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CÁMARA DE NEUBAUER
La cámara de Neubauer o hemocitómetro es un aparato de
vidrio que posee dos superficies reticuladas (retículos) para
el conteo de las células y dos columnas laterales que poseen
una altura de 0,1 mm por encima del retículo. El retículo de
Neubauer posee una subdivisión en 9 cuadrantes, de los
cuales resultan de utilidad solo los 4 cuadrantes laterales de
L1, L2, L3 y L4 (para el conteo de los leucocitos) y el
cuadrante central (H total), que a su vez se subdivide en
varios pequeños subcuadrantes (con un total de 25 H), de los
cuales quedan destacados los H1, H2, H3, H4 y H5 para el
conteo de los hematíes (eritrocitos) y las plaquetas. Cada una
de esas áreas reticuladas posee dimensiones específicas con capacidad de volúmenes específicos (Berri.es,
2019).
Para hallar el número de leucocitos, se utilizará la siguiente fórmula:
𝑁 × 200 × 10 × 400
𝑷𝒍𝒂𝒒𝒖𝒆𝒕𝒂𝒔/ 𝒎𝒎𝟑 =
800
𝑷𝒍𝒂𝒒𝒖𝒆𝒕𝒂𝒔/ 𝒎𝒎𝟑 = 𝑁 × 10000
Donde:
✓ N: Número de plaquetas en los 5 cuadrantes.
✓ 200: Factor de dilución de la sangre / Líquido de Rees-ecker.
✓ 10: Factor de espesor entre el cubre hematímetro y el retículo (contenido de sangre diluida).
✓ 400: Total de cuadros pequeños del cuadro central de la cámara.
✓ 800: Total de cuadros pequeños contados.
Rangos de Referencia: 140.00 a 500.000 plaquetas /mm3
Reactivos de laboratorio
▪ Líquido de dilución de REES-ECKER
Materiales de laboratorio
▪ Cámara de Neubauer
▪ Tubo de ensayo 75x13
▪ Tapón de caucho
▪ Pipeta semiautomática de 10 y 200 landas
▪ Caja de Petri
▪ Dispensador de plástico descartable
▪ Papel filtro
Equipos de laboratorio
▪ Microscopio binocular
▪ Mezclador de tubos
▪ Contador de células
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos y otros
que así se consideren)
Bibliografía
Berri.es. (2019). Errores en los hemogramas automatizados: los interferentes y sus correcciones. Obtenido de
Berri.es:
https://www.berri.es/pdf/HEMOGRAMA.%20C%C3%B3mo%20Hacer%20e%20Interpretar%20(Lib
ro%20+%20eBook)/9789806574939
MedlinePlus. (2021). Problemas plaquetarios. Obtenido de MedlinePlus:
https://medlineplus.gov/spanish/plateletdisorders.html
Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias Químicas
Carrera: Bioquímica y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio de Hematología
PRÁCTICA 9 Estudio diferencial de leucocitos
Estudiante: • CICLO I 2023 - 2024
✓ Guananga Bajaña Bryan Gonzalo
✓ Morales Ordeñana Carmen Alicia
• Semestre: Octavo
✓ Rivera Mora Juan Pablo
✓ Sarbia Reyes Kathya Kristel
Marco teórico
GLÓBULOS BLANCOS
Tipo de glóbulo sanguíneo (célula de la sangre) que se produce en la médula ósea y se encuentra en la sangre
y el tejido linfático. Los glóbulos blancos son parte del sistema inmunitario del cuerpo y ayudan a combatir
infecciones y otras enfermedades. Los tipos de glóbulos blancos son los granulocitos (neutrófilos, eosinófilos
y basófilos), los monocitos y los linfocitos (células T y células B). La prueba del recuento sanguíneo completo
(RSC) a menudo incluye el número de glóbulos blancos. Este valor se usa para detectar afecciones como
infecciones, inflamaciones, alergias y leucemias. También se llama corpúsculo blanco, GB y leucocito.
(Instituto Nacional del Cáncer, 2018)
Ilustración 1. Conteo de glóbulos blancos
Los valores van a depender del sexo y de la edad. Por lo general, deben haber entre 4.500 y 11.000 leucocitos
por microlitro de sangre en adultos. (Eurofins Megalab, 2018)
Una disminución de los glóbulos blancos, por debajo de los 4 mil por microlitro de sangre, baja las defensas
y nos vuelve vulnerables a alergias, bacterias e infecciones. Este problema, se llama leucopenia. Si supera los
11.000 hay un exceso de glóbulos blancos. Tener los leucocitos altos por si mismo no es una enfermedad, pero
sí alertan de un problema en nuestra salud que debe ser tratado para evitar complicaciones.
