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Cromatografia de Gases

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1

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

INSTITUTO DE BIOTECNOLOGÍA
METODOS EN BIOTECNOLOGIA

CROMATOGRAFÍA DE GASES

Biol. Laura Patricia Olguín Pérez Biol. Héctor M. Rodríguez Magadán

8 de Junio de 2004

2 CONTENIDO Antecedentes/Historia Mecanismos de la cromatografía Fundamentos teóricos Nomenclatura Fase móvil Puerto de inyección Horno de la columna Fase estacionaria Soporte Columna cromatográfica Detectores Métodos Análisis cualitativo Métodos de coincidencia Aplicaciones Comida, saborizantes y fragancias Químicos y petróleo Ambientales Médicas y biológicas Industria Otras aplicaciones Aplicaciones prácticas Cromatografía de gases como método principal Innovaciones Páginas web Bibliografía 1 2 2 5 6 6 7 8 9 10 15 20 20 21 31 31 34 35 35 37 38 38 40 41 45 45

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Antecedentes/Historia
La cromatografía es un método físico de separación en el cual los componentes a ser separados son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria mientras la otra se mueve en una dirección definida. Los componentes son separados por sus diferentes tazas de migración (IUPAC). La cromatografía puede ser clasificada por su utilidad y en base al material que se utilice como eluyente para separar los solutos. De acuerdo a su utilidad la cromatografía se clasifica en: analítica, utilizada para determinar los químicos presentes en una mezcla y en que concentración; y preparativa, utilizada para purificar grandes cantidades de químicos. La primera técnica cromatográfica fue ideada por el botánico ruso Mikhail Tswett en 1906, quien utilizó alúmina para separar los pigmentos coloreados de las hojas de las plantas. Tswett en su experimento original, metió dentro de un tubo de vidrio un fino polvo (sacarosa) para producir una columna de una altura deseada. Posteriormente, extrajo los pigmentos de hojas y los colocó en un solvente (éter de petróleo) y agregó un poco de la solución dentro de la columna. Cuando toda la solución había pasado a través de la columna se formó una estrecha zona inicial bajo la capa inicial del adsorbente. Después agregó más solvente y aplicó presión en la parte de arriba de la columna. Mientras el solvente iba pasando a través de la columna, los pigmentos se iban separando individualmente (Fig. 1). La clave del éxito de la columna de Tswett, fue la aplicación de la mezcla dentro de la columna en una zona inicial estrecha y la posterior aplicación del solvente fresco.

Fig. 1. Columna cromatográfica de Tsweet3. Y = amarillo, G = verde

2 En 1931, fue redescubierta por Richard Kuhn al utilizarla para el análisis de polienos. Los primeros en utilizar un gas como fase móvil fueron A. T. James y A. J. Martin en 1952, para separar ácidos grasos cortos. Posteriormente Dabrio, en 1971, la utilizó para separar metilaminas, aminas alifáticas y homólogos de piridina.

Mecanismos de la cromatografía
El movimiento de las substancias durante la cromatografía es el resultado de dos fuerzas oponibles, la fuerza de manejo de la fase móvil y la fuerza resistente o acción de retardo del sorbente. La fuerza de manejo mueve las substancias del origen de la columna en dirección del flujo de la fase móvil. La acción de retardo impide el movimiento de las substancias arrastrándolas del flujo y adhiriéndolas al adsorbente. Las moléculas se encuentran alternando entre estar pegadas al adsorbente o despegadas en el flujo, esto da como consecuencia que pese a que el flujo es constante, solo una fracción de las moléculas se están moviendo. Las substancias que se mueven más lentamente es porque están siendo unidas más fuertemente a la fase estacionaria, mientras que aquellas que se mueven más rápidamente es por que son menos solubles o de poca afinidad. La habilidad de tener una migración diferencial entre los componentes de la mezcla es el resultado de la selectividad del sistema cromatográfico. El flujo de la fase móvil no es selectivo en el sentido de que no afecta el movimiento de los solutos. Como parte del sistema cromatográfico, sin embargo, la fase móvil debe ser un poco selectiva para ayudar a la absorción de los solutos con la fase estacionaria. La fase estacionaria también juega un papel importante dentro del cromatograma debido a su acción resistiva como una fuerza selectiva de la velocidad de flujo de los solutos.

Fundamentos teóricos
Se han propuesto muchas teorías con complejos modelos matemáticos para explicar el comportamiento de los solutos en las columnas cromatográficas. Las más estudiadas son: • • • Teoría de las placas teóricas (Martin y Synge) Teoría cinética (Van Deenter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer) Teoría desarrollada para columnas capilares (Golay)

La principal es la teoría de las placas teóricas (theoretical plates theory), la cual plantea que una columna cromatográfica está constituída por una serie de placas contenidas en la fase estacionaria. Supone como constante el volumen de la fase estacionaria en cada placa; que el volumen de fase móvil entre placas es constante; que las dos fases están en equilibrio en cada placa, y que el valor de coeficiente de distribución es constante e independiente de la concentración del soluto. Desventaja: además de que se basa en muchas suposiciones, la principal desventaja es la falta de conexión entre la eficiencia de la columna y las propiedades fisicoquímicas de la partícula.

Difusión axial o longitudinal del soluto en la fase móvil. El término relacionado con la transferencia de masas viene dado en función del diámetro de la columna. debido a las diferentes rutas que puede tomar el analito durante su migración a través del empaque. El coeficiente relacionado con la difusión molecular tiene un valor de uno debido a que la distancia que recorre la partícula es igual a la longitud de la columna. adimensional tr= tiempo de retención de un compuesto. La ecuación de esta teoría es un caso particular de la ecuación de la teoría cinética.3 La ecuación de esta teoría1: N=16(tr/w)2 N= número de placas teóricas. La ecuación de Van Deemter1: HETP o H=A+B/u+Cu HETP o h= altura equivalente a una placa teórica. se relacionan las magnitudes que caracterizan la geometría del soporte y el término C se presenta de manera distinta pues en este tipo de columna es más importante la fase móvil que el tamaño de partícula. milímetros. minutos La teoría cinética considera el comportamiento en un proceso cromatográfico en función de los factores cinéticos que intervienen: Variaciones en las velocidades de flujo. pues en este tipo de columna es más importante que el tamaño de partícula de relleno. . en este caso se omite el término A pues su valor es despreciable. cm/seg A= 2λdp difusión aparente B= 2γDm coeficiente del término debido a la difusión molecular C= (8/π)(k’/[1+ k’]2)(df/Ds) coeficiente del término debido a la resistencia a la transferencia de masas En la teoría para las columnas capilares se considera que la difusión aparente no contribuye de manera apreciable al ensanchamiento de los picos en este tipo de columnas. minutos w= ancho del pico a media altura. Resistencia a la transferencia de masas entre la fase móvil y la fase estacionaria. u= L/ tr aire promedio de la velocidad lineal.

u= . Factor de capacidad (k’) Depende de las propiedades termodinámicas del sistema (K) y además es función de las características de la columna en particular. Probabilidad de encontrar una molécula determinada de soluto en la fase estacionaria o en la fase móvil Relación frontal (Rf) La relación frontal y el factor de capacidad son dos maneras de medir el mismo fenómeno.(k/η) (dP/ dz) u= velocidad lineal en un punto de la columna z=distancia a la entrada de la columna η= viscosidad del gas dP= gradiente de presión de un elemento dz= longitud de columna k=constante de permeabilidad. la compresibilidad o factor de obstrucción Coeficiente de reparto (K) Propiedad termodinámica del sistema soluto-fase estacionaria-fase móvil independiente del proceso cromatográfico. Tiempo muerto ( tm) Es el tiempo de retención de una sustancia insoluble en la fase estacionaria (K=0). otra que indica la velocidad media. Representa la relación entre las velocidades medias del soluto y la fase móvil en su recorrido por la columna.4 Circulación del gas portador La ley de Darcy1 correlaciona la velocidad lineal de un gas que circula por una columna con el gradiente de presión. . Concentración de soluto en la fase estacionaria frente a concentración de soluto en fase móvil a temperatura constante. Las respectivas integraciones de la ecuación permiten obtener una que relaciona el valor de la presión con la posición de la columna.

se dice que la cromatografía está siendo revelada. Por tratarse de un método donde se separa por elución es mejor referirse a tiempo de elución más que a distancias recorridas. El volumen de retención específico está delimitado por la temperatura. sobre todo. en el conocimiento del peso de la fase estacionaria en la columna. Retención relativa (rx:p) Conservan las propiedades del coeficiente de reparto y son fáciles de calcular. Altura equivalente a una placa teórica. Para poder hacer comparaciones entre columnas es necesario establecer condiciones similares de trabajo. Cada sistema cromatográfico está compuesto por una fase móvil (solvente) y una fase estacionaria (la columna). el cual se obtiene a partir de la ecuación que involucra además la compresibilidad del gas portador. Nomenclatura Desde el primer cromatógrafo de Tswett hasta los cromatógrafos de ahora siguen utilizando la misma nomenclatura para sus componentes: Un tubo de metal o vidrio se llena con un sólido activo (adsorbente) para formar una columna cromatográfica. su manejo se dificulta al momento de elegir un patrón adecuado. La mezcla a separar es aplicada en una zona inicial y es lavada con un solvente. y el lavado de la zona inicial para formar el cromatograma es la formación o desarrollo del mismo. Cuando el agente a detectar se trata con un agente químico para formar un color. líquido de lavado o revelador. La combinación del solvente.5 Volumen de retención (VR) Es el volumen de fase móvil necesario para transportar el soluto de un extremo a otro de la columna. . Resolución Cada sustancia se desplaza a una velocidad característica dada por el valor de su relación frontal en dichas condiciones. Se utiliza para disminuir el efecto de errores. Se denomina volumen de retención neto al volumen verdadero y corregido. Eficacia Una columna será más eficaz mientras mayor sea el número de placas teóricas que tenga. la mezcla y el adsorbente son llamados sistema cromatográfico. La serie de resultados se denomina cromatograma.

