Corteza cerebelosa

INTRODUCCIN El cerebelo es un rgano impar y medio, perteneciente al SNC, descubierto por Herfilo en el siglo IV a.c. y alojado en la cavidad craneana, ms concretamente en la fosa posterior. A la simple inspeccin macroscpica lo podemos dividir en vermis y hemisferios. Utilizando la sistematizacin de Larsell (17) podemos describir el lbulo floculonodular o arqueocerebelo, que est relacionado con el vestibular y tiene como ncleo al ncleo del techo, Lbulo anterior o paleocerebelo, que recibe a los espinocerebelosos, gobierna el tono postural y tiene como ncleo al globoso y emboliforme; lbulo posterior o neocerebelo que gobierna la motilidad voluntaria, recibe aferencias del cerebro y tiene como ncleo al dentado. Por lo tanto, el cerebelo es un rgano que se ocupa del ajuste y coordinacin de la musculatura estriada, tanto en sus funciones automticas (postura, etc.) como voluntarias, se puede tocar el piano gracias al cerebelo. El patrn histolgico de la corteza, es bsicamente igual en todas las reas, y se puede considerar que es la suma de multitud de unidades histofuncionales conocidas como laminillas. CONCEPTO DE LAMINILLA CEREBELOSA Si se efecta un corte sagital del cerebelo, se observa que la sustancia blanca se arboriza (es el rbol de la vida de Herfilo). Las ltimas arborizaciones estn cubiertas de sustancia gris formando las circunvoluciones y surcos que se ven en la superficie externa, si observamos al microscopio estas estructuras, notamos que cada tallo de sustancia blanca se arboriza an ms, de forma que cada circunvolucin est integrada por microcircunvoluciones invisibles al ojo (fig.1). Estas microcircunvoluciones son las laminillas cerebelosas que se pueden definir como formadas por un eje de sustancia blanca (que en realidad es una lmina) recubierto por una banda de sustancia gris. Estas laminillas, al igual que las circunvoluciones presentan dos ejes, y ante un corte sagital del cerebelo, al ms largo, que se dispone perpendicular al plano del corte, se le denomina eje longitudinal y al ms corto, que se sita dentro del plano del corte, transversal. ESTRUCTURA DE LA LAMINILLA CEREBELOSA Nos encontramos ante una estructura que presenta un eje de sustancia blanca central rodeado por la sustancia gris perifrica que se denomina corteza y que acaba en la superficie del rgano revestido por las meninges. En la corteza podemos diferenciar dos capas de morfologa muy diferente, que desde la sustancia blanca hasta las meninges son la capa granulosa, granular o de los granos y la capa molecular o plexiforme. En la inmensa mayora de los tratados se describen tres capas en la corteza cerebelosa: granulosa, de las clulas de Purkinje y molecular, aunque nosotros solamente consideramos la existencia de la primera y la ltima, puesto que los somas de las clulas de Purkinje, como veremos ms adelante no forman capa continua y la clula est ocupando todo el espesor de la corteza. Efectivamente observamos, a partir de la sustancia blanca una capa, la granulosa, que nos llama la atencin por estar ocupada por innumerables somas redondos de clulas pequeas, cuyos ncleos presentan cromatina relativamente densa, lo que les confiere un aspecto linfocitoide. Por encima de la anterior y hasta la superficie del rgano, se sita una banda con pocos somas, la capa plexiforme, que presenta caracteres tintoriales eosinfilos (en cortes teidos con H-E) y que posee pocas neuronas que se disponen salpicados en el espesor de la capa. Con fines expositivos y aunque luego describiremos cada tipo celular en detalle, las variedades neuronales de cada capa son las siguientes: CAPA GRANULAR: -Clulas de Golgi. -Clulas de Lugaro. -Clula monodendrtica o monopolar en penacho. -Granos.

CAPA MOLECULAR: -Clulas en cesta.

-Clulas estrelladas.

En el lmite entre las dos capas, llama la atencin la disposicin de los somas de unas neuronas grandes, las clulas de Purkinje, que se sitan alineados y algo separados entre s y que ocasionaron que la mayora de los tratados lo consideren una capa individualizada. Estas clulas son posiblemente las ms importantes de la corteza y sus axones, como luego veremos constituyen la nica va eferente de la misma (fig. 3). CLULA DE PURKINJE. SOMA: Las clulas de Purkinje, fueron descritas en 1837 en Praga por Juan Evangelista Purkinje, gracias a que fue el primero que pudo lograr cortes histolgicos de los centros nerviosos. Estas clulas, que son ms abundantes en la convexidad de la laminilla que en la profundidad del surco, sitan sus somas con una disposicin geomtrica en rombos de aproximadamente 50 m. de lado. Tienen un soma grande (40-100 m.), piriforme, algo aplastado en el eje longitudinal de la laminilla y presentan un gran ncleo central, esfrico y de cromatina laxa en el que se muestra un nucleolo muy patente. Su citoplasma es rico en grumos de Nissl que a veces se disponen en paquetes perinucleares, neurofibrillas que forman una red que penetra en el espesor de las dendritas, un diplosoma y un complejo de Golgi bien desarrollado. (figs. 3, 4 y 5). La M.E. confirma en lo bsico esta descripcin. El ncleo es esfrico, a veces escotado y cromatina difusa con un nucleolo prominente. En el citoplasma se observan mitocondrias, un complejo de Golgi muy desarrollado y gran cantidad de R.E.R. dispuesto en paquetes, ya que son clulas con un gran rbol dendrtico y mucho recambio protico y de membrana. Tambin observamos en su citoplasma lisosomas que aumentan con la edad, neurotbulos y neurofilamentos no tan abundantes como sugiere la M.O., abundante R.E.L. y cisternas hipolemnales que si bien no son especficas de esta clula, pues son habituales en todas las neuronas grandes, son tan abundantes que se podran considerar un dato patonogmnico y que tambin se encuentran en los grandes troncos dendrticos. Con mucha frecuencia se observa una mitocondria en relacin con estas cisternas hipolemnales y su significacin