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ESPERMATOGRAMA

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ESTUDIO DE LIQUIDOS BIOLOGICOS

LIC. TM DAVID G. QUISPE ARANDA 2008

ESPERMATOGRAMA ( ESPERMIOGRAMA)
I. EXAMEN MACROSCOPICO ( Características Físicas )
VOLUMEN Normal Polisemia Oligosemia Normal Aumentada Normal Amarillento Rosado-Rojizo 2 – 6 ml ( 3 – 5 días de abstinencia ) > 8 ml < 2 ml 15 minutos tras emisión > 15 minutos tras emisión blanquecino – opalescente Proceso supurativo ( piosperma ) Prolongada abstinencia sexual Sangre

II. EXAMEN MICROSCOPICO

Recuento VASECTOMIA Movilidad Índice de vitalidad Estudio morfológico

1. EXAMEN DIRECTO

LICUEFACCION

Observar

COLOR

Observación en fresco en lamina P-O Presencia y ausencia de esper. y cls espermáticas Concentración aproximada de esp. Movilidad Aglutinación de espermatozoides Formas anormales de esp. Leucocitos, hematíes Cristales de fosfato de espermita ( agujas)

2. ESTUDIO DE MOTILIDAD

PH

Normal 7.3 – 7.4 Variación Fisiológica 7- 8.1 > 8 infl. de glándulas sex. Pat

prostatitis vesiculitis epididimitis

< 8 oclusión de conductos eyac ( patol. crónicas ) VISCOCIDAD Se observa el deslizamiento del semen desde la punta de una pipeta pasteur de forma que si su viscosidad es normal cuando cae gota a gota Disminución ausencia de coagulación espontánea del liquido seminal ( disminución de espermatozoides o ausencia de espermatozoides ) Aumentada anulación total de progresión espermática en el moco cervical
SE REALIZA CUANDO EL SEMEN ESTA YA LICUADO

Portaobjetos calentado a 37 º

Depositar una gota de muestra

Cubrir con cubreobjetos

Observar con el objetivo 40 x

FILANCIA

El semen forma un filamento de hasta 1 cm al introducir una varilla fina o una asa de siembra y retíralo suavemente. Aumentada filamento > 1 cm ( semen no licuado o viscosidad aumentada

Se valora observando varios campos ( 40 x), contando por lo menos 200 espermatozoides Se registrar el porcentaje total de espermatozoides que presentan movilidad y el porcentaje de inmóviles Se debe hacer el porcentaje cualitativo ( % ) de la motilidad clasificando los espermatozoides según categorías Otra forma de clasificarlos es según : • Movilidad activa ------ avanzan • Movilidad pasiva------- se mueven pero no avanzan

• • • •

Movimiento rápido y rectilíneo Movimiento progresivo pero menor o no rectilíneo Movimiento sin progresión Inmóviles

categoría a categoría b categoría c categoría d Los resultados se expresan como % de espermatozoides teñidos Normal ------ coloración con eosina < 40 % Patológica --- ( infertilidad ) > 40 % 4. RECUENTO

% de teñidos < % de inmóviles

Interpretación Clínica

NORMAL ASTENOSPERMIA NECROSPERMIA 3. INDICE DE VITALIDAD

60-50 % movilidad Menos de 50 % de formas móviles a las 2 horas Todas las formas carecen de motilidad 1. 2. 3. 4. 5. homogeneizar muestra Dilución de la muestra 1/20 ( diluyente macomber – saunders ) Llenar cámara de Neubauer – reposar 2 minutos ( cámara húmeda) Observar muestra 10 x – 2 cuadrados de leucocitos Calculo ( espermatozoides / ml )

Después de licuefacción del semen

Estudio de Necrospermia ( espermatozoides muertos ) Estudio complementario de la motilidad – distingue dentro del grupo de formas móviles las vivas de las muertas

Hasta 11 con diluyente

0.5 muestra

Sol. eosina

Sol. nigrosina

Llenado de la pipeta de thoma Dilución 1/20

Llenado de la cámara de Neubauer y sedimentación de los espermatozoides en cámara húmeda

Depositar 1 gota de muestra y 1 gota de sol. Eosina . Homogeneizar 20 “

Añadir una gota de sol. De nigrosina Homogeneizar

Tapar con el cubre procurando no hacer burbujas

Observar con el objetivo de 40 x

Zona de recuento

Nº de espermatozoides contados = NC

Nº espermatozoides / ml =NC x 100 000
Normal = 50 – 120 millones de espermatozoides / ml
CLASIFICACION DEL SEMEN EN FUNCION DEL NUMERO DE ESPERMATOZIDES

HIPERESPERMIA NORMOSPERMIA OLIGOSPERMIA AZOOSPERMIA

Superior a 250 millones / ml De 20 a 250 millones / ml De 1 a 20 millones / ml Ausencia de espermatozoides maduros Presencia de células de espermiogenesis Ausencia de espermatozoides Ausencia de células de espermiogenesis Depositar 1 gota de muestra en un extremo

