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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

INSTITUTO DE BIOTECNOLOGÍA
METODOS EN BIOTECNOLOGIA

CROMATOGRAFÍA DE GASES

Biol. Laura Patricia Olguín Pérez Biol. Héctor M. Rodríguez Magadán

8 de Junio de 2004

2 CONTENIDO Antecedentes/Historia Mecanismos de la cromatografía Fundamentos teóricos Nomenclatura Fase móvil Puerto de inyección Horno de la columna Fase estacionaria Soporte Columna cromatográfica Detectores Métodos Análisis cualitativo Métodos de coincidencia Aplicaciones Comida, saborizantes y fragancias Químicos y petróleo Ambientales Médicas y biológicas Industria Otras aplicaciones Aplicaciones prácticas Cromatografía de gases como método principal Innovaciones Páginas web Bibliografía 1 2 2 5 6 6 7 8 9 10 15 20 20 21 31 31 34 35 35 37 38 38 40 41 45 45

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Antecedentes/Historia
La cromatografía es un método físico de separación en el cual los componentes a ser separados son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria mientras la otra se mueve en una dirección definida. Los componentes son separados por sus diferentes tazas de migración (IUPAC). La cromatografía puede ser clasificada por su utilidad y en base al material que se utilice como eluyente para separar los solutos. De acuerdo a su utilidad la cromatografía se clasifica en: analítica, utilizada para determinar los químicos presentes en una mezcla y en que concentración; y preparativa, utilizada para purificar grandes cantidades de químicos. La primera técnica cromatográfica fue ideada por el botánico ruso Mikhail Tswett en 1906, quien utilizó alúmina para separar los pigmentos coloreados de las hojas de las plantas. Tswett en su experimento original, metió dentro de un tubo de vidrio un fino polvo (sacarosa) para producir una columna de una altura deseada. Posteriormente, extrajo los pigmentos de hojas y los colocó en un solvente (éter de petróleo) y agregó un poco de la solución dentro de la columna. Cuando toda la solución había pasado a través de la columna se formó una estrecha zona inicial bajo la capa inicial del adsorbente. Después agregó más solvente y aplicó presión en la parte de arriba de la columna. Mientras el solvente iba pasando a través de la columna, los pigmentos se iban separando individualmente (Fig. 1). La clave del éxito de la columna de Tswett, fue la aplicación de la mezcla dentro de la columna en una zona inicial estrecha y la posterior aplicación del solvente fresco.

Fig. 1. Columna cromatográfica de Tsweet3. Y = amarillo, G = verde

2 En 1931, fue redescubierta por Richard Kuhn al utilizarla para el análisis de polienos. Los primeros en utilizar un gas como fase móvil fueron A. T. James y A. J. Martin en 1952, para separar ácidos grasos cortos. Posteriormente Dabrio, en 1971, la utilizó para separar metilaminas, aminas alifáticas y homólogos de piridina.

Mecanismos de la cromatografía
El movimiento de las substancias durante la cromatografía es el resultado de dos fuerzas oponibles, la fuerza de manejo de la fase móvil y la fuerza resistente o acción de retardo del sorbente. La fuerza de manejo mueve las substancias del origen de la columna en dirección del flujo de la fase móvil. La acción de retardo impide el movimiento de las substancias arrastrándolas del flujo y adhiriéndolas al adsorbente. Las moléculas se encuentran alternando entre estar pegadas al adsorbente o despegadas en el flujo, esto da como consecuencia que pese a que el flujo es constante, solo una fracción de las moléculas se están moviendo. Las substancias que se mueven más lentamente es porque están siendo unidas más fuertemente a la fase estacionaria, mientras que aquellas que se mueven más rápidamente es por que son menos solubles o de poca afinidad. La habilidad de tener una migración diferencial entre los componentes de la mezcla es el resultado de la selectividad del sistema cromatográfico. El flujo de la fase móvil no es selectivo en el sentido de que no afecta el movimiento de los solutos. Como parte del sistema cromatográfico, sin embargo, la fase móvil debe ser un poco selectiva para ayudar a la absorción de los solutos con la fase estacionaria. La fase estacionaria también juega un papel importante dentro del cromatograma debido a su acción resistiva como una fuerza selectiva de la velocidad de flujo de los solutos.

Fundamentos teóricos
Se han propuesto muchas teorías con complejos modelos matemáticos para explicar el comportamiento de los solutos en las columnas cromatográficas. Las más estudiadas son: • • • Teoría de las placas teóricas (Martin y Synge) Teoría cinética (Van Deenter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer) Teoría desarrollada para columnas capilares (Golay)

La principal es la teoría de las placas teóricas (theoretical plates theory), la cual plantea que una columna cromatográfica está constituída por una serie de placas contenidas en la fase estacionaria. Supone como constante el volumen de la fase estacionaria en cada placa; que el volumen de fase móvil entre placas es constante; que las dos fases están en equilibrio en cada placa, y que el valor de coeficiente de distribución es constante e independiente de la concentración del soluto. Desventaja: además de que se basa en muchas suposiciones, la principal desventaja es la falta de conexión entre la eficiencia de la columna y las propiedades fisicoquímicas de la partícula.

minutos La teoría cinética considera el comportamiento en un proceso cromatográfico en función de los factores cinéticos que intervienen: Variaciones en las velocidades de flujo. La ecuación de Van Deemter1: HETP o H=A+B/u+Cu HETP o h= altura equivalente a una placa teórica. El término relacionado con la transferencia de masas viene dado en función del diámetro de la columna.3 La ecuación de esta teoría1: N=16(tr/w)2 N= número de placas teóricas. cm/seg A= 2λdp difusión aparente B= 2γDm coeficiente del término debido a la difusión molecular C= (8/π)(k’/[1+ k’]2)(df/Ds) coeficiente del término debido a la resistencia a la transferencia de masas En la teoría para las columnas capilares se considera que la difusión aparente no contribuye de manera apreciable al ensanchamiento de los picos en este tipo de columnas. milímetros. en este caso se omite el término A pues su valor es despreciable. u= L/ tr aire promedio de la velocidad lineal. pues en este tipo de columna es más importante que el tamaño de partícula de relleno. El coeficiente relacionado con la difusión molecular tiene un valor de uno debido a que la distancia que recorre la partícula es igual a la longitud de la columna. . La ecuación de esta teoría es un caso particular de la ecuación de la teoría cinética. se relacionan las magnitudes que caracterizan la geometría del soporte y el término C se presenta de manera distinta pues en este tipo de columna es más importante la fase móvil que el tamaño de partícula. debido a las diferentes rutas que puede tomar el analito durante su migración a través del empaque. Difusión axial o longitudinal del soluto en la fase móvil. minutos w= ancho del pico a media altura. adimensional tr= tiempo de retención de un compuesto. Resistencia a la transferencia de masas entre la fase móvil y la fase estacionaria.

(k/η) (dP/ dz) u= velocidad lineal en un punto de la columna z=distancia a la entrada de la columna η= viscosidad del gas dP= gradiente de presión de un elemento dz= longitud de columna k=constante de permeabilidad. u= . Probabilidad de encontrar una molécula determinada de soluto en la fase estacionaria o en la fase móvil Relación frontal (Rf) La relación frontal y el factor de capacidad son dos maneras de medir el mismo fenómeno. otra que indica la velocidad media. Concentración de soluto en la fase estacionaria frente a concentración de soluto en fase móvil a temperatura constante. Tiempo muerto ( tm) Es el tiempo de retención de una sustancia insoluble en la fase estacionaria (K=0). Factor de capacidad (k’) Depende de las propiedades termodinámicas del sistema (K) y además es función de las características de la columna en particular. Las respectivas integraciones de la ecuación permiten obtener una que relaciona el valor de la presión con la posición de la columna. . la compresibilidad o factor de obstrucción Coeficiente de reparto (K) Propiedad termodinámica del sistema soluto-fase estacionaria-fase móvil independiente del proceso cromatográfico. Representa la relación entre las velocidades medias del soluto y la fase móvil en su recorrido por la columna.4 Circulación del gas portador La ley de Darcy1 correlaciona la velocidad lineal de un gas que circula por una columna con el gradiente de presión.

se dice que la cromatografía está siendo revelada. y el lavado de la zona inicial para formar el cromatograma es la formación o desarrollo del mismo.5 Volumen de retención (VR) Es el volumen de fase móvil necesario para transportar el soluto de un extremo a otro de la columna. el cual se obtiene a partir de la ecuación que involucra además la compresibilidad del gas portador. Para poder hacer comparaciones entre columnas es necesario establecer condiciones similares de trabajo. . su manejo se dificulta al momento de elegir un patrón adecuado. Resolución Cada sustancia se desplaza a una velocidad característica dada por el valor de su relación frontal en dichas condiciones. la mezcla y el adsorbente son llamados sistema cromatográfico. Se utiliza para disminuir el efecto de errores. El volumen de retención específico está delimitado por la temperatura. La serie de resultados se denomina cromatograma. en el conocimiento del peso de la fase estacionaria en la columna. Altura equivalente a una placa teórica. La combinación del solvente. Se denomina volumen de retención neto al volumen verdadero y corregido. Retención relativa (rx:p) Conservan las propiedades del coeficiente de reparto y son fáciles de calcular. Cuando el agente a detectar se trata con un agente químico para formar un color. líquido de lavado o revelador. sobre todo. La mezcla a separar es aplicada en una zona inicial y es lavada con un solvente. Nomenclatura Desde el primer cromatógrafo de Tswett hasta los cromatógrafos de ahora siguen utilizando la misma nomenclatura para sus componentes: Un tubo de metal o vidrio se llena con un sólido activo (adsorbente) para formar una columna cromatográfica. Eficacia Una columna será más eficaz mientras mayor sea el número de placas teóricas que tenga. Por tratarse de un método donde se separa por elución es mejor referirse a tiempo de elución más que a distancias recorridas. Cada sistema cromatográfico está compuesto por una fase móvil (solvente) y una fase estacionaria (la columna).

