Actividad Antibacteriana"in Vitro" Del Aceite Esencial Del Chiri-Chiri Grindelia Boliviana R., Frente A Staphylococcus Aureus Atcc

1
Universidad Nacional del Altiplano

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
Escuela Profesional de Biologa
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANAIN VITRO DEL ACEITE

ESENCIAL DEL CHIRI-CHIRI Grindelia boliviana R., FRENTE A
Staphylococcus aureus ATCC
TESIS
PRESENTADO POR EL BACHILLER:
JORGE GUEVARA RAMOS
PARA OPTAR EL TITULO DE:
LICENCIADO EN BIOLOGA
PUNO PER
2014
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGA
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANAIN VITRO DEL ACEITE ESENCIAL DEL

CHIRI-CHIRI Grindelia boliviana R., FRENTE A Staphylococcus aureus
ATCC
TESIS PRESENTADO POR:
Br. JORGE GUEVARA RAMOS
PARA OPTAR EL TITULO DE LICENCIADO EN BIOLOGA
APROBADO POR:
PRESIDENTE
M.Sc. Dante Choquehuanca Panclas
PRIMER MIEMBRO
M.Sc. Gilmar Goyzueta Camacho
SEGUNDO MIEMBRO
M.g. Dante Mamani Sairitupac
DIRECTOR DE TESIS
M.g. Ciria Ivonne Trigos Rondn
PUNO - PER
2014
DEDICATORIA
A mis queridos padres Gino y

Soledad, por darme la vida y
apoyo moral, su dedicacin y
ejemplo sern siempre mi
camino para alcanzar mis
sueos.
A mis hermanos Elizabeth y
Gino, su ejemplo y cario
siempre me permiten alcanzar
cada uno de mis sueos. A cada
uno de mis sobrinos, siempre
son la razn y motivacin para
seguir adelante.
A mi abuelita Mery, mis tos
Jorge Walter, quienes fueron
ejemplo de lucha y valenta
frente a las adversidades y hoy
guan mis pasos.
JORGE
AGRADECIMIENTOS
A mi Directora de tesis M.g. Ciria Ivonne Trigos Rondn, su constante

apoyo ha hecho posible la culminacin de la presente investigacin.
Al M.Sc. Dante Choquehuanca Panclas, sus consejos oportunos han sido

primordiales en el logro de mis aspiraciones.
A la M.Sc. Gilmar Goyzueta Camacho, sus valiosas sugerencias han

contribuido a la mejora de mi trabajo de tesis.
Al M.g. Dante Mamani Sairitupac, sus consejos y exigencia han marcado el

perfil de mi objetivo acadmico.
Al Lic. en Biologa Miguel A. Lpez Ruelas, por su valioso apoyo en el

anlisis estadstico de los datos.
INDICE DE CONTENIDO
Pg.
_Toc394479401
RESUMEN
I.
INTRODUCCIN................................................................................................1
II.
REVISIN BIBLIOGRFICA..............................................................................4
2.1.
Antecedentes...............................................................................................4
2.2.
Marco terico...............................................................................................9
2.2.3.
Aceites esenciales..................................................................................14
2.2.4.
Principios activos de las plantas............................................................19
2.3.
III.
Marco conceptual......................................................................................24
MTODO DE INVESTIGACIN...................................................................26
3.1.
mbito de estudio......................................................................................26
3.2.
Tipo de estudio..........................................................................................26
3.3.
Muestra......................................................................................................26
3.4.
Diseo de investigacin.............................................................................26
3.5.
Materiales..................................................................................................27
3.6.
Metodologa...............................................................................................28
3.7.
Mtodo estadstico.....................................................................................33
IV.
RESULTADOS Y DISCUSIONES.................................................................36
4.1. Efecto bactericida del aceite esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana
R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro............................................36
4.2. Concentracin mnima inhibitoria (CMI) del aceite esencial de Chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) para Staphylococcus aureus ATCC in vitro..................40
4.3. Comparacin del efecto bactericida del aceite esencial de Chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) y el antibitico Vancomicina frente a Staphylococcus
aureus ATCC in vitro........................................................................................42
CONCLUSIONES...................................................................................................45
RECOMENDACIONES...........................................................................................46
BIBLIOGRAFA CITADA.........................................................................................47
ANEXOS ................................................................................................................51
INDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite
esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus
aureus ATCC in vitro............................................................................................
Cuadro 2. Prueba de Tukey para efecto bactericida en halos de inhibicin
(mm) del aceite esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) frente a
Staphylococcus aureus ATCC in vitro.................................................................
Cuadro 3. Inhibicin porcentual del aceite esencial del Chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro...............
Cuadro 4. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite
esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) y del antibitico
vancomicina frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro...............................
Cuadro 5. Prueba de Tukey de halos de inhibicin (mm) del aceite
INDICE DE FIGURAS
Figura 1. Plantas en flor de Grindelia boliviana R...................................................

Figura 2. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite
esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus
aureus ATCC in vitro............................................................................................
Figura 3. Efecto bactericida (%) del aceite esencial del Chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro...............
Figura 4. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite
RESUMEN
El estudio se realiz en el laboratorio de Microbiologa en la Facultad de Ciencias
Biolgicas de la Universidad Nacional del Altiplano de Puno, durante los meses de
diciembre 2013 a abril 2014, cuyos objetivos fueron a) evaluar la actividad
antibacteriana del aceite esencial del chiri-chiri (Grindelia boliviana R) in vitro
frente a Staphylococcus aureus ATCC, b) determinar la concentracin mnima
inhibitoria (CMI) y c) comparar el efecto bactericida del aceite esencial de chirichiri y el antibitico Vancomicina. Se utiliz el mtodo de arrastre a vapor para
obtener el aceite esencial y el mtodo de difusin en agar para la evaluacin del
efecto bactericida, teniendo como control positivo el antibitico vancomicina. Se
aplic estadstica descriptiva, anlisis de varianza en un sentido, prueba de rango
mltiple de Tukey y una ecuacin logartmica para estimar la concentracin
mnima inhibitoria (y=bln(X)+a). Resultados: El aceite esencial del "chiri-chiri"
(Grindelia boliviana) inhibe el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC in
vitro a partir de la concentracin de 5l/l con 5.740.45 mm de halo de inhibicin,
el mayor efecto bactericida se observ en la concentracin de 75l/l con
14.240.44 mm de halo, existiendo diferencia estadstica entre las seis
concentraciones utilizadas (P=0.0001). La concentracin mnima inhibitoria (CMI)
del aceite esencial de "chiri-chiri" (Grindelia boliviana) frente a Staphylococcus
aureus ATCC in vitro fue estimada en 1.12 l/l. El antibitico vancomicina mostr
el mayor efecto bactericida en comparacin al aceite esencial del "chiri-chiri", con
halo de inhibicin de 34.661.71 mm, se determin diferencia estadstica en favor
de la vancomicina respecto a todas las concentraciones de aceite esencial de
chiri-chiri (P=0.0001).
I. INTRODUCCIN
La bacteria patgena Staphylococcus aureus se encuentra involucrada en una
diversidad de infecciones e intoxicaciones en el ser humano, presentando
diversidad de factores de virulencia, as como elevada capacidad de generar
resistencia a los antimicrobianos. En hospitales de Lima Per se reporta la
presencia de este patgeno en 55.2% en muestras de infecciones en el hospital
Cayetano Heredia, 29.8% en el Instituto Nacional de Enfermedades Neoplsicas y
15% en el Instituto de Salud del Nio, siendo una de las bacterias patgenas ms
frecuentes en las infecciones reportadas (Tamariz et al, 2009). En la ciudad de
Juliaca, en el hospital Carlos Monge Medrano se determin que el principal
agente causal de infecciones fueron las bacterias en un 92% y 8% de causa viral,
siendo Staphylococcus aureus el patgeno ms frecuente ( Velzquez
Meza,
2005).
La recurrencia de Staphylococcus aureus se ve favorecida por el hecho de que
esta especie habita tanto las mucosas como la piel de los seres humanos, lo que
permite que a travs de heridas, pueda penetrar en el torrente sanguneo del
paciente, por medio del contacto directo o indirecto con el personal sanitario, con
un objeto contaminado o incluso con otro paciente. Puede producir una amplia
gama de enfermedades, que van desde infecciones cutneas y de las mucosas
relativamente benignas, tales como funiculitis, forunculosis o conjuntivitis, hasta
enfermedades de riesgo vital, como celulitis, abscesos profundos, osteomielitis,
meningitis, sepsis, endocarditis o neumona. Tambin puede afectar al aparato
gastrointestinal, ya sea por su presencia fsica o por la ingesta de la entero toxina
estafiloccica secretada por esta bacteria (Hurtado y Brito, 2002).
Se conoce que bacterias patgenas, entre ellas S. aureus, son responsables de
ms de 5000 muertes diarias en el mundo (Benites et al., 2011). El surgimiento de
cepas resistentes a antibiticos comerciales ha resultado en un serio problema de
salud,
obligando
la
bsqueda
de
nuevas
fuentes
antimicrobianas,
encontrndose en los aceites esenciales de plantas medicinales y aromticas un

alto potencial para ello.
Por otro lado se conoce que los antibiticos comerciales causan reacciones
alrgicas, que afecta entre el 2 y 8% de los pacientes hospitalizados,
generalmente
producida
por
administracin
de
betalactmicos,
sulfas
quinolonas (Schlessinger, 2009), por lo cual es de inters probar sustancias

naturales que puedan ser tiles en el tratamiento de infecciones en pacientes con
antecedentes alrgicos a antibiticos comerciales.
El Per presenta una biodiversidad de plantas medicinales nativas, siendo
utilizadas en forma emprica por sus bondades teraputicas en el cuidado de la
salud. Dentro de este contexto, la regin andina del Per posee una variada flora
destacndose la especie conocida como chiri-chiri (Grindelia boliviana), esta
especie vegetal se desarrolla sobre los 3800 msnm y es de amplia distribucin
geogrfica en la regin Puno, se utiliza tradicionalmente como anti inflamatorio y
tambin para curar heridas en la piel (Mantilla, 1991).
Razn por la cual se plante el trabajo de investigacin que tiene como finalidad
evaluar la actividad antibacteriana in vitro del aceite esencial del chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC, as como comparar
su efecto con un antibitico comercial vancomicina, para generar conocimiento
que forme parte del desarrollo cientfico de la sociedad y estudiar las propiedades
antimicrobianas de sta planta del altiplano peruano, ya que resulta importante
buscar nuevas sustancias con actividad antibitica, frente a microorganismos
resistentes y con alta capacidad infectiva, de esta manera contribuir a la calidad
de vida y salud del ser humano.
El estudio permite ofrecer una alternativa importante en el enfoque tradicional del
tratamiento de infecciones causadas por Staphylococcus aureus, mediante el
estudio de los efectos antibiticos in vitro del chiri-chiri sobre esta bacteria
patgena, as como la utilizacin de un antibitico comercial como control positivo,
para comparar los efectos antibiticos de ambos.
Los objetivos del estudio fueron:
Objetivo general
Evaluar la actividad antibacteriana del aceite esencial del chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) in vitro frente a Staphylococcus aureus ATCC.
Objetivos especficos
1. Evaluar el efecto bactericida del aceite esencial
del
chiri-chiri
(Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro.
2. Determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI) del aceite

esencial de chiri-chiri (Grindelia boliviana R) para Staphylococcus
aureus ATCC in vitro.
3. Comparar el efecto bactericida del aceite esencial de chiri-chiri

