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AMIR Genetica
AMIR Genetica
Gentica
Gentica
ndice
TEMA 1. LA CLULA. ...............................................................................................................1
1.1. Componentes celulares. ............................................................................................1
TEMA 2. INTRODUCCIN A LA BIOLOGA MOLECULAR. .................................................1
TEMA 3. BASES MOLECULARES DE LA HERENCIA. ............................................................1
3.1. Teora celular. Clulas eucariotas y procariotas..........................................................1
3.2. Estructura de la informacin gentica. .......................................................................1
3.3. Genes eucariotas y procariotas. .................................................................................2
3.4. Expresin de los genes. ..............................................................................................2
3.5. Control de la expresin gentica. Factores de transcripcin. ....................................2
TEMA 4. ORGANIZACIN DEL ADN CELULAR. CROMOSOMAS. .....................................3
4.1. Cromatina. .................................................................................................................3
4.2. Cromosomas. .............................................................................................................3
TEMA 5. CICLO CELULAR. MITOSIS Y MEIOSIS. .................................................................4
5.1. Ciclo celular y su control............................................................................................4
5.2. Mitosis. .......................................................................................................................4
5.3. Meiosis .......................................................................................................................4
5.4. Particularidades de la ovognesis humana..................................................................6
TEMA 6. BIOTECNOLOGIA APLICADA A LA MEDICINA. ...................................................6
6.1. Principios generales del anlisis del ADN...................................................................6
6.2. Sondas moleculares. ...................................................................................................6
6.3. DNAsas de restriccin. ..............................................................................................6
6.4. Blotting: Southern, Northern, Western. ....................................................................6
6.5. La hibridacin in situ. ..............................................................................................6
6.6. Amplificacin del ADN: PCR. ....................................................................................7
6.7. Polimorfismos del ADN (RFLP). ................................................................................7
6.8. Diagnstico genotpico. ..............................................................................................7
6.9. Gentica inversa. ........................................................................................................7
6.10. Modelos animales de enfermedad humana. ...............................................................7
6.11. Espectrometra de masas. ..........................................................................................8
6.12. Arrays de DNA. .........................................................................................................8
6.13. Citometra de flujo. ....................................................................................................8
6.14. Anticuerpos monoclonales quimricos y humanizados..............................................8
TEMA 7. ENFERMEDADES GENTICAS. DEFINICIN Y MECANISMOS...........................8
7.1. Lesiones en el ADN. .................................................................................................8
7.2. Mutaciones. ................................................................................................................8
7.3. Enfermedades genticas.............................................................................................8
7.4. Mosaicismo.................................................................................................................9
7.5. Mecanismos de produccin de enfermedades genticas. ..........................................9
Gentica
TEMA 1. LA CLULA.
1.1.
Componentes celulares.
3.2.
Figura 1.
Pg. 1
3.3.
3.4.
3.5.
Pg. 2
Gentica
4.2.
Figura 4.
Cromatina.
Cromosomas.
Pg. 3
5.2.
5.3.
Figura 6.
Pg. 4
Mitosis.
Meiosis.
Gentica
Pg. 5
6.2.
Sondas moleculares.
6.3.
Figura 8.
5.4.
Pg. 6
DNAsas de restriccin.
6.4.
6.5.
La hibridacin in situ.
Consiste en hibridar una sonda marcada con los cidos nucleicos situados en el interior de la clula; el resultado se ve al microscopio.
Para estudiar la presencia de genes concretos en el ADN, se
puede realizar la hibridacin sobre el ncleo interfsico o sobre
cromosomas en metafase; en este ltimo caso podemos localizar
en qu cromosoma, brazo y banda se encuentra el locus del gen
estudiado. Igualmente podemos visualizar cuantas copias de un
cromosoma se encuentran en cada ncleo y detectar fcilmente
monosomas y trisomas.
Gentica
Una variante de la tcnica de hibridacin in situ es el cariotipo
espectral (SKY): utiliza un conjunto de sondas gnicas marcadas
con al menos cinco uorocromos diferentes de modo que se tie
cada cromosoma de una manera distinta dando un color diferente.
