el microscopio de contraste de fases y el
microscopio electrnico.
Los microscopios de uso comn se diferencian por varias caractersticas entre las que podemos
mencionar: el tamao de la muestra, la imagen, la resolucin y la cantidad de lentes objetivos.
As, el microscopio compuesto se emplea para muestras muy pequeas (<0.1mm), proyectando
una imagen bidimensional a travs de sus cuatro lentes objetivos; mientras que, el microscopio
estereoscopio se emplea para muestras de mayor tamao que son visualizadas a bajo poder de
amplificacin, pues solamente posee dos lentes objetivos y la imagen proyectada es
tridimensional.
El microscopio compuesto se usa para dos fines principales: aumentar la muestra y observar
detalles muy pequeos que a simple vista no podran ser observados. Este instrumento cuenta
con tres sistemas:
1. Sistema mecnico: permiten el movimiento para realizar el enfoque de la muestra, dentro
de este sistema se cuenta con las siguientes partes:
a. Revlver: permite el intercambio de los lentes objetivos.
b. Platina o carro: es donde se coloca la preparacin. Dispone de una regla al lado
izquierdo que va de 0-60 y otra en el borde superior de 100-180, que permiten dar la
posicin exacta de la muestra por medio de coordenadas.
c. Pinza: se encuentra en la platina y sujeta la preparacin.
d. Macromtrico: permite el enfoque de la muestra.
e. Micromtrico: le da nitidez a la imagen.
f. Perilla del eje y y x: mueve la muestra de izquierda a derecha y de arriba abajo y
viceversa.

2. Sistema ptico: son los lentes que proveen el aumento del microscopio. Hay dos tipos:
a. Lentes oculares: son dos lentes que posee un aumento fijo de 8x-15x.
b. Lentes objetivos: se encuentran dispuestos sobre el revlver posee de 3-4 lentes,
separados en las siguientes categoras:
Lentes secos: generalmente tiene tres lentes denominados lente de Bajo Poder
(BP: 4x), lente de Mediano Poder (MP: 10x) y lente de Alto Poder (AP: 40x).
Lentes hmedos: reciben este nombre debido a que es necesario incorporar una
gota de aceite de cedro entre la muestra y el lente para poder visualizar la imagen.
Provee un aumento de 100x y se conoce tambin como lente de inmersin (IN).
3. Sistema de iluminacin: son las partes que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz
empleada para observar la muestras, las cuales son:
a. Foco: emite la luz utilizada.
b. Regulador de luz: regula la intensidad de luz observada.
c. Condensador: concentra los rayos de luz emitidos por el foco sobre la muestra.
d. Diafragma: regula la cantidad de luz que pasa por el condensador.
Es importante destacar que el microscopio dispone de un filtro generalmente de color
azul, debido a que la luz azul tiene una mejor resolucin por su onda luminosa de menor
tamao.

Esquema de un microscopio compuesto

A. Oculares
B. Revolver
C. Objetivos
D. Platina
E. Perilla del eje y y x
F. Condensador
G. Tornillo macromtrico
H. Tornillo micromtrico
I. Diafragma Iris
J. Tornillo para regular la altura del
condensador
K. Interruptor
L. Regulador de luz
M. Pinza
N. Pie o soporte

Propiedades del microscopio

1. Poder separador: llamado a veces poder de resolucin, es la distancia mnima entre dos
puntos prximos que pueden verse separados. En el microscopio ptico, el poder separador
mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micra, y en el microscopio electrnico, el poder
separador llega hasta 10 angstrom.
2. Poder de definicin: se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a
sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones
de los lentes utilizados.
3. Aumento del microscopio: es la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el
dimetro o longitud del objeto, o sea, la amplificacin que ha sufrido la imagen. Para calcular
el aumento de un microscopio, se multiplica el aumento del ocular por el aumento del
objetivo, por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10X y un objetivo de 40X, el
aumento a que estamos viendo la preparacin ser: 10X x 40X = 400X, lo cual quiere decir
que la imagen del objeto est ampliada 400 veces.
Otros conceptos empleados en el uso del microscopio
1. Campo del Microscopio o Visual: es el crculo visible que se observa a travs del
microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo
es inversamente proporcional al aumento del microscopio.
2. Distancia de trabajo: es la distancia entre la preparacin y el lente objetivo, es inversamente
proporcional al aumento.
3. Posicin de trabajo: es la posicin del microscopio cuando se inicia y termina la prctica, es
platina abajo y lente de bajo poder.
Preparacin de la muestra para observar en el microscopio
Los materiales utilizados para realizar observaciones en el microscopio consisten de dos tipos
de cristalera: portaobjetos y cubreobjetos. Si se realiza un corte de la muestra este deber ser
muy delgados para permitir el paso de la luz a travs del material. Hay dos tipos de
preparaciones o lminas que pueden ser utilizadas:
1. Preparacin hmeda: la muestra es depositada sobre el portaobjetos, se le adiciona una gota
de un medio lquido puede ser agua o un colorante y se tapa con un cubreobjetos.
2. Preparacin fija: las muestras llevan una preparacin especial, la cual se basa en tcnicas
que permiten el aclarado de la muestra para depositarla en parafina y as poder realizar los
cortes necesarios con un instrumento llamado micrtomo, los cortes se pasan por varios
solventes para remover la parafina y se deposita la muestra sobre un portaobjetos tindola
con colorantes fijos. Por ltimo, se coloca el cubreobjetos y se sella con permound.
Tambin, existen dos tipos de mtodos o tcnicas especiales para montar el material a observar
en el microscopio como son:
1. Squash o aplastado: la muestra es dispersada porque se aplasta el material entre el
cubreobjetos y el portaobjetos.
2. Frotis o extendido: la muestra es lquida o semilquida y se extiende sobre una superficie
de tal forma que quede distribuida uniformemente en una delgada capa.
4

Mtodo de trabajo
1. Con ayuda del revlver coloque el lente de bajo poder. Encienda el microscopio y abra el
diafragma para que llegue la mayor cantidad de luz posible a la preparacin.
2. Abra la pinza para depositar la lmina sobre la platina y cntrela con ayuda de las perillas de
eje x y y.
3. Coloque sus dos manos en el macromtrico y gire despacio para que suba la platina hasta
cuando haya observado una imagen clara y ntida a travs de los lentes oculares.
4. Grade la intensidad de luz con el regulador de luz y controle la cantidad de luz con el
diafragma (cuanto menor sea el aumento permanecer ms cerrado) para realizar el
contraste apropiado de la preparacin.
5. Gire el revlver y observe a mayor aumento primero con el lente de mediano poder y luego
con el alto poder. Recuerde que la imagen debe estar centrada antes de cambiar de lente
objetivo.
6. Para enfocar en mediano y alto aumento deber colocar sus dos manos nicamente sobre el
micromtrico (nunca se deber usar el macromtrico) y subir lentamente hasta obtener
nuevamente la imagen.
7. Coloque el lente de bajo poder y baje la platina con el macromtrico para poder retirar la
muestra.

MATERIALES
Microscopio
Agua de charco

Portaobjetos
Gotero

Cubreobjetos
Lminas con letras

PROCEDIMIENTO
I. Cuidado del microscopio e identificacin de sus componentes.
1. Descubrir el microscopio y observar si los lentes estn limpios, en caso contrario limpiar con
papel seda con movimientos circulares. NUNCA TOCAR LOS LENTES CON LOS DEDOS
2. Identifique cada uno de los componentes del microscopio.
3. Observe el aumento de los lentes del microscopio, antelo y calcule el aumento total que se
puede obtener con los diferentes objetivos y complete el siguiente cuadro:
Nombre del Lente

Aumento del lente

Aumento total

II. Preparacin y enfoque de muestras

A. Propiedades y conceptos relacionados con el microscopio
1. Realice los siguientes ejercicios:
a. Coloque la lmina de una letra recortada en el microscopio con el cubreobjetos para arriba y
enfquela en bajo poder siguiendo siempre los pasos sealados en el mtodo de trabajo.
Cmo se observa la letra a travs de los lentes oculares del microscopio y cmo se observa
por fuera de los lentes?

b. Hacia dnde se mueve la muestra si observo por los lentes oculares? Si se mueven las
perillas de eje x y y para arriba y abajo y para la izquierda y derecha.

c. Cambie de lente objetivo sin mover la muestra qu pasa con la imagen cuando se cambia
de lente?

2. En cada poder (lente objetivo) mida la distancia de trabajo con ayuda de una regla y escriba
los datos en el siguiente cuadro:
Nombre del Lente

Distancia de trabajo
(mm)

3. Asimismo, calcule el dimetro del campo visual en cada poder (lente objetivo). Escriba ambos
datos en el siguiente cuadro:
Para medir de manera directa el dimetro del campo de visual correspondiente a cada lente
objetivo se emplea una regla milimtrica con el lente objetivo de menor aumento (BP). En
microscopa se usa comnmente la unidad de micrmetro cuyo smbolo es y equivale a
1/1000 mm.
Para calcular en los otros poderes (MP, AP, IN) se considera nicamente el aumento de los
lentes implicados, es decir, si vamos a estimar el dimetro a mediano poder (DMP) y el
dimetro a bajo poder (DPB) fue 3000 m, multiplicamos este dato por el aumento a bajo poder
(ABP) que fue donde se hizo la medicin y se divide entre el aumento a mediano poder (AMP)
porque es lo que queremos calcular, por ejemplo:

, se sustituye a

Nombre del Lente

y el resultado es 1200 m.

Dimetro del campo

visual (m)

Frmulas
Medicin
en
micras
realizada sobre el LBP

B. Montaje de una lmina hmeda e identificacin de organismos

1. Ahora realice un montaje con agua de charco, para ello tome una gota del agua con el
gotero, colquela sobre el portaobjetos y cbrala con el cubreobjetos.
2. Enfoque y observe la preparacin con el lente de bajo poder y despus aumente a mediano y
alto poder donde efectuar la identificacin.
3. Con ayuda de las lminas adjuntas en el anexo identifique los organismos que se localizan
ah y encirrelos en un crculo.

III. ltimas indicaciones:

1. Al finalizar el trabajo, apague el equipo, limpie con papel seda las partes pticas y con un
pao las mecnicas. Coloque en su posicin de trabajo.
2. Antes de retirarse, asegurarse que las mesas de trabajo, el material utilizado y el laboratorio
en general queden limpios.

Precauciones generales:

Cuando el microscopio no est siendo utilizado debe permanecer apagado.

El microscopio debe ser colocado en el centro de la mesa de trabajo, lejos de las esquinas.
El microscopio debe ser protegido del polvo cubrindolo con una funda o un estuche
Despus de efectuar las observaciones, los portaobjetos deben ser lavados con agua.
Si se rompe alguna lmina o portaobjetos no desechar en el basurero. Debe entregrselo al
profesor.
El papel toalla o desechos de cortes deben ser colocados en el basurero.

ANEXO
Identificacin de organismos presentes en el agua de charco

Prctica 2: ORGANIZACIN CELULAR

OBJETIVOS
1- Usar correctamente el microscopio.
2- Identificar diversas estructuras en clulas eucariotas.
3- Distinguir entre clulas animales y clulas vegetales.
4- Conocer la funcin de cada organela.
5- Realizar correctamente preparaciones con diferentes materiales.

