Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Bioquímica Del Biofilm Cariogénico PDF
Bioquímica Del Biofilm Cariogénico PDF
BIOFILM CARIOGNICO
ENFERMEDADES ASOCIADAS A PLACA:
CARIOLOGIA Y PERIODONTOLOGIA
2013
INTRODUCCIN
Como toda forma de vida, los microorganismos requieren un aporte de nutrientes para su
mantenimiento y crecimiento. stos nutrientes proporcionan a los organismos la energa necesaria
para sus reacciones biosintticas, as como la materia prima para la sntesis de los componentes
celulares. La microflora oral puede alimentarse de un conjunto de nutrientes que a veces es
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
superabundante, pero en otras ocasiones es intermitente y limitado en los sustratos requeridos. Las
fuentes pueden ser los tejidos y secreciones del husped, su dieta y tambin productos
metablicos de los microorganismos que habitan en estrecha proximidad.
Los microorganismos orales presentan gran diversidad de requerimientos nutricionales.
Como fuente de energa algunos de ellos utilizan carbohidratos mientras que otros pueden preferir
aminocidos o cidos orgnicos. Para el crecimiento todos necesitan componentes nitrogenados.
Las necesidades de nitrgeno son satisfechas por pptidos, aminocidos o, en algunos casos,
amonaco. Todos necesitan vitaminas, minerales, purinas, pirimidinas, cidos grasos y otros
factores de crecimiento. Debido a la gran diversidad nutricional de los microorganismos, es lgico
esperar que la localizacin de cada uno de ellos se vea grandemente influida por la disponibilidad
de los nutrientes requeridos.
Por lo tanto, el metabolismo y la actividad nutricional de las bacterias del biofilm dependen
de la disponibilidad de nutrientes. En ocasiones, el metabolismo bacteriano se ha de efectuar con
deficiencia de azcares, fosfatos o compuestos nitrogenados, segn la localizacin del biofilm.
FORMACIN DEL BIOFILM
La formacin del biofilm tiene lugar an en perodos de ayuno. Por tal motivo, la matriz del
biofilm dental en la que estn inmersas las bacterias, presentar diferentes texturas, grosor y
composicin segn se forme en ausencia o en presencia de alimentos.
Formacin del biofilm en ausencia de ingesta de alimento
Luego de un correcto cepillado, a las pocas horas se comienza a colonizar la superficie
dentaria. En ausencia de ingesta de alimentos, las bacterias utilizarn fuentes endgenas de
nutrientes. Son nutrientes endgenos los producidos en la cavidad oral del husped. Las fuentes
de estas sustancias nutritivas incluyen la saliva, el fluido
an aquella que contiene glucosa o almidn resultar poco estructurada y porosa. En cambio, en
caso de dietas ricas en sacarosa la biopelcula adquiere el aspecto de una capa gelatinosa. Esto
sugiere que existe una relacin directa entre el consumo de sacarosa y la presencia de ciertos
homopolisacridos que sern sintetizados por la flora cariognica de la biopelcula y que darn a la
misma las caractersticas de resistencia y adhesividad.
ACTIVIDADES BIOQUMICAS DE LAS BACTERIAS DEL BIOFILM
Es decir que:
Denominacin
Tipos de uniones
Funciones
Solubilidad
Reserva
1,6
1,4 1,3
energtica
Glucanos
mutanos
1,3
levanos
2,6
Fructanos
1,6 1,4
Adhesin
---
No
Reserva
energtica
Figura 1: Estructura de un glucano ramificado donde se ven los enlaces - 1, 6 de las cadenas lineales y las
ramificaciones - 1, 4 y - 1,3.
Formacin de polisacridos
La sacarosa tiene importancia especial en el metabolismo del biofilm debido a que los
estreptococos
tienen
enzimas
extracelulares
sintetizadoras
de
homopolisacridos:
las
(glucosa)n+1 + fructosa
glucano
Por su parte, el residuo de fructosa es captado por la clula bacteriana donde tiene dos
destinos: es metabolizado dando como producto final cidos orgnicos bien es acumulado como
polisacrido intracelular de reserva. Los cidos mencionados difundirn hacia la matriz de la
biopelcula acidificando el entorno y produciendo el consiguiente descenso de pH.
La reaccin no parece requerir un cofactor metlico ni coenzimas, y no resulta afectada por
los iones fluoruro. La enzima tiene un amplio pH ptimo (entre 5 y 7).