Esto nos permite identicar de modo rpido y fcil cada cromosoma y analizar su estructura detectando posibles traslocaciones
cromosmicas.
6.6.
Figura 9.
6.7.
6.8.
Diagnstico genotpico.
6.9.
Gentica inversa.
Pg. 7
Lesiones en el ADN.
7.2.
Mutaciones.
Una mutacin es una alteracin en la secuencia del ADN, que supone una lectura distinta del cdigo gentico y causa un trastorno
funcional en las clulas; si esa diferente lectura del ADN no causa
patologa, se considera un polimorsmo. Bsicamente, la alteracin
del mensaje gentico a nivel fsico puede deberse a:
1. Deleciones: prdida de bases, acortndose la longitud del gen.
2. Inserciones: aumento de la longitud del gen.
3. Sustituciones: cambio del signicado del mensaje gentico.
Las alteraciones fsicas anteriormente expuestas repercuten, a
nivel funcional, en las siguientes mutaciones:
1. Mutacin de sentido equivocado. Hay una modicacin en la
composicin de bases pricas o pirimidnicas del gen. En la
mayor parte de los casos cambia una nica base, pero se leer
como un codn distinto que codica a otro aminocido diferente. Un ejemplo son las betatalasemias.
2. Mutacin sin sentido. Como consecuencia del cambio de una
base en un codn concreto, ste se transforma en un codn de
terminacin de la traduccin ribosmica del ARNm, dando lugar
a una protena de menor longitud.
3. Cambio del marco de lectura. Como los codones son un conjunto
de tres nucletidos, si se pierde uno, los otros dos restantes formarn el triplete con el inmediatamente siguiente, cambiando
el sentido de toda la secuencia a partir del punto de la prdida
de la base.
Pg. 8
7.3.
Enfermedades genticas.
Gentica
Las enfermedades genticas adquiridas se originan cuando
los mecanismos de reparacin del ADN son incapaces de restaurar la informacin gentica correcta. Esto puede deberse a que
sean desbordados por una incidencia de lesiones superior a su
capacidad de reconstruccin (sndromes de radiacin) o bien
cuando las enzimas de reparacin funcionan de modo defectuoso.
Si la lesin afecta a las clulas germinales, ser transmitida a la
descendencia.
Desde el punto de vista de la repercusin clnica de la enfermedad gentica y las posibles actuaciones mdicas, hay tres tipos de
patologas genticas. En la siguiente tabla vienen reejadas.
7.4.
Mosaicismo.
7.5.
8.1.
Conceptos fundamentales.
8.2.
Pg. 9
Corea de Huntington.
Distroa miotnica.
Enfermedad de Alzheimer.
Esclerosis tuberosa.
Esferocitosis hereditaria.
Hipercolesterolemia familiar.
Neurobromatosis tipo 1 y tipo 2.
Osteognesis imperfecta.
Otosclerosis.
Poliposis colnica familiar.
Poliquistosis renal del adulto.
Sndrome de Marfan.
8.3.
CARACTERSTICAS.
La consanguinidad favorece la reunin en un individuo de genes
recesivos raros.
La ventaja selectiva del heterocigoto hace que a veces aparezca
cierta enfermedad en mayor porcentaje de lo esperado. Un ejemplo
lo tenemos en los individuos heterocigotos para el gen de la anemia
falciforme, ms resistente al paludismo que los homocigotos sanos
(con dos copias no alteradas del gen de la anemia falciforme).
La enfermedad monognica autosmica recesiva ms frecuente
es la anemia drepanoctica.
Pg. 10
8.4.
Se conocen muy pocas patologas que sigan este tipo de herencia. Los dos alelos presentes en el heterocigoto son activos
(alelos codominantes) y se localizan en un autosoma. Aparecen
3 fenotipos, uno de cada homocigoto y el tercero del individuo
heterocigoto.
8.5.
Gentica
Este tipo de herencia es rara, por lo que, al hablar de herencia
ligada al sexo, generalmente se entiende que estamos tratando de
herencia ligada al cromosoma X.
8.6.
Heterogeneidad.
8.7.
8.8.
Imprinting gnico.
Ataxia espinocerebelosa.