FUNDAMENTO TERICO
La clula es la unidad ms pequea que puede realizar todas las actividades asociadas con la
vida. La mayora de procariontes, muchos protistas y hongos estn conformados por una nica
clula, siendo considerados como organismos unicelulares. Por el contrario, la mayora de
plantas y animales estn compuestos por millones de clulas llamndose organismos
multicelulares o pluricelulares.
El trabajo de Schleiden, Schwann y Virchow contribuy al desarrollo de la teora celular que
establece que:
a) La clula es la unidad de organizacin y funcin bsica de la vida en todos los organismos.
b) Todas las clulas proceden de otras clulas pre-existentes.
c) Todo ser vivo est formado por una ms clulas.
Para que una estructura sea considerada como una clula debe poseer tres estructuras
bsicas: (1) una membrana plasmtica que rodea al medio acuoso denominado (2) citoplasma
donde se encuentra (3) el material gentico constituido por fibras de ADN. A pesar de estas
similitudes es posible establecer dos tipos bsicos de clulas: procariotas y eucariotas.
Los procariotas constituyen las clulas ms sencillas y de menor tamao, su ADN es una
molcula circular la cual se localiza en una regin llamada rea nuclear o nucleoide, carece de
organelas rodeadas por membranas, poseen pared celular compuesta por peptidoglucano. Las
nicas estructuras que poseen los procariontes son ribosomas y flagelos.
Por otro, lado los eucariotas son clulas complejas y altamente organizadas contienen
organelas rodeadas por membranas y su ADN lineal se encierra en un ncleo. Dentro de los
eucariotas, algunas organelas como plastidios, vacuola central y pared celular compuesta por
celulosa, se restringe a clulas vegetales; mientras que los centriolos son caractersticos de
clulas animales.
Algunas organelas y estructuras citoplasmticas importantes son:
a) Ncleo: centro regulador de la clula
10

b) Nucleolo: sitio de la sntesis del ensamblaje de ribosomas

c) Ribosomas: participan en la sntesis de polipptidos. No son considerados organelas sino
estructuras citoplsmicas puesto que carecen de membrana plasmtica
d) Retculo endoplsmico: sntesis de protenas y lpidos
e) Complejo de Golgi: modifica, clasifica, empaca y distribuye las protenas
f) Lisosomas: participa en la degradacin de materiales ingeridos, secreciones y residuos
g) Vacuolas: almacenan sustancias, residuos, agua
h) Peroxisomas: degradacin de cidos grasos, compuestos nitrogenados
i) Mitocondrias: sitio donde ocurre la respiracin celular
j) Plastidios: se encuentran varios tipos como cloroplastos (almacenan pigmentos fotosintticos
capaces de realizar fotosntesis), cromoplastos (acumulan pigmentos no fotosintticos) o
leucoplastos (almacenan almidn, protenas o aceites)
k) Centriolos: contribuyen a la formacin de cilios y flagelos o al huso mittico durante la mitosis

MATERIALES
Microscopio
Azul de metileno
Yogurt o levadura

Portaobjetos
Hojas de Elodea
Chile dulce

Cubreobjetos
Gotero
Papa

PROCEDIMIENTO
I. Organismos unicelulares
Observe las bacterias del yogurt o levaduras (eucariotas simples) en alto poder. Haga una
preparacin hmeda, coloque una gota de yogurt diluida en agua o una gota de levadura
disuelta en agua. Tia con una gota de azul de metileno diluido en agua y pngale un
cubreobjetos. Dibuje lo observado.

11

II. Organismos multicelulares

A. Clulas animales: clulas de la mejilla
1. Usando la punta de un palillo de dientes raspe su mejilla por dentro de la boca (mucosa oral).
Coloque el palillo inclinado sobre un portaobjetos y agregue una gota de agua, de forma
que escurra por el palillo y arrastre las clulas de la mejilla. Cubra la preparacin con un
cubreobjetos. Las clulas son transparentes, por lo que se recomienda bajar la intensidad de
luz, para aumentar el contraste. Observe la preparacin en bajo, mediano y alto poder.
Ubique el ncleo.
2. Ahora tia la preparacin usando una solucin de azul de metileno, que le da un color ms
oscuro al ncleo que al citoplasma que lo rodea. Aada una gota del tinte al borde del
cubreobjetos (no es necesario removerlo). Acaree el tinte hacia al cubreobjetos usando un
pedazo de papel toalla en el otro lado del cubreobjetos.

Clulas de mejilla sin teir

Clulas de mejilla teidas

B. Clulas vegetales
1. Elodea (planta acutica)
Corte una hoja joven de Elodea, pngala sobre un portaobjetos, tala con una gota de
safranina y agregue una gota de agua, cbrala con el cubreobjetos. Observe a mediano y alto
poder. Identifique las siguientes estructuras: pared celular, citoplasma, vacuola central,
cloroplasto, ncleo y observe el movimiento citoplasmtico llamado ciclosis. Dibuje lo
observado.

12

2. Chile Dulce (Cromoplastos)

Desprenda un pedacito de epidermis de chile; colquela sobre el portaobjetos, cbrala con agua
y observe la preparacin a mediano y alto poder. Observe las estructuras que presenta.

3. Papa (Amiloplastos)
Haga un corte muy fino o un frotis de papa (Solanum tuberosum); colquelo sobre un
portaobjetos, agrguele una gota de agua y una gota de lugol y cbralo. Observe la clula con
su membrana celular y su pared, que se torna transparente. Los amiloplastos tienen grnulos
de almidn que se tien de color azul con el lugol. Observe la preparacin a mediano y alto
poder.

Corte fino

Frotis

13

Prctica 3: TRANSPORTE A TRAVS DE MEMBRANAS

BIOLGICAS. SMOSIS Y DIFUSIN
OBJETIVOS
1- Describir los mecanismos de difusin y smosis.
2- Determinar los factores que afectan la velocidad de difusin.
3- Observar y establecer el efecto de la concentracin del medio sobre las clulas.

FUNDAMENTO TERICO
El agua es un integrante fundamental de la clula y es el principal componente de los seres
vivos debido a su gran cantidad. Pero su vital importancia, es el papel que desempea en la
dinmica celular, ya que los iones inorgnicos, azcares, aminocidos, protenas, nucletidos,
etc., reaccionan entre s y con otras sustancias, gracias a su interaccin con el agua en su
carcter de solvente. En estado disuelto, esas sustancias se desplazan de un punto al otro del
sistema celular siguiendo sus propios gradientes de concentracin y actividad. Cabe resaltar
que, un gradiente de concentracin se establece por diferencias de concentracin entre dos
regiones.
Las membranas biolgicas estn formadas por una bicapa lipdica que contiene protenas
integrales y perifricas. Se caracterizan por ser semipermeables o selectivamente permeables,
esto significa que permiten el paso libre de ciertas sustancias (agua y sustancias de bajo peso
molecular sin carga) a travs de ellas; mientras que no permite tan fcilmente el movimiento de
otras sustancias (cargadas y grandes molculas de soluto). Sin embargo, todas las sustancias
pueden atravesarla mediante diferentes tipos de transporte, dependiendo de la naturaleza de
las sustancias transportadas y concentracin dentro o fuera de las clulas. A escala celular se
reconocen 2 tipos de transporte: el pasivo y el activo. El transporte pasivo es el movimiento de
molculas a travs de los poros de la membrana celular, desde una zona de alta concentracin
a otra de menor concentracin; el proceso no implica gasto de energa y se realiza en forma
espontnea. La difusin y smosis son ejemplo de este tipo de transporte.
La difusin es el movimiento espontneo y desordenado de molculas individuales de una
sustancia a travs de la membrana, desde una zona de mayor concentracin de molculas a
una de menor concentracin. Diversos factores afectan la velocidad con que se desarrolla el
proceso de difusin, entre los cuales se encuentran la temperatura y el tamao de las molculas
de soluto, as como su concentracin. Por tanto, cuando hay una menor concentracin de soluto
la difusin se realiza con menor velocidad y mayor tiempo, y por el contrario a mayor
concentracin de solutos el proceso de difusin necesitar un menor tiempo para llevarse a
cabo. De la misma forma la temperatura influye en el tiempo de difusin, de forma que a mayor
temperatura mayor velocidad de difusin.
Un caso particular de difusin conocido como smosis se produce corrientemente entre
clulas vecinas o entre compartimientos celulares separados por membranas. Igualmente, es el
14

movimiento de molculas de agua a travs de una membrana semipermeable, la cual permite el

paso del disolvente pero no el del soluto, de una regin de alta concentracin a otra con baja
concentracin; sin embargo, se debe aclarar que el agua pura posee un nivel energtico y un
potencial hdrico superiores al del agua que forma una disolucin, por tanto, tiende a moverse a
travs de los poros de la membrana hacia el agua en disolucin. Por ende, cuanta ms alta sea
la concentracin de sustancias disueltas menor ser la concentracin del agua. La presin
osmtica es la presin que tendra que ejercerse sobre la disolucin para evitar la smosis.
Los medios acuosos separados por membranas semipermeables pueden tener diferentes
concentraciones, y se denominan:

Medio isotnico tiene la misma concentracin de soluto respecto a otro medio. En el caso
de una clula, el medio externo tendra la misma concentracin de soluto que el citoplasma
celular, por lo que los potenciales hdricos son iguales, la clula se encuentra en equilibrio
osmtico con el medio.

Medio hipotnica tiene una concentracin de soluto menor respecto a otro. En el caso de la
clula el medio externo tiene menor concentracin de soluto que el citoplasma celular, por lo
que la clula absorbe agua y se hincha.

Medio hipertnico tiene una concentracin de soluto mayor respecto a otro. En el caso de
la clula el medio externo tiene mayor concentracin de soluto que el citoplasma celular, por
lo que tiene un potencial hdrico menor que el del contenido celular y la clula pierde agua.

En clulas vegetales cuando son sumergidas en una solucin hipotnica absorbe agua y se
hincha, manifestando un exceso de presin que recibe el nombre de presin de turgencia pues
la membrana plasmtica presiona contra la pared de la clula, aqu se dice que la clula es
turgente. En cambio, cuando est en una solucin hipertnica pierde agua, la membrana se
retrae separndose de la pared
y la clula se vuelve flcida, por
lo que se dice que la clula se
sufre
el
proceso
de
plasmlisis.
Las clulas animales se
hinchan cuando son colocadas
en
soluciones
hipotnicas,
algunas como los eritrocitos
terminan estallando debido al
agua que penetra en ellas por
flujo
osmtico
(se
lisan)
produce una presin sobre la
membrana plasmtica que es relativamente frgil, por lo que se rompe, en este caso se dice
que las clulas estn hemolisadas (eritrocitos), para otro tipo de clulas se llama lisis. Si, por el
contrario, los introducimos en un medio hipertnico el agua saldr de la clula hasta que se
igualen las concentraciones, y la clula presentar un aspecto arrugado al microscopio, porque
la clula se deshidrata y se dice que est crenada.
La hemlisis es el fenmeno de la desintegracin de los eritrocitos. Es un proceso en el que
intervienen las soluciones. Por ejemplo, en una solucin hipotnica con respecto al glbulo rojo
o eritrocito el eritrocito pasa por un estado de turgencia y luego por la presin sta clula
estalla. Esto genera una mucha menor cantidad de clulas que transporten oxgeno al cuerpo
entre otros elementos como los anticuerpos.
15

MATERIALES
Microscopio
Cubreobjetos
Gotero
Agua caliente, fra y temperatura ambiente
Lugol
Soluciones NaCl: 0.1%, 0.9%, 20%

Portaobjetos
Lancetas
Elodea
Colorante
Soluciones sacarosa: 1%, 20%, 80%
Beakers

PROCEDIMIENTO
I. Factores que afectan la difusin (Este ejercicio se har por mesa)
A. Efecto de la concentracin
1. Rotule tres beakers con un nmero.
2. Agregue 40 ml de agua a cada uno.
3. Aada una gota de lugol al beaker 1, dos gotas de lugol al beaker 2 y tres gotas de lugol al
beaker 3.
4. Tome el tiempo de difusin.
5. Determinar en cul de los tres beaker se disolvi primero completamente el lugol?

Nmero
Beaker

Tiempo de
difusin

Concentracin

1
2
3

B. Efecto de la temperatura
1. Rotule tres beakers con un nmero.
2. Prepare tres beakers: uno con agua a temperatura ambiente, otro con agua caliente y otro
con agua fra.
3. Aada dos gotas de colorante (sin mover demasiado el agua)
4. Tome el tiempo de difusin.
5. Determinar en cul de los tres beakers se disolvi primero completamente el colorante?

