CONTROL DE

CALIDAD EN
ESPERMOGRAMA
Alvarez M. Soledad
Blanco Hirota Natalia E.
Bajuk M. Milena
Conde Valentino M. Alejandra

Cul es el objetivo del anlisis del

semen?

Predecir la fertilidad potencial
masculina

Identificar causas de infertilidad

Definir el tipo de tcnica de fertilizacin
asistida

Obtencin de la muestra

3 a 5 das de abstinencia sexual

Semen obtenido por masturbacin directa

Envase estril chico de boca ancha

Transporte a temperatura corporal

Remitir dentro de la hora de recoleccin

Examen macroscpico

Volumen

Aspecto

Color

Viscosidad

Licuefaccin

pH

VN: 1.5 - 6.0 ml

VN: 7.2 - 8.0

Examen microscpico

Movilidad espermtica

Recuento espermtico

Presencia de agrupados

Morfologa espermtica

Observacin de elementos celulares
distintos de espermatozoides

Movilidad espermtica
Condiciones para la observacin

Gota de 10l entre porta y cubre de 22x22mm

Estabilizacin por 1 minuto

Platina termostatizada a 37 C

Temperatura del laboratorio entre 21 y 24C

Observacin de 5 campos o al menos 200
espermatozoides

Hacer por duplicado

Movilidad espermtica
Clasificacin:

Mviles

GRADO a (progresiva rpida)

GRADO b (progresiva lenta)

GRADO c (no progresiva, mviles in situ)

Inmviles

GRADO d

Vivos

Muertos (Eosina positivos)

Test de Eosina

VR: < 50%

espermat.
necrosados

Movilidad espermtica
% Promedio

Diferencia lmite

0
1
02 -03
04 - 06
07 - 09
10 - 13
14 - 19
20 - 27
28 - 44
45 - 55
56 - 72
73 - 80
81 - 86
87 - 90
91 - 93
94 - 96
97 - 98
99
100

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1

VR:
Grado a
> 25%
Grado a+b
> 50%

Recuento espermtico
DILUCIONES PARA RECUENTO EN CAMARA DE
NEUBAUER
Espermatozoides por campo de 40 x
ESPERMATOZOIDES DILUCION
< 15
1:5 ME E
15 - 40 1:10 R
40 -200 1:20 A
>200
1:40 MA

SC. DILUYENTE: 50gr NaHCO3

10,0ml de formaldehdo al 36-40%(saturada)
H2O csp 1000ml

Recuento espermtico

Recuento espermtico

Recuento espermtico
Esp /ml=

N x D x 25 x 10000
n de cuadrados contados

N=n de espermatozoides contados

D=inversa de la dilucin empleada
25= nmero total de cuadrados
10.000= factor de correccin para
expresar el resultado en ml
VR: 20x106 esp/ml
40x106 esp/eyaculado

Morfologa espermtica
Tincin: Papanicolaou
Expresin de resultados:

% Normales

% Anormales

OMS 1999 > 15%

Kruger > 14%

Morfologa espermtica

Elementos celulares distintos de

espermatozoides

Clulas Epiteliales del tracto uretral y prstata

Clulas de la espermatognesis (Clulas
germinales inmaduras)

Leucocitos (Peroxidasa +)

Macrfagos

VR:

<5x106 clulas redondas/ml

<1x106 leucocitos/ml

Cun confiables son

los resultados del
anlisis del semen?

Nuestro laboratorio frente al

problema

Se utilizan los criterios OMS 1999

A partir del ao 2002 se ha iniciado el CCI
para la evaluacin de morfologa, movilidad y
concentracin espermtica

Ha asumido el compromiso de desarrollar un
Programa Nacional de CCE que est en
marcha desde el 2006: PEEC-laboratorio del
semen

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Control de la etapa pre-analtica

Reinterrogar a pacientes al azar para
verificar que la anamnesis fue adecuada

Citar a aquellos pacientes en que se
sospecha
incumplimiento
de
las
instrucciones

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Control de la etapa analtica

Comprende principalmente:

Concentracin espermtica

Movilidad

Morfologa

Niveles del control de la

etapa analtica

Intra-individual e inter-individual

Como entrenamiento de un nuevo operador

Procesamiento repetido de una muestra

10
mediciones
del control

X y DS

Grfico tipo
LeveyJennings

Medias mensuales
Morfologa . (%) Normales

Recuento espermtico (Ez./ml)

6
5

UES

1
0

-1

-1

-2

-2

-3

-3

-4

-4

6
7
8
Meses 2002

10

11

12

Movilidad grado a

10

11

12

Movilidad grado (a+b)

4
3
2
1
0
-1
-2
-3
-4

Meses 2002

3
2
1
UES

UES

0
-1
-2
-3

6 7
Meses 2002

10

11

12

-4
1

6
7
8
Me ses 2002

10

11

12

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Monitoreo de medias mensuales
Probables fuentes de error :
Movilidad

Concentracin espermtica

Funcionamiento de la platina
termostatizada

Calibracin de las pipetas automticas

Limpieza del material no

descartable

Cmaras de recuento

Toxicidad del material

descartable

Temperatura de transporte y
conservacin de la muestra

Tamao de la gota de semen
utilizada

Homogeneizado de las muestras

Cubrecmaras

Morfologa

Grosor de los extendidos

Fijacin de los extendidos

Batera de coloracin

Tamao del cubreobjetos

Cambio de operador

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Control de la etapa post-analtica

Control de la verosimilitud y
coherencia de los resultados

PEEC

Parmetros evaluados

Morfologa

Movilidad

Concentracin

Materiales de control

Suspensin estabilizada de espermatozoides

Filmaciones en DVD

Fotomicrografas en CD

Morfologa espermtica
Material de control: Fotomicrografas en CD

Movilidad espermtica
Material de control: Filmacin

Caractersticas especiales

Aproximacin a la tcnica microscpica

Evaluacin del criterio del operador

No hay efecto de temperatura

No hay efecto por la cmara

Concentracin espermtica
Material de control: Suspensin de
espermatozoides fijados en formol

Influencia del material volumtrico

utilizado en las diluciones

Influencia de la cmara de recuento

Informacin suministrada por

el laboratorio

Valor hallado

Instrumentos

Criterios

Conclusin
La nica forma que una metodologa
tan subjetiva pueda dar resultados
comparables y reproducibles es la
implementacin de un control de calidad
interno y externo

Agradecimientos

Ctedra de Citologa. Facultad de
Farmacia y Bioqumica

Residentes y ex-residentes del
Hospital de Clnicas