Corea de Huntington.
Neurobromatosis tipo 1.
Sndrome de Prader-Willi.
Pg. 11
Figura 11. Translocacin robertsoniana, un portador asintomtico puede tener hijos con trisoma.
de las clulas del organismo (el cigoto ya presentaba la alteracin)
o bien en clulas aisladas (mosaicismo).
Se considera que del 65% al 80% de las alteraciones cromosmicas del cigoto se asocian con abortos espontneos. La mayora de
los casos son espordicos y no existe una historia familiar, el riesgo
de recurrencia en madres que tienen ya un hijo con una alteracin
cromosmica es del 1%. Existen anomalas cromosmicas adquiridas
(slo afectan a algunas clulas y tejidos del organismo) en patologas
como el cncer, la exposicin a mutgenos qumicos y radiaciones
ionizantes. En los casos adquiridos suele haber una gran heterogeneidad en las alteraciones cromosmicas, mientras que en los
congnitos la alteracin es la misma para todas las clulas afectas.
9.2.
Anomalas estructurales.
Consisten en una reordenacin lineal de los genes sobre los cromosomas. La incidencia es de 1 cada 2.000 nacimientos, siendo las
ms frecuentes las deleciones y traslocaciones.
Delecin. Prdida de un segmento cromosmico y, por tanto, de
la informacin contenida en l. En el 85% de los casos de delecin
se pierde el fragmento cromosmico, dando lugar a monosomas
parciales. Una delecin se nombra con el nmero del cromosoma
y el brazo afectados, seguida del signo menos.
Microdelecin. Son deleciones no observables por tcnicas citogenticas habituales (pero s por tcnicas de biologa molecular).
Tienen inters clnico las deleciones:
13q14- brazo largo del cromosoma 13, asociada al retinoblastoma.
22q11- brazo largo del cromosoma 22, asociada al sndrome de
Di George.
5p15- brazo corto del cromosoma 5, que origina el sndrome
del maullido de gato.
Duplicacin. Repeticin de un segmento cromosmico.
Inversin. Inversin o cambio de sentido de un segmento
cromosmico.
Pg. 12
Gentica
de la traslocacin posee 45 cromosomas (uno de ellos en realidad es
doble). Algunos casos de sndrome de Down o de Patau se producen
por este mecanismo, los enfermos presentan 46 cromosomas, uno
de ellos doble (MIR 94-95, 54).
9.3.
Anomalas numricas.
El nmero euploide de cromosomas es 46 (diploide); existe una anomala numrica cuando hay una variacin (ganancia o prdida) del
nmero euploide. Poliploida: la clula tiene un nmero de cromosomas distinto de 46, pero mltiplo de 23 (triploide, 69; tetraploide, 92;
etc.), el 1,7% de las concepciones son de embriones poliploides, pero
todos acaban como abortos espontneos. Aneuploida: situacin en la
que una clula tiene un nmero de cromosomas distinto del euploide
y que no es mltiplo de 23. Las trisomas son las aneuploidas ms
frecuentemente observadas en la especie humana.
Las aneuploidas distintas de las trisomas y el sndrome de Turner que afectan a todas las clulas del organismo no son compatibles
con la vida, pero s se pueden observar en material de abortos y en
grupos celulares aislados en patologas genticas adquiridas (cncer
y exposicin a mutgenos qumicos y radiaciones).
9.4.
TRISOMAS.
El paciente tiene 47 cromosomas, existiendo por tanto uno de ms.
Ms de la mitad de los abortos espontneos presentan aneuploida,
habindose detectado trisomas de todos los pares, excepto del 1.
La trisoma ms frecuente en la especie humana es la del par 16,
pero slo se ve en abortos espontneos. Slo se ven en la prctica
mdica enfermos con trisomas de los gonosomas y de los pares 21,
13 y 18. A la edad adulta slo llegan los pacientes del Sndrome de
Down y los portadores de trisomas de gonosomas.
Trisoma del 21. Sndrome de Down. Es la trisoma ms frecuente
en clnica: 1/700 nacidos vivos. El 78% de los fetos con el sndrome
no llegan a nacer (abortos espontneos).
