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Laboratorio Bioquimica Solucion
Laboratorio Bioquimica Solucion
BIOQUIMICA
PRESENTADO POR:
Laura Gutirrez Vargas
C.c. 53094646
John Jairo Mogolln
C.C. 80069787
Edwin Len Manzano
PRCTICA 1
pH Y SOLUCIONES BUFFER
Resumen.
No siempre un sistema buffer es apropiado, por que los iones de algunas sales
hidroliticas pueden, por ejemplo, daar a los organismos que entran en contacto
con el.
H CC
cido
sal
K o OH
C base
K
C sal
Metodologa.
Reactivos y materiales
* 2 Pipetas graduadas de 10 ml
* 1 Soporte para tubos de ensayo
* 14 tubos de ensayo
Procedimiento
Disolucin
Cantidad de cido
actico 0.1 N (ml)
Cantidad
de
acetato sdico 0.1
N (ml)
pH calculado
pH experimental
Disolucin
Cantidad de NaH2PO4
0.15 M (ml)
9.5
Cantidad de Na2HPO4
0.15 M (ml)
0.5
7
4
ph calculado
ph experimental
Resultados.
Diagrama de flujo
8
3
7
Medir y aadir el
volumen de cido o de
base correspondiente
Medir y aadir el
volumen de sal
correspondiente
Determinar el pH de
la solucin
Tablas.
Disolucin
Cantidad de cido
actico 0.1 N (ml)
Cantidad
de
acetato sdico 0.1
N (ml)
pH calculado
3.80
4.15
4.76
5.12
5.36
5.71
pH experimental
3,48
4,11
4,70
5,28
4,95
6,32
Disolucin
Cantidad de NaH2PO4
0.15 M (ml)
9.5
Cantidad de Na2HPO4
0.15 M (ml)
0.5
pH calculado
5.58
5.90
6.25
6.49
6.68
6.86
7.03
7.23
pH experimental*
5,68
5,72
6,04
6,30
6,80
6,70
8
3
Clculos.
pH calculado (acidas):
H CC
cido
sal
K = 1.74 10 -5 M
C cido = 0.1 N x 9 mL / 10 mL = 0.9 meq-gr x (1mmol/1meq-gr) / 10 mL
C cido = 0.09 M
C sal = 0.1 N x 1 mL/10 mL = 0.1 meq-gr x (1mmol/1meq-gr) / 10 mL
C sal = 0.01 M
H 00..09
1.74 10
01
1.566 10 4
pH = -Log H = 3.8
pH calculado (bsicas):
H CC
cido
sal
K = 1.38 10 -7 M
C cido = 0.15 M x 9.5 mL / 10 mL = 1.425 mmol / 10 mL
C cido = 0.1425 M
C sal = 0.15 M x 0.5 mL/10 mL = 0.075 mmol / 10 mL
C sal = 0.0075
H 00..1425
1.38 10
0075
2.622 10 6
pH = -Log H = 5.58
Anlisis de resultados.
Conclusiones.
http://dta.utalca.cl/quimica/profesor/urzua/cap9/acidobase/acidobase.htm
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/constantes
de
disociacion.html
RESUMEN
JUSTIFICACION
La bioqumica es una ciencia que estudia todas las formas de vida, lo que
pretendemos es adquirir conocimientos bsicos acerca de las biomoleculas y
su metabolismo comprendiendo la interaccin entre ellas, las propiedades
estructurales y funcionales de las principales molculas que intervienen en la
alimentacin y el papel que juegan en le metabolismo de los medicamentos,
esta es la clave para la correcta interpretacin y un prediccin acertada de la
OBJETIVOS:
Reactivos
2-nitroanilina 0.16% en actico HCI
Nitrito de sodio 0,08% en H2O
Etanol 96%
Acido oxlico 0.15%
Solucin de vitamina C, recin preparada (0.2 mg/mI)
1. Procedimiento
En este grupo tomamos la pulpa de un mandarina, Para obtener el extracto problema se
procede de la siguiente manera: En el caso de las frutas ctricas se toma 1 ml de jugo, se
pesa y luego se agregan 4 ml de cido oxlico al 0,15%, se mezcla bien y se filtra, el
filtrado se conserva para hacer la determinacin colorimtrica.