(Grindelia
boliviana
R) y el
antibitico Vancomicina frente
Staphylococcus aureus ATCC in vitro.
II.
II.1.
REVISIN BIBLIOGRFICA
Antecedentes
a. A nivel internacional
Pino, et al., (1997), realizaron la investigacin Composicin y propiedades
antibacterianas del aceite esencial de Lippia alba (Mil) Brown, realizado en el
Instituto de Investigacin de Industria Alimentaria de Cuba, estudiaron la
composicin y propiedades antibacterianas del aceite esencial de Lippia alba, con
el objetivo de evaluar la actividad antibacteriana sobre 9 especies de bacterias.
Los resultados indican que el aceite esencial estuvo compuesto principalmente
por carvona 40%, limoneno 5.76%, b-guaieno 9.84%, piperitenona 8.26%. El
aceite present actividad antibacteriana, siendo mayor en general sobre los
grmenes gram positivos, con valores en las concentraciones mnimas inhibitorias
entre 0.3 mg/ml y 2.5 mg/ml; Escherichia coli fue inhibida a una CMI de 2.5 mg/ml.
Flores et al., (1999), realizaron la investigacin: Aceites esenciales con
propiedades
antimicrobianas
en
aceites
esenciales
sus
propiedades
antimicrobianas, realizado en el colegio de Farmacia y Bioqumica la Paz Bolivia,

con el objetivo de evaluar las propiedades bactericidas de varias plantas y frutos.
Los resultados reportan concentraciones inhibitorias de diferentes aceites
esenciales para el hongo Neurospora crassa: lima (Citrus limetta) 0.5 mg/ml. Para
Staphylococcus aureus: romero (Rosmarinus oficinalis) 1 mg/ml. Adems, los
aceites de perejil (Petroselium sativum), Khoa (Satrela boliviana), molle (Chinas
molle), naranja (Citrus aurantiun), toronja (Citrus paradissi) y mandarina (Citrus
mobilis), inhibieron el crecimiento tanto de hongos a 0.5 mg/ml, como de bacterias
a 1 mg/ml. Los aceites de perejil y molle a 3.7 mg/ml y khoa a 7.5 mg/ml
inhibieron el crecimiento de Shigella flexneri.
Primo et al., (2002), realizaron el estudio Determinacin de la actividad
antibacteriana y antiviral del aceite esencial de Minthostachys verticillata (Griseb),
realizado en la Universidad Nacional de Rio Cuarto Brasil. Los resultados
muestran que existe actividad antibacteriana y antiviral del aceite esencial de
Minthostachys verticillata in vitro, y del aceite esencial de la peperina sobre el
virus Herpes simple tipo I (HSV-1) y el virus de la pseudorrabia (PrV). La accin

antiviral observada fue especfica ya que se manifest en concentraciones no
toxicas para las clulas husped. Los ndices teraputicos obtenidos fueron 10
mg/ml y 9.5 mg/ml para HSV-1 y PrV, respectivamente. Las bacterias Gram
positivas mostraron mayor sensibilidad con 5 mg/ml y Gram negativas con 10
mg/ml. El aceite esencial de esta planta contiene poligona 44.56%, mentona
39.51%, cineol 0.11%, limonemo 2.03%, b-pineno 0.76%, a-pineno 0.62%; si bien
el mecanismo de accin por el cual este tipo de sustancias ejerce actividad
antiviral es desconocido, es posible que su sitio blanco sea los lpidos presentes
en la envoltura viral.
Martnez et al., (2003), realizaron el estudio Actividad antibacteriana del aceite
esencial de mandarina, realizado en la Universidad de Venezuela. Los resultados
demostraron actividad antibacteriana y concentracin mnima inhibitoria (CMI) del
aceite esencial de la mandarina (Citrus reticulata) variedad Dancy, y las cepas
bacterianas que se utilizaron fueron: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus,
Listeria monocytogenes, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, Pseudomona
aeruginosa, y Eschechia coli. La actividad antibacteriana se determin por el
mtodo de difusin en agar, utilizando las concentraciones de aceite; 1; 10; 20;
30; 40; 50; 60; 70; 80; 90 y 100%. El aceite esencial present actividad
antibacteriana
del
tipo
bactericida
contra
B.
subtilis, S.
aureus
L.
monocytogenes a todas las concentraciones excepto al 1%. La CMI del aceite

esencial de mandarina variedad Dancy para B. subtilis fue de 19%, S. aureus y L.
monocytogenes fue de 17%.
b. A nivel nacional y departamental
Castro (2000), realizo el estudio Evaluacin de la actividad in vitro del aceite
esencial de Matricaria recutita (manzanilla), sobre cepas puras extradas de
lesiones bucofarngeas de Streptococcus pyogenes y Staphylococcus aureus,
estudio realizado en la Universidad Catlica Santa Mara, Facultad de Farmacia y
Bioqumica, de la ciudad de Arequipa, Per. Los resultados fueron: el aceite
esencial de la manzanilla present actividad bactericida con una concentracin
inhibitoria mnima del 4% en el caso Streptococcus pyogenes y 3% para
Staphylococcus aureus. La concentracin mnima bactericida fue de 6% para

Streptococcus pyogenes y 5 %en el caso de Staphylococcus aureus.
Vengoa et al. (2000), realizaron el estudio Actividad antibacteriana in vitro de la
Grindelia boliviana rusby (chiri chiri) en cepas de Staphylococcus aureus,
evaluaron in vitro la actividad antibacteriana de la decoccin (DE), extracto
alcohlico (EA) y aceite esencial (AE) de Grindelia boliviana y determinar su
Concentracin Inhibitoria Mnima (CIM) frente a cepas de Staphylococcus aureus
(Si) ATCC 25923 y Streptococcus pyogenes (Spa) EMB 217. Para hallar la CIM
para cada forma medicamentosa frente a las dos cepas estndar. Los resultados
fueron: se encontr que la CIM para S. aureus con decoccin fue 640 mg; con
extracto alcohlico: 320 mg y aceite esencial: 2500 mg y para el S. pyogenes con
decoccin: 320 mg; con extracto alcohlico: 160 mg (10 al) y con aceite esencial:
1250mg. Se hallaron halos de inhibicin para las tres formas de preparacin. Se
concluye que: La decoccin, extracto alcohlico y aceite esencial de la manzanilla
tienen actividad antibacteriana in vitro. La forma medicamentosa con mayor
actividad antibacteriana fue el aceite esencial seguida del extracto alcohlico,
evaluados por la tcnica de excavacin.
Albado et al., (2001), realizaron el estudio Composicin qumica y actividad
antibacteriana del aceite esencial del Origanum vulgare (organo), estudiaron la
actividad antimicrobiana del aceite esencial (Carvacrol) del Origanum vulgare. El
aceite esencial obtenido por destilacin por arrastre a vapor de agua, a partir de
las hojas y flores desecadas de O. vulgare; la actividad antimicrobiana del aceite
de O. vulgare se realiz por el mtodo semi cuantitativo de incorporacin y de
disco difusin en agar, los resultados de la densidad especifica del producto
result 0.9234 a 20C y el ndice de refraccin 1.4774; el cromatograma mostr
un contenido de 9% de Carvacrol, 12.19% de Terpineol, 6.86% de Pcimeno y la
presencia de otros compuesto relacionados metablicamente con los tres antes
citados.
Las
bacterias
Gram-negativas:
Escherichia
coli,
Pseudomona
aeruginosa, Salmonella tiphymurium, Salmonella choleraesuis y Vibrio cholerae y

las bacterias Gram-positivas: Staphylococcus aureus y Bacillus cereus, mostraron
diferentes grados de sensibilidad. De los microrganismos evaluados solo
Pseudomonas aeruginosa mostr resistencia. El aceite esencial posee actividad

microbiana contra todas las bacterias evaluadas, excepto para P. aeruginosa.
Alzamora et al., (2001), realizaron el estudio Medicina tradicional en el Per,
actividad antibacteriana in vitro de los aceites esenciales extrados de algunas
plantas aromticas, relaizado en la Universidad Mayor de San Marcos en la
ciudad de Lima, con el objetivo de investigar la actividad antimicrobiana in vitro de
los aceites esenciales extrados de plantas aromticas, utilizando los aceites
esenciales de cinco plantas empleados en la medicina tradicional del Per
Eucalyptus globulos Eucalipto, Cymbopogon citratus (D.C.) Staff, Hierba luisa,
Tagetes pusillalag Anis serrano, Senesio tephrosioidesTurez, Huamanrripa y
Lepechinia meyenii (walp) Salvia. Los aceites esenciales obtenidos por
destilacin por arrastre al vapor se enfrentaron a Salmonella typhi 6539, S.
typhimuriun, S. enteritidis INS. Vibrio cholerae. Pseudomona auriginosa, Shiguella
flexneri INS, Staphylococcus aureus, S. aureus y Candida albicans, se emple
discos de antibiticos como controles. Los resultados fueron: los aceites
esenciales mostraron efecto variado sobre gramnegativo ninguno inhibi a
Pseudomona aeuruginosa. Los resultados obtenidos permiten validar el uso
popular del ans serrano y la hierba luisa en el tratamiento de afecciones
intestinales, como la Salmonelosis y el clera.
Reyes et al. (2003), realizaron el estudio Actividad anti-inflamatoria de Grindelia
boliviana (chiri-chiri), en ratas, realizado en la Universidad Agraria La Molina de
Lima, el objetivo fue evaluar la actividad anti-inflamatoria de Grindelia boliviana
Rusby Chiri-Chiri, en ratas. La evaluacin fue por el mtodo del Edema
Suplantar (mesurado con Pletismmetro) en 40 ratas albinas: Blanco (sin
tratamiento), dos grupos control AINE (naproxeno2%) y AIE (fluancinolide 0.05%);
y dos grupos con extracto acuoso de tallos y hojas al 25% y50% de
concentracin. La aplicacin fue por va tpica. Los resultados fueron: los
tratamientos con extracto acuoso de chiri-Chiri al 25% y 50% disminuyen el
proceso inflamatorio agudo inducido por la carragenina. La concentracin ms
efectiva fue de 25% (100% de inhibicin de la inflamacin) a las 6 horas de
evaluacin, sobre los dems tratamientos. El tratamiento estadstico mediante la
prueba de Duncan y Anlisis de varianza (p<0,05) verifica la diferencia
significativa entre los grupos tratados. Se realiz una marcha fotoqumica

preliminar de tallos y hojas de la planta, la cual revel la presencia de taninos,
flavonoides, alcaloides, carden olidos, aminocidos, esteroides, quinonas y
leucoantocianidinas.
Arapa (2013), en su estudio Actividad antibacteriana del aceite esencial de ajenjo
(Artemisia absinthium l) frente a Escherichia coli enteropatgena (EPEC) in vitro,
Puno 2011, con el objetivo de evaluar la actividad antibacteriana y concentracin
mnima inhibitoria (CMI) in vitro del aceite esencial de Ajenjo (Artemisia
absinthium L.) frente a Escherichia coli Enteropatogena (EPEC). Sus resultados
fueron: se observ actividad antibacteriana frente a E. coli (EPEC) en
concentraciones de aceite esencial superiores a 5 l/l, observndose un
comportamiento resistente a 1 l/l (0% de mortalidad). Slo la ms baja dosis de
aceite de ajenjo no ejerci un efecto de inhibicin (p> 0,05); las concentraciones
de 50 l/l y 75 l/l de aceite esencial mostraron los mayores efectos de
sensibilidad. La concentracin mnima inhibitoria (CMI) fue 32.81 l/l que es la
concentracin del aceite esencial de ajenjo necesaria para impedir o inhibir el
crecimiento en 90% de Escherichia coli enteropatgena, mientras que se obtuvo
1% de inhibicin con las dosis de 1.88 a 2.06 l/l.
II.2.
Marco terico
II.2.1. Taxonoma y caractersticas del Chiri-chiri (Grindelia boliviana Rusby)

La taxonoma de la especie es:
Reyno: Plantae
Divisin: Fanerogamas
Familia: Asteraceae
Genero: Grindelia
Nombre cientfico: Grindelia boliviana
Nombre comn: "chiri-chiri"
En idioma colla aymar: "chiri chiri"
En idioma khechua: chili chili
(Mantilla, 1991)
a. Caractersticas
Arbusto de 50 cm de alto, con abundantes hojas que presentan una sustancia
mucilaginosa que le da un olor caracterstico. La inflorescencia es de 4 cm de
dimetro. Sus hojas alternas son ovaladas, las de abajo son espatuladas, las de
arriba son lanceoladas oblongadas, de color verde claro. Las flores son tubulares
de color amarillo fuerte, radiadas, grandes, solitarias y terminales. Los frutos son
aquenios cuadrangulares. Crece en laderas secas y pedregosas, a altitudes entre
3000 a 4100 msnm, florece entre los meses de enero a mayo (Mantilla, 1991).
b. Antecedentes histricos
Es una planta herbcea de la familia de las compuestas o compositae, netamente
originaria del altiplano peruano-boliviano, antes conocido como alto Per. Los
mdicos kollas aymaras la llevaron a todo el continente americano, antes de la
invasin espaola de 1532, segn afirman los protomdicos en las crnicas de la
colonia. De esta planta medicinal existen ms de 25 especies, es resinosa,
perenne y erecta, con tallo bastante ramificado y estriado que mide ms o menos
de 60 a 80 cm de altura (Pavlow, 1980).
c. Uso tradicional del chiri-chiri
El chiri-chiri posee alcaloides, Grindelina, polifenoles cidos vanillico, p-cumrico
y para hidroxibenzoico, flavonoides derivados del quercetol, luteolol y del
10
kaempferol, alcanos hentriacontano, resina, cidos grindlico y oxigrindlico,