ASPERMIA

Hacer una extensión

5. FORMULA ESPERMATICA Valora el potencial fecundativo junto con el numero total de espermatozoides y su motilidad. Se valora los tipos de espermatozoides normales y anormales en extensiones teñidas también se observa células de espermiogenesis

Cubrir con alcohol metilico 5 minutos y dejar secar

Cubrir con wrigth durante 4 minutos

NORMAL
ANOMALIAS DE LA CABEZA • • • • • • • • • • • • • • • Cabezas duplicadas Cabezas gigantes Cabezas pequeñas Cabezas redondas Cabezas alargadas Cabezas amorfas Cabezas encogidas Engrosado Largado Inmaduro Ausente Bifida Mal implantada Enrollada Ausente

7.2
Giemsa *Lavar con agua

corriente suavemente *Secar *observar con Diluir con agua de ph 7.2 , 4 minutos Lavar con agua destilada Cubrir con giemsa diluido 12 minutos objetivo 100x

ANOMALIAS DEL CUELLO

ANOMALIAS DE LA COLA

Se registran los porcentajes de espermatozoides normales y anormales y dentro de estas ultimas el tipo de anormales encontradas y su proporción ( anormalidades en cola, cabeza y cuello ) . También se informa de la presencia de células de espermiogenesis y teratogenas , células sanguíneas y cualquier otro tipo de células que se pueden observar . EXAMEN MICROSCOPICO Numero de espermatozoides Movilidad Vitalidad Espermatozoides normales Alteraciones de cabeza Alteraciones de cuello Alteraciones de cola Alteraciones mixtas Células espermiogenicas y teratogenas Leucocitos Eritrocitos Otras células RANGO NORMAL Mayor de 25 millones / ml Mayor de 50 % Mayor de 50 % Mas de 70 % 18 % 5% 5% 0–2% 1–3% 1-2 / campo ( menos de 15/campo ) Ausentes 0 – 0.5 %

Hallazgos en el liquido seminal en las patologías mas frecuentes

Hallazgos en el liquido seminal
Volumen, recuento y motilidad disminuidos

Licuación Viscosidad elevada Blanco Claro Rojo Motilidad y recuento disminuidos ( menos del 50 % de movilidad a las 2 horas ) Color alterado Aspermia Disminución del Numero de Espermatozoides Oligospermia con motilidad y morfología normal

• • • • • • • • • • • • • • •

Patologías
Infertilidad Inflamación de próstata Inflamación de vesículas seminales Función prostática defectuosa Infección Oligospermia Sangre Lesión de los testículos Lesión del epidídimo Insuficiencia testicular de excreción Oclusión de conductos deferentes Lesión en los testículos Trastorno en el mecanismo eyaculat Estenosis de los conductos deferentes Periodo corto de abstinencia sexual

Morfología alterada

Normal – índice de malformaciones < 30 % Patológica - > 40 % ( teratospermia esterilidad definitiva ) Liquido seminal hipofecundante - alteraciones morfológicas 30 – 40 % Aumento de cls. Descamación (uretra – próstata) / uretritis – prostatitis

Aumento de leucocitos

III. EXAMEN QUIMICO
Dosificación de ciertos compuestos secretados por : Vesículas seminales Próstata Epidídimo fructosa acido cítrico, fosfatasa acida, zinc ( act. Bacteriana) carnitina

Presencia de eritrocitos o hemoglobina

Acido cítrico disminuido Fructosa disminuida

Infertilidad debida a : • Orquitis por parotiditis • Mala nutrición • Medicamentos • Radiaciones • Exceso de calor local ( rop apretad) • Cirugía • Infección de conductos deferentes • Criptorquidia • Aplasia germinal • Defectos hormonales (hipofisiarios, tiroideos) • Prostatitis • Uretritis • Epididimitos • Orquitis • Traumatismo • Tumor maligno del tracto genital • Daño renal • Inflamaciones prostáticas • Neoplasias prostáticas • Falta de estimulación hormonal • Trastorno funcional de las vesículas seminales

HOJA DE INFORME DE UNA ANALISIS DE LIQUIDO SEMINAL CONDICIONES DEL EXAMEN
Hora de eyaculacion……………….. Hora de examen …………………… Tiempo de transporte ……………… Método de obtención ……………………. Abstinencia sexual …………………......... Ultimo proceso febril …………………….

ESTUDIO DEL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
I. TOMA DE MUESTRA
Estéril ( cultivo ) VOLUMEN ( 2.5 – 5 ml ) 3 tubos Heparina ( citológico ) Fluoruro de sodio ( bioquímica )

EXAMEN MACROSCOPICO
Volumen………………………....... Color……………………….........… Olor………………………...……… Viscosidad………………………… Aspecto ………………………………….. Licuación………………………............…. Filancia………………………...…………. Ph………………………...……………….