dando lugar a la cromatografía gas-sólido (CGS). Columnas Fase estacionaria. Horno de la columna. Sistema de registro de datos. análisis frontal y desplazamiento. Puerto de inyección (inyection port) Es un dispositivo que permite la introducción de la muestra en la corriente del gas portador. pero en mucho menor proporción. Cuando la fase móvil es un gas. Los componentes son separados por sus diferencias de partición entre la fase móvil gaseosa y la fase estacionaria en la columna. Cuando la fase móvil es líquida. permitiendo que sean separados en tiempo y espacio. Si el soluto es separado del adsorbente por lavado antes del análisis. capa fina. El más común es el inyector de líquidos. solamente se utilizan columnas y el proceso siempre se realiza por elución. entonces se le llama elución y al agente a ser analizado se le llama eluyente. También provee información cualitativa y cuantitativa de los componentes presentes en una mezcla.). este movimiento es inhibido por la adsorción que presenta el analito tanto en las paredes de la columna cuanto en los materiales empaquetados en la misma. Fase móvil (mobile phases) Gaseosa. líquida o fluido supercrítico (potencia disolvente de los fluidos a temperaturas y presiones superiores al punto crítico). 3. que puede utilizarse para sólidos (en disolución) y gases . Existe cierta variedad de diseños según el tipo de muestra que se trata de analizar. Existen tres formas de desarrollar este proceso: elución. la técnica suele recibir un nombre relacionado con la forma en que se dispone la fase estacionaria (columna. Fase móvil. La cromatografía de gases es una técnica analítica que puede ser utilizada para separar compuestos orgánicos basada en sus volatilidades. etc. Detector. al líquido que sale de la columna se le nombra efluente. 5. También se utilizan absorbentes. 7. 2. recibe entonces el nombre de cromatografía gas-líquido (CGL). Puerto de inyección. La forma más usual de hacer cromatografía de gases es utilizando un líquido como fase estacionaria. El gas portador lleva las moléculas del analito a través de la columna.6 Si los componentes de la mezcla son analizados cuantitativamente. 6. papel. 4. Argón o Nitrógeno. recibe el nombre de evaluación o cuantificación. Estas fases son generalmente gases inertes como Helio. Un cromatógrafo de gases consiste de: 1.

Varios tamaños y ángulos. líquidos de 0. El inyector se trata de una cámara situada a la entrada de la columna y calentada independientemente de ésta (a temperatura superior del punto de ebullición del componente más volátil de la muestra. La técnica de inyección de muestra recomendada para líquidos en cromatografía de gases es el método de flujo del solvente. removible. Inyección de la muestra evaporada e introducirla a la columna a través de un septo de plástico (estable a la temperatura de inyección.1-10 µl y gases 0. Horno con columna capilar. Jeringas: varios estilos disponibles. Precisión de la inyección +/-1%. Temperatura de inyección debe ser de 10° a 50° mayor a la temperatura de la columna. Volúmenes de la muestra desde 1 µl.5-5 ml. . que suele tener una membrana de caucho a través de la cual se introduce la muestra con la ayuda de una microjeringa hipodérmica. y finalmente otra bolsa de aire. Incremento de la precisión al utilizar circuitos (gas sampling loops) y válvulas para introducir cantidades constantes. después se coloca la solución muestra. Percha de la columna Columna de capilaridad Fig. El solvente puro es introducido a la jeringa seguido de una bolsa de aire. 2. debe ser reemplazado periódicamente). y en el otro al detector. generalmente). Equipo no caro y requiere temperatura constante. 2). La columna debe estar en el centro del horno sin tener contacto con las paredes (Fig. Dentro del horno la columna se conecta en un extremo al puerto de inyección. Inyección rápida para introducirla en una sola descarga y no debe haber aire al momento del llenado. Aguja fija.7 (mediante jeringas especiales). donde se debe tener una buena regulación de la temperatura. Se lee el volumen de la muestra y posteriormente se inyecta al cromatógrafo. Horno de la columna En el interior se sitúa la columna.

intercambio iónico y de filtración sobre geles porosos. los ácidos no pueden analizarse en fases de carácter básico. Por otra parte. al menos teóricamente. De aquí que en series homólogas el orden de elución sea el de los puntos de ebullición crecientes. Pero cuando la viscosidad de la fase estacionaria se hace demasiado alta. Para obtener la mejor resolución de dos substancias dentro de la columna. Cuando es un líquido.8 Fase estacionaria (stacionary phase) La fase estacionaria es la encargada de separar los componentes de la muestra. Con frecuencia la reacción no ocurre con la fase misma. y el líquido de la fase estacionaria debe tener una baja viscosidad y una alta y diferencial solubilidad. ni los aldehídos en THEED (tetrahidroxietiletilendiamina). dispuestos sobre un sólido que actúa como soporte (columna). Para la elección de la fase estacionaria se deben de tener en cuenta las siguientes consideraciones: Los límites de temperatura del líquido elegido. salvo en casos especiales. Esta puede ser un sólido o un líquido. pero de estructura química diferente. Esto depende del punto de ebullición y el coeficiente de actividad de los solutos en dicha fase. Este fenómeno podría impedir el uso de una fase que para diferentes solutos resultaría excelente. Dependiendo del . generalmente la eficacia de la columna baja enormemente. pues reaccionan para formar acetales. El sólido de la fase estacionaria puede ser de aluminio. Cuando la fase estacionaria es un sólido. que se quedan en la columna. considerando su viscosidad y volatilidad. independientemente de la fase empleada. Por ejemplo. sino con impurezas en ella. La elección de la fase se hace teniendo en cuenta la polaridad de los solutos a separar y de su tiempo de retención en la fase a medida que su polaridad aumenta. esta última es la forma más usual de hacer cromatografía de gases. cada mezcla particular debe tener. Puesto que el grado de separación de dos sustancias depende de sus respectivos coeficientes de reparto en la fase estacionaria. podrán separarse fácilmente con base en su distinta solubilidad. La posibilidad de reacciones irreversibles con la columna. carbón o tierra de diatomeas. dos sustancias de punto de ebullición idéntico. una fase que efectúe la separación mejor que las demás. o se alcanza el punto de fusión. sílica gel. La fuerza de interacción soluto-solvente que han de influir en los coeficientes de actividad de los componentes de la mezcla. la interacción que puede tener con la fase móvil se puede clasificar en: Adsorción. se requiere tener una fase estacionaria donde su retención relativa sea mayor a la unidad. sino más bien de una visión de conjunto de la mezcla compleja que se desee separar. la interacción con la fase móvil recibe el nombre de reparto. La elección de la fase estacionaria dependerá no solo de la presencia de polaridad dentro de los solutos. Un descenso en la temperatura de la columna aumenta el tiempo de retención de los solutos y en ocasiones puede mejorar las separaciones.

polifenil éter. Sterchamol. aceite de silicona. Las fases se pueden clasificar en: • No polares: para separar sustancias poco o nada polares. El cromosorbo G es utilizado en columnas con poca fase estacionaria y se obtienen mejores eficacias. C-22. principalmente se trata de sílice hidratada microamorfa. Sil-O-Cel. Sebacato de dietil (2 etil hexilo). • • Columnas con fase mixta: para resolución de separaciones parciales con dos o más líquidos. gomas de silicona. productos rosados utilizado para ladrillos refractarios. Todos los soportes porosos tiene cierta actividad residual debida a la presencia de iones metálicos o defectos de superficie. Soporte (Support) La función básica del soporte sólido es sostener la fase estacionaria. Esta actividad modifica el desarrollo normal del cromatograma. Son de mayor superficie y mejor resistencia mecánica. estabilidad térmica. pero son los que presentan mayor actividad superficial residual. El más utilizado son las gomas de silicona OV-1. productos blancos utilizados para filtración. Con carácter ligeramente polar: utilización general. por lo tanto este efecto debe ser disminiudo desactivando el soporte. tres y cuatro líquidos para formar la columna final. para trabajar hasta más de 300ºC donde se consiguen eficacias de columna extraordinarias. inactividad química y baja resistencia al paso de un gas. succinato de butanodiol. También se puede hacer por lavado ácido .9 tipo de material es la temperatura máxima a la que se puede trabajar. buena selectividad para mezclas mixtas. El cromosorbo A es utilizado en escala preparativa. Una manera es cubrirlos con la misma fase estacionaria. Tiene menor actividad superficial residual. Aunque es más laboriosa y poco práctica la representación gráfica esto ha sido simplificado al utilizar programas computacionales. Celatom. De polaridad media o alta: no aptos para hidrocarburos no aromáticos. dureza mecánica. la calcinación de esta tierra dará lugar a diversos productos según la forma y temperatura de tratamiento. OV-101 o SE-30. Celita. y a los grupos OH de las moléculas. Posibilidad de separar hasta 50 sustancias mezclando dos. Aceite de Ucon LB-550X. Fundente carbonato sódico. El soporte debe de tener elevada superficie por unidad de volumen. la cua se adsorbe fuertemente en estos puntos y el efecto sobre el soluto es menor. Carbowax 1 540. Sin fundente y a mayor temperatura. La mayoría está hecho de tierra de diatomeas (diatomita o Kieselguhr).

3. El más común es la silanización. aunque el sistema más utilizado es hacer reaccionar los grupos hidroxilo de la superficie del soporte con reactivos adecuados. de diámetro. acero inoxidable o tubos de vidrio. La capacidad de carga se define como la cantidad de muestra que se puede inyectar sin pérdida apreciable de eficacia y está relacionado con la cantidad de fase estacionaria por unidad de longitud de la columna. las columnas son empacadas mientras se están doblando. 1952). Columna cromatográfica Las columnas están hechas de cobre. Aunque para casos extremos pueden presentarse aún fenómenos de adsorción que se eliminan añadiendo una pequeña cantidad de fase estacionaria muy polar (Carbowax). Excepto para las de vidrio. y pueden encontrarse comercialmente con el mismo nombre que el material original (Cromosorbo) o nombres especializados. El criterio para la diferenciación de columnas es con base en dos propiedades de éstas: • • Relación de fases: volumen de fase móvil/volumen de fase estacionaria. dobladas o enrrolladas. 4. en las que Vm/Vs y k aumetan en orden progresivo1: 1. Las columnas analíticas tienen una longitud de 1-6 m. de longitud y de 2-4 mm. Clásicas de relleno Capilares rellenas Capilares de capa porosa Capilares abiertas La elección de las columnas es lo más crítico. en el que se hace reaccionar con dimetil diclorosilano. . por lo tanto. siendo así los dos extremos en la gama de columnas utilizadas en la cromatografía de gases. 2. posteriormente fue introducida la columna capilar. es la parte más importante del cromatógrafo.10 o básico. Vm/Vs Permeabilidad: representada por una constante dependiente de las características geométricas de la columna. La primera columna utilizada fue una de relleno (James & Martin. k Con base en estas dos características se encuentran los siguientes tipos de columnas. Según se encuentre en ella distribuida la fase estacionaria y el valor que alcance la relación de fases se originan los diferentes tipos de columnas. existen dos diferencias fundamentales que deben ser cosideradas para la elección de la columna: la cantidad de muestra que admiten (capacidad de carga) y los valores de los flujos del gas portador. La separación de la mezcla se realiza dentro de la columna.

