ATLAS DE HEMATOLOGA

Dr. Frank Weilbauer - Lcdo. Manuel Snchez - TM Pablo Posligua

Sociedad Ecuatoriana de Hematologa

ATLAS DE HEMATOLOGA
Dr. Frank Weilbauer - Lcdo. Manuel Snchez - TM Pablo Posligua

Sociedad Ecuatoriana de Hematologa

Atlas de Hematologa

Auspiciantes

Primera Edicin.
Sociedad Ecuatoriana de Hematologa.

Cooperacin Belga al Desarrollo :

Agencia Belga de Cooperacin al Desarrollo - (CTB) Ecuador - Dr. Willy
Demeyer, Representante Residente.
Ocina de Cooperacin de la Embajada de Blgica - Ecuador.
Ilustre Municipalidad de Esmeraldas (IME) - Sr. Ernesto Estupin
Quintero, Alcalde.
Programa Salud y Medio Ambiente Esmeraldas (SYMAE).
Dr. Gregorio Montalvo Director Nacional (IME).
Ing. Antoine Erout Codirector Internacional (CTB).

Autores
Dr. Frank Weilbauer, Lcdo. Manuel Snchez, TM Pablo Posligua.

Comit de redaccin
Lic. Manuel Snchez, (Programa SYMAE, Instituto Nacional de
Higiene y Medicina Tropical L.I.P. Esmeraldas).
Ing. Antoine Erout, (CTB).
Dra. Liliana Mora, (Programa SYMAE).
Dr. Gregorio Montalvo, (IME).

Fotografas

Diseo grco, diagramacin e impresin

El Chasqui Ediciones.
Valladolid N24-84 y Madrid.
02-290 4134
Quito - Ecuador.

Dr. Frank Weilbauer, TM Pablo Posligua.

Tiraje

Edicin

400 ejemplares.
ISBN -978-9978-92-770-0

Ing. Antoine Erout, Lcdo. Manuel Snchez, Dra. Liliana Mora.

El contenido del presente Atlas, es responsabilidad exclusiva del Dr. Frank

Weilbauer, Lcdo. Manuel Snchez y el TM Pablo Posligua, en ningn
caso reeja la opinin de las instituciones auspiciantes.
Ecuador, noviembre de 2009.

NDICE DE CONTENIDO
ATLAS DE HEMATOLOGA
PRLOGO
INTRODUCCIN

I
II

TOMA DE MUESTRAS
Criterios tcnicos
Procedimiento tcnico para toma de muestras
Recomendaciones para evitar las causas de hemlisis

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14
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TUBOS DE EXTRACCIN
Tubo con activador del cogulo
Tubo con EDTA
Tubo para Productos de degradacin de la fibrina (PDF)
Tubo con citrato

16
16
16
16
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EXTRACCIN EN SITUACIONES ESPECIALES

Puncin cutnea
Aspectos que deben considerarse en una puncin cutnea

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18
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TCNICAS DE LABORATORIO
Extendido de sangre o frotis
Procedimiento tcnico para realizar un frotis
Procedimiento tcnico para realizar la coloracin de Wright
Secuencia para tincin con colorante de Wright
Procedimiento tcnico para analizar un frotis
Tcnica de lectura del frotis

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ANTICOAGULANTES

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EDTA

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HEPARINA

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HEMATOCRITO
Mtodos
Condiciones de la muestra
Condiciones del paciente
Interferencias y limitaciones

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25
25
25
25

PRUEBAS DE COAGULACIN
Interferencias y limitaciones

25
25

ASPECTOS PREANALTICOS
Solicitud de examen

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26

RECEPCIN Y CONTROL DE MUESTRAS

Incidencias preanalticas
Incidencias que impiden el procesamiento de la muestra
Otras incidencias

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27

CONTADORES HEMATOLGICOS
Causas de error del recuento celular sanguneo

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28

NDICE DE FIGURAS
MORFOLOGA NORMAL
Fig. 1: Morfologa normal

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30

Fig. 17: Un neutrlo picntico en una anemia

megaloblstica, macrocitosis, clulas en raqueta.

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ANEMIAS FERROPNICAS

30

ANEMIAS HEMOLTICAS

35

Fig. 2: Hipocroma, microcitosis, ovalocitos.

Fig. 3: Eritrocitos en diana y esferocitos
Fig. 4: Hipocroma con doble poblacin, normocrmica e
hipocrmica.
Fig. 5: Hipocroma marcada.
Fig. 6: Hipocroma por ferropenia; punteado baslo.
Fig. 7: Hipocroma marcada.
Fig. 8: Hipocroma marcada.
Fig. 9: Hipocroma y algunos eritrocitos en diana talasemia.
Fig. 10: Hipocroma por ferropenia.

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30
30

ANEMIAS MEGALOBLSTICAS

33

Fig. 11: Anemia megaloblstica: aniso-macrocitosis ; se ve

un corpsculo de Howell-Jolly ; un eritrocito en diana .
Fig. 12: Aniso-macrocitosis, corpsculo de Howell-Jolly,
microcito.
Fig. 13: Eritroblastos megaloblsticos: grandes, con poca
maduracin del citoplasma, ncleos inmaduros.
Fig. 14: Macrocitosis,eritroblastos : anemia megaloblstica
(deciencia de vitamina B12 o de cido flico).
Fig. 15: Un campo de anemia megaloblstica: dos
neutrlos hipersegmentados.
Fig. 16: Un neutrlo hipersegmentado en una anemia
megaloblstica; macrocitosis.

