Enterobacter

sakazakii
De la Cruz Mendieta Dulce Adriana
Esquivel Medina Alicia Karina

Tambin denominado anteriormente

Enterobacter cloacae de pigmento
amarillo, y actualmente Cronobacter
sakazakii.
Gnero: Enterobacter
Especies: E. aerogenes, E.
cloacae, E. sakazakii, E.
agglomerans y E. gergoviae
son PATGENOS OPORTINISTAS.

Microorganismo
Bacilo Gram negativo
No esporulado
Presenta movilidad por flagelo.
Mesfilo; Temperatura ptima de crecimiento: 3037C
Anaerobio facultativo
Quimioorgantrofo.
Metabolismo fermentativo y respiratorio.

Crecimiento y supervivencia
pH alrededor de 6 o 7
Termotolerante
Permanece viable a temperaturas
entre 5.8 y 8 C, no se desarrolla a
4 CValor Z (C)
Valor D (min)
52
54
56
58

54.8
23.7
10.3
4.2

60

2.5

Pruebas bioqumicas
Prueba
Rojo de metilo
VogesProskauer
Lisina
Arginina
Ornitina
Lactosa
Hidrlisis de
gelatina
Ureasa

Resultado
+
+
+
+
-

Hbitat
Existe una escasez de datos respecto a
la ecologa microbiana de E. sakazakii.
Muytjens y Kollee informaron que no
fueron
capaces
de
aislar
el
microorganismo del agua de superficie,
tierra, lodo, madera en descomposicin,
grano, roedores, animales domsticos,
ganado vacuno o leche de vaca sin
pasteurizar.
Por lo tanto, el nicho ambiental preciso

Sin embargo se ha aislado de los

materiales clnicos, incluyendo el
lquido cefalorraqudeo, sangre, piel,
heridas, de las vas respiratorias
(esputo, la garganta y la nariz), el
tracto digestivo y la orina.
Los investigadores tambin han
aislados de E. sakazakii en la leche
reconstituida basada en la frmula
infantil.(1)

(1) http://www.defendingfoodsafety.com/food-safety-law/common-food-borne-pathogens/e-sakazakii/

Va de transmisin
Productos infantiles deshidratados,
debido a su contaminacin despus
del tratamiento trmico.

Mecanismo de patogenicidad
Produce enterotoxinas
Aerobactinas (destruccin de la
clulas adyacentes) y
Hemaglutininas (adhesin)
Sin embargo, se desconoce su
mecanismo de patogenicidad.
Lehner A, Stephan R. Microbiological, epidemiological and food safety aspects of Enterobacter sakazakii. J
Food Prot. 2004;67:2850-7.

Factor de virulencia
El lipopolisacrido (forma parte de la
membrana externa) en particular el lpido A,
tambin llamado endotoxina.
Mecanismos que le permiten adaptarse a
sobrevivir en los productos desecados:
Tolerancia a los bajas concentraciones de
vapor de agua libre ( aw ), poniendo en
juego un mecanismo bioqumico adaptativo ,
permitindole ser ms resistente en su fase
estacionaria al stress osmtico y a la
desecacin, que otras bacterias que forman
parte de la misma familia , como Escherichia

Resistencia
Antimicrobianos de la familia
de los betalactmicos, por la
formacin
de
enzimas
betalactamasas de espectro
expandido por el mecanismo
de induccin frente al mismo.

Deteccin
El nivel de deteccin:
Rango de 0.36 a 66 UFC/100g
Dadas las condiciones de preparacin de
la frmulas y los tiempos que a veces
permanecen reconstituidas, permiten un
crecimiento
exponencial
del
microorganismo, llegando a niveles de
concentracin de unidades formadoras
de colonias por gramo, suficientes para
causar enfermedades en poblacin de

Supervivencia a largo plazo en los

preparados en polvo para lactantes

Dosis Infectiva
Niveles bajos de E. sakazakii en
los preparados en polvo para
lactantes.
< 3 UFC/100 g pueden aparecer
infecciones.

Enfermedad
Ha estado relacionada con casos de pequeos brotes
de sepsis neonatales, meningitis, cerebritis y
enterocolitis necrotizante.
Se han notificado tasas de mortalidad debida a la
infeccin por E. sakazakii de hasta el 50%.
La enfermedad suele responder a la terapia con
antibiticos.
Tambin se ha informado de la existencia de lactamasas y cefalosporinasas procedentes de E.
sakazakii.
Son
bien
conocidas
las
secuelas
neurolgicas a largo plazo.

Meningitis
Es una inflamacin de las membranas que cubren el
cerebro y la mdula espinal. La meningitis
bacteriana puede resultar en dao al cerebro,
prdida del odo o discapacidad para el aprendizaje.
Sntomas:
En personas mayores de dos aos:
Fiebre alta
Dolor de cabeza
Rigidez de cuello

En recin nacidos (difcil detectarlos)

Nusea
Vmito
Observar luces
Confusin
Somnolencia.
Estos sntomas pueden aparecer despus de
varias horas, o pueden tomar de 1 a 2 das.

