Algoritmos bacterianos

QBP. JUAN SALVADOR SUASTEGUI MORENO

HOSPITAL GENERAL RAYMUNDO ABARCA ALARCON
CHILPANCINGO GRO.
 I.-Puntos a tomar en cuenta en
las marchas bacterianas

1.-Toma de muestra

2.-Transporte de la muestra

3.- Análisis Microscopico

4.- Cultivo y primoaislamiento

5.- Identificación Bacteriana

 II.- Origen de muestras
clínicas
1.- Las muestras para el estudio bacteriológico, se
dividen en dos tipos:

a).- las que proceden de sitios en los que no hay

flora bacteriana normal presente.

b).- aquellas que se toman de lugares que tienen

flora bacteriana normal.
 Flora bacteriana

Es importante que el bacteriólogo tenga

conocimiento de los siguientes aspectos:

cuales son los agentes etiológicos aislados

con mayor frecuencia en procesos
infecciosos de sitios anatómicos
normalmente estériles.

cuales son los microorganismos,

presentes, bajo condiciones normales, en
la piel y en las mucosas.
 Presencia de biota normal en
diferentes zonas corporales del
humano.
ZONAS CORPORALES LIBRES DE ZONAS CORPORALES CON DE
BIOTA NORMAL BIOTA NORMAL
Aparato respiratorio inferior Piel
-Laringe Mucosas
-Traquea -Boca
-Bronquiolos -Orofaringe
Aparato genitourinario -Nasofaringe
-Ureteros Oído externo
-Vejiga Ojo
-Riñón Aparato genitourinario
-Útero -Uretra anterior
Líquidos -Vagina
-Sangre Aparato gastrointestinal
-Médula ósea -Estómago
-L.C.R. -Intestino delgado
-Líquido seroso -Intestino grueso
-Líquido sinovial
-Líquido pleural
-Orina
Tejidos
 III.- TRANSPORTE DE LA
MUESTRA
1.-La cantidad de material debe ser adecuado.

2.-La muestra debe ser representativa del proceso

infeccioso (por ejemplo, expectoración, no saliva; pus de la
lesión subyacente, no de su trayecto fistuloso; una
muestra de lo profundo de la herida, no de la superficie).

3.-Se debe evitar la contaminación de la muestra

utilizando sólo equipo estéril y precauciones asépticas.

4.-Las muestras para ser enviadas al laboratorio deben

colocarse en un medio de transporte, el cual tiene como
propósito mantener la viabilidad de las bacterias presentes
en la muestra e impedir su multiplicación. Se han diseñado
diferentes medios de transporte, el que más se utiliza es el
de Stuart.
 Medios de transporte de uso en
Bacteriología Médica.
MEDIO PROPOSITO

STUART Aerobios y anaerobios facultativos

STUART REDUCIDO Anaerobios estrictos

CARY-BLAIR Shigella y Campylobacter

AMIES
GLICEROL
SOLUCIÓN SALINA
AMIES Y DOUGLAS
HAJNA

CARBÓN ACTIVADO Streptococcus pyogenes

CAS Bordetella pertussis
REGAN-LOWE Bordetella pertussis
2SP Chlamydia

TRANSGROWN Neisseria gonorrhoeae

PIKE Strptococcus pyogenes
CALDO UREA Helycobacter pylori
CAMPYTIO Campylobacter jejuni
SP4 Micoplasma
 IV.- Condiciones apropiadas para el
transporte de muestras

1.-La orina, las expectoraciones y el material de

absceso, se pueden colocar en frascos estériles de
boca ancha.

2.-Los líquidos corporales como el Líquido

Cefalorraquídeo en tubos estériles (la sangre se coloca
en frascos diseñados ex profeso).

3.-Los trozos de tejido se pueden colocar en frascos

estériles.
 V.-Criterios para el rechazo en
la evaluación de las muestras
a) Muestras no aptas para su procesamiento:
Punta de sonda foley
Orina de bolsa de sonda
Líquidos coagulados
Cultivos para anaerobios enviados en medio de
transporte inadecuado.

b).-Muestras remitidas en condiciones inadecuadas.

c).-Solicitud de estudios especiales innecesarios.

 VI.- MICROSCOPIA
Este procedimiento evidencia lo siguiente:
1.- La presencia de bacterias, cantidad, morfología
y agrupación.
2.-Permite evaluar el grado de respuesta
inmunológica con la presencia de células
fagocíticas, cuyo quimiotactismo esté orientado
hacia un morfotipo bacteriano en particular
(Criterios de Bartlett), donde se observen células
bacterianas adheridas a la membrana de los PMN y
dentro de las vacuolas digestivas formadas en el
citoplasma de la células inflamatorias.
 VI.- Microscopia

3.-La observación microscópica es el primer

paso, el cual permitirá orientar el método a
desarrollar en el estudio bacteriológico para el
diagnóstico clínico.