Tubos
Condiciones
Fruta
D1
Verdura
D2
2-nitroanilina, ml
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
Nitrito de sodio, ml
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
Patrn vitamina C, ml
0.1
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
cido oxlico, ml
1.0
0.9
0.8
0.6
0.4
0.2
Extracto problema, ml
1.0
1.0
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
Agua destilada, ml
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
3.8
RESULTADOS
G
PROM
Tu
b
o
1
1.
31
6
1.
38
7
1.
13
4
1.
12
4
1.
08
7
Tu
b
o
2
1.
18
5
1.
41
6
1.
30
6
1.
33
7
1.
08
6
Tu
b
o
3
1.
18
0
1.
42
4
1.
48
3
1.
29
6
0.
93
3
Tu
b
o
4
1.
29
7
1.
15
8
1.
33
4
1.
30
1
1.
12
1
Tu
b
o
5
1.
12
3
1.
26
0
1.
42
0
1.
17
8
1.
13
3
Tu
b
o
6
1.
29
1
1.
44
3
0.
90
9
1.
37
8
0.
97
6
Tu
b
o
M
0.
01
6
0.
01
4
0.
03
6
0.
03
1
0.
00
3
EDIO
ABSORBANCIA es la cantidad de intensidad de luz que absorbe una muestra esta varia
de acuerdo a la luz el tiempo que pasa antes de llevarla a l espectrofotmetro ya que los
componentes se sientan y los resultados varan
ESPECTROFOTOMETRO es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz
de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz, separndolo en
facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa.
ste tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de
onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por
dicha muestra. Esto permite obtener informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la
muestra; midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos
valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma
Cuando se hace pasar un rayo de luz por una probeta (habitualmente un tubo
transparente estandarizado para el aparato en uso) con una solucin que se desea
analizar, algo de la luz lo atravesar y otra parte quedar "retenida" por la muestra. A lo
"retenido" se lo denomina Absorbancia, y a lo que pasa: Transmitancia, existiendo una
relacin entre ambas. Conocida una tabla de valores, es posible calcular la concentracin
de la solucin en anlisis.
Esto se puede realizar con el Fotocolormetro (se colocan filtros especficos de luz, para
que pase slo una determinada frecuencia) o con el Espectrofotmetro (tiene un prisma
que descompone la luz y permite utilizar una frecuencia especfica que es la ms til para
analizar la sustancia en cuestin).
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES:
3. Cuestionario
1.
Determinacin de vitamina C:
la reaccin es:
2-nitroanilina + NaNO2 --> 2-Nitro-benzenediazonio
hay varias causas por las cuales no se decoloro
1. lo que puede haber pasado es que tu NaNO2, lo hallas preparado mucho tiempo antes
y haya perdido su poder oxidante (cosa q es poco comn... la 2 es mpas comn).
2. otra causa es que el medio no sea lo suficientemente cido se necesita al menos una
concentracin tres veces superior a la del nitrito de sodio en protones en el medio para
que se genre el agente que permite la reaccin NO (generalmente se hace en un medio
con exceso de cido H2SO4 generalmente esto es porque se debe generar el NO in situ
en el medio:
H+ + NaNO2 --> HNO2 + Na+ (primer equivalente gastado)
H+ + HNO2 --> H2O + NO+ (segundo equivalente gastado)
(y el tercero es para mantener el equilibrio)
esto se puede saber colocando una gota del medio en papel de almidon iodulado , si
cambia a negro inmediatamente est bien (hay poder xidante NO).
2.
La vitamina C es el cido ascrbico y el hidrxido de sodio una base, por tanto este acta
como titulante de la vitamina C.
3.
HIDRLISIS DE POLIZACARIDOS
ALMIDON GLUCOSA
B
s/n
alm
ido
n
ml
0
.