33

Fig. 18: Abundantes clulas falciformes, en el centro

un eritrocito en diana.
Fig. 19: Anisocitosis, algunas plaquetas gigantes
Fig. 20: Varias clulas falciformes (drepanocticas) y
muchas diana: hemoglobinopata SC.
Fig. 21: Esferocitosis, eritroblasto basoflico,
policromatolia.
Fig. 22: Eliptocitosis hereditaria
Fig. 23: Eritrocitos falciformes en suspensin, con
metabisulto de sodio.
Fig. 24: Prueba de metabisulto positiva para clulas
falciformes, suspensin en solucin salina.
Fig. 25: Eritrocitos traumatizados (esquistocitos),
anemia hemoltica microangioptica.
Fig. 26: Esferocitosis: macrocitos policromatoflicos,
tres eritroblastos
Fig. 27: Muchos eritrocitos diana, falciformes
hemoglobina SC.
Fig. 28: Hemoglobinopata SC.
Fig. 29: Otro ejemplo de microangiopata, escasas
plaquetas, clulas en casco.
Fig. 30: Punteado baslo, como se ve en la intoxicacin
por plomo.
Fig. 31: Reticulocitos (tincin con azul cresil brillante)
Fig. 32: Glbulos rojos crenados, artefacto en la
elaboracin del frotis
Fig. 33: Reticulocitos

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SERIE GRANULOCTICA

39

OTROS

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Fig. 34: Abundancia de elementos granulocticos semimaduros,

pero con evidencia de maduracin. Leucemia mieloide crnica.
Fig. 35: Blastos mieloides con ncleos monocitoides:
leucemia mieloide aguda.
Fig. 36: Granulocitos medulares, se pueden ver todas
las etapas de maduracin.
Fig. 37: Leucemia mieloide crnica:
Fig. 38: Mieloblastos, aqu sin granulaciones citoplasmticas.
Fig. 39: Mieloblastos, en el izquierdo un bastn de Auer.
Fig. 40: Mielobrosis
Fig. 41: Granulocitos: una familia completa.
Fig. 42: Serie granuloctica, leucemia mieloide crnica
Fig. 43: Un campo de un aspirado medular normal.
Fig. 44: Monocito
Fig. 45: Monocito

39

Fig. 46: Megacariocito productor de plaquetas.

Fig. 47: Presencia de glbulos rojos espinosos o crenados
Fig. 48: Trombocitosis con hipocroma: probable sangrado.
Fig. 49: Un grupo de eritroblastos
Fig. 50: Un linfocito peludo: presencia de nuclolo y de
bordes citoplasmticos irregulares.
Fig. 51: Un linfocito maduro, con condensaciones cromatnicas.
Fig. 52: Una familia eritroide, con una clula en mitosis.
Fig. 53: Otro linfocito peludo grande.
Fig. 54: Plasmocito normal y rouleaux.
Fig. 55: Plasmoblastos en mdula sea.
Fig. 56: Plasmocitos de mieloma mltiple en sangre perifrica.

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GLOSARIO

46

ABREVIATURAS

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BIBLIOGRAFA

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PRLOGO

He tenido el honor y agradable encargo de escribir el prlogo a este pequeo pero muy til Atlas sobre las
tcnicas y sobre todo cuidados a tener en cuenta cuando se realiza un examen bsico en Hematologa.
Este trabajo de revisin y coleccin de fotografas nos hace recordar que en el Laboratorio Clnico y otras
ramas paramdicas, las preparaciones a ser observadas deben tener como valor el ser hechas bien y eso
significa el conocimiento que se tenga sobre el tema y sobre todo la paciencia y el esmero que se ponga para
ser realizadas.
Este trabajo realizado por el Dr. Frank Weilbauer y sus colaboradores llenar sin duda, la bibliografa
que sobre el tema existe.
Por su claridad, por sus bellas fotografas este texto tendra que estar como una ayuda muy valiosa en el
diagnstico morfolgico de algunas entidades dentro de la patologa hemtica.
Felicito a Franco, (como yo le trato) por haber puesto sobre mi escritorio y sobre muchos escritorios y
mesas de trabajo tan interesante revisin, quedndonos a todos solo el ir a este texto cuantas veces lo
necesitemos.

Dr. Hernn Noboa

Patlogo Clnico
Miembro de la Sociedad Ecuatoriana de Hematologa

II

INTRODUCCIN
En medicina se emplea el concepto normal para describir los hallazgos que se observa en los individuos
sanos. Por ello, es sorprendente y perturbador que en los laboratorios clnicos, incluso utilizando tcnicas
idnticas, se obtengan en parte valores muy divergentes.
La hematologa es una especialidad mdica que tiene una gran dependencia de los mtodos de laboratorio
en general y de las tcnicas citolgicas en particular, recordemos que esta ltima resuelve la problemtica
diagnstica en un 80% de las hemopatas.
Para realizar un correcto anlisis hematolgico, la sangre tiene que seguir conservando sus caractersticas
fisicoqumicas para que no existan alteraciones o artefactos en la muestra extrada y que pudieran dar
lugar a resultados errneos.
Un porcentaje de esas discrepancias se debe al distinto esmero con el cual se llevan a cabo los procesos para
realizar las determinaciones. Y nos encontramos que en la cadena de elaboracin de un determinado
anlisis, existen puntos crticos en los que debemos ser exigentes con nosotros mismos.
El primer eslabn del proceso es la toma y recogida de la muestra. Todo el intento para evitar errores
preanalticos dar como resultado fiabilidad, calidad y por supuesto anlisis e interpretacin.
El propsito del presente Atlas es proporcionar informacin visual, prctica y til a los profesionales de
la salud y particularmente a los laboratorios clnicos sobre los principales procedimientos que se realizan
en un laboratorio de hematologa. El documento proporciona informacin y establece normas para la
obtencin de muestras, y da criterios claros y concisos para la aceptacin de las mismas y la solicitud de
los anlisis.
El objetivo final es mejorar la calidad de los estudios hematolgicos y satisfacer los requerimientos de los
mdicos y pacientes.

14

TOMA DE MUESTRAS
La toma de muestras es el acto en el que se obtiene una cantidad de sangre
que se requiere para los estudios hematolgicos.
Las muestras que se pueden requerir son venosa o capilar, de mdula sea
o de lquido cfalo raqudeo (L.C.R.). La sangre venosa es la muestra
hematolgica por excelencia, por la riqueza de datos que aporta y su
relativa facilidad para obtenerla.

CRITERIOS TCNICOS
Es recomendable que la toma de muestra de sangre se realice mediante un
sistema al vaco ya que presta las siguientes seguridades:
Aporta a la seguridad para el profesional de salud con el n de evitar la
exposicin accidental por inoculacin.
Evita dos de los errores preanalticos ms frecuentes:
La hemlisis de las clulas.
El incorrecto llenado del tubo (error crtico para las muestras de los
estudios de coagulacin).

Procedimiento tcnico para toma de muestras

Identicar SIEMPRE al paciente antes de realizar la toma de muestra.
Identicar la solicitud y las muestras con el mismo cdigo, extremar las
precauciones en este paso porque un error aqu es, normalmente
indetectable en la fase analtica, y si se detecta, conlleva la anulacin de
toda la serie analtica.