EXAMEN MICROSCOPICO
PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………. Células……………………………. Espermiofagia…………………….. Aglutinación……………………………… Cristalización……………………………... Leucocitos por campo…………………….

NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML…………………………………….. MOVILIDAD Inmóviles…………………………% Movilidad total …………………...% Activa………….% Pasiva …………% VITALIDAD Espermatozoos teñidos ……………………………% Índice de vitalidad…………………………………% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales…………….…% Espermatozoos anormales……...…….…% Alteraciones de cabeza……...………% Alteraciones de Seg. Int……………..% Alteraciones de cola……...…………% Alteraciones mixtas……...……….…% Células de espermiogenesis …………. Leucocitos……………………………. Otras células…………………………. Bioquímica Macros ………..% Micros ………% Microbiología Citología

Análisis a realizar en una muestra de LCR
EXAMEN FISICO EXAMEN CITOLOGICO Estudio de caracteres organolépticos Recuento y diferenciación de células sanguineas y tisulares Determinaciones de metabolitos y Ph Demostración del germen causal o de etiología infecciosa Detección de antigenos y anticuerpos

ANALISIS
Acido cítrico………………..mg/dl Zinc………...……………….mg/dl

EXAMEN QUIMICO EXAMEN MICROBIOLOGICO EXAMEN INMUNOLOGICO

BIOQUIMICA
Fructosa………………………..……..mg/dl Fosfatasa acida……………………….UI/ml

DIAGNOSTICO………………………………………………………

II. EXAMEN FISICO
ASPECTO Normal : liquido / límpido / cristalino / transparente Anormal :Turbio / empañado / opalescente / sanguinolento Se expresa la turbidez en cruces ( 0-4) Procesos Infecciosos -TURBIDEZ-

III. EXAMEN CITOLOGICO Células (escasas)

Leucocitos mononucleares Malignas Plasmáticas
Macrófagos Glias . Ependimarias

Examen dentro de la primera media hora de extracción pues las alteraciones celulares aparecen rápidamente Microorganismos
1. RECUENTO CELULAR TOTAL 1. 2. 3. Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ) si esta turbio Llenar cámara de Neubauer Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las esquinas .

Leucocitos

Eritrocitos

Cuando hay aumento de proteínas ( exceso de fibrinogeno ) pueden aparecer coágulos COLOR Normal : incoloro Anormal : rojizo – hematíes Amarillo (xantocromico) :pigmento

Oxihemoglobina Metahemoglobin Bilirrubina

Se diferencia una hemorragia traumática por punción, cuando al centrifugar la muestra y se observa el sobrenadante este esta claro.
Características físicas del LCR normal PARAMETRO VALORES NORMALES
Retículo de la cámara de Neubauer. Zona de recuento 4. Dirección del contaje de leucocitos. Se cuentan los dos leucocitos sobre las líneas gruesas

Volumen Presión Color Turbidez Viscosidad Densidad pH

90 – 200 ml (adultos) 10-60 ml (recién nacidos) 70-200 mm agua( adultos ) 50-100 mm agua ( niños ) Transparentes Inexistente Similar a la del agua 1,005-1,008 7,4 - 7,5

Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )

Nº de células contadas = NC

Nº células / ul = NC / 4 x 10
Normal < 5 células / ul Monocitos Linfocitos Enfermedades infecciosas Aumento de células PLEOCITOSIS

inflamación

1. RECUENTO DIFERENCIAL Indica el porcentaje de mononucleares y polimorfonucleares 1. 2. 3. Liquido Turbio Liquido transparente Frotis directo del LCR Concentrar el LCR

III. EXAMEN QUIMICO Sangre ( difusión )
1. PROTEINAS

Origen SNC ( síntesis ) La concentración de proteínas en el LCR son 20 veces menor que las del plasma

Concentración celular ( centrifugación suave por 15 minutos Tinción con wrigth Observación al microscopia ( 100 X) se cuentan los diferentes tipos de células y se expresa en porcentaje. Resultados del análisis citológico en diferentes patologías EXAMEN CITOLOGICO
Pleocitosis moderada 10-30celulas/mm3 Pleocitosis acentuada 100-10,0000celulas/mm3 Pleocitosis extrema Hasta 50,0000celulas/mm3 Predominio de neutrofilos PATOLOGIAS ASOCIADAS Meningitis tuberculosa Encefalitis Tumores del SNC Meningitis purulenta Roturas de abscesos cerebrales Meningitis purulenta Meningitis tuberculosa y bacteriana tratada Meningitis víricas y sifilítica Meningitis nicóticas Síndrome de Guillain Barre Meningitis de origen parasitario