. Estas columnas son mejores porque se les puede aplicar una velocidad óptima de flujo más rápida (aprox. 3). La sobrecarga se alcanza cuando la concentración de soluto en la fase estacionaria es tan grande que la isoterma de distribución deja de ser lineal. para rellenarlo se debe introducir un extremo de ésta en el relleno preparado con la ayuda de un embudo. Además. El soporte sólido es frecuentemente tierra de diatomeas. 2. 1. Las columnas de capilaridad originalmente contenían una película del líquido cubriendo la pared interna de la columna de vidrio o metal.11 Las columnas empaquetadas contienen un soporte sólido inerte con una cubierta delgada de la fase líquida. Debido a este tipo de columnas. los análisis han podido ser más sensibles.. cuanto más rugosa sea su superficie mayor capacidad de carga se obtendrá. mientras que por el otro extremo se hace vacío con una bomba. El tubo de la columna debe estar perfectamente limpio. la relación entre los diámetros del tubo y de la partícula de . Por esta razón es el único tipo de columna que se usa a escala preparativa. si es necesario. no excede un milímetro. La cantidad de muestra que admite una columna capilar sin que sufra sobrecarga es mucho menor que en una columna clásica.Columnas capilares rellenas Se distinguen de las columnas clásicas de relleno por le diámetro interno del tubo. La suspensión del soporte en la disolución de la fase estacionaria debe agitarse mecánicamente y. Longitud 1-10 m Diámetro interno 2-4 mm hasta 5 cm en escala preparativa Tamaño de la partícula de relleno diez veces menor que el diámetro del tubo Capacidad de carga grande Relación de fases pequeña Permeablilidad baja A mayor tamaño de partícula del relleno mayor será su permeabilidad. Como tapones es conveniente utilizar lana de vidrio o cuarzo y una malla metálica fina (Fig. Las columnas de capilaridad ahora contienen una capa de revestimiento sólido dentro de ella con poro en el centro.Columnas clásicas de relleno Constituídas por un tubo de metal o vidrio con relleno de soporte granular con la superficie recubierta por una película de la fase estacionaria. de 25 ml por min en lugar de 1 ml por min). La fase líquida puede tener una viscosidad baja y una alta solubilidad para la mezcla de componentes. calentar ligeramente para evaporar la mayor parte del solvente.

. Guichon (1966) y Halasz (1967) han hecho estudios muy detallados de este tipo de columna. . Después se procede al estirado manteniendo fija la varilla (Fig. se cierra un extremo y se evapora el agente dispersante quedando así adheridos a la pared del capilar.. 4.5 mm Tamaño de la partícula de relleno varía entre el de un soporte clásico y las partículas de carbono producidas por la pirólisis de una sustancia orgánica. La fase estacionaria va depositada en la pared interior del tubo que actúa como soporte. La fase estacionaria se introduce de manera similar a las columnas capilares abiertas (Fig. Diámetro interno de 1 mm. Longitud de 10-50 m. Permeablilidad valores máximos (al igual que las capilares abiertas) El procedimiento dependerá de la naturaleza de la columna y del soporte. Esto hace que sea un relleno más irregular y una permeabilidad del orden de diez veces superior. Columna metálica: se prepara una suspensión del soporte. entonces al capilar resultante contiene ya el soporte en su interior. 3. es más sencillo cuando se trata de tubos de vidrio. Tamaño de la partícula de relleno de 3 a 5 veces Capacidad de carga pequeña Relación de fases grande Permeablilidad mayor que las clásicas Al ser mayor la permeabilidad pueden construirse columnas más largas (10-50 m). debido a lo difícil de introducir un soporte en un tubo capilar metálico de esa longitud.Columnas capilares de capa porosa En este caso el soporte es depositado en la pared interior del tubo. Longitud de 25-200 m Diámetro interno de 0.1-0.Columnas capilares abiertas También conocidas como columnas Golay. Este tipo de columnas no está comercializado. Se rellena un tubo Pyrex con el soporte elegido antes de estirarlo. se llena la columna con la suspensión. 3). Columna de vidrio: similar al de columnas capilares rellenas. 3). 1958). Por el contrario.12 relleno es del orden de tres a cinco veces. quien fue el primero en utilizarla (Golay. después es recubierto por la fase estacionaria y la parte central del capilar permanece vacía. La diferencia consiste en introducir una varilla de acero inoxidable un el tubo de vidrio y situar el soporte entre ambos.

Conforme aumenta el tiempo de retención. Los flujos del gas portador que se utilizan en columnas capilares suelen ser del orden de 0. ya que la pared del mismo sirve como soporte y su capacidad de retención del solvente influirá notablemente en la uniformidad de la película formada. Experimentar con varias rampas para el resto de los componentes. Algunos GC permiten programación más compleja que el simple incremento gradual de la temperatura. La relación de división (flujo al exterior/flujo que pasa por la columna) suele oscilar entre 50 y 120. se puede reducir la retención de un material aumentando la temperatura de la columna. . Esto permite disminuir la cantidad de muestra que pasa por la columna (que queda reducida a la fracción que indica la relación de división) y aumentar la velocidad lineal del gas portador en el sistema de inyección en la cantidad indicada por la relación de la división (la difusión molecular en esta parte del instrumento se hace muy pequeña). cuya finalidad es permitir la entrada en la columna de una pequeña fracción solamente del flujo que pasa por el sistema de inyección. Uno de los métodos consiste en llenar el tubo con una disolución diluida de la fase estacionaria en un disolvente volátil.5-3 ml/min.1-0. Como la solubilidad de un gas en un líquido disminuye conforme la temperatura se eleva. cerrar un extremo e introducirla en una estufa con una temperatura superior al punto de ebullición del solvente. Determinar la temperatura inicial y el tiempo basado en la mejor separación posible de los primeros picos. La naturaleza del tubo y el procedimiento seguido para su limpieza son de gran importancia en este tipo de columnas. La temperatura debe de estar dentro de Tmin/Tmax de la columna. mientras que en una columna clásica ascienden a un orden de 30-100 ml/min. la fase quedará depositada sobre la pared del capilar. Para poder utilizar la columna capilar con éxito será necesario intoducir entre el inyector y la columna un dispositivo denominado divisor de flujo. Repetir uno para los últimos picos para encontrar la mejor temperatura y tiempo. Se debe considerar la solubilidad.5 mm Capacidad de carga muy pequeña Relación de fases es la más alta Debido a la pequeña cantidad de fase estacionaria por unidad de longitud de la columna tiene una capacidad de carga muy pequeña. Entre homólogos el tiempo de retención aumenta exponencialmente con el número de carbonos. cambios en la volatilidad y estabilidad de los solutos. el ancho aumenta y la altura disminuye haciendo imposible la detección después de que algunos picos han eluído. Temperatura programada. cambios en el flujo y estabilidad de la fase estacionaria. los más utilizados varían entre 50-100 m Diámetro interno 0.13 Longitud hasta 200 m. Necesita detrectores más sensibles.

Cantidad de muestra inyectada. A menor cantidad mayor eficacia. por la resistencia que opone la fase móvil a la transferencia de masas. originando tiempos de análisis muy largos y sin mejorar la resolución. 3. Clásica de relleno Capilar de capa porosa Capilar abierta Tubo o Fase estacionaria Grano de soporte Fig. Limita en cuanto a las velocidades lineales del gas portador.14 Entre los factores que disminuyen la eficacia de una columna se encuentran: • • • • • • • • Longitud de la columna. Velocidad del gas portador. . Fase estacionaria: no afecta. Diámetro de la columna. Una velocidad elevada es la óptima. Al aumentar esta disminuye la eficacia al afectar directamente en el coeficiente de reparto. Temperatura de la columna. Más importante en columnas capilares abiertas. Naturaleza de las fases. Tamaño de la partícula de relleno. Tipos de columnas cromatográficas. Gas portador: viscosidad y valores del coeficiente de difusión en la fase móvil. Cantidad de fase estacionaria.

Recuperación de la muestra: en referencia a si la muestra es destruída o no. Pueden ser clasificados por: • • • • Grado de selectividad: universales que responden a la mayoría de los solutos. Cambios en conductividad térmica. Proceso de detección: ionización. La temperatura del elemento censor depende de la conductividad térmica del gas que fluye alrededor. En un lado de la muestra el gas fluye por el filamento mientras que en el lado de referencia el gas puede pasar sobre el alambre del filamento y difundir a través de él. esto es traducido en una señal eléctrica que es amplificada y registrada al momento de salir de la columna. el otro par localizados antes del inyector o en una columna de referencia separando las resistencias de los dos pares y están acomodados en un circuito de puente. un par localizado en la salida de la columna para detectar los componentes separados mientras van saliendo. Dos pares del TCD son utilizados en cromatógrafos de gases. provocan un incremento en la temperatura del elemento el cual está siendo monitoreado como un cambio en la resistencia. óptico-espectroscópico. cada una conteniendo un filamento de alambre de tungsteno o de tungsteno con lámina de oro.15 Detectores Los detectores son dispositivos que indican y miden los solutos en la corriente del gas acarreador. Para un máximo de sensibilidad. electroquímico. Detector de conductividad térmica (TCD thermal conductivity detector) Consiste de dos celdas metálicas idénticas. Esta señal es elaborada por una comparación entre el gas acarreador puro (blanco) y el mismo gas llevando cada uno de los componentes previamente separados en la columna. Los detectores más ampliamente utilizados son el detector de conductividad térmica (TCD) y el detector de ionización de flama (FID). Los filamentos son calentados por una corriente eléctrica. como cuando las moléculas orgánicas desplazan un poco al gas portador. Modo de respuesta: dependientes de flujo de masa (cantidad de soluto independientemente de la cantidad de gas portador). dependientes de concentración (cantidad de soluto por unidad de volumen de gas portador). Un buen detector es altamente sensible (sensibilidad). El efluente fluye a través de una celda y el gas portador (He o H2) fluye a través de la otra. tiene una respuesta lineal (linearidad) sobre un amplio rango de concentración y es relativamente insensible a variaciones de flujo y temperatura (rango dinámico lineal). convirtiendo una señal no medible directamente en una señal elaborable de una propiedad física. la temperatura y la velocidad del flujo son disminuidas y se escoge un gas con mayor . específicos-selectivos con respuesta a un grupo particular de sustancias. la temperatura del filamento es incrementada.