aceite esencial borneol y cido robstico, saponinas glucosdicas, matricarianol,
taninos glicos, fitosterolesgrindelol y principios amargos (Pavlow, 1980).
Entre los usos tradicionales es expectorante y antiinflamatoria; es eficaz para las
afecciones de las vas respiratorias, bronquitis, asma, tosferina, catarro, pulmona,
bronconeumona, laringitis y faringitis. Se usa las flores y las hojas; 1 cucharada
para un litro de agua en infusin, con miel de abejas o con chancaca negra, se
recomienda tomar 3 veces al da, con 1 limn cada taza, en ayunas, antes de
almorzar y antes de acostarse (Mantilla, 1991).
Se ha aplicado esta planta medicinal en pacientes que sufran de cistitis, como
diurtico general; es balsmica y aromtica. Es un excelente antisptico contra
gripe, catarro, tos, resfriados. Tambin se han preparado parches con esta hierba,
con vaselina, pomadas para fricciones contra el reumatismo y dolores
musculares, quedando los pacientes sanos y fuertes con la medicina natural,
tanto en Bolivia como a nivel mundial, recomendndose que mujeres
embarazadas y nios no deban usar la planta internamente. Las hojas trituradas y
mezcladas con orina son utilizadas para tratar golpes, dislocaduras, fracturas o
desgarros musculares. Tambin es usada en infusiones para combatir resfros
(Pavlow, 1980).
Segn la composicin qumica que muestra el gnero Grindelia se cree que la
actividad antibacteriana se debera a la presencia de Diterpenos, flavonoides y
poliacetilenos corno lo reportado en otras plantas, la accin antibacteriana
demostrada por el aceite esencial se basara tambin en los compuestos
qumicos como el borneol, terpinol, A-pineno y B-pineno (Martnez, 1994).
11
Figura 1. Plantas en flor de Grindelia boliviana R.
II.2.2. Compuestos qumicos presentes en el genero Grindelia

a. Diterpenos
Definicin: son terpenos formados con cuatro unidades isoprnicas, procedentes
del metabolismo del geranilgeranil pirofosfato (GGPP), estn presentes en los
vegetales. Algunos son universales, como las giberelinas, pero otros tienen una
distribucin restringida. Son abundantes en Lmiales y Asterales, en Asteraceae
se han descrito ms de 1.200 diterpenos (Cotillo, 1990).
El inters teraputico es limitado, se utiliza como antimittico (anticanceroso),
sobre todo contra el cncer de ovario. Algunas potencialidades teraputicas de los
diterpenos en general incluyen:, quinonas diterpnicas de Salvia miltiorrhiza,
antitumorales de diterpenos tetracclicos (orionina, lasiokaurina, etc.) de Isodon
(Lamiaceae), etc. Hay que destacar la actividad co-cancergena de los steres
diterpenos de Euphorbiaceae y Thymelaeaceae, incluyen actividad citotxica.
Tambin es importante sealar las propiedades antioxidades de los diterpenos
fenlicos de algunas labiadas (romero, salvia oficinal); las propiedades
edulcorantes del estevisido de la estevia o hierba azucarada del Paraguay. La
funcin de los diterpenos no es del todo conocida, excepto las giberelinas, se
supone que juegan un papel en la proteccin frente a los depredadores, otros son
12
constituyentes de los revestimientos foliares que limitan las prdidas de agua en

la planta (Cotillo, 1990).
b. Flavonoides
Flavonoide (del latn flavus, "amarillo") es el trmino genrico con que se identifica
a una serie de metabolitos secundarios de las plantas. Son sintetizados a partir de
una molcula de fenilalanina y 3 de malonil-CoA, a travs de lo que se conoce
como "va biosinttica de los flavonoides", cuyo producto, la estructura base, se
cicla gracias a una enzima isomerasa. La estructura base, un esqueleto C6-C3C6, puede sufrir posteriormente muchas modificaciones y adiciones de grupos
funcionales, por lo que los flavonoides son una familia muy diversa de
compuestos, aunque todos los productos finales se caracterizan por ser
polifenlicos y solubles en agua. Los flavonoides que conservan su esqueleto
pueden clasificarse, segn las isomerizaciones y los grupos funcionales que les
son adicionados, en 6 clases principales: las chalconas, las flavonas, los
flavonoles, los flavandioles, las antocianinas, y los taninos condensados, ms una
sptima clase, las auronas, tenidas en cuenta por algunos autores por estar
presentes en una cantidad considerable de plantas. Tambin el esqueleto puede
sufrir
modificaciones,
convirtindose
entonces
en
el
esqueleto
de
los
isoflavonoides o el de los neoflavonoides, que por lo tanto tambin son derivados

de los flavonoides (Goodman y Gilman, 1991).
Los flavonoides protegen del dao de los oxidantes, como los rayos UV; la
polucin ambiental (minerales txicos como el plomo y el mercurio); algunas
sustancias qumicas presentes en los alimentos (colorantes, conservantes, etc).
Como el organismo humano no tiene la capacidad de sintetizar estas sustancias
qumicas, las obtiene enteramente de los alimentos que ingiere, no son
considerados vitaminas. Al limitar la accin de los radicales libres (que son
oxidantes), los flavonoides reducen el riesgo de cncer, mejoran los sntomas
alrgicos y de artritis, aumentan la actividad de la vitamina C, bloquean la
progresin de las cataratas y la degeneracin macular, evitan las tufaradas de
calor en la menopausia y combaten otros sntomas. En general los flavonoides
son de sabor amargo, llegando incluso a provocar sensaciones de astringencia si
la concentracin de taninos condensados es muy alta. El sabor puede variar
13
dependiendo de las sustituciones presentadas en el esqueleto llegando incluso a

usarse como edulcorantes similares a la glucosa (Goodman y Gilman. 1991).
Algunos de los efectos favorables de los flavonoides pueden ser:
-
Propiedades anticancerosas: han demostrado ser tremendamente eficaces en

el tratamiento del cncer. Se sabe que muchos inhiben el crecimiento de las
clulas cancerosas. Se ha probado contra el cncer de hgado.
Disminucin del colesterol: poseen la capacidad de disminuir la concentracin

de colesterol y de triglicridos.
Antinflamatorios
analgsicos:
la
hesperidina
por
sus
propiedades
antiinflamatorias y analgsicas, se ha utilizado para el tratamiento de ciertas

enfermedades como la artritis. Los taninos tienen propiedades astringentes,
vasoconstrictoras y antiinflamatoria, pudindose utilizar en el tratamiento de las
hemorroides.
-
Antimicrobianos: isoflavonoides, furanocumarinas y estilbenos han demostrado

tener propiedades antibacterianas, antivirales y anti fngicas.
Propiedades antioxidantes: En las plantas los flavonoides actan como

antioxidantes, especialmente las catequinas del t verde (Winkel-Shirley, 2001).
c. Poliacetilenos
Los Poliacetilenos o Polinos son un grupo de compuestos orgnicos con

alternancia de enlaces covalentes simples y triples. El ejemplo ms simple es el
diacetileno o buta-1,3-diino.HCC-CCH. Al igual que los cumuleno s, los
poliacetilenos se distinguen de las otras cadenas orgnicas por su rigidez, lo que
los hace viables para nanotecnologa molecular. Los poliacetilenos se encuentran
en las nubes moleculares interestelares en donde el hidrgeno es escaso
(Goodman y Gilman. 1991).
El poliacetileno sinttico ms largo que se ha reportado contiene 22 unidades de
acetileno y se encuentra sustituido con grupos trisopropilsililo en los extremos. El
poliacetileno de longitud infinita es un compuesto hipottico llamado carbino, uno
de los al tropos de carbono.
Los mono y poliacetilenos naturales se encuentran en muchas plantas y muchos
de ellos tienen propiedades farmacolgicas y toxicolgicas. Los tallos y las hojas
14
de especies pertenecientes a la familia compuesta han sido utilizados para el

tratamiento del cncer en Indonesia. Estas especies han sido utilizadas para tratar
infecciones de la piel y como desparasitantes intestinales por nativos de frica y
Canad (Pavlow, 1980).
Debido a las posibles propiedades medicinales de los poliacetilenos, varios
procedimientos de sntesis se estn estudiando con la esperanza de que estos se
puedan replicar industrialmente por sntesis orgnica (Pavlow, 1980).
II.2.3. Aceites esenciales
Los Aceites Esenciales o esencias vegetales son productos qumicos que forman
las esencias odorferas de un gran nmero de vegetales. El trmino aceite
esencial se aplica tambin a las sustancias sintticas similares preparadas a partir
del alquitrn de hulla, y a las sustancias semi sintticas preparadas a partir de los
aceites naturales esenciales. Los aceites esenciales son lquidos voltiles, en su
mayora insolubles en agua, pero fcilmente solubles en alcohol, ter y aceites
vegetales y minerales. Por lo general no son oleosos al tacto. Pueden agruparse
en cinco clases, dependiendo de su estructura qumica: alcoholes, steres,
aldehdos, cetonas y lactonas y xidos (Van Ginkel, 2003).
Los aceites esenciales proceden de las flores, frutos, hojas, races, semillas y
corteza de los vegetales. El aceite de espliego, por ejemplo, procede de una flor,
el aceite de pachul, de una hoja, y el aceite de naranja, de un fruto. Los aceites
se forman en las partes verdes (con clorofila) del vegetal y al crecer la planta son
transportadas a otros tejidos, en concreto a los brotes en flor. Se desconoce la
funcin exacta de un aceite esencial en un vegetal; puede ser para atraer los
insectos para la polinizacin, o para repeler a los insectos nocivos, o puede ser
simplemente un producto metablico intermedio (Van Ginkel, 2003).
a. Caractersticas Fsicas de los Aceites Esenciales

Los aceites esenciales son voltiles y son lquidos a temperatura ambiente.
Recin destilados son incoloros o ligeramente amarillos.
15
Su densidad es inferior a la del agua (la esencia de sasafrs o de clavo

constituyen excepciones).
Casi siempre dotados de poder rotatorio, tienen un ndice de refraccin elevado.
Son solubles en alcoholes y en disolventes orgnicos habituales, como ter o
cloroformo, y alcohol de alta gradacin. Son liposolubles y muy poco solubles en
agua, pero son arrastrables por el vapor de agua.
b. Caractersticas Qumicas de los Aceites Esenciales
Los componentes de los aceites se clasifican en terpenoides y no terpenoides.
-
No Terpenoides: En este grupo tenemos sustancias alifticas de cadena corta,

sustancias aromticas, sustancias con azufre y sustancias nitrogenadas. No
son tan importantes como los terpenoides en cuanto a sus usos y aplicaciones.
Terpenoides: Son los ms importantes en cuanto a propiedades y

comercialmente. Los terpenos derivan, de unidades de isopreno (C 5) unidas en
cadena. Los terpenos son una clase de sustancia qumica que se halla en los
aceites esenciales, resinas y otras sustancias aromticas de muchas plantas,
como los pinos y muchos ctricos. Principalmente encontramos en los aceites
mono terpenos (C10), aunque tambin son comunes los sesquiterpenos (C 15) y
los diterpenos (C20). Pueden ser alifticos, cclicos o aromticos.(Van Ginkel,
2003) Segn los grupos funcionales que tengan pueden ser:
-
Alcoholes (mentol, bisabolol) y fenoles (timol, carvacrol)
Aldehdos (geranial, citral) y cetonas (alcanfor, thuyona)
steres (acetato de bornilo, acetato de linalilo, salicilato de metilo,

compuesto antiinflamatorio parecido a la aspirina).
teres (1,8 cineol) y perxidos (ascaridol)
Hidrocarburos (limoneno, y pineno) (Goodman y Gilman. 1991).
c. Obtencin de los Aceites Esenciales

