TEMA: DETERMINACION DEL TIEMPO DE PROTROMBINA Y

TROMBOPLASTINA.

OBJETIVOS

Objetivo General
Determinar el Tiempo de Protrombina y Tromboplastina para el
anlisis de enfermedades hematolgicas.
Objetivos Especficos
Analizar las causas que producen aumento en el tiempo de
protrombina.
Determinar la utilidad del Tiempo parcial de Tromboplastina en la
deteccin de alteraciones hemostticas.
MATERIALES:
Tubos vacutainer de tapa celeste
Torniquete
Torundas de Alcohol
Lpiz graso
Tubos de ensayo pequeos
Micropipetas de 100 y 200 ul
Papel absorbente
Gradilla
Puntas desechables para micropipeta
Equipo de Bioseguridad: Mascarilla, gorro, mangas plsticas, guantes,
camiseta y pantaln de color azul marino, zapatos blancos cerrados y
mandil.
EQUIPOS
Cronometro
Bao Mara
Centrifuga
REACTIVOS
Reactivo de TP
Reactivo de TTP
MUESTRA
Sangre venosa

MARCO TEORICO
Protrombina

La protrombina es una protena del plasma sanguneo, forma parte del

proceso de coagulacin mediante la reaccin de sta con la enzima
"tromboplastina", una enzima ubicada en el interior de los trombocitos,
liberada al romperse la frgil membrana celular de los trombocitos. En esta
etapa tambin participa el Ca++ (calcio), actuando como factor
coenzimtico.

La protrombina es creada en el hgado al igual que la mayora de los

factores coagulantes, tambin se denomina factor II de la coagulacin. Se
ha descubierto que un porcentaje reducido de personas sufren una
mutacin al gen de la protrombina, siendo ms propensos a una trombosis.
Alteraciones del Tiempo de Protrombina

El tiempo de Protrombina puede aumentar debido a diferentes causas

entre las ms mencionadas tenemos:
Enfermedades Hepticas, como la cirrosis heptica y la insuficiencia
heptica aguda
Dficit de vitamina K, esto debido a una mala absorcin o a la ingesta
de antibiticos.
Monitorizacin a pacientes con anticoagulantes
Hepatopatas
Antes de Cirugas
Valores Normales
Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre
diferentes laboratorios.
Edad
Adultos
Nios Prematuros
Recin nacidos

Valores Normales
10 14 segundos
12 21 segundos
12 20 segundos

Patologas
Se produce un aumento en el tiempo de Protrombina cuando existe:
Deficiencia de factores V, VII y X
Deficiencia de vitamina K
Hepatitis
Alcoholismo
Medicamentos
Se produce disminucin en el tiempo de Protrombina cuando existe:
Hiperfuncin ovrica
Dieta rica en grasas
Tromboplastina
Es un examen que mide la capacidad de la sangre para coagular,
especficamente la va intrnseca (que implica al factor IX y cofactores) y la
va comn (factores X y II, y cofactores) de la coagulacin. Est enfocado en
un paso especfico del proceso de coagulacin.
Adems de detectar anormalidades de la coagulacin, el TTP se usa tambin
para controlar el efecto del tratamiento con heparina, uno de los
anticoagulantes ms utilizados. Se usa conjuntamente con el tiempo de
protrombina (PT), que mide la va extrnseca (que implica al factor VII y el
factor tisular)

Cuando se realiza

Este examen que va junto al tiempo de protrombina se utiliza para:

Detectar problemas de sangrado
Vigilar personas con tratamientos de anticoagulante
Antes de realizar cirugas
Valores Normales
Los tiempos de coagulacin dependen de numerosos factores, entre
los que se incluyen la temperatura, la calidad del agua, el pH, la carga
inica, el anticoagulante, la toma de muestras, la conservacin de
muestras y la poblacin de pacientes. Cada laboratorio ha de
establecer lmites especficos normales para cada prueba.
Edad
Adultos

Valores Normales
30 45 segundos

Patologas
Se produce un aumento del tiempo parcial de tromboplastina cuando
existe:
Cirrosis
Coagulacin Intravascular diseminada
Deficiencia del factor XII
Hemofilia A y B
Hipofibrinogenemia
Mala Absorcin
Enfermedad de Von Willebrand
Tiempo de Protrombina
Principio
El PT de un paso mide el tiempo de coagulacin del plasma despus
de adicionar una fuente de factor tisular (Tromboplastina) y calcio. La
recalcificacin del plasma en la presencia del factor tisular genera la
activacin del factor Xa con la consecuente formacin de trombina y
por ultimo un coagulo de fibrina.
Tiempo Parcial de Tromboplastina
Principio
El Tiempo parcial de Tromboplastina activada se realiza por la adicin
a la muestra del reactivo de aPTT que contiene un activador de
plasma y fosfolpidos. Los fosfolpidos sirven como un sustituto de las
plaquetas. Esta mezcla se incuba para una activacin, despus se
recalcificacin cloruro de calcio y se contabiliza el tiempo de
formacin del coagulo.