4.-Se pueden realizar preparaciones en fresco

para la observación en campo oscuro,
( treponemas y leptospiras), preparaciones en
fresco de muestras de vagina para la
observación de células indicativas de vaginosis
bacteriana.
 VII.- Tinciones

1. Simples: 2. Diferenciales:
• Gram
Azul de metileno
• Ziehl-Neelsen

Fucsina fenicada • Tan Thiam-Hok

• Machiavello
Verde de malaquita • Jiménez
VIII.- Tinciones Estructurales:
a) Flagelos
- Rhodes
- Tribondeau
- Leifson
b) Esporas
- Shaeffer-fulton
- Moeller
c) Cápsula
- Hiss
- Tinta china
d) Gránulos metacromáticos
- Ernst-Neisser
- Albert
- Loeffler
Tinción Gram
+ + + + + + + + – – – – –
(cultivo fresco)

Forma coco coco coco coco bastón bastón bastón bastón bastón bastón bastón bastón coco

Agrupación racimos racimos cadenas tetradas                 pares

Crecimiento 
+ + + + + – + + + + + + +
aerobio

Crecimiento 
– + + + + + + – – – + + –
anaerobio

Esporas – – – – – + + + – – – – –

Movilidad  – – – – – +o– +o– +o– +o– + o  – +o- + –

Catalasa  + + – – – – + + + + + + +

Oxidasa                  + + – + +

Fermentación de
glucosa a acido  – + + + + + (o –) + – – – + + –
o a acido+gas

O/F                  – O F F O

Micrococcus X                        

Staphylococcus   X                      

Streptococcus     X                    

Lactococcus     X                    

Enterococcus     X                    

Leuconostoc     X                    

Pediococcus     X X                  

Aerococcus       X                  

Lactobacillus         X                

Clostridium           X              

Bacillus             X X          

Alcaligenes                 X        

Pseudomonas                   X      

 Enterobacterias                     X    

Aeromonas                       X  

Chromobacterium                       X  

Neisseria                         X
 IX.-Características fenotipicas
para la identificación bacteriana
A).- Criterios Generales:

Requerimientos de Oxigeno (atmósfera) y temperatura de

incubación.
Morfología colonial.
Tipo de hemólisis en GS carnero al 5%.
Requerimientos nutricionales.
Producción de pigmentos.
Tinciones: Afinidad a la tinción de Gram.
Morfología bacteriana.
Presencia de enzimas.
Reacciones inmunoserológicas.
Sensibilidad antimicrobiana.
 X.- Criterios de Cowan y
Steel
B).- Pruebas de selección Primaria :

Reacción de catalasa
Reacción de oxidasa
Prueba de movilidad
Pruebas de O/F de carbohidratos
Presencia de Esporas
Tinción de Ziehel Neelsen
Tinción de Gram
 XI.-Requerimientos nutricionales
1.-Conocer que suplementos nutricionales
que requiere MO para crecer óptimamente.

2.-Ejemplo: dependencia de factor NAD (V) o

factor Hemina (X) ó ambos en el género
Haemophilus.

3.-Familia Enterobacteraceae: no son

organismos nutricionalmente exigentes.
 XII.- Atmósfera

1.-Conocer cuales son los requerimientos de

O2 de los MO.

2.-Aerobios.

3.-Microaerofílicos.

4.-Anaerobios facultativos.

5.-Anaerobios estrictos
 XIII.- Temperatura
1.-Conocer la temperatura ideal para su
desarrollo.

2.-Mesofílicos (35 a 37ºC): la mayoria de las

especies bacterianas de interés clínico.

3.-Termofílicos (>37ºC): Pseudomonas aeruginosa

(41ºC), Campylobacterias (42ºC).

4.-Psicrofílicos(<ATM): Yersinia enterocolítica

(4ºC), Listeria monocytogenes (ATM)
Morfología colonial
Tipo de hemólisis en GS carnero al
5%

Haga clic para modificar el estilo de texto del patrón

Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
 XIV.-Producción de pigmentos

1.-Los pigmentos insolubles en agua

incluyen los carotenoides (amarillo-
naranja), la violaceína (violeta o púrpura) y
las fenazinas (rojo, castaño, marrón).