METODO TURBIDIMETRICO ( precipitación de proteínas ) 1. Mezclar en un tubo LCR (sobrenadante de la centrifugación ) y reactivo tricloroacetico al 3% en partes iguales 2. Reposar 10 minutos 3. Leer absorbancia 500 nm frente al blanco de agua destilada 4. La Absorbancia leída es proporcional a la concentración de Proteínas Normal : 0.2 0.4 gr /L Recién Nacidos : aumentan ( 5to – 6to mes ) > 40 años : aumentan mayor de 0.6 gr/L ******Procesos infecciosos que afectan al SNC aumenta la concentración de Proteínas del LCR ******
Proteinorraquia Patologías Sangre AUMENTO Siempre que haya Pus Proteínas celulares Exudado por meninges inflamadas Causas Hemoglobina Proteínas plasmáticas

RECUENTO TOTAL

Predominio de linfocitos

RECUENTO DIFERENCIAL
Presencia de eosinofilos

Presencia de células plasmáticas con linfocitos Presencia de histiocitos malignos Presencia de macrófagos

Procesos inflamatorios crónicos Esclerosis múltiple Tumores cerebrales

AUMENTO LIGERO

Inflamación de tejidos cerebrales Esclerosis múltiple Encefalitis , polineuritis Meningitis tuberculosa y luética Alteraciones vasculares Procesos tumorales Bloqueo del canal espinal Meningitis infecciosa Abscesos cerebrales Síndrome de Guillain-Barre

Exudación por la inflamación Aumento del contenido celular Obstrucción de la circulación

Infartos craneales Sustancias extrañas en LCR

AUMENTO IMPORTANTE

Estasis en la resorción del LCR Mayor permeabilidad de la barrera sangre-LCR Degeneración tisular

2.

GLUCOSA

La concentración de glucosa es la mitad de los niveles sanguíneos ( 50 – 80 mg / dl )
Aumenta : Disminuye : diabetes mellitus uso aumentado debido a la presencia de leucocitos o gérmenes en el LCR

3. LACTATO DESHIDROGENASA ( LDH ) -origen-

difusión de sangre gérmenes, células ( leucocitos, células Tumorales )

Se utiliza para el diagnostico diferencial de una meningitis bacteriana y vírica Aumenta en hemorragias subaracnoideas, leucemias y linfomas o carcinomas metastáticos del SNC 4. ADENOSIN DESAMINASA ( ADA ) Diagnostico de meningitis tuberculosa Valor > 9 U / L 5. TGO Aumenta en meningitis , hemorragias y tumores

Se realiza por el método enzimático de la glucosa Oxidasa de manera manual o automatizada ( HITACHI )

Variaciones de la glucorraquia en diversas patologías Glucorraquia Patologías
Meningitis purulentas Meningitis tuberculosa

DISMINUIDA

Carcinomas meníngeos Hipoglucemia

NORMAL AUMENTADA

Infecciones virales Meningitis no infecciosa Diabetes mellitus

Reacción de PANDY : colocar en un tubo 2 ml reactivo ( 10 gr fenol /100 ml agua destiladaestufa 37ºC 2 – dias. Tomar el sobrenadante ) , y agregar 1 gota de LCR. Normal – no hay turbidez o ligera turbidez Anormal – turbidez lechosa ( aumento de globulinas ). Hemorragia, alteraciones inflamatorias o degenerativas, meningitis TBC o sifilítica .

Perfiles analíticos del LCR en diversas patologías del SNC
Patología Muy turbio Normal Claro De 2-5 mm3 . Linfocitos MME 80-90% de granulocitos ME Inicialmente Granulocitos Después linfocitos E Linfocitos 10-1000 cel/mm3 linfocitos 25-2000 Predominio linfocitos Predominan PMN al inicio. Después linfocitos NoE 5080mg/dl 120-130 mmol/l 70-200 mm H2O ME Aspecto Células Proteínas Glucosa Cloruros Presión Otros

Meningitis bacteriana Meningitis vírica

Turbio amarillo coágulos Claro o ligero color amarillo

MME

MD

NoD

E

N

N

NoE

Muy hemorragico en 3 tubos sucesivos

Meningitis Tuberculosa Meningitis Sifilítica Hemorragia cerebral
GLUCOSA PROTEINAS

Claro Raramente turbio Incoloro. A veces coágulos Sanguinolen Hematíes en sedimento Xantocromia Claro o turbio

ME

D

MD

E

E

NoD

N

ME

Bacter + Pbas Serolo +

MME

NoE

NoD

E

Absceso cerebral

E

NoE

NoE

E

Claro o poco turbio

Trombosis cerebral

Claro

NoE Elevadas PT/IgG Elevada A/GT Oligoclonal N o ME

NoE

NoD

E

AST Elev.