Nox.16 conductividad térmica (la mayoría de los gases orgánicos tienen calores de conductividad bajos). con un límite de detección de ~400 pg/ml de gas portador. Su modo de detección es debido al cambio de resistencia del cable basado en la termoconductividad del gas cuando fluye a través de la columna (Fig. . con selectividad universal. Fig. la cual rompe las moléculas orgánicas y produce iones. Detector de conductividad térmica6 Detector de ionización de flama (FID flame ionization detector) El FID consiste de una flama hidrógeno/aire y una placa colectora. O2. Las muestras que salen de la columna pasan a través de la flama. H2O. se mezcla con el hidrógeno y entra a la flama. Este es un método no destructivo dependiente de concentración. La muestra debe ser un combustible. esta entra en la base del detector. Es extremadamente sensible en un amplio rango dinámico. compuesto como el NH3. CO2. CS2. 4. etc. compuestos perhalogenados. N2. La respuesta está basada en el número de carbonos y otros elementos tales como halógenos y el oxígeno presentes que reducen la combustión. La única desventaja es que destruye la muestra. CO. 4). Los iones son colectados en un electrodo parcial y produce una señal eléctrica. Hay compuestos con poca o sin respuesta al FID.

pero los más comunes son para la detección de sulfurados y fosforados en mezclas complejas. la cual determina que componentes son los detectados. Fig. La luz filtrada es medida por un fotomultiplicador (PMT) y transducida a una señal. el cual permite una detección simultánea de una segunda señal. 5). Se puede agregar un segundo fotomultiplicador.17 Este es un método destructivo dependiente de flujo de masa. con un límite de detección de ~ 100pg/seg. La . Estas especies emiten una luz característica que es óptimamente filtrada por la longitud de onda deseada. El FPD consiste de una flama reductora que produce especies quimioluminiscentes. 5. Su modo de detección es debido a la producción de iones en una flama resultando en una corriente que puede ser medida (Fig. Los filtros para FPD pueden ser seleccionados para diferentes componentes. Detector de ionización de flama6 Detector fotométrico de flama (FPD flame photometric detector) Es uno de los más usados en los métodos selectivos de cromatografía de gases. con selectividad para compuestos orgánicos.

así como de componentes sulfurados volátiles en el análisis de alimentos. La cromatografía de gases con FPD puede ser usada para detectar componentes sulfurados en extractos crudos de aceite y en contaminantes de gas natural. P. Ge. Este es un método destructivo dependiente de flujo de masa. Su modo de detección es debido a la producción longitudes de onda particulares resultando en una corriente que puede ser medida.18 selectividad de FPD clásicos (como una porción por peso del carbono) es 105 para sulfurados y 106 para fosforados. Cr. Sn. Fig. 6 Detector fotométrico de flama6 . B. con selectividad para S. También puede ser utilizado para detectar pesticidas y herbicidas organofosforados. con un límite de detección de ~ 100pg/seg.Se. As.

19 Detector de captura de electrones (ECD electron capture detector) Es altamente sensible a compuestos halogenados y por lo tanto muy útil en la detección de pesticidas. cetonas. Para este tipo de cromatografía la muestra debe contener una fase gaseosa electrófora. aromáticos. . organosulfurados y algunos organometálicos. Los iones producidos son colectados por electrodos siendo la corriente generada una medida de la concentración del analito. siendo esta la base de la respuesta(Fig. la longitud de onda oscila entre 106-150 nm. Este es un sistema donde se detectan partículas ß por absorción de especies que contienen halógenos. Fig. Las partículas ß son emitidas por una fuente de 63Ni. organometales y dobles enlaces conjugados. aldehídos y aminas. Este es un método no destructivo dependiente de concentración. con selectividad para compuestos alifáticos. Da un poco de respuesta a hidrocarburos y otros carbonilos conjugados. heterocíclicos. 7 Detector de captura de electrones6 Detector de fotoionización (PID photoionization GC detector) Este tipo de detector es muy selectivo para los compuestos con hidrocarburos aromáticos o con heteroátomos. 8). Su modo de detección es debido a los potenciales de ionización de los compuestos analizados (Fig. ésteres. nitrilos. los cuales tienen potenciales de ionización. los electróforos las absorben reduciendo la corriente. Utiliza luz ultravioleta para ionizar un analito. nitratos. con un límite de detección de ~2pg/seg. 7).

Para simplificar el problema del análisis cualitativo se supone que el cromatograma se ha registrado en las condiciones óptimas. un solo parámetro expresado cuantitativamente expresado como dato de retención. suministra la información cualitativa y los otros proporcionan la información cuantitativa. cada componente de una muestra suministra tres unidades de información: posición. siendo preferibles las técnicas multiparamétricas. como la espectrometría de masas o la espectroscopía de infrarrojo.20 Fig. . altura y anchura de los picos en el cromatograma. La posición. En los casos favorables es posible identificar los componentes por la posición de los picos. 8 Detector de fotoionización6 Métodos Análisis cualitativo La cromatografía de gases es uno de los métodos físicos de separación más eficaces que se conocen. pero por lo general la ambigüedad es tan grande que el analista ha de completar la información con la obtenida por otros métodos analíticos. los picos están totalmente separados con resolución superior a la unidad y que cada uno de ellos corresponde a un solo compuesto.

Si por el contrario. Métodos de coincidencia El método más simple de identificación cromatográfica consiste en comparar el volumen de retención de un compuesto problema con el de un patrón. No existe un método general aplicable a todos los problemas prácticos. es mejor añadir el patrón como un marcador a la muestra problema y comprobar si no coincide con alguno de los picos originales. Tabla. Solamente se estudia la identificación por procedimientos cromatográficos teniendo siempre en cuenta que se ha de completar. A pesar de los inconvenientes del método. la información cromatográfica cualitativa depende del conocimiento previo de la composición de las muestras y casi siempre se han de combinar varias de las operaciones incluidas en la tabla para seguir identificaciones fiables. colocados a la salida de la columna y el de condensación y análisis por otras técnicas instrumentales o químicas. excepto en los casos favorables. aumenta la .21 En la siguiente tabla se resumen los procedimientos utilizados para identificar los picos cromatográficos. o de infrarrojo. 1 Identificación cualitativa por cromatografía de gases2. por análisis con otros métodos. Entre los más eficientes están el de pasar directamente los efluentes a un espectrómetro de masas. la cromatografía de gases en combinación con otras técnicas es el instrumento más eficaz conocido hasta la fecha para determinar la composición cualitativa de mezclas complejas de compuestos orgánicos. determinado en las mismas condiciones operativas y en la misma columna. Como estas condiciones son difíciles de mantener constantes en cromatogramas registrados sucesivamente y todavía más difíciles en días diferentes.

δVr al nivel de confianza de 95 % vale 4σVr (σVr es el error típico de las medidas duplicadas del volumen de retención). Esto significa que en la mayoría de los casos prácticos es imposible la identificación en éste nivel con una sola columna a partir de los datos de retención. Son evidentes las razones de la separación en varias columnas. muy difícil de conseguir en la practica. .22 altura de alguno de ellos. se puede afirmar que ninguno de los componentes de la muestra es el patrón. es posible reducir fácilmente ρ por medio de otro tipo de información. sobre todo si se analizan compuestos que no han sido previamente estudiados por cromatografía de gases. Expresando cuantitativamente esta observación intuitiva se tiene2: ρ = h/(V1r-V2r)/δVr ρ = número total de picos/número total de divisiones Si se sabe de antemano que la mezcla solamente contiene carbono e hidrógeno. es una evidencia de la coincidencia de los volúmenes de retención. pero una discusión semicuantitativa aclara las limitaciones del tratamiento estadístico. pn = e-pρn/n! en la que pn es la probabilidad de encontrar n solutos en el intervalo unitario δVr Para reducir las identificaciones erróneas a 1 en 1000. La primera alternativa implica mejorar la precisión de las determinaciones de rutina de las medidas de retención a un nivel superior al 1%. En otras palabras si en un cromatograma fuera posible incluir todos los eluyentes posibles entre V1r y V2r el número de sustancias que dentro del error experimental serían simultáneamente eluidas sería ρ. Al estudiar la probabilidad de que el pico que coincide con el patrón sea el patrón. solamente serán permisibles 4 eluyentes. pes. h sería el número posible de hidrocarburos eluidos entre los volúmenes de retención V1r y V2r. Esto es equivalente a reducir δVr o h. Por otra parte. La respuesta negativa no es ambigua. análisis elemental. Pero en caso contrario la ambigüedad es muy grande. La menor diferencia de volúmenes de retención detectable. técnicas instrumentales o separación en otras columnas cromatográficas. la certeza es la identificación de que un pico depende de sustancias eluidas cerca del mismo con las que puede confundirse. dato suministrado por el análisis elemental orgánico. y por tanto. o en densidad de los picos. La única manera de eliminar esta dificultad es reducir ρ. En la práctica la distribución de picos sigue la distribución de Poisson2.