solamente se utilizan columnas y el proceso siempre se realiza por elución. análisis frontal y desplazamiento. Puerto de inyección (inyection port) Es un dispositivo que permite la introducción de la muestra en la corriente del gas portador. Estas fases son generalmente gases inertes como Helio. Sistema de registro de datos. papel. al líquido que sale de la columna se le nombra efluente. 7. Fase móvil. Existe cierta variedad de diseños según el tipo de muestra que se trata de analizar. recibe el nombre de evaluación o cuantificación. Fase móvil (mobile phases) Gaseosa. la técnica suele recibir un nombre relacionado con la forma en que se dispone la fase estacionaria (columna. permitiendo que sean separados en tiempo y espacio. 5. 6. 3. dando lugar a la cromatografía gas-sólido (CGS). También se utilizan absorbentes. recibe entonces el nombre de cromatografía gas-líquido (CGL). Argón o Nitrógeno. Si el soluto es separado del adsorbente por lavado antes del análisis. Los componentes son separados por sus diferencias de partición entre la fase móvil gaseosa y la fase estacionaria en la columna. Un cromatógrafo de gases consiste de: 1. Cuando la fase móvil es líquida. El gas portador lleva las moléculas del analito a través de la columna. este movimiento es inhibido por la adsorción que presenta el analito tanto en las paredes de la columna cuanto en los materiales empaquetados en la misma. 2. También provee información cualitativa y cuantitativa de los componentes presentes en una mezcla. que puede utilizarse para sólidos (en disolución) y gases .6 Si los componentes de la mezcla son analizados cuantitativamente. entonces se le llama elución y al agente a ser analizado se le llama eluyente. pero en mucho menor proporción. Detector. etc. Existen tres formas de desarrollar este proceso: elución.). El más común es el inyector de líquidos. Cuando la fase móvil es un gas. La cromatografía de gases es una técnica analítica que puede ser utilizada para separar compuestos orgánicos basada en sus volatilidades. Horno de la columna. Columnas Fase estacionaria. Puerto de inyección. capa fina. La forma más usual de hacer cromatografía de gases es utilizando un líquido como fase estacionaria. 4. líquida o fluido supercrítico (potencia disolvente de los fluidos a temperaturas y presiones superiores al punto crítico).

Precisión de la inyección +/-1%. líquidos de 0. Equipo no caro y requiere temperatura constante. Aguja fija. La técnica de inyección de muestra recomendada para líquidos en cromatografía de gases es el método de flujo del solvente. El inyector se trata de una cámara situada a la entrada de la columna y calentada independientemente de ésta (a temperatura superior del punto de ebullición del componente más volátil de la muestra. 2). debe ser reemplazado periódicamente). Se lee el volumen de la muestra y posteriormente se inyecta al cromatógrafo. y en el otro al detector. . El solvente puro es introducido a la jeringa seguido de una bolsa de aire.7 (mediante jeringas especiales). removible. generalmente).1-10 µl y gases 0. Varios tamaños y ángulos. Dentro del horno la columna se conecta en un extremo al puerto de inyección. Horno con columna capilar.5-5 ml. y finalmente otra bolsa de aire. Volúmenes de la muestra desde 1 µl. 2. Inyección de la muestra evaporada e introducirla a la columna a través de un septo de plástico (estable a la temperatura de inyección. donde se debe tener una buena regulación de la temperatura. Horno de la columna En el interior se sitúa la columna. después se coloca la solución muestra. Jeringas: varios estilos disponibles. Inyección rápida para introducirla en una sola descarga y no debe haber aire al momento del llenado. Incremento de la precisión al utilizar circuitos (gas sampling loops) y válvulas para introducir cantidades constantes. La columna debe estar en el centro del horno sin tener contacto con las paredes (Fig. Percha de la columna Columna de capilaridad Fig. Temperatura de inyección debe ser de 10° a 50° mayor a la temperatura de la columna. que suele tener una membrana de caucho a través de la cual se introduce la muestra con la ayuda de una microjeringa hipodérmica.

Puesto que el grado de separación de dos sustancias depende de sus respectivos coeficientes de reparto en la fase estacionaria. pero de estructura química diferente. ni los aldehídos en THEED (tetrahidroxietiletilendiamina). la interacción que puede tener con la fase móvil se puede clasificar en: Adsorción. Esto depende del punto de ebullición y el coeficiente de actividad de los solutos en dicha fase. una fase que efectúe la separación mejor que las demás. los ácidos no pueden analizarse en fases de carácter básico. independientemente de la fase empleada. sino con impurezas en ella. carbón o tierra de diatomeas. considerando su viscosidad y volatilidad. Dependiendo del . pues reaccionan para formar acetales. De aquí que en series homólogas el orden de elución sea el de los puntos de ebullición crecientes. cada mezcla particular debe tener. esta última es la forma más usual de hacer cromatografía de gases. Por otra parte. Cuando es un líquido. y el líquido de la fase estacionaria debe tener una baja viscosidad y una alta y diferencial solubilidad. dispuestos sobre un sólido que actúa como soporte (columna). generalmente la eficacia de la columna baja enormemente. Un descenso en la temperatura de la columna aumenta el tiempo de retención de los solutos y en ocasiones puede mejorar las separaciones. o se alcanza el punto de fusión. que se quedan en la columna. dos sustancias de punto de ebullición idéntico. podrán separarse fácilmente con base en su distinta solubilidad. Esta puede ser un sólido o un líquido. se requiere tener una fase estacionaria donde su retención relativa sea mayor a la unidad. Este fenómeno podría impedir el uso de una fase que para diferentes solutos resultaría excelente. sílica gel. al menos teóricamente. la interacción con la fase móvil recibe el nombre de reparto. La elección de la fase se hace teniendo en cuenta la polaridad de los solutos a separar y de su tiempo de retención en la fase a medida que su polaridad aumenta. La posibilidad de reacciones irreversibles con la columna. Para obtener la mejor resolución de dos substancias dentro de la columna. sino más bien de una visión de conjunto de la mezcla compleja que se desee separar. Cuando la fase estacionaria es un sólido. Por ejemplo. El sólido de la fase estacionaria puede ser de aluminio. Con frecuencia la reacción no ocurre con la fase misma. La elección de la fase estacionaria dependerá no solo de la presencia de polaridad dentro de los solutos. Para la elección de la fase estacionaria se deben de tener en cuenta las siguientes consideraciones: Los límites de temperatura del líquido elegido. Pero cuando la viscosidad de la fase estacionaria se hace demasiado alta. La fuerza de interacción soluto-solvente que han de influir en los coeficientes de actividad de los componentes de la mezcla. intercambio iónico y de filtración sobre geles porosos. salvo en casos especiales.8 Fase estacionaria (stacionary phase) La fase estacionaria es la encargada de separar los componentes de la muestra.

Sebacato de dietil (2 etil hexilo). para trabajar hasta más de 300ºC donde se consiguen eficacias de columna extraordinarias. Carbowax 1 540. OV-101 o SE-30. El más utilizado son las gomas de silicona OV-1. succinato de butanodiol. la calcinación de esta tierra dará lugar a diversos productos según la forma y temperatura de tratamiento. Sin fundente y a mayor temperatura. la cua se adsorbe fuertemente en estos puntos y el efecto sobre el soluto es menor. Una manera es cubrirlos con la misma fase estacionaria. De polaridad media o alta: no aptos para hidrocarburos no aromáticos. inactividad química y baja resistencia al paso de un gas. gomas de silicona. productos blancos utilizados para filtración. y a los grupos OH de las moléculas. productos rosados utilizado para ladrillos refractarios. pero son los que presentan mayor actividad superficial residual. La mayoría está hecho de tierra de diatomeas (diatomita o Kieselguhr). estabilidad térmica. Esta actividad modifica el desarrollo normal del cromatograma. Tiene menor actividad superficial residual. También se puede hacer por lavado ácido . Soporte (Support) La función básica del soporte sólido es sostener la fase estacionaria. aceite de silicona. por lo tanto este efecto debe ser disminiudo desactivando el soporte. Sil-O-Cel. Aceite de Ucon LB-550X. Celatom. Con carácter ligeramente polar: utilización general. Sterchamol. Son de mayor superficie y mejor resistencia mecánica. El cromosorbo G es utilizado en columnas con poca fase estacionaria y se obtienen mejores eficacias. buena selectividad para mezclas mixtas. Todos los soportes porosos tiene cierta actividad residual debida a la presencia de iones metálicos o defectos de superficie. Posibilidad de separar hasta 50 sustancias mezclando dos. • • Columnas con fase mixta: para resolución de separaciones parciales con dos o más líquidos. tres y cuatro líquidos para formar la columna final. polifenil éter. Las fases se pueden clasificar en: • No polares: para separar sustancias poco o nada polares. Aunque es más laboriosa y poco práctica la representación gráfica esto ha sido simplificado al utilizar programas computacionales. dureza mecánica. principalmente se trata de sílice hidratada microamorfa. El cromosorbo A es utilizado en escala preparativa.9 tipo de material es la temperatura máxima a la que se puede trabajar. Fundente carbonato sódico. C-22. El soporte debe de tener elevada superficie por unidad de volumen. Celita.

las columnas son empacadas mientras se están doblando. posteriormente fue introducida la columna capilar. Aunque para casos extremos pueden presentarse aún fenómenos de adsorción que se eliminan añadiendo una pequeña cantidad de fase estacionaria muy polar (Carbowax). k Con base en estas dos características se encuentran los siguientes tipos de columnas. Columna cromatográfica Las columnas están hechas de cobre. Según se encuentre en ella distribuida la fase estacionaria y el valor que alcance la relación de fases se originan los diferentes tipos de columnas. El más común es la silanización. en el que se hace reaccionar con dimetil diclorosilano. en las que Vm/Vs y k aumetan en orden progresivo1: 1. acero inoxidable o tubos de vidrio. de diámetro. Excepto para las de vidrio. existen dos diferencias fundamentales que deben ser cosideradas para la elección de la columna: la cantidad de muestra que admiten (capacidad de carga) y los valores de los flujos del gas portador. Las columnas analíticas tienen una longitud de 1-6 m. dobladas o enrrolladas. La separación de la mezcla se realiza dentro de la columna. es la parte más importante del cromatógrafo. Clásicas de relleno Capilares rellenas Capilares de capa porosa Capilares abiertas La elección de las columnas es lo más crítico. La capacidad de carga se define como la cantidad de muestra que se puede inyectar sin pérdida apreciable de eficacia y está relacionado con la cantidad de fase estacionaria por unidad de longitud de la columna. Vm/Vs Permeabilidad: representada por una constante dependiente de las características geométricas de la columna. y pueden encontrarse comercialmente con el mismo nombre que el material original (Cromosorbo) o nombres especializados. 1952). 4. La primera columna utilizada fue una de relleno (James & Martin. 2. aunque el sistema más utilizado es hacer reaccionar los grupos hidroxilo de la superficie del soporte con reactivos adecuados.10 o básico. siendo así los dos extremos en la gama de columnas utilizadas en la cromatografía de gases. . por lo tanto. El criterio para la diferenciación de columnas es con base en dos propiedades de éstas: • • Relación de fases: volumen de fase móvil/volumen de fase estacionaria. 3. de longitud y de 2-4 mm.