Esclerosis múltiple

Claro

E Predominan linfocitos NoE Predominan linfocitos

N

N

E

PROTEINAS
Tumor Cerebral Incoloro o Xantocromico

N

N

E

Celu. tumor

Xantocromico

N = normal E = Elevado ME = Muy Elevado MME = Muy Muy Elevado D = Disminuido MD = Muy Disminuido

ESTUDIO DEL LIQUIDO SINOVIAL
Hoja informe de un análisis de LCR Muestra : liquido cefalorraquídeo VOLUMEN EXTRAIDO : PRESION : ASPECTO : COLORACION : PIGMENTOS : DENSIDAD : EXAMEN CITOLOGICO CRITERIOS DE VALORACION LEUCOCITOS TOTALES : Mononucleares Polinucleares HEMATIES : OTRAS CELULAS : BIOQUIMICA PROTEINAS TOTALES PROTEINOGRAMA Pre-albumina Albumina Globulinas totales Alfa-1 Alfa-2 Beta Gamma Cociente A/GT GLUCOSA CLORUROS LACTATO TGO ADA INMUNOLOGIA AntiVIH FTA-ABS ANTICUERPOS ANTIMICROBIANOS MICROBIOLOGIA Crecimiento de microorganismos Estudio de sensibilidad Hasta 5/ ul Hasta 5/ ul Menos de 1/ul Ausencia Ausencia CRITERIOS DE VALORACION 0,15-0,40 g/L 3-7% 50-70% 20-45% 3-8% 4-10% 7-12% 4-12% Hasta 8 Adultos :0.4-0.75 g/L Niños : 0.5-0.8g/L 120-130mmol/L 1.1-2.8 mmol/L 7-45 mU/mL Hasta 5 U/L CRITERIOS DE VALORACION Negativo No se detectan Ausentes CRITERIOS DE VALORACION 1.Características Físicas 2. Bioquímica 3. Citología 4. Estudio de cristales 5.Examen bacteriológico 6. Examen inmunológico

I. EXAMEN FISICO.
1. ASPECTO Normal amarillo pálido – casi incoloro
Aumento de leucocitos

Fragmento cartílagos
Patológico -TURBIO0- 4 cruces

Procesos inflamatorio

Cristales

Fibrina

Aspecto Normal : amarillo pálido transparente
LECHOSO Artritis tuberculosa Artritis reumatoide crónica Artritis gotosa Lupus eritematoso Artritis infecciosa Artritis supurada de otro origen Artritis por Hemophilus Sinusitis aguda por gota o pseudo gota Procesos inflamatorios Artritis traumática Tumores sinoviales Artropatía neurogenica Diatesis hemorrágicas Punción traumática

PURULENTO VERDOSO AMARILLO INTENSO

ROJO SANGUINOLENTO

2. VISCOCIDAD Y FILANCIA PRUEBA DEL COAGULO DE MUCINA Normal Patológico Procedimiento 1. 2. Dejar gotear el liquido desde una jeringa desprovista de la aguja , a un tubo de ensayo Se observa si cae gota agota formando un filamento en su caída……….VISCOCIDAD NORMAL liquido viscoso , pegajoso al tacto disminuye la viscosidad 1. 2. 3. Colocar en un tubo 2 ml de acido acético 10 % Adicionar una gota de liquido sinovial Normal, si se observa un coagulo o precipitado firme Patológico , si el coagulo es blando que se fragmenta fácilmente o se observa una suspensión turbia sin coagulo. ( enfermedades inflamatorias activas )

II. EXAMEN CITOLOGICO
1. RECUENTO CELULAR

***FILANCIA Estudio complementario de la viscosidad Procedimiento 1. 2. 3. S coloca una gota de liquido sinovial entre el dedo pulgar y el dedo índice y se presiona Se separan los dedos Se debe observar un filamento de 3 a 6 cm de longitud

Normal Patológico

10 – 200 células / ul ( casi todos leucocitos ) > 200 leucocitos / ul

Procedimiento 1. 2. Homogeneizar muestra Dilución si es necesario ( 1/20 o 1/50 o 1/ 100 ) Con suero fisiológico al 0.1 % de azul de metileno Reposar 10 minutos, antes de llenar la cámara de Neubauer Llenar cámara de recuento Observar al microscopio con 10 x para comprobar la distribución homogénea. Observar con 40 x y se cuentan 4 cuadrados grandes de las esquinas ( leucocitos) Calculo : Nº de células contadas = NC

Una filancia disminuida se observa cuando el filamento formado es menor de a 3cm

3. 4. 5.

VISCOSIDAD NORMAL :Elevada aunque depende de la articulación 6.