no será válido el razonamiento si el volumen de retención en la columna A está relacionado con el de la columna B. más marcadamente cuando las columnas tienen comportamiento muy diferente. del flujo del gas portador y de la cantidad de fase estacionaria. dependiendo solamente de la temperatura de separación y de la naturaleza de la fase estacionaria. y por ello la separación en dos columnas ha reducido la probabilidad de identificación errónea debida a la elución simultánea. La retención relativa de un compuesto es independiente de la longitud de la columna. En la práctica del análisis cualitativo se emplea corrientemente la retención relativa. Se han utilizado dos procedimientos generales: a) Cálculo de los volúmenes de retención específicos b) Determinación de retenciones relativas a patrones Es difícil determinar rutinariamente el volumen de retención específico porque se necesita conocer con exactitud el peso de la fase estacionaria de la columna. debido a esto es difícil conseguir respuesta idéntica aún en columnas preparadas en las mismas condiciones. Siguiendo este procedimiento y separando en suficiente número de columnas es posible reducir pes a un valor muy pequeño. y otra entre los máximos del patrón y el aire. El cálculo es muy sencillo. Un inconveniente de la identificación por retenciones relativas es el gran número de sustancias empleadas como referencia. para identificar sustancias a partir de datos bibliográficos se han de expresar las retenciones como variables reproducibles por diferentes equipos e investigadores.23 La probabilidad que se eluyan simultáneamente picos conteniendo más de un componente en dos columnas diferentes A y B está dada por2: pesA+B = pesA*pesB como pesB <1 se deduce que pesA+B < pesA. Retención relativa Los volúmenes de retención dependen de un gran número de variables operativas. el empleo de varias columnas reduce la probabilidad de identificación errónea. Los componentes y el patrón han de registrarse en el mismo cromatograma. que hace difícil determinar la coincidencia de los datos publicados por diferentes autores. se limita a la realización de dos medidas de distancia. para que se cumpla el procedimiento estadístico la distribución de los eluyentes ha de ser aleatoria. por lo tanto. Por lo tanto. Es casi imposible en la práctica fijar un solo patrón . Sin embargo. una desde el máximo del pico del problema al pico del aire.

Expresado como4: N = 5. Un valor alto de N indica una gran capacidad de retención del soluto de la fase estacionaria y una gran eficiencia de la columna. por lo que existe gran número de datos de poca aplicación a problemas particulares. todo debe ser repetido. Una cromatografía de gases optimizada que está bien calibrada cuando 1) las soluciones estándar de diferentes concentraciones son lineales. Si alguno de los criterios antes mencionados no se completan. son indicativos de una cromatografía bien calibrada. dependientes de la selectividad y eficiencia. diámetro interno. 2) los estándares a las mismas concentraciones se reproducen en un periodo de tiempo específico y 3) bajos niveles de concentración de picos tempranos y tardíos.24 de referencia y su selección queda a disposición del especialista. y capacidad de adhesión de la película. 2) parámetros operacionales como la temperatura de la columna. La dificultad con la optimización es que esto involucra muchas variables: 1) parámetros fijados como la longitud de la columna. Optimización del flujo acarreador para mejorar la resolución de la columna La resolución y separación de los picos son dos de los factores más importantes para la resolución de la columna. Esto es determinado por el número efectivo de placas teóricas las cuales son secciones ideales de la columna donde los solutos se equilibran entre la fase estacionaria líquida y la fase gaseosa móvil. Desafortunadamente. to es el tiempo de retención de una sustancia sin retención o tiempo de volumen muerto. La eficiencia es la relación entre la longitud del tiempo que gasta el soluto en salir de la columna y la anchura del pico sobre la elución. y w1/2 es el ancho del pico del soluto. esto frecuentemente aumenta el tiempo de análisis. puede modificar completamente la forma de los picos y alterar toda la eficiencia de la columna. una cromatografía de gases es optimizada cuando la sensibilidad y resolución de una mezcla compleja es activado en el menor tiempo posible. Complicaciones mayores se obtienen cuando se utiliza un sistema de dos columnas y una de ellas afecta el funcionamiento de la otra. La asociación entre la velocidad lineal y eficiencia de . Un cambio directo en el flujo. acompañados con el menor ruido. acarreador y flujo de gas. o los modos de inyección. Resolución es la capacidad de la columna para separar dos picos adyacentes. La presencia de un volumen muerto grande (to) esconde la eficiencia de la columna pero puede ser reducido incrementando la velocidad lineal del flujo del gas acarreador. Optimización de flujos en capilaridad split/splitless en cromatografía de gases Por definición estándar. Un sistema optimizado es muy difícil de mantener.54 [(tr-to)/w1/2] 2 Donde tr es el tiempo de retención del soluto.

La figura 9 muestra (H) como una función de la velocidad promedio (u) donde Hmin y umin están bajo condiciones de flujo optimizados. el hidrógeno es la mejor elección para obtener la separación más grande en el periodo de tiempo más corto debido a su menor viscosidad que otros gases en temperaturas más altas. En general. todos los solutos se optimizan en algunos puntos directamente sobre umin pero moléculas grandes se optimizan en velocidades más bajas que moléculas pequeñas. (N) está relacionado a la longitud de la columna (L) de acuerdo a H (HETP) = L/N. De acuerdo a umin la eficiencia máxima es obtenida pero solo gastando mayor tiempo de corrida. Claramente. En este modelo. es una elección más práctica porque no se necesitan precauciones de ventilaciones. Para disminuir la viscosidad e incrementar la eficiencia de la columna. El helio. . Fig. se debe seleccionar una velocidad de flujo lineal. el tiempo de corrida es el más corto con una muy baja pérdida de eficiencia. La velocidades bajo umin caen en la parte de la curva donde la eficiencia y el tiempo de corrida son los peores. 9 Punto general de Van Deemter4.25 columnas de capilaridad puede ser ilustrado más claramente sustituyendo la altura equivalente a una placa teórica (H) por número efectivo de placas teóricas (N). El grado en el cual la velocidad lineal puede mejorar el comportamiento de la columna cuando la programación de la temperatura es específica al gas acarreador como se muestra en la figura 10. En este valor.

linearidad y reproducibilidad. Para medir la velocidad lineal. aunque un flujo fuerte se requiera para el barrido de . se ajusta la fuente del acarreador que es por lo menos 20 psi más grande que la presión de la cabeza de la columna. se inyecta una sustancia no retenible a la temperatura donde hay mayor elución. con ECD el detector de gas necesita mantener un equilibrio de concentración de electrones térmicos y un barrido efectivo de gas acarreador-soluto. estará arriba del 50 % de la eficiencia que puede ser perdida cuando se hacen rangos de 50 hasta 200 ºC.26 . Esto podría ser porque la velocidad es optimizada pero no parece ser porque el disfraz del flujo no lo esté. Las velocidades de flujo varían de acuerdo al disfraz del gas y el tipo de detector. Fig. U (cm/seg) = longitud de la columna/RT del pico de lo no retenido Es importante considerar el disfraz de la velocidad del flujo de gas cuando se optimiza la velocidad lineal del acarreador. La velocidad lineal es calculada usando la siguiente ecuación y entonces un valor promedio se obtiene de un mínimo de tres mediciones4. Por ejemplo. especialmente desde que el disfraz afecta la forma del pico. La sensibilidad ECD es inversamente proporcional al flujo.10 Efectos de usar diferentes gases acarreadores en el punto Van Deemeter4. Si a esto se le optimiza la temperatura. Cuando la velocidad lineal se optimiza para el helio será aproximadamente 21-40 cm/seg y para el hidrógeno de 50-80 cm/seg. Esto es para minimizar la resistencia del flujo de la columna para suplementar líneas y garantizar una velocidad de flujo volumétrico constante entre el inyector. Antes de marcar el uso de flujo de acarreadores. la columna y el detector.

la muestra se inyecta dentro de la columna caliente y forma un vapor que consiste de muestra. Durante el muestreo con splitless. Para mantener una sensibilidad satisfactoria en las velocidades de flujo en el ECD se utiliza 95 % de argón y 5 % de metano como fuente de gas. con solventes como el cloruro de metileno (punto de ebullición de 40ºC).27 sustancias altamente retenidas para producir picos agudos. La cantidad requerida de resolución y la simetría del pico es específica al método de análisis. para prevenir que los vapores entren en contacto con la cabeza de la columna y sean retenidos ahí.83 * el pico a 1/2 de altura / pico a 1/10 de altura 3) La sensibilidad está relacionada con la altura del pico a la base del mismo. la concentración del solvente no es práctica porque la temperatura inicial del horno estará a menos de la temperatura del cuarto.5-1. 2) PGF = 1. Esta técnica es extremadamente útil para adelgazar los picos y eliminar las trazas de solvente y la interferencia de vapor retenido momentáneamente en la fase estacionaria. El muestreo con splitless puede ser optimizado usando “concentración de muestra / solvente” para volver a concentrar la muestra en la columna caliente. es crítico para la discriminación y reproducibilidad del cromatograma. o el tiempo que el respirador del split es abierto después de la inyección. 1) Resolución= rt2-rt1/ Avg (w2+w1) rt2 – rt1 es la diferencia en los tiempos de retención entre los dos picos. el analizador debe aceptar los picos que . Normalmente.8 a 1. En este caso. Sin embargo. la simetría de los picos y la sensibilidad podrían ser monitoreadas para confirmar que la cromatografía de gases está calibrada correctamente y la velocidad lineal está optimizada. El respirador del split se apaga en éste punto y se vuelve a prender después de 20 a 60 seg. La resolución. Parte del gas sale por el respirador al pasar en el alineador. El solvente humedece la fase estacionaria para retener a los solutos. la temperatura inicial del horno debe ser 20ºC abajo del punto de ebullición del solvente. Optimización de tiempo de purga y velocidad de split Las muestras con splitless son frecuentemente usadas para análisis de componentes donde una gran cantidad de muestra es inyectada a la columna. por lo cual. El tiempo de purga. Para que ocurra la retención. una buena resolución se encuentra entre 0. esto permite una rápida elución de los solutos. Una porción de 3:1 indica una sensibilidad adecuada.0 y un rango aceptable PGF está entre 0. w2 es el ancho del pico 2 y w1 es el ancho del pico 1.2 cuando están determinados por 1 y 2 (ver abajo). solvente y gas.