Colocar el torniquete entre 7 a 10 cm por encima del lugar elegido para

la venopuncin.

15
Recomendaciones para evitar las causas de hemlisis
Soltarlo inmediatamente despus de canalizar la vena. Nunca debe estar
colocado ms de dos minutos, altera el equilibrio entre el lquido y los
elementos formes de la sangre (aumento del 10% en el hematocrito y el
15% en el tiempo de coagulacin).
Realizar una puncin lo menos traumtica posible, sobre todo si incluye
estudio de coagulacin, mientras ms limpio (una sola puncin sin
bsqueda de la vena) sea el procedimiento menos factores tisulares se
liberarn.

El uso de jeringa y aguja para la extraccin multiplica el riesgo de

hemolizar las muestras.
No tirar con excesiva fuerza del mbolo de la jeringa.
No usar llave de tres vas, no forzar el paso de sangre por la aguja.
No llenar el tubo sin dejar deslizar la sangre por la pared interna del
mismo.
No extraer sangre de un hematoma.
No agitar los tubos de extraccin con fuerza, en lugar de invertirlos
suavemente, para mezclar la muestra con el anticoagulante.
Si se usa jeringa y aguja para realizar la extraccin, hay que recordar:
No destapar NUNCA los tubos, ya que al volver a cerrarlos puede
producirse un exceso de presin dentro y hacer que salte el tapn durante
el transporte.
Respetar el volumen de llenado de cada tubo, y en especial el de
coagulacin.
Llenar los tubos dejando deslizar la sangre por la cara interna de los
mismos, no dejarla caer directamente al fondo, ni forzar el paso de la
sangre por la aguja.
Respetar el orden de extraccin de los tubos: esto variar en funcin del
sistema utilizado para realizar la extraccin.

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TUBOS DE EXTRACCIN

Tubo con EDTA

Existen diferentes tubos para recoger la sangre para el anlisis, dependiendo

del tipo de determinacin a realizar se emplean tubos con distintos
anticoagulantes; para diferenciarlos a simple vista se emplea un cdigo de
colores regulado por la norma ISO 6710.

Se utiliza para el estudio cuantitativo y cualitativo de las clulas

sanguneas, tanto para su recuento y estudio de su morfologa
(hemograma), como para el estudio inmunohematolgico (grupos
sanguneos, pruebas de compatibilidad etc.). El EDTA K3 es una sal
tripotsica del cido etilen-diamino-tetractico, un anticoagulante con
un efecto quelante sobre el calcio. Se identica con un tapn color lila.

Tubo con activador del cogulo

Se usa para el estudio de determinaciones en suero, este tipo de tubo no
lleva ningn anticoagulante, por el contrario su pared interna est
recubierta con una sustancia activadora del cogulo que facilita y acelera
el proceso de retraccin del cogulo. En el fondo del tubo hay un gel
separador que al centrifugar se interpone entre el suero y el cogulo
separndolos denitivamente e impidiendo su homogenizacin
posterior. Su volumen de llenado es de 5 o 7 ml.
Este tubo se utiliza preferentemente en el rea de hematologa biolgica
para el estudio de anemias, aunque tambin se utiliza para pruebas
complementarias de estudio de coagulacin especial y algunas
especcas del Banco de Sangre. Se identica con un tapn color rojo.

Tubo para productos de degradacin de la brina (PDF)

Se utiliza nicamente para el estudio de los productos de degradacin de
la brina (PDF). Contiene un inhibidor de tripsina de soya y veneno de
Bothrops atrox para la recogida de 2 ml. de sangre, estos aditivos provocan
la formacin de un cogulo de forma rpida, incluso en presencia de
heparina. Es habitual la presencia de hemlisis en el suero que no afecta
al ensayo. Esta determinacin pertenece al rea de coagulacin y
hemostasia. Se identica con un tapn color azul marino.

17
especimen aumentando la relacin citrato-plasma; este citrato extra en
el plasma, forma complejos con el calcio agregado durante la medicin
de estas determinaciones elevando ambos tiempos. Este problema se
corrige aadiendo dos gotas (50 a 100ul.) de cloruro de calcio (Cl Ca2)
tanto al TP como al TTPa.
Una vez centrifugado el tubo con la muestra de sangre, obtenemos
plasma que es la muestra usada para las determinaciones de coagulacin.
(El plasma se diferencia del suero ambos obtenidos tras la centrifugacin
de la sangre- en su riqueza en factores de coagulacin). Se identica con
un tapn color celeste.

Tubo con citrato

El citrato sdico es el anticoagulante para realizar los estudios de
coagulacin. Su accin anticoagulante se basa en la precipitacin de los
iones de calcio; se usa en forma acuosa de citrato trisdico 0.106M
(C6H5O7Na3-2H2O) tamponado para estabilizar el pH del plasma.
La caracterstica primordial de este tubo es que el volumen de
anticoagulante que contiene est preparado para un volumen
determinado de sangre. La relacin volumen de citrato sdico / plasma
tiene que ser 1:9, una parte de citrato por nueve de plasma. Cuando no
se llena el tubo correctamente se modica esta proporcin y esto aumenta
el tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPa) y del tiempo de
protrombina (TP), especialmente s la relacin aumenta a 1:7. Tambin
cuando el valor del hematocrito supera el 55% se alteran los valores del
TP y del TTPa debido a que se reduce el volumen de plasma en el

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EXTRACCIN EN SITUACIONES
ESPECIALES
Evtese la extraccin de sangre del brazo donde el paciente tenga
colocada una va de perfusin, la muestra obtenida estar diluida. Si no
hubiera otra opcin (vas en ambos brazos por ejemplo), y siempre que
sea posible, cierre la perfusin y espere al menos dos minutos para
realizar la extraccin.
La extraccin de sangre de un catter debe asegurar que, ni la solucin
perfundida, ni el uso de heparina, van a interferir en el resultado del
anlisis.
Siempre debe desecharse un volumen de al menos dos o tres veces el de
la luz del catter, si la extraccin es para un estudio de coagulacin no
debe usarse este mtodo si no es en el momento de la implantacin de
la va.
La obtencin de sangre arterial para realizar estudios hematolgicos no
est aconsejada. En cualquier caso tenga en cuenta que las jeringas de
extraccin arterial estn heparinizadas, por lo que no pueden usarse
para la extraccin de un estudio de coagulacin.
No obstante, en la prctica diaria se dan situaciones en las que no es
posible usar otra opcin que las descritas en los puntos anteriores, en

estos casos debe el laboratorio tomar en cuenta las caractersticas de

la extraccin y de la imposibilidad de realizarla de otra forma.