2.-Los pigmentos hidrosolubles y difusibles

incluyen las fluoresceínas (pioverdina),
piocianinas, piorrubina, melanina y otros
varios subproductos pigmentados, que
cambian el color del medio de cultivo.
 Pigmentos insolubles en agua

Carotenoides (amarillo- Fenazinas (rojo, castaño, marrón)

naranja)
 Pigmentos hidrosolubles y
difusibles

Fluoresceínas (pioverdina- piocianinas) Lampara de Wood (UV)

XV.-Tinciones: Afinidad a la
tinción de Gram.
 Morfología bacteriana

c para modificar el estilo de texto del patrón

nivel
nivel
o nivel
into nivel Haga clic para modificar el estilo de texto d
Segundo nivel
● Tercer nivel
● Cuarto nivel
● Quinto nivel
 XVI.-Reacción de catalasa

Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas

en las Micrococcaceae.

La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al

3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y
abundante de burbujas indica la conversión del H202
en agua y oxígeno gaseoso.

La prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un

medio que no contenga sangre porque los eritrocitos
pueden producir una reacción de catalasa débil.
Prueba de la catalasa
 Reacción de citocromo oxidasa

Los citocromo son

hemoproteinas que
contienen hierro y actuan
como último eslabón de la
cadena de la respiración
aerobia ; transfireren
electrones de Hidrógeno al
Oxígeno, con la formación
de agua.
El sistema citocromo se
encuentra presente en
microorganismos aerobios,
microaerofílicos y en
algunos anaerobios Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
facultativos, pero nunca en
anaerobios estrictos.
 Prueba de movilidad

En agar semisólido ó por gota pendiente

 Pruebas de fermentación
de carbohidratos
1.-El medio OF de Hugh y Leifson contiene peptona al
0,2% y 1,0% de hidratos de carbono, de tal forma que la
relación entre peptona e hidrato de carbono es 1:5, a
diferencia de la relación 2:1 que existe en los medios
utilizados para fermentación de hidratos de carbono.

2.-La disminución de la peptona minimiza la formación

de productos de oxidación a partir de los aminoácidos,
que tienden a elevar el pH del medio y pueden
neutralizar los ácidos débiles producidos por los bacilos
no fermentadores.
 Medio O/F

Los microorganismos oxidativos Los microorganismos

producen ácido sólo en el tubo fermentadores producen ácido
abierto expuesto al oxígeno en ambos tubos.
atmosférico.
 Medio O/F
Izquierda tubo de OF
inoculado con un organismo
de metabolismo no
fermentador y no oxidativo
para la glucosa.

Observe el ligero vire a

alcalino (azul) debido a la
utilización de proteinas
(peptonas) del medio.
XVII.-Pruebas de fermentación de
carbohidratos
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Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
 XVIII.-Presencia de enzimas

Detección de enzimas y vías

metabólicas

a) RM-VP (KOH + Alfa-naftol).

b) O.N.P.G.
 Prueba de la ONPG (o-
Nitrofenil- β-D-
galactopiranósido)
Es un compuesto estructuralmente
similar a la lactosa, excepto en que la
glucosa ha sido reemplazada por un
grupo o-nitrofenilo.

Esta prueba permite detectar con

mayor rapidez la fermentación de la
lactosa, al evidenciar la enzima β-
galactosidasa más rápidamente.
Haga clic para modificar el estilo de texto del patrón
Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
Haga clic para modificar el estilo de texto del patrón
Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
 XIX.Reacciones
inmunológicas
Utilización de antisueros específicos para determinar
el fenotipo antigénico de grupo y tipo (seroagrupar,
serotipificar)
Haga clic para modificar el estilo de texto del patrón
Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
 MARCHAS BACTERIOLÓGICAS.
1.- Sistema gastrointestinal
1.-Coprocultivo rutina: 2.-Coprocultivo específico
A).- E. coli patógenas.

A).- Salmonella sp
B).- Campylobacter sp.

B).- Shigella sp C).- Vibrios.

D).- Otras entidades .

 A).- Coprocultivo
Las enfermedades infecciosas del aparato
gastrointestinal representan una de las
principales causas de mortalidad y
morbilidad infantil por la diarrea aguda de
niños menores de cinco años.
La patogénesis de la diarrea involucra a
varios microorganismos como agentes
causales, pertenecientes en su mayoría a la
familia Enterobacteriaceae, entre los que
destacan: Salmonella, Shigella, Yersinia y
Escherichia coli.
 Escherichia coli

Escherichia coli forma parte de la biota

normal, sin embargo las cepas patógenas
se clasifican de acuerdo con su mecanismo
de patogenicidad en seis grupos:

1. Enteropatógena EPEC
2. Enterohemorrágica EHEC
3. Enterotoxigénica ETEC
4. Enteroagregativa EaggEC
5. Enteroadherente difusa DAEC
6. Enteroinvasiva EIEC
Algunas especies de
Campylobacter y Helicobacter se
incluyen como causantes de
enfermedad en el aparato
gastrointestinal, al igual que
Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.
 Recolección de la muestra
Las muestras se recolectan directamente en un frasco
limpio y de boca ancha con tapa hermética, al inicio de
la enfermedad y preferentemente antes de iniciar
tratamiento antimicrobiano.