empaquetado ligeramente con lana de sílica. Otra ventaja del split. es que se pueden usar columnas más estrechas para tener una mejor resolución sin tener que volver a muestrear la columna. Para incrementar el flujo a través del respirador se disminuye la presión o el flujo del acarreador a través de la columna. Quizá el único inconveniente del split es que la cantidad inyectada a la columna podría no ser representativa si la muestra no es completamente vaporizada. hasta alcanzar el máximo de sensibilidad del soluto sin que haya trazas del solvente.2 a 1. el tiempo de purga necesitar estar cercano a 0. La cantidad purgada en el respirador del split está determinado por la velocidad del split4: Velocidad del split (ml/min)= Promedio del flujo del split+ promedio de flujo de columna/promedio de flujo de columna Una velocidad de 100:1 indica que el 99 % de la muestra.1 a 2 µl no impide que haya una buena altura y sensibilidad en el pico. es esencial para completar la filtración de . Ajustar el tiempo de purga en incrementos de 0. Si se obtiene la cantidad máxima de eficiencia de la columna. los componentes más pesados no se volatilizarán lo suficiente o no se crearía la “concentración del solvente”. concentración de la muestra.5 min. Si hay una gran diferencia entre el punto de ebullición del solvente y el del soluto. Un alineador inerte. Un alineador de cuello de ganso es una alternativa viable para un alineador delgado.1 min. El muestreo tipo split es el método más popular porque inyectar muestras de 0. Por esta razón. el método de inyección split puede ser monitoreado siempre corriendo soluciones estándares de concentraciones conocidas y analizar su reproducibilidad. Esto es porque la muestra entra en el alineador con el respirador split abierto y el extracto de la muestra y el acarreador son purgados antes de que entren a la columna. menos de 0.1 min. la lana puede ser usada para ayudar a la volatilización de los componentes de alto peso molecular. diseñado específicamente para mejorar la eficiencia del splitless y disminuir la degradación de la muestra. las áreas del pico más pequeñas asociadas con el muestreo tipo split reflejan una reducción en lo ancho lugar de lo alto del pico. Si el tiempo es muy corto. Una columna moderadamente polar desactivada.28 estén entre los solutos que eluyen al principio o tratar varias técnicas de inyección que sean compatibles con el muestreo tipo splitless. sin lana de sílica es preferida para una mezcla ligera de la muestra con el solvente. puesta 1 o 2 cm abajo del punto de inyección. Una cabeza del alineador desactivada. Algunas de estas discrepancias pueden ser minimizadas al seleccionar un alineador de inyección adecuado.2 min. podría ser utilizada siempre con splitless para minimizar el pegado de los picos y para tener una migración uniforme del solvente. temperatura inicial del programa y volumen de inyección afectan el split. Para tener un tiempo de purga óptimo. Mejorar la simetría del pico permite una mejor reproducibilidad y por lo cual da una mejor cuantificación del área de los picos. Las diferencias en el peso molecular. Ocasionalmente. el solvente y el acarreador se purgaron a través del respirador del split. se comienza con un rango de purga de 0.

Para optimizar el flujo constante. El siguiente es un cálculo para mejorar el EPC y establecer una presión en la cabeza necesaria para mantener un flujo constante mientras la temperatura se incrementa de T1 a T24: Pi2 = [(T2/T1)1. excepto que los flujos son más estacionarios. particularmente la longitud de la columna. El EPC puede ser corrido a presión constante con un solo punto de entrada en toda la columna.5 a 6 ml/min. Combinación de temperatura y programación de temperatura para completar la optimización La adición de control electrónico de presión a la programación de la temperatura mejora dramáticamente la separación. Para mejorar la velocidad del split. Esto garantiza una alta eficiencia y un flujo constante. bajo presión constante. al final del detector. permitiendo una restauración más rápida del equilibrio del flujo después de un periodo de apagado. colocar la temperatura del horno a la temperatura inicial y ajustar flujo del respirador del split hasta que esté en 10 a 15 ml/min. Esto es porque la presión puede ser regulada precisamente y el flujo programado continuamente durante la columna. Esto es particularmente importante cuando se inyectan componentes de alto punto de ebullición. el flujo y presión constantes. la presión de la cabeza de la columna debe incrementar 3.7(pi2-po2)1+po2]1/2 Donde Pi es la presión gauge inicial + 1 atm y po es la presión de salida a 1 atm. La habilidad para correrlo a temperaturas bajas reduce significantemente la degradación termal y mejora la longevidad de la columna. y el flujo del acarreador en 2 a 5 ml/min.5 veces a la cantidad original en la columna por cada 200°C para compensar un incremento en la viscosidad. Esto es similar a lo que el gauger mecánico hace. puede gotear más del 50 %. velocidad de split y el goteo de la presión desde la cabeza hasta la cola de la columna. promueven una elución más rápida de componentes de alto peso molecular en temperaturas más bajas con mejor resolución. Hay varios factores a considerar cuando se programa un EPC. . la cual. diámetro interno. mezclado y expansión del vapor. En general. donde la presión es ajustada automáticamente a los cambios de temperatura para corregir el volumen del gas dentro de la columna dado a que el calor se expande al incrementar la temperatura. El EPC puede ser también programado para tener una corrida de flujo constante. reduce el tiempo de corrida y se obtiene una velocidad óptima lineal para el soluto. El flujo a través del respirador de purga pude estar entre 0.29 residuos no analizables y garantizar el calentamiento adecuado.

Cuando se usa EPC con inyección tipo split. Si los últimos picos de elución son resueltos pobremente. Incrementar las rampas de presión y temperatura para reducir los espacios en blanco entre grupos. 3. También. Algunos puntos que garantizan una programación exitosa son: 1. hay menos contacto con sitios activos de superficies catalíticas del alineador. Los cambios en la presión pueden ocurrir en temperatura y tiempos específicos durante una corrida. Con la programación de la temperatura y presión se han optimizado y mejorado los procedimientos de corrida. la cabeza de presión es aumentada un poco después de la inyección. y se programa una inclinación para el remanente de la corrida. 5. La temperatura del horno inicial podría ser lo suficientemente baja como para permitir separar componentes de bajo punto de ebullición pero más alta que la temperatura mínima para la fase estacionaria de la columna. Esto puede ser solucionado variando el tiempo de purga. No hay suficiente tiempo para que el vapor se expanda hasta el inicio del alineador y salga por el respirador del purgador. Esto no remplaza los métodos ya desarrollados pero puede eliminar los tiempos de corrida sesgados. la velocidad del split puede ser programada para cambiar durante la corrida o entre los métodos en una secuencia. permitiendo una mejor optimización. el volumen de expansión de vapor puede ser controlado para prevenir el regreso el cual podría ocurrir si la cantidad inyectada excede la capacidad del buffer en la cabeza del alineador. . Comenzar con rampas de temperatura. Correr mezclas complejas en temperaturas iniciales bajas para dispersar os picos. especialmente si usas “concentración de solventes” debido a que la velocidad del flujo tiende a interferir con la concentración de la muestra en la columna. Siempre introducir un tiempo de sostenido inicial para soluto de rápida elución. Esto actualmente mejora el muestreo splitless porque expansión de volúmenes más pequeños son producidos dado al menor tiempo gastado en la cabeza. Si se aplican pulsos de presión a la inyección tipo split. Puesto que el tiempo que la muestra permanece en el alineador es reducido. la delimitación de los picos puede ocurrir con pulsos de presión. reducir la temperatura e incrementar la presión. Al incrementar la presión durante la inyección. 2. Los programas computarizados como el ezGC &#153 proveen aproximaciones más cercanas para condiciones ya optimizadas. Hay menos adsorción del alineador y descomposición de la muestra y por lo tanto la resolución del pico es mejorada. 4. incrementa el flujo el cual podría reducir la velocidad de split. puede ser programado para apagarlo entre corridas para conservar la cantidad de gas acarreador. Seleccionar columnas que tengan mayor eficiencia que la requerida para la separación. En el pulso de presión. los pulsos de presión y la temperatura del horno.30 La programación de la presión envuelve simples y múltiples campos los cuales entran en el panel de control en la misma manera como un programa de temperatura. Ocasionalmente.

una serie de grados de redundancia puede ser evitada por la asignación de cuatro grandes categorías: a) Comida. con la longitud de la columna. Los resultados entran al programa. b) mejoras en la instrumentación comercial. Otra forma de clasificar las aplicaciones en la cromatografía de gases es dividir los datos de la literatura en áreas de interés. Las guías de aplicaciones para fases estacionarias en los análisis de las diferentes áreas se muestran en catálogos tales como Supelco. carbón y aceites. aire y tierra. saborizantes y fragancias En la mayoría de las investigaciones hechas sobre saborizantes se realizan por cromatografía de gases. algunos de los ejemplos incluidos pueden ser criticados porque los eventos de separación en la cromatografía de gases pueden ser muy rápidos y en muchos casos es posible generar resultados que son superiores a los mostrados en las ilustraciones. Una serie de algorímetros determinan los mejores programas basados en la termodinámica de retención para índices y cálculos. en consecuencia la compilación casi siempre puede estar incompleta por cromatógrafos individuales debido a la omisión de ejemplos que se consideran críticos para algunos campos específicos. b) Petróleo y químicos. Contaminantes de agua. análisis de pesticidas.31 El software requiere que dos programas extremos sean usados como un rango 1) Una presión o temperatura alta con un rampeo rápido y 2) una presión y temperatura inicial con un rampeo bajo. análisis de pesticidas. Por otra parte. niveles de alcohol y drogas en la sangre. separación de enantiómeros. separación de enantiómeros. Aplicaciones Un intento para crear una compilación de aplicaciones deseadas para generar un manual debe ser selectivo. separación de enantiómeros. separación de enantiómeros. de tiempo muerto y otros parámetros. análisis de pesticidas. y las correlaciones sensoriales que se requieren para que haya significancia en la determinación de sabores deben ser medidas por patrones de . Productos naturales y las feromonas. Aplicaciones en comida. Ácidos grasos. Analabs. d) Médicas y biológicas. Applied Science. c) Ambientales. Los avances que han permitido mejorar los métodos incluye a) mejores métodos de preparación y almacenamiento de las muestras. Ácidos grasos. sabores y fragancias. combustibles sintéticos. la velocidad lineal. etc. pese a que la sobrelapación de algunos sea inevitable. halometanos en el agua hasta las dioxinas en la tierra. la presión sobre el diámetro de la columna. incluyendo entradas superiores que llevan a cabo un mejor proceso de inyección de la muestra y c) la disponibilidad de mejores columnas desactivadas en un rango más amplio de diámetros y cubiertas de una gran variedad de fases estacionarias.