Nmero
Beaker

Tiempo de
difusin

Temperatura

1
2
3

16

II. Plasmlisis en Elodea

1. Rotular 3 portaobjetos con las concentraciones de las disoluciones de sacarosa (1%, 20%,
80%)
2. Corte 3 hojas de Elodea y deposite cada una sobre un portaobjetos.
3. Agregue con un gotero una gota de la disolucin de sacarosa marcada en el portaobjetos.
Ponga un cubreobjetos.
4. Observe al microscopio en alto poder (AT).
5. Repita la observacin despus de 5 min y dibuje.
6. Identifique el estado de la clula (EC) y el tipo de solucin (TS).

AT:
TS:
EC:

AT:
TS:
EC:

AT:
TS:
EC:

17

III. smosis en glbulos rojos

1. Rotular 4 portaobjetos con las concentraciones de las disoluciones de NaCl (0.1%, 0.9% y
20%)
2. Con una lanceta extraiga una gota de sangre de su dedo y depostela sobre un portaobjetos.
Repita hasta tener tres gotas de sangre en tres portaobjetos.
3. Agregue con un gotero dos gotas de la disolucin de NaCl al 0.9% en el portaobjetos. Repita
para las otras concentraciones. Ponga un cubreobjetos.
4. Observe al microscopio en alto poder (AT).
5. Haga un dibujo
6. Identifique el estado de la clula (EC) y el tipo de solucin (TS).

AT:
TS:
EC:

AT:
TS:
EC:

AT:
TS:
EC:

18

Prctica 4: PROPIEDADES DE LAS PRINCIPALES

BIOMOLCULAS
OBJETIVOS
1- Estudiar los diferentes tipos de biomolculas que conforman un ser vivo.
2- Identificar diferencias qumicas y funciones entre estos componentes orgnicos.
3- Distinguir entre las principales macromolculas biolgicas mediante pruebas de
reconocimiento.

FUNDAMENTO TERICO
En el planeta las formas de carbono se encuentran ampliamente distribuidas. Los compuestos
orgnicos son molculas donde los tomos de carbono se unen covalentemente entre s para
formar un esqueleto. A dichos compuestos se le pueden incorporar diferentes grupos funciones
tales como hidroxilo, carbonilo, carboxilo, amino, fosfato, etc., los cuales les permiten adquirir
diferentes funcionales, pero principalmente intervienen con su solubilidad en el agua.
La gran diversidad de las molculas orgnicas se debe principalmente a la capacidad del tomo
de carbono de formar cuatro enlaces, permitiendo a su vez crear macromolculas muy grandes.
Las macromolculas se crean por reacciones de condensacin o deshidratacin con una
prdida de una molcula de agua y se degradan por hidrlisis.
Las principales macromolculas en la clula son: hidratos de carbono o carbohidratos,
protenas, lpidos y cidos nucleicos. De acuerdo a la composicin molecular en un ser vivo el
principal componente va a ser el agua seguido por protenas, lpidos, carbohidratos, cidos
nucleicos y sales minerales. Estas macromolculas se pueden clasificar en: macromolculas
con informacin como protenas y cidos nucleicos, y macromolculas de almacenamiento o
estructurales como los carbohidratos y lpidos.
Los hidratos de carbono estn compuestos por subunidades de monosacridos como glucosa,
fructosa, ribosa, galactosa, etc. Estas subunidades se pueden unir por enlaces O-glucosdicos
para formar disacridos (formados por dos monosacridos) como lactosa, maltosa, sacarosa,
trehalosa, etc., y polisacridos (formados por 10 ms monosacridos). Los polisacridos
pueden ser molculas de almacenaje como el glucgeno y almidn; estructurales como la
quitina, celulosa y el peptidoglucano; y de comunicacin celular como los glucolpidos y
glucoprotenas.
Los lpidos son molculas muy heterogneas, no obstante, todas son hidrofbicas. Pueden
almacenar energa en forma de triglicridos y constituyen el principal componente estructural de
las membranas celulares como los fosfolpidos y colesterol. Tambin, son importantes en el
transporte del colesterol, cidos grasos y triglicridos por el organismo a travs de las
lipoprotenas como HDL y LDL. Se debe recordar que el colesterol tambin es un precursor de
hormonas sexuales como estrgenos y testosterona.
19

Las protenas tienen mltiples niveles de estructura y estn compuestas de subunidades de

aminocidos unidas por enlaces peptdicos. Sin embargo, son funcionales hasta que adquieren
su estado nativo, es decir, cuando se encuentran en forma tridimensional, pero pueden ser
afectadas por diferentes factores como el grado de acidez, las radiaciones, los solventes
orgnicos, los detergentes, la agitacin violenta, las soluciones de urea, los iones de metales
pesados y la temperatura que provocan la desnaturalizacin de la molcula. Cuando una
protena se une a otras molculas orgnicas recibe el nombre de prtido.
Los cidos nucleicos son molculas compuestas nucletidos con diferentes funciones biolgicas
tales como transportadores de energa como el ATP, transportadores de electrones como
NADH, reguladores de procesos metablicos como el AMPc y los polinucletidos formados por
largas cadenas de subunidades de nucletidos unidas por enlaces fosfoster tales como el ADN
y el ARN.

MATERIALES
Hojas de alguna planta
Tocineta
Solucin de gelatina
Reactivo de Benedict
Lugol
Lmparas de alcohol
Solucin de glucosa, lactosa,
sacarosa
Agua destilada

Pasas
Aceite
Pinzas para tubos de ensayo
Reactivo de Fehling
Tubos de ensayo
Solucin de albmina 5%
Gradillas para tubos de
ensayo

Papa
Cloroformo
Solucin almidn 1%
Acetona
Reactivo de Biuret
Beaker
Lentes de seguridad
(estudiante debe traerlos)

PROCEDIMIENTO
I. Determinacin de agua y minerales.
1. Coloque una hoja verde en un tubo de ensayo y caliente suavemente durante 20 segundos.
Anote sus observaciones.

2. Por qu se observa agua en las paredes del tubo de ensayo? A qu se debe esto?

3. Posteriormente, contine calentando por 30 segundos ms hasta obtener un residuo de

cenizas color grisceo. Qu indican esto?

Nota: en todos los siguientes procedimientos debe colocarse los lentes de seguridad.
20

II. Determinacin de Carbohidratos.

Los monosacridos son sustancias qumicas que pueden ser oxidadas fcilmente. La presencia
de azcares reductores se detecta con las pruebas de Fehling, Benedict y la prueba de Tollens.
En la reaccin de Benedict el in Cu 2+ que est presente en el reactivo con color azul se reduce
a Cu+ que precipita como Cu2O de color rojo-naranja por oxidacin del grupo carbonilo (CHO)
del aldehdo. El reactivo de Fehling reduce el Cu 2+ a Cu+ por oxidacin del grupo carbonilo del
aldehdo obteniendo un color verdoso al reaccionar con monosacridos o ladrillo con
disacridos. Por otro lado, los polisacridos reaccionan con iones de triyoduro (IO 3-) y forman un
complejo qumico de color azul intenso.
1. Coloque pasas en un tubo de ensayo con 1 ml agua destilada. Agregue 0.5 ml (10 gotas) del
reactivo de Benedict. Caliente en un beaker con agua en ebullicin durante unos tres
minutos. Retire el tubo de ensayo con ayuda de pinzas y colquelo en una gradilla para que
se enfre y observe la coloracin. Anote sus observaciones en el cuadro de abajo. A qu se
debe el cambio de coloracin?

2. Repita el procedimiento anterior agregando 1 ml de cada una de las siguientes soluciones:

Lactosa
Glucosa
Sacarosa
Agua
3. Agregue 0.5 ml de reactivo de Benedict. Coloque en bao con agua hirviendo por 5 minutos.
Saque los tubos con ayuda de pinzas, colquelos en una gradilla y observe los cambios de
color. Anote sus resultados en el cuadro de abajo. A qu se debe el cambio de color?

4. Rotule dos tubos de ensayo

5. En uno tome un pedacito de papa y colquelo en un tubo de ensayo con 1 ml de agua.
6. En otro tubo coloque 1 ml de solucin de almidn 1%
7. A ambos tubos agregue 2-3 gotas de solucin Lugol y caliente por unos segundos en un
bao mara. Anote sus observaciones en el cuadro de abajo. A qu se debe el cambio de
color?

Muestra

Reactivo utilizado

Color inicial

Color final

Resultado (+/-)

Pasas
Lactosa
Glucosa
Sacarosa
Agua
Papa
Almidn

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III. Protenas.
La reaccin de Biuret reconoce los enlaces peptdicos entre los aminocidos. La reaccin
consiste en la quelacin de iones Cu 2+ por los enlaces peptdico en un ambiente bsico y la
consecuente formacin de complejos color violeta.
1. Enumere tres tubos de ensayo del 1 al 3 y en coloque respectivamente en el:
Tubo 1: 1 ml de albmina 5%
Tubo 2: 1 ml de solucin de gelatina
Tubo 3: 1 ml de agua destilada
2. Agregue a cada tubo 3-4 gotas de reactivo de Biuret. No se aplica calor.
3. Compare los tubos y describa sus observaciones en el siguiente cuadro.
Tubo

Sustancia

Albmina 5%

Solucin de gelatina

Agua destilada

Color inicial

Color final

Resultado (+/-)

IV. Reconocimiento de Lpidos.

Cuando los lpidos se oxidan pierden agua y dan origen una sustancia voltil de olor penetrante
llamada acrolena.
A. Prueba de solubilidad
1. Rotule tres tubos de ensayo y agregue por las paredes del tubo 1 ml de cada uno de los
siguientes compuestos:
Tubo 1: aceite y agua
Tubo 2: aceite y acetona
Tubo 3: aceite y cloroformo
2. Realice una primera observacin. Cmo se disuelven? Escriba las capas que se forman
(superior e inferior).
3. Mezcle por inversin cada tubo y deje reposar por 5 minutos. Observe y anote. Escriba las
capas que se forman (superior e inferior).
Tubo

Sustancia

Aceite y agua

Aceite y acetona

Aceite y cloroformo

Capas iniciales

Capas finales

Solubilidad (+/-)

22

B. Formacin de acrolena
1. Caliente suavemente en un tubo de ensayo una gota de aceite hasta que se forme acrolena.
No caliente directamente sobre la llama por mucho tiempo y protjase sus ojos.
2. Acerque el tubo a la nariz y mueva el aire con la mano en direccin hacia la nariz, nunca
directamente porque el olor es muy fuerte. Anote el olor detectado en el cuadro.
3. Luego, caliente un pequeo trozo de carne de cerdo (tocino) en otro tubo de ensayo.
4. Compare el olor con el de la acrolena. Anote sus resultados en el cuadro.
Muestra

Descripcin del Olor

Resultado (+/-)

Aceite
Tocino

23

Prctica 5: CATLISIS ENZIMTICA

OBJETIVOS
1- Describir la actividad enzimtica en las clulas.
2- Estudiar el mecanismo de accin de la papana, bromelina y catalasa.
3- Determinar el efecto de diferentes factores sobre la actividad enzimtica.