Esto se analiza a través de un hemograma, que se realizan tanto en el análisis básico como en el análisis
integral de LGS. (Eurofins Megalab, 2018)
• Problemas en médula ósea: La célula se dispara cuando el cuerpo reciente problemas óseos o
afecciones como tumores, leucemia y cáncer.
• Afección cutánea: Cuando recibimos quemaduras, los niveles aumentan como mecanismo de
defensa.
• Alergias e infecciones: El trabajo de esta célula es cuidarnos antes diferentes infecciones, si dichas
alergias son muy fuertes, los niveles aumentarán drásticamente. Enfermedades como asma, rinitis,
gripe.
Existen cinco tipos de leucocitos, cada uno de ellos con funciones diferentes. La fórmula leucocitaria permite
conocer:
• Si hay presencia de alguna célula anormal que no corresponda a ninguno de los leucocitos
habituales.
Esta información es valiosa para el diagnóstico de algunas enfermedades que afectan al sistema inmunitario
y en los trastornos de la médula ósea. (SEQC , 2022)
La fórmula leucocitaria suele realizarse junto con el hemograma, solicitado como parte de un control
rutinario de salud, o bien tras haber obtenido un resultado alterado en este. La mayoría de las veces, el recuento
diferencial se realiza de manera automatizada en un analizador, aunque no es raro que se realice una extensión
de sangre para que el especialista del laboratorio la revise al microscopio. (SEQC , 2022)
La médula ósea produce principalmente cinco tipos de leucocitos: neutrófilos, eosinófilos, basófilos,
linfocitos y monocitos.
Granulocitos: Presentan gránulos en su citoplasma. Los gránulos contienen sustancias químicas y otros
compuestos que se liberan en el curso de una respuesta inmunitaria. Existen tres tipos de granulocitos:
Neutrófilos: Normalmente son los leucocitos mayoritarios. Se movilizan hacia las áreas lesionadas,
inflamadas o infectadas para absorber y destruir bacterias u hongos.
Eosinófilos: Responden a infecciones causadas por parásitos y juegan un papel importante en el
desarrollo de la alergia.
Basófilos: Suelen ser los leucocitos minoritarios y se piensa que también juegan un papel en las
reacciones alérgicas.
Linfocitos: Existen tanto en la sangre como en el sistema linfático. Se pueden clasificar en tres tipos, aunque
en la fórmula leucocitaria no es posible diferenciarlos, por lo que se informa del total de linfocitos. Para
conseguir diferenciar los tipos de linfocitos se requieren pruebas específicas como el inmunofenotipado.
(SEQC , 2022)
Monocitos: son similares a los neutrófilos, se desplazan hacia la zona de la infección para engullir y destruir
bacterias. Suelen aparecer en infecciones crónicas, pero no tanto en las agudas. También participan en los
procesos de reparación de los tejidos y tienen otras funciones dentro del sistema inmune. (SEQC , 2022)
Basófilo
Neutrófilo
En el campo del centro se observa un neutrófilo En el campo del centro se observa un neutrófilo
segmentado. segmentado y un basófilo.
Neutrófilo segmentado
Monocito
Neutrófilo en cayado
Neutrófilo
segmentado
Marco teórico
El tiempo de sangría es un examen básico de orientación
en el estudio de la hemostasis de un paciente. Es un método "in
vivo", que en condiciones fisiológicas mide la capacidad de las
plaquetas para funcionar normalmente formando el "tapón
plaquetario" de la hemostasis primaria. Para la interpretación de
la función plaquetaria normal o patológica se requiere que el
recuento de plaquetas sea superior a 100.000 x mm3.
El tiempo de sangría es un examen sencillo, de gran uso y utilidad, por ello es necesario determinar el
rango de sus valores normales. De esta manera se define también el nivel patológico que dará una orientación
clínica importante en el preoperatorio o en el enfermo que sangra.
• En otras palabras, es el intervalo de tiempo que media entre el momento en que comienza a fluir sangre
de una pequeña herida (3 x 3 mm) provocada en la piel y la detención de la hemorragia.
Al realizar una pequeña incisión en una zona de microcirculación para producir una hemorragia, ésta
se detiene fundamentalmente por acción combinada de las plaquetas y del vaso, sin la intervención de otros
factores del mecanismo hemostático.