funcional no est clara pero se ha asociado con el recambio de membranas y con la captacin de sustancias externas hacia el citoplasma neuronal. (figs. 6, 7 y 8). Recientemente se han efectuado estudios inmunohistoqumicos de las neuronas de la corteza (Hawkes y Leclerc, 1989 (10); Sahin y Hockfield, 1990 (34);Yan y Garey, 1996 (39), etc.) y se demuestra que las clulas de Purkinje son positivas a los anticuerpos anti-calbindina, y mabQ113. DENDRITAS: El rbol dendrtico se encuentra en su totalidad incluido en la capa molecular, Nace de uno o dos gruesos troncos principales que arrancan de la zona superior del soma y se arborizan en el plano transversal de la laminilla, de forma que su ramificacin solo se observa en cortes transversales, mientras que en los longitudinales no se aprecia ms que una lnea ascendente que casi alcanza la superficie del rgano. Por lo tanto, el campo anatmico que cubre el ramaje dendrtico es muy amplio en el plano parasagital pero muy estrecho en el longitudinal. En otras palabras, las clulas de Purkinje dejan abundantes reas sin cubrir. (figs. 3, 5, 9 y 15). Estas dendritas se dividen en ramas cuyo dimetro va disminuyendo progresivamente y forman las ramas dendrticas secundarias y terciarias. De estas ltimas surgen, a su vez, lo que Cajal denomin ramos terminales, que son ms cortos, se dividen solo una o dos veces y son de calibre constante. Sin embargo el dato ms llamativo de estos ramos terminales es que su superficie est repleta de espinas sinpticas lo que les confiere un aspecto como de alambre de espinos.

Las dendritas principales contienen gran cantidad de neurotbulos, todos dispuestos de forma paralela y longitudinal y condicionando la disposicin de las restantes estructuras, de las cuales las mitocondrias, que se suelen disponer perifricamente, son lineales, el complejo de Golgi suele ser axial y longitudinal, as como el R.E.L. que es muy abundante. El R.E.R. es escaso como ya demostr Cajal y son abundantes las cisternas hipolemnales en las que es frecuente su disposicin en pilas de monedas. En las espinas, por el contrario no se encuentran mitocondrias ni neurotbulos y solo contienen algunas cisternas de R.E.L.. Estas espinas se han estudiado exhaustivamente porque, como ya postul Cajal, representan estructuras postsinpticas. Habitualmente son formaciones en tachuela, con un pedculo de 15-2 y una cabeza de 05 m. de dimetro donde recibe la aferencia. Puesto que esta estructura es perfectamente demostrable con el mtodo de Golgi, se ha intentado hacer anlisis cuantitativos para conocer el nmero de aferencias que a traves de las espinas recibe la clula de Purkinje. El resultado de estos contajes varan, ya que con el mtodo de golgi solo se observan las espinas que se sitan de perfil, es decir, aproximadamente la mitad o un tercio del total de las existentes. Considerando este factor de correccin, se calcula que cada clula de Purkinje en la rata posee de 30.000 a 60.000 espinas, lo que es coincidente con los contajes de Fox (8) en el mono y de Palkovits (28) en el gato y discrepante con resultados de otros autores, aunque en cualquier caso sirven para dar una idea de la tremenda cantidad de aferencias que reciben las clulas de Purkinje. En los troncos dendrticos principales y secundarios, existen unos abultamientos sin tallo, mayores y ms groseros que las espinas, y que tambin sern localizaciones para recibir contactos sinpticos. AXN: El axn de las clulas de Purkinje es un elemento de gran importancia para la comprensin de la corteza cerebelosa, ya que es la nica va por la que se canalizan las eferencias. El axn surge del soma, en situacin contrapuesta a las dendritas, o bien ms raramente de uno de los troncos dendrticos principales, dirigindose mediante un trayecto ligeramente arqueado a la sustancia blanca. A diferencia de otras neuronas no existe un cono axnico definido, de manera que, como ya dijo Cajal (4), el nico dato diferencial es la convergencia de las neurofibrillas. Su segmento inicial mide 1-2 m. de dimetro por 1520 de longitud, de forma que se extiende por la parte superior de la capa de los granos, es amielnico y no da colaterales. Su lmite est sealado por un adelgazamiento brusco, durante el cual se hace casi imperceptible (02-04 m. de dimetro), volviendo luego a engrosarse y mielinizarse; una vez que ha adquirido la envoltura mielnica atraviesa la capa de los granos e ingresa en la sustancia blanca, terminando en los ncleos grises del cerebelo. Antes de abandonar la capa de los granos y una vez mielinizado, da una colateral recurrente descrita por Cajal, a partir de la cual van a formarse varios importantes sistemas de asociacin. Esta colateral, cerca de su origen, da una rama que forma un plexo relativamente poco extenso en la capa granulosa, como ya describiera Lugaro y posteriormente comprobaron Fox (8) y Palay (27). Una vez que ha surgido esta rama, la colateral sigue un trayecto ascendente recubierta por su vaina de mielina y se resuelve a la altura de los somas de las clulas de Purkinje en dos plexos, uno situado por debajo (infraganglinico) y otro por encima (supraganglinico) que terminan sobre distintos somas neuronales, entre los que se encuentran los de otras clulas de Purkinje. En cuanto a la porcin axnica que ingresa en la sustancia blanca, termina en un ncleo cerebeloso formando un teledendrn en tirabuzn que abraza varias de las grandes neuronas ganglionares. El anlisis E.M. de estas terminaciones ha revelado que se trata de contactos axo-somticos y axo-dendrticos muy extensos y al igual que los de las colaterales, de tipo II de Gray y con vesculas planas, lo que est en correspondencia con su carcter inhibidor. Sin embargo, este carcter inhibitorio es sorprendente, pues si resulta que la nica aferencia de la corteza cerebelosa tiende a inhibir, ha de admitirse que las neuronas nucleares reciben influencias activadoras de otro origen.