También se pueden detectar contaminantes dentro de la comida empaquetada por cromatografía de gases. el 2-etilhexanol). Otro uso importante de la cromatografía de gases ha sido en el análisis de vinos adulterados. si se quedan dentro de la columna. La complejidad el aceite es tan alta que no se podría analizar su composición por una simple columna cromatográfica. Silar 5CP 1. Aminoácidos OV-17. por lo que se han optimizado fases estacionarias que permiten un aumento en la retención relativa y velocidad parcial de la volatilidad de los compuestos. Debido a la gran complejidad de las muestras de comida. OV-210 17 Carbohidratos 2330. 2340 225. 275 . El dibromo de etileno (EDB) ha sido utilizado ampliamente para inhibir la infestación de insectos en comida empaquetada. para producir una mejor separación de los compuestos así como un tiempo de vida más largo. De aquí que la cromatografía de gases es usada no solo para establecer cuales son los materiales normales que contiene cada muestra. La cromatografía puede ser extremadamente compleja y frecuentemente influenciada por los métodos de preparación de la muestra. sino también aquellos componentes cuya concentración aumenta el abuso del aceite (ejemplo: el p-cymeno). por lo que se usan columnas especializadas de polimetilsiloxano con diferentes fases estacionarias. Estos contaminantes están relacionados con trazas de solventes residuales usados en las películas plastificadas del empaquetamiento (por ejemplo. 5. dando prioridad a la salida de los contaminantes. La cromatografía de gases es ampliamente utilizada en el análisis de aceites esenciales. Tabla 2. pero se demostró que este compuesto es carcinogénico en altos niveles. y son frecuentemente dispersados dentro de una matriz que contiene materiales los cuales podrían.32 cromatografía de gases. Un ejemplo de esto puede ser el aceite de limón al cual se adulteraba por la adición de turpentina. en los vinos europeos fue de gran importancia en la detección de dietilenglicol. donde la complejidad de la muestra puede ser en verdad un gran reto. la detección de estos EDBs puede ser un problema. Muchos de estos productos son frágiles e importantes comercialmente y se utiliza la cromatografía de gases para cuantificar componentes específicos que podrían ser indicativos de calidad del aceite y para detectar adición de compuestos clandestinos como antioxidantes así como componentes utilizados como diluyentes. Por ejemplo. El análisis puede ser complicado debido a que los compuestos de interés volatilizan usualmente en muy bajas concentraciones. sabores y fragancias4 Solutos Fase estacionaria Tipo de columna Ácidos grasos volátiles en 10% SP-1000/1%H3PO4 PEGa agua (C2 a C5) Ácidos grasos bacterianos 3% SP-2100. acortar la vida de la muestra en un grado considerable. El dietilenglicol es un material tóxico y se ha encontrado en niveles de 60 g/L en los vinos. Columnas recomendadas para cromatografía de comida. 225.

microempaquetados y columnas PLOT. (1982) 4 demostaron la separación de hidrocarbonos de bajo peso molecular en un sistema de válvula de entrada. la fase estacionaria de metilpolisiloxano. et al. por ejemplo. También se han diseñado separaciones interesantes utilizando columnas tubulares de capa porosa (PLOT) cubiertas con alúmina. para llevar a cabo separaciones que son difíciles de duplicar con equipos convencionales o columnas tubulares abiertas. describieron un sistema para cuantificar aditivos oxigenados con las bases de características de retención cuando las inyecciones de gasolina eran simultáneamente agregadas a dos columnas diferentes. cuya interacción con los solutos está limitada a las fuerzas de dispersión. Levy y Yancey (1986) 4. Las pruebas de solventes han sido todo un reto. La diferenciación de hidrocarburos parafínicos. Se diseñaron sistemas de multicolumnas de válvula de entrada. debido a la cantidad masiva del constituyente principal que debe ser inyectado a la columna si la detección es para los constituyentes menores. el rango dinámico del sistema debe ser suficientemente amplio para acomodar estas diferencias cuantitativas en los componentes. olefínicos y aromáticos son metas normales. . Las columnas empaquetadas todavía son utilizadas para algunas separaciones de hidrocarburos ligeros. la cual da una gran estimación de ciertos aditivos de octanos. Las preparaciones de hidrocarburos derivados de aceites o carbón licuado pueden ser extremadamente complejas y también pueden incluir una variedad de otros grupos funcionales. Mooney. mezclas de gases.33 Aplicaciones relacionadas a químicos y petróleo Los análisis de productos del petróleo incluyen la separación de mezclas de gases ligeros hasta la caracterización de aceites crudos y materiales producidos en la licuación del carbón. La cromatografía multidimensional se utiliza para la separación de algunos componentes menores como los aditivos “antiknock” en gasolinas. y algunas veces se requiere la detección de componentes nitrogenados y sulfurados. por ejemplo. Las interacciones entre la fase estacionaria y los solutos hidrocarbonados están limitados generalmente a fuerzas de dispersión. con potencial de reflujo y/o redirección de fracciones individuales a tubos abiertos. Estas columnas son especialmente útiles para mezclas de baja ebullición. La cromatografía multidimensional puede ser requerida para el análisis de estas mezclas complejas. Estas columnas normalmente se empaquetan con alúmina o algunos polímeros porosos como los cromosorbos. Estas columnas incrementan la retención de los hidrocarburos de bajo peso molecular en altas temperaturas. alcoholes y halocarbonos de bajo peso molecular. usando una columna de película apretada en condiciones subambientales. componentes sulfurados y nitrogenados de bajo peso molecular. funciona bien para la separación de estos componentes.

compuestos clorados mezclados en el aire. las cuales dan una excelente precisión y tiempos de análisis muy cortos pese a la complejidad que podría presentar la muestra. desde agua potable hasta aguas industriales. esto es también cierto para otros solutos activos como los pesticidas. Las mismas columnas se usan para la separación de pesticidas y compuestos aromáticos clorados. podrían ser empleadas para establecer que la precisión del sistema se extiende a los niveles medidos para el soluto en cuestión. En muchos casos el problema inicial es la obtención y preparación de la muestra. Para solutos termolábiles se requieren columnas frías de inyección (tabla 3). Aplicaciones médicas y biológicas La detección en bajos niveles de componentes significativos en este campo tiene requerimientos estrictos para los sistemas analíticos. En estos análisis cromatográficos se usan fases estacionarias de compuestos aromáticos para mejorar la separación de los solutos. como desactivar el puerto de inyección del cromatograma. Cuando la cuantificación es importante. sino también de los sistemas analíticos particulares. Los análisis cromatográficos se llevan a cabo por columnas tubulares abiertas. Con algunas excepciones los métodos de análisis oficiales son menos sensitivos y consumen mayor tiempo que los métodos que se desarrollaron en los comienzos de la cromatografía. En muchos casos las agencias de regulación de calidad tienen procedimientos estándar específicos para el análisis de materiales dados en una matriz dada. Las muestras de agua son muy variables. Los métodos 603 hasta el 613 separan en 13 clases los 113 contaminantes orgánicos que son monitoreados por cromatografía de gases.34 Aplicaciones ambientales Los análisis ambientales se enfocan a la detección y/o cuantificación de muchas substancias diferentes en una diversidad de matrices. las técnicas utilizadas por Schomburg (1979) 4 y Dandeneau (1979) 4. Estos análisis pueden ir desde químicos de pesticidas y herbicidas hasta hidrocarburos aromáticos polinucleares (PAHs). . En Estados Unidos. la agencia de protección ambiental (EPA) especificó procedimientos para el monitoreo de efluentes industriales en 1977. Los altos niveles de solutos activos podrían necesitar no solo la selección de columnas bien desactivadas. agua y tierra.

usaron inyecciones de espacio principal o “headspace” en dos columnas empaquetadas diferente y con una detección simultánea por captura de electrones-ionización de flama (FID-ECD) para facilitar la detección e identificación rápida de estos solutos en las muestras de sangre de pacientes envenenados. Para esto se utilizan columnas tubulares abiertas de diámetro largo muy apretadas para llevar a cabo la separación de varios anestésicos en menos de 7 minutos. En estudios de derivatización de aminas disfuncionales. La drogas son frecuentemente solutos más activos. Es probable que con la columna DB-624 se pueda tener un análisis más rápido y mejor. OV-17/H3PO4 Barbitúricos SP-2250 1. la derivatización es empleada para aportar estabilidad térmica y se puede utilizar en ambas columnas. Alm. las columnas empacadas llevan a cabo la separación en 28 minutos. Los agentes más comunes en estos casos son los solventes (aerosol. y su derivatización es normalmente requerida para su análisis en columnas empaquetadas. Fases estacionarias recomendables para las aplicaciones biológicas y químicas4 Solutos Columnas empaquetadas Columnas tubulares Clinicas/Biomédicas Cetosteroides Silar 5CP 225 Colesterol. repelentes o anestésicos) los cuales incluyen bromocloro -difluorometano. Jacob. clorobutanol.5. establecieron que con excepción de la efedrina. (1983) 4. esteroides. pero en otros casos el diagnóstico es facilitado por análisis de sangre. et al.35 Tabla 3. inyectaron muestras simultáneas de drogas en dos columnas . Ramsey y Flanagan (1982) 4. nbutano.17 Diuréticos OV-17/H3PO4 Frecuentemente es deseable el análisis de un anestésico presente en el aire suministrado a un paciente del que se encuentra en la atmósfera del cuarto. En algunos casos. todas las drogas examinadas producían dos derivados estereisómeros que eran resueltos en picos bien formados bajo las condiciones que ellos usaron. tetracloro de carbono. para lo cual se requiere un sistema de detección rápido y normalmente se utiliza uno de conductividad térmica. las empaquetadas y las tubulares abiertas. etc. et al (1985) 4. Algunas veces el envenenamiento de pacientes por solventes orgánicos volátiles son evidentes por el hedor del paciente al respirar. estrógenos OV-17 17 Alcoholes en sangre Carbopak/SP-1000 PEG Drogas Anfetaminas Apiezon/KOH Antidepresivos SP-2250 Alcaloides SP-2250. Se puede incrementar la forma inerte de las columnas de sílica para permitir un análisis directo de estas drogas sin derivatizar.