Puncin cutnea
La mal denominada sangre capilar es la obtenida mediante puncin
cutnea. En realidad es una mezcla de sangre procedente de arteriolas,
vnulas y capilares con lquidos intersticiales e intracelulares; su
composicin depende fundamentalmente de la cantidad de ujo
sanguneo en la zona de puncin y de la profundidad de penetracin de
la lanceta.
En el anlisis hematolgico este tipo de muestra se usa para las
determinaciones del hematocrito capilar. Es muy til en nios para
realizar la biometra sin puncin venosa.
En adultos, la zona de puncin ideal es el lateral de los dedos de la mano
y el antebrazo para la tcnica del Ivy (corte).
En RN se usa tambin la supercie plantar externa o interna del taln
(sin superar los 2,4 mm de profundidad).

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Aspectos que deben considerarse en una puncin cutnea:
Una vez desinfectada la zona de puncin debe dejarse secar el antisptico
usado, para que no interera en el anlisis posterior de la muestra y,
para que haya un mejor ujo de las gotas.

Utilizar siempre lancetas para realizar esta tcnica. El uso de agujas

hipodrmicas o I.V. est totalmente desaconsejado. (Una de las primeras
causas de pinchazos accidentales).

Desechar la primera gota que uye; est contaminada de factores y

lquidos tisulares.
Si las gotas no uyen libremente aplicar una ligera presin sobre la zona,
no se debe exprimir ni forzar el ujo, esto puede hemolizar la muestra
o incrementar la proporcin de uidos intersticiales en ella.
El precalentamiento de la zona de puncin puede favorecer su
vascularizacin.

20

TCNICAS DE LABORATORIO
EXTENDIDO DE SANGRE O FROTIS
Este debe ser realizado en un portaobjeto limpio (placa) y de una muestra
de sangre sin anticoagulante; en caso de no haber podido hacerlo, es
aceptable que se haga de una muestra de sangre fresca con EDTA; muestras
con otros anticoagulantes como heparina no se debe emplear porque al
colorear las clulas dieren de las coloreadas con EDTA.

Procedimiento tcnico para realizar un frotis

1. Usar un portaobjeto limpio de polvo y grasa, sobre todo esta ltima,
para evitar la grasa en el portaobjeto estos deben ser lavados con un
detergente desengrasante, sumergidos en etanol y nalmente
secados.

2. Los portaobjetos ideales deberan tener un extremo opaco, esta rea al

extremo del portaobjeto se utilizar para identicar la muestra.

3. Seleccionar una placa para hacer el extendido, esta deber tener sus

bordes ntegros, es decir sin irregularidades, para distribuir la gota de

sangre de manera uniforme. Esta placa seleccionada podr ser utilizada
muchas veces, hay que tener la precaucin de limpiar el extremo que
estuvo en contacto con la gota de sangre cada vez que se ha utilizado.

4. Poner una gota de sangre a un centmetro del borde nal y en la mitad

del portaobjeto, acercar la placa de extendido en un ngulo de 30 en

relacin al portaobjeto, hacer contacto con la gota de sangre, esperar
unos segundos hasta que la gota de sangre est completa y
uniformemente distribuida en el borde del portaobjeto de
extendido.

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5. Desplazar en un solo movimiento la placa de extendido, ms o menos

3 cm. a lo largo del portaobjetos que contendr el frotis, tener la

precaucin de que el extendido termine 1 centmetro antes del nal
del portaobjeto.

7. En muestras de sangre con anemia, que son ms diluidas, es necesario

ampliar el ngulo de la placa de extendido sobre el portaobjeto del

frotis. En los casos contrarios como poliglobulia el ngulo se debe
disminuir.

8. El frotis ideal es aquel en que los glbulos rojos no estn superpuestos

en muchos campos de lectura del frotis. Tambin los leucocitos deben

ser fcilmente identicados en el frotis. Un extendido inadecuado es
cuando el frotis se ha realizado en un portaobjetos con mucho polvo
o grasa o el extendido no est hecho de un solo movimiento.

6. El grosor del extendido puede ser regulado variando la presin, la

velocidad y el ngulo con que la placa de extendido se desliza sobre el
portaobjeto del frotis.

Procedimiento tcnico para realizar la coloracin de Wright

1. Diluir 2.5 gr. de polvo de Wright en un litro de metanol absoluto,
mezclar por agitacin y dejar madurar al ambiente por una semana.

2. Cubrir el frotis con la solucin anterior por 2 a 3 minutos.

3. Aumentar 8 a 10 gotas de buer de fosfatos con un pH de 6.7 o agua

destilada, soplar para que las dos soluciones se mezclen, incubar por 4 a
6 minutos. Los tiempos deben ajustarse en relacin a cada laboratorio.

4. Lavar con agua corriente por 1 o 2 minutos.

5. Limpiar la parte posterior del portaobjeto.
6. Secar el frotis al aire.

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Secuencia para tincin con colorante de Wright

1. Colorante Wrigth.

2. Aplicacin de buer de fosfato.

3. Periodo de incubacin.

4. Lavado con agua corriente.

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Procedimiento tcnico para analizar un frotis
1. El examen comienza con una observacin macroscpica del frotis,
para pasar luego a un lente de bajo poder 10X, 40X y 100X
progresivamente. El uso del lente de inmersin requiere una gota de
aceite mineral.

2. La primera observacin, macroscpica debe darnos una impresin

sobre la coloracin y si el frotis fue realizado con buena tcnica,
pueden observarse anormalidades.

3. La segunda observacin con lentes de 10X o 40X nos permitir

observar si hay una buena distribucin de clulas, glbulos rojos,

blancos y plaquetas, si hay una mala distribucin o agregados que nos
daran una impresin errnea al hacer el contaje.

5. Limpieza parte posterior del portaobjetos.

4. La observacin con el lente de 100X nos permite identicar el tipo de

clula, sus caractersticas fsicas, tamao celular, relacin ncleo

citoplasma, tamao del ncleo y nucleolos, entre otras. La coloracin
nos evidencia la madurez de la clula porque nos permite ver la
coloracin que toma la cromatina del ncleo, los nucleolos si estuvieran
presentes, el color del citoplasma y la presencia de grnulos de acuerdo
al tipo de clula o por aspectos patolgicos.