4
0
.
4
0
.
4
0
.
4
0
.
4
0
.
4
0
.
4
0
.
6
0
.
6
0
.
6
0
.
6
0
.
6
0
.
6
Ag
ua
des
tila
da
0
.
1
Na
oH
(2
4N)
Ncl
(4N
)
0
.
6
0
.
6
1
2
1
5
2
5
24 N
ml
Reacti
vo3.5
dinitris
ilato
0.02
0
0.18
8
0.05
1
0.03
0
0.01
6
0.02
6
0.34
8
0.14
8
0.29
4
0.16
6
0.15
0
0.36
1
0.26
6
0.46
6
0.38
5
0.12
5
0.21
4
0.43
3
0.62
2
0.53
4
0.24
2
0.60
1
0.78
5
0.76
2
0.70
6
0.26
4
0.84
1
0.82
2
0.84
1
0.53
7
0.34
9
0.90
4
1.31
0.64
7
grup
o
tubo
HIDRLISIS DE CELULOSA
Hidrlisis acida en ZnCL2
1
1.0
87
2.1
54
2.0
10
2.2
82
2.00
1
1.5
83
2.1
90
2.3
49
2.1
31
2.28
0
1.8
27
2.2
36
2.3
00
2.2
94
2.33
5
S/n
almidn
0.1
0.1
0.1
HCL( 4N)
0.2
0.2
0.2
Calentar
minutos
10
20
NaoH(2.
4N)
0.3
0.3
0.3
3.5
dinitro
0.3
0.3
0.3
G2
G3
G4
G5
Tubo1
0.03
1
0.03
4
0.02
6
0.12
2
0.03
8
Tubo
2
0.07
5
0.07
2
0.06
1
0.06
2
0.06
8
Tubo3
0.12
6
0.10
9
0.11
5
0.17
5
0.12
5
Tubo4
0.15
4
0.15
6
0.17
1
0.23
1
0.16
3
Tubo5
0.20
4
0.19
1
0.20
5
0.30
6
0.19
8
Tubo6
0.29
8
0.27
8
0.27
5
0.02
3
0.26
9
Tubo7
0.02
1
0.00
6
0.04
5
0.01
5
Tubo8
0.01
3
0.00
4
0.00
4
0.03
3
Tubo9
0.00
6
0.13
8
0.10
9
0.05
2
0.22
2
Tubo1
0
0.02
9
0.29
3
0.22
2
0.00
5
0.40
9
Tubo1
1
0.03
1
0.25
4
0.22
4
0.00
5
0.10
6
Tubo1
2
0.01
6
0.09
1
0.42
0
0.03
2
0.19
3
Tubo1
3
0.03
8
0.02
1
0.10
2
0.02
6
0.07
8
Tubo1
4
0.02
9
0.01
0
0.00
1
0.03
6
0.04
2
Tubo1
5
RESUMEN
De la siguiente practica de laboratorio podemos encontrar los diferentes pasos
para la extraccin de protenas de una sustancia determinada en este caso de la
harina de soya en las cuales encontramos albuminas, globulinas, prolaminas y
glutelinas. El rendimiento de estas extracciones los cuales se deducen de los
porcentajes de protena total
La solubilidad de una buena cantidad de protena es funcin de la fuerza ionica, el
ph y la concentracin de solvente orgnico.
OBJETIVOS
INTRODUCCION
Procedimiento
1. Se toma un tubo de ensayo y se colocan tres centmetros cbicos de
albmina de huevo, es decir la parte transparente.
2. Se aaden 2 centmetros cbicos de solucin de hidrxido de sodio al 20%.
3. Ms adelante se agregan 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida
al 1%.
4. El resultado es que la mezcla se torna de color violeta, indicando la
presencia de protenas.