CAPA DE LOS GRANOS. Como ya comentbamos ms arriba, esta capa nos llama la atencin por estar ocupada por innumerables somas redondos de clulas pequeas (granos del cerebelo), cuyos ncleos presentan cromatina relativamente densa, lo que les confiere un aspecto linfocitoide. y en la que de trecho en trecho llaman la atencin unos pequeos espacios acelulares eosinfilos a los que Cajal denomin Islotes protoplsmicos (fig. 14) y en los que Held demostr neurosomas (mitocondrias), los cuales tendrn una significacin funcional muy importante. Esta capa se extiende hasta aproximadamente la mitad de la corteza, teniendo unos 500 m. de espesor en la convexidad y unos 100 m. en el surco. Como ya hemos apuntado ms arriba es la ms celular y se calcula que contiene de 3 a 7 millones de neuronas por mm3. El elemento celular predominante es el grano del cerebelo. Junto a ellas existen otros elementos ms grandes conocidos como clulas estrelladas grandes y que constituyen un tipo celular alrededor del cual existe un notable confusionismo terminolgico. (figs. 1 y 3). GRANOS. Son abundantsimos y el elemento ms caracterstico de esta capa, calculndose que la relacin clulas de Purkinje/granos es de 1/1769 (29) en el gato. Su soma es esfrico y pequeo (entre 5 y 8 m. de dimetro), no presentan grumos de Nissl y su ncleo, ocupa la mayor parte del citoplasma y presenta cromatina densa, lo que provoca una gran cromofilia. Estas dos caractersticas prestan a la clula un aspecto linfocitoide. De hecho en 1900 todava se dudaba que no fueran linfocitos. Los somas estn muy juntos unos a otros y pese a que no estn revestidos por gla no presentan contactos sinpticos. El ncleo es ligeramente irregular, con heterocromatina en bloques y en el citoplasma se observan algunas mitocondrias, un pequeo complejo de Golgi, polisomas y un diplosoma ya descrito por del Ro Hortega. (fig. 10, 11 y 12). Las dendritas son 4 o 6 que nacen del soma y tras un trayecto muy corto, algo flexuoso y sin ramificarse, terminan en una pequea arborizacin que recuerda a una garra y que fue comparada por Rouget a una placa motora. Estas terminaciones dendrticas confluyen en los islotes protoplsmicos, donde van a intervenir en una sinapsis mltiple que ya estudiaremos. Su superficie es lisa, no presentan contactos sinpticos ms que en la garra y mantienen un dimetro constante en todo su recorrido. Su ultraestructura presenta neurotbulos y neurofilamentos. Desde el punto de vista inmunohistoqumico, los granos son positivos a la anti-calretinina con cuya tcnica, segn Yan y Garey (39) aparecen agrupados en asociaciones de aproximadamente seis unidades. (fig. 10). El axn nace habitualmente del soma o, en raras ocasiones de la dendrita ms alta, y asciende ms o menos curvadamente hasta la capa molecular. Este trayecto ascendente es al principio liso, pero luego se torna varicoso (fig. 10). Al llegar a la capa molecular, el axn se divide en T, dando dos ramas contrapuestas que avanzan en sentido longitudinal y que constituyen las fibras paralelas (F.P.) de Cajal. Estas fibras estn orientadas en el eje longitudinal de la laminilla, de manera que para verlas en toda su longitud hemos de utilizar cortes tambin longitudinales, en los que veremos el perfil del ramaje dendrtico de las clulas de Purkinje, imagen que fue comparada por Cajal a un tendido telefnico. Esto significa que las F.P. atraviesan perpendicularmente el plano del rbol dendrtico de las clulas de Purkinje. Habitualmente existe una relacin entre la situacin de la fibra paralela, su grosor y su soma, de suerte que los granos ms profundos son los que poseen el axn ms grueso y dan origen a las F.P. ms profundas. En el curso de su trayecto, las FP hacen abundantsimas sinapsis en passant con todos los tipos celulares de la capa molecular, pero especialmente con las clulas de Purkinje y ms concretamente con las espinas dendrticas que son diferenciaciones especficas para las F.P.. Estas sinapsis contienen vesculas esfricas y conformacin tipo I de Gray, lo que se corresponde con su carcter activador. Generalmente, el ensanchamiento de la F.P. envuelve a la cabeza de la espina, pero el disco sinptico es mucho ms pequeo, comprendiendo solamente un 15-20% del total de la superficie. No es infrecuente observar que sobre una espina se producen sinapsis de dos F.P..