Tcnica de lectura del frotis

1. Iniciar la observacin en un punto del frotis donde la distribucin
celular sea uniforme y continuar en el mismo sentido de derecha o
izquierda o viceversa de acuerdo a la disposicin del frotis.

6. Secado del frotis.

24
2. Una segunda forma sera, siempre iniciando en el rea de mejor
distribucin celular, recorrerla siguiendo pequeos cuadrados
continuos segn esquema, sin repetir el sitio observado hasta
completar el contaje de 100 clulas.

HEPARINA
No es el anticoagulante de eleccin en hematologa. Se utiliza a una
concentracin de 0.2 ml. de heparina saturada por cada 1 ml. de sangre.
Las alteraciones que se producen son:
Degeneracin nuclear de los neutrlos.
No es apta para estudios de inmunohematologa y test de Coombs.
No se utiliza para las tinciones citoqumicas.

3. Una vez terminado el contaje diferencial reportar de acuerdo al % de

clulas observadas. Y ms detalles que llamen la atencin.

ANTICOAGULANTES
La primera premisa a respetar para realizar un anlisis hemocitolgico es
que la sangre obtenida y transferida a un tubo con anticoagulante no tenga
cogulo. La segunda premisa es conservar siempre la proporcin entre
sangre y anticoagulante.

HEMATOCRITO
El hematocrito mide la concentracin de glbulos rojos en sangre
anticoagulada, representa el porcentaje del volumen total de sangre
ocupada por los glbulos rojos.
Ayuda al diagnstico de anemia y policitemia y es necesario para calcular
ndices sanguneos.

EDTA

El hematocrito mide el porcentaje de las clulas sanguneas rojas en el

volumen total de la sangre.

Es el anticoagulante de eleccin para hematologa, se utiliza a una

concentracin 1 mg. por 1 ml. de sangre o 0.5 ml. de solucin al 1 % para
5 ml de sangre, o 0.1 ml. de solucin al 1% para 1 ml. de sangre.

Se encuentran niveles aumentados en enfermedad cardiaca congnita,

policitemia vera y la deshidratacin.

Una excesiva concentracin del anticoagulante hace que se alteren las

clulas sanguneas.

Pueden verse niveles disminuidos en anemia, hipertiroidismo, cirrosis,

reaccin hemoltica, hemorragia, insuciencia de mdula sea,
embarazo normal, mieloma mltiple, leucemias, desnutricin, entre
otros.

Tambin es el anticoagulante de eleccin para Test de Coombs y para

realizar tinciones citoqumicas.

25
Mtodos
Micro mtodo manual donde los glbulos rojos son empaquetados por
centrifugacin.
Mtodo automatizado que clasica electrnicamente por tamao los
glbulos rojos, mide la hemoglobina y calcula el hematocrito.
El mtodo de Wintrobe (macro mtodo), por centrifugacin en tubos
especiales por 30 minutos, despus de medir la sedimentacin.

Condiciones de la muestra
Sangre total con anticoagulante EDTA o sangre capilar
(tubo borde rojo). La muestra es estable a temperatura ambiente entre 18
y 25C por 4 horas.

Condiciones del paciente

No requiere ninguna condicin especial.

Estos valores son en 3% superior a los obtenidos a nivel del mar.

No son ables los valores inmediatamente despus de una hemorragia.

PRUEBAS DE COAGULACIN
El citrato sdico al 3.8% es el anticoagulante de eleccin para los estudios
de coagulacin. Se utiliza a una concentracin de un parte de citrato
sdico 0.11 M por nueve partes de sangre total. Es totalmente necesario e
imprescindible mantener la relacin anticoagulante/ sangre para realizar
las pruebas de coagulacin, los valores obtenidos sin esta relacin no
tienen ningn valor diagnstico.
Ejemplo:
Para conseguir un volumen total de muestra de 3ml, se deben poner en la
jeringa 0,3 ml. de citrato y extraer 2,7 ml. de sangre (0,3 x 9).
Una vez obtenida la muestra:

Interferencias y limitaciones

Se centrifuga la muestra entre 2500-3500 rpm durante 15 minutos.

Alteraciones en el tamao de los hemates pueden modicar el valor del

hematocrito.

Separar el plasma a un tubo plstico dentro de los 30 primeros minutos

post extraccin, y refrigerarlo hasta la realizacin de la prueba.

En el embarazo suelen reducirse ligeramente los valores por la

hemodilucin.

Interferencias y limitaciones

La residencia a gran altura aumenta los valores. En la zona interandina

del Ecuador es normal un hematocrito en hombres de 48 % +/- 3%
(1DS) y en mujeres del 45% +/-3% (1DS).

La congelacin o descongelacin pueden producir la crioprecipitacin

de algunos factores de coagulacin.

26

ASPECTOS PREANALITCOS
SOLICITUD DE EXAMEN

RECEPCIN Y CONTROL DE MUESTRAS

Cualquier peticin realizada debe contener un mnimo de informacin

(legible) que permita una identicacin inequvoca del paciente, de su
ubicacin, del destino del informe de los resultados (si no es el mismo de
su ubicacin), de la persona responsable de la peticin y de las
determinaciones requeridas.

La calidad de las muestras es absolutamente importante para obtener

resultados en relacin a la situacin clnica del paciente.

Adems una peticin debe contener informacin sobre la situacin clnica

del paciente, o sobre aquellos aspectos preanalticos que el personal
responsable de realizar la extraccin pueda considerar como relevante
para la fase analtica.

Comprobacin de la identicacin de la solicitud de examen y de la/s

muestra/s y de la concordancia entre ellas.

El laboratorio recibir la muestra, previa constatacin de los siguientes

parmetros:

Comprobacin de los datos de la solicitud.

Comprobacin de la idoneidad de la muestra:
Volumen.
Aspecto.
Tipo.
Identicacin (nuevamente).
Comprobacin de las condiciones de transporte y conservacin de las
muestras.
Cualquier anomala detectada ser registrada e informada como
incidencia preanaltica.

Incidencias preanalticas
Las incidencias preanalticas en el laboratorio de hematologa se clasican en:
Las que impiden el procesamiento de la muestra de acuerdo a la solicitud
de examen.