PROCEDIMIENTO
Reactivo de TP
Extracto de cerebro de conejo 2.6 %

CaCl2.. 0.13 %
Sales y estabilizadores
Mtodo de TP
Una vez seleccionada la vena se procede a limpiar el sitio de puncin.
Se realiza una pequea puncin y se extrae con vacutainer 4.5 ml de
sangre en un tubo con citrato de sodio.
Despus se lleva a centrifugar la sangre y se separa el plasma.
Luego como reactivo de TP viene liofilizado, es decir en polvo, para
utilizarlo se coloca 2ml de agua destilada, se agita suavemente hasta
que se disuelva completamente y se lo deja incubar por 15 minutos.
Colocar en un tubo de ensayo el plasma ya separado.
En otro tubo colocar 200ul de reactivo de TP.
Estos dos tubos se los lleva al bao Mara a 37C de 3 a 5 minutos.
Transcurrido este tiempo se aade 100ul de plasma en el tubo que
contiene reactivo de TP, apenas se aade el plasma se activa el
cronometro y mezclo sin sacar del bao Mara.
Pasado unos 7 segundos aproximadamente luego de ver activado el
cronometro se saca el tubo y se observa hasta que se forme la red de
fibrina.
Reactivo de TTP
Extracto de cerebro y fosfolpidos 0.007 %
cido Elgico
0.0037 %
Bufferes, sales y estabilizadores
Mtodo de TTP
Una vez seleccionada la vena se procede a limpiar el sitio de puncin.
Se realiza una pequea puncin y se extrae con vacutainer 4.5 ml de
sangre en un tubo con citrato de sodio.
Despus se lleva a centrifugar la sangre y se separa el plasma.
Se enumeran 2 tubos uno para reactivo de TTP y otro para Cloruro de
Calcio.
En un tubo se colocan 100ul de reactivo de TTP a este mismo tuvo le
adiciona 100ul de plasma y se mezcla suavemente.
En otro tubo colocamos el cloruro de calcio.
A los dos tubos se los lleva al bao Mara a 37C de 3 a 5 minutos.
Luego se coloca 100ul de cloruro de calcio en el tubo que contiene
plasma y reactivo de TTP, apenas coloco el cloruro de calcio activo el
cronometro y mezclo el tubo dentro del bao Mara por 25 segundos.
Transcurrido este tiempo saco el tubo y observo hasta que se formen
los filamentos de fibrina.
Resultados
Responsables

TP

TTP

Doctora

11 segundos

44 segundos

Alumno

13 segundos

41 segundos

Interpretacin de Resultados
Tiempo de Protrombina (PT)
En este examen el rango de error establecido por la docente fue de
1 por lo que comparando el resultado obtenido por la docente que es
de 11 segundos con el resultado obtenido por mi persona que es de
13 segundos y tomando en cuenta el rango de error mi valor esta
fuera del rango establecido por la doctora. Cabe destacar que ambos
valores se encuentran dentro de los valores de referencia que son de
10 a 14 segundos.
Tiempo Parcial de Tromboplastina (TTP)
En este examen el rango de error establecido por la docente fue de
1 por lo que comparando el resultado obtenido por la docente que es
de 44 segundos con el resultado obtenido por mi persona que es de
41 segundos y tomando en cuenta el rango de error mi valor esta
fuera del rango establecido por la doctora. Cabe destacar que ambos
valores se encuentran dentro de los valores de referencia que son de
30 a 45 segundos

CONCLUSIONES

El tiempo de Protrombina puede aumentar debido a diferentes causas

entre las ms mencionadas tenemos:
Enfermedades Hepticas, como la cirrosis heptica y la insuficiencia
heptica aguda
Dficit de vitamina K, esto debido a una mala absorcin o a la ingesta
de antibiticos.
Monitorizacin a pacientes con anticoagulantes
Hepatopatas
Antes de Cirugas
El tiempo parcial de Tromboplastina se utiliza para detectar anormalidades
de la coagulacin, el TTP se usa tambin para controlar el efecto del
tratamiento con heparina, uno de los anticoagulantes ms utilizados. Se usa
conjuntamente con el tiempo de protrombina (PT), que mide la va
extrnseca (que implica al factor VII y el factor tisular)

LIMITACIONES
No se encontr ninguna limitacin

RECOMENDACIONES
Homogenizar bien la sangre con el anticoagulante, para evitar la
coagulacin de la misma.
Tener mucha atencin en el momento en que empieza a formarse el
coagulo de fibrina en caso del TP y los filamentos de fibrina en caso
de TTP para evitar dar resultados errneos.

Pipetear adecuadamente para que los resultados no se alteren.

Evitar que el tiempo en que estn los tubos en el bao Mara sea
mayor a 5 minutos.

BIBLIOGRAFIA

Burneo, R. Principios de Laboratorio Clnico. 1era Edicion. LojaEcuador.Cientifica Medica. 1992. Pgs. 182-183
YOVISNA, Manual Bsico de Laboratorio Clnico, disponible en,
http://www.monografias.com/trabajos14/labclinico/labclinico.shtml