Columnas capilares rellenas Se distinguen de las columnas clásicas de relleno por le diámetro interno del tubo. La fase líquida puede tener una viscosidad baja y una alta solubilidad para la mezcla de componentes. calentar ligeramente para evaporar la mayor parte del solvente.11 Las columnas empaquetadas contienen un soporte sólido inerte con una cubierta delgada de la fase líquida. Las columnas de capilaridad ahora contienen una capa de revestimiento sólido dentro de ella con poro en el centro. Además. los análisis han podido ser más sensibles. de 25 ml por min en lugar de 1 ml por min). Las columnas de capilaridad originalmente contenían una película del líquido cubriendo la pared interna de la columna de vidrio o metal. cuanto más rugosa sea su superficie mayor capacidad de carga se obtendrá.. Estas columnas son mejores porque se les puede aplicar una velocidad óptima de flujo más rápida (aprox. La cantidad de muestra que admite una columna capilar sin que sufra sobrecarga es mucho menor que en una columna clásica. La suspensión del soporte en la disolución de la fase estacionaria debe agitarse mecánicamente y. no excede un milímetro. Como tapones es conveniente utilizar lana de vidrio o cuarzo y una malla metálica fina (Fig. la relación entre los diámetros del tubo y de la partícula de .Columnas clásicas de relleno Constituídas por un tubo de metal o vidrio con relleno de soporte granular con la superficie recubierta por una película de la fase estacionaria. 1. 3). Por esta razón es el único tipo de columna que se usa a escala preparativa.. si es necesario. para rellenarlo se debe introducir un extremo de ésta en el relleno preparado con la ayuda de un embudo. Longitud 1-10 m Diámetro interno 2-4 mm hasta 5 cm en escala preparativa Tamaño de la partícula de relleno diez veces menor que el diámetro del tubo Capacidad de carga grande Relación de fases pequeña Permeablilidad baja A mayor tamaño de partícula del relleno mayor será su permeabilidad. mientras que por el otro extremo se hace vacío con una bomba. El soporte sólido es frecuentemente tierra de diatomeas. El tubo de la columna debe estar perfectamente limpio. 2. Debido a este tipo de columnas. La sobrecarga se alcanza cuando la concentración de soluto en la fase estacionaria es tan grande que la isoterma de distribución deja de ser lineal.

Permeablilidad valores máximos (al igual que las capilares abiertas) El procedimiento dependerá de la naturaleza de la columna y del soporte. Diámetro interno de 1 mm. Por el contrario..5 mm Tamaño de la partícula de relleno varía entre el de un soporte clásico y las partículas de carbono producidas por la pirólisis de una sustancia orgánica. La diferencia consiste en introducir una varilla de acero inoxidable un el tubo de vidrio y situar el soporte entre ambos. Columna de vidrio: similar al de columnas capilares rellenas. Guichon (1966) y Halasz (1967) han hecho estudios muy detallados de este tipo de columna. 3).Columnas capilares de capa porosa En este caso el soporte es depositado en la pared interior del tubo. La fase estacionaria va depositada en la pared interior del tubo que actúa como soporte. 1958). debido a lo difícil de introducir un soporte en un tubo capilar metálico de esa longitud. es más sencillo cuando se trata de tubos de vidrio. quien fue el primero en utilizarla (Golay. Esto hace que sea un relleno más irregular y una permeabilidad del orden de diez veces superior. 3. 3).. se cierra un extremo y se evapora el agente dispersante quedando así adheridos a la pared del capilar. Longitud de 25-200 m Diámetro interno de 0. Tamaño de la partícula de relleno de 3 a 5 veces Capacidad de carga pequeña Relación de fases grande Permeablilidad mayor que las clásicas Al ser mayor la permeabilidad pueden construirse columnas más largas (10-50 m). Este tipo de columnas no está comercializado. se llena la columna con la suspensión.12 relleno es del orden de tres a cinco veces.Columnas capilares abiertas También conocidas como columnas Golay. 4. Se rellena un tubo Pyrex con el soporte elegido antes de estirarlo. Longitud de 10-50 m. .1-0. después es recubierto por la fase estacionaria y la parte central del capilar permanece vacía. La fase estacionaria se introduce de manera similar a las columnas capilares abiertas (Fig. Después se procede al estirado manteniendo fija la varilla (Fig. entonces al capilar resultante contiene ya el soporte en su interior. Columna metálica: se prepara una suspensión del soporte.

Experimentar con varias rampas para el resto de los componentes. cambios en el flujo y estabilidad de la fase estacionaria. La naturaleza del tubo y el procedimiento seguido para su limpieza son de gran importancia en este tipo de columnas. la fase quedará depositada sobre la pared del capilar. Esto permite disminuir la cantidad de muestra que pasa por la columna (que queda reducida a la fracción que indica la relación de división) y aumentar la velocidad lineal del gas portador en el sistema de inyección en la cantidad indicada por la relación de la división (la difusión molecular en esta parte del instrumento se hace muy pequeña). La relación de división (flujo al exterior/flujo que pasa por la columna) suele oscilar entre 50 y 120. Como la solubilidad de un gas en un líquido disminuye conforme la temperatura se eleva. . cerrar un extremo e introducirla en una estufa con una temperatura superior al punto de ebullición del solvente. La temperatura debe de estar dentro de Tmin/Tmax de la columna. ya que la pared del mismo sirve como soporte y su capacidad de retención del solvente influirá notablemente en la uniformidad de la película formada.13 Longitud hasta 200 m. Se debe considerar la solubilidad. Temperatura programada. Conforme aumenta el tiempo de retención. cambios en la volatilidad y estabilidad de los solutos. mientras que en una columna clásica ascienden a un orden de 30-100 ml/min. Los flujos del gas portador que se utilizan en columnas capilares suelen ser del orden de 0. Entre homólogos el tiempo de retención aumenta exponencialmente con el número de carbonos. los más utilizados varían entre 50-100 m Diámetro interno 0. Repetir uno para los últimos picos para encontrar la mejor temperatura y tiempo. Para poder utilizar la columna capilar con éxito será necesario intoducir entre el inyector y la columna un dispositivo denominado divisor de flujo. Algunos GC permiten programación más compleja que el simple incremento gradual de la temperatura. el ancho aumenta y la altura disminuye haciendo imposible la detección después de que algunos picos han eluído. se puede reducir la retención de un material aumentando la temperatura de la columna.1-0. Necesita detrectores más sensibles. Determinar la temperatura inicial y el tiempo basado en la mejor separación posible de los primeros picos.5 mm Capacidad de carga muy pequeña Relación de fases es la más alta Debido a la pequeña cantidad de fase estacionaria por unidad de longitud de la columna tiene una capacidad de carga muy pequeña. Uno de los métodos consiste en llenar el tubo con una disolución diluida de la fase estacionaria en un disolvente volátil.5-3 ml/min. cuya finalidad es permitir la entrada en la columna de una pequeña fracción solamente del flujo que pasa por el sistema de inyección.

14 Entre los factores que disminuyen la eficacia de una columna se encuentran: • • • • • • • • Longitud de la columna. Tamaño de la partícula de relleno. originando tiempos de análisis muy largos y sin mejorar la resolución. Cantidad de muestra inyectada. Naturaleza de las fases. Al aumentar esta disminuye la eficacia al afectar directamente en el coeficiente de reparto. Temperatura de la columna. 3. A menor cantidad mayor eficacia. Clásica de relleno Capilar de capa porosa Capilar abierta Tubo o Fase estacionaria Grano de soporte Fig. por la resistencia que opone la fase móvil a la transferencia de masas. . Velocidad del gas portador. Fase estacionaria: no afecta. Tipos de columnas cromatográficas. Cantidad de fase estacionaria. Más importante en columnas capilares abiertas. Limita en cuanto a las velocidades lineales del gas portador. Gas portador: viscosidad y valores del coeficiente de difusión en la fase móvil. Una velocidad elevada es la óptima. Diámetro de la columna.