Los aceites esenciales se obtienen por los mtodos: Enfleurage, extraccin con
solventes, extraccin por prensado, extraccin con fluidos supercrticos,
16
hidrodestilacin y extraccin por arrastre con vapor. Actualmente los aceites

esenciales sintticos u obtenidos de fuentes naturales por cualquiera de estos
mtodos, se purifican normalmente por destilacin al vaco. El mtodo mas
utilizado para la extraccin de aceite esencial es el de arrastre a vapor
(Van
Ginkel, 2003).
Extraccin por arrastre con vapor
Por efecto de la temperatura del vapor (100C) en un cierto tiempo, el tejido
vegetal se rompe liberando el aceite esencial, el cual presenta a estas
condiciones una presin de vapor.Las plantas se colocan sobre un fondo
perforado o criba ubicado a cierta distancia del fondo de un tanque llamado
alambique. La parte ms baja de esta contiene agua hasta una altura algo menor
que el nivel de la criba. El calentamiento se produce con vapor saturado que se
provee de una fuente de calor que compone el equipo, fluye mojado y a presin
baja, penetrando a travs del material vegetal.
Los componentes se volatilizan, y condensan en un refrigerante, siendo recogidos
en un vaso florentino, donde se separa el agua del aceite por diferencia de
densidad (Van Ginkel, 2003).
a) La extraccin por arrastre con vapor es una tcnica para la separacin de
sustancias insolubles en agua y ligeramente voltiles de otros productos no
voltiles.
b) Las sustancias arrastrables con vapor son inmiscibles en agua, tienen presin
de vapor baja y punto de ebullicin alto.
c) Los vapores saturados de los lquidos inmiscibles siguen la ley de Dalton sobre
las presiones parciales.
d) Al destilar una mezcla de dos lquidos inmiscibles, su punto de ebullicin ser
la temperatura a la cual a suma de las presiones de vapor de cada lquido es igual
a la presin atmosfrica.
e) La destilacin por arrastre de vapor sirve para separar aceites esenciales de
tejidos
vegetales.
hidrocarburos,
Los
terpenos,
aromticos y fenoles.
aceites
esenciales
alcoholes,
son
compuestos
mezclas
complejas
carbonlicos,
de
aldehdos
17
f) La pureza y el rendimiento del aceite esencial depender de la tcnica que se

utilice para el aislamiento (vila, 2001).
Factores que Influyen en la extraccin.
Tiempo de secado del material .El eucalipto puede durar hasta 4 meses.
La limonaria, la albahaca, la menta, la citronella si quedan en arrumes, generan
hongos, los que transfieren un olor terroso mohoso al aceite, debido a la
formacin de cidos grasos; por esto si el material no se procesa pronto ( 3 das)
se dispone en literas para su oreo.
d. Productos
En un aceite esencial pueden encontrarse hidrocarburos aliciclicos y aromticos,
as como sus derivados oxigenados; Ej: alcoholes, aldehdos, cetonas, steres,
etc., substancias azufradas y nitrogenadas. Los compuestos mas frecuentes
derivan biolgicamente del cido mevalnico; se les cataloga como terpenos:
mono terpenos (C10) y sesquiter penos (C15) (Bruneton, 2001).
e. Usos de los Aceites Esenciales
Industria Alimentaria
Se emplean para condimentar carnes preparadas, embutidos, sopas, helados,
queso, etc. Los aceites ms empleados por esta industria son el Cilantro, Naranja
y Menta, entre otros. Tambin son utilizados en la preparacin de bebidas
alcohlicas y no alcohlicas, especialmente refrescos. Con respecto a esta
utilidad podemos citar las esencias extradas del naranjo, limn, mentas e hinojo,
entre otros. Estas esencias tambin se emplean en la produccin de caramelos,
chocolates y otras golosinas (Bruneton, 2001).
Industria Farmacutica
Se usan en cremas dentales (aceite de menta e hinojo), analgsicos e inhalantes
para descongestionar las vas respiratorias (eucalipto). El ecucaliptol es muy
empleado en odontologa. Son utilizados en la fabricacin de neutralizantes de
18
sabor desagradable de muchos medicamentos (naranjas y menta, entre otros)

(vila, 2001).
Industria de Cosmticos
Esta industria emplea los aceites esenciales en la produccin de cosmticos,
jabones, colonias, perfumes y maquillaje. En este campo se pueden citar lo
aceites de geranio, lavanda, rosas y pachouli. Desodorantes Industriales:
Actualmente se ha desarrollado el uso de esencias para disimular el olor
desagradable de algunos productos industriales como el caucho, los plsticos y
las pinturas. La industria de las pinturas emplea limoneno como disolvente
biodegradable. Tambin se imparte olor a juguetes. En textiles, como
enmascarado res de olores en tratamientos con mordientes antes y despus del
teido. En papelera, para impregnar de fragancias cuadernos, tarjetas, papel
higinico, toallas faciales (Bruneton, 2001).
Industria de productos de uso veterinario
Esta industria emplea el aceite esencial de Chenopodium ambrosoid es muy
apreciado por su contenido de ascaridol, vermfugo. Tambin requiere limoneno y
mentol como insecticidas.
Biocidas e insecticidas
Existen esencias con propiedades bactericidas, como el tomillo, clavo, salvia,
mentas, organo, pino, etc. Otras son insecticidas:
- Contra hormigas: Menthaspicata (spearmint), Tanacetumy poleo.
- Contra fidos: ajo, otros Allium, coriandro, ans, albahaca.
- Contra pulgas: lavanda, mentas etc.
- Contra moscas: ruda, citronela, menta, etc.
- Contra piojos: Menthaspicata, albahaca, ruda, etc.
- Contra polilla: mentas, Hisopo, romero, etc.
- Contra colepteros: Tanacetum, comino, ajenjo y tomillo, etc.
- Contra cucarachas: menta, ajenjo, eucalipto, laurel, etc.
- Contra nematodos: Tagetes, salvia, calndula, Aspragus, etc.
19
Los aceites esenciales se utilizan para dar sabor y aroma al caf, el t, los vinos y
las bebidas alcohlicas. Son los ingredientes bsicos en la industria de los
perfumes y se utilizan en jabones, desinfectantes y productos similares. Tambin
tienen importancia en medicina, tanto por su sabor como por su efecto calmante
del dolor y su valor fisiolgico (Bruneton, 2001).
II.2.4. Principios activos de las plantas
Los principios activos son sustancias que se encuentran en las distintas partes u
rganos de las plantas y que alteran o modifican el funcionamiento de rganos y
sistemas del cuerpo humano y animal. La investigacin cientfica ha permitido
descubrir una variada gama de principios activos, de los cuales los ms
importantes desde el punto de vista de la salud, son los aceites esenciales, los
alcaloides, los glucsidos o hetersidos, los muclagos, gomas y los taninos.
Existen en las plantas otros principios activos relevantes denominados nutrientes
esenciales, como las vitaminas, minerales, aminocidos, carbohidratos y fibras,
azcares diversos, cidos orgnicos, lpidos y los antibiticos.
Los principios activos se clasifican, segn su estructura qumica, en grupos:
Productos resultantes del metabolismo primario (procesos qumicos que
intervienen en forma directa en la supervivencia, crecimiento y reproduccin):
Glcidos,
lpidos,
derivados
de
aminocidos.
Productos
derivados
del
metabolismo secundario (no son esenciales para el metabolismo sino que son
sintetizadas como defensa, adaptacin, etc.), son los ms importantes como
principios activos: Hetersidos. Antraquinnicos, Cardiotnicos, Cianognicos,
Cumarnicos, Fenlicos, Flavnicos, Ranunculsidos, Saponsidos,
Sulfurados, Polifenoles. cidos fenlicos; Cumarinas; Flavonoides; Lignanos;
Taninos;
Quinonas. Terpenoides. Aceites esenciales; Iridoides; Lactonas;
Diterpenos; Saponinas (Van Ginkel, 2003).

II.2.5. Caractersticas de Staphylococcus aureus
El prototipo de los estafilococos patgenos es S. aureus que es el agente causal
de la mayora de las infecciones, son cocos Gram positivos de 0.5 - 1 um de
dimetro, son inmviles, fermentan los azucares, no esporulan, productores de
20
catalasa y generalmente no son capsulados (Murray, 2006). Se agrupa en forma de

racimos y se consideran bacterias poco exigentes, que crecen en medios
comunes y ofrecen cierta resistencia a los agentes extraos. Se encuentran
generalmente en el medio ambiente que rodea al hombre, formando parte de la
flora normal de la piel y las mucosas. Su estructura antignica de este
microorganismo es bastante compleja, se han determinado cerca de 30 antgenos
diferentes en su pared celular (Ziad, 2000).
Taxonoma de Staphylococcus aureus.

La clasificacin sistmica segn la nueva edicin del manual de bacteriologa
sistmica de (Bettin et al, 2003):
DOMINIO: Procarionte
FILO: Firmicutis
CLASE: Schyzomicetes
ORDEN: Baciliales (Eubacteriales)
FAMILIA: Staphylococcaceae
GENERO: Staphylococcus
ESPECIE: aureus
a. Generalidades de Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus es un microorganismo de gran importancia mdica. Desde
hace muchos aos se le ha reconocido como uno de los principales agentes
patgenos para el humano. S. aureus forma parte de la familia Microccocaceae,
gnero Staphylococcus, el cual contiene ms de 30 especies diferentes y muchas
de stas son habitantes naturales de la piel y las membranas mucosas del
hombre. Es un coco gram-positivo, no mvil. Puede encontrarse solo, en pares,
en cadenas cortas o en racimos. Es un anaerobio facultativo, pero crece mejor en
condiciones aerobias. El microorganismo produce catalasa, coagulasa y crece
rpidamente en agar sangre. Sus colonias miden de 1 a 3 mm, producen un tpico
pigmento amarillo debido a la presencia de carotenoides y muchas cepas
producen hemlisis a las 24-36 horas. (Velzquez, 2005 y Kanafani, 2006).
21
b. Factores de virulencia de Staphylococcus aureus

Los estafilococos poseen numerosas protenas de superficie. As la mayora de
las cepas de S. aureus contiene un factor de agregacin llamado coagulasa
ligada, protena que constituye un factor de virulencia. Se une al fibringeno y lo
convierte en fibrina insoluble, lo que hace que los estafilococos se agreguen en
forma de grupos. La deteccin de esta protena constituye la prueba principal de
identificacin de S. aureus. Posee otras protenas de superficie importantes
tambin para la adherencia a las protenas de la matriz y tejidos del anfitrin (p.ej.
fibronectina, fibringeno, elastina, colgeno) (Murray et al, 2006).
c. Patogenicidad de Staphylococus aureus
De 20 a 50% d los humanos albergan a S. aureus en la nariz. La capacidad
patgena de de una cepa determinada de S. aureus es un efecto combinado de
factores extracelulares y toxinas aunado a als propiedades invasora de las cepas
en un extremo de la diversidad de la enfermedad se encuentra la intoxicacin
alimetaria de estafilococos, atribuible nicamente a la ingestin de eterotoxinas
preformadas; en el otro extremo estn las bacterias estafilocicas y los abscesos
diseminados en todo los rganos (Jawetz, 2005).
d. Enfermedades producidas por S. aureus
Intoxicacin alimentaria. Mediada por enterotoxinas que producen diarreas,
vmitos, nuseas y espasmos abdominales dolorosos; se produce por consumo
de alimentos contaminados con S. aureus. El tiempo de incubacin de la
enfermedad es muy corto: de dos a seis horas. El tratamiento con antibiticos no
es til debido a que los sntomas son causados por una toxina y no por la
multiplicacin de las bacterias (Jawetz, 2005).
-
Sindrome del Shock Toxico. Es causado por cepas de S. aureus que producen
la toxina asociada al sndrome del shock toxico, la cual es absorbida por el
torrente sanguneo produciendo fiebre elevada, erupciones de color rojo
brillante por todo el cuerpo y ocasionando una disminucin de la presin
sangunea. El Saureus asociado con el sndrome de choque toxico se puede
22
encontrar en la vagina, tampones, heridas, en otras infecciones localizadas o

en la garganta, pero casi nunca en el torrente sanguneo (Jawetz, 2005).
-
Imptigo.- Es una infeccin de la piel caracterizada por ampollas que pueden

estar localizadas en cualquier parte del cuerpo, aunque por lo general se
observan alrededor de la nariz o la boca. Puede ser causado por uno de dos
tipos de bacterias: S. pyogenes y S. aureus.
Infecciones del tracto respiratorio superior e inferior.- Puede ser un patgeno o

co-patgeno, produciendo diversas infecciones tales como: faringitis y
neumona.
Endocarditis bacteriana.- puede producir insuficiencia cardiaca, siendo la

endocarditis en humanos la ms frecuente, subsecuente a la infeccin por
Staphylococcus aureus.
e. Epidemiologa de S. aureus.
S. aureus es una de las bacterias patgenas ms importantes a nivel global.
Cerca de un cuarto de la poblacin porta alguna de sus cepas en cierta etapa de
su vida o todo el tiempo. Si en las personas se desarrolla una infeccin por esta
bacteria es muy probable que la responsable sea una de las propias cepas de S.
aureus que colonizan el organismo. En aos recientes las infecciones por S.
aureus han reemergido debido a que la bacteria se ha vuelto resistente a los
antibiticos con los que normalmente se le combate (Howe et al, 1996 y
Velzquez, 2005).
Las cepas SARM se introducen en el medio hospitalario a travs de pacientes,
visitantes o trabajadores sanitarios. El reservorio fundamental lo constituyen los
pacientes ingresados que estn infectados o colonizados, extendindose a otros
pacientes principalmente por medio de las manos del personal sanitario (infeccin
cruzada). A medida que progresa un brote epidmico, aumenta el nmero de
portadores nasales de SARM que constituyen, a menudo, la propia fuente de
infeccin. La transmisin a travs del entorno inanimado (reservorio ambiental)
puede ser digna de mencin, especialmente en ciertas reas, como en las
Unidades de Cuidados Intensivos. Desde hace muchos aos se han reportado
brotes epidmicos de S. aureus por todo el mundo (Kanafani et al, 2006).
23
f. Antimicrobianos para Staphylococcus aureus.