27
Las que originan una anotacin u observacin en el informe de resultados.
Las que originan la devolucin de la solicitud de examen y/o muestras
al peticionario.

Incidencias que impiden el procesamiento de la muestra

Muestra y solicitud de examen con datos no coincidentes, impide
siempre el procesamiento de dicha muestra, en el caso de ser una
solicitud de transfusin, de anticoagulacin oral, o una muestra invasiva
procede su devolucin.
Muestra extradas en tubo de citrato (tapn celeste) con un volumen
incorrecto.

Muestra extrada en tubo incorrecto no puede ser procesada; en el caso

de ser una peticin de transfusin u hoja de consulta de anticoagulacin
oral procede su devolucin inmediata.
Muestra mal identicada o sin identicar.
Solicitud de examen sin muestra. En el caso de ser una hoja de consulta
de anticoagulacin oral o transfusin procede su devolucin.

Otras incidencias:
Muestra insuciente, impide el procesamiento de algunas de las
determinaciones solicitadas al agotarse la muestra.

Muestra coagulada, extrada en tubo de citrato (tapn celeste) o en tubo

con EDTA (tapn lila).

Muestra estropeada en el laboratorio. Cuando en el propio laboratorio

se rompe un tubo de extraccin, se derrama o se invalida
accidentalmente.

Muestra hemolizada (plasma) extrada en tubo de citrato (tapn

celeste), o de suero extrado en tubo de tapa roja.

Muestra mal transportada. Cuando se detecte alguna incidencia

producida por un transporte incorrecto o deciente al laboratorio.

Muestra lipmica (plasma) extrada en tubo de citrato (tapn celeste).

28

CONTADORES HEMATOLGICOS
La automatizacin ha contribuido
en la rapidez y abilidad del
recuento de las clulas sanguneas
(leucocitos, eritrocitos y plaquetas),
esto ha sido posible gracias al
desarrollo alcanzado en los
procedimientos destinados para
estos anlisis.
Pero la utilizacin diaria de los
estndares y un adecuado
mantenimiento harn de este
instrumento un verdadero apoyo
tanto al laboratorio cuanto al
paciente.

Dilucin o hemoconcentracin.
Coagulacin parcial.
Lisis celular (hemlisis).
Alteracin del lquido diluyente (uso de diluyente incorrecto).
Presencia de partculas extraas en el lquido diluyente.
Agitacin incorrecta del espcimen.
Defectos del sistema electrnico de recuento.
Lisis incompleta de eritrocitos en el canal de leucocitos.
Presencia de agregados celulares a nivel del oricio de recuento.
Obstruccin de los capilares u oricio de recuento.

Varios mtodos se han implementado para que los recuentos hematolgicos

sean ms ecientes.

Dilucin incorrecta de la muestra por el lquido diluyente.

CAUSAS DE ERROR DEL RECUENTO CELULAR

SANGUNEO.

Contaminacin por arrastre de un espcimen con el siguiente.

Al igual que sucede con el recuento en cmara cuenta glbulos el

mtodo electrnico puede verse sometido a grandes errores si se olvida
el control peridico y el calibrado diario de los instrumentos. En general
el error debido a propio mtodo de recuento electrnico, cuando este
se realiza en ptimas condiciones, suele ser inferior al 1%, pero puede
incrementarse notablemente por las siguientes causas:
Errores de extraccin sangunea o manipulacin de la muestra.

Presencia de microburbujas, que son contadas como clulas.

Presencia de interferencias electrnicas y averas de los componentes

electrnicos del instrumento.
Desajustes electrnicos del autoanalizador.
Desajustes de la calibracin del equipo.
Alteraciones del plasma (interferencias):
Paraproteinas, crioglobulinas, mucinas, hemoglobinas inestables,

29
hiperlipidemias, hiperbrinogenemia, heparina, hiperglicemia,
leucocitosis, trombocitosis, eritroblastos, megatrombocitos, agregados
plaquetarios (seudotrombocitopenia).
Defectos por lisis eritrocitaria:
Uremia (Linfocitos e inversin de la frmula leucocitaria).
Neonatos con hemoglobinopatas (HbS, dianocitos).
Gammapatias monoclonales (mieloma ).
Crioglobulinemia(VCM ).
En la actualidad, debido al uso generalizado de autoanalizadores, es
frecuente observar falsas trombocitosis o trombocitopenias debidas a
artefactos. Las principales causas de estos errores son:
Falsas trombocitosis.
Hemlisis con fragmentacin eritrocitaria (esquisocitosis).
Microcitosis extrema (VCM <50fL).
Hemoglobinopata.
Fragmentacin leucocitaria (leucemia linfoide crnica, sndrome
linfoproliferativo crnico con leucocitosis).
Paludismo.
Crioglobulinemia.
Bacteremia.

Falsas trombocitopenias.
Coagulacin parcial del espcimen (microcoagulos).
Plaquetas gigantes (megatrombocitos).
Satelitismo plaquetario.
Agregacin espontnea de las plaquetas por el EDTA.
Por todo esto siempre que existan dudas sobre la veracidad del recuento
electrnico de plaquetas debe realizarse un examen de la extensin
sangunea para efectuar la correspondiente comprobacin. En condiciones
normales las plaquetas suelen agregarse sobre el portaobjetos, formando
cmulos visibles siempre que la muestra se haya recogido sin
anticoagulante.
Cuando se emplea sangre con EDTA es necesario para el recuento
electrnico, y por causas desconocidas, se producen agregados de plaquetas
que constituyen una causa frecuente de seudotrombocitopenia. En estos
casos se debe realizar el recuento manual en cmara a partir de sangre
diluida en oxalato de amonio al 1%, y una observacin morfolgica de la
extensin de la sangre (apreciacin semicuantitativa), utilizar pipeta de
glbulos rojos y llenar con sangre hasta la marca 1 y el resto con oxalato.
Agitar por 2 a 3 minutos y cargar la cmara de Neubauer pero que sea
plana y proceder al contaje como si fuera a contar glbulos rojos. En los
cinco cuadraditos del cuadrado central, utilice lente de 40X.

30

MORFOLOGA NORMAL

Fig. 2: Hipocroma, (1) microcitosis, (2) ovalocito, (3).

Fig. 1: Morfologa normal.

ANEMIAS FERROPNICAS
2
1

2
1

Fig. 3: Eritrocitos en diana, (1) y esferocitos, (2).