DISMINUIDA

SE MANTIENE ELEVADA

Edad Derrames articulares inflamatorios Infecciones Derrames traumáticos Derrames de las artrosis

Nº células(leucocitos) / ul = NC x2.5x Dilución ( inversa)

Si el liquido sinovial es hemorrágico, lisar hematíes utilizando una solución hipotónica (0.3% ), Hematíes de cuantifican de manera cualitativa , ausencia o presencia ( escasos, abundantes , muy abundantes )

2. RECUENTO DIFERENCIAL. Polimorfonucleares Mononucleares 7 – 10 % ( aceptable hasta 25 % ) 70 % Linfocitos Monolitos 15 - 35 % 35 - 55 %

III. INVESTIGACION DE CRISTALES.
El liquido sinovial debe recogerse sin anticoagulantes o preservantes ( EDTA u Oxalato de calcio ) porque pueden formar cristales que pueden dar falsos resultados .En el procedimiento para observar cristales : 1. Se utiliza un microscopio óptico convencional. También se puede utilizar un microscopio de luz polarizada, donde los cristales se observan mas brillantes y birrefrigentes. 2. Se deposita una gota de liquido en una lamina porta objetos limpio. 3. Se cubre con una laminilla cubre objeto, realizando una ligera presión 4. Se absorbe el liquido sobrante con papel filtro 5. Se sella con barniz el borde de la laminilla para evitar la desecación 6. Observa al microscopio ( 40 x)

Células sinoviales Células plasmáticas Otras células Procedimiento 1. 2. 3. 4. Normal Patológico

3–5% 10 % hasta 7 %

Tinción directa de liquido sinovial o tinción del sedimento obtenida por centrifugación Elaboración del frotis Tinción – Wrigth Estudio morfológico celular – 100 x

< 25 % PMN Aumento de PMN ---- Inflamación e infecciones articulares.

CELULAS AR…. Leucocitos PMN con inclusiones citoplasmáticas abundantes y oscuras que contienen IgG e IgM ( FR ). Se presentan en pacientes con Artritis reumatoide ( no son especificas de esta patología ), gota, artritis septicas . CELULAS LE ….Son neutrofilos cuyas vacuolas contienen material nuclear Se presentan en la artritis del Lupus Eritematoso.

Urato monosodico

Pirofosfato calcico

Hidroxiapatita

Colesterol

CRISTAL
URATO MONOSODICO

ESTRUCTURA Alargados con forma de agujas de tamaño variable Birrefringencia positiva Abundantes en el líquidos sinovial de las articulaciones Inflamadas flotando libres o en el citoplasma de neutrofilos Tienen forma de barra, bastones o romboides. Localizados dentro de los leucocitos y fuera de ellos Pueden ser muy escasos Birrefringencia positiva

PATOLOGIA

MUESTRA LIQUIDO SINOVIAL
Procedencia:………………………...………………………...……………………. Presencia de derrame………………………...………………………...……….…… Volumen extraído ………………………...………………………...……………… Aspecto………………………...………………………...………………………..... Viscosidad /Mucina………………………...………………………..........................

GOTA
PSEUDOGOTA

PIROFOSFATO CALCICO

EXAMEN CITOLOGICO
LEUCOCITOS TOTALES………………..neutro/mm3 Mononucleares ………………………...% Polinucleares ………………………...…% hasta 200 75 – 90 % 10 – 25 %

HIDROXIAPATITA

Brillantes con el contorno irregular y de muy pequeño tamaño. Forma de vara o aguja. Aislados solo visibles al microscopio electrónico. Se ven agregados en masas brillantes no birrefringentes en derrames

ARTRITIS

FORMULA LEUCOCITARIA
Segmentados…………..…..% Cayados…………………....% Eosinofilos………………...% Linfocitos……………….…% Monolitos……………….…% Plasmocitos………………..% Fagocitos…………………..% Células sinoviales………….% 5 – 10 % 0–1% 0–1% 15 – 35 % 35 – 55 % 8 – 10 % hasta 7 % hasta 5 % Ausentes

COLESTEROL

La forma habitual es en placas finas. En procesos crónicos, forma de agujas o romboides. Tamaño mayor que los anteriores

ARTRITIS REUMATOIDE (ocasionalmente)

IV. EXAMEN QUIMICO
1. PROTEINAS Normal : 15 – 30 gr / L Patológico : procesos articulares artritis reumatoide Artritis séptica gota Artritis - TBC

HEMATIES ..…………………… CRISTALES
Presencia de : …………………...

Ausentes

EXAMEN QUIMICO
Glucosa …………………….... g/l Proteínas totales …………….. g/l 0.55 - 1.0 g/l 5 – 30 g/l 20 – 30 mg/dl

Se realiza de manera automatizada ( HITACHI ) 2. GLUCOSA Concentración similar al plasma sanguíneo o Ligeramente menor Si disminuye a la mitad sugiere infección bacteriana Se realiza de manera automatizada ( HITACHI ) 3. LDH Indica alguna inflamación > de 30 mg/dl …inflamación

Lactato ………………….…..

mg/dl

MICROBIOLOGICO
Sedimento………………………...………………………...………………………... Cultivo………………………...………………………...………………………........