Cuando se sospecha de la posible recuperación de

Shigella y Campylobacter, es necesario tomar dos
hisopos rectales impregnados de materia fecal, los
cuales se colocan en medio de transporte Cary-Blair (se
pueden usar otros medios de transporte como Stuart o
Amies).
HISOPADO
RECTAL CARY
BLAIR
2.-Tracto genitourinario
I.V.U : Urocultivo

Vaginitis : Cultivo Vaginal

Vaginosis: Cultivo vaginal

Uretritis: Cultivo sec. uretral

 A).- Urocultivo
La orina de personas sanas es estéril debido a su vaciado
frecuente, lo cual evita la colonización.

La acidez inhibe algunos microorganismos, y en los

pacientes masculinos, la secreción prostática contiene
espermita y zinc que impiden el desarrollo de algunas
bacterias.

Cuando la orina es turbia debido a la presencia de

leucocitos (piuria), en ocasiones de eritrocitos (hematuria)
y de bacterias, es sugestivo de infección de las vías
urinarias (IVU).

La bacteriuria puede ser asintomática o presentarse como

una enfermedad crónica o aguda.
En la colonización de las vías urinaria,
intervienen varios factores predisponentes que
pueden ser de origen local como por ejemplo: la
contaminación fecal del meato urinario, el
cateterismo, la patología urinaria congénita o
adquirida y el reflujo vesical.

Entre los factores generales se mencionan: la

diabetes mellitus, el transplante de órganos, el
SIDA, el embarazo, la hipertensión arterial y la
terapia con fármacos de amplio espectro.

Escherichia coli es el agente etiológico en más

del 80% de estas infecciones; ocasionalmente
pueden encontrarse dos o más especies
bacterianas involucradas.
La muestra de elección, es la primera orina de la mañana;
sin embargo en la IVU aguda la carga bacteriana es
representativa a cualquier hora del día.

En pacientes femeninas se indica que deben lavarse el

área periuretral y la periferia del meato urinario, utilizando
una gasa estéril humedecida con agua y jabón, con
movimientos de adelante hacia atrás.

posteriormente se limpiará el área con una gasa estéril

humedecida con agua o solución salina estéril.

la recolección de la orina debe hacerse separando los

labios mayores con una mano, la otra mano sostiene el
frasco donde se deposita la muestra.
A los pacientes masculinos se les indica que se limpien
el glande y la periferia del meato urinario con una
gasa impregnada con solución salina estéril antes de
la micción.

En ambos sexos la muestra debe tomarse por el

método del “Chorro medio”, que consiste en que el
paciente debe desechar la primera porción de orina y
recolectar la parte media del chorro en un frasco de
boca ancha estéril.

En recién nacidos, niños y ancianos la muestra puede

recibirse en una bolsa de plástico estéril; las muestras
tomadas en esas condiciones fácilmente se
contaminan de biota fecal, en un resultado positivo
debe considerarse la posibilidad de una
contaminación.
El criterio que se aplica para evaluar la presencia de
bacterias en la orina es el de Kass (1957) y Sanford
(1956), el cual considera que las bacterias
provenientes de las porciones superiores aparato
urinario durante su residencia en la vejiga, utilizan la
orina como medio de cultivo, alcanzando un población
superior a 100,000 UFC/ml de muestra.

Por el contrario las bacterias que son arrastradas

durante la micción, nunca llegan a esas cifras por lo
que en estos casos se les considera como
contaminantes.

Cuentas menores de 100,000 UFC/ml podrían

corresponder a infecciones en las vías superiores en
pacientes que han recibido antimicrobianos, o en
aquellos cuya orina está muy diluida por la terapia
hidratante; por último cuentas menores de 10,000
UFC/ml se toman como contaminantes.
 Criterios para el diagnóstico de IN
6.5 Infecciones de vías urinarias.
(Sintomáticas, cont.....)
Independientemente de los hallazgos de urocultivo:
6.5.1.11 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa, mayor
de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.1.12 Cateterismo: más de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.1.13 Punción suprapúbica: cualquier crecimiento es diagnóstico.
6.5.1.14 El aislamiento de un nuevo microorganismo en urocultivo es
diagnóstico de un nuevo episodio de infección urinaria.
6.5.2 Asintomáticas.
Pacientes asintomáticos de alto riesgo con un sedimento urinario que
contenga 10 o más leucocitos por campo más cualquiera de los siguientes:
6.5.2.1 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa mayor de
50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.2.2 Cateterismo: mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.2.3 Punción suprapúbica: cualquier crecimiento es diagnóstico.
 B).- Exudado cérvico vaginal
En las mujeres con signos y síntomas de infección genital
aguda las muestras más comunes son de cuello uterino y
de uretra.