Las fibras paralelas fueron consideradas por Cajal como el prototipo de las conexiones cruciformes de alto poder generador pues, segn l recorreran la laminilla de punta a punta, haciendo sinapsis con todas las clulas de Purkinje. Sin embargo, los datos cuantitativos conocidos invalidan la suposicin, ya que una C.P. no posee suficientes espinas para recibir contactos sinpticos de todas las F.P. que atraviesan su campo dendrtico. El problema a sido revisado por Fox (8), quien demostr que las F.P. no recorren la totalidad de la laminilla sino solo una longitud de 2-3 mm. y atraviesan los campos dendrticos de 230-460 C.P., lo que concuerda con datos electrofisiolgicos. A su vez, en este trayecto, tampoco conectan con todas las CP puesto que en el campo anatmico de una C.P., que contiene aproximadamente 60.000 espinas, pueden contarse hasta 200-300.000 FP. Puesto que est claro que las nicas sinapsis F.P.-C.P. se establecen sobre las espinas, se deduce que solo unas cuantas fibras contactan con la C.P. En resumen, aunque las F.P. atraviesan los campos dendrticos de 230-460 C.P., solo sinaptan con una de cada cinco y cada F.P. contacta con 46-92 C.P. Esto tiene su importancia para la comprensin de la arquitectura funcional. GRANDES CLULAS ESTRELLADAS. Las grandes clulas estrelladas son un elemento sobre el que existe una gran confusin terminolgica, que ha sido revisado muy profundamente con M.O. por Cajal (4) y a la luz de ms recientes aportaciones por Mugnaini (1974) (21). En la siguiente exposicin intentaremos aclarar y simplificar conceptos en la medida de lo posible, atendiendo solamente a aquellos datos con coherencia morfofuncional. Para ello, consideraremos, de momento, como grandes estrelladas a toda neurona distinta a los granos y ubicada en esta capa. Con este criterio, podemos distinguir de momento las siguientes variedades: a) Clulas de soma grande, dendritas rectilneas dirigidas a la molecular y axn corto y muy ramificado en la capa de los granos. A estas clulas que tienen un significado funcional importante las llamaremos clulas de Golgi. b) Elementos idnticos a los anteriores pero en situacin ectpica (capa molecular o sustancia blanca), denominadas por Cajal clulas desplazadas. Este tipo es idntico al anterior, pero se trata de elementos aberrantes y por tanto muy infrecuentes y con escasa significacin funcional. c) Clulas de soma fusiforme grande y dendritas opositopolares rectilneas o en abanico, que se extienden inmediatamente por debajo de los somas de las clulas de Purkinje. Este tipo fue denominado por Cajal grandes estrelladas fusiformes, ahora conocidas como clulas de Lugaro en atencin a la descripcin minuciosa que este autor hizo de ellas. d) Clulas de soma grande, con dendritas como las clulas de Lugaro o de Golgi, pero cuyo axn se dirige a la sustancia blanca. Se trata tambin de elementos aberrantes, bien pertenecientes a los ncleos grises (Cajal) o bien clulas de Purkinje aberrantes (Estable, Eccles, Ito, Szentagothai). Son elementos de escasa significacin que no estudiaremos. De todo lo anterior podemos concluir que dentro de lo que Cajal design como grandes estrelladas, hay dos tipos de valor funcional e histolgico definido, las clulas de Golgi y las de Lugaro. CLULAS DE GOLGI: Son elementos que tienen el soma estrellado y estn situados a todas las alturas en la capa de los granos. Contienen grumos de Nissl y abundantes neurofibrillas, as como un complejo de Golgi y R.E.L. casi tan ricos como en las C.P.; sin embargo las cisternas hipolemnales son bastante menos frecuentes. El ncleo es a veces escotado, de cromatina laxa y con un nucleolo prominente y que suele ocupar una posicin excntrica. Sobre la superficie del soma pueden encontrarse botones sinpticos pequeos, correspondientes a colaterales de Purkinje y que presentan la misma morfologa descrita para la terminacin principal, con vesculas aplanadas que estructuran sinapsis tipo II de Gray. Sobre el soma se pueden observar otras sinapsis ms grandes que describiremos ms adelante y que corresponden a terminales de fibras extrnsecas al cerebelo. Desde un punto de vista inmunohistoqumico, segn Sahin y Hockfield (34), estas clulas son positivas al anticuerpo Rat-303 en el gato, mientras que Ngyessy y cols., 1997(26), observan su positividad para el mGluR5.

