Definiciones Urocultivo: Es el anlisis que se le realiza a la orina para detectar con exactitud y presin cual es el agente microbiano que esta causando una infeccin en un organismo.
Principios generales La muestra ideal es la de la maana debido a que la cuenta bacteriana es mayor. Se requiere de 3 a 5ml de orina en un frasco estril, tambin se puede obtener mediante una sonda uretral, suprapbica o permanencia. La muestras para urocultivo no se toman de bolsas recolectoras de orina que forman parte de un sistema de drenaje a travs de una sonda. Se lleva la muestra al laboratorio y se examina lo ms pronto posible, de no ser as, la orina se puede refrigerar hasta dos horas antes de someterla a cultivo. Para establecer bacteriuria, se toman 2 muestras de chorro medio. Las muestras deben de obtenerse antes de la administracin de cualquier antibitico. El personal de salud debe instruir al paciente respecto a la tcnica adecuada para recolectar la muestra. Coleccin de muestras Puncin suprapbica Catter Recepcin de la muestra Las muestras deben venir acompaadas de su respectiva hoja de pedido donde deben llenarse todos los datos solicitados por el laboratorio: Nombre y Apellido completo N de Historia Clnica edad sexo servicio y cama tipo de muestra: catter, suprapbica, etc. recibi antibiticos en los ltimos 7 das, si es as anotar nombre del ATB y dosis control o sospecha de algn germen anterior
Rechazo de la muestra Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mnimos indispensables para su correcto procesamiento el laboratorio deber rechazarlas, algunos de los criterios a tomar en cuenta son: Muestras que no evidencian ser refrigeradas + de 2 horas de coleccin. Rechazar orinas de ms de 24 horas colectadas. Rechazar muestras de Sonda foley. Rechazar la orina de la bolsa de un paciente con catter. Si ha sido inadecuadamente colectada, transportada y manipulada la muestra no debe ser recepcionada.
Microorganismos observados Organismos que son uropatgenos reconocidos y crecen bien en medios de rutina en 24 hrs: Estos incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y Pseudomona aeruginosa. Estos patgenos constituyen la causa del 80% de los bacilos gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacter son tambin comnmente aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae son los gram positivos ms frecuentemente aislados.
Organismos que son uropatgenos reconocidos y no crecen en medios de rutina: Mycobacterium tuberculosis, Chlamidia trachomatis, Neisseriae gonorrhoeae se desarrollla.
Organismos que pueden ser uropatgenos, pueden requerir medios especiales y ms de 24 hrs: Corynebacterium urealyticum, Corynebacterium seminale stos se desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H. parainfluenzae, estos de desarrollan en A. chocolate Gardenella vaginalis en altos recuentos se ha asociado a UTI ste se desarrolla en Human Blood Agar. Todos estos medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En CO2.
Organismos que no son uropatgenos pero pueden aislarse de uretra y orina: Gran variedad de grmenes colonizan la uretra y el rea genitourinaria, estos incluyen anaerobios, Actinomyces spp, Lactobacillus, Streptococcos alfa-hemolticos, Staphylococcos coag-negativa, y pequeos nmeros de gram negativos.
Mtodos Mtodo de conteo en placa o recuento de colonias (Mtodo de Kass):
Se homogeniza la muestra mediante agitacin. Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1ml de orina en 9.9ml de caldo tripticasa o de suero fisiolgico estril. Se preparan diluciones de 1:1000 y 1:10 000 a partir de la dilucin 1:100. Se deposita 1ml de cada dilucin en placas petri estriles que contienen agar Tripticasa o medio CLED, Mediante rotacin suave se favorece la distribucin homognea de la siembra. Se incuban todas las muestras a 37 0 C de 24 a 48 horas. Para calcular el nmero de colonias se eligen las placas que contengan de 30 a 300 colonias. Contadas estas basta multiplicar su nmero por la dilucin respectiva para obtener la cuenta total. Mtodo del asa calibrada: Esta estimacin cuantitativa consiste en sembrar una placa con medio de agar sangre o medio CLED en una muestra de orina, sin centrifugar, empleando un asa de platino calibrada (4mm. De dimetro). Despus de incubar las muestras a 37 0 C durante 24 a 48 horas, se cuenta el nmero de colonias desarrolladas y el resultado se multiplica por 100, ya que el asa de platino contiene 0.01ml de orina.
Procedimiento Inoculacin Usar el asa calibrada, flamear, dejar enfriar, mantener en posicin vertical introducir solo el aro debajo del nivel de la orina previa mezcla de la orina sin centrifugar.
Mtodo para introducir el asa calibrada Estriar en la placas de cultivo de la siguiente manera: Estriar de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina en una serie de pasos de ngulo de 90 a travs del inculo Sin flamear el asa estriar atravesndola lnea del inoculo en el sentido de las flechas. Incubacin Una vez sembradas las placas deben incubarse durante 24 horas a 35 - 37 C. Lectura Los resultados del estudio cuantitativo se reportan de la siguiente manera:
No hubo desarrollo bacteriano. Menos de 10 000 colonias por ml. Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml. Ms de 100 000 colonias por ml.
Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con ms de 100 000 colonias por ml., la probabilidad de infeccin es del 80%, cifra que se eleva a 95% si el mismo resultado se obtiene en 3 recuentos sucesivos.
Por lo general las muestran contaminadas tienden a mostrar cuentas inferiores a 10 000 colonias por ml, cuando el recuento revela valores intermedios, entre 10 000 y 100 000 colonias por ml, el examen debe repetirse.
Mtodos cualitativos Se usan para identificar que microorganismo es el causante de la enfermedad. Se usan medios de cultivo tanto enriquecidos como selectivos.