Los antimicrobianos se desarrollaron en los ltimos 60 aos. Muchas
enfermedades
infecciosas
consideradas
incurables
letales
son
ahora
susceptibles de tratamiento. La potencia notable y la actividad especfica de los

frmacos antimicrobianos se deben a su selectividad sobre blancos especficos
que son nicos en los microorganismos. Entre estos blancos estn las enzimas
que sintetizan la pared celular, los ribosomas, las enzimas requeridas en la
sntesis de nucletidos y la replicacin de DNA. Una Consecuencia inevitable del
uso de los antimicrobianos es la seleccin de microorganismos resistentes
(Katzung, 2005).
a. Glicopeptidos (Vancomicina y Teicoplanina)
Mecanismo de accin: la vancomicina inhibe la sntesis de la pared celular por
unin firme al extremo D-Ala-D-Ala del pentapeptido peptidoglucano de sntesis
reciente. Esto inhibe a la transglicosilasa y evita la mayor elongacin del
peptidoglucano y sus enlaces cruzados. El peptidoglucano se debilita as y las
clulas se hacen susceptibles a la lisis. La membrana tambin se daa lo que
hace efecto a su efecto antibacteriano (Katzung, 2005).
Resistencia: la resistencia de los enterococos a la vancomicina se debe a la
modificacin del sitio de unin D-Ala-D-Ala del bloque de construccin,
peptidoglicano, donde el D-Ala terminal es sustituido por D-lactato. Esto produce
la prdida de un enlace de hidrogeno critico que facilita la unin de alta afinidad
de la vancomicina a su sitio de accin y la prdida de actividad. Ese mecanismo
tambin est presente en cepas de Staphylococcus aureus resistentes a la
vancomicina (Katzung, 2005).
II.3.
Marco conceptual
Aceite Esencial: son productos qumicos que forman las esencias odorferas
de un gran nmero de vegetales (Bruneton, 2001).
Antimicrobianos: sustancia que mata o inhibe el crecimiento de microbios,
tales como bacterias, hongos, parsitos o virus (Guerrero, 2001).
24
Bactericida: Es cuando el antimicrobiano destruye al germen, son

bactericidas tpicos las beta lacta masas y los amino glucsidos (Guerrero,
2001).
Bacteriosttico: Es cuando el antimicrobiano inhibe temporalmente el
crecimiento o multiplicacin del germen, para ser destruido el germen debe ser
ayudado por el sistema inmunolgico del husped (Bruneton, 2001).
Cepa: Cultivo puro formado por bacterias descendientes de un solo
aislamiento (INS, 2002).
Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI): Corresponde a la concentracin
ms dbil de un antibitico capaz de inhibir el crecimiento visible de una cepa
bacteriana al cabo de 18 24 horas de incubacin (INS, 2002).
Concentracin Mnima Bactericida (CMB): Es la mnima cantidad de
antibitico capaz de destruir el 99.9% de una muestra inoculada en
condiciones estandarizadas (INS, 2002).
Entero toxina: Es una sustancia daina producida por ciertas bacterias y que
es especialmente peligrosa para partes del tracto gastrointestinal (Guerrero,
2001).
Escala de Mc. Farland: Estndar de turbidez de sulfato de bario. La escala
usada para el inculo de las pruebas de susceptibilidad por el mtodo de disco
difusin es 0.5 (INS, 2002).
Principio Activo: Los principios activos son la sustancia a la cual se debe el
efecto farmacolgico de un medicamento, en un principio eran hierbas y
sustancias naturales (Bruneton, 2001).
Resistencia: Son mecanismos de defensa que crean los grmenes para evitar
que los antimicrobianos los destruyan, se produce no genticamente
(metablicamente inactivos, sin estructura blanco) y genticamente (mutacin,
plasmodios) (Guerrero, 2001).
25
Resistente (R): Categora clnica definida para las pruebas de susceptibilidad

in vitro. Las cepas bacterianas incluidas en esta categora no son inhibidas por
las concentraciones sricas del antibitico normalmente alcanzadas con las
dosis habituales del mismo (INS, 2002).
Sensible (S): Categora clnica definida para las pruebas de susceptibilidad in
vitro. Implica que una infeccin debida a la cepa bacteriana estudiada puede
ser tratada apropiadamente con la dosis de antibitico recomendada para el
tipo
de
infeccin
la
especie
infectante,
menos
que
existan
contraindicaciones (INS, 2002).
III.
III.1.
MTODO DE INVESTIGACIN
mbito de estudio
El estudio se realiz en la ciudad de Puno, ubicado en coordenadas UTM: 19 L

0393076 E8242866 N, a una altitud de 3838 msnm, la recoleccin de plantas de
chiri-chiri (Grindelia boliviana R.), se efectu en su hbitat silvestre en cercanas
al barrio Torres de San Carlos de la ciudad de Puno, la obtencin del aceite
esencial del chiri-chiri, se realiz mediante el mtodo de arrastre al vapor en la
26
Facultad de Ciencias Agrarias, Escuela Profesional de Agroindustria de la

Universidad Nacional del Altiplano. El experimento de evaluacin de la actividad
antimicrobiana se realiz en el laboratorio de Microbiologa de la Facultad de
Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional del Altiplano Puno.
III.2.
Tipo de estudio
El trabajo de investigacin fue del tipo cuasi experimental utilizando un control

positivo (antibitico vancomicina). Se analiz el efecto que tiene el factor en
estudio (aceite esencial), mediante la medicin de la variable de respuesta
inhibicin del crecimiento bacteriano expresada en halos de inhibicin en mm.
III.3.
Muestra
La muestra de la especie vegetal chiri-chiri (Grindelia boliviana R), se colect de

una poblacin silvestre existente en el barrio Torres de San Carlos de la ciudad de
Puno, el mismo que se realiz a las 7 am, tomndose plantas enteras en un peso
de 10 kg. La bacteria patgena Staphylococcus aureus cepas ATCC, fueron
obtenidas del Instituto Nacional de Salud en la ciudad de Lima, Per.
III.4.
Diseo de investigacin
La distribucin de unidades experimentales para el estudio del efecto del aceite

esencial de chiri-chiri frente a Staphylococcus aureus ATCC, correspondi a un
diseo completamente al azar (D.C.A), la disposicin de unidades experimentales
fue de la siguiente manera:
Antibitico
Repet.
1
2
3
4
5
Total
Aceite esencial de chiri-chiri Grindelia boliviana R
Vancomicina
1 l/l
5l/l
10l/l
25l/l
35l/l
50l/l
Total
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
1
1
1
1
1
5
7
7
7
7
7
35
Se trabajo con 35 unidades experimentales, conformado por 5 repeticiones por

cada dosis utilizada, adems se utiliz un control positivo el antibitico comercial
27
vancomicina que sirvi para estimar el porcentaje inhibitorio, ya que se conoce

que Staphylococcus aureus ATCC es sensible a este antibitico.
III.5.
Materiales
Material Biolgico
Cepa ATCC de Staphylococcus aureus
Plantas de "Chiri -chiri" (Grindelia boliviana R)
Material de Vidrio
Buretas.
Probetas.
Frascos acaramelados con tapa estril.
Pipeta.
Placas Petri de vidrio Prex.
Equipos y Materiales.
Refrigeradora.
Incubadora.
Estufa de esterilizacin.
Esterilizadores (autoclave).
Destilador por arrastre a vapor.
Pipetas calibradas de 0,1 l, 0,5l y 1,0l.
Mechero Bunsen.
Balanza.
Soporte Universal.
Esptula de Driblasky.
Medios de Cultivo.
Agar MullerHinton.
Agar Mackonkey.
Caldo Indol.
Caldo nutritivo.
Material Fungible.
Agua destilada.
Alcohol.
Escobillas.
Bolsas de papel.
28
Tijeras podadoras.
Guantes.
Guantes de Goma.
Algodn.
Lpiz de cera.
Papel Kraft.
Tiras medidoras de pH.
Pabilo.
Punteras de plstico.
Azas de Kholle.
III.6.
Metodologa
a. Recoleccin de plantas
Para la recoleccin se tuvo en cuenta que la planta de "chiri -chiri" (Grindelia
boliviana R) se encuentre en estado de madurez fisiolgica (con flores), que
pueda contener los principios activos, la recoleccin se efectu por la maana (7
am) en el barrio Torres de San Carlos de la ciudad de Puno, se cortaron los tallos
con tijeras de podar obteniendo la planta sin raz, para su posterior secado en
sombra y en un ambiente cerrado. Se colect 10 kg de biomasa (Pineda, 2001).
b. Secado del material vegetal

Fundamento.- Es la eliminacin del agua de los tejidos y clulas de la planta,
para evitar la alteracin de los componentes de la planta por la humedad
persistente. Las hojas deben ser secadas con el tallo sin desprenderlas (Tadeo,
2004).
Procedimiento.- El secado se realiz en un ambiente protegido de la luz solar,
ventilada y sin superponer los tallos para su desecacin ptima por el lapso de 10
das para obtener un secado adecuado de la materia vegetal.
c. Destilacin por arrastre a vapor (Tadeo, 2004).
29
Fundamento.- Consiste en calentar la planta hasta que sus componentes ms

voltiles pasen a la fase de vapor y a continuacin se enfra el vapor para
recuperar dichos componentes en forma lquida por medio de la condensacin (el
aceite esencial) (Tadeo, 2004).
Procedimiento
-
Se separaron manualmente las hojas de los tallos de la planta, y se carga en

un hidrodestilador, de manera que forme un lecho fijo compacto, colocndose
un total de 2 kg.
El vapor de agua se inyect mediante un distribuidor interno, prximo a su base

y con la presin suficiente para vencer la resistencia hidrulica del lecho.
Conforme el vapor se pone en contacto con el lecho, la materia prima se
calienta y liberando el aceite esencial contenido y ste, a su vez, debido a su
alta volatilidad se evapora. Al ser soluble en el vapor circundante, el aceite
esencial es arrastrado, corriente arriba hacia el tope del hidrodestilador.
La mezcla, vapor saturado y aceite esencial, fue condensado y enfriado, hasta

temperatura ambiente en un condensador cuello de cisne o prolongacin
curvada del conducto, a la salida del hidrodestilador.
A la salida del condensador, se obtuvo una emulsin lquida heterognea. La

cual, se separo en un decantador dinmico o bureta. Este equipo est lleno de
agua fra al inicio de la operacin y el aceite esencial se fue acumulando,
debido a su casi inmiscibilidad en el agua y a la diferencia de densidad y
viscosidad con el agua. Posee un ramal lateral, por el cual, el agua es
desplazada para favorecer la acumulacin del aceite. El vapor condensado
acompaante del aceite esencial y que tambin se obtiene en la bureta, es
llamado agua floral, posee una pequea concentracin de los compuestos
qumicos solubles del aceite esencial, lo cual le otorga un ligero aroma,
semejante al aceite obtenido.
El proceso termin cuando el volumen del aceite esencial acumulado en la

bureta no varo con el tiempo. A continuacin, el aceite fue retirado de la bureta
y almacenado en frascos acaramelados estriles con tapa. Para conservar el
aceite esencial se coloc sulfato de sodio, para evitar la hidratacin por la
humedad ambiental, luego los frascos se rotularon y se mantuvieron en
refrigeracin.
30
d. Obtencin de la cepas de Staphylococcus aureus

Se utiliz cepas ATCC de Staphylococcus aureus, provenientes del Instituto
Nacional de Salud de la ciudad de Lima.
Preparacin del medio de cultivo agar Mller Hinton (INS, 2002)
Fundamento.- El agar Mller-Hinton se considera el mejor medio para las
pruebas de sensibilidad de rutina dado que muestran buena reproducibilidad lote
a lote en las pruebas de sensibilidad, contiene bajo nivel de inhibidores de
sulfonamidas, trimetoprima y tetraciclina, es adecuado para el desarrollo de la
mayora de las bacterias patgenas y existen suficientes datos recopilados que
avalan la experiencia de las pruebas de sensibilidad realizadas en este medio.
Procedimiento.- Segn su especificacin para su respectiva hidratacin, se
prepar la cantidad de 3 g de agar con 80 ml de agua destilada para 4 placas.
Luego se llev el medio a esterilizacin en autoclave a 120 C por 30 minutos.
Antes que el medio de cultivo se enfre, se realiz el plaqueo, vertiendo
aproximadamente 20 ml de medio Mller Hinton en cada placa estril vaca, luego
se esper su solidificacin y se verific el pH (7.2-7.4); empleando tiras reactivas.
e. Preparacin del estndar Mc Farland (INS, 2002)