Este estudio es util para determinar el posible agente

causal de la vaginitis e incluso de la vaginosis
bacteriana.

Las muestras cervicales se obtienen con un espéculo,

después de eliminar el moco cervical con una torunda
seca y esteril.
 Agentes potencialmente
Vaginitis patógenos: Vaginosis
Neisseria gonorrhoeae
Gardnerella vaginalis
Streptococcus agalactiae
Candida albicans Mobiluncus
Mycoplasmas y ureaplasmas Bacteroides
Chlamidia
Peptostreptococcus
Trichomonas vaginalis
 Toma del producto
Con la paciente en posición ginecológica se introducirá
un espéculo lubricado con agua ó sol. salina estéril.
Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo de
dalcrón, de la zona con mayor exudado, o en su defecto,
del fondo del saco vaginal posterior. Repetir la operación
con la segunda torunda.
Se obtendrán 3 hisopados, uno destinada al estudio
microscópico del Gram, otro para cultivo y el tercero
para el fresco.
El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que
sea posible.
El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene
viables a los MO hasta por 3-6 horas.
 C).-Exudado uretral masculino
El diagnóstico de gonorrea puede establecerse en los
hombres que se presentan con uretritis supurativa
aguda, en quienes es posible identificar los diplococos
intracelulares gramnegativos.
Cuando la descarga uretral es escasa y los diplococos
intracelulares no aparecen en una muestra al azar, la
toma de la primera muestra de la mañana, antes de
orinar, suele ser útil.
La incidencia de C. trachomatis excede la de N.
gonorrhoeae como causa de infecciones supurativas
agudas en los genitales.
Los signos y síntomas son indistinguibles; C. trachomatis
tiende a generar menos exudado y menor concentración
de neutrófilos segmentados que N. gonorrhoeae.
Hasta un 20% de hombres y un 40% de las
mujeres con gonorrea pueden estar coinfectados
por C. trachomatis.

En muchos casos pueden requerirse

procedimientos de cultivo para recuperar ambos
microorganismos, en particular cuando el
tratamiento falla.

Con frecuencia, tanto en hombres como en

mujeres la infección es asintomática, en particular
cuando el agente infeccioso es C. trachomatis.
 Toma del producto
Limpiar cuidadosamente la mucosa circundante
con gasas estériles.

Introducir el hisopo suavemente con un

movimiento de rotación hasta penetrar unos 2
cm dentro de la uretra (3-5 cm para la
investigación de Chlamydia trachomatis) y
depositar en el medio 2SP.

Repetir operación con un segundo hisopo para

tinción Gram.

El medio de transporte de Stuart-Amies,

mantiene viables a los MO hasta por 3-6 horas.
Haga clic para modificar el estilo de texto del patrón
Segundo nivel
● Tercer nivel

● Cuarto nivel

● Quinto nivel
 3.- Vías respiratorias
A).- Infecciones de las VRS
Exudado faringeo : Diagnóstico de Faringo amigdalitis,
amigdalitis, epiglotitis.
Portadores de patógenos oportunistas Exudado nasal.
Exudado Otico: Diagnóstico de otitis media.
B).- Infecciones de las VRI
Cultivo de Expectoración.
Cultivo de Lavado Bronco Alveolar.
Cepillado Bronquial (CB).
 A).- Exudado faringeo
Este estudio bacteriológico esta encaminado
como una herramienta para el diagnostico
confirmatorio de la faringo amigdalitis de
origen piógena,
La confirmación de patologías “complejas”,
tales como la difteria, la angina de Vincent, la
faringitis clamidiana y micoplásmica, así como
las infecciones virales, no pueden ser
evidenciadas por este procedimiento.
El clínico debe de formular el cuadro
diagnóstico complementario cuando esto sea
necesario.
Los microbiólogos deben orientar a los
médicos para realizar un diagnóstico
adecuado entre "investigación de
estreptococos" y cultivos de rutina.
La confusión surge cuando los médicos
ordenan cultivos de rutina de garganta
para faringitis agudas y el laboratorio
reporta la presencia de Staphylococcus
aureus, Enterobacterias y BGN no
fermentadores, Haemophilus influenzae
y otros microorganismos que no causan
faringoamigdalitis primaria.
Bajo visión directa, con la ayuda de un
depresor lingual, se tocará con un hisopo de
dacrón en todas las partes con exudado,
membranas o inflamación.

Se deben frotar las criptas tonsilares y la

faringe posterior.

No tocar nunca la mucosa oral, lengua o úvula.