FUNDAMENTO TERICO
Las enzimas son catalizadores biolgicos en su mayora compuestos por protenas globulares
que catalizan la velocidad de reaccin de los sistemas biolgicos porque disminuyen su energa
de activacin. Aceleran las reacciones que en forma natural son espontneas, y al ser
catalizadores no se deben consumir ni alterarse de forma permanente y lo ms importante, se
deben reutilizar constantemente.
A pesar que la mayora de enzimas son protenas tridimensionales, recientemente, algunos
cientficos han descubierto unas que catalizan algunos tipos de ARN llamadas ribozimas.
Asimismo, las enzimas tambin intervienen en la transformacin de diferentes tipos de energa,
debido a que son molculas claves en el sistema de control metablico.
Algunas enzimas estn compuestas nica y primordialmente de protenas, pero otras tienen dos
componentes: una parte proteica denominada apoenzima y otra parte no proteica llamada
cofactor. Algunos cofactores pueden ser iones o molculas orgnicas denominadas coenzimas
que sirven de apoyo para la funcin enzimtica tales como vitaminas o aceptores de electrones
de reacciones oxidacin-reduccin. Juntas la apoenzima y el cofactor forman un complejo que
se denomina holoenzima.
La funcin de las enzimas est ntimamente relacionada con la estructura de la enzima. Cada
enzima tiene uno o ms sitios activos, en las que ingresan el o los sustrato(s), para formar el
complejo enzima-sustrato, luego de una serie reacciones tanto el sustrato como el sitio activo
cambian de forma distorsionando sus enlaces qumicos y producindose el proceso
denominado catlisis. Cuando sta se completa se obtienen nuevos productos, los cuales no
encajan en el sitio activo y son expulsados, por lo que la enzima vuelve a su configuracin
original.
Las enzimas son especficas y catalizan unos cuantos tipos de reacciones qumicas. Pero de la
misma forma, tambin las clulas regulan el metabolismo al controlar las enzimas mediante
diferentes mecanismos como:
a) sintetizando enzimas en forma inactiva para que sean funcionales nicamente en
condiciones apropiadas por ejemplo la pepsina y tripsina,
b) creando molculas reguladoras que se unen al sitio regulador o alostrico para fortalecer o
inhibir la actividad enzimtica,
c) mediante inhibidores como venenos, drogas, agentes qumicos, etc. que compiten con el
sustrato por el sitio activo de la enzima.
24

Estos catalizadores biolgicos pueden ser eficaces en condiciones ptimas de temperatura, pH

y concentracin de sales. Cualquier desviacin de estas condiciones estrictas ejerce efectos
adversos en la actividad enzimtica, debido a la modificacin de su estado nativo.

MATERIALES
Tubos de ensayo
Pinzas
Jugo de papaya
Hgado fresco y cocido
Perxido de hidrgeno (Agua oxigenada)
NaOH 0.1M
Placas petri

Mechero de Alcohol
Jugo de pia
Huevos duros
Papa
HCl 0.1M
Agua destilada
Bandas identificadoras de pH

PROCEDIMIENTO
I. Actividad de las enzimas bromelina y papana.
1. Tome cuatro tubos de ensayo:
TUBO 1 y 2: agregue 5 ml de jugo de pia
TUBO 3 y 4: agregue 5 ml de jugo de papaya
Nota: es importante que el jugo sea natural para que haya mejores resultados.
2. Tome los tubos 1 y 3 y calintelos por unos segundos (NO HERVIR). Posteriormente,
agrgueles un pedacito de huevo cocido a cada uno de ellos y dejar reposando en una
gradilla para tubos de ensayo por 1 hora y media.
3. A los tubos 2 y 4 (NO CALENTAR) debe agregarles un pedacito de huevo a cada uno y dejar
reposar en una gradilla para tubos de ensayo por 1 hora y media.
4. Despus de hora y media verter cada uno de los contenidos en una caja petri diferente y
observar.
5. Toque la contextura de los huevos en cada uno de los jugos y conteste:
a. Hay diferencia en la contextura de los huevos?

b. Qu ocurri en el tubo 1 y 3 despus de 1 hora y media?

c. Qu tipo de enzima tiene cada uno de los jugos?

25

II. Actividad de la enzima catalasa.

1. Corte el hgado fresco en cuadritos y colquelo en 2 tubos de ensayo.
2. Repita el mismo procedimiento con el hgado cocido.
3. Tome 4 tubos de ensayo, numrelos y agregue lo siguiente:
Tubo 1
4.0
ml
de
destilada
10 gotas de
oxigenada
Hgado fresco

Tubo 2
Tubo 3
agua 5.0 ml de Agua 4.0
ml
de
destilada
destilada
agua
10 gotas de
-----------------oxigenada
Hgado fresco
Hgado cocido

Tubo 4
agua 5.0 ml de Agua
destilada
agua
-----------------Hgado cocido

4. El hgado debe quedar sumergido en el lquido. Realice la observacin hasta que finalice la
reaccin (cuando deje de burbujear).
5. Observe y conteste las siguientes preguntas:
a. Cmo es la reaccin en cada uno de los tubos? Cul fue el tiempo de reaccin?

b. Cules son los productos de la reaccin?

c. Cul es la funcin de los tubos 2 y 4?

d. La reaccin en el tubo 1 y 3 es igual. S o No, por qu?

e. Qu funcin cumple el agua oxigenada?

III. Efecto del pH sobre la actividad enzimtica.

La peroxidasa es una enzima que cataliza la oxidacin de un amplio nmero de sustratos
orgnicos e inorgnicos, utilizando el poder oxidante del perxido de hidrgeno. sta presenta
una actividad mxima a temperatura entre 60-70 C y a un pH neutro.
1. Prepare 5 tubos de ensayo, limpios y secos, rotule de forma correcta e incluya las siguientes
soluciones en cada uno de ellos.

26

Reactivos
H2O
destilada
H2O2

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 4

Tubo 5

4.3 ml

0.3 ml

0.5 ml

Tubo3
0.5ml (10
gotas)
0.5 ml

4.5 ml

4.3 ml

0.5 ml

0.5 ml

0.5 ml

HCl 0.1 M

0.2ml (4 gotas)

4.0 ml

0.5ml

NaOH 0.1 M

0.2ml

4.0ml

pH Inicial
Tiempo de
reaccin
pH final
2. Mida el pH inicial para cada tubo. Anote en el cuadro.
3. Haga un raspado de papa en una caja petri y agregue una cantidad igual a cada tubo (trate
de que la cantidad sea exactamente la misma, para que haya la misma cantidad de enzima
en cada tubo).
4. Mida el tiempo de reaccin de cada uno de los tubos (cuando comience a burbujear detenga
el tiempo). Coloque sus resultados en la tabla.
5. Mida el pH final de cada uno de los tubos.
6. A qu se debe el cambio de pH?

7. Despus de haber finalizado todos los ejercicios complete el siguiente cuadro para resumir la
actividad efectuada:
Parte I

Parte II

Parte III

Sustrato
Enzimas
Productos

27

Prctica 6: DIVISIN CELULAR: MITOSIS, MEOISIS.

ENTRECRUZAMIENTO Y ABERRACCIONES CROMOSMICAS
OBJETIVOS
1- Preparar lminas de mitosis con meristemos de cebollas.
2- Reconocer las fases de la mitosis vegetal en lminas hmedas y fijas.
3- Simular el proceso de meiosis en eucariotas.
4- Representar el entrecruzamiento y las aberraciones cromosmicas con el biokit de
simulacin de cromosomas.
5- Comprender las diferentes formas de alteraciones de la informacin gentica.

FUNDAMENTO TERICO
Todo ser vivo est formado por clulas, las cuales se dividen para formar nuevas clulas. Este
proceso permite que un organismo crezca, mantenga la homeostasis de sus tejidos, repararse y
reproducirse.
Cuando un organismo entra en divisin celular su material gentico -localizado en el ADN- debe
ser duplicado en forma exacta y sus copias se transmiten a su descendencia junto con los
componentes citoplasmticos adecuados.
El ciclo celular es un proceso de crecimiento celular y reproduccin. El tiempo de duracin vara
dependiendo del organismo, el tipo de clula y los nutrientes. Es importante aclarar que el ciclo
celular eucariota est compuesto por la interfase y la divisin mittica o meitica (segn sea el
caso). Adems, la divisin mittica est integrada por la mitosis (divisin nuclear) y la citocinesis
(divisin del citoplasma) y la divisin meitica la conforman la meiosis (divisin nuclear) y la
citocinesis. En procariotas este proceso de divisin se conoce como fisin binaria y se obtienen
dos copias genticamente exactas.
La mayora de las clulas eucariotas del cuerpo se dividen por mitosis. Por lo que, este proceso
es altamente regulado por factores (nutrientes, pH, temperatura, etc.), enzimas (ciclinas y
ciclinas dependientes de quinasas Cdk-), y puntos de control para evitar errores que pueden
llevar a enfermedades o desrdenes cromosmicos.
La Interfase es un perodo de crecimiento activo, consta de tres fases G1, S y G2, donde se
llevan a cabo una serie de actividades metablicas y el material gentico de la clula se duplica
en este periodo en la fase S. En resumen la clula toma los nutrientes del ambiente, crece y
duplica estructuras citoplasmticas.
La mitosis consta de cuatro fases: profase, metafase, anafase y telofase. La Profase es la etapa
ms larga porque se debe condensar la cromatina, formar el huso mittico, desensamblar la
membrana nuclear y el citoesqueleto, y el nucleolo desaparece. En la metafase los cromosomas
se localizan en el ecuador para separarse en cromtidas y ser enviados a polos en la anafase.
28

Por ltimo, en la telofase suceden los eventos contrarios a la profase, es decir, la envoltura
nuclear se reorganiza alrededor de cada juego de cromtidas, los nucleolos son aparentes, los
cromosomas se descondensan y el huso desaparece, dejando as dos ncleos hijos listos para
ser separados en cada clula.
La citocinesis es el reparto del citoplasma y confinamiento de nuevas clulas dentro de
membranas plasmticas diferentes.
Otro mecanismo de reproduccin eucariota llamado Meiosis permite la reproduccin sexual, la
cual comprende la fusin de dos clulas haploides (n) para formar un organismo diploide (2n)
llamado cigoto. Las clulas especializadas que se unen durante la reproduccin sexual se
denominan gametos. En esta divisin celular el nmero cromosmico se reduce a la mitad; para
ello, la clula, pasa por dos divisiones sucesivas en la cual el ADN se duplica solamente una
vez. El resultado final son cuatro clulas haploides diferentes entre s.
Adems, se debe recordar que la meiosis es un paso fundamental en la reproduccin sexual de
la mayora de organismos. Este proceso es importante, ya que asegura la continuidad gentica
entre generaciones, debido a la variabilidad obtenida durante el evento de recombinacin o
entrecruzamiento gentico ocurrido durante la profase I. Consta de ocho fases: profase I,
metafase I, anafase I y telofase I, profase II, metafase II, anafase II y telofase II.
El primer ciclo de divisin es la parte que la diferencia de una mitosis, porque cada cromosoma
busca a su homlogo para formar las ttradas, durante esta sinapsis puede ocurrir el
intercambio de informacin gentica en un proceso denominado entrecruzamiento.
Posteriormente, las ttradas se separan en cromosomas homlogos que migran hacia los polos
(anafase I), resultando en dos ncleos con un nmero haploide de cromosomas cada uno con
dos cromtidas (telofase I). La segunda divisin sencillamente se distingue porque migran las
cromtidas recombinadas, se separan (anafase II) y se distribuyen a una clula hija distinta.
Tambin, es necesario comprender que los genes se localizan en los cromosomas y stos
tienden a heredarse juntos, siempre y cuando estn localizados en el mismo cromosomas, por
lo que decimos que los genes estn ligados, sin embargo, puede ocurrir una interrupcin o reordenamiento de los genes durante la meiosis. Este intercambio de informacin gentica entre
cromosomas homlogos se denomina entrecruzamiento, pero si el intercambio ocurre entre
cromosomas no homlogos lo llamamos traslocacin.
Otros mecanismos de re-arreglos de genes pueden ser las deleciones cuando hay una prdida
de una porcin de la cromtida produciendo la muerte o defectos en la descendencia de las
clulas reproductivas. Por otro lado, cuando una cromtida tiene ms informacin (genes
dobles) sobre la misma caracterstica producto de mutaciones o traslocaciones no recprocas se
llama duplicacin. Por ltimo, una inversin es cuando existe un cambio en la secuencia de los
genes en un grupo ligado.

MATERIALES
Lminas fijas
Bolsas plsticas

Biokit de simulacin de cromosomas

Cuerdas de 75 cm

29

PROCEDIMIENTO
I. Mitosis
1. Identifique el meristema (son las regiones de crecimiento en plantas, y en ellas ocurre la
divisin celular) de la raz de Allium cepa en el microscopio y dibjelo.
2. Estudie al microscopio las fases de la mitosis y la interfase en el lente de alto poder. Para ello
trabaje con las lminas fijas disponibles de mitosis en clulas vegetales y animales.
3. Haga dibujos rotulados de sus observaciones.