Fundamento.- El inoculo bacteriano debe contener una cantidad normatizada de
unidades formadoras de colonias (UFC), para minimizar la variacin de la
poblacin bacteriana, esta cantidad es de 1x10 3 UFC/ml la que se determin
mediante el estndar de Mc Farland.
Procedimiento.- Para estandarizar la densidad ptica del inculo se utiliz una
suspensin de sulfato de bario como estndar de turbidez (0.5 de la escala de Mc
Farland). Para prepararlo se procedi de la siguiente manera: Se agrega 0,5 ml
de BaCl2 a 99,5 ml de H2SO4. Luego se verifica la densidad correcta del estndar
usando un espectrofotmetro; la absorbancia a 625 nm debe ser 0,03 - 0,10 para
el estndar 0,5 de Mc Farland. Se distribuyen 2 - 4 ml de la solucin en tubos
31
similares a los que se usan para preparar los inculos y se mantienen guardados
a temperatura ambiente al abrigo de la luz. Antes de su uso y para lograr una
turbidez homognea, se agita vigorosamente cada estndar.
f. Preparacin del inculo
Las cepas ATCC (American Tipy Culture Colletion) Staphylococcus aureus fueron
adquiridas de INS Lima, las cuales fueron inoculadas en medio de cultivo Mac
Conkey, con 24 a 48 horas de ser cultivados, a partir del cual se seleccionaron y
recogieron con asa de kolle, 4 a 5 colonias, bien aisladas y con similar morfologa,
teniendo el cuidado de no recoger medio de cultivo. Con estas colonias se
prepar una suspensin en 4 5 ml en solucin salina. Luego la suspensin
bacteriana fue incubada a 35C hasta alcanzar o exceder la turbidez del estndar
(2 horas). Finalmente se realiz el ajuste a la turbidez del inculo por comparacin
visual, agregando solucin salina, hasta una turbidez equivalente al tubo 0.5 del
estndar de Mc. Farland, para ello, se observaron los tubos contra un fondo
blanco con una lnea negra como contraste.
g. Prueba de inhibicin para determinar la actividad antimicrobiana del

aceite esencial de Grindelia boliviana R. por el Mtodo de difusin en agar
Kirby-Bahuer (INLASA, 2003).
Fundamento.- La tcnica de dilucin en agar segn Kirby-Bahuer, se utiliz para
medir cuantitativamente la actividad "in vitro" de un antimicrobiano frente a un
cultivo bacteriano. Estos mtodos se basan en la preparacin de una serie de
placas con caldo o agar, respectivamente, a los cuales se les agrega el antibitico
o aceite esencial en distintas concentraciones. Luego se inoculan cada uno de las
placas con una suspensin estandarizada del microorganismo en estudio. Las
pruebas se examinan despus de incubar 18 a 24 hs. a 35C y se determina la
concentracin
mnima
inhibitoria
(CMI)
del
microorganismo ensayado.
Aplicacin de los discos en las placas inoculadas
antimicrobiano
frente
al
32
Se colocaron los discos sobre la superficie del agar Mller-Hinton,

inoculada con pinza estril aplicando una ligera presin a una distancia no
menor a 24 mm desde un centro al otro. Debido a que algunas drogas
difunden casi instantneamente, un disco no debe ser removido una vez
que tom contacto con la superficie del agar. No deben colocarse ms de 6
discos por placa.
Incubar las placas invertidas a 35C dentro de los 15 minutos posteriores a

que los discos fueron aplicados.
Lectura de las placas e interpretacin de resultados

-
Despus de 16 a 18 horas de incubacin se examin cada placa y

medimos los dimetros de las zonas de inhibicin, las zonas de inhibicin
debieron
estar uniformemente
circulares y
se
observ
desarrollo
confluente. Como el microorganismo estudiado fue un Staphylococcus, se

incub por 24 horas para evaluar el efecto de la vancomicina,
-
Para evaluar el punto final se considerel el rea que no muestre desarrollo

obvio a observacin directa, no incluyendo halo de crecimiento o colonias
muy pequeas que pudieran ser detectadas solo con mucha dificultad en el
borde de la zona.
h. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI)

Fundamento.- El valor de la CMI se obtuvo por el mtodo de difusin en agar,
que permite determinar la concentracin de antibitico o aceite esencial que se
necesita alcanzar en el sitio de infeccin para inhibir al microorganismo infectante.
La CMI, sin embargo, no representa un valor absoluto, la CMI real puede estar
entre la menor concentracin de antibitico que inhibe al microorganismo y la
siguiente donde se observa desarrollo del mismo (Cruz-Carrillo, et al, 2010).
Procedimiento.- Se observ la inhibicin del desarrollo bacteriano a las 24 horas
en las placas Petri y se determina en funcin a las placas con aceite de chirichiri, en donde midiendo el halo de inhibicin, permite mediante el uso del control
33
positivo (vancomicina), convertir los dimetros de halos de inhibicin en

porcentaje de inhibicin, bajo la siguiente frmula de clculo (Cruz-Carrillo, et al,
2010):
% efecto inhibitorio=
Promedio del halo de inhibicion

x 100
Diametro del halo de inhibicion control positivo
Una vez obtenido el efecto inhibitorio en porcentaje, se procedi al ajuste de una

ecuacin logartmica, a partir de la cual se obtiene la CMI, como el valor de
concentracin del aceite esencial a partir del cual se obtiene la inhibicin de la
bacteria patgena.
III.7.
Mtodo estadstico
Se evalu las diferencias estadsticas entre los tratamientos y concentraciones de

aceite esencial del chiri-chiri y el control de los bioensayos, para lo cual se utiliz
el anlisis de varianza en un sentido (ANOVA), para determinar la existencia de
diferencias entre las dosis respecto a la inhibicin producida en Staphylococcus
aureus ATCC por el efecto de aceite esencial del "chiri -chiri" (Grindelia boliviana
R.), el anlisis de varianza se realiz utilizando el siguiente modelo lineal aditivo:
Yij i ij
Donde:
Yij
Variable de respuesta (halo de inhibicin en mm)
Promedio general
i
Efecto de la i-sima dosis de aceite esencial de chiri-chiri
ij
Efecto del error experimental
Adicionalmente la concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) se obtuvo ajustado una

funcin logartmica, mediante el mtodo estadstico de mnimos cuadrados
ordinarios, que permite obtener los porcentajes de inhibicin y la dosis a la cual
corresponde la CMI, el modelo logartmico fue el siguiente:
Y b ln(X)+a
Donde:
34
Y=Porcentaje de inhibicin
X=Concentraciones del aceite esencial
b= Pendiente
a= Intercepto
Las pruebas estadsticas se evaluaron:
Si el resultado es p < a 0.05 las pruebas son significativas
Si el resultado es p > a 0.05 las pruebas no son significativas
Prueba de rango mltiple de Tukey.
Procedimiento:
1)
Encontrar el error estndar de la media: S

S __
X
2CM EE
r
r
: Nmero de repeticiones
CMEE : Cuadrado Medio del Error Experimental
2) Encontrar la Amplitud Estudiantizada Significativas de Tukey: AES(D)
AES ( D ) D( t 1,GLEE );
3)
Determinar la Amplitud Lmite de Significacin

Amplitud Lmite de Significacin de Tukey: ALS (D)
ALS ( D ) AES ( D ) S __
X
4) Ordenar los promedios de los tratamientos en serie por su magnitud en

forma decreciente y realizar las diferencias de medias entre los mismos.
35
IV.
IV.1.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Efecto bactericida del aceite esencial
del
Chiri-chiri (Grindelia
boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro.

Cuadro 1. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del Chirichiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro
Concentraciones
No. repeticiones
Mnimo
Mximo
Promedio
Error estndar
1l/l
5
0
0
0
-
Fuente: elaboracin propia, 2014
5l/l
5
5.100
7.500
5.740
0.45
10l/l
5
6.300
9.600
7.420
0.59
25l/l
5
7.500
10.600
9.100
0.60
35l/l
5
9.500
12.400
10.760
0.51
50l/l
5
9.800
13.500
11.320
0.76
75l/l
5
12.800
15.400
14.240
0.44
36
16
14
12
Halos de inhibicin (mm) a las 110 hrs
10
Figura 2. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del Chirichiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro
En el cuadro 1 y figura 2, la concentracin de 1l/l de aceite esencial de Grindelia

boliviana, no muestra ningn efecto bactericida sobre Staphylococcus aureus
ATCC in vitro, debido a que no se observ la formacin del halo de inhibicin,
con la dosis de 5l/l se obtuvo un promedio de 5.740.45 mm de halo de
inhibicin, con la concentracin de 10l/l se obtuvo 7.420.59 mm, con la de 25l/l
se tiene 9.10.60 mm, la concentracin de 35l/l present el halo inhibitorio de
10.760.51 mm, con la concentracin de 50l/l el promedio fue 11.320.76 mm
por ltimo la dosis ms alta de 75l/l present el halo de 14.240.44 mm.
De los resultados del efecto bactericida, se observa que existe una respuesta
directamente proporcional de Staphylococcus aureus ATCC frente a las diferentes
concentraciones utilizadas de aceite esencial de Grindelia boliviana, lo que indica
que al incrementar la concentracin de aceite esencial el efecto bactericida
aumenta tambin proporcionalmente, lo que se expresa en un mayor dimetro del
halo de inhibicin que se forma en la placa cultivada con la bacteria patgena en
estudio. En la concentracin de 1l/l de aceite esencial la bacteria patgena
37
presenta resistencia, a partir de la concentracin de 5l/l se observa sensibilidad

de Staphylococcus aureus ATCC al aceite esencial de chiri-chiri.
El anlisis de varianza (anexo 2.1), para los dimetros de los halos de inhibicin
formados por el aceite esencial de Grindelia boliviana en el cultivo de la bacteria
patgena Staphylococcus aureus ATCC, indica que se encontr diferencia
estadstica altamente significativa (P=0.0001) entre las concentraciones de aceite
esencial utilizada, lo que permite sealar que existe un efecto diferente de cada
dosis respecto al halo de inhibicin formado, para obtener un ordenamiento del
efecto de cada concentracin en el siguiente cuadro se muestra los resultados de
la prueba de rango mltiple de Tukey.
Cuadro 2. Prueba de Tukey para efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite
esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC
in vitro
Concentraciones
75
50
35
25
10
Promedio
14.24
11.32
10.76
9.10
7.42
5.74
Grupos de Tukey
A
B
B
B
C
C
D
D
*Promedios con letra diferente son estadsticamente diferentes entre si (P<0.01)
En el cuadro 2, se observa segn la prueba de Tukey, que la concentracin

mxima utilizada de 75l/l de aceite esencial de Grindelia boliviana alcanz el
mayor efecto bactericida con un promedio de halo de inhibicin de 14.24 mm, que
es estadsticamente superior al resto de concentraciones (P<0.01), un segundo
grupo est formado por las concentraciones de 50, 35 y 25 l/l que presenta halos
inhibitorios de 11.32 a 9.10 mm y que estadsticamente presentan un efecto
bactericida similar entre si, las concentraciones de 10 y 5 l/l forman el ltimo
grupo con el menor efecto bactericida. Debe sealarse que la dosis de 1l/l no
38
mostr formacin de halo de inhibicin, por lo cual no se la consider en el

anlisis comparativo.
Utilizando aceite esencial de Lippia alba en Cuba (Pino, et al., 1997), indica
tambin su actividad antibacteriana, siendo mayor dicho efecto en general sobre
los grmenes gram positivos; del mismo modo Flores et al., (1999) seala que
observ efecto bactericida del aceite esencial del romero (Rosmarinus oficinalis)
frente a Staphylococcus aureus en la concentracin de 1 mg/ml. Martnez et al.,
(2003), tambin seala que el aceite esencial de la mandarina (Citrus reticulata)
variedad Dancy mostr efecto bactericida sobre Staphylococcus aureus, pero
indica que a la concentracin de 1% el aceite no mostr formacin de halos de
inhibicin.
Castro (2000), utilizando aceite esencial de manzanilla (Matricaria recutita) de la
ciudad de Arequipa, indica que se evidenci efecto bactericida de dicho aceite
sobre Staphylococcus aureus extrado de lesiones bucofarngeas, pero dicho
efecto se observ a partir de la dosis de 3%. Albado et al., (2001) estudiaron el
efecto bactericida del aceite esencial de Origanum vulgare, sealando que dicho
aceite mostr efecto bactericida sobre Staphylococcus aureus, sin embargo
seala que Pseudomonas aeruginosa mostr resistencia.
De los resultados del estudio y la revisin de antecedentes, queda claro que los
aceites esenciales de diferentes plantas, entre ellos el chiri-chiri, muestran
efecto bactericida sobre la mayora de bacterias patgenas, lo cual se atribuye a
la composicin de los aceites, Grindelia boliviana presenta grindelina, polifenoles
cidos vanillico, p-cumrico y para hidroxibenzoico, flavonoides derivados del
quercetol, luteolol y del kaempferol, alcanos hentriacontano, resina, cidos
grindlico y oxigrindlico, y principios amargos (Pavlow, 1980). El efecto de los
aceites esenciales de plantas seria sinrgico, es decir no solo atribuible a una
sustancia del aceite esencial, sino a una accin acumulativa de las varias
sustancias que forman el aceite, cuya accin consiste en la disrupcin de la
membrana celular bacteriana, daando la integridad estructural de la membrana
bacterial, es decir la disposicin ordenada de lpidos y protenas, de modo que
interfieren con su funcionamiento, ejerciendo un efecto neto de interferencia de
los procesos de transporte y metabolismo energtico del microorganismo,
39
provocando tambin la salida de pequeas molculas de la clula, esto se traduce

en la inestabilidad de la membrana (provocando permeabilidad), lo cual permite el
ingreso de los principios activos del aceite esencial.
IV.1.1. Concentracin mnima inhibitoria (CMI) del aceite esencial de

Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) para Staphylococcus aureus
ATCC in vitro.
Para obtener la CMI por el mtodo de difusin en discos, se hace uso del control
positivo (Vancomicina), que permiti obtener el porcentaje de inhibicin para cada
una de las dosis de aceite esencial de Grindelia boliviana (chiri-chiri), que se
muestran en el siguiente cuadro.
Cuadro 3. Inhibicin porcentual del aceite esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana
R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro
Concentracin
(l/l)
1
5
10
25
35
50
75
Dimetro Halos
(mm)
0
5.74
7.42
9.10
10.76
11.32
14.24
Inhibicin
(%)
0
16.56
21.41
26.26
31.04
32.66
41.08
40
45
40
f(x) = 8.69 ln(x) + 0.66
R = 0.98
35
30
25
Inhibicin (%) 20
15
10
5
0
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Concentraciones
Figura 3. Efecto bactericida (%) del aceite esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana
R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro
En el cuadro 3, se observa que la dosis de 1l/l no muestra ningn porcentaje de

inhibicin sobre Staphylococcus aureus ATCC, debido a la ausencia de formacin
de halos de inhibicin, con la concentracin de 5 l/l se obtuvo una inhibicin de
16.56%, con la de 10 l/l 21.41%, con 25 l/l un 26.26% de inhibicin, con 35 l/l
un 31.04%, con 50 l/l una inhibicin de 32.66% y la mayor dosis utilizada de 75
l/l obtuvo un 41.08% de inhibicin sobre Staphylococcus aureus ATCC.
En la figura 3, se muestra el ajuste de una ecuacin logartmica que permite
evaluar la relacin entre las concentraciones de aceite esencial de Grindelia
boliviana utilizadas y el efecto bactericida sobre Staphylococcus aureus ATCC
expresada en porcentaje de inhibicin, como se observa la ecuacin logartmica
explica el 98% de dicha variacin (r2=0.9783), por lo cual se la considera
apropiada para obtener la CMI, una vez estimada y realizada la conversin
mediante el uso del antilogaritmo result en 1.12 l/l, que es la concentracin con
la que se obtendra una mnima inhibicin de la bacteria patgena en estudio.
Este resultado es coherente debido a que la concentracin de 1 l/l no haba
mostrado formacin de halo de inhibicin, por lo que la CMI debera encontrarse
entre este valor y el de 5 l/l que fue la concentracin a partir de la cual ya se
observ formacin de halo de inhibicin.
41
Arapa (2013) menciona para aceite esencial de ajenjo (Artemisia absinthium)

sobre Escherichia coli enteropatgena (EPEC) una CMI de 1.88 a 2.06 l/l, con la
que se obtiene una mnima inhibicin (1%), los resultados de nuestro estudio
estn ligeramente por debajo de dicha concentracin (1.12 l/l). Flores et al.,
(1999) reporta para aceite esencial de romero (Rosmarinus oficinalis) una CMI de
1 mg/ml frente a Staphylococcus aureus, del mismo modo Castro et al. (2000)
indica una CMI del aceite esencial de manzanilla de 4% sobre Staphylococcus
aureus proveniente de infecciones bucofarngeas. De la concentracin mnima
inhibitoria estimada en nuestro estudio, se puede sealar que el aceite esencial
de la Grindelia boliviana presenta una CMI similar a la de otros aceites obtenidos
a partir de otras plantas medicinales y aromticas, sin embargo se evidencia que
la mayora de bacterias patgenas son resistentes a concentraciones bajas de
dichos aceites esenciales.
IV.2.
Comparacin del efecto bactericida del aceite esencial de Chiri-chiri

(Grindelia
boliviana
R)
el
antibitico
Vancomicina
frente
Staphylococcus aureus ATCC in vitro.

Cuadro 4. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del Chirichiri (Grindelia boliviana R) y del antibitico vancomicina frente a Staphylococcus aureus
ATCC in vitro
Vancomicin
Concentraciones
Repeticiones
Mnimo
Mximo
Promedio
Error estndar
5 l/l
5
5.10
7.50
5.74
0.45
10 l/l
5
6.30
9.60
7.42
0.59
25 l/l
5
7.50
10.60
9.10
0.60
35 l/l
5
9.50
12.40
10.76
0.51
50 l/l
5
9.80
13.50
11.32
0.76
75 l/l
5
12.80
15.40
14.24
0.44
a
5
30.40
40.30
34.66
1.71
42
45
40
35
30
Halos de inhibicin (mm) a las 110 hrs
25
20
15
10
5
5 5 5 5 5 5
Figura 4. Efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del Chirichiri (Grindelia boliviana R) y del antibitico vancomicina frente a Staphylococcus aureus
ATCC in vitro
En el cuadro y figura 4, se observa que el patgeno Staphylococcus aureus ATCC

in vitro, muestra una alta sensibilidad al antibitico usado como control positivo
vancomicina, con la dosis ms alta utilizada de aceite esencial de Grindelia
boliviana se obtuvo un halo de inhibicin de 14.240.98 mm, mientras que la
vancomicina present en promedio un halo de inhibicin de 34.663.82 mm, lo
que indica que la vancomicina provoca casi el doble de inhibicin sobre
Staphylococcus aureus ATCC. El anlisis de varianza de los halos de inhibicin
respecto a las dosis de aceite esencial de Grindelia boliviana y del antibitico
vancomicina se muestra en el siguiente cuadro.
El anlisis de varianza en un sentido para los dimetros de los halos de inhibicin
formados por el aceite esencial de Grindelia boliviana y el control positivo
vancomicina frente a la bacteria patgena Staphylococcus aureus ATCC (anexo
2.2), indica que se encontr diferencia estadstica altamente significativa
(P=0.0001) entre las concentraciones de aceite esencial y el control, lo que
43
permite sealar que existe un efecto diferente de cada dosis, as como de la

vancomicina, para obtener un ordenamiento del efecto de cada concentracin, as
como del efecto del control positivo en el siguiente cuadro se muestra los
resultados de la prueba de Tukey.
Cuadro 5. Prueba de Tukey de halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del Chirichiri (Grindelia boliviana R) y del antibitico vancomicina frente a Staphylococcus aureus
ATCC in vitro
Conc/Antib Promedio
Vancomicina
34.660
75
14.240
50
11.320
35
10.760
25
9.100
10
7.420
5
5.740
Grupos de Tukey
A
B
B
B
C
C
C
D
D
D
E
E
E
*Promedios con letra diferente son estadsticamente diferentes entre si (P<0.01)
En el cuadro 5, se observa que la vancomicina muestra el mayor efecto

bactericida expresada en promedio de 34.66 mm de halo de inhibicin, siendo
estadsticamente superior (P<0.01) al aceite esencial de Grindelia bolivianala, la
concentracin mxima utilizada de 75l/l de aceite esencial alcanz un promedio
de halo de inhibicin de 14.24 mm que es estadsticamente menor al del control
positivo (vancomicina). De estos resultados se confirma que la vancomicina es un
antibitico al cual Staphylococcus aureus ATCC muestra una alta sensibilidad.
La vancomicina fue extrada de Nocardia orientalis, inhibe la sntesis de la pared
celular bacteriana unindose con alta afinidad a los terminales D-alanil-D-alanina
de las unidades precursoras de la pared celular, estas unidades estn
compuestas por cido N-acetilmurmico, N-acetilglucosamina y un pentapptido,
y forman parte de la estructura del peptidoglucano de la pared celular. La
vancomicina inhibe el proceso de la transglicosilacin de estos precursores,
impidiendo su unin a las capas de peptidoglucano, afectando la estabilidad de la
pared bacteriana.
A diferencia de la vancomicina que ha sido aislado el principio activo, en los
aceites esenciales el efecto bactericida se atribuye a la gran variedad de
compuestos qumicos que contienen (efecto sinrgico), es muy probable que su
44
actividad antimicrobiana no sea atribuible a un mecanismo especfico, sino a la

accin combinada de varios de ellos sobre distintas localizaciones de la bacteria.
Se ha planteado que su actividad bactericida se debe fundamentalmente, a la
sobrecarga a la que es sometida la membrana celular de los microorganismos de
forma tal que la hace perder el control y la integridad, uno de los principales
mecanismos de accin propuestos para los terpenoides, que tambin contiene el
aceite esencial del chiri-chiri, consiste en la disrupcin de la membrana celular
bacteriana mediante tres posibles vas: aumentando la permeabilidad de la
membrana a iones pequeos, afectando la estabilidad estructural de la membrana
y desestabilizando el empaquetamiento de la bicapa lipdica, cualquiera de estos
efectos produce la muerte de la clula bacteriana (Goodman y Gilman. 1991).
Tanto la vancomicina como los aceites esenciales obtenidos de las plantas,
actan sobre la pared celular de la bacteria patgena, provocando su
inestabilidades y en algunos casos su lisis, debido a que esta es una estructura
vital para las bacterias pues la protege del medio externo, cualquier afeccin a
esta estructura puede provocar la muerte de la bacteria.
CONCLUSIONES
1. El aceite esencial del "chiri-chiri" (Grindelia boliviana) presenta efecto
bactericida sobre Staphylococcus aureus ATCC in vitro, a partir de la
concentracin de 5l/l con 5.740.45 mm de halo inhibitorio, el mayor
efecto bactericida se observ con la concentracin de 75l/l con
14.240.44 mm de halo de inhibicin.
2. La concentracin mnima inhibitoria (CMI) del aceite esencial del "chirichiri" (Grindelia boliviana) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro,
fue estimada en 1.12 l/l.
3. El antibitico vancomicina mostr un mayor efecto bactericida frente a
Staphylococcus aureus ATCC in vitro en comparacin al aceite esencial
de "chiri-chiri" (Grindelia boliviana) (P<0.01), con halo de inhibicin de
34.661.71 mm.
45
RECOMENDACIONES
Realizar estudios considerando otros mtodos de extraccin como extractos
acuosos y extractos metanlicos del "chiri-chiri" (Grindelia boliviana).
Realizar estudios con concentraciones de aceite esencial de chiri-chiri mayores
a las utilizadas (75l/l), y tambin cercanas a la concentracin mnima inhibitoria
(1.12 l/l).
Realizar pruebas in vivo en ratas de laboratorio, para evaluar el efecto
bactericida topical del aceite esencial de "chiri-chiri" (Grindelia boliviana) en
infecciones cutneas superficiales.
Realizar estudios sobre el efecto bactericida del aceite esencial del "chiri-chiri"
(Grindelia boliviana) frente a otras bacterias patgenas de los gneros
Streptococcus y Campylobacter.
46
BIBLIOGRAFA CITADA
Albado P, Saez F, Grabiel A. 2001. Composicin qumica y actividad

antibacteriana del aceite esencial del Origanum vulgare (organo), Rev
Med Hered 12 (1).
Alzamora L, Morales L. 2001. Medicina tradicional en el Per, actividad
antibacteriana in vitro de los aceites esenciales extrados de algunas
plantas aromticas. Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima
Per.
Arapa, F. 2013. Actividad antibacteriana del aceite esencial de ajenjo (Artemisia
absinthium l) frente a Escherichia coli enteropatgena (EPEC) in vitro,
Puno 2011. Tesis Facultad de Ciencias Biolgicas. UNA, Puno, Per.
vila, Z. 2001. Qumica Orgnica, experimentos con un enfoque ecolgico,
primera edicin. Mxico.
47
Benites, J.; Bravo, F.; Rojas, M.; Fuentes, R.; Moiteiro, C.; Florencia V. 2011.
Composition and antimicrobial screening of the essential oil from the leaves
and stems of Senecio atacamensis Phil. from Chile. Journal of the Chilean
Chemical Society 56(2): 712 714.
Bettin A, Suarez P, Bedoya A. 2003. Staphylococcus aureus en residentes de un
hogar de ancianos de Cartagena. Colombia, Universidad de Cartagena,
Facultad de Medicina. Pag. 650-657.
Bruneton, J. 2001. Farmacognosia y fotoqumica. Plantas Medicinales. Ed.
Zaragoza: Acribia S. A. Espaa.
Castro A. 200. Evaluacin de la actividad
in vitro
del aceite esencial de
Matricaria recutita (manzanilla), sobre cepas puras extradas de lesiones