15 Detectores Los detectores son dispositivos que indican y miden los solutos en la corriente del gas acarreador. Los filamentos son calentados por una corriente eléctrica. Modo de respuesta: dependientes de flujo de masa (cantidad de soluto independientemente de la cantidad de gas portador). El efluente fluye a través de una celda y el gas portador (He o H2) fluye a través de la otra. Para un máximo de sensibilidad. provocan un incremento en la temperatura del elemento el cual está siendo monitoreado como un cambio en la resistencia. Proceso de detección: ionización. convirtiendo una señal no medible directamente en una señal elaborable de una propiedad física. un par localizado en la salida de la columna para detectar los componentes separados mientras van saliendo. Dos pares del TCD son utilizados en cromatógrafos de gases. específicos-selectivos con respuesta a un grupo particular de sustancias. cada una conteniendo un filamento de alambre de tungsteno o de tungsteno con lámina de oro. Los detectores más ampliamente utilizados son el detector de conductividad térmica (TCD) y el detector de ionización de flama (FID). Un buen detector es altamente sensible (sensibilidad). la temperatura y la velocidad del flujo son disminuidas y se escoge un gas con mayor . Detector de conductividad térmica (TCD thermal conductivity detector) Consiste de dos celdas metálicas idénticas. tiene una respuesta lineal (linearidad) sobre un amplio rango de concentración y es relativamente insensible a variaciones de flujo y temperatura (rango dinámico lineal). electroquímico. Esta señal es elaborada por una comparación entre el gas acarreador puro (blanco) y el mismo gas llevando cada uno de los componentes previamente separados en la columna. el otro par localizados antes del inyector o en una columna de referencia separando las resistencias de los dos pares y están acomodados en un circuito de puente. la temperatura del filamento es incrementada. La temperatura del elemento censor depende de la conductividad térmica del gas que fluye alrededor. óptico-espectroscópico. Pueden ser clasificados por: • • • • Grado de selectividad: universales que responden a la mayoría de los solutos. esto es traducido en una señal eléctrica que es amplificada y registrada al momento de salir de la columna. En un lado de la muestra el gas fluye por el filamento mientras que en el lado de referencia el gas puede pasar sobre el alambre del filamento y difundir a través de él. dependientes de concentración (cantidad de soluto por unidad de volumen de gas portador). como cuando las moléculas orgánicas desplazan un poco al gas portador. Cambios en conductividad térmica. Recuperación de la muestra: en referencia a si la muestra es destruída o no.

CS2. Su modo de detección es debido al cambio de resistencia del cable basado en la termoconductividad del gas cuando fluye a través de la columna (Fig. la cual rompe las moléculas orgánicas y produce iones. Hay compuestos con poca o sin respuesta al FID. esta entra en la base del detector. . con selectividad universal. 4). Este es un método no destructivo dependiente de concentración. etc. N2. La muestra debe ser un combustible. Nox. La respuesta está basada en el número de carbonos y otros elementos tales como halógenos y el oxígeno presentes que reducen la combustión. 4. con un límite de detección de ~400 pg/ml de gas portador. compuestos perhalogenados. CO2.16 conductividad térmica (la mayoría de los gases orgánicos tienen calores de conductividad bajos). Las muestras que salen de la columna pasan a través de la flama. compuesto como el NH3. La única desventaja es que destruye la muestra. H2O. Los iones son colectados en un electrodo parcial y produce una señal eléctrica. CO. Es extremadamente sensible en un amplio rango dinámico. se mezcla con el hidrógeno y entra a la flama. Fig. Detector de conductividad térmica6 Detector de ionización de flama (FID flame ionization detector) El FID consiste de una flama hidrógeno/aire y una placa colectora. O2.

Fig. Su modo de detección es debido a la producción de iones en una flama resultando en una corriente que puede ser medida (Fig. La luz filtrada es medida por un fotomultiplicador (PMT) y transducida a una señal.17 Este es un método destructivo dependiente de flujo de masa. Se puede agregar un segundo fotomultiplicador. Detector de ionización de flama6 Detector fotométrico de flama (FPD flame photometric detector) Es uno de los más usados en los métodos selectivos de cromatografía de gases. 5). pero los más comunes son para la detección de sulfurados y fosforados en mezclas complejas. Los filtros para FPD pueden ser seleccionados para diferentes componentes. 5. la cual determina que componentes son los detectados. con un límite de detección de ~ 100pg/seg. con selectividad para compuestos orgánicos. Estas especies emiten una luz característica que es óptimamente filtrada por la longitud de onda deseada. La . el cual permite una detección simultánea de una segunda señal. El FPD consiste de una flama reductora que produce especies quimioluminiscentes.

También puede ser utilizado para detectar pesticidas y herbicidas organofosforados. Ge. Este es un método destructivo dependiente de flujo de masa. B. así como de componentes sulfurados volátiles en el análisis de alimentos. As. con un límite de detección de ~ 100pg/seg. Su modo de detección es debido a la producción longitudes de onda particulares resultando en una corriente que puede ser medida. Sn. Fig.Se. P. Cr. 6 Detector fotométrico de flama6 .18 selectividad de FPD clásicos (como una porción por peso del carbono) es 105 para sulfurados y 106 para fosforados. con selectividad para S. La cromatografía de gases con FPD puede ser usada para detectar componentes sulfurados en extractos crudos de aceite y en contaminantes de gas natural.

nitrilos. siendo esta la base de la respuesta(Fig. Utiliza luz ultravioleta para ionizar un analito. Este es un sistema donde se detectan partículas ß por absorción de especies que contienen halógenos. Este es un método no destructivo dependiente de concentración. heterocíclicos. Su modo de detección es debido a los potenciales de ionización de los compuestos analizados (Fig. Fig. los electróforos las absorben reduciendo la corriente. organosulfurados y algunos organometálicos. 7 Detector de captura de electrones6 Detector de fotoionización (PID photoionization GC detector) Este tipo de detector es muy selectivo para los compuestos con hidrocarburos aromáticos o con heteroátomos. ésteres. aromáticos. la longitud de onda oscila entre 106-150 nm. . cetonas. con un límite de detección de ~2pg/seg. nitratos. aldehídos y aminas. los cuales tienen potenciales de ionización. 7).19 Detector de captura de electrones (ECD electron capture detector) Es altamente sensible a compuestos halogenados y por lo tanto muy útil en la detección de pesticidas. 8). organometales y dobles enlaces conjugados. Da un poco de respuesta a hidrocarburos y otros carbonilos conjugados. Para este tipo de cromatografía la muestra debe contener una fase gaseosa electrófora. con selectividad para compuestos alifáticos. Los iones producidos son colectados por electrodos siendo la corriente generada una medida de la concentración del analito. Las partículas ß son emitidas por una fuente de 63Ni.

altura y anchura de los picos en el cromatograma. un solo parámetro expresado cuantitativamente expresado como dato de retención. suministra la información cualitativa y los otros proporcionan la información cuantitativa. los picos están totalmente separados con resolución superior a la unidad y que cada uno de ellos corresponde a un solo compuesto.20 Fig. cada componente de una muestra suministra tres unidades de información: posición. siendo preferibles las técnicas multiparamétricas. 8 Detector de fotoionización6 Métodos Análisis cualitativo La cromatografía de gases es uno de los métodos físicos de separación más eficaces que se conocen. En los casos favorables es posible identificar los componentes por la posición de los picos. La posición. como la espectrometría de masas o la espectroscopía de infrarrojo. Para simplificar el problema del análisis cualitativo se supone que el cromatograma se ha registrado en las condiciones óptimas. pero por lo general la ambigüedad es tan grande que el analista ha de completar la información con la obtenida por otros métodos analíticos. .

aumenta la . Entre los más eficientes están el de pasar directamente los efluentes a un espectrómetro de masas. la información cromatográfica cualitativa depende del conocimiento previo de la composición de las muestras y casi siempre se han de combinar varias de las operaciones incluidas en la tabla para seguir identificaciones fiables. colocados a la salida de la columna y el de condensación y análisis por otras técnicas instrumentales o químicas. Como estas condiciones son difíciles de mantener constantes en cromatogramas registrados sucesivamente y todavía más difíciles en días diferentes. es mejor añadir el patrón como un marcador a la muestra problema y comprobar si no coincide con alguno de los picos originales. 1 Identificación cualitativa por cromatografía de gases2.21 En la siguiente tabla se resumen los procedimientos utilizados para identificar los picos cromatográficos. excepto en los casos favorables. Si por el contrario. o de infrarrojo. Métodos de coincidencia El método más simple de identificación cromatográfica consiste en comparar el volumen de retención de un compuesto problema con el de un patrón. por análisis con otros métodos. No existe un método general aplicable a todos los problemas prácticos. determinado en las mismas condiciones operativas y en la misma columna. la cromatografía de gases en combinación con otras técnicas es el instrumento más eficaz conocido hasta la fecha para determinar la composición cualitativa de mezclas complejas de compuestos orgánicos. Tabla. A pesar de los inconvenientes del método. Solamente se estudia la identificación por procedimientos cromatográficos teniendo siempre en cuenta que se ha de completar.

. h sería el número posible de hidrocarburos eluidos entre los volúmenes de retención V1r y V2r. análisis elemental. La menor diferencia de volúmenes de retención detectable. Pero en caso contrario la ambigüedad es muy grande. pero una discusión semicuantitativa aclara las limitaciones del tratamiento estadístico. pn = e-pρn/n! en la que pn es la probabilidad de encontrar n solutos en el intervalo unitario δVr Para reducir las identificaciones erróneas a 1 en 1000. Por otra parte. Esto es equivalente a reducir δVr o h. Esto significa que en la mayoría de los casos prácticos es imposible la identificación en éste nivel con una sola columna a partir de los datos de retención. o en densidad de los picos. dato suministrado por el análisis elemental orgánico. En otras palabras si en un cromatograma fuera posible incluir todos los eluyentes posibles entre V1r y V2r el número de sustancias que dentro del error experimental serían simultáneamente eluidas sería ρ. Son evidentes las razones de la separación en varias columnas. es una evidencia de la coincidencia de los volúmenes de retención. Expresando cuantitativamente esta observación intuitiva se tiene2: ρ = h/(V1r-V2r)/δVr ρ = número total de picos/número total de divisiones Si se sabe de antemano que la mezcla solamente contiene carbono e hidrógeno. La primera alternativa implica mejorar la precisión de las determinaciones de rutina de las medidas de retención a un nivel superior al 1%. y por tanto. La respuesta negativa no es ambigua. se puede afirmar que ninguno de los componentes de la muestra es el patrón. δVr al nivel de confianza de 95 % vale 4σVr (σVr es el error típico de las medidas duplicadas del volumen de retención). técnicas instrumentales o separación en otras columnas cromatográficas. Al estudiar la probabilidad de que el pico que coincide con el patrón sea el patrón. muy difícil de conseguir en la practica. solamente serán permisibles 4 eluyentes. La única manera de eliminar esta dificultad es reducir ρ. es posible reducir fácilmente ρ por medio de otro tipo de información. sobre todo si se analizan compuestos que no han sido previamente estudiados por cromatografía de gases. pes. la certeza es la identificación de que un pico depende de sustancias eluidas cerca del mismo con las que puede confundirse.22 altura de alguno de ellos. En la práctica la distribución de picos sigue la distribución de Poisson2.