AT:
MERISTEMA

AT:
Fase:

AT:
Fase:

AT:
Fase:

AT:
Fase:

AT:
Fase:

30

II. Simulacin de la Mitosis

A. Ensamblaje.
1. Cada equipo tendr 60 bolitas (genes) de cada color
(120 total), cuatro centrmeros magnticos, cuatro
centriolos, una bolsa plstica y cuatro cuerdas de 75
cm.
2. Ensamble cuatro unidades (dos de cada color) como
se ilustra en la figura 1.
3. Coloque los centrmeros de dos unidades del mismo
color juntas para que se atraigan y se unan formando
un cromosoma con dos cromtidas paralelas como
se muestra en la figura 2.

B. Fases.
1. Interfase: Ponga dos cromosomas en la bolsa plstica (membrana nuclear). Coloque la bolsa
en el centro de la mesa de trabajo para representar el ncleo y posicione los dos centriolos
cerca del ncleo en un ngulo recto uno con otro (Fig. 3).

2. Profase: Separe los dos centriolos alrededor de 50 cm a cada lado del ncleo (fig. 4). Saque
los cromosomas de la bolsa y coloque la bolsa a un lado. Doble los brazos de los
cromosomas como se indica en la figura 4. Forme un lazo en un extremo de cada cuerda.
Haga un lazo apretado alrededor de cada centrmero de una cromtida como se muestra en
la figura 5, y luego, pase la cuerda de las cromtidas hermanas a travs de los centriolos
opuestos.
3. Metafase: Hale suavemente las cuerdas para llevar el cromosoma al punto intermedio entre
los centriolos (fig. 6).

31

4. Anafase: Contine halando las cuerdas hasta que los centrmeros sean separados (fig. 7).
Cuando los centrmeros son separados las cromtidas se convierten en cromosomas hijos.
Contine halando los cromosomas hijos hacia los centriolos.
5. Telofase: Remueva las cuerdas. Agrupe los dos cromosomas juntos cerca de su centriolo
(fig. 8). La membrana nuclear se formara ahora y la divisin del citoplasma ocurrira,
completando la divisin celular.
6. Repita el procedimiento de arriba las veces necesarias hasta que se familiarice con los
principales eventos de la mitosis.

32

III. Meiosis
A. Ensamblaje.
1. Cada equipo tendr 60 bolitas (genes) de cada color (120 total), cuatro
centrmeros magnticos, cuatro centriolos, una bolsa plstica y cuatro
cuerdas de 75 cm.
2. Ensamble cuatro unidades (dos de cada color) como se ilustra en la figura
1A.
3. Coloque los centrmeros de dos unidades del mismo color juntas para que
se atraigan y se unan formando un cromosoma con dos cromtidas
paralelas.
4. Interfase: Ponga dos cromosomas en la bolsa plstica (membrana
nuclear). Coloque la bolsa en el centro de la mesa de trabajo para
representar el ncleo y posicione los dos centriolos cerca del ncleo en
un ngulo recto uno con otro.

B. Primera divisin: divisin reduccional.

1. Profase I: Aunque los eventos de la profase I ocurren dentro de la membrana nuclear para
simularlos la bolsa plstica no puede ser usada. Vierta los cromosomas en la mesa de
trabajo y entrelcelos como se muestra en la figura 2A (note que las cromtidas de cada
cromosoma permanecen paralelas). Para simular el entrecruzamiento despegue una
seccin de la cromtida de cada cromosoma en el mismo punto (e.g. A de la figura 2A) e
intercmbielos (las secciones deben ser de igual tamao). Separe los dos centriolos
alrededor de 50 cm a cada lado del ncleo (figura 2A). Forme un lazo apretado alrededor del
doble centrmero de cada cromosoma como se muestra en la figura 3A, y luego, pase a
travs de las cuerdas de los centriolos opuestos.
2. Metafase I: Coloque los cromosomas cerca del punto intermedio entre los centriolos y en
ngulo recto a las cuerdas (fig. 4A).
3. Anafase I: Hale suavemente de las cuerdas, separando los cromosomas por tirar de ellos
hacia los centriolos (fig. 5A).
4. Telofase I: Remueva las cuerdas y agrupe los cromosomas cerca de su centriolo y coloque
un segundo centriolo cerca del primero en ngulo recto a ste (fig. 6A). La formacin de la
membrana nuclear y la divisin del citoplasma frecuentemente ocurre al mismo tiempo para
producir dos clulas hijas (fig. 6A).

33

C. Segunda divisin: divisin mittica.

El siguiente procedimiento aplica a ambos grupos de cromosomas obtenidos en la primera
divisin.
7. Profase II: Separe los dos centriolos alrededor de 50 cm a cada lado del ncleo (figura 8A).
Forme un lazo en un extremo de cada cuerda. Haga un lazo apretado alrededor de cada
centrmero de una cromtida como se muestra en la figura 7A, y luego, pase la cuerda de
las cromtidas hermanas a travs de los centriolos opuestos.
8. Metafase II: Hale suavemente las cuerdas para llevar el cromosoma al punto intermedio
entre los centriolos (fig. 8A).
9. Anafase II: Contine halando las cuerdas hasta que los centrmeros sean separados y los
cromosomas hijos son halados hacia los centriolos (fig. 9A).
10. Telofase II: Remueva las cuerdas. Agrupe cada cromosoma cerca de su centriolo (fig. 10A).
La formacin de la membrana nuclear y la divisin del citoplasma ocurriran al mismo
tiempo.
11. Repita el procedimiento de arriba las veces necesarias hasta que se familiarice con los
principales eventos de la meiosis.

34

IV. Entrecruzamiento y aberraciones cromosmicas

A. Ensamblaje.
1. Cada equipo tendr 60 bolitas (genes) de cada color y cuatro centrmeros magnticos.
2. Ensamble cuatro unidades (dos de cada color) como se ilustra en la figura 1B.
3. Coloque los centrmeros de dos unidades del mismo color juntas para que se atraigan y se
unan formando un cromosoma con dos cromtidas paralelas como se muestra en la figura
2B.
B. Entrecruzamiento.
1. Entrelace las cromtidas de la pareja de cromosomas como se muestra en la figura 3B.
2. Despegue las secciones de las cromtidas correspondientes a la A, B y C de la figura 3B e
intercambie las secciones (note que las secciones intercambiadas deben ser del mismo
tamao).
3. Desenrede el cromosoma y registre los resultados sombreando las secciones
correspondientes en la figura 4B.
4. Compare sus resultados con los otros grupos. Si encuentra diferencias, trate de determinar
cmo ocurrieron.
5. Coloque el cromosoma en la condicin original.

35

C. Deleccin y duplicacin.
1. Remueva una porcin de una cromtida.
2. Posteriormente, agrguela al extremo de otra cromtida.
3. Diagrame los resultados de la deleccin y la duplicacin en la figura 5B demarcando la deleccin
y dibujando la duplicacin
4. Re-ensamble el cromosoma en la condicin original.
D. Inversin.
1. Use un bolgrafo para marcar las bolitas en una cromtida tal como se muestra en la figura 6B
(si es necesario marque las letras con cinta adhesiva y pguela a las bolitas).
2. Forme un lazo en la cromtida como se muestra en la figura 7B.
3. Separe los extremos de las cromtidas donde superponen e intercambie los extremos.
4. Enderece las cromtidas con el gen A de nuevo hacia arriba.
5. Registre la nueva secuencia de genes en la figura 8B.
6. Qu pasa con la secuencia de genes que estaban dentro del lazo?

36

37

Prctica 7: EXTRACCIN DE ADN Y GENEALOGAS

OBJETIVOS
1- Comprender la base de las tcnicas de extraccin de ADN.
2- Extraer y manipular el ADN de clulas vegetales.
3- Construir rboles genealgicos y determinar el genotipo de los individuos que lo integran.
4- Determinar el modo de herencia de algunos caracteres genticos.

FUNDAMENTO TERICO
Existen diversos procedimientos para extraer ADN de las clulas. Estos varan en la cantidad y
pureza del ADN que se obtiene al finalizar el procedimiento, pero la base de todos ellos es muy
similar.
La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar tienen que
romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula.
A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por
ltimo, hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que
hacer que precipite en alcohol.
La solucin con detergente y sal es capaz de romper la pared celular y las membranas
plasmtica y nuclear. Los jugos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que
contribuye a eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN. El alcohol se utiliza para
precipitar el ADN que es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y
precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.
Cuando el ADN va a utilizarse en el laboratorio para otras aplicaciones, se toman estas fibras
que precipitan en la interfase y se disuelven en agua o en un amortiguador apropiado. Esta
solucin de ADN se puede mantener a 4C (en un refrigerador) por aos, puesto que es una
molcula muy estable.

Genealogas humanas
La herencia consiste en la transmisin de genes a la descendencia, la cual puede provenir de
varias vas como la herencia autosmica, herencia ligada al sexo y herencia citoplsmica o
materna. Actualmente, existe la posibilidad de poder estudiar y determinar la forma de herencia
de diferentes genes mediante diversos exmenes como anlisis de pedigrs o rboles
genealgicos, anlisis de poblaciones, tcnicas citogenticas y moleculares, etc.
Sin embargo, el modo tradicional para estudiar la herencia es construir rboles familiares o
genealgicos que indican la presencia o ausencia del rasgo en estudio en los miembros de
cada generacin. Estos registros de cruces se denominan comnmente como genealogas.

38

Convenciones en las genealogas

Las mujeres se representan con crculos,
los hombres con cuadrados y cuando no
se conoce el sexo es rombo. Los padres
se unen por una lnea horizontal y una
lnea vertical se dirige a sus
descendientes. Si los padres estn
emparentados
(consanguneos)
se
unirn por una lnea doble. Todos los
grupos de hermanos se conectan por
una lnea horizontal y se sitan de
acuerdo al orden de nacimiento de
izquierda a derecha. Cada generacin se
escribe con un nmero romano.
Cuando se estudia un nico carcter los
crculos, cuadrados y rombos se sombrean si expresan el fenotipo considerado. En el caso de
genealogas que no representan un carcter recesivo y se conoce que el individuo es portador
heterocigoto se coloca un punto negro dentro del cuadrado o crculo. Si el individuo ha muerto o
se desconoce su fenotipo se pone una lnea diagonal sobre el cuadrado o crculo. Los gemelos
se indican por lneas diagonales que nacen de la lnea vertical.

Anlisis de genealogas
Los patrones de herencia en el anlisis de pedigr pueden revelar la determinacin allica de
muchos trastornos hereditarios poco frecuentes o raros que son estudiados por la gentica
mdica. Dichos patrones se pueden distinguir en cuatro categoras: autosmica recesiva,
autosmica dominante, ligada a X recesiva y ligada a X dominante.
a) Trastornos autosmicos recesivos: el fenotipo de los afectados es determinado por un alelo
recesivo. Los patrones de herencia en el rbol revelaran que la enfermedad aparece en la
descendencia de los padres no afectados porque el fenotipo del carcter afectado
desaparece en los descendientes de la siguiente generacin. Puede aparecer tanto hombres
como mujeres en igual proporcin y la posibilidad de adquirir la enfermedad de un padre
afectado es 25%. La representacin de este tipo de trastornos en un rbol se observara de
la siguiente forma:

, por lo que se podra deducir que el genotipo sera:

Algunos ejemplos son la fenilcetonuria, fibrosis qustica, alcaptonuria, anemia falciforme,

ataxia telagientacsia, enfermedad de Tay-Sachs, galactosemia y albinismo.

b) Enfermedades autosmicas dominantes: el alelo normal es recesivo, y el alelo anormal es

dominante. Son poco frecuentes. En el anlisis de pedigr, se pueden distinguir porque el
fenotipo tiende a aparecer en cada generacin y tanto los padres como las madres pueden
39

transmitir el fenotipo a sus hijos e hijas. La mayora de las personas afectadas son
heterocigotos, y la probabilidad que un padre afectado transmita la enfermedad a sus hijos
es 50%. Estas enfermedades se pueden representar en un rbol de la siguiente forma:

Pedigr de un fenotipo dominante determinada por el alelo A.