Las dendritas nacen de 4-5 gruesos troncos principales y despus de un breve trayecto horizontal o descendente se dicotomizan e incurvan para alcanzar la capa molecular. Son expansiones casi rectilneas, poco ramificadas y casi sin varicosidades, aunque en su trayecto por la capa de los granos, presentan unas excrecencias groseras que les prestan un aspecto villoso (21). No se trata de espinas, sino simplemente de irregularidades del contorno dendrtico, que representan dispositivos postsinpticos para fibras extrnsecas. En los espacios que dejan libres estas excrecencias, se encuentran botones sinpticos pertenecientes a colaterales recurrentes de Purkinje similares a los que encontrbamos en el soma y sinapsis en passant formadas por el segmento ascendente de los axones de los granos con contactos tipo I de vesculas redondas en la presinapsis. La ultraestructura de las dendritas es similar a la del soma, aunque los organoides van disminuyendo a medida que nos alejamos y en la capa molecular solo contienen haces de neurotbulos y algo de R.E.L.. Tambin a este nivel pueden verse abundantes contactos sinpticos de las fibras paralelas y de elementos propios de la capa plexiforme. El campo dendrtico de la clula de Golgi est dispuesto, a diferencia del de la clula de Purkinje, en los tres planos espaciales y comprende un amplio territorio; sus dendritas abarcan un rea dentro de la cual se albergan 16-25 clulas de Purkinje, sin que exista apenas superposicin de los campos. El axn de estas clulas es su elemento ms caracterstico. Nace del soma o de uno de los troncos dendrticos principales y presenta un segmento inicial muy breve (4-5 m.). A partir de este momento, se divide formando un plexo intrincadsimo; tanto que estas clulas son el ejemplo tpico de neuronas de axn corto. Las ramificaciones son siempre en ngulo recto y se extienden por todo el espesor de la capa de los granos subyacente al soma. Las ramas terminales del axn se dirigen y acaban en los islotes protoplsmicos, donde en unin de las dendritas de los granos y de fibras extrnsecas van a modelar una sinapsis compleja. El patrn de arborizacin axnico fue muy bien estudiado por Cajal, quien aisl tres tipos bsicos que luego han resultado tener una correspondencia funcional perfecta. En el primer tipo, el plexo axnico cubrira un campo mas o menos equivalente al de las dendritas; en el segundo tipo, el axn se extendera mucho ms pero sin salir de la laminilla, en tanto que en el tercer tipo, del segmento inicial se originan dos plexos, uno en la propia laminilla y otro en la vecina. CLULAS DE LUGARO: Son elementos grandes, cuyo soma suele encontrarse inmediatamente por debajo de la hilera de somas de Purkinje, existiendo confusin en cuanto a su naturaleza. En 1894, Lugaro describi una clula situada por debajo de las C.P. con dendritas largas y opositopolares y un axn que, tras un corto trayecto, se resolvera en un plexo inmediatamente por encima de los somas de las C.P.. Este tipo de arborizacin axnica no fue encontrado por Cajal, quien s pudo identificar, sin embargo, el soma y dendritas de las clulas descritas por Lugaro, denominandolas clulas fusiformes horizontales. En los trabajos de Cajal, las clulas fusiformes horizontales tendran dos tipos de organizacin axnica: en una de ellas el axn ingresara en la sustancia blanca y en la otra se resolvera dentro de la capa de los granos en un plexo idntico al de las clulas de Golgi. Los resultados de Cajal fueron reinterpretados posteriormente, considerndose que las fusiformes horizontales con axn a la sustancia blanca seran C.P. aberrantes, en tanto que las de axn corto no seran sino clulas de Golgi cuyas dendritas no ascenderan a la capa molecular. Estas consideraciones fueron generalmente admitidas hasta que en 1959 Fox (7) resucit el problema al encontrar en el mono clulas de dendritas opositopolares cuyo axn se ramificaba, exactamente como dijo Lugaro, por encima del soma de las clulas de Purkinje. Posteriormente Palay (27) comprob los resultados de Fox aunque tambin ha encontrado clulas cuyo axn parece ir a la sustancia blanca. Por lo tanto, en el momento actual se puede pensar en que quiz haya varios tipos de estas clulas grandes de dendritas opositopolares, algunas con axn corto y otras con axn largo. En la pasada dcada (1996), Lain y Axelrad (15) vuelven al estudio de este tipo neuronal y lo describen con el rbol dendrtico ya conocido anteriormente, mientras que el axn se bifurca en un amplio plexo

arrosariado que abarca la zona superior de la capa granulosa y la casi totalidad de la molecular, dispuestos en el plano sagital. Por otra parte Sahin y Hockfield (34), ya haban demostrado en 1990 la caracterizacin de estas clulas en el gato al encontrarlas, a diferencia de todas las dems, positivas a los anticuerpos Cat-301 y Cat-304, mientras que Ngyessy y cols., 1997 (26), observan su positividad para el mGluR5 que tambin mostraban las clulas de Golgi. El confusionismo se debe a la extraordinaria dificultad para impregnar el axn, lo que a su vez conlleva que la sinaptologa sea mal conocida, puesto que no es facil identificarlo ni con el M.E. ni con las modernas tcnicas de inmunohistoquimia. Sin embargo interesa destacar que son elementos de presencia constante, cuyas dendritas se extienden en el plano transversal, cubriendo un campo que alberga 1-2 hileras completas de clulas de Purkinje. Esta disposicin es idntica a la de los grandes elementos de asociacin de la VII capa de la retina. Aunque an no se puede asegurar, es posible que juegen un papel modulador y que la dificultad de impregnar su axn pueda ser debida a que se trate de clulas de tipo amacrino, de transmisin bidireccional, que acten directamente sobre los axones de las C.P. que salen a este nivel. En suma, son clulas de momento mal conocidas pero que posiblemente jueguen un papel importante en la elaboracin de la respuesta cerebelosa. CLULAS MONODENDRTICAS EN