Fig. 4: Hipocroma con doble poblacin, normocrmica, (1) e hipocrmica, (2).

31

Fig. 5: Hipocroma marcada ( ).

Fig. 6: Hipocroma por ferropenia, punteado baslo ( ).

Fig. 7: Hipocroma marcada ( ).

Fig. 8: Hipocroma marcada (

).

32

Fig. 9: Hipocroma y algunos eritrocitos en diana ( ): talasemia.

Fig. 10: Hipocroma por ferropenia, ( ).

ANEMIAS MEGALOBLSTICAS

33

3
2

2
3

Fig.11: Anemia megaloblstica, aniso-macrocitosis, (1) se ve un corpsculo de HowellJolly, (2) un eritrocito en diana, (3).

Fig. 12: Aniso-macrocitosis, (1) un corpsculo de Howell-Jolly, (2) microcito, (3).

Fig. 13: Eritroblastos megaloblsticos grandes, con poca maduracin del citoplasma,
ncleos inmaduros.

Fig. 14: Macrocitosis, (1) eritroblastos, (2) anemia megaloblstica (deciencia de vitamina
B12 o de cido flico).

34
1

Fig. 15: Un campo de anemia megaloblstica: dos neutrlos hipersegmentados.

Fig. 17: Un neutrlo picntico en una anemia megaloblstica, macrocitosis, clulas en

raqueta, (1).

Fig. 16: Un neutrlo hipersegmentado en una anemia megaloblstica;

macrocitosis, (1).

ANEMIAS HEMOLTICAS

35

1
2

Fig. 18: Abundantes clulas falciformes, (1) en el centro un eritrocito en diana, (2).

Fig. 19: Anisocitosis, (1) algunas plaquetas gigantes, (2).

3
2

2
3
3

Fig. 20: Varias clulas falciformes (drepanocticas) y muchas dianas: hemoglobinopata SC.

Fig. 21: Esferocitosis, (1) un eritroblasto basoflico, (2) policromatolia, (3).

36

Fig. 22: Eliptocitosis hereditaria.

Fig. 23: Eritrocitos falciformes en suspensin, con metabisulto de sodio.

Fig. 24: Prueba de metabisulto positiva para clulas falciformes, suspensin en solucin
salina.

Fig. 25: Eritrocitos traumatizados, (

) (esquistocitos), con diversas fragmentaciones o

roturas: anemia hemoltica microangioptica.

37
3
3

Fig. 26: Esferocitosis, (1) macroctos policromatoflicos, (2) tres eritroblastos, (3).

Fig. 27: Muchos eritrocitos en diana, (1) en el centro varios falciformes (2),
(hemoglobina SC).

Fig. 28: Hemoglobinopata SC.

Fig. 29: Otro ejemplo de microangiopata. Escasas plaquetas (1), clulas en casco (2).

38

Fig. 30: Punteado baslo, (

) como se ve en la intoxicacin por plomo.

Fig. 32: Glbulos Rojos crenados; artefacto en la elaboracin del frotis (

).

Fig. 31: Reticulocitos, (

) (tincin con azul cresil brillante).

Fig. 33: Reticulocitos (

).

SERIE GRANULOCTICA

39
1

1
2
1
2
1

Fig. 34: Abundancia de elementos granulocticos semimaduros, pero con evidencia de

maduracin. (1) Leucemia mieloide crnica (2).

Fig. 35: Blastos mieloides con ncleos monocitoides: (

) leucemia mieloide aguda.

2
4

Fig. 36: Granulocitos medulares, se pueden ver todas las etapas de maduracin.

Fig. 37: Leucemia mieloide crnica: mielocitos, (1) metamielocitos, (2) cayados, (3) y
segmentados, (4) blasto, (5).

40

Fig. 38: Mieloblastos, aqu sin granulaciones citoplasmticas (

).

Fig. 39: Mieloblastos, en el izquierdo un bastn de Auer (

).

1
5
8

6
1
3

Fig. 40: Mielobrosis: glbulos rojos en raqueta, (1) ovalocitos, (2) un eritroblasto (3).

3
7
4

Fig. 41: Granulocitos: una familia completa. Esquina superior izquierda un neutrlo, (1) un
mieloblasto, (2) esquina inferior izquierda un linfocito, (3) un eosinlo, (4) en el centro
superior un promielocito, (5) seguido de un metamielocito, (6) y un mielocito, (7) en la esquina
superior derecha un baslo, (8).

41

Fig. 42: Serie granuloctica de promielocito a segmentados, en una leucemia mieloide crnica.

MONOCITOS

Fig. 44: Monocito.

Fig. 43: Un campo de un aspirado medular normal. Al centro un promielocito, (

la periferie muchos elementos eritroides y mieloides.

Fig. 45: Monocito.

) en

42

OTROS
1

1
2
2

Fig. 46: Megacariocito productor de plaquetas.

Fig. 47: Presencia de glbulos rojos espinosos o crenados, (1) usualmente se trata de
artefactos de laboratorio. Dos eritroblastos, (2).

Fig. 48: Trombocitosis (

) con hipocroma: probable sangrado.

Fig. 49: Un grupo de eritroblastos; al centro un eritroblasto basoflico, (1) arriba tres
policromatlos, (2) glbulos rojos en rouleaux pilas de moneda (3).

43

Fig. 50: Un linfocito peludo: presencia de nuclolo y de bordes citoplasmticos

irregulares.

Fig. 51: Un linfocito maduro, con condensaciones cromatnicas.

Fig. 52: Una familia eritroide, con una clula en mitosis (

Fig. 53: Otro linfocito peludo grande.

).

44

Fig. 54: Plasmocito normal y rouleaux.

Fig. 56: Plasmocitos de mieloma mltiple en sangre perifrica.

Fig. 55: Plasmoblastos en mdula sea.

46
GLOSARIO
Anemia: Trastorno que se caracteriza por la disminucin de la
hemoglobina o de los glbulos rojos en la sangre.

Hemate: Glbulo Rojo, hemate o clula de la sangre que contiene

hemoglobina y transporta el oxgeno desde los pulmones hasta los tejidos.

Anticoagulante: un anticoagulante es una sustancia exgena que interere

o inhibe la coagulacin de la sangre, creando un estado pro hemorrgico.
Evita o impide la coagulacin de la sangre.