Los componentes y el patrón han de registrarse en el mismo cromatograma. dependiendo solamente de la temperatura de separación y de la naturaleza de la fase estacionaria. Es casi imposible en la práctica fijar un solo patrón . Retención relativa Los volúmenes de retención dependen de un gran número de variables operativas. Se han utilizado dos procedimientos generales: a) Cálculo de los volúmenes de retención específicos b) Determinación de retenciones relativas a patrones Es difícil determinar rutinariamente el volumen de retención específico porque se necesita conocer con exactitud el peso de la fase estacionaria de la columna. debido a esto es difícil conseguir respuesta idéntica aún en columnas preparadas en las mismas condiciones. una desde el máximo del pico del problema al pico del aire. y otra entre los máximos del patrón y el aire. y por ello la separación en dos columnas ha reducido la probabilidad de identificación errónea debida a la elución simultánea. por lo tanto. que hace difícil determinar la coincidencia de los datos publicados por diferentes autores. se limita a la realización de dos medidas de distancia. En la práctica del análisis cualitativo se emplea corrientemente la retención relativa.23 La probabilidad que se eluyan simultáneamente picos conteniendo más de un componente en dos columnas diferentes A y B está dada por2: pesA+B = pesA*pesB como pesB <1 se deduce que pesA+B < pesA. no será válido el razonamiento si el volumen de retención en la columna A está relacionado con el de la columna B. Sin embargo. del flujo del gas portador y de la cantidad de fase estacionaria. La retención relativa de un compuesto es independiente de la longitud de la columna. para que se cumpla el procedimiento estadístico la distribución de los eluyentes ha de ser aleatoria. más marcadamente cuando las columnas tienen comportamiento muy diferente. El cálculo es muy sencillo. el empleo de varias columnas reduce la probabilidad de identificación errónea. para identificar sustancias a partir de datos bibliográficos se han de expresar las retenciones como variables reproducibles por diferentes equipos e investigadores. Un inconveniente de la identificación por retenciones relativas es el gran número de sustancias empleadas como referencia. Siguiendo este procedimiento y separando en suficiente número de columnas es posible reducir pes a un valor muy pequeño. Por lo tanto.

La eficiencia es la relación entre la longitud del tiempo que gasta el soluto en salir de la columna y la anchura del pico sobre la elución. por lo que existe gran número de datos de poca aplicación a problemas particulares. acarreador y flujo de gas.54 [(tr-to)/w1/2] 2 Donde tr es el tiempo de retención del soluto. Optimización del flujo acarreador para mejorar la resolución de la columna La resolución y separación de los picos son dos de los factores más importantes para la resolución de la columna. y capacidad de adhesión de la película. Un valor alto de N indica una gran capacidad de retención del soluto de la fase estacionaria y una gran eficiencia de la columna. una cromatografía de gases es optimizada cuando la sensibilidad y resolución de una mezcla compleja es activado en el menor tiempo posible. to es el tiempo de retención de una sustancia sin retención o tiempo de volumen muerto. o los modos de inyección. Si alguno de los criterios antes mencionados no se completan. puede modificar completamente la forma de los picos y alterar toda la eficiencia de la columna. Esto es determinado por el número efectivo de placas teóricas las cuales son secciones ideales de la columna donde los solutos se equilibran entre la fase estacionaria líquida y la fase gaseosa móvil. son indicativos de una cromatografía bien calibrada. y w1/2 es el ancho del pico del soluto. Desafortunadamente.24 de referencia y su selección queda a disposición del especialista. diámetro interno. dependientes de la selectividad y eficiencia. La dificultad con la optimización es que esto involucra muchas variables: 1) parámetros fijados como la longitud de la columna. 2) los estándares a las mismas concentraciones se reproducen en un periodo de tiempo específico y 3) bajos niveles de concentración de picos tempranos y tardíos. Un sistema optimizado es muy difícil de mantener. Un cambio directo en el flujo. Una cromatografía de gases optimizada que está bien calibrada cuando 1) las soluciones estándar de diferentes concentraciones son lineales. Optimización de flujos en capilaridad split/splitless en cromatografía de gases Por definición estándar. La asociación entre la velocidad lineal y eficiencia de . Complicaciones mayores se obtienen cuando se utiliza un sistema de dos columnas y una de ellas afecta el funcionamiento de la otra. Resolución es la capacidad de la columna para separar dos picos adyacentes. acompañados con el menor ruido. Expresado como4: N = 5. 2) parámetros operacionales como la temperatura de la columna. La presencia de un volumen muerto grande (to) esconde la eficiencia de la columna pero puede ser reducido incrementando la velocidad lineal del flujo del gas acarreador. todo debe ser repetido. esto frecuentemente aumenta el tiempo de análisis.

El grado en el cual la velocidad lineal puede mejorar el comportamiento de la columna cuando la programación de la temperatura es específica al gas acarreador como se muestra en la figura 10. 9 Punto general de Van Deemter4. Claramente. En este valor. La figura 9 muestra (H) como una función de la velocidad promedio (u) donde Hmin y umin están bajo condiciones de flujo optimizados. todos los solutos se optimizan en algunos puntos directamente sobre umin pero moléculas grandes se optimizan en velocidades más bajas que moléculas pequeñas. En general. (N) está relacionado a la longitud de la columna (L) de acuerdo a H (HETP) = L/N. La velocidades bajo umin caen en la parte de la curva donde la eficiencia y el tiempo de corrida son los peores. . El helio. De acuerdo a umin la eficiencia máxima es obtenida pero solo gastando mayor tiempo de corrida. se debe seleccionar una velocidad de flujo lineal. Fig. Para disminuir la viscosidad e incrementar la eficiencia de la columna. el hidrógeno es la mejor elección para obtener la separación más grande en el periodo de tiempo más corto debido a su menor viscosidad que otros gases en temperaturas más altas. el tiempo de corrida es el más corto con una muy baja pérdida de eficiencia. es una elección más práctica porque no se necesitan precauciones de ventilaciones.25 columnas de capilaridad puede ser ilustrado más claramente sustituyendo la altura equivalente a una placa teórica (H) por número efectivo de placas teóricas (N). En este modelo.

La velocidad lineal es calculada usando la siguiente ecuación y entonces un valor promedio se obtiene de un mínimo de tres mediciones4. La sensibilidad ECD es inversamente proporcional al flujo.26 . Fig. linearidad y reproducibilidad. Esto es para minimizar la resistencia del flujo de la columna para suplementar líneas y garantizar una velocidad de flujo volumétrico constante entre el inyector. la columna y el detector. especialmente desde que el disfraz afecta la forma del pico. estará arriba del 50 % de la eficiencia que puede ser perdida cuando se hacen rangos de 50 hasta 200 ºC. U (cm/seg) = longitud de la columna/RT del pico de lo no retenido Es importante considerar el disfraz de la velocidad del flujo de gas cuando se optimiza la velocidad lineal del acarreador.10 Efectos de usar diferentes gases acarreadores en el punto Van Deemeter4. Por ejemplo. con ECD el detector de gas necesita mantener un equilibrio de concentración de electrones térmicos y un barrido efectivo de gas acarreador-soluto. Cuando la velocidad lineal se optimiza para el helio será aproximadamente 21-40 cm/seg y para el hidrógeno de 50-80 cm/seg. Para medir la velocidad lineal. Las velocidades de flujo varían de acuerdo al disfraz del gas y el tipo de detector. Esto podría ser porque la velocidad es optimizada pero no parece ser porque el disfraz del flujo no lo esté. se inyecta una sustancia no retenible a la temperatura donde hay mayor elución. se ajusta la fuente del acarreador que es por lo menos 20 psi más grande que la presión de la cabeza de la columna. Antes de marcar el uso de flujo de acarreadores. Si a esto se le optimiza la temperatura. aunque un flujo fuerte se requiera para el barrido de .

Esta técnica es extremadamente útil para adelgazar los picos y eliminar las trazas de solvente y la interferencia de vapor retenido momentáneamente en la fase estacionaria.2 cuando están determinados por 1 y 2 (ver abajo). Sin embargo. La resolución. Para que ocurra la retención. Durante el muestreo con splitless. La cantidad requerida de resolución y la simetría del pico es específica al método de análisis. por lo cual.0 y un rango aceptable PGF está entre 0.27 sustancias altamente retenidas para producir picos agudos.8 a 1. El tiempo de purga. Optimización de tiempo de purga y velocidad de split Las muestras con splitless son frecuentemente usadas para análisis de componentes donde una gran cantidad de muestra es inyectada a la columna. el analizador debe aceptar los picos que . 1) Resolución= rt2-rt1/ Avg (w2+w1) rt2 – rt1 es la diferencia en los tiempos de retención entre los dos picos. El respirador del split se apaga en éste punto y se vuelve a prender después de 20 a 60 seg. para prevenir que los vapores entren en contacto con la cabeza de la columna y sean retenidos ahí. El muestreo con splitless puede ser optimizado usando “concentración de muestra / solvente” para volver a concentrar la muestra en la columna caliente. la concentración del solvente no es práctica porque la temperatura inicial del horno estará a menos de la temperatura del cuarto. Normalmente.5-1. En este caso. solvente y gas. w2 es el ancho del pico 2 y w1 es el ancho del pico 1. o el tiempo que el respirador del split es abierto después de la inyección. esto permite una rápida elución de los solutos. una buena resolución se encuentra entre 0. 2) PGF = 1. la temperatura inicial del horno debe ser 20ºC abajo del punto de ebullición del solvente. la simetría de los picos y la sensibilidad podrían ser monitoreadas para confirmar que la cromatografía de gases está calibrada correctamente y la velocidad lineal está optimizada. Parte del gas sale por el respirador al pasar en el alineador.83 * el pico a 1/2 de altura / pico a 1/10 de altura 3) La sensibilidad está relacionada con la altura del pico a la base del mismo. la muestra se inyecta dentro de la columna caliente y forma un vapor que consiste de muestra. con solventes como el cloruro de metileno (punto de ebullición de 40ºC). El solvente humedece la fase estacionaria para retener a los solutos. Para mantener una sensibilidad satisfactoria en las velocidades de flujo en el ECD se utiliza 95 % de argón y 5 % de metano como fuente de gas. es crítico para la discriminación y reproducibilidad del cromatograma. Una porción de 3:1 indica una sensibilidad adecuada.