Se investigará rutinariamente la presencia de

Streptococcus beta-hemolítico del grupo A
(S. Pyogenes), la posible presencia de los
Streptococcus beta-hem. De los grupos C y G.
Se le solicita al paciente
que abra bien laHagabocaclic
y para modificar el estilo de texto
que emita un "ah". Segundo nivel
● Tercer nivel
La lengua se abate Cuarto nivel
●

Quinto nivel
suavemente con una
●

espátula y se guía un
hisopo hacia la faringe
posterior.
La mucosa detrás de la
úvula y entre los pilares
amigdalinos es
recolectada con un
movimiento suave de
barrido de atrás hacia
delante.
Seroagrupar preferentemente
Realizar susceptibilidad (CLSI)
 B).- Cultivo nasal
Es la muestra indicada para la investigación de
Bordetella pertussis y de otros patógenos oportunistas
(S. pneumoniae, H. influenzae, Neisseria meningitidis).

En pacientes inmuno comprometidos se evaluara la

colonización de:

K. pneumoniae subesp. Rhinoscleromatis

K. pneumoniae subesp. ozaenae

 Toma del producto
Las muestras nasofaríngeas se obtienen usando
iluminación por encima del hombro.
Con el pulgar de la mano, se eleva delicadamente
la punta de la nariz, se humedece la punta de un
hisopo nasofaríngeo delgado de alambre flexible
con agua o solución salina estéril y se lo inserta con
suavidad en uno de los orificios nasales.
El hisopo se guía hacia atrás y hacia arriba a lo
largo del septo hasta encontrar resistencia, que
indica que se ha llegado a la faringe posterior, se
retira con delicadeza y se deposita en el medio de
transporte Stuart.
 C).- Otitis media
Se define otitis media Los dos principales
como la presencia de patógenos son:
exudado en la cavidad
media del oído. Cocos gram positivos como:
Streptococcus pneumoniae,
Streptococcus pyogenes,
Los lactantes y niños Staphylococcus aureus.
pequeños son los más
propensos a padecer Bacilos Gram negativos
otitis media, como: E. coli o
Pseudomonas
aeruginosa,Haemophilus
influenzae y anaerobios
 Cultivo de secreción de oído
El Cultivo bacteriológico de aspirado de oído
medio adecuadamente recolectados, permite
determinar cuáles son los microorganismos
responsables de la otitis media aguda.

La timpanocentesis para obtener líquido para

cultivos, solo es útil si existe exudación.

Puede ser necesario el cultivo simultáneo e LCR y

sangre, si existen signos y síntomas sistémicos.
 D).-Cultivo de expectoración
Las infecciones del tracto respiratorio inferior
son de las más frecuentes dentro del conjunto
de las infecciones,tanto entre las adquiridas en
el ambiente comunitario como en el medio
nosocomial.

La bronquitis crónica se define, como un

proceso caracterizado por un descenso de los
flujos espiratorios que no cambian de manera
significativa tras varios meses de seguimiento.
El diagnóstico viene sugerido por el cuadro
clínico, por lo que el cultivo no es la
herramienta de Dx de mayor utilidad para
esta patología.

Un gran número de los pacientes son

fumadores,o están expuestos de forma
prolongada a substancias nocivas para la
mucosa bronquial, y que refiere tos y
expectoración habitual; según la definición
clásica, durante un mínimo de 3 meses y
hasta por dos años consecutivos.
 Esputo inducido
No es el tipo de muestra más
representativa de las inefcciones VRI, por
su mezcla con secreciones procedentes
de todo el arbol traqueo-bronquial y con
la flora saprófita de la orofaringe.

El resultado dependerá en gran medida

de su correcta obtención, control de
calidad antes de iniciar su proceso, tipo
de agente que se pretenda detectar.
 Obtención del producto.
Enjuagar la boca con agua estéril o solución salina.
Obtener el esputo tras una expectoración profunda,
preferentemente matinal.
De no producirse expectoración espontánea, puede
inducirse el esputo con nebulizaciones de suero
fisiológico estéril (15 ml durante 10 minutos.
Recolectar en un frasco de boca ancha esteril por lo
menos 2 ml de la secreción.
Procesar lo antes posible.
Muestra de calidad =>25 PMN CE <=10 en
promedio de 30 campos a 10x.
 Criterios para el diagnóstico de IN
Infecciones del tracto respiratorio.