bucofarngeas de Streptococcus pyogenes y Staphylococcus aureus.
Universidad Catlica Santa Mara, Facultad de Farmacia y Bioqumica,
Arequipa, Per.
Cotillo, P. 1990. Mtodos farmacolgicos en la investigacin de productos
vegetales. Primera Ed. Editorial Jarmad-UNMSM. Lima-Per Pg: 28.
Cruz-Carrillo, A; Rodrguez N; Rodrguez, C. 2010. Evaluacin in vitro del efecto
antibacteriano de los extractos de Bidens pilosa, Lantana camara, Schinus
molle y Silybum marianum. Revista U.D.C.A Actualidad y Divulgacin
Cientfica 13 (2): 117-124.
Flores, E., Velazco P, Figueroa N, Jimnez A. 1999. Aceites esenciales con
propiedades antimicrobianas. Revista BIOFARBO, rgano oficial del
colegio de Bioqumica y Farmacia de Bolivia.
Goodman, H; Gilman, V. 1991. Las Bases farmacolgicas de la teraputica.
Editorial Mdica Panamericana. Espaa.
Guerrero, I. 2001. Changing resistance in enteric pathogens. Jacksonville Med; 2:
1-3.
Howe RA, Brown NM, Spencer RC. 1996. The new threats of Gram positive
pathogens: re-emergence of things past. J Clin Pathol; 49:444-9.
48
Hurtado, M. y A, Brito. 2002.
Staphylococcus aureus: Revisin de los
mecanismos de patogenicidad y la fisiopatologa de la infeccin

estafiloccica. Rev Soc Ven Microbiol (Venezuela: Scielo) 22 (2): pp. 112118. ISSN 1315-2556.
Instituto Nacional de Laboratorios de Salud (INLASA). 2003. Manual de
procedimientos y control de calidad interno mtodo de Bahuer Kirby.
Ministerio de Salud y Deportes, La Paz, Bolivia.
Instituto Nacional de Salud. 2002. Manual de Procedimientos para la prueba de
sensibilidad Antimicrobiana por el mtodo de disco difusin, serie de
normas tcnicas N 30, 68 pag., Lima- Per.
Jawetz, Melnick y Adelberg. 2005. Microbiologa Mdica.18va Edicin. Editorial El
Manual Moderno S.A. de CV. Mxico DF. p. 250,252.
Kanafani ZA, Fowler VG. 2006. Staphylococcus aureus infections: new challenges
from an old pathogen. Enferm Infecc Microbiol Clin 2006; 24:182-93.
Katzung G. 2005. Farmacologa Bsica y Clnica. Novena Edicin. Editorial el
Manual Moderno, S.A. de C.V. Mxico, 2005. 1152 pag.
Mantilla, J. 1991. Estudio botnico para el cultivo del "chiri chiri" (AsteraceaeAstereae) Grindelia boliviana Rusby. Tesis Facultad de Ciencias Biolgicas,
UNSAAC. Cusco. pg. 2-8, 48-50.
Martnez, J; Sulbaran, B, Ojeda, G. 2003. Actividad antibacteriana del aceite
esencial de mandarina. Revista de la Facultad de agronoma vol. 20 n 4.
Colombia.
Martnez, M. 1994. Antimicrobial properties of Argentatine A. isolated from
Parthenium Fitoterapia. Volumen LXV N 4, Pg: 371.
Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. 2006. Microbiologa mdica. Elsevier Inc. 5ta
edicin. Espaa. 2006: 221-224.
Patrick, R; Murray; K; S. Rosenthal; Michael, A. Pfaller. 2009. Microbiologa
Mdica (6a edicin). Espaa: Elsevier-Mosby.
49
Pavlow, M. 1980. El gran libro de las Plantas Medicinales, Ed. Everest S.A.
Espaa.
Pineda, J. 2001. Determinacin de la cintica de extraccin de aceite esencial
chiri chiri (Grindelia boliviana) y salvia (Lepechenia meyenii). Tesis
Ingeniero Qumico. Facultad de Ingeniera Qumica, UNA, Puno.
Pino, J; Ortega A, Rosado A, Rodrguez M, Baluja J. 1997. Composicin y
propiedades antibacterianas del aceite esencial de Lippia alba (Mil) Brown.
Instituto de investigacin para la industria alimenticia, Revista cubana de
farmacia.
Primo, V; Rovera M; Oliva M., Demo M., Sabini L. 2002. Determinacin de la
actividad antibacteriana y antiviral del aceite esencial de Minthostachys
verticillata (Griseb). Epling. Universidad nacional de Rio Cuarto. Argentina.
Reyes, A;
Infantas, D. 2003. Actividad anti-inflamatoria de Grindelia boliviana
(chiri-chiri), en ratas. Anales cientficos. Universidad Agraria La Molina.

Per.
Schlessinger, L. 2009. Alergia a frmacos II: aspectos clnicos y estudio.
Medwave. Jun; 9(6):e3991 doi: 10.5867.
Tadeo, V. 2004. Mtodos de Separacin por Destilacin Qumica Analtica e
Instrumental. Universidad de Bogot, Colombia.
Tamariz, J; Cruz, J; Atencia, A; Figueroa, J; Horna, G; Guerra, A. 2009.
Resistencia a clindamicina inducida por eritromicina en Staphylococcus
aureus aislados de tres hospitales de Lima, Per. Acta md. Peruana v.26
n.1 Lima ene/mar.
Van Ginkel, A. 2003. Plantas Medicinales y Fitoterapia. Mdulo 2. Cultivo de
plantas medicinales. Tecnologa y Produccin. Apuntes del Mster y
Diplomatura de posgrado de la UAB.
Velzquez-Meza ME. 205. Surgimiento y diseminacin de Staphylococcus aureus
meticilino resistente. Salud Pblica Mx 2005; 47:381-7.
50
Vengoa I, Tagle G. 2000. Actividad antibacteriana in vitro de la Grindelia boliviana

rusby (chiri chiri) en cepas de Staphylococcus aureus. SITUA: Setiembre
1999 - Febrero, Ao 8 N 15.
Winkel-Shirley, B. 2001. It takes a garden. How work on diverse plant species has
contributed to an understanding of flavonoid metabolism. Plant Physiology
127: 1399-1404.
Ziad, D. 2000. Efecto de concentraciones subinhibitorias de antimicrobianos sobre
las interacciones Fibronectina - Staphylococcus aureus. Tesis para optar el
grado de Doctor. Espaa Universidad Complutense de Madrid facultad de
Farmacia Dpto. de Microbiologa; Pg.:150.
ANEXO 1
PROCEDIMIENTO SEGUIDO EN LA INVESTIGACION
Secado de plantas de Grindelia boliviana

Extraccin de aceite esencial por arrastre a vapor
Preparacin
discos conpor
aceite
esencial
Prueba
de efectodebactericida
difusin
en agar
Medicin de halos de inhibicin mostrando el efecto bactericida
51
ANEXO 2
ANALISIS ESTADISTICO
Anexo 2.1. Anlisis de varianza para efecto bactericida en halos de inhibicin (mm) del
aceite esencial del Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus
ATCC in vitro
F.V
Concentracione
G.L
S.C
C.M
Fc
Pr > F
s
Error
Total corregido
5
24
29
227.878
38.972
266.850
45.576
1.624
28.067
< 0.0001 **
** Diferencia altamente significativa (P<0.01)
Anexo 2.2. Anlisis de varianza de halos de inhibicin (mm) del aceite esencial del
Chiri-chiri (Grindelia boliviana R) y del antibitico vancomicina frente a Staphylococcus
aureus ATCC in vitro
F.V
Tratamientos
Error
Total
G.L
6
28
34
S.C
2884.352
97.324
2981.676
** Diferencia altamente significativa (P<0.01)
C.M
480.725
3.476
Fc
138.304
Pr > F
< 0.0001 **

Actividad Antibacteriana"in Vitro" Del Aceite Esencial Del Chiri-Chiri Grindelia Boliviana R., Frente A Staphylococcus Aureus Atcc

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Actividad Antibacteriana"in Vitro" Del Aceite Esencial Del Chiri-Chiri Grindelia Boliviana R., Frente A Staphylococcus Aureus Atcc

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1

Universidad Nacional del Altiplano

ACTIVIDAD ANTIBACTERIANAIN VITRO DEL ACEITE

JORGE GUEVARA RAMOS

PARA OPTAR EL TITULO DE:

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

ACTIVIDAD ANTIBACTERIANAIN VITRO DEL ACEITE ESENCIAL DEL

M.Sc. Dante Choquehuanca Panclas

M.Sc. Gilmar Goyzueta Camacho

M.g. Dante Mamani Sairitupac

M.g. Ciria Ivonne Trigos Rondn

A mis queridos padres Gino y

A mi Directora de tesis M.g. Ciria Ivonne Trigos Rondn, su constante

Al M.Sc. Dante Choquehuanca Panclas, sus consejos oportunos han sido

A la M.Sc. Gilmar Goyzueta Camacho, sus valiosas sugerencias han

Al M.g. Dante Mamani Sairitupac, sus consejos y exigencia han marcado el

Al Lic. en Biologa Miguel A. Lpez Ruelas, por su valioso apoyo en el

Principios activos de las plantas............................................................19

Figura 1. Plantas en flor de Grindelia boliviana R...................................................

encontrndose en los aceites esenciales de plantas medicinales y aromticas un

quinolonas (Schlessinger, 2009), por lo cual es de inters probar sustancias

(Grindelia boliviana R) frente a Staphylococcus aureus ATCC in vitro.

2. Determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI) del aceite

3. Comparar el efecto bactericida del aceite esencial de chiri-chiri

antibitico Vancomicina frente

Staphylococcus aureus ATCC in vitro.

antimicrobianas, realizado en el colegio de Farmacia y Bioqumica la Paz Bolivia,

virus Herpes simple tipo I (HSV-1) y el virus de la pseudorrabia (PrV). La accin

monocytogenes a todas las concentraciones excepto al 1%. La CMI del aceite

Staphylococcus aureus. La concentracin mnima bactericida fue de 6% para

aeruginosa, Salmonella tiphymurium, Salmonella choleraesuis y Vibrio cholerae y

Pseudomonas aeruginosa mostr resistencia. El aceite esencial posee actividad

significativa entre los grupos tratados. Se realiz una marcha fotoqumica

II.2.1. Taxonoma y caractersticas del Chiri-chiri (Grindelia boliviana Rusby)

kaempferol, alcanos hentriacontano, resina, cidos grindlico y oxigrindlico,

Figura 1. Plantas en flor de Grindelia boliviana R.

II.2.2. Compuestos qumicos presentes en el genero Grindelia

constituyentes de los revestimientos foliares que limitan las prdidas de agua en

isoflavonoides o el de los neoflavonoides, que por lo tanto tambin son derivados

dependiendo de las sustituciones presentadas en el esqueleto llegando incluso a

Propiedades anticancerosas: han demostrado ser tremendamente eficaces en

Disminucin del colesterol: poseen la capacidad de disminuir la concentracin

antiinflamatorias y analgsicas, se ha utilizado para el tratamiento de ciertas

Antimicrobianos: isoflavonoides, furanocumarinas y estilbenos han demostrado

Propiedades antioxidantes: En las plantas los flavonoides actan como

Los Poliacetilenos o Polinos son un grupo de compuestos orgnicos con

de especies pertenecientes a la familia compuesta han sido utilizados para el

a. Caractersticas Fsicas de los Aceites Esenciales

Su densidad es inferior a la del agua (la esencia de sasafrs o de clavo

No Terpenoides: En este grupo tenemos sustancias alifticas de cadena corta,

Terpenoides: Son los ms importantes en cuanto a propiedades y

Alcoholes (mentol, bisabolol) y fenoles (timol, carvacrol)

Aldehdos (geranial, citral) y cetonas (alcanfor, thuyona)

steres (acetato de bornilo, acetato de linalilo, salicilato de metilo,

teres (1,8 cineol) y perxidos (ascaridol)

Hidrocarburos (limoneno, y pineno) (Goodman y Gilman. 1991).

c. Obtencin de los Aceites Esenciales

hidrodestilacin y extraccin por arrastre con vapor. Actualmente los aceites

f) La pureza y el rendimiento del aceite esencial depender de la tcnica que se

sabor desagradable de muchos medicamentos (naranjas y menta, entre otros)

Quinonas. Terpenoides. Aceites esenciales; Iridoides; Lactonas;

Diterpenos; Saponinas (Van Ginkel, 2003).

catalasa y generalmente no son capsulados (Murray, 2006). Se agrupa en forma de