hasta alcanzar el máximo de sensibilidad del soluto sin que haya trazas del solvente. concentración de la muestra. Ajustar el tiempo de purga en incrementos de 0.2 a 1. menos de 0. las áreas del pico más pequeñas asociadas con el muestreo tipo split reflejan una reducción en lo ancho lugar de lo alto del pico. Las diferencias en el peso molecular.2 min. Un alineador de cuello de ganso es una alternativa viable para un alineador delgado. Si hay una gran diferencia entre el punto de ebullición del solvente y el del soluto. Ocasionalmente. Una cabeza del alineador desactivada. temperatura inicial del programa y volumen de inyección afectan el split. Algunas de estas discrepancias pueden ser minimizadas al seleccionar un alineador de inyección adecuado. Por esta razón.5 min. puesta 1 o 2 cm abajo del punto de inyección. el método de inyección split puede ser monitoreado siempre corriendo soluciones estándares de concentraciones conocidas y analizar su reproducibilidad. Si se obtiene la cantidad máxima de eficiencia de la columna. La cantidad purgada en el respirador del split está determinado por la velocidad del split4: Velocidad del split (ml/min)= Promedio del flujo del split+ promedio de flujo de columna/promedio de flujo de columna Una velocidad de 100:1 indica que el 99 % de la muestra. es esencial para completar la filtración de .28 estén entre los solutos que eluyen al principio o tratar varias técnicas de inyección que sean compatibles con el muestreo tipo splitless. Un alineador inerte. los componentes más pesados no se volatilizarán lo suficiente o no se crearía la “concentración del solvente”. el solvente y el acarreador se purgaron a través del respirador del split. se comienza con un rango de purga de 0. Una columna moderadamente polar desactivada. empaquetado ligeramente con lana de sílica. podría ser utilizada siempre con splitless para minimizar el pegado de los picos y para tener una migración uniforme del solvente.1 a 2 µl no impide que haya una buena altura y sensibilidad en el pico.1 min. diseñado específicamente para mejorar la eficiencia del splitless y disminuir la degradación de la muestra. es que se pueden usar columnas más estrechas para tener una mejor resolución sin tener que volver a muestrear la columna. Para tener un tiempo de purga óptimo. El muestreo tipo split es el método más popular porque inyectar muestras de 0. Quizá el único inconveniente del split es que la cantidad inyectada a la columna podría no ser representativa si la muestra no es completamente vaporizada. Si el tiempo es muy corto. la lana puede ser usada para ayudar a la volatilización de los componentes de alto peso molecular. Para incrementar el flujo a través del respirador se disminuye la presión o el flujo del acarreador a través de la columna. Esto es porque la muestra entra en el alineador con el respirador split abierto y el extracto de la muestra y el acarreador son purgados antes de que entren a la columna. Otra ventaja del split.1 min. sin lana de sílica es preferida para una mezcla ligera de la muestra con el solvente. el tiempo de purga necesitar estar cercano a 0. Mejorar la simetría del pico permite una mejor reproducibilidad y por lo cual da una mejor cuantificación del área de los picos.

reduce el tiempo de corrida y se obtiene una velocidad óptima lineal para el soluto. Hay varios factores a considerar cuando se programa un EPC. Para mejorar la velocidad del split. mezclado y expansión del vapor. El flujo a través del respirador de purga pude estar entre 0. Esto es particularmente importante cuando se inyectan componentes de alto punto de ebullición. colocar la temperatura del horno a la temperatura inicial y ajustar flujo del respirador del split hasta que esté en 10 a 15 ml/min. al final del detector. .29 residuos no analizables y garantizar el calentamiento adecuado. El EPC puede ser también programado para tener una corrida de flujo constante. el flujo y presión constantes. En general. diámetro interno. y el flujo del acarreador en 2 a 5 ml/min. Esto es similar a lo que el gauger mecánico hace. bajo presión constante. El EPC puede ser corrido a presión constante con un solo punto de entrada en toda la columna. la presión de la cabeza de la columna debe incrementar 3. excepto que los flujos son más estacionarios. donde la presión es ajustada automáticamente a los cambios de temperatura para corregir el volumen del gas dentro de la columna dado a que el calor se expande al incrementar la temperatura. Esto es porque la presión puede ser regulada precisamente y el flujo programado continuamente durante la columna. la cual. puede gotear más del 50 %. particularmente la longitud de la columna. La habilidad para correrlo a temperaturas bajas reduce significantemente la degradación termal y mejora la longevidad de la columna. Esto garantiza una alta eficiencia y un flujo constante.5 veces a la cantidad original en la columna por cada 200°C para compensar un incremento en la viscosidad. velocidad de split y el goteo de la presión desde la cabeza hasta la cola de la columna. permitiendo una restauración más rápida del equilibrio del flujo después de un periodo de apagado. Combinación de temperatura y programación de temperatura para completar la optimización La adición de control electrónico de presión a la programación de la temperatura mejora dramáticamente la separación. promueven una elución más rápida de componentes de alto peso molecular en temperaturas más bajas con mejor resolución. El siguiente es un cálculo para mejorar el EPC y establecer una presión en la cabeza necesaria para mantener un flujo constante mientras la temperatura se incrementa de T1 a T24: Pi2 = [(T2/T1)1. Para optimizar el flujo constante.7(pi2-po2)1+po2]1/2 Donde Pi es la presión gauge inicial + 1 atm y po es la presión de salida a 1 atm.5 a 6 ml/min.

Con la programación de la temperatura y presión se han optimizado y mejorado los procedimientos de corrida. Ocasionalmente. Los cambios en la presión pueden ocurrir en temperatura y tiempos específicos durante una corrida. Comenzar con rampas de temperatura. incrementa el flujo el cual podría reducir la velocidad de split.30 La programación de la presión envuelve simples y múltiples campos los cuales entran en el panel de control en la misma manera como un programa de temperatura. la delimitación de los picos puede ocurrir con pulsos de presión. 2. el volumen de expansión de vapor puede ser controlado para prevenir el regreso el cual podría ocurrir si la cantidad inyectada excede la capacidad del buffer en la cabeza del alineador. Cuando se usa EPC con inyección tipo split. puede ser programado para apagarlo entre corridas para conservar la cantidad de gas acarreador. Esto no remplaza los métodos ya desarrollados pero puede eliminar los tiempos de corrida sesgados. 5. . Correr mezclas complejas en temperaturas iniciales bajas para dispersar os picos. La temperatura del horno inicial podría ser lo suficientemente baja como para permitir separar componentes de bajo punto de ebullición pero más alta que la temperatura mínima para la fase estacionaria de la columna. 3. hay menos contacto con sitios activos de superficies catalíticas del alineador. No hay suficiente tiempo para que el vapor se expanda hasta el inicio del alineador y salga por el respirador del purgador. En el pulso de presión. Si se aplican pulsos de presión a la inyección tipo split. los pulsos de presión y la temperatura del horno. Hay menos adsorción del alineador y descomposición de la muestra y por lo tanto la resolución del pico es mejorada. y se programa una inclinación para el remanente de la corrida. Esto actualmente mejora el muestreo splitless porque expansión de volúmenes más pequeños son producidos dado al menor tiempo gastado en la cabeza. especialmente si usas “concentración de solventes” debido a que la velocidad del flujo tiende a interferir con la concentración de la muestra en la columna. la velocidad del split puede ser programada para cambiar durante la corrida o entre los métodos en una secuencia. Siempre introducir un tiempo de sostenido inicial para soluto de rápida elución. Esto puede ser solucionado variando el tiempo de purga. Algunos puntos que garantizan una programación exitosa son: 1. permitiendo una mejor optimización. Si los últimos picos de elución son resueltos pobremente. Puesto que el tiempo que la muestra permanece en el alineador es reducido. Incrementar las rampas de presión y temperatura para reducir los espacios en blanco entre grupos. la cabeza de presión es aumentada un poco después de la inyección. Seleccionar columnas que tengan mayor eficiencia que la requerida para la separación. También. Los programas computarizados como el ezGC &#153 proveen aproximaciones más cercanas para condiciones ya optimizadas. 4. reducir la temperatura e incrementar la presión. Al incrementar la presión durante la inyección.