6.1.2 Infecciones de vías respiratorias bajas. CIE-10 (J12-J18, J20, J86.9, J98.5).
6.1.2.1 Neumonía. CIE-10 (J12-J18).
Cuatro criterios hacen el diagnóstico.
Criterios 6.1.2.1.4 y 6.1.2.1.5
son suficientes para el diagnóstico de neumonía.
6.1.2.1.1 Fiebre, hipotermia o distermia.
6.1.2.1.2 Tos.
6.1.2.1.3 Esputo purulento o drenaje purulento a través de cánula endotraqueal
que al examen microscópico en seco débil muestra <10 células epiteliales y
> 20 leucocitos por campo.
6.1.2.1.4 Signos clínicos de infección de vías aéreas inferiores.
6.1.2.1.5 Radiografía de tórax compatible con neumonía.
6.1.2.1.6 Identificación de microorganismo patógeno en esputo, secreción
endotraqueal o hemocultivo.
 E).- Neumonía adquirida
en la comunidad (NAC).
Constituye una causa muy importante de morbilidad y
mortalidad.
La mortalidad varia desde el 5% a más del 30%, según
el agente causal y diversos factores de riesgo
individuales.
En los países industrializados, la NAC es la primera
causa infecciosa de muerte y la sexta de mortalidad
general.
El número de personas que fallecen cada año en el
mundo como consecuencia de esta infección se cifra en
aproximadamente 5 millones.
 F).- Cultivo de LBA ó CB
Neumonía nosocomial: La mayoría de los
estudios consideran la neumonía nosocomial
como la segunda causa de las infecciones
adquiridas en el hospital.
La neumonía nosocomial se adquiere a través
de tres mecanismos: la aspiración, la
inhalación de aerosoles y la diseminación
hematógena a partir de otro foco de sepsis.
La flora orofaríngea normal está formada
principalmente por cocos grampositivos.
La colonización de la orofaringe por BGN se observa en
menos del 10% de los individuos sanos, aumenta con
hospitalizaciones prolongadas y alcanza el 60-75% en
enfermos críticos ingresados en unidades críticas.

La implicación de los bacilos gramnegativos (enterobacterias

como Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Serratia
marcescens, Enterobacter spp., y Pseudomonas aeruginosa)
en la neumonía nosocomial es muy frecuente (20-60%).

En el enfermo ventilado, Staphylococcus aureus se situaría

en segundo lugar (10-30%), mientras que otros
microorganismos más prevalentes en la comunidad, como
Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae o
Chlamydia pneumoniae serían menos frecuentes.
 Muestras sistémicas

LCR
Sangre
Médula ósea
Líquidos diversos:
a) L. Pleural
b) L. Sinovial
c) L.Peritonial
 4.- Líquido cefalorraquídeo (LCR)
El líquido cefalorraquídeo (LCR) es la muestra
clínica representativa cuando hay sospecha de
meningitis séptica.

Los agentes infecciosos más comunmente

identificados incluyen N. meningitidis,
S. pneumoniae , H. influenzae, S. agalactiae

Otros agentes menos frecuentes son:

Enterobacterias, C. neoformans, C. albicans,
algunos BGNF, S. aureus entre otros.
 Obtención de líquido
cefalorraquídeo (LCR)
La colección del LCR solamente debe ser
tomada por personal especializado y bajo
condiciones de estricta asepsia.

Por lo general, se sacan tres tubos de LR para

química, microbiología y citología.

Si solamente hubiera disponible un tubo, este

debe enviarse al laboratorio de microbiología
para su inmediato análisis.
 Transporte de las
muestras de LCR
Enviar inmediatamente al laboratorio de
microbiología para su análisis (en un
plazo no mayor de 1 hora a partir del
momento de la obtención de la muestra

No refrigerar ni exponer a calor

extremo o a la luz solar.
5.- Sangre (Hemocultivo)

El estudio bacteriológico de la
sangre debe realizarse
principalmente en pacientes con
neumonía, meningitis o fiebre de
origen desconocido, entre otros
síndromes.
DEFINICION

Bacteriemia: es la presencia de
bacterias viables en el torrente
sanguíneo, evidenciada por la
obtención de cultivos en sangre, sea
por punción venosa o por aspiración a
DEFINICION (NOM-045-SSA2–2005 )

Este diagnóstico se establece en un paciente con

fiebre, hipotermia o distermia con hemocultivo
positivo.