PENACHO: Recientemente se ha descrito un nuevo tipo celular, cuyo significado funcional no est claro, que se sita en la capa de los granos de la corteza cerebelosa de los mamferos. Se trata de la clula monodendrtica o monopolar en penacho, descubierta por Muz en 1990 (25) y descrita posteriormente por Braak y Braak(3), Mugnaini y Floris (23) y Yan y Garey (39). Presenta un soma esfrico y un solo tronco dendrtico que termina en una corta arborizacin en penacho y parece tratarse de una clula de asociacin. CAPA MOLECULAR Como ya hemos apuntado, esta capa es una banda parvicelular de aproximadamente 300-400 m. de espesor que se extiende entre la hilera de los somas de la clulas de Purkinje y la pamadre. Fundamentalmente est constituida por un plexo muy tupido de axones y dendritas, entre el que se distribuyen como salpicados los somas de los nicos elementos neuronales que residen en ella y que son las clulas estrelladas pequeas, que pueden ser superficiales (clulas estrelladas de la terminologa actual) y profundas (clulas en cesta), situadas estas inmediatamente por encima de los somas de las C.P.. CLULAS EN CESTA: Fueron entrevistas por Golgi y descritas por Cajal (4), quien las denomin pequeas estrelladas profundas, aunque se instaur, por parecer ms oportuno, el nombre de clulas en cesta (Korbzellen) propuesto por Klliker en atencin al modo de terminacin de sus axones. Son elementos cuyo soma est justo por encima de la hilera de somas de Purkinje, presenta morfologa triangular o estrellada y un dimetro promedio de 10-20 m. Tienen un ncleo lobulado y excntrico y su citoplasma posee escasos organoides concentrados en el polo que deja libre el ncleo; los grumos de Nissl son pequeos y escasos, el complejo de Golgi y el R.E.L. son poco prominentes y puede presentar alguna cisterna hipolemnal (fig. 13). Las dendritas, que se ramifican en el plano transversal, pueden ser cortas y descendentes, pero lo habitual es que asciendan hasta el tercio superior de la capa plexiforme. Son relativamente rectilneas y poco dicotomizadas, presentando espinas aunque ms escasas y groseras que las de las C.P.. Contienen abundantes neurotbulos y neurofilamentos, R.E.L. incluso en sus porciones distales, mitocondrias alargadas y algo de R.E.R. y complejo de Golgi en los troncos principales. Sobre el soma y las dendritas de las clulas en cesta terminan importantes aferencias. As son abundantes las sinapsis en passant de las fibras paralelas, las cuales asientan sobre las espinas y son tipo I de Gray con discos sinpticos extensos. Tanto sobre el soma como sobre las dendritas pueden

identificarse otros botones sinpticos, tipo II de Gray que corresponden a axones de otras clulas en cesta y de estrelladas superficiales, as como colaterales del plexo supraganglinico de las C.P. El axn es amielnico, nace del soma como una expansin muy fina que discurre para sagitalmente sobre el campo dendrtico de 1-2 clulas de Purkinje. Esta primera porcin, que presenta caractersticas de segmento inicial, termina bruscamente con un aumento de calibre que ya no variar y a partir del cual comienza a dar colaterales. Estas colaterales, ricas en neurofibrillas y de baja densidad electrnica, siguen un curso en el plano longitudinal, dando ramas ascendentes y descendentes. Las ascendentes, que son generalmente ms cortas, llegan hasta la zona media de la capa molecular y en este camino sinaptan, en estructuras tipo II de gray, con dendritas lisas de las C.P., dendritas de otras clulas en cesta y posiblemente con dendritas de las clulas de Golgi. Las colaterales descendentes, forman un dispositivo en el que hizo Cajal la observacin inicial que le permiti enunciar la teora neuronal. Se trata de una sinapsis compleja en la que las colaterales descendentes abrazan por completo el soma de la clula de Purkinje (fig. 3), confluyendo sus extremos en la base del soma donde forman un pincel que rodea al axn de la clula de Purkinje. El anlisis E.M. ha venido a aadir nuevas peculiaridades de esta singular sinapsis. Los principales estudios fueron efectuados inicialmente por Hamori y Szentopothai(9), siendo posteriormente corregidos por Sotelo (38), Llinas (19), Palay (27), Mugnaini (20), etc. quienes describen el soma completamente rodeado por clulas gliales, por fuera de las cuales se deslizan las ramas descendentes de la cesta, las cuales taladran la envoltura glial y sinaptan con el soma, dirigindose luego al segmento inicial axnico, donde conforman el pinceaux. En este lugar existe una tremenda convergencia, observndose multitud de axones preterminales dispuestos de forma concntrica alrededor del delgado segmento inicial axnico de la C.P.. Entre estos axones se forman uniones comunicantes, pero curiosamente, las sinapsis qumicas sobre el propio segmento inicial son muy escasas y segn opinin de Mugnaini, en todo el pinceaux solo se forman 1-2 sinapsis sobre el segmento inicial. En el resto de su trayecto, este aparece en aposicin con los axones del pinceaux, existiendo entre ambas estructuras un espacio intercelular bien definido, no identificndose ningn tipo de diferenciaciones de membrana. En cuanto a la disposicin geomtrica del campo axnico de las clulas en cesta hay que apuntar que, al contrario que en otras clulas del cerebelo, existe una notable superposicin en los campos axnicos de las cestas. Segn distintos clculos cada clula en cesta acta a travs de sus colaterales axnicas descendentes sobre un nmero determinado de C.P. (216 en el mono, Fox (8), 60 en el gato, Palkovits (30)), que adems no estn repartidas de manera anrquica sino siguiendo un patrn ms o menos rectangular (1220 en el mono, 610 en el gato, 33 en la rata). Estos campos rectangulares estn muy superpuestos, de forma que en una clula de Purkinje intervienen colaterales de distintas clulas en cesta. CLULAS ESTRELLADAS: Se trata de clulas entrevistas por Fusari y luego estudiadas a fondo por Cajal, que las