saborizantes y fragancias En la mayoría de las investigaciones hechas sobre saborizantes se realizan por cromatografía de gases. separación de enantiómeros. análisis de pesticidas. una serie de grados de redundancia puede ser evitada por la asignación de cuatro grandes categorías: a) Comida. Ácidos grasos. sabores y fragancias. Contaminantes de agua. Una serie de algorímetros determinan los mejores programas basados en la termodinámica de retención para índices y cálculos. niveles de alcohol y drogas en la sangre. la velocidad lineal. con la longitud de la columna. análisis de pesticidas. Analabs. c) Ambientales. análisis de pesticidas. etc. halometanos en el agua hasta las dioxinas en la tierra. incluyendo entradas superiores que llevan a cabo un mejor proceso de inyección de la muestra y c) la disponibilidad de mejores columnas desactivadas en un rango más amplio de diámetros y cubiertas de una gran variedad de fases estacionarias. Otra forma de clasificar las aplicaciones en la cromatografía de gases es dividir los datos de la literatura en áreas de interés. separación de enantiómeros. la presión sobre el diámetro de la columna. b) Petróleo y químicos. Ácidos grasos.31 El software requiere que dos programas extremos sean usados como un rango 1) Una presión o temperatura alta con un rampeo rápido y 2) una presión y temperatura inicial con un rampeo bajo. de tiempo muerto y otros parámetros. Las guías de aplicaciones para fases estacionarias en los análisis de las diferentes áreas se muestran en catálogos tales como Supelco. separación de enantiómeros. Productos naturales y las feromonas. Los resultados entran al programa. algunos de los ejemplos incluidos pueden ser criticados porque los eventos de separación en la cromatografía de gases pueden ser muy rápidos y en muchos casos es posible generar resultados que son superiores a los mostrados en las ilustraciones. combustibles sintéticos. y las correlaciones sensoriales que se requieren para que haya significancia en la determinación de sabores deben ser medidas por patrones de . aire y tierra. Por otra parte. pese a que la sobrelapación de algunos sea inevitable. b) mejoras en la instrumentación comercial. Applied Science. separación de enantiómeros. Aplicaciones en comida. d) Médicas y biológicas. Los avances que han permitido mejorar los métodos incluye a) mejores métodos de preparación y almacenamiento de las muestras. en consecuencia la compilación casi siempre puede estar incompleta por cromatógrafos individuales debido a la omisión de ejemplos que se consideran críticos para algunos campos específicos. carbón y aceites. Aplicaciones Un intento para crear una compilación de aplicaciones deseadas para generar un manual debe ser selectivo.

Silar 5CP 1. en los vinos europeos fue de gran importancia en la detección de dietilenglicol. Tabla 2. La cromatografía puede ser extremadamente compleja y frecuentemente influenciada por los métodos de preparación de la muestra. la detección de estos EDBs puede ser un problema. El dietilenglicol es un material tóxico y se ha encontrado en niveles de 60 g/L en los vinos. 275 . por lo que se han optimizado fases estacionarias que permiten un aumento en la retención relativa y velocidad parcial de la volatilidad de los compuestos. si se quedan dentro de la columna. OV-210 17 Carbohidratos 2330. pero se demostró que este compuesto es carcinogénico en altos niveles. Por ejemplo. dando prioridad a la salida de los contaminantes. La cromatografía de gases es ampliamente utilizada en el análisis de aceites esenciales. Aminoácidos OV-17. Columnas recomendadas para cromatografía de comida. El análisis puede ser complicado debido a que los compuestos de interés volatilizan usualmente en muy bajas concentraciones. donde la complejidad de la muestra puede ser en verdad un gran reto. Otro uso importante de la cromatografía de gases ha sido en el análisis de vinos adulterados. También se pueden detectar contaminantes dentro de la comida empaquetada por cromatografía de gases. Estos contaminantes están relacionados con trazas de solventes residuales usados en las películas plastificadas del empaquetamiento (por ejemplo. por lo que se usan columnas especializadas de polimetilsiloxano con diferentes fases estacionarias. El dibromo de etileno (EDB) ha sido utilizado ampliamente para inhibir la infestación de insectos en comida empaquetada. para producir una mejor separación de los compuestos así como un tiempo de vida más largo. acortar la vida de la muestra en un grado considerable. La complejidad el aceite es tan alta que no se podría analizar su composición por una simple columna cromatográfica. sabores y fragancias4 Solutos Fase estacionaria Tipo de columna Ácidos grasos volátiles en 10% SP-1000/1%H3PO4 PEGa agua (C2 a C5) Ácidos grasos bacterianos 3% SP-2100. Muchos de estos productos son frágiles e importantes comercialmente y se utiliza la cromatografía de gases para cuantificar componentes específicos que podrían ser indicativos de calidad del aceite y para detectar adición de compuestos clandestinos como antioxidantes así como componentes utilizados como diluyentes. Un ejemplo de esto puede ser el aceite de limón al cual se adulteraba por la adición de turpentina. 5. De aquí que la cromatografía de gases es usada no solo para establecer cuales son los materiales normales que contiene cada muestra. 2340 225. Debido a la gran complejidad de las muestras de comida. sino también aquellos componentes cuya concentración aumenta el abuso del aceite (ejemplo: el p-cymeno).32 cromatografía de gases. y son frecuentemente dispersados dentro de una matriz que contiene materiales los cuales podrían. el 2-etilhexanol). 225.

Se diseñaron sistemas de multicolumnas de válvula de entrada. debido a la cantidad masiva del constituyente principal que debe ser inyectado a la columna si la detección es para los constituyentes menores. describieron un sistema para cuantificar aditivos oxigenados con las bases de características de retención cuando las inyecciones de gasolina eran simultáneamente agregadas a dos columnas diferentes. usando una columna de película apretada en condiciones subambientales. (1982) 4 demostaron la separación de hidrocarbonos de bajo peso molecular en un sistema de válvula de entrada. mezclas de gases. por ejemplo. et al. La cromatografía multidimensional puede ser requerida para el análisis de estas mezclas complejas. para llevar a cabo separaciones que son difíciles de duplicar con equipos convencionales o columnas tubulares abiertas. Estas columnas normalmente se empaquetan con alúmina o algunos polímeros porosos como los cromosorbos. la cual da una gran estimación de ciertos aditivos de octanos. cuya interacción con los solutos está limitada a las fuerzas de dispersión. olefínicos y aromáticos son metas normales. Estas columnas incrementan la retención de los hidrocarburos de bajo peso molecular en altas temperaturas. alcoholes y halocarbonos de bajo peso molecular.33 Aplicaciones relacionadas a químicos y petróleo Los análisis de productos del petróleo incluyen la separación de mezclas de gases ligeros hasta la caracterización de aceites crudos y materiales producidos en la licuación del carbón. Levy y Yancey (1986) 4. componentes sulfurados y nitrogenados de bajo peso molecular. Estas columnas son especialmente útiles para mezclas de baja ebullición. y algunas veces se requiere la detección de componentes nitrogenados y sulfurados. el rango dinámico del sistema debe ser suficientemente amplio para acomodar estas diferencias cuantitativas en los componentes. Las pruebas de solventes han sido todo un reto. con potencial de reflujo y/o redirección de fracciones individuales a tubos abiertos. También se han diseñado separaciones interesantes utilizando columnas tubulares de capa porosa (PLOT) cubiertas con alúmina. Las columnas empaquetadas todavía son utilizadas para algunas separaciones de hidrocarburos ligeros. funciona bien para la separación de estos componentes. . La diferenciación de hidrocarburos parafínicos. La cromatografía multidimensional se utiliza para la separación de algunos componentes menores como los aditivos “antiknock” en gasolinas. Mooney. la fase estacionaria de metilpolisiloxano. microempaquetados y columnas PLOT. Las interacciones entre la fase estacionaria y los solutos hidrocarbonados están limitados generalmente a fuerzas de dispersión. por ejemplo. Las preparaciones de hidrocarburos derivados de aceites o carbón licuado pueden ser extremadamente complejas y también pueden incluir una variedad de otros grupos funcionales.

. las cuales dan una excelente precisión y tiempos de análisis muy cortos pese a la complejidad que podría presentar la muestra. Los altos niveles de solutos activos podrían necesitar no solo la selección de columnas bien desactivadas. Aplicaciones médicas y biológicas La detección en bajos niveles de componentes significativos en este campo tiene requerimientos estrictos para los sistemas analíticos. Los análisis cromatográficos se llevan a cabo por columnas tubulares abiertas. las técnicas utilizadas por Schomburg (1979) 4 y Dandeneau (1979) 4.34 Aplicaciones ambientales Los análisis ambientales se enfocan a la detección y/o cuantificación de muchas substancias diferentes en una diversidad de matrices. Las mismas columnas se usan para la separación de pesticidas y compuestos aromáticos clorados. En muchos casos el problema inicial es la obtención y preparación de la muestra. compuestos clorados mezclados en el aire. En Estados Unidos. En estos análisis cromatográficos se usan fases estacionarias de compuestos aromáticos para mejorar la separación de los solutos. Con algunas excepciones los métodos de análisis oficiales son menos sensitivos y consumen mayor tiempo que los métodos que se desarrollaron en los comienzos de la cromatografía. la agencia de protección ambiental (EPA) especificó procedimientos para el monitoreo de efluentes industriales en 1977. Estos análisis pueden ir desde químicos de pesticidas y herbicidas hasta hidrocarburos aromáticos polinucleares (PAHs). En muchos casos las agencias de regulación de calidad tienen procedimientos estándar específicos para el análisis de materiales dados en una matriz dada. podrían ser empleadas para establecer que la precisión del sistema se extiende a los niveles medidos para el soluto en cuestión. sino también de los sistemas analíticos particulares. como desactivar el puerto de inyección del cromatograma. Las muestras de agua son muy variables. desde agua potable hasta aguas industriales. agua y tierra. Los métodos 603 hasta el 613 separan en 13 clases los 113 contaminantes orgánicos que son monitoreados por cromatografía de gases. Cuando la cuantificación es importante. Para solutos termolábiles se requieren columnas frías de inyección (tabla 3). esto es también cierto para otros solutos activos como los pesticidas.