para generar los datos de la Fig. Algunos controles importantes a efectuar durante la fase de crianza en vinos y cavas son métodos específicos para la determinación de fenoles volátiles y compuestos azufrados. 12. Concretamente en la cava. hay que disponer de un amplio banco de datos del mismo en las diferentes etapas de elaboración y en diferentes adiciones. Por ello. Fig. ya sea mediante estudio bibliográfico o por detección olfatométrica. y correlacionar estadísticamente determinados compuestos con ciertas anomalías.36 diferentes. a partir de la evolución de ciertos compuestos volátiles. Esta información es un instrumento útil para el seguimiento del producto en el proceso productivo. entre ellos los vitispiranos. Por lo tanto. 11. se calcula el momento en el que tienen lugar las fases de autólisis y postautólisis durante la crianza. La información que nos puede suministrar la GC en el control de calidad será más grande cuanto mejor conozcamos el perfil cromatográfico de la fracción aromática de nuestro producto. No . como son los tapones y las barricas. así como el control de otros materiales enológicos. es necesario conocer los umbrales a partir de los cuales mejora o se desvirtúa nuestro producto. Aplicaciones en la industria La cromatografía de gases es muy útil cuando pretendemos identificar los compuestos que determinan una característica aromática conocida. Análisis de una droga ilegal en un analizador de detector y columna doble4. Controlar el momento en que se desarrollan estas fases es importante debido a las alteraciones organolépticas que conllevan. una empleando FID y la otra con detección de nitrógeno/fósforo (NPD). o tipificar variedades que no contengan algún compuesto específico que las identifique (como sucede en la mayoría de casos).

se convierte en un contaminante atmosférico al formar ácido sulfhídrico. El problema se agrava en aquellos compuestos para los que no disponemos de patrones sintéticos y. Aplicaciones prácticas Dentro de la investigación que se realiza en el Instituto de Biotecnología. se trata de análisis todavía demasiado laboriosos para constituir aplicaciones rutinarias de control. y la espectrometría. en el departamento de Ingeniería Celular y Biocatálisis. El azufre al ser oxidado durante el proceso de combustión. Se determinan los residuos de ditiocarbamato en los alimentos dietéticos. no es posible conocer sus propiedades aromáticas. Se hacen análisis de componentes de la acrilamida. se realiza investigación sobre la degradación enzimática de compuestos azufrados. La cromatografía de gases nos permite cuantificar la concentración de compuestos azufrados. los cuales dañan la salud por la desinfección del agua de piscinas con cloro. Para la determinación de componentes aromáticos en alimentos y bebidas. presentes en petróleo crudo y sus derivados. La determinación de aceites minerales en el agua. por tanto. . La detección de los productos de degradación se realiza por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas.12). Otras aplicaciones También se hacen análisis cromatográficos para la determinación de metanos trihalogenados. el análisis por cromatografía de gases no nos permite definir el perfil aromático del vino analizado. Análisis de herbicidas en campos de golf. el cual forma parte de la lluvia ácida. Para determinar los grados de alcohol en bebidas como la cerveza.37 obstante. el análisis de los productos (fig. como el dibenzotiofeno. En todo caso.

38 Abundance TIC: DBT.00 6.D 184 600000 550000 500000 450000 400000 350000 300000 250000 200000 150000 139 100000 50000 63 32 50 92 215 246281 327 377 429 479 530 562 605 200 250 300 350 400 450 500 550 600 659693 650 700 m/z--> m/z 0 100 150 B) espectrometría de masas Fig. .00 22. debido a que es de suma importancia tener conocimiento de los componentes cuya presencia cae dentro de los parámetros permitidos en ciertos productos.00 20.00 28.00 16.00 A) cromatografía de gases. Para ejemplificar este punto hacemos referencia al siguiente artículo de divulgación. Entre las aplicaciones de más importancia está la del ámbito de alimentos. 12 gráfica de detección de dibenzotiofeno.00 14.00 18.00 12.00 8.00 10. aún a pesar de que no formen parte del contenido original. Abundance Scan 550 (11.368 min): DBT.00 26. Se anexa publicación al finaldel trabajo.D 5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000 Time--> Time 4.00 24.

Determinación de ácidos grasos. Méx. carnes rojas y pollo).uaaan. Ecatepec.mx/DirInv/texthtml/servicio. Investigación: Tratamiento de efluentes gaseosos por medio de catálisis química y biofiltración. CINVESTAV. Coahuila Responsable: Lic.asp?opcion=laboratorios . Cromatógrafo de gases Hewlett Packard con detector selectivo de masas y detector de conductividad térmica.com/index. www. Laura Olivia Fuentes Lara. Detector de ionización de flama. http://tese.39 López. 20. Edo. Cromatógrafo de gases Varian.5 µm suspendidas en el aire por cromatografía de gases – espectrometría de masas. vol. **LABORATORIO DE CALIDAD DEL AIRE/ITESM. hortalizas. Producción de pigmentos y enzimas de interés agroalimentario. p.mty.htm ** LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN QUÍMICA Y BIOQUÍMICA (LIQB)/TESE. cereales.html **LABORATORIO DE NUTRICION Y ALIMENTOS Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro. Avance y perspectiva. Investigación: Bromatológicos en forrajes y concentrados para consumo animal. 2001. 421-424 Cromatografía de gases como método principal **DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AMBIENTALES CENTRO DE CIENCIAS DE LA ATMÓSFERA/UNAM. Monitoreos de emisiones en fuentes fijas. Restauración de suelos contaminados con hidrocarburos y plaguicidas. M. Nuevo León Cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas y detector infrarrojo con transformada de Fourier.itesm. Monterrey. Una sinfonía de aromas.G. en alimentos de consumo humano (frutas. Distrito Federal Investigación: Estudio de la composición orgánica semivolátil presente en las partículas menores o iguales a 10 y 2. Unidad Irapuato. perimetrales y proyectos especiales en empresas. Análisis externos (análisis de compuestos orgánicos volátiles y semivolátiles). Cromatógrafo de gases con detector de captura de electrones.mx/ctl/labaire. http://uninet.dns2go.

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el analito y la matriz son ordenados en el puerto y los solventes de bajo punto de ebullición son rápidamente eluidos (paso 2). los componentes inyectados son organizados en la precolumna de acuerdo a su punto de ebullición.41 El sistema ProSep consiste de 4 componentes. aquí el solvente. . Cuando ya se han transferido todos los solutos de interés. se abre de nuevo el respirador split se abre de nuevo y la columna de preseparación aumenta la temperatura para hervir a los componentes no deseados de la matriz (paso 4). el cual es el puerto de entrada. El flujo de la función ProSep se muestra en la siguiente figura. la columna de preseparación modula la temperatura. el módulo de precolumna. Todos estos pasos son monitoreados bajo softwares de la marca ProSepTM. 13 Columnas de separación tipo ProSepTM 7. dos módulos control y una precolumna de vidrio o sílica la cual está unida dentro de la precolumna de manera similar al alineador de vidrio split/splitless (partido / sin partir) (paso 1). Debido a que ProSep provee alguna separación. cerrando el respirador split transfiriendo los solutos dentro de la columna analítica (paso3). Fig. Después de la eliminación del solvente. La inyección con el ProSep en el cromatógrafo de gases de manera split.

gracias al gran potencial demostrado por los primeros intentos de combinación y a su rápido desarrollo. sensibilidad y poder resolutivo. Dichas limitaciones surgen del hecho de que mientras la cromatografía de gases pueda separar los componentes . Cromatografía de gases y espectrometría de masas Durante los últimos veinte años la espectrometría de masas (EM) y la cromatografía de gases (GC) han demostrado repetidamente. 14 Cromatógrafo de gases con columnas y detectores ProSep7. Aunque en la práctica hasta 1957 la cromatografía de gases y la espectrometría de masas avanzaron por caminos diferentes pero paralelos en el campo del análisis orgánico. en gran número de laboratorios en todo el mundo. habiéndose convertido respectivamente e independientemente en dos métodos analíticos en los que se conjuntan una gran rapidez. Ambas técnicas han alcanzado últimamente un alto grado de desarrollo en sus diversas facetas prácticas. su versatilidad como métodos analíticos para la determinación estructural y separación de compuestos orgánicos. previamente inyectada en el cromatógrafo. De esta forma las limitaciones inherentes de la cromatografía de gases quedan considerablemente reducidas en el análisis cualitativo. Conectando la salida de un cromatógrafo de gases a la cámara de ionización de un espectrómetro de masas de puede obtener información estructural (espectro de masas) para cada uno de los componentes de la mezcla original.42 Fig. a medida que estos son eluidos en serie de la columna cromatográfica. en la actualidad la combinación directa cromatográfica de gases-espectrometría de masas se reconoce como uno de los sistemas más eficaces a disposición del químico analista para el estudio e identificación de mezclas complejas de productos orgánicos.

Por ello la utilización de los datos basados en el tiempo de retención absoluto o relativo puede resultar un método adecuado para la identificación tentativa de ciertos compuestos o mezclas relativamente simples o para las cuales se dispone de los correspondientes patrones. .). como el análisis de mezclas de productos naturales de extrema complejidad.43 individuales de una mezcla con un alto grado de poder resolutivo. sobre todo en los casos que se requiere una programación de la temperatura del cromatógrafo de gases y se carece de compuestos patrón. en sentido riguroso más que información preliminar sobre su estructura. desconectando ciertos detectores específicos (por ejemplo captura de electrones. Hay que señalar como esencial que cualquier columna cromatográfica no es un instrumento analítico. etc. no puede dar. Asimismo. Sin embargo. los detectores cromatográficos solamente responden en general a la cantidad de la muestra eluída de la columna. cuando esta metodología se intenta llevar a extremos. sino tan solo un medio de separación física. los resultados así obtenidos carecen de la precisión cualitativa. A este respecto. una de las áreas más activas de la combinación cromatografía de gases-espectrometría de masas es en conclusión la identificación de compuestos nuevos o no sospechados previamente. fósforo.

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