Algunos ejemplos seran la pseudo-acondroplasia (un tipo de enanismo), la enfermedad de

Huntington, hipercolesterolemia familiar, polidactilia (dedos extra), branquidactilia (dedos
cortos), hipotricosis, neurofibromatosis, pico de viuda, neurofibromatosis, porfiria (algunas
formas), Sndrome de Ehler-Danlos y Sndrome de Marfan.

c) Trastornos ligados al X recesiva: es mucho ms frecuente en hombres que mujeres. Los

hombres afectados no transmiten el fenotipo a sus hijos y todas sus hijas son "portadoras",
es decir, llevan el alelo recesivo enmascarados en la condicin heterocigtica. En un rbol
genealgico dicho trastorno se representara de la siguiente manera:

Pedigr de un macho afectado por una condicin ligada a X recesiva.

Los hijos de mujeres afectadas tienen un 50% de probabilidad de adquirir la enfermedad.
Algunos ejemplos son: daltonismo, hemofilia, distrofia muscular de Duchenne, sndrome de
feminizacin testicular, sndrome de Lesch-Nyhan

d) Trastornos ligados al X dominantes: los hombres afectados pasan la condicin a todas sus
hijas pero a ninguno de sus hijos y las mujeres heterocigotas afectadas casadas con
hombres no afectados transmiten su condicin a la mitad de sus hijos e hijas, tal como se
40

representa a continuacin:

Pedigr de un macho afectado por una Pedigr de una hembra afectada por una
condicin ligada a X dominante
condicin ligada a X dominante
Los hijos o hijas de mujeres afectadas tienen un 50% de probabilidad de adquirir la enfermedad.
Hay pocos ejemplos trastornos ligados a X dominantes en los seres humanos, como la
hipofosfatemia (un raquitismo resistente).

MATERIALES
Fresas
Embudo
Beakers pequeos
Fresas
Palillos de plstico para revolver el caf
Jugo de papaya o pia, o suavizante de carne
OPCIONAL

Bolsas Ziploc
Gasa o filtros de caf
Tubos de ensayo
Bolsas Ziploc
Buffer de Extraccin: solucin de
detergente/sal (20 ml de SDS al 10%, 20g de
NaCl y 180 ml de agua destilada)
Etanol al 95% BIEN FRO (ideal: del
congelador)

PROCEDIMIENTO
I. Extraccin de ADN
1. Introduzca 2 fresas en una bolsa Ziploc, intente sacar el aire antes de cerrar.
2. Aplaste las fresas por unos dos minutos hasta formar un pur. Tenga cuidado de no romper la
bolsa.
3. Agregue 10 ml del buffer de extraccin a la bolsa y macere nuevamente por un minuto.
4. Filtre el contenido de la bolsa a travs de gasa o un filtro de caf de manera que caiga en un
beaker pequeo o cualquier recipiente pequeo. Una vez terminada la filtracin puede botar
los restos de fresas y la gasa (filtro).
5. OPCIONAL: agregue 3 ml de jugo de papaya o pia (o suavizante de carne) al filtrado y
mezcle.
6. Transfiera el filtrado a un tubo de ensayo de forma que 1/8 del tubo est lleno.
7. Agregue lentamente etanol bien fro a la muestra hasta que la mitad del tubo est lleno. El
etanol se agrega de manera que se deslice por la pared del tubo, no directamente sobre el
filtrado.
8. En la interfase podr ver el ADN precipitar. Extraiga las fibras de ADN con un palillo de
madera y dibuje lo observado.

41

II. Construccin de rboles genealgicos

1. Escoja alguno de los siguientes caracteres monognicos que se describen a continuacin y
reconozca las variaciones fenotpicas de los integrantes de su familia (al menos 3
generaciones):
a. Lnea frontal del pelo: puede ser continua o tener un crecimiento del cabello en el centro de la
lnea frontal del cabello denominado "pico de viuda".
b. Disposicin del lbulo de la oreja: puede haber dos variantes separado de la mejilla o pegado
lateralmente a la mejilla.
c. Pigmentacin del iris: ojos azules frente a ojos ms oscuros, sean estos verdes o marrones.
Lo que se compara es la ausencia total o no de pigmentacin en la superficie del ojo. En
ausencia de sta, se observa la lmina interna azul del iris, y los ojos sern totalmente
azules. La presencia de pigmento en las capas superiores del iris enmascara en mayor o
menor grado el color azul del fondo.
d. Hoyuelos faciales a ambos lados de la boca: presencia o ausencia de hoyuelos en las
mejillas.
e. Capacidad de enrollar la lengua: son capaces o no de enrollar la lengua en forma de U fuera
de la boca.
f. Hiperextensibilidad del dedo pulgar: es la capacidad o incapacidad de doblar hacia atrs la
ltima falange del pulgar en un ngulo de casi 45 ms respecto al anterior.
g. Dedo meique doblado: puede estar recto, o bien con la ltima falange doblada hacia el dedo
anular. Se colocan ambas manos relajadas sobre una mesa y se observa si los dedos estn
paralelos o si los meiques se doblan hacia dentro.
h. Longitud relativa del dedo ndice: dedo ndice ms o menos largo que el anular. Es un
carcter de expresin influenciada por el sexo.
i. Pelo en la falange: presencia o ausencia de pelo en la falange.
2. Construya el rbol genealgico con base en los datos obtenidos de la observacin de sus
familiares.
3. Determine el genotipo en cada caso cuando sea posible.

42

Prctica 8: DETERMINACIN DE GRUPOS SANGUNEOS Y

GENTICA DE POBLACIONES
OBJETIVOS
1- Identificar los mecanismos genticos que regulan la herencia de grupos sanguneos y
Rh.
2- Utilizar de forma correcta los sueros para poder identificar los diferentes grupos
sanguneos y Rh.
3- Analizar la importancia de los grupos sanguneos del sistema ABO y el factor Rh en las
transfusiones.
4- Determinar las frecuencias gnicas y allicas para los grupos sanguneos.

FUNDAMENTO TERICO
Los grupos sanguneos humanos juegan un papel importante en la gentica, por sus
contribuciones en algunos principios genticos y por la importancia clnica.
Para la clasificacin de los grupos sanguneos se emplean varios sistemas:
A. Sistema ABO: La sangre de todo individuo pertenece a uno de los cuatro grupos diferentes
que se distinguen uno de otro segn la reaccin de aglutinacin. Hay cuatro fenotipos ABO
principales conocidos como grupos O, A, B y AB; en donde los individuos del grupo A
poseen el antgeno A en sus hemates, los del grupo B el antgeno B, los del grupo AB
presentan ambos antgenos y los del grupo O carecen de ambos. Los individuos tendrn
anticuerpos en el plasma contra antgenos desconocidos. Por ejemplo individuos con
sangre tipo A generarn anticuerpos contra el antgeno B (Cuadro 1). El patrn de herencia
de estos grupos sanguneos corresponde a la interaccin de alelos mltiples en los cuales
el gen O es recesivo frente a los genes codominantes A y B.
B. Sistema Rh: El sistema Rh es genticamente complejo. Por simplicidad se puede hablar
de dos alelos R y r. Las personas rr tendrn sangre Rh - y las personas RR o Rr tendrn
sangre Rh+. El alelo R representa al antgeno D, el cual es el ms inmunognico y es el
responsable de las reacciones de rechazo. El alelo r representa a todos los dems
antgenos del sistema Rh. Los individuos Rh- slo pueden recibir sangre del mismo tipo.
Existen complicaciones que pueden surgir durante el embarazo. Si una mujer Rh- concibe
un hijo Rh+, debido al intercambio de sangre a travs de la placenta, la madre producir
anticuerpos contra el tipo Rh+ del hijo. En el siguiente embarazo, si el nuevo hijo es tambin
Rh+, los anticuerpos maternos reaccionarn destruyendo los glbulos rojos del hijo. Esto se
conoce como eritroblastosis fetal y conduce a la muerte del hijo. Para evitarlo, se le pone
una inyeccin a la madre inmediatamente despus del parto. Esa inyeccin impide a la
madre producir anticuerpos anti-D. De esa forma, al quedar embarazada nuevamente no
destruir los glbulos rojos del nuevo hijo. En caso de mujeres tipo Rh- que tengan ms de
un hijo Rh+, es necesario repetir la inyeccin luego de cada parto.
43

Cuadro 1. Grupos sanguneos con sus genotipos.

Fenotipo de
grupos
sanguneos

Genotipos

IAIA; IAi

IBIB; IBi

AB
O

Antgenos
presentes

Reaccin con suero

Anti A- Anti B

Anticuerpos en
plasma del
individuo

Anti -A

Anti-B

Anti B

-----

Anti A

------

IA IB

AB

Ninguna

ii

NINGUNO

Anti A y Anti B

------

------

Frecuencias gnicas
La constitucin gentica de una poblacin puede determinarse en trminos de frecuencias
genotpicas. Esto es posible conociendo la relacin entre el genotipo y su correspondiente
fenotipo. La frecuencia de un genotipo determinado en una poblacin se obtiene dividiendo el
nmero de veces que ocurre cada genotipo entre el nmero total de los genotipos. Las
frecuencias gnicas o allicas pueden calcularse contando el nmero de veces que aparece
cada alelo en una muestra dividiendo este entre el nmero total de alelos.
Las frecuencias gnicas permanecen constantes en la poblacin en ausencia de fuerzas tales
como: mutacin, migracin, deriva gnica, seleccin, etc. El proceso hereditario por s mismo no
cambia la estructura gentica de una poblacin, este principio fue formulado por HardyWeinberg en 1908 y se conoce como la ley de Hardy-Weinberg en gentica.
Esta ley predice adems que las frecuencias genotpicas se pueden calcular a partir de las
frecuencias allicas. Con dos alelos con frecuencias p y q, la frecuencia en equilibrio est dada
por: (p + q)2 = p2 + 2pq+ q2; donde q siempre corresponde al alelo recesivo.
Cuando se trabaja con tres alelos como grupos sanguneos (A- B- O), la frecuencia de equilibrio
est dada por: (p + q + r)2 = p2 + q2 + r2 +2pq +2pr + 2qr.
Si en una poblacin determinada se obtienen las siguientes frecuencias de los grupos
sanguneos A-B-O:
Cuadro 2. Frecuencia de los alelos IA, IB y i del sistema ABO para una determinada
poblacin.
Fenotipo

Frecuencias fenotpicas

Frecuencia genotpica

0.45

p2 + 2pr

0.13

q2 + 2qr

AB

0.06

2pq

0.36

r2

Las frecuencias allicas pueden obtenerse de la siguiente manera:

Frecuencia de sangre tipo O es r2, donde r = 0.36 = 0.6
Frecuencia de sangre tipos B y O = (q+r)2 = 0.13 + 0.36 = 0.49
44

Por lo tanto q+r = 0.7

Si r = 0.6 entonces, q + 0.6 = 0.7, por lo que q = 0.1
Si p + q+ r = 1 entonces, p = 1- (q+r) entonces, p = 1-0.7 = 0.3

Cada poblacin presenta frecuencias gnicas caractersticas por ejemplo:

Cuadro 3. Frecuencia de los alelos IA, IB e i del sistema ABO y de los alelos R y r del sistema
Rh en varias poblaciones humanas.
Poblacin

IA

IB

Amerindios (Sioux)

0.035

0.010

0.955

0.95

0.05

Europeos (Belgas)

0.257

0.058

0.684

0.62

0.38

Africanos (Pigmeos)

0.227

0.219

0.554

0.70

0.30

MATERIALES
Palillos de madera
Alcohol
Lancetas desechables estriles
Calculadora (aportada por el estudiante)

Algodn
Portaobjetos
Sueros Anti-A, Anti-B y Anti-D

PROCEDIMIENTO
I. Determinacin de Grupos Sanguneos: ABO y Rh
1. Tome dos portaobjetos limpios y secos (Placa 1 y 2). Limpie la yema de uno de sus dedos
con algodn y alcohol, djelo secar. Con una lanceta estril punce el dedo y apretando
ligeramente adicione una gota de sangre en cada uno de los extremos de la placa 1, y una
gota de sangre en la placa 2.
2. En la placa 1 agregue suero Anti-A en una de las gotas y suero Anti-B en la otra (esto debe
hacerse de forma rpida antes de que la sangre coagule).
3. En la placa 2 adicione el suero Anti-D. Evite que la punta del gotero toque la gota de
sangre, para que no haya contaminacin.
4. Usando un palillo para cada gota de sangre, agite y observe si se produce o no aglutinacin
y anote sus resultados.