Ramsey y Flanagan (1982) 4. Para esto se utilizan columnas tubulares abiertas de diámetro largo muy apretadas para llevar a cabo la separación de varios anestésicos en menos de 7 minutos. et al (1985) 4. clorobutanol. Se puede incrementar la forma inerte de las columnas de sílica para permitir un análisis directo de estas drogas sin derivatizar. las empaquetadas y las tubulares abiertas. esteroides. Es probable que con la columna DB-624 se pueda tener un análisis más rápido y mejor. usaron inyecciones de espacio principal o “headspace” en dos columnas empaquetadas diferente y con una detección simultánea por captura de electrones-ionización de flama (FID-ECD) para facilitar la detección e identificación rápida de estos solutos en las muestras de sangre de pacientes envenenados. etc. inyectaron muestras simultáneas de drogas en dos columnas . OV-17/H3PO4 Barbitúricos SP-2250 1. nbutano. y su derivatización es normalmente requerida para su análisis en columnas empaquetadas. repelentes o anestésicos) los cuales incluyen bromocloro -difluorometano. et al. para lo cual se requiere un sistema de detección rápido y normalmente se utiliza uno de conductividad térmica.35 Tabla 3. La drogas son frecuentemente solutos más activos. En estudios de derivatización de aminas disfuncionales. Jacob. las columnas empacadas llevan a cabo la separación en 28 minutos. Los agentes más comunes en estos casos son los solventes (aerosol. En algunos casos.5. Algunas veces el envenenamiento de pacientes por solventes orgánicos volátiles son evidentes por el hedor del paciente al respirar. pero en otros casos el diagnóstico es facilitado por análisis de sangre. tetracloro de carbono. estrógenos OV-17 17 Alcoholes en sangre Carbopak/SP-1000 PEG Drogas Anfetaminas Apiezon/KOH Antidepresivos SP-2250 Alcaloides SP-2250.17 Diuréticos OV-17/H3PO4 Frecuentemente es deseable el análisis de un anestésico presente en el aire suministrado a un paciente del que se encuentra en la atmósfera del cuarto. Alm. todas las drogas examinadas producían dos derivados estereisómeros que eran resueltos en picos bien formados bajo las condiciones que ellos usaron. (1983) 4. la derivatización es empleada para aportar estabilidad térmica y se puede utilizar en ambas columnas. Fases estacionarias recomendables para las aplicaciones biológicas y químicas4 Solutos Columnas empaquetadas Columnas tubulares Clinicas/Biomédicas Cetosteroides Silar 5CP 225 Colesterol. establecieron que con excepción de la efedrina.

No . así como el control de otros materiales enológicos. Análisis de una droga ilegal en un analizador de detector y columna doble4. Por lo tanto. o tipificar variedades que no contengan algún compuesto específico que las identifique (como sucede en la mayoría de casos). Controlar el momento en que se desarrollan estas fases es importante debido a las alteraciones organolépticas que conllevan. Esta información es un instrumento útil para el seguimiento del producto en el proceso productivo. Fig. Por ello. a partir de la evolución de ciertos compuestos volátiles. ya sea mediante estudio bibliográfico o por detección olfatométrica. entre ellos los vitispiranos. se calcula el momento en el que tienen lugar las fases de autólisis y postautólisis durante la crianza. 12. La información que nos puede suministrar la GC en el control de calidad será más grande cuanto mejor conozcamos el perfil cromatográfico de la fracción aromática de nuestro producto. Concretamente en la cava. como son los tapones y las barricas. hay que disponer de un amplio banco de datos del mismo en las diferentes etapas de elaboración y en diferentes adiciones. para generar los datos de la Fig. Aplicaciones en la industria La cromatografía de gases es muy útil cuando pretendemos identificar los compuestos que determinan una característica aromática conocida. y correlacionar estadísticamente determinados compuestos con ciertas anomalías.36 diferentes. es necesario conocer los umbrales a partir de los cuales mejora o se desvirtúa nuestro producto. una empleando FID y la otra con detección de nitrógeno/fósforo (NPD). 11. Algunos controles importantes a efectuar durante la fase de crianza en vinos y cavas son métodos específicos para la determinación de fenoles volátiles y compuestos azufrados.

se realiza investigación sobre la degradación enzimática de compuestos azufrados. .37 obstante. Aplicaciones prácticas Dentro de la investigación que se realiza en el Instituto de Biotecnología. El azufre al ser oxidado durante el proceso de combustión. no es posible conocer sus propiedades aromáticas. Se hacen análisis de componentes de la acrilamida. Para determinar los grados de alcohol en bebidas como la cerveza. presentes en petróleo crudo y sus derivados. Otras aplicaciones También se hacen análisis cromatográficos para la determinación de metanos trihalogenados. el análisis por cromatografía de gases no nos permite definir el perfil aromático del vino analizado. La cromatografía de gases nos permite cuantificar la concentración de compuestos azufrados. por tanto. La determinación de aceites minerales en el agua. el análisis de los productos (fig. El problema se agrava en aquellos compuestos para los que no disponemos de patrones sintéticos y. se trata de análisis todavía demasiado laboriosos para constituir aplicaciones rutinarias de control. Para la determinación de componentes aromáticos en alimentos y bebidas. en el departamento de Ingeniería Celular y Biocatálisis. el cual forma parte de la lluvia ácida. y la espectrometría. La detección de los productos de degradación se realiza por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Análisis de herbicidas en campos de golf. como el dibenzotiofeno.12). Se determinan los residuos de ditiocarbamato en los alimentos dietéticos. los cuales dañan la salud por la desinfección del agua de piscinas con cloro. En todo caso. se convierte en un contaminante atmosférico al formar ácido sulfhídrico.

00 26. Se anexa publicación al finaldel trabajo. Abundance Scan 550 (11.00 20.00 12. 12 gráfica de detección de dibenzotiofeno.D 5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000 Time--> Time 4. .00 28. aún a pesar de que no formen parte del contenido original.00 6. Entre las aplicaciones de más importancia está la del ámbito de alimentos.38 Abundance TIC: DBT.00 16.00 10.00 A) cromatografía de gases.00 8.00 14.00 24.00 22.D 184 600000 550000 500000 450000 400000 350000 300000 250000 200000 150000 139 100000 50000 63 32 50 92 215 246281 327 377 429 479 530 562 605 200 250 300 350 400 450 500 550 600 659693 650 700 m/z--> m/z 0 100 150 B) espectrometría de masas Fig. Para ejemplificar este punto hacemos referencia al siguiente artículo de divulgación.00 18.368 min): DBT. debido a que es de suma importancia tener conocimiento de los componentes cuya presencia cae dentro de los parámetros permitidos en ciertos productos.

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. El flujo de la función ProSep se muestra en la siguiente figura. cerrando el respirador split transfiriendo los solutos dentro de la columna analítica (paso3). los componentes inyectados son organizados en la precolumna de acuerdo a su punto de ebullición. Todos estos pasos son monitoreados bajo softwares de la marca ProSepTM.41 El sistema ProSep consiste de 4 componentes. la columna de preseparación modula la temperatura. Debido a que ProSep provee alguna separación. Fig. Después de la eliminación del solvente. aquí el solvente. 13 Columnas de separación tipo ProSepTM 7. el módulo de precolumna. el cual es el puerto de entrada. el analito y la matriz son ordenados en el puerto y los solventes de bajo punto de ebullición son rápidamente eluidos (paso 2). dos módulos control y una precolumna de vidrio o sílica la cual está unida dentro de la precolumna de manera similar al alineador de vidrio split/splitless (partido / sin partir) (paso 1). se abre de nuevo el respirador split se abre de nuevo y la columna de preseparación aumenta la temperatura para hervir a los componentes no deseados de la matriz (paso 4). Cuando ya se han transferido todos los solutos de interés. La inyección con el ProSep en el cromatógrafo de gases de manera split.

14 Cromatógrafo de gases con columnas y detectores ProSep7. habiéndose convertido respectivamente e independientemente en dos métodos analíticos en los que se conjuntan una gran rapidez. su versatilidad como métodos analíticos para la determinación estructural y separación de compuestos orgánicos. Cromatografía de gases y espectrometría de masas Durante los últimos veinte años la espectrometría de masas (EM) y la cromatografía de gases (GC) han demostrado repetidamente. sensibilidad y poder resolutivo. a medida que estos son eluidos en serie de la columna cromatográfica. Conectando la salida de un cromatógrafo de gases a la cámara de ionización de un espectrómetro de masas de puede obtener información estructural (espectro de masas) para cada uno de los componentes de la mezcla original. previamente inyectada en el cromatógrafo.42 Fig. Dichas limitaciones surgen del hecho de que mientras la cromatografía de gases pueda separar los componentes . gracias al gran potencial demostrado por los primeros intentos de combinación y a su rápido desarrollo. De esta forma las limitaciones inherentes de la cromatografía de gases quedan considerablemente reducidas en el análisis cualitativo. en la actualidad la combinación directa cromatográfica de gases-espectrometría de masas se reconoce como uno de los sistemas más eficaces a disposición del químico analista para el estudio e identificación de mezclas complejas de productos orgánicos. en gran número de laboratorios en todo el mundo. Ambas técnicas han alcanzado últimamente un alto grado de desarrollo en sus diversas facetas prácticas. Aunque en la práctica hasta 1957 la cromatografía de gases y la espectrometría de masas avanzaron por caminos diferentes pero paralelos en el campo del análisis orgánico.

en sentido riguroso más que información preliminar sobre su estructura. Sin embargo. Asimismo. sobre todo en los casos que se requiere una programación de la temperatura del cromatógrafo de gases y se carece de compuestos patrón. una de las áreas más activas de la combinación cromatografía de gases-espectrometría de masas es en conclusión la identificación de compuestos nuevos o no sospechados previamente. etc.43 individuales de una mezcla con un alto grado de poder resolutivo. no puede dar. cuando esta metodología se intenta llevar a extremos. los detectores cromatográficos solamente responden en general a la cantidad de la muestra eluída de la columna. A este respecto. sino tan solo un medio de separación física.). Hay que señalar como esencial que cualquier columna cromatográfica no es un instrumento analítico. fósforo. . como el análisis de mezclas de productos naturales de extrema complejidad. los resultados así obtenidos carecen de la precisión cualitativa. desconectando ciertos detectores específicos (por ejemplo captura de electrones. Por ello la utilización de los datos basados en el tiempo de retención absoluto o relativo puede resultar un método adecuado para la identificación tentativa de ciertos compuestos o mezclas relativamente simples o para las cuales se dispone de los correspondientes patrones.

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