La enzima fructosiltransferasa encontrada en St. salivarius, A. viscosus y algunos St.
mutans, sintetiza otro polisacrido extracelular importante, homopolmero de la fructosa, al que se
denomina levano o fructano. Este es un polmero de la D-fructofuranosa que muestra un
predominio de enlaces (26), tales polmeros tienen elevado peso molecular, son bastante
solubles y fcilmente degradables. Dado que estas bacterias tambin son capaces de degradar
dicho polmero, es difcil determinar la verdadera produccin de fructano por las bacterias del
biofilm. El sustrato especfico para las fructosiltransferasas es la sacarosa, de la que se usa la
fructosa para incrementar el polmero fructofuranosa, liberando una molcula de glucosa en el
proceso. En este caso, la glucosa restante ser captada por la clula bacteriana y destinada a la
obtencin de energa o almacenada como polmero intracelular de reserva, teniendo el mismo
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
(fructosa)n+1 + glucosa
fructano
FRUCTOSA
Figura 3: Estructura de la sacarosa
La sacarosa tiene una unin glucosdica entre -D-glucosa y -D-fructosa que incluye los
grupos reactivos de ambas hexosas y que tiene una energa libre de hidrlisis equivalente a la del
ATP. Tal energa es utilizada para la reaccin de polimerizacin. La energa libre de hidrlisis de
maltosa y lactosa es mucho ms baja, por lo tanto estos disacridos no resultan efectivos para la
sntesis de polisacridos extracelulares. Esto explica por que, si bien otros azcares pueden ser
metabolizados por las bacterias, la sacarosa es el nico hidrato de carbono eficiente para la
sntesis de polmeros extracelulares.
Segn hemos explicado, la matriz del biofilm recin formado, en presencia de sacarosa se
convierte con el tiempo en una malla gruesa y gelatinosa de protenas y polisacridos, a la que
llamaremos biopelcula madura.
Esmalte
Sacarosa
Bacteria
Matriz proteica
Polisacridos extracelulares
Glucosa
Fructosa
Figura 4: Formacin de polisacridos extracelulares por bacterias del biofilm a partir de sacarosa dietaria.
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
El efecto de esta biopelcula gruesa consiste en una limitacin del libre movimiento de las
molculas entre la saliva y el biofilm, por ejemplo el oxgeno. Se crea as un ambiente anaerbico
que favorece la fermentacin de los azcares con produccin de distintos cidos orgnicos tales
como: lctico, frmico,
Es sabido que no todos los hidratos de carbono de la dieta sern utilizados de igual forma
por las bacterias de la biopelcula.
Los carbohidratos polimricos, como el almidn, son menos accesibles como sustratos para
las bacterias de la biopelcula que aquellos de bajo peso molecular. Ello se debe a que los
polisacridos, dado su alto peso molecular difunden con menor facilidad que los mono o
disacridos. Adems los polisacridos deben ser hidrolizados antes de ser metabolizados.
El impacto de los diferentes hidratos de carbono sobre el pH de la biopelcula bacteriana fue
estudiado por Stephan en 1940, quien realiz una medicin directa de los cambios de pH en la
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
10
Tiempo (min)
El estudio se hizo sobre una biopelcula desarrollada durante 72 hs. A tiempo 0 los
pacientes se realizan un enjuague prolongado (60 seg.) con solucin de sacarosa al 10%.
En contraste con los monosacridos y la sacarosa, las soluciones de almidn al 10%
tuvieron poco efecto o ninguno sobre el pH de la biopelcula por las razones antes comentadas. Los
alcoholes o azcares como el xilitol (derivado de xilosa) o el sorbitol (derivado de glucosa) no son
metabolizados por las bacterias de la biopelcula y por lo tanto no producen cada de pH. Por esta
razn se ha extendido su uso como edulcorantes alternativos de la sacarosa para productos
seguros dentalmente o no cariognicos.
Stephan realiz la misma curva en un grupo de pacientes con baja actividad cariognica y
en otro con alta actividad. En el primer grupo el descenso del pH del biofilm luego del enjuague fue
menor y el retorno a los valores iniciales fue ms rpido que en el segundo grupo.
11
pH
en salud
cariognico
Tiempo (min)
Debemos tener en cuenta adems que los valores de pH varan de un sitio a otro
dependiendo del espesor de la biopelcula y el acceso de saliva. De tal forma que en el grfico
pH de la placa
Oclusal
Interproximal
Tiempo (min)
Una vez formado el biofilm en la superficie del diente, las bacterias continan metabolizando
los sustratos disponibles para satisfacer sus necesidades energticas y producir componentes
estructurales destinados al mantenimiento y la reproduccin.