El 95% de los enfermos tienen cariotipo 47,+21 y se han originado por falta de disyuncin (separacin de cromosomas o cromtidas) en la meiosis. Un 1% son mosaicos: coexisten clulas 46 y
47,+21, y se originaron por falta de disyuncin en una de las primeras
mitosis de la vida embrionaria. El 3-4% tienen un reordenamiento
balanceado (traslocacin robertsoniana) siendo la ms frecuente
t(14q; 21q) (MIR 96-97, 218).
Los genes responsables de la patologa tpica del sndrome estn
en la regin 21q22.1 del cromosoma. En esta zona se sitan cinco
genes, siendo los ms interesantes son la superxido dismutasa1(SOD1) y GART. SOD1 es una enzima que cataboliza el paso de radicales de oxgeno a perxido de hidrgeno. La sobreexpresin podra
tener que ver con el envejecimiento prematuro de los pacientes. El
gen Gart codica tres enzimas bsicas en la sntesis de purinas, cuyos
niveles estn aumentados permanentemente en los pacientes. Esto
podra explicar las anomalas neuropsquicas del sndrome.
El riesgo de recurrencia es 1-2% segn dos factores: edad de la
madre y posibilidad de que los progenitores sean portadores de
una traslocacin.
Trisoma del 18. Sndrome de Edwards. Frecuencia: 1/3000 nacidos, predomina en mujeres. El 95% de los fetos afectados acaban
como abortos espontneos, y de los que llegan a nacer, el 90% mueren en el primer ao de vida. Origen: no disyuncin cromosmica
en la meiosis. El riesgo de recurrencia es el 1%.
Trisoma del 13. Sndrome de Patau. Frecuencia: 1/5000 nacidos,
el 90% mueren en el primer ao de vida.
Origen: en el 80% de los casos, una no disyuncin meitica; en
el restante 20%, uno de los padres es portador de una traslocacin
entre los cromosomas 13 y 14: t (13;14q).
ALTERACIONES DE LOS CROMOSOMAS SEXUALES.
Son menos graves que las alteraciones en autosomas. Producen como
rasgo principal infertilidad, mientras que las autosmicas originan
malformaciones graves y retraso mental. Las ms frecuentes son:
Sndrome de Turner (45, X). Es la nica monosoma compatible
con la vida. Frecuencia: 1/5000 mujeres. Aunque es la aneuploida
ms frecuente en embriones humanos, la mayor parte no llegan a
nacer, siendo la frecuencia de abortos espontneos de los fetos 45,
X del 99%.
Un 50% son monosomas puras (45, X): todas sus clulas tienen
45 cromosomas, un 33% presentan mosaicismo y el resto presenta
un cariotipo 46, XX, pero uno de los cromosomas X es anormal,
existiendo deleciones en su brazo corto.
La patologa del sndrome se debe a la no expresin de algunos
genes, situados en el segmento homlogo del cromosoma X, que
deben estar duplicados para un metabolismo celular normal. Recordar que estos genes no se inactivan por efecto Lyon.
Sndrome de la superhembra o triple X (47, XXX). Frecuencia:
1/1000 mujeres. Origen: no disyuncin meitica. Es un sndrome
mal denido. La mayor parte de las ocasiones no aparece patologa.
Se ha asociado con retraso mental leve y psicosis. En pacientes que
poseen ms de 3 cromosomas X (48, XXXX, 49, XXXXX, etc.) aparece
retraso mental y cuadros psicticos, que son ms intensos cuanto
mayor sea el nmero de cromosomas X.
Sndrome de Klinefelter (47, XXY). Frecuencia: 1/1000 hombres.
Origen: no disyuncin meitica. En el 60% de los casos, el cromosoma X extra es de origen materno. A veces aparece el mosaico 46, XY
/ 47, XXY. En sus clulas tienen 1 corpsculo de Barr, caracterstica
propia de las clulas femeninas.
Sintomatologa: microrquidia, azoospermia y ginecomastia. En
algunos casos aparece retraso mental y conducta antisocial.