45

Placa 2. Sueros anti-D

Placa 1. Sueros anti- A y anti- B

Interpretacin de Resultados:
Si la sangre aglutina con el suero anti-A, es del grupo A.
Si la sangre aglutina con el suero anti-B, es del grupo B.
Si la sangre aglutina con ambos sueros, es del grupo AB.
Si la sangre no aglutina con ninguno de los sueros, es del grupo O.
Si en la sangre aglutina con el suero anti- D, es de factor Rh Positivo.
Si la sangre no aglutina con el suero anti-D, es de factor Rh Negativo.

II. Clculo de frecuencias fenotpicas y allicas del grupo sanguneo Rh

1. Utilizando los datos de todos sus compaeros, llene el siguiente cuadro:
FENOTIPO

No. Estudiante

Frecuencia
fenotpica

Frecuencia allica

Rh+

p=

Rh-

q=

Total

1.0

1.0

2. La frecuencia fenotpica de los individuos Rh- refleja la frecuencia genotpica de los homocigotos
recesivos. Asumiendo que se trata de un rasgo en equilibrio de Hardy-Weinberg, calcule las
frecuencias allicas y coloque los valores finales en el cuadro anterior.

3. Es el rasgo polimrfico en la poblacin?

46

III. Clculo de frecuencias fenotpicas y allicas de los grupos sanguneos: ABO

1. Utilizando los datos de todos sus compaeros, llene el siguiente cuadro:

FENOTIPO

No. Estudiante

Frecuencia
fenotpica

Frecuencia allica

p=

q=

AB

r=

O
Total

1.0

1.0

2. Cul es el tipo sanguneo ms comn?

3. Indique si el tipo ms comn corresponde al alelo dominante o al alelo recesivo

4. Hay alguna relacin entre la dominancia o recesividad de un alelo y su frecuencia?

5. A cul o cules poblaciones del cuadro 3 se aproximan los datos obtenidos en la clase?
Qu nos indica esto respecto al origen gentico de la poblacin costarricense?

6. Calcule las frecuencias allicas. Est la poblacin en equilibro Hardy-Weinberg? Y coloque

el resultado final en el cuadro anterior.

47

Prctica 9: ANLISIS DE FOLCULOS PILOSOS Y CUERPOS DE

BARR
OBJETIVOS
1- Adquirir conocimientos bsicos necesarios acerca del anlisis fsico de elementos pilosos
y su importancia como evidencia forense.
2- Identificar partes principales de un folculo piloso.
3- Analizar diferencias entre pelos de diferentes especies y entre diferentes grupos
humanos.
4- Relacionar el fenmeno de compensacin de dosis con la presencia de cuerpos de Barr.
5- Identificar cuerpos de Barr en clulas de la mucosa bucal.

FUNDAMENTO TERICO
Un pelo se puede definir como un crecimiento delgado a partir de un folculo en la piel de los
mamferos. Presenta tres regiones morfolgicas: la cutcula, la mdula y la corteza. Estas
regiones se ilustran en la figura 1, junto con algunas estructuras bsicas que se encuentran en
ellas. Los componentes principales del pelo son queratina (una protena), melanina (un
pigmento) y cantidades muy pequeas de elementos metlicos. Un pelo crece de la papila y,
exceptuando este punto de nacimiento, est compuesto de clulas muertas. La raz del pelo se
encuentra dentro de la piel (Fig. 2). Despus de un periodo de crecimiento el pelo permanece
en el folculo en un periodo de descanso, para ser posteriormente eliminado del cuerpo.

48

La cutcula est formada por escamas superpuestas que apuntan hacia la punta del pelo,
formadas por clulas especialmente queratinizadas, que forman de 6 a 8 capas. Existen
diferentes tipos de escamas: coronales, espinosas, imbricadas, las cuales se presentan a
continuacin:

Coronales

Espinosas

Imbricadas

Figura. 3. Tipos de escamas

Las escamas coronales se encuentran comnmente en pelos de roedores pequeos y

murcilagos, casi nunca en humanos. Las espinosas se encuentran en pelos de mink, y la
regin proximal de pelos de gatos y focas, nunca en humanos. Las escamas imbricadas se
encuentran en pelos de humanos y de muchos animales (Fig. 4).

Figura.4. Microfotografas de pelos de distintos organismos.

La corteza o cortex est sostenida de la capa protectora de la cutcula y la constituyen clulas

corticales en forma de aguja, alineadas regularmente paralelas a la longitud del cabello. Su
importancia forense radica en que se halla implantada con grnulos pigmentarios que originan
el color del cabello. El tono y distribucin de estos es un importante punto de comparacin y
diferenciacin. Los cuerpos ovoides son ms grandes que los grnulos de pigmento. Estos se
observan con frecuencia en pelo de ganado y perros, pero tambin pueden estar presentes en
humanos (fig. 5).

Figura. 5. Diferencias en cantidad de cuerpos ovoides en la corteza de diferentes organismos.

49

La cantidad de pigmento vara en humanos entre personas con pelo de diferente color y
diferentes grupos tnicos.
La mdula es el canal central que corre a travs del cabello y que puede o no estar, y cuando
est, vara en el grado de medulacin. La mdula en animales tiende a ser mucho ms definida
que en humanos. En la figura 6 se presentan diferentes tipos de mdula en animales.

Figura. 6. Diferente grado de medulacin en pelos animales

Anlisis Forense
Los pelos relacionados con un hecho delictivo deben ser levantados con una lgica de
clasificacin, que permita posteriormente relacionarlos con las etapas del hecho o
circunstancias del mismo.
Ya en el laboratorio, se debe examinar toda la evidencia en un rea limpia y sin corriente de
aire, por separado para evitar que se mezclen. Hacer una descripcin escrita de cada objeto de
evidencia, resaltando caractersticas fsicas y mtodo de embalaje.
Se debe remover cada pelo de los objetos remitidos, usando pinzas y guantes. Luego etiquetar
todos los recipientes y portaobjetos con la fuente, nmero de caso, nmero de tem, etc.
Cuando no sea posible utilizar pinzas guantes, se puede usar una cinta adhesiva. Recordar,
re-empacar cada muestra antes de examinar la siguiente.
Con el aumento adecuado, es posible determinar: origen; raza; sexo; lugar del cuerpo de donde
proviene; si se trata de un cabello teido; si se trata de un pelo cado, arrancado cortado;
enfermedades que sirvan para reducir la bsqueda o descartar sospechosos.
El anlisis forense de pelos puede brindar mucha evidencia en juicios criminales. No slo son
importantes en estos casos los pelos humanos, sino los pelos animales presentas en la ropa del
sospechoso, por ejemplo, que pueden ayudar a ubicar a alguien en la escena del crimen. Es
importante tener en mente que se trata de una ciencia menos exacta que por ejemplo la
identificacin por anlisis de ADN, pero puede llegar a ser un complemento importante.
Cuerpos de Barr o corpsculo de cromatina sexual
En el ser humano, el sexo est determinado por la presencia de dos cromosomas X en la mujer y
de los cromosomas XY en el sexo masculino. Por lo que, si uno de los dos cromosomas X se
inactiva en clulas femeninas, la dosis de informacin gentica que se puede expresar en ambos
gneros es equivalente.
En mamferos el mecanismo de compensacin de dosis, identificado por Mary Lyon en los aos
60, esta inactivacin ocurre al azar en las clulas somticas de las hembras en una etapa
temprana del desarrollo embrionario y todas las clulas hijas presentan el mismo cromosoma X
inactivado y es posible demostrarlo fcilmente en clulas femeninas de la mucosa bucal o en
50

fibroblastos pero no en clulas similares de los hombres. Esta estructura muy condensada de
cerca de 1 m de dimetro se encuentra pegada a la envoltura nuclear de las clulas en interfase.
Independientemente de cuantos cromosomas X se encuentren en un individuo parece que se
inactivan todos excepto uno. Por ejemplo en mujeres con sndrome de Turner (45, X) y los
hombres normales (XY) no se presentan cuerpos de Barr, en hombres con sndrome de Klinefelter
(47, XXY) slo uno, y as sucesivamente. Por tanto, se puede establecer la regla N-1, donde N
representa el nmero total de cromosomas X presente.

Figura. 1 Clulas de la mucosa bucal con uno y dos cuerpos de Barr

MATERIALES
Palillos de madera
Portaobjetos
Algodn o gasa
Lminas con pelos de diferentes organismos
(vaca, perro, murcilago, gato) y diferentes
grupos humanos (asitico, caucsico, negro)

Cubreobjetos
Papel filtro
Aceto-Orcena
Fijador (3 partes de etanol al 95% y 1 parte de
cido actico glacial)
Medio de montaje

PROCEDIMIENTO
I. Lminas fijas de folculos pilosos
1. Observe en alto poder las lminas con pelos de diferentes animales (vaca, perro, gato,
murcilago) y dibuje lo observado

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

51

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

2. Observe en alto poder las lminas con pelos de humanos de diferente origen tnico
(caucsico, asitico, negro). Dibuje lo observado.

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

52

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

Especie:
Tipo de mdula:
Tipo de escamas:
Corteza:

III. Cuerpos de Barr

3. Limpie la mucosa bucal con un pedazo de algodn o gasa manteniendo la boca abierta y la
lengua en el lado opuesto al frotis.
4. Con ayuda de un palillo de madera raspe suavemente la parte interna de las mejillas para
obtener un material blanquecino que ser colocado sobre un portaobjetos bien limpio formando
una capa muy delgada.
5. Fije por 20 minutos en la solucin fijadora y deje secar.
6. Tia la preparacin con una gota de aceto-orcena y deje reposando por 10 minutos.
Posteriormente, cbralo con un cubreobjetos y seque el exceso de colorante con un papel
absorbente y ejerciendo firme presin.
7. Observe al microscopio en bajo poder buscando clulas que se encuentren bien extendidas.
Cambie a alto poder y localice las estructuras alargadas o plano-convexas, adyacentes a la
membrana nuclear de coloracin oscura en comparacin con el resto del ncleo. Dibuje lo
observado y seale los cuerpos de barr con una flecha.

53

Prctica 10: TAXONOMA: USO DE CLAVE DICOTMICAS PARA

CLASIFICAR PLANTAS
OBJETIVOS
5- Aprender a usar y elaborar una clave dicotmica
6- Conocer las diferentes formas foliares y utilizar esto para clasificar plantas

FUNDAMENTO TERICO
Los seres humanos hemos descrito hasta este momento cerca de 2 millones de especies, sin
embargo se especula que faltan muchos millones ms por descubrir. Para poder estudiar mejor
la diversidad de organismos los bilogos han organizado a los seres vivos, agrupndolos segn
las similitudes, anatmicas, fisiolgicas, embriolgicas y de comportamiento que muestren entre
ellas.
La taxonoma se encarga de nombrar, describir y clasificar los organismos. Histricamente se
han utilizado muchos mtodos para lograr la clasificacin, el mtodo utilizado hoy da fue
propuesto por Carlos Linneo a mediados del siglo XVIII, ste desarroll un sistema que asigna
especies a una jerarqua de grupos cada vez ms generales y trata de reflejar las relaciones
evolutivas entre organismos (cuadro 1).
Cuadro 1. Clasificacin taxonmica de los seres humanos.
Dominio Eukarya
Reino

Animalia

Filo

Chordata

Clase

Mammalia

Orden

Primates

Familia

Hominidae

Gnero

Homo

Especie

Homo sapiens

Las claves dicotmicas ayudan en la identificacin de los diferentes grupos taxonmico. La

clave es una herramienta que funciona con base en dos opciones excluyentes entre s. Las dos
opciones numeradas con el nmero 1 se contraponen entre s y lo mismo sucede con los
nmeros siguientes. A la hora de tratar de identificar una especie se debe tomar la opcin que
mejor la describa, siguiendo el orden de los nmeros debajo de la opcin escogida hasta llegar
a la especie en particular.