METODOLOGIA
H2O desmineralizada
NaCl al 1 %
Etanol al 75%
Naoh al 0.1 N
Reactivo de Biuret
Solucin de concentracin conocida
RESULTADOS
TABLA
Condiciones B 1
10 11 12 13 14
Sol patrn
albumina
Fraccin
albumina,
ml
Fraccin
globulinas
Fraccin
prolaminas
Fraccin
glutelinas
H2O
destilada,
ml
2 1.9 1.7 1.5 1.3 1.1 0.8 1.5 1.0 1.5 1.0 1.5 1.0 1.5 1.0
0.5 1.0
0.5 1.0
0.5 1.0
0.5 1.0
GRU
PO
1
0,031
0,075
0,125
0,154
0,204
0,298
0,021
0,013
0,006
0,029
0,031
0,016
0.038
0,029
0,034
0,072
0,109
0,156
0,191
0,278
0,006
0,004
0,138
0,293
0,054
0,091
0,021
0,010
0,026
0,061
0,115
0.0171
0,205
0,275
0,045
0,004
0,109
0,222
0,224
0.420
0,102
0,061
0,122
0,066
0,072
0,231
0,306
0,023
0
0,033
0,052
0,005
0,032
0,026
0,036
0,063
0,032
0,068
0,125
0,163
0,098
0,296
0.015
0
0.222
0,409
0,106
0,193
0,078
0,048
TUBO
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
GRAFICA DE RESULTADOS
ANALISIS DE RESULTADOS
En el resultado de la practica determinamos la concentracin de protenas en la
harina de soya y el nivel de absorbancia atraves de un fotmetro. Tambin los
diferentes tipos de protena que en ella se encuentra como la albumina, globulinas
prolaminas y glutelinas, dando respuesta de su solubilidad.
Por medio de la grafica anterior se pudo determinar la cuantificacin de las
fracciones obtenidas por muestra.
BIBLIOGRAFIA
http://www.dclmexico.com/espa%F1ol/proteina_total.pdf
RESUMEN
La ureasa es una enzima que se utiliza como agente cataltico y en este trabajo se
pretende determinar varios factores caractersticos de la ureasa como su
temperatura y ph caracterstico en este caso nos permite el estudio sobre la
temperatura y la comparacin de micromoles de urasa vs temperatura.
Objetivos
INTRODUCCION
Las reacciones qumicas que ocurren en los sistemas vivientes son tan variadas
como complejas. Sin embargo, la naturaleza provee velocidades de reaccin en
condiciones por dems suaves, que haran avergonzar al mejor qumico. La
mayora de las reacciones que ocurren en los sistemas vivos son catalizadas por
protenas conocidas con el nombre de enzimas. Cientos de enzimas han sido
aisladas y probablemente existen cientos de miles en la naturaleza. Su estructura
es muy compleja, y puede ser representada como se muestra en la figura 4.
Las enzimas reciben su nombre en funcin de su actividad especfica, as, por
ejemplo, la enzima "ureasa" cataliza con eficiencia la hidrlisis de la urea, las
proteasas actan sobre las protenas, las amidasas sobre las amidas, etc. Todas
las enzimas desde el punto de vista qumico son protenas, pero pueden
asociarse con substancias no protenicas, llamadas coenzimas o grupos
prostticos, que son esenciales para la accin de la enzima. A veces las enzimas
son inactivas catalticamente, si no se encuentran en presencia de ciertos iones
metlicos.
METODOLOGIA
DIAGRAMA DE FLUJO
Condiciones
Tubos
B
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
HgCl2, gotas
Temperatura de incubacin,
C
16
16
37
60
92
Urea 0.25 M, ml
Buffer de fosfato pH ptimo,
ml
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
6M
L
5M
L
6ML 5M
L
6ML
3.9
3.4
0,4
1.6
1.2
2.5
0,3
1.1
1.6
0.5
0.6
0.5
0.7
0.3
0.3
0.5
0.4
5ml
6ml
5ml
6ml
5ml
6ml
1ml
1.3ml
1,2ml
2ml
2,8ml
ANALISIS DE RESULTADOS
BIBLIOGRAFIA
Modulo de bioqumica
http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioqui
mica/guia_5_2.pdf