INMUNOLOGICO
Complemento………………………...………………………...…………………….

ESTUDIO DEL LIQUIDO PLEURAL , PERICARDICO Y PERITONEAL
Hallazgos en el LIQUIDO SINOVIAL en las patologías mas frecuentes

TRASUDADO
TIPOS
Valores Normales
No inflamatorio Inflamatorio

EXUDADO
Infección bacteriana o nicótica Neoplasia Traumatismo Enfermedad Reumatoidea Lupus Eritematoso Sistémico
Observación del aspecto

Séptico

Hemorrágico

Insuficiencia congestiva Cirrosis hepática

Aspecto Color Viscosidad Leucocitos % de PMN Proteínas g/l Glucosa

Transparente Claro Elevada Menor de 200 Menos del25% 15 – 30 Similar a glucemia

Transparente Amarillento Elevada 20-2000 Menos del25% 15 – 30 Similar a glucemia No No

Turbio Amarillo Disminuida 2000-75000 Mas del 50% Mas de 30 Reducida

Purulento Amarillo7marro Disminuida Mayor100000 Mas del 75 % Mas de 30 Muy reducida

Turbio Rojizo Elevada Hematíes Según sangre Mas de 30 Similar a glucemia

HIpoproteinemia ( síndrome nefrotico)
FISICO

ANALISIS DE LOS

CITOLOGICO

Recuento de hematíes Recuento de leucocitos Recuento diferencial

Cristales Gérmenes

No No

Si No

No Si

Si No

DERRAMES SEROSOS

BIOQUIMICO

Proteínas totales ADA Tinciones , cultivos. Demostración del bacilo tuberculoso.Enterobacterias y anaerobios de tubo digestivo

*Artrosis *Artropatías postraumáticas * Artropatías

*Artritis por cristales *reumatismos inflamatorios

*Artritis sépticas

*Traumatismos articulares *Diatesis hemorrágicas *Artropatías neuropaticas *Neoplásicas

MICROBIOLOGICO

PATOLOGIAS

nerviosas * Artropatías metabólicas *Osteonecrosis

Las muestras de líquidos serosos se toman con tubos heparinizados ( tubos con 2 – 3 gotas heparina sodica 1% con 10 ul de liquido y se mezcla rápidamente )

ASPECTO
Transparente.Amarillo palido.Volumen < 20 ml Transparente.Amarillo palido.Volumen > 20 ml Turbio purulento

PATOLOGIAS
Normal Insuficiencia cardiaca congesti Infección bacteriana Tuberculosis Enfermedades Reumatoideas

I. EXAMEN CITOLOGICO
1. RECUENTO DE HEMATIES Y LEUCOCITOS 1) Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ), si esta turbio 2) Llenar cámara de Neubauer 3) Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las esquinas .

Liquido Pleural

Aumento del numero de leucocitos Inflamación séptica o no Lechoso Derrame quiloso Hemorrágico

Quilotorax Neoplasia de pulmón Neumonía

*Si la sangre procede de la punción traumática , no esta uniformemente distribuida*

Traumatismo toracico Infarto pulmonar Pancreatitis

Transparente.Amarillo palido.Volumen < 50 ml Turbio Empañado

Normal Peritonitis Infección bacteriana Traumatismo Ulcera duodenal perforada

Liquido Pericardico
Verdoso Presencia de bilis Prueba de bilirrubina para confirmar Lechoso Derrame quiloso Hemorrágico *Diferenciar de manchas de sangre * Purulento Mucinoso

Retículo de la cámara de Neubauer. Zona de recuento

Intestino perforado Colecistitis o vesícula perforada Pancreatitis aguda Obstrucción linfática Síndrome nefrotico

Dirección del contaje de leucocitos cuentan los dos leucocitos sobre las líneas gruesas

4) Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )

Nº de células contadas = NC

Neoplasia Patología infecciosa Seudoxantoma peritoneal Pericarditis Infección bacteriana. Tubercul. Artritis reumatoidea .LE Carcinoma Aneurisma hemorrágico Obstrucción del conducto torác

Nº células / ul = NC / 4 x 10
2. RECUENTO DIFERENCIAL O ESTUDIO MORFLOGICO 1. concentración de células por centrifugación lenta ( 10 ‘ ) 2. Se resuspende el sedimento celular en 1-5 ml de tampón fosfato isotónico ph = 7.4 3. Tinción con colorante wrigth 4. Recuento diferencial , se distingue el porcentaje de linfocitos, neutrofilos , monolitos y eosinofilos ……………..PARA REALIZAR EL ESTUDIO DE CELULAS TUMORALES SE UTILIZA COLORACION PAP …………….

Liquido
Hemorrágico

Peritoneal

Lechoso Derrame quiloso Purulento

Infección bacteriana.