54

stas claves dicotmicas resultan muy tiles cuando se quiere reconocer cualquier tipo de
organismos, ya que muchas veces no se tiene la suficiente experiencia o no existe un registro
fotogrfico amplio para poder hacer las identificaciones.
En las plantas por ejemplo, se puede utilizar caractersticas como la forma foliar, el tipo de
flores, hojas, frutos, los olores y las texturas para clasificar las plantas a nivel de familia, gnero
o especie.

Figura 1. Partes de una hoja. Cuando el peciolo est ausente, se llama sentada

MATERIALES
15 plantas por grupo
Clave dicotmica de plantas comunes del valle central
Cinta adhesiva
Lpiz

Borrador
Marcadores permanentes

PROCEDIMIENTO
I. Crear una clave dicotmica
1. Para esta prctica se trabajara en grupos de 4 personas.
2. Los alumnos saldrn y recolectarn 15 plantas, a cada una de ellas se le asignar un nmero
del 1 al 15.
3. Luego se tratarn de separar las plantas de su coleccin creando una clave dicotmica. La
misma debe de estar bien realizada, de manera que otro grupo de la clase pueda identificar
todas las plantas del aula.
4. Para realizar la clave puede usar caractersticas como los tipos de hojas que se indica en la
figura #2
II. Identificacin de organismos.
Ahora trate de identificar las plantas que colect haciendo uso de la clave dicotmica que se
entregar a cada grupo.

55

III. Dibuje
Dibuje la forma de las plantas que identific y colqueles el respectivo nombre cientfico.

Nombre de la planta:

Nombre de la planta:

Nombre de la planta:

Nombre de la planta:

Figura 2. Tipos de hojas compuestas: (1)

paripinada, (2) bicompuesta paripinada, (3)
imparipinada, (4)imparipinada bicompuesta, (5)
imparipinada bicompuesta (Acha et al 1999)

Figura 3. Tipos de bases foliares: (1)

redondeada (2) obtusa, (3) aguda, (4)
cuneada, (5) atenuada, (6) truncada, (7)
cordada, (8) sagitada, (9) hastada,
(10)auriculada, (11) abrazadora. (Acha et al
1999)

56

Figura 5. Forma de hojas: (1) acicular, (2) lineal, (3) lanceolada (4) oblanceolada
espatulada, (6) oblonga, (7) elptica, (8) ovalada, (9) ovada (10) obovada, (11) orbicular,
peltada, (13) acorozanada, (14) obcordada, (15) romboidal, (16) reniforme, (17) sagitada,
deltoide, (19) obdeltoide, (20) hastada, (21)cueniforme, (22) perfoliada, (23) pandurada,
decurrente, (25) falcada, (26) ensiforme. (Acha et al 1999

Figura 4. Tipos de pices foliares: (1)

redondeado (2) obtuso, (3) agudo, (4) atenuado,
(5) truncado, (6) emarginado, (7) retuso, (8)
cuspidado, (9) mucronado, (10) acuminado, (11)
espinoso, (12) aristado, (13) caudado (Acha et al
1999)

(5)
(12)
(18)
(24)

Figura 6. Tipos de mrgenes foliares: (1)

enteras (pueden ser dentadas) (2)
palamatilobuladas, (3) pinatilobuladas, (4)
palmatihendidas, (5) pinatihendidas, (6)
palmatfidas, (7) pinatfidas, (8)
palmatipartidas, (9) pinatipartidas, (10)
palmatisectas, (11) pinatisectas, (12)
runcidas, (13) laciniadas, (14) liradas (Acha
et al 1999)

57

Prctica 11: CLCULO DE BIODIVERSIDAD UTILIZANDO

INSECTOS
OBJETIVOS
1- Aprender el uso de ndices de diversidad.
2- Conocer tcnicas para atraer insectos.
3- Reconocer los principales rdenes de insectos.

FUNDAMENTO TERICO
La diversidad biolgica o biodiversidad es la variedad de organismos y de ecosistemas en qu
estos viven, incluye el nmero de especies distintas (diversidad de especies), variedad gentica
(diversidad gentica) y la diversidad de interacciones dentro de los ecosistemas y entre ellos
(diversidad de ecosistemas).
La diversidad de especies es la forma ms prctica en que se puede conocer un ecosistema y
esta se puede estudiar de dos formas: Riqueza de especies (es nicamente el nmero de
especies en un sitio delimitado) y equidad de especies (es el nmero de especies en un sitio
incluyendo el nmero de individuos de cada especie). Algunos de los ndices de equidad ms
utilizados son el ndice de Shannon y el ndice de Simpson.
Los insectos son el grupo de organismos ms diverso que hay en el planeta. Se han identificado
ms especies de insectos que todas las dems especies de animales juntos, y es bastante
probable que queden muchsimas ms por identificar. Los insectos se clasifican en diversos
rdenes los cuales se identifican por caractersticas externas como la forma de patas, alas y
piezas bucales.

Ordenes
Thysanura

Nombre comn Caractersticas

Ilustracin
Pececillos
de Pequeos, cuerpo aplanado,
plata
sin alas, cuerpo cubierto con
escamas. 3 cercos caudales

Odonota

Liblulas,
Grandes ojos compuestos,
caballitos
del abdomen largo y delgado, labio
diablo, gallegos
grande y modificado como
rganos prensil.
Cucarachas,
Cuerpo
aplanado
cucarachones
dorsoventralmente,
alas
anteriores coreaceas, escudo
ceflico,
patas
largas
adaptadas para correr

Blattodea

58

Ordenes
Isoptera

Nombre comn
Termitas

Mantodea

Mantis religiosas

Phasmida

Juan palos

Dermaptera

Tijerillas

Orthoptera

Grillos,
Chapulines,
langostas,
saltamontes
Chinches,
cigarras,

Hemiptera

Caractersticas
Ilustracin
Pequeos, cuerpo blando, 2
pares de alas de igual tamao,
largas y membranosas
Primer par de patas grande y
raptor, cabeza muy mvil, con
grandes ojos, alas anteriores
gruesas,
posteriores
membranosas
Cuerpo
cilndrico,
largo.
Mimetizan su entorno,
Cercos posteriores muy duros
y en forma de tenaza,
Patas posteriores grandes y
adaptadas para el salto,

Piezas bucales picadoras

suctoras formando un pico
articulado
Coleoptera
Escarabajos,
Orden
ms
diverso
de
lucirnagas,
insectos, cuerpo muy duro,
primer
par
de
alas
esclerotizadas (litros),
Diptera
Moscas,
Solo un par de alas, el
zancudos,
segundo modificado en una
tbanos
estructura en forma de clavo
(halterios) que sirve para el
balance, grandes ojos, cabeza
mvil.
Lepidoptera
Mariposas,
Grandes
piezas
bucales,
polillas
suctoras,
con
muchas
escamas,
Hymenoptera Abejas, avispas, Dos
pares
de
alas
hormigas
membranosas, las posteriores
ms pequeas, hembras con
ovopositor
generalmente
modificado en aguijn.

Figura 1. Algunos de los rdenes ms conocidos de insectos. Con sus caractersticas ms

distintivas. Ilustraciones de Sols (1994)

MATERIALES
Una pala

Un balde
59

Carnada para insectos (frutas, miel, carne)

Tarros de vidrio con tapa hermtica

Alcohol de 70 (no azul)

Pinzas

PROCEDIMIENTO
1. Los alumnos debern de llevar a cabo este procedimiento antes de la clase, y se realizar en
grupos de 4 o 5 personas.
2. Cada grupo har en un patio o lote vaco una trampa de insecto tipo pit fall (ver figura 1),
elegirn alguno de los dos tipos de carnada, y dejar la trampa 3 das, sin embargo cada da
la irn a revisar y colectarn los insectos en los tarros con alcohol.
3. Se traern los insectos a clases y se separarn en los diferentes rdenes.
4. Con esto se realizar un ndice de diversidad de Shannon (figura 2) y se determinar la
equidad (fig. 3).
5. Poner un grfico con los insectos encontrados y el resultado del ndice de diversidad.

Figura 1. Ejemplo de trampa pitfall

( )

Figura 2. ndice de Shannon-Wiener.

Valor entre 0 y 1 (1= ms diverso)

Figura 3. Frmula para determinar la equidad.

60

GIRA BIOLOGA GENERAL

Sitio de visita:
_________________________________
Fecha y hora de salida:
_________________________________

OBJETIVOS:
- Estudiar la diversidad de animales.
- Estudiar las caractersticas adaptativas
de los organismos para sobrevivir en
el ambiente boscoso
- Conocer las caractersticas principales
de este tipo de bosque
- Hacer una lista de las especies
observadas.
Que llevar:
Obligatorio:
- Botas de hule
- Capa impermeable o poncho
- Impermeable
- Pantaln largo
Sugerido:
- Cmara fotogrfica
- Bloqueador solar
- Gorra
- Binoculares
- Pantaln que no sea de mezclilla
- Un juego de ropa extra en caso de
lluvia
- Botella de agua para la caminata.
- Almuerzo y alimentacin: depende del
sitio de la visita

comportamiento adecuado en cada

momento, cualquier tipo de desacato,
impuntualidad o falta, se penalizar de
acuerdo al reglamento estudiantil.
- Es importante desde el momento que
empieza la gira, empezar a tomar
apuntes para realizar un informe, el
cual contar como Tarea #2.
- El informe debe de ser presentado una
semana despus de la gira
- El informe puede ser escrito en forma
de ensayo, se puede agregar
informacin extra de pginas web,
libros y/o revistas cientficas.
- Se hacen los informes en forma
individual, y todos deben ser
diferentes, porque a pesar de que el
gua da la misma informacin a todos,
cada
uno
hace
diferentes
observaciones en el campo.

FORMATO DEL INFORME

Introduccin: Se habla del sitio, su ubicacin
geogrfica, la categora de manejo y tipo de
ecosistema que se visitar.
Desarrollo: Se habla de la informacin
recibida por el gua y profesor, se anotan las
especies observadas as como abundancia
y comportamiento de las mismas. Se
pueden anotar datos extra de historia
natural
Conclusin: Se menciona los principales
puntos que se aprendieron en la gira, se
menciona su percepcin personal de la gira
y sugerencias para prximas giras
Para las citas bibliogrficas seguir el mismo
formato indicado en este folleto.

Importante:
- Las giras se consideran clases, por lo
que
es
necesario
tener
un

61

BIBLIOGRAFA
Ach, D., Fortrbel, F. y Zambrana, I. (1999). Introduccin a la botnica. Bolivia: Ed. La Paz.
Bolivia.
Audesirk, T., Audesirk, G. y Byers, B.E. (2008). Biologa. La vida en la Tierra. (8 ed.) Mxico:
Prentice Hall.
Becker, W.M., Kleinsmith, L.J y Hardin, J. (2007). El mundo de la clula. (6 ed.) Madrid:
Addison Wesley.
Begon, M. J., Harper, L. & Townsend, C. R. (1999). Ecology. (3th ed.) USA: Blackwell
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Brusca, R. C y Brusca, G. J. (2005). Invertebrados. (2 ed.) Espaa: McGraw Hill
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Everest. (Ed.). (1998). Diccionario de Botnica. Ciudad: autor.
Klug, W.S., Cummings, M.R, y Spencer, C.A. (2006). Conceptos de Gentica. (8 ed.) Madrid:
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Stern, K. R., Bidlack, J. E. & Jansky, S.H. (2008). Introductory plant biology. (11 ed.) USA:
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http://www.unicartagena.edu.co/librose/TABLA%20DE%20CONTENIDO.pdf

62