Sndrome del supermacho (47, XYY). Frecuencia: 1/1000 varones. En estudios de cribaje realizados sobre recin nacidos que luego
fueron controlados, se evidenci que son ms altos que la media,
suelen tener inteligencia normal o algo disminuida, generalmente
no son estriles (pueden tener hijos normales) y tienen un riesgo
elevado de padecer problemas conductuales.
Sndrome del cromosoma X frgil o de Martin-Bell. Frecuencia: 1/1000 varones. Es, en frecuencia, la segunda causa de retraso
mental tras el sndrome de Down y la primera ligada al sexo. Se trata
de un sndrome recesivo ligado a la fragilidad de la regin Xq27.3
(telmero del brazo largo del cromosoma X). El mecanismo de la
enfermedad es, como en el corea de Huntington, la expansin de
secuencias. El sndrome se denomina as porque el telmero presenta un aspecto deshilachado, como si se hubiese roto por mnimas
manipulaciones (frgil).
Sintomatologa: retraso mental y genitales, orejas y nariz de
mayor tamao del normal. El 30% de las mujeres portadoras tienen
retraso mental moderado.
Otras anomalas en cromosomas sexuales. Son anomalas frecuentes entre los cromosomas X e Y la formacin de isocromosomas
(delecin de un brazo y duplicacin del otro) o la delecin de un
brazo o de todo el cromosoma, dando lugar a cuadros clnicos no
puros por aparecer en el mismo individuo varios cariotipos.
Molas hidatiformes. Constituyen un caso excepcional de alteraciones numricas en embriones, conviene recordar que las molas se
originan a partir de un embarazo anormal, las vellosidades corinicas crecen de modo anormal y constituyen un tumor invasivo (ver
ginecologa para ms informacin). Las molas son de dos tipos:
Completa. No contiene feto. Las clulas tienen un cariotipo 46,
XX, siendo todos los cromosomas de origen paterno. Todos los
marcadores son homocigotos, es decir, los dos cromosomas de
cada pareja son idnticos entre s. Se piensa que se origina por
fecundacin de un ovocito sin ncleo.
Pg. 13
Albinismo.
Ataxia telangiectasia.
Atroa medular espinal del adulto.
Enfermedad granulomatosa crnica.
Inmunodeciencia combinada severa.
Retinitis pigmentaria.
Sndrome de Ehlers-Danlos.
Sordera.
Pg. 14
Gentica
5. INVASIVIDAD: METSTASIS.
Oncogenes y transformacin celular. Se denomina oncogn a un
gen que, como consecuencia de una alteracin en su cdigo, o en su
regulacin, codica una protena capaz de desencadenar la transformacin maligna en la clula portadora de ese gen. Una clula
normal no tiene oncogenes, tiene genes de control del ciclo celular;
cuando uno de estos genes se altera o se desregula, es cuando pasa
a denominarse oncogn.
Atendiendo al mecanismo de accin de las protenas por ellos
codicadas, se pueden clasicar a estos genes en cuatro grupos.
1. Control de la entrada en ciclo celular. La existencia de una
protena codicada por un oncogn hara que la clula entrase
en ciclo, sin que nadie le hubiese dado la orden para ello, y una
vez originadas dos clulas hijas, volveran ambas a entrar en
ciclo. Es el mecanismo por el que malignizan las protenas de
los primeros oncogenes descritos, como el src. Ejemplos: src,
ras, Her2 y myc.
2. Control de la salida del ciclo celular. Una vez entrada la clula
en ciclo, es incapaz de salir de ste. A los genes normales (no
alterados) se les llam antioncogenes (oncogenes recesivos) y
a las protenas que codican, factores supresores. Ejemplos Rb
y p-53.
3. Control de la muerte celular programada (apoptosis). La clula
se negara a suicidarse, cuando fuera instada a ello, por haberse
detectado cualquier mutacin en la misma. Son genes de este
tipo bcl-2 y fas.
4. Sistema de reparacin de lesiones en el ADN. Si se alteran los
mecanismos de reparacin, es fcil que surjan mutaciones en
cualquiera de los genes de los tres grupos estudiados anteriormente que, al no ser reparadas, llevan a la enfermedad de modo
rpido.
Pg. 15