En lactantes
Pueden parecer lentos o inactivos
Vmito
Estar irritables o ser alimentado de forma
deficiente.
A cualquier edad los pacientes pueden
tener convulsiones

Enterocolitis necrotizante
Es una enfermedad grave que afecta a
recin nacidos, en especial prematuros.
Se presenta como un sndrome
gastrointestinal y sistmico.
Se caracteriza por necrosis de la
mucosa o de capas incluso ms
profundas del intestino, sobre todo en
el leon terminal y con menos
frecuencia del colon y del intestino

Sntomas:
Distensin e hipersensibilidad abdominal
Sangre en heces
Intolerancia a la alimentacin
Apnea (problemas respiratorios que se caracterizan por la
obstruccin de las vas areas)
Letargia (estado de somnolencia profunda y prolongada. )
En casos avanzados
Acidosis
Sepsis
Shock.
Su fisiopatogenia no est todava completamente aclarada.

La va final es una cascada

inflamatoria que se
desencadena en recin
nacidos con determinados
factores de riesgo y que
lleva a una necrosis de la
pared intestinal.

Brotes
Se ha reportado E. sakazakii como
agente causal de meningitis en
pases como Suiza, Espaa y Estados
Unidos.
El primer brote
de meningitis
causada por E. sakazakii fue
reportado por Urmenyi y Franklin en
1961.(1)
(1) Urmenyi, A.M.C. and Franklin, A.W. 1961. Neonatal death from pigmented coliform infection. Lancet 1:313315.

1983, Muytjens Simmons et al., identificaron a

E. sakazakii como agente etiolgico asociado
a un brote ocurrido en Holanda, donde los
utensilios empleados para la preparacin de la
frmula infantil estuvieron implicados en su
origen.
Se report en un estudio en el Hospital de
Baltimore, Estados Unidos, en el cual los
utensilios utilizados para la preparacin de las
frmulas infantiles estaban contaminados con
E. sakazakii; debido a esto el hospital tom
medidas de control con el fin de evitar la
presencia de este microorganismo (2)
(2)Iversen C, Forsythe S, Risk profile of Enterobacter sakazakii, an emergent pathogen associated with infant
milk formula. T in Food Science 2003;14:443-54.

2004, En Francia y Nueva Zelanda, dos brotes infecciosos

protagonizados por Enterobacter sakazakii, bacteria
presente en leches en polvo para lactantes causaron la
muerte de tres bebes y dejaron con secuelas neurolgicas
a otros cuatro.
2005, En Argentina Enterobacter sakazakii fue hallada en
un lote de la leche Enfamil AR, importada de Mxico, lo
que motiv, a principios de esa semana, su retiro del
mercado y la prohibicin de su consumo.(3)
2008, En Mxico, 2 nios hospitalizados por E. sakazakii,
el varn muri y la mujer permaneci hospitalizada,
ambos nios haban sido alimentados con leche en polvo
y otros alimentos. Tenan diferentes cepas de la bacteria.
(4)
(3) La Nacin Len. Fecha de consulta: 20 de marzo de 2010,
Disponible en http://www.lanacion.com.ar/nota.asp?nota_id=725151
(4) http://www.enterobactersakazakiiblog.com/articles/e-sakazakii-watch/

Control
Durante la produccin
Monitorear materias primas, especficamente
aquellos ingredientes que no requieren
tratamiento trmico antes de la mezcla.
Reducir el nivel de las enterobacterias en las
zonas utilizadas para la produccin, a fin de
evitar contaminacin posterior.
Revisar las instrucciones para la preparacin
de la leche, lo que sugiere una mayor
temperatura de agua, pero no superior a
80C, para la solubilidad (>70C). Una
temperatura demasiado alta podra daar la
caractersticas nutricionales del producto.

En casa
Usar
biberones
limpios
y
descontaminados.
Preparar
los
alimentos slo lo suficiente para la
comida, evitar la preparacin de
despus de las comidas, si es
necesario limitar el nmero de comidas
preparadas con antelacin a 1o 2.
Evite
dejar
sin
utilizar
leche
reconstituida
en
temperatura
ambiente.
Conservar en el refrigerador el
producto reconstituido.

En hospitales/ guarderas
Esterilizar todos los utensilios utilizados para
la preparacin con tratamiento trmico (por
ejemplo, el lavado en lavavajillas) o con
autoclave.
Siempre que sea posible uso de utensilios
desechables.
Emplear
personal
cualificado
y
especializado.
Almacenar el producto reconstituido en un
refrigerador.
Reducir en lo posible el paso del tiempo
entre la reconstitucin del producto y su uso.