El diagnóstico de bacteriemia nosocomial (BN)

puede darse aun en pacientes con menos de 48
horas de estancia hospitalaria si se les realizan
procedimientos de diagnóstico invasivos o reciben
Interpretación del Hemocultivo Positivo.
Un hemocultivo positivo para Gramnegativos,
Grampositivos u hongos es suficiente para hacer el
diagnóstico.
En caso de aislamiento de un bacilo Grampositivo o
estafilococo coagulasa-negativo, puede considerarse
bacteriemia si se cuenta con dos o más de los
siguientes criterios:
• Alteraciones hemodinámicas.
• Trastornos respiratorios.
• Leucocitosis o leucopenia no inducida por fármacos.
• Alteraciones de la coagulación (incluyendo trombocitopenia).
• Aislamiento del mismo microorganismo en otro sitio anatómico.
Los gérmenes identificados como causales de
Bacteriemia Nosocomial según la bibliografía
internacional son principalmente:
1.- Cocos gram positivos:
3.- Bacilos
•Estafilococo Coagulasa-Negativo
Gramnegativos:
•Staphylococcus aureus Pseudomonas spp
E. coli
•Enterococcus spp.
Klebsiella pneumoniae
Enterobacter cloacae
Acinetobacter spp
2.- Hongos levaduriformes: Serratia spp
•Candida spp

RHOVE-DGE
 Material necesario
Guantes, jeringuilla, aguja,
ligadura, torundas, contenedor de
punzocortantes, botella de cultivo,
tintura de yodo, alcohol isopropílico
al 70%.

El tamaño de la aguja dependerá

del lugar de la del tamaño de la
vena y la edad del paciente.
 Venopución
1) Seleccione el brazo y aplique el torniquete para restringir el
paso de la sangre venosa.
2) Normalmente se selecciona la vena más prominente para la
punción.
3) Limpie completamente la piel con alcohol al 70%; y a
continuación limpie con solución yodo povidona, frotando el
área seleccionada y deje secar.
4) Introduzca en la vena la aguja con el bisel hacia arriba. Una
vez que la vena se haya canalizado, extraiga la sangre jalando
el émbolo de la jeringuilla de manera lenta y con continuidad.
5) Una vez que se ha obtenido la cantidad de sangre necesaria,
retire el torniquete y coloque un algodón con alcohol sobre el
sitio de Inserción.
6) Retire la aguja y haga que el paciente sostenga firmemente el
algodón hasta que cese el sangrado.
7) Inocule el medio de cultivo con los volúmenes de sangre que
recomienda el fabricante.
 6.- Piel y tejidos blandos

Cultivo de secreción de
herida

Cultivo de absceso

Cultivo para anaerobios

 A).- Cultivos de secreción de
Heridas, úlceras y abscesos
Lavar cuidadosamente la superficie de la herida.
La aspiración percutánea requiere una desinfección
severa, previa similar a la realizada en la toma de
hemocultivos.
Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando
preferentemente de zonas profundas.
Esta técnica también es adecuada para obtener
muestras de celulitis, úlceras, escaras o abscesos
abiertos y heridas superficiales.
Cuando la muestra sea insuficiente, instilar solución
salina estéril y aspirarlo nuevamente en la jeringa.
Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles
podrá efectuarse un frotis de las partes profundas de la
herida con un hisopo para tinción de Gram.
 Criterios para el diagnóstico de IN

6.8 Infección de piel y tejidos blandos.

6.8.2 Infecciones de tejidos blandos. CIE-10 (L04, L08).
Fascitis necrosante, gangrena infecciosa, celulitis, miositis y linfadenitis.
Con tres o más de los siguientes criterios:

6.8.2.1 Dolor localizado espontáneo o a la palpación.

6.8.2.2 Inflamación.
6.8.2.3 Calor.
6.8.2.4 Rubor, palidez o zonas violáceas.
6.8.2.5 Crepitación.
6.8.2.6 Necrosis de tejidos.
● 6.8.2.7 Trayectos linfangíticos.

● 6.8.2.8 Organismo aislado del sitio afectado.

● 6.8.2.9 Drenaje purulento.

6.8.2.10 Absceso o evidencia de infección durante la

cirugía o por examen histopatológico.
 B).- Cultivo de catéter
Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm
correspondiente a la zona de entrada del catéter.

Hacerlo en forma de círculos comenzando par el centro.

Repetir la misma operación, pero con el alcohol iodado o

iodopovidona.

Retirar el catéter con la máxma asepsia.

Con pinzas y las tijeras estériles, cortar los 3 cm distales del catéter
que corresponden a la porción intravascular.

Introducir el segmento de catéter en un recipiente estéril

correctamente identificado.
 Criterios para el diagnóstico de IN
Bacteriemias.
6.9.6 Bacteriemia relacionada a líneas y terapia intravascular.
Hemocultivo positivo periférico y a través del catéter con dos o más de los
siguientes criterios:

6.9.6.1 Relación temporal entre la administración de terapia

intravascular y la aparición de manifestaciones clínicas.
6.9.6.2 Ausencia de foco evidente.
6.9.6.3 Identificación de contaminación de catéter o solución endovenosa.
6.9.6.4 Desaparición de signos y síntomas al retirar el catéter o la
solución sospechosa.
6.9.6.5 Cultivo de punta de catéter >15 UFC/ml.