II. EXAMEN QUIMICO
Análisis Químico 1 – 5 ml

LIQUIDO PLEURAL - Proteína - ADA - Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Pleuritis TBC > 45 U/L equipo automatizado ( HITACHI ) Anormal < de 60 mg/dl o 40 mg/dl menor que la glucosa serica Disminuye exudado Normal trasudado equipo automatizado ( HITACHI ) Liquido pleural lechoso( QUILURIA ) Tg ( < 50 mg/dl ) Pseudoquilotorax Colesterol aumenta ( TBC o reumatoideo)

Centrifugar
Ph=7.4

Citología

CITOLOGIA
Liquido Pleural
Hipercelularidad ( >1000 leucocitos/ul) Linfocitos ( mas del 50% ) Escasez de células mesoteliales Hipercelularidad ( >10000 leucocitos/ul) Predominio de neutrofilos Eosinofilia Células malignas Células LE Raras

PATOLOGIAS
Enfermedades de evolución crónica Tromboembolismo pulmonar Enfermedades inflamatorias agudas (Pleuroneumonias) Lesión pleural inespecífica Derrames neoplásicos Lupus eritematoso sistémico

-Triglicéridos

LILIQUIDO ASCITICO - Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Igual concentración al del suero Disminuye < 60 mg/dl :peritonitis, carcinomas, TBC equipo automatizado ( HITACHI ) Aumenta al doble en una perforación del intestino delgado, apéndice perforado.

- Fosfatasa Alcalina

Trasudado

Liquido Pericardico

Recuento > 250/uL Recuento > 500/uL Mas del 50% neutrofilos Celularidad Variable Presencia de hematíes

Infección o Tumor

Peritonitis Peritonitis infecciosa piógena
Tumor Insuficiencia cardiaca congestiva

LILIQUIDO PERICARDICO - Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Disminuye : pericarditis bacteriana, Inflamaciones no sépticas ( enfermedad reumatoide, tumor )

Eosinofilia

Linfoma abdominal Quiste hidatídico desgarrado

Liquido Peritoneal

Pericarditis bacteriana Recuento leucocitario > 1000 /ul Predominio de neutrofilos Recuento leucocitario > 1000/ul Predominio de linfocitos Síndrome infarto posmiocardico Algunas pericarditis víricas

REACCION DE RIVALTA : colocar en un tubo 5 ml de agua destilada y 0.1 ml de acido acético glacial se mezcla bien , se deja caer una gota de liquido en examen. TRASUDADO– no hay turbidez o ligera turbidez
EXUDADO – nube blancoazulada en la estela de la gota como humo de cigarrillo ( aumento de globulinas ).

TRASUDADO Características Aspecto Densidad Proteínas
Proteína liquido/ Proteína serica Claro, trasparente

EXUDADO
Inflamatorio Empiema
• • •

PROTEINA DE BENCE JONES
Proteína de bajo peso molecular y de sensibilidad térmica, Parapoteina Presente en casos de mieloma múltiple( fase Terminal ) , neoplasias óseas , osteomalacia y leucemias linfoides y mieloides crónicas.

Turbio

Purulento

1,003-1,019
Menos de 3 g/dl

Superior a 1,020 Mas de 3g/dl Mayor de 0.5

Procedimiento :

Menor de 0.5

1. 2.

Se colocan en cada uno de tres tubos 5 ml de orina filtrada. En el primer tubo se coloca una gota de acido acetico al 33 % En el segundo tubo se colocan dos gotas de acido acetico al 33 % El tercer tubo ( blanco ) no recibe acido SE calienta gradualmente en baño maria, se agitan los tubos y se observa la aparición de turbidez.

Glucosa LDH LDH liquido/ LDH serica pH Leucocitos

Como la serica
Menos de 200UI/L

Menos de 60mg/dl Mas de 200UI/L
5.

3. 4.

Menor de 0.6 Mayor de 7.3
Menor de 1.000

Mayor de 0.6 Menor de7.3 Mayor de 1.000 Mayor de 25.000

6. 7.

5.

La proteína de BJ aparece entre 40 y 60 ª C y desaparece a mayor temperatura

***Otras proteínas precipitan si la temperatura pasa de 65ºC. Si se encuentran otras proteínas estas deben ser calentadas hasta ebullición y filtradas por papel en caliente, donde quedan retenidas. La proteína de BJ aparece nuevamente cuando el filtrado alcanza unos 50ªC aproximadamente*** Se colocan 5 ml de orina en un tubo y cuidadosamente 2ml de HCl concentrado por sus paredes. En la zona de separación de ambos fluidos aparece un anillo de color blanco. Puede diferenciarse de otras proteínas presentes, pues la proteína de BJ da positiva la prueba después de diluir la orina

PATOLOGIAS

Trastornos Hemodinamicos

Enfermedades que lesionan Directamente la serosa

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