Materiales de laboratorio
▪ Papel filtro.
▪ Reloj cronómetro.
▪ Algodón.
▪ Alcohol.
Equipos de laboratorio
▪ Equipo semiautomático para punción capilar (con lanceta desechable)
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos y otros
que así se consideren)
Rango referencial: 1-4 minutos
Valoración de los resultados
Paciente: Masculino
Tiempo de sangría: 1 minuto 32 segundos
El tiempo de sangría indicado se encuentra dentro de los parámetros establecidos. Dicho tiempo muestra los
segundos transcurridos desde la primera limpia hasta que la yema del paciente ha dejado de sangrar (después
de 3 limpiadas). Si el tiempo hubiera superado los 4 minutos esto implica que el paciente presenta alteraciones
en la función plaquetaria y que presenta probablemente una Trombocitopenia, sin embargo, ese no fue el caso.
Conclusiones
1. Desarrollamos las destrezas necesarias para la técnica de la punción capilar.
2. Determinamos el tiempo de sangría, por medio de la técnica de punción capilar adecuadamente,
dándonos como resultado un tiempo de 1 minuto 32 segundos en un paciente masculino.
Recomendaciones
• La punción capilar se debe realizar sobre el borde de la yema del dedo y no realizarla en el centro.
• Desinfectar correctamente la yema con el algodón humedecido en alcohol
• Dejar secar el alcohol en la yema del dedo del paciente.
• Empezar y detener precisamente el cronómetro.
• Registrar el tiempo en minutos y segundos
Bibliografía
Babini, S., Benzoni, A., Morilla, G., Rossi, S., & Maffrand, C. (2022). TIEMPO DE COAGULACIÓN Y
https://www.evelia.unrc.edu.ar/evelia/archivos/idAula126939418615/materiales/5_Adicionales/Tiemp
o_de_coagulacion_y_sangria_2022_120931267064_127034822438.pdf
https://www.scartd.org/arxius/hemostasia_05.pdf
Anexos
Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias Químicas
Carrera: Bioquímica y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio de Hematología
PRÁCTICA Determinación del tiempo de coagulación
11
Estudiante: • CICLO I 2023 - 2024
✓ Freire Zöller Nicolás Marcelo
✓ Guananga Bajaña Bryan Gonzalo
✓ Morales Ordeñana Carmen Alicia
• Semestre: Octavo
✓ Morán Guillen Allison Nicole
✓ Rivera Mora Juan Pablo
✓ Sarbia Reyes Kathya Kristel
Sistema Rh
En 1940 se descubrió otro grupo de antígenos (D) que se denominaron factores Rhesus (factores Rh) porque
fueron descubiertos durante unos experimentos con simios del tipo Macaccus Rhesus. Según este grupo
sanguíneo, las personas con factores Rhesus en su sangre se clasificarían como Rh positivos; mientras que
aquellas sin los factores se clasificarían como Rh negativos, y sólo podrán recibir sangre de donantes Rh
negativos. (Ramírez, 2022)
Un poco de historia
Las funciones de la sangre se desconocieron durante siglos. Los médicos intuían su importancia y realizaron
múltiples intentos de transfusiones sanguíneas como medio para tratar distintas enfermedades. Pero, en la
mayoría de los casos, resultaron nocivos para el paciente por lo que esta práctica médica estuvo prohibida.
(Cruz Roja, 2022)
En 1900, el patólogo alemán Karl Landsteiner comenzó a mezclar sangre de diferentes personas, encontrando
que algunas mezclas eran compatibles, mientras que otras no lo eran.