Hematolgico: Funcin del sistema hematolgico, produccin de sangre,

transporte de oxgeno, metabolitos y coagulacin.

Bothrops Atrox: Serpiente de la subfamilia de los Crotalinae, su veneno

es usado para evitar la coagulacin.
Buer: Tampn qumico, en trminos qumicos, tambin es un sistema
constituido por un cido dbil y su base conjugada o por una base y su
cido conjugado que tiene capacidad tamponante, es decir, que puede
oponerse a grandes cambios de pH (en un margen concreto) en una
disolucin acuosa.
Citoqumica: Es una rama de la biologa celular enfocada en el estudio de
la composicin qumica de las clulas y sus procesos biolgicos moleculares
mediante anlisis qumicos y qumico fsicos que permitan su observacin.
Se considera como un nexo de unin entre la morfologa y la bioqumica.
Cogulo: Masa gelatinosas de tejido sanguneo formada por factores
coagulantes en la sangre.
Crioprecipitacin: Proceso de precipitacin de protenas mediante la
aplicacin de un efecto fsico de temperatura.
Frotis: Preparacin para el microscopio hecha tomando parte de un tejido
membrana o lquido, que se necesita examinar.

Hemocitolgico: Estudio de las clulas de la sangre.

Hemodilucin: Proceso de dilucin de la sangre.
Hemlisis: Fenmeno de la desintegracin de los eritrocitos.
Hemostasia: Conjunto de mecanismos aptos para detener los procesos
hemorrgicos.
Heparinizada: Solucin o sangre con anticoagulante heparina.
Hidrodinmico: Dinmica del agua u otros uidos. Para esto hay que
considerar entre otras cosas la velocidad, presin, ujo y gastos del
uido.
Impedancia: Es una magnitud que establece la relacin (cociente) entre
la tensin y la intensidad de corriente. Tiene especial importancia si la
corriente vara en el tiempo, en cuyo caso, sta, la tensin y la propia
impedancia se describen con nmeros complejos o funciones del anlisis
armnico.
Inmunohematologa: Es parte de la hematologa que estudia los
procesos inmunitarios que tiene lugar en el organismo con relacin a los
elementos sanguneos.

47
Lanceta: Instrumento con una hoja de acero muy alada por ambos lados
y de punta muy aguda que sirve para abrir una sura en la piel.

Portaobjeto o placa: Pieza o lamina rectangular de cristal en que se coloca

el objeto o preparacin que va a ser observado en un microscopio.

Leucocito: Cada una de las clulas o glbulos, incoloras o blanquecinas

con citoplasma viscoso, que se encuentra en la sangre y en la linfa y forma
parte del sistema inmunolgico.

Quelante: Crea complejos con metales, se utilliza para evitar la

coagulacin de la sangre por su capacidad de secuestrar al calcio.

Lipemia: Concetracin elevada de varias clases de lpidos, aunque

generalmente se reere a los acilglicridos, steres en los que uno, dos o
tres cidos grasos se unen a una molcula de glicerina, formando
monoglicridos, diglicridos y triglicridos respectivamente.
Lisis: Lisis celular es la rotura de la membrana celular.
Neutrlos: Denominados tambin macrfagos, son glbulos blancos de
tipo granulocito. Miden de 12 a 18 um y es el tipo de leucocito ms
abundante de la sangre en el ser humano.

Retraccin del cogulo: Procedimiento utilizado para conrmar la

funcin plaquetaria.
Seudo trombocitopenia: Falsa trombocitopenia, en cualquier situacin
el recuento plaquetario es inferior a 100.000/mm, es decir, la disminucin
de la cantidad de plaquetas circulantes en el torrente sanguneo por debajo
de los niveles normales.
Suero: Componente de la sangre resultante tras permitir la coagulacin
de sta y eliminar el cogulo de brina y otros componentes.

Osciloscopio: Instrumento de medicin electrnica para la representacin

grca de seales electricas que pueden variar en el tiempo.

Temperatura Ambiente: Es la temperatura que se puede medir con un

termmetro y que se toma del ambiente actual, por lo que, si se toma de
varios puntos en un rea a un mismo tiempo puede variar.

Peroxidasa: Tipo de enzimas muy extendidas en toda la escala logentica;

pertenecen a la categora de las oxidorreductasas.

Test de Coombs: Prueba de laboratorio para determinar la presencia de

anticuerpos contra antgenos de los glbulos rojos.

pH: Medida de la acidez o alcalinidad de una solucin. Equivale a la

concentracin de iones hidrgeno.

Torniquete: Elemento utilizado para comprimir una vena, para diferenciar

una vena o vaso para extraer sangre.

Policitemia: La policitemia es un trastorno en el cual hay demasiados

glbulos rojos en la circulacin sangunea. Patologa medular caracterizada
por la produccin en exceso de glbulos rojos.

Venopuncin: Proceso que se hace en vena para extraer sangre o inyectar

algo.

Poliglobulia: Patologa que afecta a la mdula sea, produciendo glbulos

rojos en exceso.

Wrigth: Colorante utilizado en Hematologa.

48
ABREVIATURAS
LCR

Lquido Cefalorraqudeo.

EDTA

Etilen diamino tetraactico

EDTA.K

Etilen diamino tetraactico potsico 3

PDF

Factores de degradacin de la brina.

rpm

Revoluciones por minuto.

TP

Tiempo parcial de coagulacin.

TTP

Tiempo Parcial de Tromboplastina.

49
BIBLIOGRAFA
Alvarado Moreno J.A., Mayani H., El Ciclo Celular y su papel en la
biologa de las clulas progenitoras hematopoyticas, 2007.
Fernandez V, Saez R, Cueto L. Hematopoyesis Extramedular, 1998.
Mayani, H., Salcedo M., Humphries K., Aspectos moleculares de la
hematopoyesis, 1997.
Senz Klever, Narvez Luis, Cruz Marcelo, Valores de Referencia
Hematolgicos en poblacin Altoandina ecuatoriana, 2008
S. Mitchell Lewis Barbara J., Bain, Imelda Bates, Practical Haematology
9na Edicin, Churchill LIVINGSTONE, London 2001.
Vives, J.L.I., Aguilar., J.L.I., Manual de Tcnicas de Laboratorio de
Hematologa, 2006.

INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE

Y MEDICINA TROPICAL
LEOPOLDO IZQUIETA PREZ
LABORATORIO ESMERALDAS

9 789978 927700