clasifica en dos grandes clases, de axn corto y de axn largo, aunque esta clasificacin fue posteriormente criticada, ms utilizando criterios histofuncionales que morfolgicos. Son neuronas de soma pequeo (5-8 m.), poligonal o estrellado, que alberga un ncleo de cromatina laxa y un citoplasma con pocos organoides. Las dendritas, que se ramifican en el plano transversal, parten de cinco o seis troncos dendrticos principales y generan un plexo circunscrito de ramas varicosas, provistas de espinas. Este plexo dendrtico, habitualmente comprende solo una parte del campo de 1-2 C.P.. Sobre soma y dendritas se producen sinapsis en passant tipo I formadas por las fibras paralelas y sinapsis tipo II correspondientes a axones de otras estrelladas y colaterales ascendentes de los axones de clulas en cesta. El axn surge de un cono axnico bien definido y despus de un segmento inicial de 5-6 m. de longitud, se resuelve en un plexo circunscrito, aunque desplazado del soma y orientado verticalmente, extendindose por los campos dendrticos de las 4-8 clulas de Purkinje circundantes. Las colaterales axnicas acaban formando contactos tipo II con las dendritas y somas de las C.P., existiendo

tambin contactos del mismo tipo con las dendritas de otras estrelladas, clulas en cesta y clulas de golgi. Adems existen otras, ms grandes que las anteriores, presentando su soma una estructura idntica al de las clulas en cesta, del que parten 5-6 expansiones que se dirigen de forma rectilnea hacia la zona ms superficial de la capa plexiforme, presentando algunas bifurcaciones y espinas groseras como las de las clulas en cesta. El axn, despus de un segmento inicial de 9-10 m. de longitud, se engruesa y corre en el plano parasagital, dando colaterales transversales de las que a su vez, emergen ramas ascendentes y descendentes. Las ascendentes hacen sinapsis tipo II con dendritas de las cestas, estrelladas y Golgi y ms frecuentemente con dendritas de las clulas de Purkinje. Las colaterales descendentes de las ms profundas pueden participar en la formacin de la cesta, aunque no est claro si llegan a formar parte del pinceaux. Salvo este detalle, estas clulas son idnticas a clulas en cesta desplazadas y as las consider Cajal (4) y Palkovits (29), aunque ms recientemente Palay (27) critic esta consideracin. Posiblemente sean clulas diferentes a cestas desplazadas, pero esta diferencia es en base a su posible significacin fisiolgica ms que a su morfologa, pues como el mismo Palay confiesa, solo en algunos casos son diferentes de las clulas en cesta. FIBRAS EXTRNSECAS. Sabemos que las eferencias la corteza son los axones de las clulas de Purkinje, pero nos resta conocer de donde se nutre toda la circuitera de la corteza, es decir las aferencias. Existen dos tipos de fibras aferentes que llegan a la corteza cerebelosa: Las fibras musgosas y las fibras trepadoras. Ambas ingresan en la corteza desde la sustancia blanca y van a conectar con elementos neuronales de la misma. FIBRAS MUSGOSAS: Son gruesas fibras mielnicas que penetran en el cerebelo por cualquiera de los pednculos y que despus de dividirse profusamente en la sustancia blanca, dan ramas que terminan en los ncleos grises, formando con las neuronas del ncleo sinapsis que se producen en la terminacin de la fibra, que se indenta en el citoplasma neuronal formando una estructura redondeada parecida a una castaa (de ah la denominacin de sinapsis en marron de los franceses) donde se sita el aparato presinptico de un contacto sinptico tipo I de Gray. Otras ramas abordan la corteza penetrando en la capa de los granos, donde siguen un curso tortuoso, dando multitud de colaterales. Durante su trayecto por la granulosa, las fibras musgosas presentan unos abultamientos nudosos que se dira estn constiutidos por un acmulo irregular de plata precipitada. Estas varicosidades son verdaderas arborizaciones cortas y varicosas que aparecen en ciertos parajes de la fibra a la manera de un musgo o maleza de revestimiento. En numerosas ocasiones, esta arborizacin est sostenida por un tallo corto y delgado que le presta el aspecto de una flor (Cajal, 1888). Estas eflorescencias, que se conocen como rosaceas o rosetas, pueden estar localizadas no solo en el curso de la fibra, sino tambin en su terminacin y en las bifurcaciones y como ya postul Cajal, representan dispositivos de articulacin sinptica que se disponen en aquellas estructuras acidfilas, denominadas islotes protoplasmicos, donde tambin confluan las dendritas de los granos y las terminaciones axnicas de las clulas de Golgi. Estos tres elementos van a constituir una estructura sinptica compleja que se conoce desde Held y fue estudiada ultraestructuralmente por primera vez por Palkovits (29,31), quien confirm las ideas de Cajal, denominada: glomrulo cerebeloso (fig. 14). Las fibras musgosas son gruesas, con abundantes neurotbulos, neurofilamentos y mitocondrias. Presentan una gruesa vaina de mielina, en cuyos nodos de Ranvier residen las eflorescencias descritas por Cajal; en el contorno de estos ensanchamientos irregulares de la fibra se indentan las terminaciones dendrticas de los granos, mientras que el centro de la rosacea suele estar ocupado por neurofilamentos y mitocondrias, bordeando a las cuales aparecen abundantsimas vesculas esfricas configurando la presinapsis que forma multiutd de contactos tipo I con las dendritas de los granos. El tercer elemento del glomrulo son las terminaciones del plexo axnico de las clulas de Golgi. Se trata de expansiones