Deteccin
Pesar 333g muestra
Diluirlo en Agua destilada estril, agitar suavemente hasta que
el polvo es uniformemente suspendido
10 ml de la suspensin + 90 ml de caldo EE estril. Incubar a
36C durante 24h
Se inocula 0,1 ml en placas de agar VRBG por duplicado
***Si se sospecha que la frmula en polvo para lactantes
contiene un alto nmero de E. sakazakii, el caldo EE se
deben diluir a 10-4 a 10-6
con caldo EE estril.)
Aislamiento: Inocular colonias caractersticas de E. sakazakii
en una placa de TSA
Incubar a 25C durante 48-72 horas.
Realizar Pruebas Bioqumicas

Medios de cultivo
Caldo de Enriquecimiento de
Enterobacterias (EE)
Se emplea para el enriquecimiento selectivo de
todas las Enterobactericeas en productos
alimenticios y otras muestras de inters
Por la presencia de la Bilis de buey y del Verde Brillante
se inhibe el crecimiento de la flora indeseable.
A su vez la Glucosa permite el crecimiento de todas las
Enterobactericeas, tanto lactosa-positivas como
lactosa-negativas.
La mezcla de fosfatos tampona el medio y evita que
por efecto del descenso del pH se pudieran frenar los
crecimientos.

Composicin:
Bilis de Buey 20,0 g.
Glucosa 5,0g
Peptona de
Gelatina10,0g
Potasio di-Hidrgeno
Fosfato 2,0g
di-Sodio Hidrgeno
Fosfato 8,0g
Verde Brillante 0,015g

http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm

Agar Soja y Tripticasena (TSA)

Medio muy rico en nutrientes empleado para el
desarrollo de gran variedad de microorganismos.

Por el contenido de peptona de soja y peptona

de casena resulta una aportacin nutritiva que
permite el desarrollo ptimo de un gran nmero
de microorganismos, tanto exigentes como no
exigentes.
La lectura consiste en contar las colonias tpicas
que aparecern con pigmentos amarillos
despus de 48-72 h de incubacin a 25 C.

Fig1.http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/
LaboratoryMethods/ucm114665.htm

Composicin:
Peptona de Soja 5,0g
Peptona de Casena
15,0g
Cloruro de Sodio 5,0g
Agar 15,0g

http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm

Agar bilis rojo violeta glucosa

(VRBG).

Medio selectivo utilizado en la identificacin

presuntiva y enumeracin de enterobacterias en
alimentos, productos lcteos y otras muestras de
importancia sanitaria.
Las sales biliares y el cristal violeta del medio
inhiben la flora acompaante Gram positiva.
La fermentacin de la glucosa hace que vire el
indicador rojo neutro a un color rojo prpura.
Tambin. se produce una precipitacin de las
sales biliares.
La lectura consiste en contar las colonias rojo
prpura rodeadas de una zona de precipitacin
de las sales biliares color violeta.

Fig2.http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/La
boratoryMethods/ucm114665.htm

Composicin:
Extracto de levadura
3,0 g.
Peptona 7,0 g.
Cloruro sdico 5,0 g.
Sales biliares 1,5 g.
Rojo neutro 0,03 g.
Cristal violeta 0,002 g.
Glucosa 10.0 g
Agar 15,0 g.

http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm

Otros medios ( Mtodos

Rpidos)
Agar Chromocult Enterobacter sakazakii
Gracias a su sistema de deteccin cromognico,
basado en la alfa-D-glucosidasa (una enzima
especfica para E. sakazakii) slo las colonias de
E. sakazakii aparecen de color turquesa,
mientras que otras bacterias tienen colonias
incoloras.
El Agar Chromocult Enterobacter sakazakii
permite una deteccin rpida y fiable en tan slo
24 horas
http://www.rapidmicrobiology.com/news/1054h11.php

Fig.3
http://www.rapidmicrobiology.com/news/1054h1
1.php

Medio RAPID'sakazakii
Es un medio cromognico selectivo utilizado para el
aislamiento y deteccin de Cronobacter spp.
(anteriormente clasificados como Enterobacter
sakazakii).
La hidrlisis del sustrato cromognico 5-bromo-4-cloro3-indol glucopiransido conduce a la formacin de
Fig. 4 www.rapidmicrobiology.com/news/1027h
26.php
colonias de color turquesa, tpica.
El medio incluye compuestos cuidadosamente
seleccionados para promover el crecimiento de las
especies de Cronobacter, mientras que suprime la flora
a interferir, dando al medio un aumento de
selectividad.
Sin embargo la flora acompaante no es
completamente inhibida y puede formar colonias de luz
www.rapidmicrobiology.com/news/1027h26.php
violeta o gris.

Referencias
http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMet
hods/ucm114665.htm
http://www.cdc.gov/meningitis/about/faq.html
http://www.sccalp.org/boletin/46_supl1/BolPediatr2006_4
6_supl1_172-178.pdf
http://www.who.int/foodsafety/publications/micro/es_sp.p
df
http://www.fao.org/docrep/009/y5502s/y5502s07.htm
http://ftp.fao.org/codex/ccfh36/fh04_12s.pdf
David Hendricks Bergey,John G. Holt, et. al., Bergeys
manual of Determinative Bacteriology, 9. Edicin, 1994.
http://www.alertanutricional.org/interior.php?num=103
http://www.iss.it/binary/publ/cont/275%20%20ANN_08_39%20Fiore.1224498732.pdf