Descubrió que, en la superficie de los hematíes, existían dos tipos de proteínas marcadoras o antígenos que
denominó A y B. Observó, además, que el plasma contiene también dos tipos de anticuerpos que reaccionan
con las proteínas de los glóbulos rojos y que llamó anticuerpos Anti-A y Anti-B. De esta manera estableció
cuatro tipos de grupos sanguíneos: (Cruz Roja, 2022)
Partiendo de esta caracterización estableció la compatibilidad entre los distintos grupos según las reacciones
que se producían, ya que los anticuerpos que posee cada grupo sanguíneo reacciona cuando se introducen en
el torrente sanguíneo hematíes con antígenos "extraños": Anti-A contra antígenos A y Anti-B contra antígenos
B. (Cruz Roja, 2022)
Landsteiner continuó investigando sobre el tema, puesto que seguían produciéndose reacciones transfusionales
y, así, descubrió, en 1940, el factor Rhesus durante sus experimentos con macacos Rhesus. Este sistema
comprende varios antígenos, el más importante de los cuales es el factor D. Este factor se encuentra en la sangre
del 85% de las personas, que se denominan Rh positivas, mientras que el 15% restante que carece de este factor,
son Rh negativas. Por tanto, las personas se clasifican, por ejemplo, como 0 positivas o AB negativas,
basándose en los grupos AB0 y en el Rh. De esta manera, cuando se va a realizar una transfusión hay que
atender la compatibilidad de los dos factores. (Cruz Roja, 2022)
Reactivos de laboratorio
▪ Kit de grupo sanguíneo Anti-A y Anti-B
▪ Kit de suero Anti-D (Rh)
Materiales de laboratorio
▪ Láminas de acrílico para tipificación de grupos sanguíneos
▪ Lápiz graso
▪ Dispensador de plástico
▪ Palillos de dientes
Equipos de laboratorio
▪ N/A
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento
Depositar 3 gotas de
Obtener sangre Añadir el suero anti-A,
sangre en la lámina
mediante punción suero anti-B y suero anti-
para tipificación
capilar D en las 3 gotas de
sanguínea
sangre
Resultados Obtenidos
Bibliografía
Cruz Roja. (2022). Tipos de sangre. Obtenido de Cruz Roja Española: https://www.donarsangre.org/todo-
sobre-la-sangre/tipos-de-sangre/
Ramírez, C. (2022). Los grupos sanguíneos. Obtenido de Centro Regional de transfusión sanguínea y banco
sectorial de tejidos de Granada y Almería: http://transfusion.granada-almeria.org/donar/grupos-
sanguineos
Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias Químicas
Carrera: Bioquímica y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio de Hematología
PRÁCTICA 13 Retracción del coágulo
Estudiante: CICLO I 2023 - 2024
Freire Zöller Nicolás Marcelo
Semestre: Octavo
Guananga Bajaña Bryan Gonzalo
Morales Ordeñana Carmen Alicia
Docente: Q.F. William Jiménez Jiménez
Morán Guillen Allison Nicole
Rivera Mora Juan Pablo Grupo: G1B
Sarbia Reyes Kathya Kristel
Objetivos de la práctica de laboratorio
1. Determinar la calidad del coágulo.
2. Determinar adecuadamente la consistencia del coágulo.
Instrucciones o consideraciones previas
Marco teórico
El sistema hemostático y el coagulograma
Ante una agresión vascular, se produce una serie de acontecimientos que tratarán de evitar la pérdida de sangre
mediante la vasoconstricción, la agregación de plaquetas en el lugar de la
lesión, la activación de los factores de la coagulación, que darán lugar a la
formación de un coágulo; y posteriormente, la actuación del sistema
fibrinolítico en la disolución del coágulo y restitución de la integridad del
endotelio.
Durante este proceso participan diferentes factores o componentes,
necesarios para el mantenimiento de una hemostasia normal, tales como: el
vascular, el plaquetario, los plasmáticos y los fibrinolíticos, con sus factores
e inhibidores.
Durante la formación del coágulo se pueden evidenciar 2 etapas. La primera:
vascular o plaquetaria, donde participan factores o componentes vasculares y
plaquetarios cuyo objetivo es formar un tapón hemostático inicial constituido
principalmente por plaquetas activadas y agregadas; y una etapa secundaria o plasmática donde participan
factores plasmáticos y fibrinolíticos, cuya finalidad es generar suficiente cantidad de trombina para convertir
el fibrinógeno en fibrina y formar el coágulo irreversible, sellando así el sitio lesionado
En el laboratorio se han desarrollado numerosas técnicas para el estudio de estas etapas con el fin de determinar
la causa de los procesos hemorrágicos y trombóticos. (Zamora, 2012)
El coagulograma comprende pruebas que evalúan funcionamiento de los diferentes componentes del sistema
plaquetario y hemostático, incluye: prueba del lazo, tiempo de sangramiento, recuento de plaquetas, retracción
del coágulo, tiempo de coagulación, tiempo de protrombina (TP), tiempo parcial de tromboplastina activada
(TPTA) y tiempo de trombina (TT); de todas estas pruebas se hará énfasis en la retracción del coágulo.
(Mendoza, 2019)
¿De qué trata la retracción del coágulo?