electroclaras que forman sinapsis tipo II con las dendritas de los granos, en situacin contrapuesta al disco sinptico que forman la fibra musgosa y la dendrita. En el glomrulo no existen contactos sinpticos entre la rosacea y los axones de la clula de Golgi, pese a que en algunos lugares puedan estar anatmicamente prximos. Con M.E. se ha comprobado (31) la observacin previa de Cajal de que existen sinapsis entre las rosaceas y el soma y/o dendritas de las clulas de Golgi. Estas sinapsis con las dendritas poseen numerosos discos sinpticos de gran extensin, no forman glomrulo y la especializacin sinptica se sita solo en la cara que mira a la dendrita. En el caso de los contactos con el soma neuronal, presentan una disposicin en marron con la estructura de la rosacea incluida en una indentacin del soma, lo que les presta una morfologa redondeada. Estas sinapsis son de tipo I y su importancia reside en que al contener multitud de discos sinpticos, su poder activador es muy elevado. FIBRAS TREPADORAS: Son fibras de menor dimetro que las musgosas, descritas por Cajal en 1888, que penetran a travs de los pednculos cerebelosos y tras dar colaterales para todos los ncleos grises, donde contactan con la neuronas del ncleo efectuando sinapsis en marron de tipo I, alcanzan la corteza y se ramifican sobre todo en la capa molecular. Atraviesan la capa granulosa de forma casi rectilnea, con escasas varicosidades y dando nicamente 1-2 colaterales. Al alcanzar el nivel del soma de las clulas de Purkinje, la fibra pierde la mielina y da colaterales ascendentes que trepan, a modo de lianas, por los troncos dendrticos principales de las C.P.. En el curso de este ascenso, dan lugar a abundantes ramas delgadas que, tras un breve y flexuoso trayecto, terminan en un botn. Tanto estos botones como las varicosidades del plexo principal, corresponden a dispositivos sinpticos sobre el rbol dendrtico de las C.P. (fig. 15). Observadas mediante M.E., las fibras trepadoras en su ltimo trayecto son finas y amielnicas, con algunos neurofilamentos, pocas mitocondrias y abundantes sinapsis en passant tipo I con las dendritas de las C.P.. La identificacin elecromicroscpica de los terminales de estas fibras fue obra del espaol Larramendi (16), quien demostr que sinaptan sobre ciertas excrecencias de los troncos dendrticos principales que ya describimos anteriormente. Con este hallazgo se vino a completar la arquitectura sinaptolgica de las clulas de Purkinje. Por otro lado, la identificacin E.M. de las trepadoras con sus botones muy densos y atiborrados de vesculas redondas, ha permitido comprobar, como ya dijera Cajal, la existencia de sinapsis entre estas fibras y las dendritas de las clulas estrelladas y las clulas en cesta. El destino de las colaterales que permanecan en la capa de los granos son las dendritas de las clulas de Golgi y el soma de las mismas, con el que estructuran un aparato sinptico similar al que provocaban las fibras musgosas (27), esto es, una estructura redondeada incluida en la indentacin del soma con mltiples discos sinpticos tipo I. NEUROGLIA DEL CEREBELO En la sustancia blanca existen astrocitos fibrosos y oligodendrocitos sin caractersticas especiales. En la capa de los granos se pueden observar astrocitos protoplsmicos que no aslan todas las neuronas y que parecen formar circulos alrededor de los glomrulos. En la capa molecular se sitan unas clulas gliales denominadas de Bergmann que presentan un cuerpo irregular localizado al lado de los somas de las C.P. y que emiten de una a tres expansiones muy varicosas que atraviesan la capa molecular y se adosan, mediante ensanchamientos que forman la limitante de Cajal, en la piamadre. Existen otras clulas similares a las anteriores cuyos cuerpos celulares se sitan en posiciones ms altas en la capa molecular y cuyas expansiones no alcanzan la piamadre que se denominan clulas de Faans. En realidad, tanto las clulas de Bergmann como las de Faans son variedades de astrocitos protoplsmicos, adaptados a la morfologa en candelabro de la C.P. y que no presentan ninguna peculiaridad ultraestructural (fig. 16), expresando ambas positividad para el anticuerpo de la protena

cida gliofibrilar. Se ha descrito tambin la presencia de oligodendrocitos en la capa molecular pero no en la de los granos. HISTOFISIOLOGA Como hemos visto hasta ahora, el cerebelo es quiz el territorio del S.N.C. que presenta la estructura ms geomtrica y mejor conocida, siendo posible establecer, incluso desde bases puramente morfolgicas, una serie de correlaciones funcionales. Est bien comprobada la existencia de sinapsis musgosas-granos, fibras paralelas-Clulas de Purkinje, fibras paralelas-clulas en cesta, clulas en cesta-clulas de Purkinje, etc., pero, en contra de lo que pensaba Cajal, no todas las sinapsis son activadoras. Debido a que las neuronas de asociacin tienen actividad inhibidora no parece sostenerse la teora de que la misin de estas es la de repartir y ampliar el estmulo a campos ms o menos alejados. Actualmente se sostiene que la misin de las neuronas de asociacin o intercalares, ms que repartir el estmulo por las reas cercanas es precisamente la contraria, impedir la difusin incontrolada de los impulsos En general, se puede describir un circuito principal que penetrara en la corteza mediante las fibras musgosas y que a travs de los contactos con los granos en el glomrulo, modulados o inhibidos por la clula de Golgi, y los de las fibras paralelas con la C.P. conseguira salir de la corteza mediante los axones de las C.P.. A su vez otro circuito que amplificara el anterior gracias a su contacto con las C.P., sera el que penetra en la corteza por las fibras trepadoras. Estos circuitos principales, se ven modulados por las neuronas de asociacin que producen contactos inhibidores, tanto en el glomrulo (clulas de Golgi) como en las dendritas de las C.P. (Clulas estrelladas), en el segmento inicial del axn de la C.P. (Clulas en cesta) o la funcin, de momento ms oscura que puedan tener las clulas de Lugaro o las monodendrticas en ramillete. A su vez, la nica va eferente de la corteza est representada por los axones de las clulas de Purkinje que formarn sinapsis inhibidoras que modulan el contacto activador que se produce entre las fibras musgosas y trepadoras y las neuronas de los ncleos grises del cerebelo (fig. 17).