Los carbohidratos son la fuente principal de energa y pueden provenir de la dieta o de los
polisacridos intracelulares.
Desde el punto de vista metablico las biopelculas bacterianas pueden dividirse en dos
grandes grupos segn su principal fuente energtica:
a) las que utilizan preferentemente carbohidratos que convierten en cidos orgnicos y tienden a
disminuir el pH.
b) las que utilizan preferentemente material nitrogenado y producen sustancias bsicas que tienden
a incrementar el pH;
Es importante destacar que las bacterias usan ambos tipos de sustratos aunque cada
bacteria en particular metaboliza preferencialmente uno de ellos. Las bacterias del biofilm
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
12
Estos microorganismos pueden captar azcares del medio por dos mecanismos:
1) de alta afinidad
2) de baja afinidad
Estos mecanismos operan en situaciones diferentes pero son ambos imprescindibles para el
metabolismo bacteriano.
13
1) De alta afinidad
En condiciones de ausencia de alimento o muy baja concentracin de azcares en la
biopelcula y por lo tanto a pH neutro, opera el sistema de la fosfotransferasa.
Este es un sistema de transporte activo de azcares presente en muchas membranas
bacterianas. Constituye el paso limitante en la produccin de energa cuando el estreptococo se
desarrolla a bajas concentraciones extracelulares de azcares. Es un sistema altamente especfico,
presenta alta afinidad para azcares y cataliza la transferencia de un grupo fosfato desde el
fosfoenolpiruvato al azcar que es entonces transportado al interior de la clula.
El azcar fosforilado ser utilizado como sustrato para la gluclisis generando dos moles de
fosfoenolpiruvato, uno de los cuales ser usado para fosforilar la prxima molcula de azcar que
ingrese y el otro se usar para la produccin de ATP.
14
evitar el descenso del pH intracelular que inhibira a la va glucoltica los protones son expulsados
en intercambio con iones K+ por la actividad de una ATPasa ligada a la membrana bacteriana. Se
genera un gradiente de protones y por consiguiente una fuerza protomotriz a travs de la
membrana celular. Esto favorece el transporte del azcar hacia el interior en simporte con H+.
Este sistema resulta muy activo en el Streptococcus mutans, an a pH 5,5, el cual es
desfavorable para otras bacterias de modo que le permite ser dominante en la biopelcula
bacteriana.
Sistema dependiente
de la fuerza protomotriz
Sistema del
fosfoenolpiruvato
Los estreptococos no contienen las enzimas del ciclo de Krebs ni las de la cadena
respiratoria, requieren entonces de la gluclisis para la obtencin de energa.
El destino final del piruvato depende de que la disponibilidad de azcares sea alta o baja:
15
Sin embargo esto no ocurre porque otras bacterias como las del gnero Veillonella utilizan
el cido lctico como sustrato removiendo de este modo un producto perjudicial para el
estreptococo.
La Veillonella metaboliza el lactato de la siguiente forma:
lactato + H2O
acetato + CO2 + 2 H2
16
lactato + H2
propionato + H2O
Los cidos propinico y actico son ms dbiles que el lctico y actan como bufferes
elevando el pH del medio.
Ca2+ + H2PO4-
17
Zona de reprecipitacin
Biofilm
Biofilm
Esmalte
Esmalte
(a)
(b)
En esta figura se esquematiza el intercambio inico entre la superficie del esmalte y el fluido
de la placa que produce una superficie altamente sustituida (a) y una incipiente lesin cariosa (b),
donde el ataque cido severo sobre la superficie del esmalte produce una subsuperficie
descalcificada sobre una superficie externa relativamente densa debido a la reprecipitacin y a la
migracin neta de iones fuera del esmalte. Eventualmente, la superficie irregular y permeable se
rompe y las bacterias invaden el lugar y se forma ms placa dentro de la cavidad, la cual bajo
Ctedra de Bioqumica General y Bucal FOUBA-
18
CONCLUSION:
La cariogenicidad va a depender de:
Tipo de Hidrato de Carbono en la dieta
Tipo de bacteria
Tipo de polisacrido producido
Frecuencia y oportunidad de exposicin al azcar
Localizacin del biofilm
Todo esto en funcin del tiempo.
19