La retracción del coágulo depende del número de plaquetas, de su actividad funcional y de la concentración
del fibrinógeno. El grado de retracción se correlaciona muy bien con el número de plaquetas. En ciertas
condiciones puede resultar normal aún con un número tan bajo de plaquetas como 30 000/mm3.
Por alteraciones funcionales como en la tromboastenia de Glanzmann, en ciertas enfermedades sistémicas y en
insuficiencia renal aguda o crónica, la retracción del coágulo puede ser incompleta o nula.
En los métodos en sangre total, el grado de retracción es dependiente del hematócrito, o sea, del volumen
globular a retraer. (Zamora, 2012)
Principio: la retracción del coágulo depende de la actividad trombodinámica plaquetaria, porque se necesita
un número mínimo de plaquetas normales y cationes divalentes. La actinomiosina plaquetaria (trombosternina),
proteína contráctil plaquetaria es la responsable de esta función
Al tomar una muestra de sangre sin anticoagulante y colocarla en un tubo, ocurre primero coagulación y
posteriormente la retracción del coagulo; está en función de la cantidad y capacidad funcional de las plaquetas.
La retracción depende del fibrinógeno y esencial mente de las plaquetas sanguíneas; la prueba permite apreciar
indirectamente no solo las variaciones cuantitativas de estos elementos figurados, sino alguno de sus trastornos
funcionales. (Zamora, 2012)
Valores de referencia
Retráctil: el coágulo sanguíneo se desprende totalmente del tubo de ensayo.
Parcialmente retráctil: solo una porción del coágulo se desprende.
Irretráctil: el coágulo se mantiene adherido a las paredes del tubo.
La retracción del coagulo se realiza gracias a una proteína la tromboastenina, que utiliza el ATP como fuente
de energía en presencia de iones cálcicos o magnésicos. La rapidez y calidad del coagulo depende de: número
y calidad de las plaquetas, concentraciones adecuadas de fibrinógeno y trombina. La retracción es influenciada
por la temperatura, el volumen eritrocítico, la superficie de contacto y el pH. (Zamora, 2012)
Reactivos de laboratorio
Muestra de sangre (reactivo biológico)
Materiales de laboratorio
Tubos de 150x13
Tapones de caucho
Material para extracción venosa (guantes, algodón, alcohol, torniquete, jeringa)
Equipos de laboratorio
Estufa
Reloj de laboratorio
Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos y otros
que así se consideren)
Resultados obtenidos de bibliografía de internet
Retracción del coágulo Parcial
Consistencia del coágulo Firme
La retracción ocurre por la interacción entre los pseudópodos de las plaquetas y las hebras de fibrina, donde
coágulo ocupa el 50% del volumen total de sangre. La retracción del coágulo resulta en una masa estabilizada
de plaquetas y de fibrina que cierra firmemente el vaso injuriado para prevenir futuras perdidas de sangre. En
valores normales (45%-60%) la retracción en varía en relación inversa al hematocrito, si faltan plaquetas la
retracción se dificulta la cual no fue el caso.
Conclusiones
1. Determinamos adecuadamente la calidad del coágulo, se observó una retracción parcial, lo cual se
encuentra los valores normales de retracción.
2. Determinar adecuadamente la consistencia del coágulo, su consistencia fue firme, también
encontrándose en los valores normales.
Recomendaciones
Uso de equipo de protección (guantes, bata de laboratorio, gafas de seguridad).
Tener todos los materiales necesarios, incluyendo los tubos de ensayo, la sangre venosa, el agitador de
vidrio y la incubadora listos y esterilizados.
Asegúrate de que la incubadora esté configurada a la temperatura adecuada (37°C) y en posición vertical
para permitir una formación de coágulo uniforme.
Realiza observaciones regulares de la formación del coágulo en intervalos de una hora.
Al utilizar el agitador de vidrio para determinar la calidad del coágulo, manéjalo con cuidado para evitar
dañar el coágulo o afectar los resultados.
Bibliografía
Mendoza, Y. (Junio de 2019). Estudio de tres pruebas de función plaquetaria en adultos jóvenes residentes en
una ciudad de gran altitud (Cusco, 3399 msnm). Anales de la Facultad de Medicina, 193-195. Obtenido
de http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-55832019000200010
Zamora, Y. (2012). Pruebas del coagulograma y componentes de la hemostasia. Utilidad para diagnosticar las
diátesis hemorrágicas. Revista Cubana Hematología, Inmunología y Homoterapia, 141-150. Obtenido
de http://scielo.sld.cu/pdf/hih/v28n2/hih05212.pdf